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espontáneos y tienen una fase lútea espontánea similar en longitud o un poco más larga que la
fase lútea de 64 ± 1 días de los 65 ± 1 días de gestación seguida por un anestro obligado antes del
embarazo. siguiente período de "calor" de 2-3 semanas (Tabla 1). Los intervalos entre celos de 5 a
12 meses, generalmente de 6 a 7 meses, varían de muy variables a regulares dentro de las perras,
y los promedios no varían significativamente o de manera consistente entre los ciclos de gestación
y no preñez. El estro puberal ocurre de forma variable a los 6-14 meses en la mayoría de las razas,
con medias correlacionadas positivamente con el tamaño de la raza. El ciclo canino se divide
clásicamente en 4 fases (Evans y Cole, 1931), un proestro de 5 a 20 días, estros de 5 a 15 días, un
intervalo de 50 a 80 días (porción post-estro de la fase lútea) y anestro que dura típicamente 80 -
240 días. Estas fases reflejan, respectivamente, el aumento de la fase folicular en el estrógeno, el
aumento inicial de la fase lútea en la progesterona y la disminución del estrógeno, el resto de la
fase lútea y el intervalo entre la pérdida de la función lútea y el inicio del próximo ciclo. El tiempo
dentro del ciclo de 160-370 días se ha informado de forma variable en días posteriores al inicio del
proestro, comienzo del estro, comienzo del mésesto, pico preovulatorio de LH o aumento de LH.
Este último se usa como día 0 en esta revisión (Fig. 1) a menos que se indique lo contrario. Los
niveles de hormonas son principalmente los observados en el laboratorio del autor utilizando
ensayos previamente informados y estándares de gonadotropina canina.
Endocrinología
Los mecanismos endocrinos del ciclo canino no son diferentes a los de otros mamíferos según se
interpretan a partir de los perfiles hormonales y los resultados de las manipulaciones
experimentales. Los ensayos de esteroides establecidos para rumiantes y humanos se han
adaptado al suero y al plasma canino utilizando extracción de muestras o ensayos directos con
muestras de animales ovariectomizados que controlan la interferencia no específica. LH, FSH y
prolactina se analizan usando ensayos de heterol ogous basados en antisueros para hormonas
rumiantes o de roedores o ensayos homólogos, con preparaciones de hormonas caninas
purificadas como patrones.
La fase luteal prolongada da como resultado una dilatación mamaria detectable que en una
proporción de perras puede dar como resultado un cuadro clínico, pseudogestación manifiesta,
caracterizada por una ampliación mamaria macroscópica acompañada de lactogénesis y
lactopoesis. Los ciclos de embarazo se caracterizan por una mayor secreción de progesterona
efectuada por aumentos relacionados con el embarazo en la prolactina después de la
implantación, tal vez en respuesta al aumento de la relaxina; el parto ocurre en respuesta a un
aumento luteolítico abrupto en la PGF sistemática inmediatamente antes del parto.
Proestro
Proestro se produce cuando los signos externos de aumento de la estrogenización se observan por
primera vez como hinchazón de la vulva (edema) generalmente acompañada de secreción
vulcanosa serosanguinosa. Proestro tiene un promedio de 9 días y se caracteriza por aumentos
progresivos en: tamaño vulvar y turgencia; proliferación epitelial vaginal, cornificación y edema;
números de células epiteliales en frotis vaginales; y secreción vaginal de feromonas que atraen a
los machos. Los perfiles de células epiteliales de frotis vaginales cambian de ser dominados por
células parabasales (acompañados por números variables de neutrófilos), a ser dominados
sucesivamente por pequeñas células escamosas intermedias, intermedios grandes, y luego células
cornificadas grandes hasta que finalmente se componen por completo (98-100%) células
cornificadas y ausencia virtual de neutrófilos que ya no atraviesan el epitelio engrosado. Los picos
de cornificación varían de 1 a 6 días antes del pico de LH. La descarga serosanguinosa implica un
fluido seroso que contiene eritrocitos intactos y lisos y su hemoglobina originada por diapedesis
en el útero; no hay cambios característicos y fiables en su número o apariencia.
Vaginoscópicamente, la mucosa parece edematosa, cambiando progresivamente de rosado a
blanco, con líquido serosanguinoso en la superficie y en profundos pliegues vaginales que se
vuelven más prominentes en ambos ejes, produciendo una apariencia lisa de adoquines (Jeffcoate
y Lindsay, 1989).
Hay una disminución progresiva en la respuesta agresiva a los hombres interesados. Las negativas
de los intentos de montaje cambian progresivamente de agresivo a ambivalente a juguetón a
pasivamente acostado. La atracción masculina implica la secreción de feromonas, y el p-
hidroxibenzoato de metilo se identificó como un atrayente sexual en las secreciones vaginales de
las perras del estro. Pequeñas cantidades aplicadas a la vulva causan que los machos se exciten;
los estudios de bajas cantidades de ug fueron descontinuados debido a la hiperreactividad y la
interrupción de colonias (Concannon, inédito). El estradiol sérico aumenta en todo, de 5 a 15 pg /
ml (~ 20-55 pmol / l) inicialmente (Fig. 2), para alcanzar picos de 40-120 (media 70) pg / ml (~ 150-
450, media 255 pmol / l). Proestrus termina con el inicio del comportamiento receptivo que
típicamente ocurre 0.5-3 días después del pico en el estradiol y dentro del día del pico
preovulatorio de LH. Endocrinológicamente, el proestro fisiológico termina con la oleada
preovulatoria de LH.
Estro
Metaestro
Anestro
El anestro canino (ver Okkens y Kooistra, 2006) implica la ausencia de evidencia evidente de
actividad ovárica, se considera "obligado" con una duración mínima de 7 semanas después de que
la progesterona disminuye por debajo de 1-2 ng / ml, y promedia 18-20 semanas . Inicialmente,
puede ser importante para la reparación endometrial normal que se completa alrededor del día
120-130. El índice apoptótico y el porcentaje de células epiteliales degeneradas en el endometrio
son altos durante la fase lútea media, bajos en el anestro temprano y ausentes en el día 120 (Po-
yin et al., 2006). La citología vaginal muestra un número escaso de células parabasales (y
"escamas" degeneradas) y un número variable pero modesto de neutrófilos. La mucosa vaginal
parece delgada y roja con capilares visibles; la superficie se traumatiza fácilmente y la citología
vaginal es difícil de vigilar sin inducir hemorragia con eritrocitos espurios en los frotis. Se informa
que el estradiol sérico es variable, pero generalmente bajo a 5-10 pg / ml (~15-35 pmol / l)). La HL
basal es baja (<1-2 ng / ml) entre pulsos esporádicos, de altura variable y a menudo grandes (3-30
ng / ml) a intervalos de 7-18 ho más. La FSH es alta (50-400 ng / ml, media 140) entre pulsos
esporádicos ligeramente por encima de la línea base elevada que, cuando son detectables, son
típicamente concomitantes con los pulsos de LH. La progesterona sérica permanece por debajo de
1 ng / ml (por debajo de ~4 nmol / l), con un nadir cercano a 400 pg / ml (~1500 pmol / l) a los 30-
40 días antes del proestro (ver Concannon, en Concannon et al., 1993) .
Fase folicular
La fase folicular implica una cohorte de 2-8 folículos por ovario detectables como folículos antrales
grandes de 3 mm visibles pero que no sobresalen de la superficie a los 6-10 días antes del pico de
LH, y secretan estradiol suficiente para causar cambios en el tracto reproductivo descrito para
proestro Se inicia por un aumento precedente en la frecuencia del pulso LH (figura 3) a partir de
intervalos que promedian> 7h durante el anestesia hasta intervalos circorrales de menos de 2 h
(Concannon et al., 1993; Tani et al., 1999). La LH media diaria se eleva así durante
aproximadamente 6-10 días en las 1-3 semanas antes del proestro observado (Fig. 4). La duración
estimada se basa en mediciones diarias o más frecuentes en el período anterior al proestro,
incluida la determinación de intervalos de pulso en ventanas de muestreo de 7 h cada 15-20
minutos (figura 3), y en la duración de 8-9 días de GnRH- la administración agonista usualmente
necesitaba inducir proestro fértil en las perras durante el anestro (Concannon, 1993; Concannon
et al., 2006a). El aumento de la pulsatilidad de LH se acompaña de pulsos de FSH y de aumentos
menos prominentes en la FSH media que pueden no ser significativos. El aumento de LH es el
factor crítico que selecciona la onda ovulatoria de folículos. El proestro fértil precoz resultó de la
inyección de LH porcina purificada, no de FSH (Verstegen et al., 1997). GnRH en pulsos cada 90
min indujo "proestro fértil", es decir, uno que resulta en un aumento espontáneo de LH y una
ovulación fértil (Concannon et al., 1997a, b). Sin embargo, no se requiere pulsativamente; la
elevación persistente de LH durante 7-9 días o más a través de implantes de agonistas de GnRH de
liberación constante también induce proestro fértil (Concannon, 1989). Los diámetros foliculares
aumentan a 6-9 mm antes del pico de LH, y aumentan a 9-12 mm entre el pico de LH y la
ovulación; el crecimiento del folículo y la ovulación pueden controlarse por ultrasonido (England et
al., 2009a).
Ovulación
En la perra, la supresión del proestro de la LH parece ser sensible a la tasa de aumento del
estradiol y la oleada de LH se inicia por un descenso abrupto en la tasa de cambio en la relación
estrógeno a progestina. Los aumentos iniciales de las progestinas sirven para facilitar la rapidez y
la magnitud del aumento de LH (Concannon et al., 1979, 1993, 2009). En las perras
ovariectomizadas con implantes de estradiol en su lugar, las inyecciones en serie de benzoato de
estradiol que causan aumentos progresivos del estradiol sérico a valores 2-4 veces los valores
máximos normales continuaron suprimiendo la LH. La liberación súbita de LH por vía preovulatoria
ocurrió después de una disminución en el estradiol después del cese de las inyecciones (o en
algunas perras después de que se produjo un pico en el estradiol a pesar de la administración
continuada debido a un aclaramiento aumentado). En las perras tratadas de manera similar, la
progesterona administrada cuando se interrumpieron las inyecciones de estradiol ocasionó que
aparecieran picos de LH más temprano, más sincrónicamente, y hasta el doble de la magnitud
obtenida sin progesterona. La sinergia de la progesterona sugiere un papel facilitador para
aumentar la progestina inmediatamente antes y durante el aumento de LH (figura 2) en el
proestro tardío. Tanto en perras como en ovejas, el aumento de estradiol puede causar una
supresión dependiente de la dosis de la secreción hipotalámica de GnRH que implica una gran
disminución en la amplitud del pulso a pesar del aumento en la frecuencia del pulso y resulta en la
supresión de la LH media (Evans et al., 1994). La supresión directa de la liberación de
gonadotropina LH también puede jugar un papel. La disminución en la tasa de aumento de
estradiol en el proestro tardío que inicia la liberación repentina de LH (Fig. 2) probablemente se
deba al aumento del aclaramiento de estradiol periférico y a los folículos que alcanzan la
maduración terminal (Concannon et al., 2009).
Luteortropinas
Progesterona
ciclos de embarazo
La progesterona es completamente de origen lúteo en el embarazo. La media de progesterona en
los ciclos de embarazadas frente a no embarazadas rara vez difiere significativamente entre los
estudios, aunque es numéricamente más alta en el embarazo después del día 25-30 en la mayoría
de los casos. Los aumentos secundarios obvios después del día 25 ocurren en la mayoría de los
embarazos, pero no en los ciclos no prenatales. Otras observaciones indican que la secreción de
progesterona aumenta mucho durante el embarazo. Las concentraciones medias después del día
25 son numéricamente más altas en los ciclos de gestación a pesar de un aumento del volumen
plasmático de distribución suficiente para causar una anemia normocrómica, normocítica
comparable a la de los humanos. Los hematocritos comienzan a disminuir entre los días 25 y 30,
alcanzando un nadir cercano o inferior al 40% a término, y la anemia no se resuelve hasta 1-2
meses después del parto. La progesterona durante el embarazo también sigue siendo alta a pesar
del aumento del metabolismo y del aclaramiento hepático que causa progesterona fecal dos veces
mayor que en los ciclos no prenatales (Gudermuth et al., 1998). La testosterona fecal y el
estrógeno también aumentan, lo que sugiere una mayor secreción luteínica de estos esteroides
durante el embarazo. Es probable que el aumento de la secreción de progesterona sea resultado
de una mayor secreción de prolactina, que comienza en los días 25-28 del embarazo, la prolactina
media es significativamente mayor el día 32. La prolactina aumenta simultáneamente con el inicio
de concentraciones detectables y crecientes de relaxina en el plasma los días 25-27 . La relajación
alcanza su punto máximo a mitad del embarazo, permanece elevada hasta el término, disminuye
al momento del parto y aparece por completo de origen placentario. Varios cambios endocrinos y
no endocrinos en ciclos de gestación han sido revisados en otros lugares, incluido el aumento de la
resistencia a la insulina (Concannon et al., 1989), aumento de fibrinógeno y proteína c reactiva,
otras alteraciones en factores inflamatorios y de coagulación, embarazo tardío aumenta en FSH,
preparto picos en cortisol, PGF y prolactina, y liberación de oxitocina intraparto (ver Concannon et
al., 1989, 2006b; Günzel-Apel et al., 2006, 2009).
El ovario, completamente encerrado en una membrana bursal con una pequeña hendidura bursal,
es típicamente transmembrana visible en animales jóvenes, pero a menudo no en animales viejos
debido a la grasa bursal. Los largos cuernos uterinos se vuelven serpentinos durante el crecimiento
rápido en celo y la fase lútea temprana. El fundus corto proporciona la translocación de óvulos en
celo. El único cuello uterino está orientado con el orificio casi ventral en la vagina anterior, craneal
a un pliegue dorsal-mediano a menudo prominente (dmf) pero visible vaginiscópicamente, y
susceptible de inseminación transcervical con dificultad variable. El aspecto caudal del dmf puede
presentarse como un "falso cuello uterino", con el lumen vaginal ocluido que aparece como el
cuello uterino de algunas especies. Las respuestas del oviducto y el endometrio al estrógeno y la
progesterona son similares a las descritas en los roedores, y el desarrollo máximo del endometrio
requiere una exposición secuencial al estrógeno y la progesterona, como ocurre en los ciclos
normales. Los cambios del receptor de esteroides sexuales en los tejidos reproductivos muestran
cambios cíclicos similares a otras especies; recientes análisis detallados de células endometriales
caninas han sido extensos (ver Van Cruchten et al., 2004; Ververidis et al., 2004). La ER y la PR
endometriales aumentan en proestro, disminuyen en celo y mesestro, y se reponen en anestro.
Los índices mitóticos de estroma endometrial, vasos sanguíneos y epitelio superficial son máximos
bajo la influencia del estrógeno en el proestro y disminuyen a partir de entonces, mientras que los
índices para el epitelio glandular basal alcanzan su máximo en celo y estro durante la influencia
temprana de la progesterona. La enfermedad mamaria y uterina es más común en perros que en
otras especies domésticas, tal vez debido a la sensibilidad a la progesterona, la ausencia de
embarazo de rutina y el uso de progestinas para la anticoncepción.
Todas las progestinas actúan para suprimir la ciclicidad ovárica en perros al prevenir aumentos en
la pulsatilidad de LH que normalmente resultan en proestro, quizás actuando como
antiestrógenos. No suprimen las concentraciones basales de LH ya bajas, sino que permiten que la
LH basal aumente por encima de las concentraciones normalmente observadas en el anestro. La
regulación negativa de LH y FSH por la administración crónica de agonistas de GnRH proporciona
una prevención de estro continua pero reversible. Las formulaciones agonistas comerciales (por
ejemplo, deslorelina y azagly-nafarelina) se han aprobado para ese uso, la anticoncepción
masculina o el tratamiento de endocrinopatías seleccionadas, en algunos países. El efecto
secundario adverso de la inducción aguda del estro fértil tras la administración se evita con el
tratamiento de perras prepúberes jóvenes, perras con alta progesterona o con pretratamiento con
progestina. Las modalidades inmunológicas y citotóxicas para la anticoncepción canina están bajo
investigación extensa.
La inducción del proestro y estro prematuros se ha logrado con tasas de éxito muy variables
utilizando estradiol, FSH, FSH más LH o eCG, y se complica típicamente por luteinización folicular,
falla de la ovulación, fases lúteas cortas o implantación fallida. Sin embargo, la gonadotropina
menopáusica humana, que tiene más potencia de LH que de FSH, puede producir mejores
resultados (Wanke et al., 1997). Las dosis reductoras de prolactina de agonistas de dopamina
administradas durante 7-30 días en perras anestrocas a menudo resultan en proestro prematuro
pero normal, incluyendo aumentos preestrés normales en la pulsatilidad de LH (Concannon, 1993,
Spattini et al., 2007). La administración pulsátil de GnRH puede inducir proestro que progresa
hacia el estro fértil espontáneo. De manera similar, si se administra a dosis que regulan
positivamente la LH a las concentraciones normalmente vistas antes del proestro y no regula
demasiado rápidamente la LH y previene un aumento espontáneo de LH ovulatoria en respuesta a
la excursión de estradiol del proestro inducido, es crónico s.c. Administración de agonistas de
GnRH a través de una bomba osmótica o un implante patentado por 7 a 14 días. En una serie de
estudios, la regulación del ciclo se efectuó al extremo utilizando un GnRH-A con bio-potencia en
vivo 150 × GnRH nativa en dosis de 0,6-1,8 μg / kg / día; Los intervalos entre celos de solo 120 días
se obtuvieron rutinariamente usando tratamientos agonistas de 12 días comenzando 60 días
después de la luteólisis inducida por PGF en la fase lútea media. Los intervalos de ciclo de 320 días
se obtuvieron rutinariamente suprimiendo primero estro con implantes de progesterona desde el
día 160-252 y luego administrando GnRH-A el día 305. En comparación, los intervalos del ciclo de
control promediaron 211 días (Concannon et al., 1989, 2006a). Las inducciones exitosas de celo
fértil en perras por infusión de GnRH-A pueden estar relacionadas con el hecho de que dosis
moderadas a grandes requieren alrededor de 3 semanas para regular completamente por
disminución los valores basales de la LH (ver Concannon et al., 2006b, 2009).
La razón por la cual el anestro es tan variable en algunas perras y no en otras no está claro. Del
mismo modo, los factores que conducen al anestro tardío aumentan en la pulsatilidad de GnRH y
LH y en el inicio del proestro no se conocen bien. Se ha documentado una mayor actividad
hipotalámica de liberación de GnRH en el anestro tardío (Tani et al., 1996). Los factores que
pueden estar involucrados incluyen (1) proximidad a otras perras, ya que las feromonas de una
perra de estro pueden facilitar el inicio del proestro en otras perras; (2) interacciones sociales,
considerando los efectos de las hembras dominantes en las manadas de lobos; y (3) efectos
subliminales de un ciclo circanual endógeno. Los ciclos circensales endógenos fotograbados
observados en cánidos estacionalmente monóseos y en perros basenji de cría en otoño
presumiblemente persisten como ciclos libres en razas domésticas no capturadas, del mismo
modo que persisten en la mayoría de las especies de reproductores estacionales cuando se ven
privados de señales normales de fotoperíodo. Sin embargo, los ciclos endógenos en perros no
están bien documentados. Se informan ciclos anuales de nadirs invernales en la prolactina media
en perros machos, pero el estudio de perros individuales sugiere que los ritmos de prolactina
pueden ser circanuales en ciclos que van de 6 a 14 meses (Verstegen et al., 2008). Por lo tanto, se
sugiere que los ciclos circanuales correspondientes a las sensibilidades de las rutas hipotalámica
dopaminérgica, serotoninérgica y / o opioide desempeñan un papel en la generación de los
intervalos de ciclos de 7 a 12 meses de la perra (Concannon, 2009). Los cambios durante los 1-3
meses previos al aumento de la pulsatilidad de LH poco antes del proestro incluyen (1) FSH sérica
aumentando de concentraciones altas a incluso mayores (Okkens y Kooistra, 2006); (2) aumentar
la capacidad de respuesta pituitaria a GnRH; (3) aumento de la liberación de LH en respuesta al
antagonista opioide naloxona (Concannon, 1989); (4) un número creciente de folículos antrales
pequeños detectables (2 mm) de 2 por ovario a los 30-40 días de preestrés (England et al., 2009b);
(5) aumentar la expresión ER hipotalámica y pituitaria; y (6) aumento en la expresión de
aromatasa hipotalámica. La evidencia de ondas subliminales de folículos dominantes durante el
anestro es modesta, y si son distintas, es probable que se superpongan, produciendo un conjunto
casi constante de folículos dominantes receptivos. Más del 80% de las perras en cualquier etapa
de anestro ingresarán rápidamente a un proestro inducido en respuesta a dosis fisiológicas de
GnRH administradas de forma circular o de administración constante de GnRH-A, aunque estas
últimas dan como resultado estrógeno fértil con mayor frecuencia en el anestro tardío vs.
temprano. Los roles de las vías serotonérgicas, dopaminérgicas y opioidérgicas no se han
documentado completamente. La naloxona opioide-antagonista causa aumentos agudos de LH en
cualquier momento, pero especialmente en el anestro tardío. Los agonistas de la dopamina en
dosis que disminuyen la prolactina pueden causar un proestro prematuro que implica un aumento
preprocestral normal de la pulsatilidad de LH, con respuestas más rápidas en el anestro tardío
frente al anestro temprano. Una falla de respuesta en una perra que normalmente se ciclaba se
asoció con la falta de disminución de la prolactina, lo que sugiere que los cambios endógenos en la
sensibilidad a la dopamina pueden ser importantes y / o que la prolactina puede desempeñar un
papel inhibidor. Un antagonista de serotonina indujo proestro precoz en un estudio pero no en
otro. El cebado por estradiol a partir de una onda folicular subliminal que produce elevaciones en
estrógenos o andrógenos podría estar involucrado teniendo en cuenta los cambios mencionados
en ER y aromatasa (Hatoya et al., 2003), y un informe de un aumento transitorio de estrógenos
alrededor de 40-50 días antes proestro ER aumenta durante el anestro tardío, al igual que la
aromatasa hipotalámica. En las perras administradas previamente prostaglandina para acortar la
fase lútea, el tratamiento con estrógenos produjo un falso proestro que progresó a un proestro
fértil con estro avanzado en comparación con las perras que no recibieron estrógeno (Bouchard et
al., 1993). También existe la posibilidad de que existan mecanismos ováricos u otros sensibles a los
cambios en la disponibilidad de progesterona u otras hormonas ováricas, ya que la progesterona
disminuye desde 1 ng / ml en el anestro temprano hasta niveles de 0.2-0.4 ng / ml alrededor de 30
días antes del proestro. (Concannon, 1993). Se necesita un estudio adicional del anestro canino
para explicar los patrones temporales de los ciclos del estro canino.
La endocrinología básica del ciclo del estro canino parece ser similar a la de muchas otras especies,
incluido el papel del aumento de la pulsatilidad de GnRH y LH en desencadenar la fase folicular de
1 a 2 semanas, el efecto sinérgico de la progesterona para iniciar y mejorar la liberación de oleadas
preovulatorias de LH y el comportamiento del estro después de la excursión de fase folicular en
suero estradiol, y la formación espontánea de cuerpos lúteos que desarrollan un requisito
absoluto para los efectos luteotróficos de prolactina y LH como en roedores. El proestro
relativamente largo refleja una fase folicular de 1 a 2 semanas como ocurre en los primates. El
inicio y la duración de la semana relativamente larga de celo reflejan el efecto estimulante de la
disminución asociada de la relación estrógeno-progesterona y la aparente ausencia de un
mecanismo para interrumpir abruptamente el comportamiento del estro. La fase luteal
espontáneamente prolongada de aproximadamente dos meses parece comparable a la de los
individuos histerectomizados de la mayoría de las especies poliestro y refleja la ausencia de un
mecanismo luteolítico uterino agudo. Si bien es poco probable que los mecanismos celulares
involucrados sean específicos de una especie, se necesitan estudios adicionales de animales
enteros y moleculares para confirmar el valor de la perra como modelo de los fenómenos
reproductivos básicos. Poco comprendidos y en necesidad de estudio son el papel de un ciclo
endógeno que afecta la duración del anestro y los intervalos interestrolares de 6-12 meses, las
relaciones causales y la secuencia de los eventos requeridos que terminan anestro, la base
molecular del retraso en la maduración de los ovocitos hasta 2-3 días después de la ovulación, y la
base endocrina de la duración del estro más larga y más variable que en la mayoría de las especies
no candidas.