PRACTICA DE LABORATORIO N°2

Efecto de la concentración de enzima sobre la actividad enzimática

I.INTRODUCCIÓN
Las enzimas son proteínas que catalizan todas las reacciones
bioquímicas. Los catalizadores disminuyen la energía de activación de
una reacción, al disminuir la energía de activación aumenta la velocidad
la cinética enzimática estudia la velocidad de las reacciones catalizadas
por enzimas.
La mayoría de las reacciones de los sistemas vivos son reversibles, es
decir, que en ellas se establece el equilibrio químico. Por lo tanto, las
enzimas aceleran la formación de equilibrio químico, pero no afectan las
concentraciones finales del equilibrio. [1]Hay factores que afectan
la actividad enzimática:
Concentración del reactivo
. A mayor concentración del sustrato, a una concentración fija de la
enzima se obtiene la velocidad máxima. Después de que se alcanza esta
velocidad, un aumento en la concentración del sustrato no tiene efecto en
la velocidad de la reacción.
Concentración de la enzima
. Siempre y cuando haya reactivo disponible, un aumento en la
concentración de la enzima aumenta la velocidad enzimática hacia cierto
límite.
Temperatura
. Un incremento de 10°C duplica la velocidad de reacción, hasta ciertos
límites. El calor es un factor que desnaturaliza las proteínas por lo tanto si
la temperatura se eleva
2demasiado, la enzima pierde su actividad. Por el contrario si se
disminuye la temperatura la velocidad de disminuye porque se generan
menos choques entre partículas.
pH.
El pH óptimo de la actividad enzimática es 7, si se aumenta el pH y se
obtiene uno muy básico, la reacción no sucede. [2]La catalasa es una
enzima que se encuentra en las células de los tejidos animales y
vegetales. La función de esta enzima en los tejidos es necesaria porque
durante el metabolismo celular, se forma una molécula tóxica que es el
Peróxido de hidrógeno, H
(Agua oxigenada.) Esta enzima, la catalasa, lo descompone en agua y
oxígeno, por lo que se soluciona el problema. La reacción de la catalasa
sobre el
Velocidad de una reacción
La velocidad de una reacción química es la cantidad de producto que ésta
genera, o la cantidad de reactivo que consume en una unidad de tiempo.
Por lo tanto, la velocidad de descomposición del agua oxigenada puede
medirse según la cantidad de oxígeno que se desprende
II.OBJETIVO

 El objetivo de la presente experiencia es demostrar el efecto de la concentración

de la enzima sobre la actividad enzimática ,utilizando para ello la enzima salival

III.REBICION BIBLIOGRAFICA
 BIOQUÍMICA, Legninger, Edit. Omega. Segunda edición. 1981. Madrid
IV.MATERIALES Y MÉTODOS
Material biológico: enzima amilasa
 Agua destilada
 Pipetas de 1ml
 Plumón indeleble
 Gradilla tubos de ensayo
 Material para baño maría 37°c
 Gotero o pipetas descartables de plástico
 Peseta con agua destilada

4.1REACTIVOS
 Solución de almidón 1%
 PH 6.9
 HCL:0.05
 NaCL 0.1M
 Solución yodada
 V.PROCEDIMIENTO.
ETAPA SISTEMAS DE INCUBACION

Tubo de ensayo

IA IIA III IV
Solución de almidón bufferado al 1% 3.5 3.5 3.5 3.5
Cloruro de sodio( Nacl) 0.1 M 1.0 1.0 1.0 1.0
Agua destilado 1.5 1.0 0.5
Amilasa salival 0.5 1.0 1.5

Mesclar suavemente e incubar por 37°c por 15m

RESULTADOS
TABLA N° 01: hidrolisis de almidón
I II III IV

Color inicial incoloro incoloro incoloro incoloro

Rx no si no si
enzimática(si/no)
sustracto abundante escaso Abundante escaso
TABLA 2 .DETERMINAR DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA AMILASA
SALIVAL

Componentes (ml.) y procesos TUBOS DE ENSAYO

I II III IV

HCL 0,5N 3.0 3.0 3.0 3.0

De los tubos I y IV de la tabla 1 0,5 0,5 0.5 0.5

trasferir :
Solución yodada 0,5 0,5 0.5 0.5

RESULTADO
Los resultados obtenidos demuestran que la velocidad enzimática se
ve influenciada por la cantidad de enzima presente en solución.
TABLA N° 02:
I II III IV

Color inicial incoloro incoloro incoloro incoloro

Color final Azul oscuro Azul medio rojizo Amarillo

rojizo
Rx si si si si
enzimática(si/no)
Producto Presencia Presencia Presencia presencia
formado

Discusión
En este estudio se determinó la temperatura óptima de actividad
para la cual la actividad enzimática es máxima, nos basamos en los resultados
apreciables en el gráfico 2, en donde se observa claramente que la máxima actividad
de la enzima es a la temperatura de ensayo.
VI.CONCLUSION
La velocidad enzimática se ve influenciada por la cantidad de enzima presente en
solución. La gráfica que se produce como consecuencia de la aparición de
eritrodextrinas del almidón genera una recta de pendiente positiva, lo cual permite
pensar que a medida que la concentración de la enzima es mayor el tiempo que se
necesita para transformar el sustrato en producto es mucho menor (al graficar 1/t
vs concentración)
Los resultados son consistentes por el hecho que las enzimas son catalizadores
biológicos de una reacción.
La temperatura tiene un efecto importante en la velocidad enzimática. Si la
temperatura aumenta considerablemente la reacción puede no producirse debido a
la desnaturalización de la enzima. Si la temperatura es alta y propicia se obtienen
los productos de la acción enzimática sobre el sustrato.

VII.REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS:
 NELSON, D.L.; COX, M.M. “Principios de Bioquímica”, 4°edición, p.190,
EditorialEdiciones Omega S.A, Barcelona, España, (2005).
VIII.ANEXOS
UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
ESCUELA ACADEMICO PROFESIONAL DE AGRONOMIA

CURSO: BIOQUIMICA

TEMA:
Efecto de la concentración de enzima sobre la actividad
enzimática

ALUMNOS:

-SAAVEDRA BARRETO ANA MELBA

PROFESOR:
MG.CASTRO MALABRIGO, VÍCTOR MANUEL

MESA: III
TRUJILLO– PERU
2018