DIAGNÓSTICO DE LABORATORIAL

LOS ENSAYOS
Para el diagnóstico de laboratorio de rabia se emplean dos pruebas de rutina:
- La prueba de inmunofluorescencia directa (IFD)
- La prueba biológica de inoculación en ratones (IR).

Ambas pruebas poseen una alta sensibilidad y especificidad.

La prueba de inmunofluorescencia directa (IFD) es una prueba rápida, con alta
sensibilidad y que permite obtener resultados en unas pocas horas. Por el contrario, la
prueba de inoculación en ratones (IR) posee una mayor especificidad, los resultados se
obtienen en 21 días, además confirman el diagnóstico de pruebas negativas por
inmunofluorescencia directa (IFD).
La prueba de inmunofluorescencia directa es necesario titular el conjugado antirrábico,
buscando encontrar la dilución óptima de éste.
Según las recomendaciones del Comité de Expertos de Rabia de la Organización Mundial
de la Salud (OMS), un diagnóstico positivo en cualquiera de las dos pruebas es
concluyente.
ENSAYO DE INMUNOFLUORESCENCIA DIRECTA
La prueba de IFD, debido a su rapidez y sencillez, es la primera prueba que se utiliza para
el diagnóstico de rabia. Si el resultado de la prueba es negativo, se procederá a realizar la
inoculación en ratones. La prueba de IFD detecta el antígeno rábico de la impronta
mediante el uso del conjugado antirrábico que contiene globulinas marcadas con ITCF.
ENSAYO DE INOCULACIÓN EN RATONES
Esta prueba de inoculación en ratones es una técnica sencilla, basada en procedimientos
rigurosos.
La inoculación se realiza en ratones por su alta susceptibilidad al virus rábico y se
manifiesta con una sintomatología clásica (erizamiento, parálisis, postración y muerte).
Una vez muerto el ratón se procede a realizar la prueba de IFD para determinar si la
muestra inoculada es positiva a rabia.
ENSAYO DE SERONEUTRALIZACIÓN PARA LA DETERMINACIÓN DE
ANTICUERPOS ANTIRRÁBICOS
Esta prueba de neutralización del suero en ratones es un procedimiento serológico que es
utilizado para determinar si una persona o un animal están protegido contra la rabia.
Utilizando este método se determina la cantidad de anticuerpos presentes en el suero y se
basa en la neutralización de una serie de diluciones de suero con una dosis constante de
un virus de desafío previamente titulado. Los resultados obtenidos son expresados en
términos de títulos serológicos, definidos como la dilución más elevada que neutraliza
una cantidad estándar de virus.
INS. 2002. Manual De Procedimientos Para El Diagnóstico De La Rabia. Lima
Diagnóstico laboratorial de encefalitis por virus rabia

Las pruebas realizadas en laboratorio de rutina pueden mostrar leucocitosis neutrofílica. Con
una ligera pleiocitosis es observada en una 60% de los pacientes en la primera semana. Los
diagnóstico puede ser realizados por identificación temprana de antígenos virales, de RNA
genómico o aislamiento del virus. En un individuo que no ha sido vacunado, se pueden
detectar anticuerpos específicos en suero y/o líquido cefalorraquídeo.

En la siguiente tabla se describen los principales ensayos para el diagnóstico ante y post-
mortem.

Objetivo del ensayo Prueba empleada

Ante-mortem
Biopsia de piel Detección de Ag IF
RNA viral RT-PCR
Saliva, lagrimas, LCR Aislamiento viral Cultivo celular
Inoculación de ratón lactante
RNA viral RT-PCR
Suero Detección de Ac específicos No vacunado: prueba
inmediata; vacunado: ver
conversión serológica
LCR Detección de Ac específicos Se prueba en paralelo con
suero
Post-mortem
Cerebro Detección de Ag IF
Punción necropsia RNA viral RT-PCR
Aislamiento viral Cultivo
Inoculación de ratones
lactantes
Diagnostico retrospectivo Detección de Ag en tejido Técnicas enzimaticas
fijados en formol

Quarleri J. 2008. Contenidos Complementarios Del Seminario De Rabia. Pag. 9