PARASITOLOGÍA GENERAL-MANUAL DE LABORATORIO M. Sc. SÁNCHEZ M.

HENRY

FACULTAD DE MEDICINA Y CIENCIAS DE LA SALUD

PARASITOLOGÍA GENERAL
MANUAL DE PRÁCTICAS

2018 - II

M. Sc. Lic. Mblgo. HENRY WILLIAN SÁNCHEZ MENDOZA

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NORMAS PARA LAS SESIONES DE PRÁCTICAS

1. El ingreso al Laboratorio tiene como tolerancia 10 minutos, luego del cual ya no se
permitirá el ingreso.
2. El Ingreso al Laboratorio se debe hacer con la chaqueta o mandilón perfectamente colocado.
3. De acuerdo a las mínimas Normas de Bioseguridad, se evitará la ingesta de cualquier tipo de
alimento, durante la permanencia en el Laboratorio.
4. De acuerdo a los requerimientos de las prácticas a realizar, el grupo que no presente las
muestras requeridas para el desarrollo de las mismas, no podrá participar de ellas.
5. Una vez finalizada la sesión se debe dejar todo el material y/o equipo empleado, en las
mismas condiciones en las que fue recibido y cualquier desecho debe ser eliminado en el
lugar correspondiente. Nadie puede abandonar el Laboratorio sin hacerlo.
6. Limpiar y desinfectar el área de trabajo antes y después de usarla.
7. Está PROHIBIDO el uso de teléfonos celulares en el laboratorio y de cualquier otro artefacto
que distraiga la atención del estudiante
8. Asegurarse que los insumos, reactivos y soluciones estén debidamente ROTULADOS y que los
frascos o envases no estén deteriorados.
9. Está PROHIBIDO absorber o pipetear cualquier tipo de sustancia con la boca. Usar propipetas
(bombillas) u otro dispensador.
10. Las agujas y otros elementos punzantes deberán ser descartados en un recipiente resistente.
Se deberán evitar los intentos de reintroducir las agujas descartadas en capuchones o de
romperlas o doblarlas. Por ningún concepto las agujas serán retapadas. El conjunto aguja-
jeringa deberá ser descartado en el recipiente destinado a tal fin.
11. Dejar DESCONECTADOS los equipos y CERRADAS las llaves de gas y grifos.
12. Informe al profesor de cualquier accidente que ocurra.
13. Lávese las manos con agua y jabón antes de salir del laboratorio.
14. Es obligación de cada equipo entregar todo el material limpio

SISTEMA DE EVALUACIÓN
 Al inicio de cada sesión de laboratorio se evaluará en forma escrita u oral, lo relacionado tanto a
la sesión a realizar como a la realizada en la sesión anterior.
 Los informes de prácticas se presentarán al inicio de la sesión posterior de acuerdo a lo
planteado en el presente Manual de Prácticas (cuestionarios, esquemas o cualquier otro tipo de
actividad).
 En este informe sólo deberán figurar a los alumnos del grupo, que hayan participado de la
sesión.
 Se evaluará parcialmente con dos Exámenes de Laboratorio, según calendarización, los mismos
que tienen carácter cancelatorio.
 Las notas parciales correspondientes a las sesiones de Laboratorio constan de:
Promedio de Informes, Promedio de Evaluaciones Escritas Y Nota Actitudinal
 Notas que serán promediadas con las respectivas de Teoría, tal como está indicado en el Silabo.
 La asistencia a las sesiones de prácticas es Obligatoria. Alumno que no asista y no presente la
justificación respectiva (por salud o trabajo), se le asignará como nota: cero (00) en el Informe
de la fecha, en la evaluación escrita correspondiente y en consecuencia afectará su nota
actitudinal. Por ningún motivo se recibirán informes fuera del tiempo
 No se podrá intercambiar de grupos asignados ni de los horarios correspondientes.
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PRACTICA N °1

BIOSEGURIDAD, NIVELES DE RIESGO BIOLÓGICO

Y RECONOCIMIENTO DE LABORATORIO

INTRODUCCIÓN:
En el campo de la salud existen diversos lugares en donde el profesional respectivo se desempeña,
como los hospitales, clínicas, postas, centros asistenciales, etc. Sin embargo el laboratorio también
constituye un lugar de trabajo, tanto en el campo clínico, educativo, de investigación e incluso de
enseñanza, siendo por ello necesario que se conozcan las pautas mínimas necesarias para el normal
desempeño dentro de, el.
Se define como bioseguridad al conjunto de combinaciones específicas (normas) de trabajo, equipo
de seguridad y facilidades diseñadas para minimizar la exposición de los trabajadores y el ambiente a
los agentes infecciosos; es así que las normas de bioseguridad están destinadas a reducir el riesgo de
transmisión de microorganismos de fuentes reconocidas o no reconocidas de infección en Servicios
de Salud vinculadas a accidentes por exposición a sangre y fluidos corporales, así como también
agentes físicos y químicos.

OBJETIVOS:
- Familiarizarse con las Normas de Bioseguridad.
- Conocer los Niveles de riesgo y Señales de Bioseguridad
- Manejar los residuos sólidos según las Normas de Bioseguridad

AGENTES DE RIESGO
 Agentes biológicos; transmitidos por ingestión, inhalación, inoculación y por contacto directo a
través de piel o mucosas.
 Agentes físicos y mecánicos; como las temperaturas extremas, radiaciones ionizantes, contactos
eléctricos o conexiones defectuosas y vidrios resquebrajados de recipientes dañados.
 Agentes químicos; que pueden ser corrosivos, tóxicos, carcinógenos, inflamables o explosivos.

NIVELES DE BIOSEGURIDAD (GRUPOS DE AGENTES DE RIESGO):

NBS 1: Nivel básico. Se trabaja con agentes que no tienen o tienen un peligro mínimo para el
personal. Las mesas son impermeables, no requieren de equipos especiales y diseño muy específico.
Se utiliza apara la enseñanza básica o investigación, se trabaja al descubierto y el acceso es limitado.
Microorganismos con muy pocas probabilidades de causar enfermedad humana o animal, agentes
biológicos del grupo 1, ejemplo: virus de vegetales, Virus Influenza, E. coli K12, Saccharomyces
cerevisiae, Acanthamoeba, Bacillus substilis, B. cereus; microorganismos que se utilizan en la
industria de la alimentación.
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NBS 2: Riesgo individual moderado. Se manipula agentes con peligrosidad intermedia. Que causan
enfermedad en el hombre y puede suponer un peligro para los trabajadores, siendo poco probable
que se propague a la colectividad y existiendo generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. Como
algunos que, perteneciendo a la propia flora habitual del hombre, son capaces de originar patología
infecciosa humana de gravedad moderada o limitada. Debe tener gabinetes especiales para evitar
aerosoles, salpicaduras, debe tener autoclave. Se usa para Diagnostico E Investigación el acceso es
restringido en los momentos de trabajo. Agentes de riesgo tipo 2. Ejemplo: Bacterias: Clostridium,
Corynebacterium, Bartonella, Bordetella, Enterobacter, Neisseria, Helicobacter pylori, Listeria, E. coli
patógenos, Salmonella sp, Leptospira, Campylobacter, Neisseria, Legionella, Actinobacillus
Hongos: Candida, Aspergillus, Microsporum, Trichophyton
Virus: Adenovirus, Herspesvirus, Hepatitis B, Papovirus, Picornavirus
Protozoos: menos Leishmania, T. brucei gambiense, Plasmodium sp.
Nematodos todos, trematodos todos, Cestodos. H. nana, Taenia saginata.

NBS 3: Laboratorio de contención. El trabajo es con gérmenes altamente infecciosos,

potencialmente mortales. Con riesgo de que se propague a la colectividad y existiendo frente a él
generalmente profilaxis o tratamiento eficaz. El mayor y más frecuente peligro que entrañan éstos es
la infección adquirida a través de aerosoles y por fluidos biológicos. El laboratorio debe tener
características de diseño e ingeniería especiales, por ejemplo, zona de acceso con doble puerta y
penetraciones selladas. Algunos laboratorios universitarios, de análisis clínicos, de diagnostico
especial e investigación. Agentes de riesgo tipo 3. Ejemplo: Bacterias: M. leprae, M. tuberculosus,
M. bovis, Bacillus anthracis, Brucella, cepas aviares de Chlamydia, Salmonella typhi, Ritchettsia,
Blastomyces. Coxiella burneti, Y. pestis Parásitos: Echinococcus granulosus, T. solium. Priones
Virus: Flavirus, Dengue, Hepatitis B, C, G, E, Retrovirus, VIH, Rabia, Fiebre amarilla. Influenza AN1H1.
Protozoos: L. braziliensis, L. donovani, Trypanosoma cruzy

NBS 4: Contención máxima. Son laboratorios donde se trabaja con M.O. de muy alto riesgo para la
vida, individual como comunitario, agentes peligrosos y exóticos. El laboratorio tiene características
especiales de ingeniería y diseño para evitar la diseminación de los microorganismos en el medio
ambiente. El laboratorio tiene que tener presión de aire negativa, personal con entrenamiento
especifico, usan trajes presurizados que cubren todo el cuerpo y sobrepresión para eliminar
partículas que puedan ingresar por rotura. También incluye los laboratorios de producción de
biológicos y control de calidad de alimentos, medicamentos y afines. El acceso del personal
administrativo está terminantemente prohibido. Agentes biológicos del grupo 4. Ejemplo: Arenavirus
como el que produce la fiebre de Lassa, Machupo, Hantavirus, Ebóla, Hantavirus y Poxvirus. Virus
Marburg

CONCEPTOS BÁSICOS EN BIOSEGURIDAD

 LIMPIEZA: Es la eliminación física de sangre, fluidos corporales o cualquier material extraño visible
de la piel u objetos inanimados.
 DESINFECCIÓN: Es la destrucción de la infectividad potencial de un material determinado. Es útil
con la aplicación de desinfectantes sobre superficies, ejemplo: Hipoclorito de sodio 10%,
glutaraldehido 2%, ácido paracético o fenol 10%. Para la desinfección de manos y piel, se utilizan
productos menos tóxicos que los anteriores, ejemplo: alcohol yodado 2%, clorheximida 1% o
etanol al 70%. Puede hacerse también por ebullición.
 ESTERILIZACIÓN: Se define como la ausencia total de microorganismos viables, incluyendo las
esporas fúngicas o bacterianas. Se puede lograr por métodos físicos como la temperatura: por
calor seco (horno) ó calor húmedo (autoclave) y; en frío por filtración y centrifugación. Las
radiaciones métodos físicos útiles para la esterilización de plásticos, sondas y alimentos. La
esterilización por métodos químicos se puede hacer con óxido de etileno o peróxido de
hidrógeno.
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SEÑALES DE SEGURIDAD
De Prohibición: Redondas, con pictograma de color negro sobre fondo blanco, con bordes y banda
transversal de izquierda a derecha.
Contra Incendios: Rectangulares o cuadrangulares, con pictograma blanco sobre fondo rojo.
De Advertencia: Triangulares, con pictogramas de color negro y fondo amarillo o naranja.
De Seguridad: Rectangulares o cuadrangulares, con pictogramas de color blanco y fondo verde.
De Obligación: Circulares y con pictogramas de color blanco con fondo azul.
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GESTIÓN EN MANEJO DE RESIDUOS

1. Generalidades: La gestión de residuos debe ser considerada como una parte importante de la
seguridad en los laboratorios. Los desechos que se generan pueden estar contaminados por
microorganismos o contener sustancias químicas tóxicas y peligrosas. En menor medida, el
personal del laboratorio puede estar expuesto a los efectos de las radiaciones ionizantes.
Los casos de infecciones o intoxicaciones en el laboratorio son conocidos lo que obliga a la
adopción de medidas de protección para el personal que trabaja en este ámbito. La visión que
se pretende dar está sobre todo encaminada a la protección del personal de los laboratorios, no
olvidar que las actividades que en ellos se realizan pueden afectar a la salud comunitaria.
La mejor manera de racionalizar los residuos es mediante una gestión integrada cuyos pilares
básicos son la minimización, segregación y eliminación.
2. Clasificación de los Residuos según su Peligrosidad:
Clase A: Residuos Biocontaminados (Peligrosos)
Tipo A 1: Atención al paciente. Instrumentos y materiales utilizados en la toma de
muestra de sangre, tejidos y otros.
Tipo A 2: Material biológico.
Tipo A 3: Sangre humana y productos derivados.
Tipo A 4: Quirúrgicos y anatomopatológicos.
Tipo A 5: Animales contaminados.
Tipo A 6: Punzo cortantes
Clase B: Residuos Especiales
Tipo B 1: Químicos peligrosos.
Tipo B 2: Farmacéuticos.
Tipo B 3: Radioactivos.
Clase C: Residuos Comunes: Similares a los domésticos. Incluye a los generados en
administración como: cartón, papel, material de oficina, basura orgánica, etc.
3. Manejo de Residuos Sólidos:
Las bolsas de recolección de residuos sólidos se deben de diferenciar por colores:
- Residuos Biocontaminados: Color roja.
- Residuos Especiales: Color amarilla.
- Residuos comunes: Color negra.
Si los residuos son punzantes o cortantes debe utilizarse recipientes rígidos resistentes a la
perforación cuyo volumen no supere los 2 L y que contengan desinfectante (hipoclorito de sodio
al 10%), el cual debe ocupar los 2/3 del volumen del recipiente.

ACTIVIDADES A DESARROLLAR
1. Mencione 5 tipos de residuos biocontaminados, 5 especiales y 5 comunes, en laboratorio.
2. Mencione 5 Normas de Bioseguridad que usted estime conveniente debe de tener un
laboratorio de prácticas.
3. Señale que institución norma la Bioseguridad en las áreas de salud de nuestro país.
4. Identifique las probables fuentes de que generen residuos sólidos en la UAP y diseñe un sistema
de gestión de dichos residuos.
5. Mencione y esquematice los materiales y equipos que observó en el reconocimiento del
laboratorio de Biología.
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PRACTICA N °2
COPROLOGÍA: EXAMEN DE HECES
Es un método de diagnóstico no invasivo, la obtención de la muestra es relativamente fácil, se utiliza
mx recién obtenida por expulsión natural. Es el estudio de la materia fecal en la búsqueda de formas
parasitarias. El análisis de heces es efectivo en la identificación de formas quísticas, trofozoitos,
larvas y huevos. La identificación de los parásitos depende de la preparación adecuada del material.
El análisis inmediato es indispensable.

RECOLECCIÓN DE LA MUESTRA

Recolectar en un recipiente seco, limpio y sin orina.

Considerar a pacientes que reciben bario, bismuto o antibióticos pues las mx
son insatisfactorias.
Muestras formadas = ideales para quistes de protozoarios.
Muestras líquidas (diarreicas) o después de un purgante = ideales para
trofozoitos.
Consistencia dura y sin sangre: procesamiento idealmente en dos horas.
Presencia moco y sangre: inmediatamente.

FASES DEL EXAMEN

Examen Macroscópico
Color
Consistencia
Sangre
Restos alimenticios
Moco
pH
Examen Microscópico
Jabones, almidones, Grasas, Células vegetales, Otros, Parásitos.
1. EXAMEN MICROCOPICO
COLOR
Café: estercobilina (bilirrubina)
Blanquecino: ausencia de pigmentos biliares.
Amarillo: Leche, o presencia de bilirrubina inalterada
Gris oscuro: ingesta de grandes cantidades de chocolate o cacao.
Verde: ingesta de espinacas y vegetales clorofílicos. Diarrea infantil –biliverdina.
Rojo: remolacha
 Estrías rojas: sangrado porciones inferiores del SGI, o hemorroides
Negro: Hierro y bismuto.
 Melena: sangrado porciones altas del SGI.

CONSISTENCIA
Pastosas: presentan un aspecto moldeado
Semi Líquidas o Semidiarreicas
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Líquidas o Diarreicas
Formada
Caproica “con forma de bolas”
SANGRE
Indica hemorragia, varía su coloración de acuerdo a la parte del SGI de donde
provenga.

RESTOS ALIMENTICIOS
Tejidos o fibras vegetales como indicador de mala digestión.
MOCO
Copos desgarrados traslúcidos, indica procesos inflamatorios del intestino.

pH
Regularmente neutro (6.9-7.2)
ácido en Amebiasis y abundancia de carbohidratos
alcalino en Shigelosis y exceso de consumo de proteínas.

OLOR
 No se reporta, proviene del indol y escatol.

2. EXAMEN MICROSCÓPICO
 JABONES: Formas varias, generalmente color ámbar.
 ALMIDONES: coloreados de color oscuro al observar con lugol.
 GRASAS: Refringentes regularmente circulares.
 CELULAS VEGETALES: múltiples formas, doble pared, inclusiones celulares, diversas
coloraciones provenientes de pigmentos vegetales.

Fibras Musculares: cilindros cortos, con presencia de estrías o huellas. Prótidos: aumento de fibras
musculares = falta de digestión. Nota: reportar en “otros”. Los jabones indican mala digestión de
lípidos. Lípidos: grasas neutras y ácidos grasos. Glúcidos: (almidón) indigestibilidad o exceso de
ingesta de vegetales ricos en ellos. Células Vegetales: Provienen de la dieta y su cantidad está
relacionada con ésta.
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PROTOZOOS
Entamoeba coli: indicador de contaminación fecal por excelencia. Quiste 6-8
núcleos
Endolimax nana: indicador contaminación fecal en alimentos, menor tamaño E. coli
Iodamoeba butschlii: Un solo núcleo, vacuola de glucógeno.
Entamoeba poleckii: quiste con un núcleo excentrico, cromatina concentrada y
densa.
Entamoeba hartmanni: quiste con 3 a 4 núcleos, tamaño redondeado.
Chilomastix mesnilli: Trofozoito con movimiento tirabuzón y Quiste en “forma de
limón”, núcleo excéntrico.
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Giardia lamblia: Patógeno, axostilo y dos núcleos característicos. Trofozoitos y quistes.

Generalmente, con forma ovoide.
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PRACTICA N °3
PROTOZOOS: AMEBAS

Características Generales: protos, primero y zoon, animal.

• Son TODOS organismos unicelulares
• Son células eucariotas
• Hábitats: amplia variedad de nichos ecológicos, poseen orgánelos
• SON De forma variable
• La mayoría móviles en una etapa de su desarrollo = forma vegetativa = Trofozoito o
Zoitos→ algunos se trasforman en una forma de resistencia y transmisión = quiste
(inmóviles y de baja actividad metabólica).
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Iodamoeba butschlii Endolimax nana

Blastocystis hominis
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PRACTICA N °4
PROTOZOOS: FLAGELADOS
En la actualidad, la Giardia spp, es indicador de contaminación fecal del agua, en países
subdesarrollados o en aquellos donde la materia fecal llega a contaminar el agua potable,
como ha sucedido en EUA e Inglaterra. Esto hizo que se consideren como agentes causales
de “diarrea de los viajeros”.

La giardiasis es una parasitosis cosmopolita y es una de las causas más importantes de

enfermedad diarreica aguda (EDA), especialmente en niños y en sujetos que viajan a países
tercermundistas.

Giardia lamblia
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Chilomastix mesnilli:

Su prevalencia es aproximadamente de 1% a 3%. Habita en el colon de animales y del

hombre sin producir patología. Los quistes aparecen sólo en las materias fecales sólidas o
blandas; su tamaño es de 6 a 9 um , su forma es generalmente redondeada o piriforme,
con una pequeña prominencia, por lo cual se ha descrito como en forma de limón. Poseen
doble membrana gruesa y un núcleo, además de las estructuras rudimentarias del
citoplasma. Los quistes son la forma infectante
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PRACTICA N °5
PROTOZOOS: ESPOROZOARIOS INTESTINALES
Son un orden de protozoos esporozoarios, de la subclase de los coccidiomorfos, aovados o
esféricos carentes de aparato de locomoción, parásitos en el interior de la células y que se
multiplican por esporas y algunos alternadamente por división y gametos, que se
enquistan.
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PRACTICA N °5
PROTOZOOS: ESPOROZOARIOS PLASMODIUM
Son un orden de protozoos esporozoarios, de la subclase de los coccidiomorfos, aovados o
esféricos carentes de aparato de locomoción, parásitos en el interior de la células y que se
multiplican por esporas y algunos alternadamente por división y gametos, que se
enquistan.
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PRACTICA N °6
HELMINTOS: NEMATODOS

LOS NEMATODOS.

Su aspecto es alargado y ahusado en ambos extremos; en el corte transversal son redondos

y no segmentados. Poseen sólo un conjunto de músculos longitudinales que les permiten
desplazarse de manera “como un látigo”; un aparato digestivo completo adaptado de modo
apropiado para la ingestión del contenido intestinal, las células, la sangre o productos de
degradación celular del hospedador, y un aparato reproductor muy desarrollado
diferenciado en sexos.
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PRACTICA N °7
HELMINTOS: PLATELMINTOS
LOS PLATELMINTOS

Son gusanos o vermes aplanados dorsoventralmente en el corte transversal, y son

hermafroditas, con pocas excepciones.

• El tamaño varía desde 1 mm a varios metros (tenia).

• Se presentan en forma de vida libre y parásitas.

• Sistema muscular en forma de vaina o funda (circulares, longitudinales y a veces

oblicua) de origen mesodermico

Todas las especies de importancia en medicina pertenecen a dos clases:

1. trematoda (duelas)

2. cestoda (tenias).