Martes 04/09/18

Práctica #2: Estudio microscópico de los microorganismos

Resultados:
Mediante la práctica logramos adquirir el conocimiento de la realización de las distintas
tinciones, así como su uso óptimo, ya que dependiendo del microorganismo y situación
específica que quieras analizar, irá variando dentro de las mismas especies. Al adquirir el
conocimiento de las tinciones, pudimos utilizar esa adquisición en aplicaciones de casos
reales, en donde se nos dio a observar una muestra de una paciente que solicitó un
diagnóstico óptimo. Unas de las tinciones más utilizadas, se nos enseñó cómo realizarlas,
las condiciones, los pasos y la identificación del medio de cultivo con el que tratamos.
La realización de tinciones que son muy importantes en el entorno clínico como lo es la
tinción de Gram, la cual se basa en la identificación de bacterias con características muy
específicas como pueden ser componentes de su pared celular, o bien el resultado de la
tinción de cápsula en donde pudimos apreciar la aparición del organelo específico del
Cryptococcus sp denominado cápsula, entre otros.
Como otra de las apariciones fue de una muestra en fresco de Cryptococcus sp, se podía
apreciar el tamaño de los microorganismos, al igual que su movimiento, aunque no se podía
apreciar su estructura como una de sus características importantes.
Posteriormente como finalización de práctica, realizamos los medios de BAAR, en donde
se sometieron a distintos microorganismos a dicha tinción en donde el Mycobacterium
Gordonae resultó positivo ya que, al observar al microscopio, había algunas zonas pintadas
de rojo, dando un claro ejemplo de una BAAR positiva.

Discusión:
En el área clínica que se dedica únicamente al diagnóstico, debe contener distintas técnicas
que ayuden a la investigación de microorganismos y que estos a su vez, ayuden de manera
positiva el diagnóstico, dando uno más acertado. Dichas técnicas pueden entrar desde
tinciones, mordentes y procesos en donde ayuden a una mejor visualización. Iniciando por
la tinción negativa, la cual únicamente se encarga de teñir un organelo específico, como en
este caso fue la tinción de cápsula y endoespora, las cuales se basan únicamente en teñir
el organelo que se desea osbervar.1

En esta tinción negativa del cultivo de Cryptococcus sp, se logra

observar cómo el microorganismo se encuentra teñido de rosado,
mientras que mantienen una protección a su alrededor conocida
como espora.
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Dentro de la práctica nos encontramos con una tinción selectiva que se concentra en los
bacilos, provocando una visualización verdosa. Dicha tinción se llama Técnica de Schaefer
y Fulton, y es una técnica diseñada para aislar endosporas tiñendo cualesquiera
endosporas presentes verde, y cualesquiera otros organismos bacterianos rojo. La mancha
verde es verde malaquita, y la de contraste es safranina, que tiñe cualquier otro organismo
bacterianas rojo.

Es una muestra de Bacillus subtilis con la

aplicación de la tinción de Schaefer y
Fulton, lográndose observar tonalidades
rojas debido al contraste de safranina y
tonalidades verdosas que son los bacilos y
fueron teñidos por el verde malaquita.

Dichas tinciones se concentran en las

bacterias con menos grado de complejidad
y que se tienen ya bien identificadas como
lo fue la Klebsiella pneumoniae. Como un
punto adicional práctico, realizamos una tercera tinción selectiva a la cual únicamente se
analizaba el Cryptococcus sp pero como muestra en fresco, dificultando el análisis de las
bacterias que viven, debido al movimiento caracterizado de las Creptococcus2.

Es una muestra al microscopio de el cultivo

Cryptococcus sp sin ninguna tinción, pudiéndose
observar todo el movimiento natural del
microorganismo, pero difícilmente su estructura.

Posteriormente, nos encargamos de pasar a la siguiente tinción la cual fue la tinción de

Gram, en donde consiste en una serie de pasos para lograr teñir ciertas partes del
microorganismo. Como muestra esencial en la tinción más utilizada, fue un cultivo de
Escherichia coli, la cual una de sus principales características es tener un lado negativo en
la tinción de Gram que se vio reflejado posteriormente en una foto en donde se percibe un
campo difícil de encontrar, debido a que la mayoría del campo visual únicamente contienen
bacterias Gram positivo, dicho campo también contiene Gram negativo y esto pudo ser
debido a que la tinción no se colocó en el tiempo adecuado de preparación. La tinción de
Gram, es una tinción que ya lleva un tiempo desarrollada y que con el tiempo se ha
perfeccionado a lo largo de los años, haciendo más efectivo su uso.3
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Se utilizaron cultivos de E. Coli en donde a simple vista

parece ser Gram positiva, aunque existen ciertas
tonalidades de azul, concluyendo que es Gram negativa.

Aunque por otro lado se encuentran las BAAR, las cuales tienen el fundamento de contener
características en su pared celular que los ayuda como protección, la cual la tinción de Ziehl
Neelsen, se encarga de teñir y poder facilitar una correcta observación.

Cultivo de Staphylococcus aureus indicando

una resistencia leve al alcohol-ácido, logrando
almacenar ciertas bacterias con su colorante
rojizo dentro de un entorno de azul.

Conclusiones:
Con el avance de la práctica obtuvimos conocimientos de empleo de técnicas indeales para
la identificaiicon y diagnóstico de microorganismos que pueden ser útiles para nuestro
desarrollo profesionalizante. Las técnicas salieron correctamente, por lo que los pasos del
manual se siguieron al pie de la letra, sin causar ninguna contaminación del medio y así
poder tener una muestra pura. Sin embargo, el medio de esterilidad no es del todo completo,
por lo que variaciones dentro de cultivos podría afectar resultados a la hora de observarlos
en el microscopio como lo son los falsos positivos, debido a que otro microorganismo se
está tiñiendo, logrando una alteración de la muestra, aunque ninguna de dichas situaciones
pasó debido al seguimiento correcto del manual y que son conocimientos que en un futuro
se utilizarán pero en casos completamente reales.
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Bibliografías:

1. TORTORA, G.J.; FUNKE, B.R.; CASE, CL. Microbiologia. 10. ed., Porto
Alegre: Artmed, 2010. Pag 67, 185 y 186

2. MADIGAN, M.T.; MARTINKO, J.M.; DUNLAP, P.V.; CLARK,

D.P. Microbiologia de Brock. 12. ed., Porto Alegre: Artmed, 2010. Pag:
234,235 y 457

3. López L., Hernández M. "Las tinciones básicas en el laboratorio de

microbiología" 2014. CDMX, México. Mediagraphic

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Kevin Alejandro Rivera Ruiz Firma