W

Margit Pavelka
Jürgen Roth

Functional Ultrastructure
Funktionelle Ultrastruktur

Ander
Atlas Atlas of Tissue
Biologie undBiology andvon
Pathologie Pathology
Geweben

SpringerWienNewYork
Dieses eBook enthält keine begleitenden Medien, die mit der gedruckten
Version des Buches verpackt wurden.

Prof. Dr. med. Margit Pavelka

Medizinische Universität Wien, Zentrum für Anatomie und Zellbiologie,
Institut für Histologie und Embryologie, Abteilung für Zellbiologie und Ultrastrukturforschung, Wien, Österreich
(margit.pavelka@meduniwien.ac.at)

Prof. Dr. med. Dr. sc. Dr. h. c. Jürgen Roth

Universität Zürich, Abteilung für Zell- und Molekularpathologie, Zürich, Schweiz
(juergen.roth@usz.ch)

Das Werk (mit beigepackter CD-ROM) ist urheberrechtlich geschützt.

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Mit 413 elektronenmikroskopischen Aufnahmen und einer CD-ROM

Bibliografische Information der Deutschen Bibliothek

Die Deutsche Bibliothek verzeichnet diese Publikation in der Deutschen Nationalbibliografie;
detaillierte bibliografische Daten sind im Internet über http://dnb.ddb.de abrufbar.

ISBN-10 3-211-83563-6 SpringerWienNewYork

ISBN-13 978-3-211-83563-0 SpringerWienNewYork
 Wir widmen dieses Buch

Michaela und Ernst

Verena, Raphael, Julia und David

VORWORT
Die Elektronenmikroskopie hat wie kaum eine andere
Disziplin die Entwicklung der Biologie und Medizin in
der zweiten Hälfte des letzten Jahrhunderts beeinflusst
und den Weg zur Konvergenz der bis dahin getrennten
Wissensbereiche Zytologie, Biochemie und Zellphy-
siologie zur Zellbiologie bereitet. Zahlreiche Konzepte
der modernen Zellbiologie basieren auf Befunden der
zellulären Ultrastruktur. Wer sich in den sechziger und
siebziger Jahren für Zellbiologie interessierte, musste
sich zuerst mit der Elektronenmikroskopie auseinander-
setzen und sich mit den Techniken der Fixierung,
Einbettung und Kontrastierung der schwer herstell-
baren Ultradünnschnitte befassen. Es vergingen Jahre
bis diese Techniken standardisiert und mit der ultra-
strukturellen Enzym-Zytochemie oder Immunelek-
tronenmikroskopie neue funktionelle Methoden ent-
wickelt wurden, die dann aber viel zum Verständnis der
diversen Funktionen der Zellen beigetragen haben.
Gleichzeitig wurden neue biochemische und biophysi-
kalische Verfahren eingeführt, welche die bestechende
Eleganz und Universalität der funktionellen Prinzipien
von Zellen deutlich machten. Die massive Zunahme
solcher Daten hat in den letzten Jahrzehnten zu einer
Verschiebung der Schwerpunkte geführt, und die Elek-
tronenmikroskopie durch andere weniger aufwendige
Verfahren, die schneller zu „Ergebnissen“ führen, aus
ihrer Spitzenposition verdrängt. In morphologischen
Studien wurden z. B. die Immunofluoreszenz und die
Confokale Laser Raster Mikroskopie zu Standard-
methoden, obwohl sie eine deutlich niedrigere Auf-
lösung besitzen als die Elektronenmikroskopie. Obwohl
die Relevanz der Ultrastruktur für zellbiologische
Studien damit nicht prinzipiell in Frage gestellt wird,
lässt die Qualität derart publizierter elektronen-
mikroskopischer Aufnahmen, die analog zu Blots und
lichtmikroskopischen Aufnahmen in Briefmarkengröße
veröffentlicht werden, im Hinblick auf ihre Aussagekraft
viel zu wünschen übrig. Auch in der Ausbildung der
Studenten geht die funktionelle Bedeutung der
Ultrastruktur durch Versuche zur „Integration“ der
Fächer Zytologie, Biochemie und Physiologie häufig
verloren. Aus diesen genannten Gründen besteht ein
großer Bedarf an einem fundierten Text über die
Ultrastruktur der Zellen und ihrer Analyse mit
modernen morphologisch-zellbiologischen Verfahren.
Dies ist Margit Pavelka und Jürgen Roth vortrefflich
gelungen. Als erfahrene Elektronenmikroskopiker ha-
ben sie selbst zur methodischen Entwicklung der
Immunelektronenmikroskopie und ultrastrukturellen
Zytochemie beigetragen und zahlreiche wichtige Bei-
träge zur funktionellen Ultrastruktur der Zelle ver-
öffentlicht. Als Hochschullehrer sind sie bestens mit der
Problematik der Lehre der Zellbiologie vertraut, aber
auch mit den technischen Aspekten und möglichen
Artefakten, die im Elektronenmikroskopie Labor ent-
stehen können. Der vorliegende Atlas stellt eine
Sammlung erstklassiger elektronenmikroskopischer
Aufnahmen aus verschiedenen Geweben mit hohem
Informationsgehalt dar. Mit großer Sorgfalt werden die
morphologischen Veränderungen der Zellen und Orga-
nellen unter experimentellen Bedingungen dokumen-
tiert. Die funktionellen Aspekte werden mittels präziser
zytochemischer Markierungen dargestellt und in
schönen Schemata übersichtlich zusammengefasst.
Weiterhin wird die funktionelle Bedeutung der
Ultrastruktur durch die Präsentation relevanter
pathologisch veränderter Zellen und Organellen bei
bestimmten menschlichen Erkrankungen unterstrichen.
Dieser Atlas rückt die Individualität der Zellen und
die Verschiedenheit ihrer Organellen wieder in den Vor-
dergrund und wendet sich gegen ihre Vereinheitlichung,
die manchmal durch Analyse der „Homogenate“ vor-
getäuscht wird. Er wird eine Quelle der Inspiration für
junge Zellbiologen sein, die ihre Ergebnisse aus Pro-
teomics und Genomics mit ultrastrukturellen Merk-
malen korrelieren möchten. Aber auch für ältere bietet
sie eine ausgezeichnete Informationsquelle über die
neusten funktionellen Aspekte der verschiedenen Zell-
typen mit Angaben entsprechender Referenzen. Die
Lektüre, aber auch die Betrachtung alleine wird auf
jeden Fall viel Freude bereiten und gleichzeitig die
„Effizienz“ steigern.
Heidelberg, Juli 2005 H. Dariush Fahimi
Prof. Dr. med. em.
Abteilung Medizinische Zellbiologie
Institut für Anatomie und Zellbiologie
Universität Heidelberg
EINFÜHRUNG
Zellen stellen die grundlegenden Einheiten der Gewebe
in lebenden Organismen dar. Ihre vielfältigen Funk-
tionen werden durch eine zunehmend überschaubare
Zahl von molekularen Bausteinen bewerkstelligt. Die
weitgehende Entschlüsselung des menschlichen Erb-
gutes und desjenigen verschiedener anderer Organis-
men wird weiterhin weitreichende und spannende Kon-
sequenzen für die molekulare Zellbiologie haben.
Bekanntermassen sind Funktion und Struktur untrenn-
bar miteinander verbunden und die modernen mor-
phologischen Techniken haben entscheidende Beiträge
zur Aufklärung der Struktur und somit zur Struktur-
Funktionsanalyse von Molekülen, makromolekularen
Anordnungen und der verschiedenen zellulären Orga-
nellen, einschliesslich des Zytoskeletts und der kom-
plexen Strukturen der extrazellulären Matrix, geliefert.
Das Spektrum der verfügbaren hochauflösenden Mi-
kroskopietechniken hat nicht nur für die topographisch
orientierte Strukturanalyse, sondern zunehmend für die
Analyse hoch dynamischer und komplexer Transport-
vorgänge in den Zellen wesentliche und wichtige
Beiträge geliefert und wird auch in der Zukunft neues
Wissen generieren. Elektronenmikroskopische Analysen
unter Anwendung moderner Präparations- und Un-
tersuchungstechniken, wie beispielsweise der Hoch-
druck Gefrierfixierung, der Kryoelektronenmikro-
skopie, Elektronentomographie und Immungoldmar-
kierung, nehmen einen bedeutenden Platz unter den
Methoden der molekularen Zellbiologie ein.
Wir haben uns bei der Konzeption und Zusammen-
stellung dieses Atlases „Funktionelle Ultrastruktur“ von
dem Gedanken leiten lassen, dass das Studium und das
wissenschaftliche Arbeiten auf dem Gebiet der mole-
kularen Zellbiologie und der medizinischen Grund-
lagen- und Krankheitsforschung fundierte Kenntnisse
der Feinstruktur der Bestandteile der Zellen und ihrer
Umgebung sowie Organisationsprinzipien von Gewe-
ben voraussetzt. Das gilt heute um so mehr wegen der
wieder zu neuer Aktualität gelangten systemischen
Betrachtungsweise in der Biologie und Medizin. So
hoffen wir, dass dieser Atlas den Studierenden eine hilf-
reiche Einführung und den bereits Fortgeschrittenen ein
Referenzwerk sein wird und die vielfältige und kom-
plexe Welt der zellulären Feinstrukturen sowohl den
morphologisch interessierten Medizinern und Zell-
biologen als auch den Molekularbiologen und Bio-
chemikern näher bringen wird. Die den Kern dieses
Atlas darstellenden Abbildungen basieren auf der An-
wendung nach wie vor aktueller klassischer Techniken
wie auch der modernen Techniken der Immunelek-
tronenmikroskopie, Gefrierbruch Elektronenmikro-
skopie, Hochdruck Gefrierfixierung, Kryoelektronen-
mikroskopie, Raster- und Atomkraftmikroskopie. Sie
werden von kurzen Texten und Schemata sowie aus-
gewählten Literaturzitaten begleitet. Für den Zugriff auf
weiterführende und nach der Drucklegung des Atlas
erschienene Publikationen ist der online Service von
Pubmed (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/
query. fcgi?db) sehr empfehlenswert.
Der Atlas besteht aus zwei Teilen. Der erste betrifft
Zellen und ihre verschiedenen Bestandteile, Zell-Zell
Kontakte und Zell-Matrix Interaktionen. Zusätzlich zur
normalen Struktur beinhaltet er auch Beispiele
experimentell verursachter oder im Gefolge von Er-
krankungen auftretender charakteristischer Veränder-
ungen von Organellen. Unser Ziel war, eine möglichst
umfassende Dokumentation der Zellstrukturen zu prä-
sentieren und den Zusammenhang zu ihren Funktionen
darzustellen. Im Gegensatz hierzu war es nicht unser
Ehrgeiz, dem zweiten Teil enzyklopädischen Umfang zu
geben. An Hand von ausgewählten und, wie wir hoffen,
repräsentativen Beispielen von Prinzipien der Gewebe-
organisation wurde das Augenmerk auf spezifische
Funktionen erfüllende Strukturen gerichtet, die letzt-
endlich eine morphologische Widerspiegelung dieser
Funktionen sind. Veränderungen von Zellbestandteilen
im Gefolge von Krankheiten können mitunter derart
charakteristisch sein, dass sie wichtig für die Diagnose-
stellung sind. Solche praktisch bedeutsamen Beispiele
haben wir eingeschlossen.
Im Vergleich zur kürzlich erschienen englischsprachi-
gen Ausgabe des Atlas ist die vorliegende Ausgabe er-
weitert worden und wir danken Prof. S. Cinti für
Abbildungen zum weissen und braunen Fettgewebe,
sowie Prof. D. Kerjaschki für Abbildungen des olfakto-
rischen Epithels. Dieser Ausgabe liegt auch eine CD-
ROM bei, die zusätzliche Benutzungsmöglichkeiten
eröffnet. Ein von nur zwei Autoren verfasstes Buch
bietet Vorteile bezüglich der Einheitlichkeit des Stiles
der Texte und der Auswahl der Abbildungen. Da wir uns
in beides redlich geteilt haben, hoffen wir, ein lesens-
und anschauenswertes Buch verfasst zu haben. Um so
wichtiger erscheint es uns, von Ihnen, unseren Lesern,
Rückinformation zu erhalten für Verbesserungen und
Veränderungen jedweder Art. Wir erwarten gerne Ihre
Post an: juergen.roth@usz.ch und margit.pavelka@
meduniwien.ac.at
Wien und Zürich, September 2005 Margit Pavelka
Jürgen Roth
DANKSAGUNG
In die verschiedenen Aspekte während der Konzi-
pierung, Verfassung und Herstellung dieses Buches
waren viele Personen einbezogen und wir möchten allen
Studenten, Mitarbeitern und Kollegen für ihre wert-
vollen Hinweise und Ideen herzlich danken. Sie sind zu
zahlreich, um alle genannt werden zu können. Für die
Bereitstellung von hervorragendem Bildmaterial sind
wir ebenfalls vielen Kollegen zu grossem Dank ver-
pflichtet. Auch sind eine Reihe der im Atlas enthaltenen
Abbildungen das Ergebnis der Zusammenarbeit mit
unseren Mitarbeitern und mit Kollegen von ausserhalb,
die nachfolgend (in alphabetischer Reihenfolge) genannt
sind: Moise Bendayan, Eric G. Berger, Dieter Bitter-
Suermann, Daniela Brada, Dennis Brown, Eric
Carlemalm, Pierre M. Charest, Paul Debbage, Michel
Deschuyteneer, Adolf Ellinger, Jingyu Fan, Richard
M. Franklin, Alfred Gangl, Irwin J. Goldstein, Bruno
Guhl, Michael Hess, Robert L. Hill, Kristijan Jezernik,
Eduard Kellenberger (†), Reinhard Kofler, Peter M.
Lackie, Hans Lassmann, John M. Lucocq, Roberto
Montesano, Josef Neumüller, Armando Parodi, James C.
Paulson, Hanns Plenk jr., Christian Schöfer, Robert G.
Spiro, Douglas J. Taatjes, Kiyoteru T. Tokuyasu, Monika
Vetterlein, Werner Villiger, Franz Wachtler, Winifred M.
Watkins, Klara Weipoltshammer and Christian Zuber.
Für das Lesen der Texte gebührt ein besonderer
Dank Antoinette Schumacher and Dr. Monika Vetter-
lein. Wir möchten unseren Dank an Ulrich Kaindl,
Norbert Wey, Stefanie Sulzer und Klaus Schönheinz
aussprechen für ihre grossartige Hilfe bei der Erstellung
der Abbildungen und für die professionelle Herstellung
der Schemata und Diagramme. Bei der Präparation der
unzähligen ultradünnen Schnitte sind Elfriede Scherzer,
Beatrix Mallinger, Beatrice Pfizer und Dr. Bruno Guhl
tatkräftig und mit viel Feingefühl zu Werke gegangen,
wofür wir ihnen sehr danken möchten. Dr. Bernd Sasse,
Maya Häberlin und Terry Menard waren beim Durch-
forsten des Archivs echte Pfadfinder. Kann ein Buch
ohne engagierte Verlagsmitarbeiter gelingen? Sicherlich
nicht, und so ist es uns ein Bedürfnis, Direktor Rudolf
Siegle, Renate Eichhorn und Wolfgang Dollhäubl vom
Springer-Verlag in Wien für ihre Ausdauer, Verständnis
und Hilfe während der Entstehung dieses Buches
speziell zu danken. Letztlich möchten wir den Mit-
arbeitern der Holzhausen Druck und Medien GmbH in
Wien danken, dass sie die von uns gewünschten Grau-
töne so professionell getroffen haben.
FÜR DIE GROSSZÜGIGE BEREITSTELLUNG VON BILDMATERIAL DANKEN WIR

Dr. Ueli Aebi, Basel (Abb. 8B, 9, 129) Dr. Lars-Inge Larsson, Frederiksberg (Abb. 96A)

Dr. Thomas Bächi, Zürich (Abb. 41D, 41E, 71B) Dr. Hans Lassmann, Wien (Abb. 144, 145)

Dr. Peter H. Burri, Bern (Abb. 113) Dr. Josef Neumüller, Wien (Abb. 116)

Dr. Saverio Cinti, Ancona (Abb. 132, 133)

Dr. Hanns Plenk jr., Wien (Abb. 135, 136)
Dr. Dusan Cmarko, Lausanne (Abb. 4, 7)
Dr. Charlotte Remé, Zürich (Abb. 105, 106)
Dr. H. Dariush Fahimi, Heidelberg (Abb. 60–63)
Dr. Rok Romih, Ljubljana (Abb. 114, 115)
Dr. Stanislav Fakan, Lausanne (Abb. 2A, 3A, 4, 7)
Dr. Christian Schöfer, Wien (Abb. 6)
Dr. Michael Hess, Innsbruck (Abb. 33)
Dr. Max Spycher, Zürich (Abb. 20, 50–56, 64B, 65)
Dr. Ernst B. Hunziker, Bern (Abb. 130 A, B)
Dr. Franz Wachtler, Wien (Abb. 5)
Dr. Françoise Jaunin, Lausanne (Abb. 4, 7)

Dr. Kristian Jezernik, Ljubljana (Abb. 114, 115) Dr. Ewald R. Weibel, Bern (Abb. 111)

Dr. Brigitte Kaissling, Zürich (Abb. 93, 104) Dr. Klara Weipoltshammer, Wien (Abb. 6)

Dr. Dontscho Kerjaschki, Wien (Abb. 107) Dr. Sadaki Yokota, Yamanashi (Abb. 57)
INHALT

DIE ZELLE

Einleitung: Allgemeiner Bauplan tierischer Zellen 2

Der Zellkern
Die Architektur des Zellkerns 4
Zytochemischer Nachweis von Ribonukleoproteinen 6
Die Kernlamina 6
Nachweis von Orten der DNA-Replikation und von Domänen in Interphasenchromosomen 8
Der Nukleolus 10
Funktionsbezogene Änderungen der Nukleolusarchitektur 12
Nachweis von Orten der RNA-Synthese 14
Die Kernporenkomplexe 16
Darstellung von Strukturveränderungen der Kernporenkomplexe durch Zeitraffer Atomkraftmikroskopie 18
Mitose und Zellteilung 20
Apoptose 22
Virale Einschlüsse 22

Das Zytoplasma: das sekretorische System

Der sekretorische Apparat exokriner Pankreaszellen 24
Ribosomen, raues endoplasmatisches Retikulum 26
Die Kernhülle und das raue endoplasmatische Retikulum 28
Das raue endoplasmatische Retikulum: Ort der Eiweisstranslokation und des Beginns
der Eiweiss N-Glykosilierung 30
Trimmen der Oligosaccharide, Reglukosilierung und Eiweissqualitätskontrolle im endoplasmatischen Retikulum 32
Raues endoplasmatisches Retikulum: ein Speicherort für nicht korrekt gefaltete, aggregierte Glykoproteine 34
Russell-Körper und Aggresomen sind verschiedene Typen von Eiweisseinschlusskörpern 36
Glattes endoplasmatisches Retikulum 38
Proliferation des glatten endoplasmatischen Retikulums 40
Prä-Golgi Transportintermediäre 42
Prä-Golgi Transportintermediäre: Trimmen von Oligosacchariden und Eiweissqualitätskontrolle 44
Der Golgi Apparat: eine Schaltzentrale des sekretorischen Transportwegs 46
Immunelektronenmikroskopie: eine Technik für Untersuchungen zur Sekretion von Eiweissen 48
Protein N-Glykosilierung: Trimmen von N-Glykanen im Golgi Apparat und Prä-Golgi Transportintermediären 50
Der Golgi Apparat: Abschluss der Synthese von Asparagin-verknüpften Glykanen 52
Zelltyp-abhängige Unterschiede in der Topographie von Glykosilierungsreaktionen im Golgi Apparat 54
Zelltyp-abhängige Unterschiede im Aufbau von Glykanen der Glykoproteine 56
Die Topographie der Biosynthese von Serin-/Threonin-verknüpften Glykanen 58
Golgi Apparat und TGN – Bedeutung für Sekretion und Endozytose 60
Golgi Apparat, TGN und trans-Golgi-ER 62
Golgi Apparat, TGN und trans-Golgi-ER: Kippserie 64
Brefeldin A-verursachte Dissoziation des Golgi Apparats 66
Brefeldin A-verursachte Bildung von Membrantubuli 68
XIV

Brefeldin A: Einfluss auf den retrograden Transport internalisierter Lektine 70

Brefeldin A: Einfluss auf transitorisches ER und Prä-Golgi Transportintermediäre 72
Strukturveränderungen des Golgi Apparats durch Hitzeschock 74
ATP-abhängige Strukturveränderungen des Golgi Apparats 76
Sekretgranula 78
Die Feinstruktur exokriner und endokriner Sekretgranula 80

Das Zytoplasma: das endozytische System

Clathrin-abhängige Rezeptor-vermittelte Endozytose 82
Virusendozytose 82
Endosomen und endozytische Wege 84
Endozytisches TGN und Endozytosewege in den Golgi Apparat 86
Tubuläre perizentrioläre Endosomen 88
Langerhans-Zellen und Birbeck-Granula: Antigen-präsentierende dendritische Zellen der Epidermis 90
Caveolae 92
Pinozytose 94
Phagozytose 94

Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen

Lysosomen 96
Lokalisation saurer Phosphatase, LAMP und Polylaktosamin 98
Die I-Zellkrankheit 100
Morbus Gaucher 102
Morbus Fabry 104
GM2-Gangliosidosen 106
Morbus Farber 108
Morbus Wolman 110
Glykogenose vom Typ II 112
Zystinose 112

Das Zytoplasma: die Autophagozytose

Autophagosomen: Organellen für die limitierte Selbstverdauung 114

Das Zytoplasma: die Mitochondrien und Abnormitäten

Mitochondrien vom Crista- und Tubulus-Typ 116
Strukturabnormitäten von Mitochondrien 118

Das Zytoplasma: die Peroxisomen und peroxisomale Erkrankungen

Peroxisomen: Organellen mit vielfältigen Funktionen 120
Biogenese der Peroxisomen 122
Peroxisomen: adaptive Veränderungen 124
Peroxisomen Pathologie 126

Das Zytoplasma: zytosolische Partikeln

Glykogen 128
Glykogenose vom Typ I 128
Erythropoetische Protoporphyrie 130
 XV

Das Zytoplasma: das Zytoskelett

Zytozentrum, Zentrosom und Mikrotubuli 132
Ausschaltung der Mikrotubuli 134
Aktinfilamente 136
Intermediärfilamente 138
Mallory-Körper 140

Die Zelloberfläche
Die Plasmamembran 142
Zellen in Kultur 144
Bürstenzelle 146
Die Glykokalyx (cell coat) 148
Die Glykokalyx: kompositionelle Unterschiede zwischen Zelltypen und Domänenbildung 150
Veränderungen der Glykokalyx in Tumoren 152

Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen

Junktionale Komplexe 154
Tight Junctions und Gap Junctions 156
Fleckdesmosomen 158
Zell-Zell Verzahnungen 160
Basales Labyrinth 162
Die Basalmembran 164
Die glomeruläre Basalmembran 166
Alport-Syndrom (hereditäre Nephritis) 166
Die Descemet’sche Membran 168
Die Basalmembran der Haut und die Hemidesmosomen der Keratinozyten:
eine Epithel-Bindegewebe Verbindung 170
Epidermolysis bullosa simplex 172

PRINZIPIEN DER GEWEBEORGANISATION

Sekretorische Epithelien
Der Pankreasazinus 176
Das Azinuszentrum mit sekretorischen und zentroazinären Zellen 178
Das Schaltstück 180
Die Submandibulardrüse 182
Die Becherzellen: einzellige Drüsen 184
Die Belegzellen des Magens: Orte der Salzsäureproduktion 186
Die Schaltzellen der Niere: Regulatoren des Säure-Basen Haushalts 188
Endokrine Sekretion: Insulin-produzierende Beta-Zellen der Langerhans’schen Inseln 190
Störungen der Hormonkonversion in menschlichen Insulinomen 192
Das diffuse endokrine System 194
Das Leberepithel 196
Das Leberepithel – Gallekanälchen 198
Das Leberepithel – Lipoproteintransport 200
Plexus choroideus 202
XVI

Resorptive Epithelien
Das resorbierende Dünndarmepithel 204
Dünndarmepithel – Lipoproteintransport 206
Proximale Tubuli der Niere: Modifikation des Primärharns 208
Der Einfluss von Parathormon auf die proximalen Tubuli 210

Sensorische Epithelien
Die Photorezeptoren der Retina: Umwandlung von Lichtquanten in elektrische Signale 212
Umsatz von Photorezeptoren und Licht-induzierte Apoptose 214
Das Riechepithel 216

Plattenepithelien
Das vordere Hornhautepithel 218
Die Epidermis 220
Differenzierung der Keratinozyten und Ausbildung der Flüssigkeitsbarriere in der Epidermis 222

Epithelien der Atemwege und Kinoziliendyskinesien

Das Tracheobronchialepithel 224
Die Pathologie der Kinozilien 226
Die Alveolen: Gasaustausch und Abwehrsystem 228

Das Urothel
Die Deckzellen – Oberfächendifferenzierungen 230
Die fusiformen Vesikel in den Deckzellen 232

Die Endothelien
Kontinuierliches Endothel, Perizyt 234
Fenestriertes Endothel 236
Endothelzellkontakte mit Perizyten und glatten Muskelzellen 238

Das Glomerulum und krankhafte Veränderungen

Das Glomerulum: ein hochspezialisierter Filterapparat 240
Pathologie des glomerulären Filters: Minimal Change Glomerulopathie und kongenitale
nephrotische Syndrome 242
Glomeruläre Erkrankungen: membranöse Glomerulonephritis 244
Glomeruläre Erkrankungen: membranoproliferative Glomerulonephritis 246
Glomeruläre Erkrankungen: Transplantatglomerulopathie 248

Das Bindegewebe
Lockeres fasriges Bindegewebe 250
Fibroblast, Fibrozyt und Makrophage 252
Kollagene und elastische Fasern 254
Eosinophiler Granulozyt, Plasmazelle, Makrophage und Mastzelle 256
Die Bindegewebsschicht der Kornea 258
Die Bowman’sche Schicht in der Kornea 260
Die Amyloidose der Niere 262
Sichtbarmachung des Wachstums von Amyloidfibrillen durch Zeitraffer Atomkraftmikroskopie 264
 XVII

Das Fettgewebe
Das weisse Fettgewebe 266
Das braune Fettgewebe 268

Der Knorpel
Der Gelenkknorpel 270

Der Knochen
Osteoblast und Osteozyt 272
Osteoklast 274

Die Skelettmuskulatur und Dystrophien

Myofibrillen und Sarkomer 276
Das sarkoplasmatische Retikulum, Triaden, Satellitenzelle 278
Motorische Endplatte 280
Muskeldystrophien 282

Die Herzmuskulatur
Myofibrillen, Glanzstreifen 284

Die glatte Muskulatur

Glatte Muskelzellen, Synapse á distance 286
CADASIL 288

Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen

ZNS – Neuron, Gliazellen 290
ZNS – Blut-Hirnschranke, Synapsen 292
Marklose Nervenfaser 294
Peripherer Nerv, Bindegewebshüllen 296
Markhaltige Nervenfaser, Myelin 298
Ranvier’scher Schnürring 300
Axonale Degeneration 302
Neuroaxonale Dystrophie 304
Neuropathien im Gefolge von Dysproteinämien 306
Metachromatische Leukodystrophie 308
Neuronale Zeroidlipofuszinosen 310

Zellen des Bluts

Rote Blutzellen – Erythroblast, Retikulozyt, Erythrozyt 312
Neutrophiler Granulozyt 314
Eosinophiler Granulozyt 316
Monozyt 318
Lymphozyt 320
Megakaryozyt und Thrombozytenbildung 322
Thrombozyt 324

Sachverzeichnis 326
DIE ZELLE
2 Einleitung
ALLGEMEINER BAUPLAN TIERISCHER ZELLEN
Tierische Zellen haben einen grundsätzlich gleich-
artigen subzellulären Aufbau, der in Abhängigkeit von
ihrem Differenzierungsgrad und ihrer funktionellen
Beanspruchung quantitativ variiert und sich als Aus-
druck funktioneller Spezialisierung in speziellen
Strukturen manifestiert. Die nebenstehende elek-
tronenmikroskopische Abbildung zeigt bei schwacher
Vergrößerung seröse azinäre Zellen des Rattenpankreas,
den Prototyp einer polarisierten sekretorischen Zelle.
Mehrere azinäre Zellen bilden eine Funktionseinheit,
den Azinus.
Jede Zelle weist zwei Hauptkompartimente auf, den
Zellkern und das Zytoplasma, die beide im ersten
Kapitel detailliert dargestellt werden.
Der Zellkern wird von der Kernhülle umgeben, die
aus zwei Membranen besteht und von zahlreichen
Kernporen durchbrochen ist. Das Karyoplasma besteht
aus dem Hetero- und Euchromatin und enthält den
Nukleolus.
Das Zytoplasma besteht aus membranbegrenzten
Organellen und dem Zytoskelett. Beide sind in das
ZG
CV
Golgi
prä-GI
TE
TE
TE TE ER
prä-GI
Nukleus
prä-GI
prä-GI
TE
TE
Zytosol eingelagert, in dem der Intermediärstoffwechsel,
die Eiweißsynthese und der proteosomale Eiweißabbau
stattfinden. Das raue endoplasmatische Retikulum
(RER) ist in die Synthese, die Qualitätskontrolle und die
Retrotranslokation der Eiweiße einbezogen sowie der
Ort des Beginns der Eiweiß N-Glykosilierung und ein
bedeutender Kalziumspeicher. Im endoplasmatischen
Retikulum werden auch die Lipide synthetisiert. Viele de
novo synthetisierte Eiweiße und Lipide werden in den
Golgi Apparat transportiert und erhalten hier weitere
posttranslationelle Modifikationen, bevor sie an ihre
tatsächlichen Bestimmungsorte gelangen. Ferner be-
ginnt die Eiweiß O-Glykosilierung im Golgi Apparat.
Für den anterograden und retrograden Transport
zwischen dem rauen endoplasmatischen Retikulum und
dem Golgi Apparat sind die Prä-Golgi Transport-
intermediäre (prä-GI) zuständig. Wie in anderen
sekretorischen Epithelzellen werden auch die
Sekretprodukte der pankreatischen azinären Zellen in
Trans Zisternen des Golgi Apparats in unreife
Sekretgranula (CV) gepackt, die zu Zymogengranula
(ZG) reifen. Auf einen Reiz hin werden die in den
Zymogengranula gespeicherten Eiweiße über Exozytose
sezerniert, daher die Bezeichnung regulierte Sekretion.
Gemeinsam bilden das endoplasmatische Retikulum
mit seinen transitorischen Elementen (TE), die Prä-
Golgi Transportintermediäre, der Golgi Apparat und die
Zymogengranula den sekretorischen Apparat der Zelle.
Andere Zelltypen, wie Fibroblasten, bilden keine
Sekretgranula und sezernieren ihre Produkte fort-
während mittels kleiner Vesikeln, daher die Bezeichnung
konstitutive Sekretion.
Weitere ubiquitäre Organellen sind die energie-
erzeugenden Mitochondrien (M), die Peroxisomen,
welche oxidative Enzyme besitzen, die für den Substanz-
abbau wichtigen Lysosomen und die in die Substanz-
aufnahme einbezogenen Endosomen.
Die Plasmamembran (Plasmalemma) stellt die
Grenze der Zelle zu ihrer Umgebung dar, wobei bei epi-
thelialen Zellen wie den azinären Zellen zwei Plasma-
membrandomänen zu unterscheiden sind. Die luminale
Plasmamembran stellt die apikale Membrandomäne
dar, die das Azinuslumen (AL) bildet. Sie ist durch junk-
tionale Komplexe (Pfeile) von der lateralen (LPM) und
der basalen (BPM) Plasmamembrandomäne abge-
grenzt.
Das Diagramm stellt eine vereinfachte Darstellung
einer azinären Pankreasepithelzelle dar.
Vergrößerung: x 11,250
Abbildung 1 3

ZG

AL
ZG

CV

Golgi

M
M

LPM RER Nukleus

BPM
4 Der Zellkern
DIE ARCHITEKTUR DES ZELLKERNS
Der Zellkern ist das größte der Zellkompartimente und
enthält die Chromosomen mit dem Hauptanteil der
Gene und die zahlreichen molekularen Instrumente, die
für die Genorganisation und Expression notwendig
sind. Gleichzeitig mit der erfolgreichen Sequenzierung
des gesamten menschlichen Genoms in den vergan-
genen Jahren, haben sich auch die Kenntnisse über die
Kernarchitektur enorm erweitert und rezente Ergeb-
nisse zeigen, dass das langjährige Dogma einer strikten
räumlichen Trennung von Transkription im Zellkern
und Translation im Zytoplasma nicht aufrechterhalten
werden kann.
Die Kernhülle wird von einer Doppelmembran
gebildet, die mit ihrem inneren Blatt den Kernraum
begrenzt und ihn vom Zytoplasma trennt. Zahlreiche,
komplex aufgebaute „Poren“ für den bidirektionalen
Transport zwischen Karyoplasma (Nukleoplasma) und
Zytoplasma durchsetzen die Kernhülle (Pfeile in A; siehe
auch Abb. 8 und 9). Abbildung B zeigt die äußere und
innere Membran der Kernhülle und die perinukleäre
Zisterne. Der Stern markiert eine Stelle, wo sich die
äußere Membran der Kernhülle in die des rauen endo-
plasmatischen Retikulums (RER) fortsetzt und die peri-
nukleäre Zisterne in das RER-Lumen mündet.
Der Zellkern ist ebenso, wie das Zytoplasma, in
Kompartimente gegliedert (Diagramme A and B). Die
Chromosomen (A-Chromosomen 1,2,3) sind im
Interphasenkern in Territorien organisiert (A-1,2,3),
denen Interchromatinräume gegenüber stehen. Genloci
(B-1,2,3) finden sich innerhalb der Chromosomen-
territorien und auch außerhalb, wohl an dekonden-
sierten Chromatinschlaufen (B-1,2,3).
A B
3
1 2 2 1 1
NOR 1
3
3
2 2
3
Nu
Im Elektronenmikroskop ist das kondensierte
Chromatin (Heterochromatin, C) durch seine intensive
Kontrastierbarkeit deutlich sichtbar, während die de-
kondensierten Chromatinfäden kaum erkennbar sind.
Das kondensierte Chromatin dominiert in den periph-
eren Kernarealen. Im Inneren des Zellkerns umgeben
Stränge von kondensiertem Chromatin die funktionell
aktiven, doch weniger auffälligen, Kernraumareale, in
denen zahlreiche diskrete Strukturen, die mit der Gen-
expression in Zusammenhang stehen, erkennbar sind.
Am auffälligsten sind die Nukleolen (Nu, siehe Abb. 5-7).
Interchromatingranula (IG) entsprechen elektro-
nenmikroskopisch den Splicing Factor-Kompartimen-
ten, wo RNA und Proteine, die beim mRNA-Spleißen
benötigt werden, angereichert sind. Auch enthalten
Interchromatingranula zahlreiche RNA-Prozessierungs-
faktoren, Transkriptionsfaktoren und auch potentielle
Strukturproteine, wie zum Beispiel Lamine.
Die „Cajal bodies“ (CB) wurden von Ramon y Cajal
vor 100 Jahren beschrieben. Sie entsprechen den „coiled
bodies“, gehören zu den bestcharakterisierten kleinen
Körperchen im Zellkern, und wurden erst kürzlich
wiederum nach ihrem Entdecker umbenannt. In den
Cajal Körperchen sind Transkriptions- und RNA-
Prozessierungsfaktoren vorübergehend lokalisiert.
Kernstrukturen sind außerordentlich dynamisch,
auch wenn sie morphologisch stabil erscheinen
(Diagramme C und D).
Sowohl Chromatin-assoziierte Proteine (Diagramm
C) als auch Proteine der Interchromatindomänen
(Diagramm D) befinden sich nur temporär am
Chromatin und in den entsprechenden Kompartimen-
ten (Nu: Nukleolus, IG: Interchromatingranula, Cajal
Körperchen). Es findet kontinuierlicher Austausch mit
dem Nukleoplasma statt.
Die Diagramme sind nach Roix and Misteli (2002)
gezeichnet.
Literatur
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nuclear architecture and gene regulation in mammalian cells.
Nat Rev Genetics 2: 292
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ic networks in the cell nucleus. Histochem Cell Biol 118: 105
Vergrößerung: x 24,000 (A), x 106,000 (B)
Abbildung 2 5

Kernhülle

IG

C
CB

Nu

IG

Nu
C

Kernhülle
A

*
äussere
Kernmembran
innere
RER
B
6 Der Zellkern
ZYTOCHEMISCHER NACHWEIS VON RIBONUKLEOPROTEINEN
DNA und RNA können elektronenmikroskopisch mit
verschiedenen zytochemischen Techniken nachgewiesen
werden. Die klassische Technik zum Nachweis
Ribonukleoprotein (RNP)-haltiger Strukturen in ultra-
dünnen Gewebeschnitten stellt die regressive
Kontrastierung nach Bernhard dar. Zunächst werden
sowohl DNA als auch RNA mit Uranylazetatlösung kon-
trastiert. Daran schließt sich eine Inkubation mit EDTA
Lösung an, die über die Komplexbildung von EDTA mit
Uranylionen zu einer fortschreitenden und bevorzugten
Entfernung der kontrastgebenden Uranylionen von der
DNA, aber nicht von RNP-haltigen Strukturen führt.
Die Spezifität dieser Methode für Ribonukleoproteine
ist begrenzt und muss in Kontrollen mittels Enzymver-
dauungen bestätigt werden.
Abbildung A zeigt die regressive RNA-Kontras-
tierung an einem Ultradünnschnitt von Glutaraldehyd-
fixierter und Epon-eingebetteter Rattenleber. Im Zell-
kern der Hepatozyten kommen vorwiegend RNP-
enthaltende Strukturen kontrastreich zur Darstellung.
Die Perichromatinfibrillen (Pfeilköpfe) treten ebenfalls
kontrastreich hervor. Perichromatingranula (Pfeile), die
als Speicher und/oder Transportform von Prä-mRNA
Partikeln angesehen werden, sind auch kontrastiert. Das
DNA enthaltende periphere und Nukleolus-assoziierte
kondensierte Chromatin (C) weist nur einen sehr
schwachen Kontrast auf.
IG: Interchromatingranula ; Nu: Nukleolus.
Literatur
Bernhard W (1969) A new staining procedure for electron micro-
scopical cytology. J Ultrastruct Res 27: 250
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Moyne G (1980) Methods in ultrastructural cytochemistry of the
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DIE KERNLAMINA
Die innere Kernmembran (IM) ist von einer 30 bis 80
nm dicken Schicht fibrösen Materials bedeckt, der Kern-
lamina. In Abbildung B, die einen Ausschnitt eines Ke-
ratinozyten der Haut zeigt, ist sie deutlich zu erkennen.
Die Kernlamina besteht aus Lamin A und variablen
Mengen des Lamins B und C, die zu der Familie der
Intermediärfilamente gehören. Im Unterschied zu
anderen Intermediärfilamenten bilden sie ein zweidi-
mensionales orthogonales Gitterwerk. Die nukleären
Lamine sind spezialisierte Fibrillen, die aus einer zen-
tralen _-helikalen stabförmigen Domäne bestehen, die
beidseits von einer globulären Domäne begrenzt wird.
Die C-terminale globuläre Domäne enthält eine
Aminosäuresequenz für den Zellkernimport. Nach
Farnesylierung werden die Laminuntereinheiten im
Bereich der inneren Kernmembran assembliert und
mittels des Lamin B Rezeptors und der Lamin-
assozierten Proteine 1 und 2 mit ihr verankert.
Die Kernlamina ist für die Gestalt und mechanische
Resistenz der Kernhülle sowie für die Genregulation von
Bedeutung. Weiterhin verbindet sie Chromosomen und
Kernhülle. Zu Beginn der Mitose kommt es durch
Phosphorylierung der Lamine zur Desintegration der
Kernlamina mit nachfolgender Auflösung der Kern-
hülle. Während der späten Anaphase erfolgt eine
Dephosphorylierung der Lamine und der Wiederaufbau
der Kernhülle.
Überraschenderweise verursachen Lamin A Muta-
tionen nicht nur den Verlust der Kernhülle, sondern
auch Erkrankungen der quergestreiften Muskulatur
(Kardiomyopathie und Muskeldystrophie), der Adipo-
zyten (partielle Lipodystrophie-Syndrome) und von
peripheren Nerven (periphere Neuropathie) sowie
vorzeitige Alternssyndrome. Die Laminopathien werden
gegenwärtig durch die Strukturhypothese (geschwächte
Kernlamina) und die Genexpressionshypothese (ge-
störte Regulation der Genexpression) erklärt.
AM: äussere Kernmembran; C: Chromatin.
Literatur
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Vergrößerung: x 24,500 (A); x 70,000 (B)
Abbildung 3 7

Nu

IG

C
Nu
C

C
Kernlamina

IM
B AM
8 Der Zellkern
NACHWEIS VON ORTEN DER DNA -REPLIKATION UND VON DOMÄNEN IN
INTERPHASENCHROMOSOMEN
DNA kann immunelektronenmikroskopisch mit hoher
Präzision und Spezifität nachgewiesen werden. Anti-
DNA Antikörper, die entweder in Tieren erzeugt wur-
den oder aus Seren von Patienten mit Autoimmun-
krankheiten gewonnen wurden, sowie Antikörper gegen
Nukleotidanaloge sind hierfür geeignet. Sie können an
Ultradünnschnitten von Aldehyd-fixierten und Lowi-
cryl- oder LR White-eingebetteten Geweben und Zellen
in Verbindung mit Immungold Markierungstechniken
erfolgreich eingesetzt werden. Auf diese Weise konnte
DNA im kondensierten und lockeren Chromatin von
Interphasenkernen, in Chromosomen mitotischer
Zellen und in Mitochondrien nachgewiesen werden.
In den Abbildungen A und B ist DNA in V79-Hams-
terzellen immunelektronenmikroskopisch markiert.
Hierfür wurden lebende Zellen mit dem membran-
gängigen Thymidinanalog Bromdeoxyuridin (BrdU)
inkubiert, welches während der Replikation in die DNA
eingebaut wurde. Mit einem monoklonalen Anti-BrdU
Antikörper und gold-markiertem Zweitantikörper
konnte dann das in der DNA vorhandene BrdU nach
Fixierung und Lowicryl-Einbettung in Ultradünn-
schnitten nachgewiesen werden.
Zum Nachweis naszenter DNA (Abb. A) wurden
Hamsterzellen nur kurzzeitig (zwei Minuten) mit BrdU
inkubiert. Mittels Immungoldmarkierung konnten
individuelle Chromatinfibrillen (Pfeilköpfe) in der
Peripherie des kondensierten Chromatins (Pfeil) als
DNA-Replikationsorte identifiziert werden. In anderen
Experimenten wurde hier auch DNA-Polymerase-alpha
nachgewiesen. Zusätzlich zum Immungoldnachweis von
naszenter DNA wurde in den Lowicryl Dünnschnitten
DNA mit einer modifizierten Feulgen-Reaktion kon-
trastiert. Aus derartigen Experimenten wurde gefolgert,
dass die DNA-Replikation vorwiegend in Perichroma-
tinregionen stattfindet und dass frisch replizierte DNA
von hier rasch in Regionen von kondensiertem
Chromatin gelangt.
Zum Nachweis von Chromosomenterritorien und
subchromosomalen Domänen (Abb. B) wurden V79-
Hamsterzellen für 9 Stunden mit BrdU inkubiert und
anschließend für weitere 62 Stunden kultiviert. Inner-
halb dieser Zeitspanne fanden etwa fünf Zellteilungen
statt, während derer eine Segregation der markierten
Chromosomen eintrat. Die Zellen enthielten nur noch
zwei bis drei markierte Chromosomen, die auf die
Anwesenheit von Chromosomenterritorien und sub-
chromosomalen Domänen untersucht wurden. Mittels
BrdU-Immungoldmarkierung wurde gezeigt, dass sepa-
rate Chromosomendomänen existierten, die aber auch
in engem räumlichem Kontakt zueinander standen,
jedoch ohne dass es zur Vermischung ihrer DNA kam.
Letzterer Befund wurde dahingehend interpretiert, dass
Chromosomen-Chromosomen Interaktionen aufgrund
des regional begrenzten Kontakts des Chromatins
benachbarter Chromosomen stattfinden können.
Somit ermöglicht die BrdU-Immunelektronen-
mikroskopie die Darstellung von Orten der DNA-Repli-
kation und auch die Analyse der regionalen Anordnung
von Komponenten der Interphasenchromosomen.
Die Pfeile in Abbildungen A und B markieren RNP
Fibrillen in Perichromatin- und Interchromatin-
regionen.
Literatur
Fakan S (2004) The functional architecture of the nucleus as
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Vergrößerung: x 66,000 (A); x 63,000 (B)
Abbildung 4 9

Kernhülle

B
10
DER NUKLEOLUS
Die Nukleolen oder Kernkörperchen sind die morpho-
logisch auffälligsten Organellen des Zellkerns. Sie bilden
sich an den Nukleolusorganisatorregionen (NORs) der
akrozentrischen Chromosomen, wo in zahlreichen
Kopien die Gene, die für die Vorstufen der ribosomalen
RNA (Prä-rRNA) kodieren, lokalisiert sind. Die
Vorstufen der ribosomalen Untereinheiten werden in
den Nukleolen gebildet. Dies ist ihre Hauptaufgabe,
wenn auch Prä-ribosomale Partikelchen nicht aus-
schließlich in den Nukleolen entstehen und umgekehrt
auch andere Funktionen den Nukleolen zugeschrieben
werden. In menschlichen Zellen sind Nukleolusorgani-
satorregionen an fünf Chromosomen lokalisiert.
Theoretisch könnten in diploiden Zellen 10 Nukleolen
gebildet werden, doch ist das meist nicht der Fall.
Säugetierzellen besitzen durchschnittlich einen bis vier
Nukleolen. Ihre Zahl und ihr Aufbau sind funktions-
abhängig (siehe Abb. 6). Die Nukleolen verschwinden
bei Eintritt der Zellen in die Mitose, wenn Synthese und
Prozessierung der Prä-rRNA unterdrückt werden.
Die Ultrastruktur der Nukleolen spiegelt ihre
Hauptaufgabe bei der Bildung der Ribosomenvorstufen.
Ein Nukleolus besteht aus 3 Komponenten, der dicht
fibrillären Komponente (dfK), der granulären Kom-
ponente (gK) und dem fibrillären Zentrum (fZ). Das
meist sehr auffällige, den Nukleolen angelagerte kon-
densierte Chromatin (C) entspricht hauptsächlich den
Territorien von NOR-tragenden Chromosomen. Das
fibrilläre Zentrum, dem eine wichtige Rolle als Pro-
teinspeicher zugeschrieben wird, ist als deutlich ab-
grenzbares Körperchen von den dicht fibrillären und
granulären Nukleoluskomponenten umgeben. Beide
Komponenten beinhalten neu gebildete Prä-ribosomale
Strukturen, die sich in der dicht fibrillären Region in
einem sehr frühen Stadium, in der granulären Kompo-
nente in einem späten Stadium des Assemblierung
befinden. Die dicht fibrilläre Komponente ist vor allem
reich an neusynthetisierter Prä-rRNA und assoziierten
Proteinen, die granuläre Komponente enthält die fast
fertiggestellten Prä-ribosomalen Partikelchen, die für
das granuläre Aussehen dieses Teils des Nukleolus ver-
antwortlich sind. Die Transkription wird verschiedenen
Regionen im Nukleolus, der dicht fibrillären Region,
insbesondere der Grenzregion zum fibrillären Zentrum,
und auch Regionen im fibrillären Zentrum zuge-
schrieben.
Der Zellkern
Die Nukleolen stehen in enger funktioneller und
morphologischer Beziehung zu den Cajal Körperchen
(siehe Abb. 2). Cajal Körperchen sind wichtig für die
Bildung und Funktion der kleinen nukleolären
Ribonukleoproteine. Sie sind sehr dynamisch, bewegen
sich in unterschiedlichem Abstand zu den Nukleolen
und treten mit ihnen in Kontakt. Eine Reihe von
Proteinen, wie zum Beispiel Fibrillarin und Nopp40,
finden sich sowohl in den Nukleolen als auch in den
Cajal Körperchen und es gibt Hinweise, dass Proteine
zwischen den beiden Körperchen ausgetauscht werden.
Ein Austausch durch direkten Kontakt wird diskutiert.
In den vergangenen Jahren wurden zusätzliche, nicht
mit der Bildung von Prä-ribosomalen Partikeln in
Verbindung stehende Funktionen der Nukleolen be-
kannt. Sie werden sowohl mit der tRNA-Bildung und
Sequestrierung von regulatorischen Proteinen, als auch
Kontrolle von Alterungsvorgängen und Virusinfektion
in Zusammenhang gebracht. Nukleolen bilden eventuell
für solch unkonventionelle Aktivitäten eine stationäre
Plattform im Zellkern.
Kürzlich wurde mit dem Nachweis einer GTP-
gesteuerten Retention von Nukleostemin erstmals ein
molekularer Mechanismus für die Lokalisation und
Anhäufung eines Proteins im Nukleolus identifiziert.
Literatur
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mechanism controlling the dynamic coupling of nucle-
ostemin. J Cell Biol 168:179
Vergrößerung: x 66,000
Abbildung 5 11

gK
C

fZ
gK

dfK

gK

gK fZ

dfK
12
FUNKTIONSBEZOGENE ÄNDERUNGEN DER NUKLEOLUSARCHITEKTUR
Die Organisation und Architektur der Nukleolen steht
in engem Zusammenhang mit dem Funktionszustand
der Zellen und ändert sich Hand in Hand gehend mit
Änderungen der zellulären Funktion und Aktivität.
Drei Nukleolustypen lassen sich auf Grund ihrer
Architektur im Elektronenmikroskop unterscheiden:
(1) „Ringförmige“ Nukleolen (Pfeil in A) mit einem
großen fibrillären Zentrum, das von dicht fibrillären
und granulären Komponenten umgeben ist. Dieser Typ
wird im Detail auf der vorhergehenden Seite in Abb. 5
vorgestellt.
(2) Nukleolen mit einem „Nukleolonema“, einem
ausgedehnten Netzwerkknäuel aus dicht fibrillärer und
granulärer Substanz (Abb. B). Die fibrillären Zentren
sind klein und unauffällig.
(3) „Kompakte“ Nukleolen (Abb. C) mit mehreren
fibrillären Zentren, die von breiten Bändern aus
dichtem fibrillären Material und granulär nukleolärer
Substanz eingefaßt sind.
Die Bilder A–C zeigen in der Abfolge die Verän-
derungen der Nukleolen menschlicher Lymphozyten zu
verschiedenen Zeitpunkten nach Stimulierung mit
Phytohämagglutinin (PHA).
Ungefähr 75% der unstimulierten Lymphozyten aus
dem peripheren Blut enthalten einen ringförmigen
Nukleolus; die restlichen 25% der Zellen besitzen zwei
oder mehrere ringförmige Nukleolen.
Stimulierung der Zellen mit PHA führt zu einem An-
stieg der Zellen mit mehreren ringförmigen Nukleolen.
Abbildung A zeigt ein Beispiel eines Lymphozyten nach
4 Stunden PHA-Behandlung, in dessen Kern zwei ring-
förmige Nukleolen angeschnitten sind. Nach 12 Stun-
den besitzen 34% der Lymphozyten mehr als einen
Nukleolus. Die Zunahme der Anzahl der Nukleolen
wird mit der Aktivierung von zusätzlichen NORs in
Verbindung gebracht. Fortgesetzte Behandlung führt
zum Auftreten von großen Nukleolen mit Nukleo-
lonemata (Abb. B). Diese ausgedehnten nukleolären
Netzwerke, in denen die dicht fibrillären und granulären
Komponenten dominieren, scheinen durch Fusion
mehrerer kleiner vorgebildeter Nukleolen zu entstehen.
Die fibrillären Zentren sind verkleinert und wirken
„erschöpft“ durch Verbrauch der gespeicherten Proteine
für die angekurbelte und gesteigerte Bildung von
Ribosomenvorstufen; diese werden in den ausgedehnten
granulären Nukleolusregionen sichtbar. Dieser Nukleo-
lustyp ist am ausgeprägtesten nach 36 Stunden PHA-
Behandlung. Ein Beispiel nach 16 Stunden wird in
Abb. B gezeigt. Eine weitere Umformung in ausgedehnte
kompakte Nukleolen mit mehreren fibrillären Zentren
Der Zellkern
und auffällig breiten dicht fibrillären und granulären
Komponenten tritt unter prolongierter PHA-
Behandlung ein. Diese Umformung entspricht einer
neuerlichen hochaktiven Periode und ist in Abb. C nach
72 Stunden PHA-Behandlung dargestellt.
Der enge Zusammenhang von Nukleolusarchitektur
und Funktion kommt auch unter Proteinsynthese- und
RNA-Synthesehemmung zum Ausdruck. Wenn die
Proteinsynthese durch Puromycin gehemmt wird,
kommt es zu einer signifikanten Größenreduktion der
fibrillären Zentren. Behandlung mit Actinomycin D, das
spezifisch die rRNA-Transkription hemmt, bewirkt eine
generelle Abnahme der Größe der Nukleolen und eine
Segregation ihrer Komponenten. Dieser Zustand wird
an Hand eines Nukleolus im Kern einer HeLa Zelle nach
6-stündiger Actinomycin D-Gabe in Abbildung D ge-
zeigt und in einem zusätzlichen Diagramm dargestellt.
C
fZ
gK
dfK
C
Fibrilläres Zentrum (fZ) und dicht fibrilläre (dfK)
und granuläre Komponenten (gK) erscheinen separiert
und unzusammenhängend. C: kondensiertes
Chromatin
Literatur
Wachtler F, Ellinger A, and Schwarzacher HG (1980)
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biosynthesis. Cell Tiss Res 247: 583
Vergrößerung: x 7,000 (A); x 29,000 (B); x 14,000 (C); x 30,000 (D)
Abbildung 6 13

PHA 4h - Ringförmige Nukleolen PHA 16h - Nukleolonema

A B

PHA 72h - Kompakter Nukleolus Actinomycin D

C D
14
NACHWEIS VON ORTEN DER RNA -SYNTHESE
RNA kann ähnlich wie DNA in ultradünnen Schnitten
von Geweben und Zellen durch Immunelektronen-
mikroskopie mit hoher Präzision und Spezifität
nachgewiesen werden. Konventionelle Aldehydfixierung
und Einbettung in Epon, Lowicryl oder LR White sind
hierfür geeignet. Obwohl Antikörper gegen RNA ver-
fügbar sind, wird am häufigsten ein monoklonaler
Antikörper gegen Bromdeoxyuridin in Verbindung mit
goldmarkierten Zweitantikörpern verwendet, um in die
RNA eingebautes 5’Bromuridin-5-Triphosphat (BrUTP)
nachzuweisen. Die Immungoldmarkierung kann mit
anderen zytochemischen Nachweistechniken kom-
biniert werden. Im Gegensatz zu Bromdeoxyuridin ist
BrUTP nicht membrangängig. Um für den Einbau in
RNA verfügbar zu sein, müssen lebende Zellen perme-
abilisiert werden oder das BrUTP muss mikroinjiziert
werden. Zum anderen wurde anstelle des Nukleotid-
analogs BrUTP sein Nukleosidanalog BrU verwendet
oder Liposom-basierende Transfektionsvektoren als
Transportvehikel eingesetzt.
Abbildung A zeigt den Nachweis von RNA Synthese-
orten am Ultradünnschnitt kultivierter menschlicher
Blasenkarzinomzellen durch Immungoldmarkierung.
Die Zellen wurden mit BrUTP mikroinjiziert und nach
20 Minuten fixiert. Immungoldmarkierung fand sich zu
diesem Zeitpunkt im Perichromatin entlang der Peri-
pherie von kondensiertem Chromatin (C). Im Nuk-
leolus (Nu) war die Immungoldmarkierung hauptsäch-
lich mit der dichten fibrillären Komponente assoziiert
und stellt vermutlich neu synthetisierte Prä-rRNA dar.
Abbildung B zeigt einen Kernausschnitt von Zellen,
die nur 10 Minuten nach der Mikroinjektion von
BrUTP fixiert wurden. Mittels Doppelmarkierung
wurde an den Ultradünnschnitten sowohl neu syn-
thetisierte RNA (6 nm Goldpartikeln) als auch hnRNA-
Komplexe (15 nm Goldpartikeln) nachgewiesen.
Oftmals sind sowohl kleine als auch große Gold-
partikeln mit Perichromatingranula (Pfeilköpfe) assozi-
iert, die sowohl frisch synthetisierte Prä-mRNA als auch
Faktoren zur RNA-Prozessierung enthalten. Die Inter-
Der Zellkern
chromatingranula sind nicht markiert. In ihnen finden
spätere Prozessierungsschritte wie das Spleißen der Prä-
mRNA statt.
Mittels Immungoldmarkierungen ergaben sich in
solchen Experimenten Hinweise darauf, dass die dichte
fibrilläre Komponente des Nukleolus ein Ort der Prä-
rRNA Transkription und früher Prozessierungschritte
der Prä-rRNA ist. Andererseits stellen die Perichroma-
tinfibrillen in situ morphologisch Prä-mRNA
Transkripte dar, in denen der Großteil der Prä-mRNA
Prozessierung stattfindet.
IG: Interchromatingranula.
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Thiry M (1999) Ultrastructural methods for nucleic acid detec-
tion by immunocytology. Progr Histochem Cytochem 34: 93
Verheggen C, Le Panse S, Almouzni G, and Hernandez-Verdun D
(1998) Presence of pre-rRNAs before activation of polymerase I
transcription in the building process of nucleoli during early
development of Xenopus laevis. J Cell Biol 142: 1167
Vergrößerung: x 32,000 (A); x 122,000 (B)
Abbildung 7 15

Nu

C C

IG

B
16
DIE KERNPORENKOMPLEXE
Die Kernporen, die die Kernhülle durchsetzen, stellen
komplexe makromolekulare Strukturen mit einer unge-
fähren Masse von 125 MDa dar. Im Durchschnitt finden
sich 4000 pro Zellkern. Ihre Zahl variiert in Abhängig-
keit von der Aktivität der Zelle. Die Kernporen vermit-
teln den bidirektionalen Transport zwischen dem
Karyoplasma und dem Zytoplasma.
Abbildung A zeigt einen Gefrierbruch durch große
Anteile eines Zellkerns und des angrenzenden Zyto-
plasmas, der die innere und äußere Kernmembran und
zahlreiche Kernporen freigelegt hat. In Abbildung B sind
isolierte, detergenzextrahierte Kernporenkomplexe mit-
tels Kryo-Elektronenmikroskopie im hydratisiert-
gefrorenen Zustand gezeigt. In der Frontansicht weisen
sie eine typische, aus acht peripheren und einem zen-
tralen Partikel bestehende Komposition auf.
Die dreidimensionale Struktur der Kernporen-
komplexe konnte mit hochauflösender Elektronen-
mikroskopie rekonstruiert werden (siehe Diagramm).
Die Grundstruktur ist ein zylindrischer dreiteiliger
Kanal von etwa 125 nm Durchmesser. Er besteht aus
einem in die Kernhülle eingebetteten großen luminalen
Ring, der sowohl zytoplasma- als auch karyoplasma-
seitig von einem Ringwulst begrenzt wird. Der tonnen-
förmige luminale Ring ist aus acht Speichen aufgebaut,
die sich in das Lumen vorwölben und die charakteris-
tische achtfache Achsensymmetrie begründen. Der
Speichenkomplex hat aufgrund von Messungen mit
Rastertransmissionselektronenmikroskopie eine Masse
von 52 MDa. Zwischen den Speichen liegen Kanäle von
etwa 10 nm Durchmesser, durch die Ionen und kleine
Proteine () 60 kDa) diffundieren können. Der Transport
größerer Partikeln (RNA, RNP und * 60 kDa Proteine)
durch die Kernporen erfolgt über aktiven, energieab-
hängigen Transport durch spezifische Rezeptorproteine.
In der Kernporenmitte sitzt in der Regel ein Zentrum-
partikel, das offenbar Transportfunktionen innehat.
Unter Verwendung unterschiedlich großer Goldpar-
tikeln, die mit nukleären Importsignalen enthaltenden
Zytoplasmatischer
Ring
Peripherer Kanal
Zentrale Pore
Luminale Domäne
Zentraler Pfropfen
Nukleärer Ring
Der Zellkern
Peptiden überzogen waren, konnte die maximale
Partikelgröße für den Transport durch Kernporen mit
etwa 26 nm bestimmt werden. Solche Experimente
haben auch die Flexibilität der Kernporengestalt
aufgezeigt.
Vom zytoplasmatischen Ringwulst erstrecken sich
acht Filamente in das Zytoplasma. Die acht Filamente
des karyoplasmatischen Ringwulsts laufen in eine
korbförmige, von einem Ring begrenzte Struktur
zusammen, die wie eine Iris funktioniert (siehe Abb. 9).
Viele die Kernporen aufbauende Proteine (Nukleo-
porine) sind Glykoproteine, die O-glykosidisch an Serin
oder Threonin gebundenes N-Azetylglukosamin
besitzen. In Abbildung C ist O-glykosidisch gebundenes
N-Azetylglukosamin in den Kernporen mit einer
Goldmarkierungstechnik nachgewiesen. Die Markie-
rung ist besonders eindrücklich in tangential angeschnit-
tenen Kernporen (Pfeilköpfe). Diese Glykosilierung
wurde auch an anderen Proteinen gefunden, wie
beispielweise der katalytischen Untereinheit der RNA-
Polymerase-II und verschiedenen Transkriptions-
faktoren. Offenbar handelt es sich um eine regulative
posttranslationale Modifikation, die alternierend mit
O-Phosphorylierung Eiweißfunktionen moduliert.
Literatur
Adam SA (1999) Transport pathways of macromolecules between
the nucleus and the cytoplasm. Curr Opin Cell Biol 11: 402
Akey C, and Rademacher M (1993) Architecture of the Xenopus
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Nature 403: 835
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Hart G W (1997) Dynamic O-linked glycosylation of nuclear and
cytoskeletal proteins. Annu Rev Biochem 66: 315
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specific premessenger ribonucleoprotein particle through the
nuclear pore studied with electron microscope tomography. Cell
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to distinct nucleopore regions during their nuclear import.
Science 273: 1729
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the nucleus. Trends Biochem Sci 23: 185
Wells L, Whalen SA, and Hart GW (2003) O-GlcNAc: a regulato-
ry post-translational modification. Biochem Biophys Res
Commun 302: 435
Vergrößerung: x 30,000 (A); x 121,000 (B); x 17,000 (C)
Abbildung 8 17

innere
Kernmembran
äussere

Kernporen

B C
18
DARSTELLUNG VON STRUKTURVERÄNDERUNGEN DER KERNPORENKOMPLEXE DURCH
ZEITRAFFER ATOMKRAFTMIKROSKOPIE
Die Atomkraftmikroskopie ist einzigartig, da sie
Untersuchungen an nativen Makromolekülen unter fast
physiologischen Bedingungen mit hoher Auflösung
ermöglicht. Abgesehen von statischen Strukturanalysen
können Strukturveränderungen auf Stimuli hin oder
das Wachstum von Fibrillen und seine Kinetik (siehe
Abb. 131) im Zeitrafferverfahren analysiert werden. Im
Folgenden wird die Anwendung zum Nachweis
Kalzium-induzierter Veränderungen an nativen Kern-
porenkompexen illustriert.
Isolierte native Kernhüllen von Xenopus Eizellen sind
sowohl von ihrer zytoplasmatischen (Abb. A) als auch
von ihrer karyoplasmatischen Seite (Abb. B) abgebildet
und unterscheiden sich strukturell eindeutig. Die
zytoplasmatische Oberfläche der Kernporenkomplexe
erscheint Doughnut-artig (Abb. A und C), während die
karyoplasmatische Oberfläche eine kuppelförmige
Gestalt (Abb. B und D) aufweist. Bei starker
Vergrößerung wird auch die achtfache Achsen-
symmetrie einzelner Kernporenkomplexe sichtbar
(Nebenbild in A). Für eine quantitative Strukturanalyse
wurden zahlreiche aufeinander ausgerichtete Kern-
porenkomplexe gemittelt und ihre radialen Höhen-
profile berechnet (Abb. C und D).
Kalzium-induzierte Veränderungen an der
karyoplasmatischen Oberfläche von Kernporen wurden
mit dem Zeitrafferverfahren analysiert. Drei gleiche
Kernporenkomplexe sind mit Pfeilköpfen markiert. In
der Abwesenheit von Kalzium sind sie geschlossen (Abb.
E), während sie durch mikromolare Kalzium-
konzentrationen geöffnet werden (Abb. F). Diese kon-
formationellen Strukturveränderungen konnten über
die Berechnung der radialen Höhenprofile zahlreicher
aufeinander ausgerichteter und gemittelter Kernporen-
komplexe quantifiziert werden (Abb. G und H).
Hierüber konnte gezeigt werden, dass die von den acht
Filamenten des karyoplasmatischen Ringwulsts gebil-
dete Iris-artige Blende sich öffnen und schließen kann.
In Anwesenheit von mikromolaren Kalziumkon-
Der Zellkern
zentrationen bildet sich eine 20 bis 30 nm große Öff-
nung, ohne dass sich dadurch die Höhe des Ringwulsts
ändert. Diese Strukturveränderungen sind im Dia-
gramm schematisch dargestellt, das gleichzeitig die
dreidimensionale Struktur eines Kernporenkomplexes
zeigt.
- Ca2+ + Ca2+
Literatur
Binnig G, Quate CF, and Gerber C (1986) Atomic force micro-
scope. Physical Rev Letters 56: 930
Oberleithner H, Schneider S, and Bustamante JO (1996) Atomic
force microscopy visualizes ATP-dependent dissociation of mul-
timeric TATA-binding protein before translocation into the cell
nucleus. Pflügers Arch 432: 839
Perez-Terzic C, Gacy AM, Bortolon R, Dzeja PP, Puceat M,
Jaconi M, Prendergast FG, and Terzic A (1999) Structural plastic-
ity of the cardiac nuclear pore complex in response to regulators
of nuclear import. Circ Res 84: 1292
Perez-Terzic C, Pyle J, Jaconi M, Stehno-Bittel L, and Clapham DE
(1996) Conformational states of the nuclear pore complex
induced by depletion of nuclear Ca2+ stores. Science 273: 1875
Ryan KJ, and Wente SR (2000) The nuclear pore complex: a pro-
tein machine bridging the nucleus and cytoplasm. Curr Opin Cell
Biol 12: 361
Stolz M, Stoffler D, Aebi U, and Goldsbury C (2000) Monitoring
biomolecular interactions by time-lapse atomic force microscopy.
J Struct Biol 131: 171
Wang H, and Clapham DE (1999) Conformational changes of the
in situ nuclear pore complex. Biophys J 77: 241
Vergrößerung: x 75,000 (A, B); x 150,000 (oberes Nebenbild in A
and B); x 100,000 (unteres Nebenbild in A); x 150,000 (E, F)
Abbildung 9 19

1 2
zytoplasmatisch 8 nukleär
3
7
6 5 4

8 1 2
7 3
6 5 4

A B

70nm

35nm

100nm 100nm
C D

- Ca2+ + Ca2+

E F

70nm 70nm

100nm 100nm
G H
20
MITOSE UND ZELLTEILUNG
Für die Histogenese und Organogenese, die Gewebser-
neuerung und Aufrechterhaltung der Lebensfunktion
der Organe ist die Produktion neuer Zellen durch
Zellteilung, ebenso wie die programmierte Eliminie-
rung von Zellen unbedingt notwendig. Im Ablauf der
Zellteilung dient die Mitose dazu, alle Teile des Genoms
erbgleich auf die Tochterzellen zu verteilen. Hand in
Hand gehend mit den Vorgängen im Verlauf der 4 gut
charakterisierten Mitosephasen, der Prophase, Meta-
phase (Abb. A und B), Anaphase und Telophase, findet
eine Reorganisation des Zytoplasmas statt, die zur
eigentlichen Teilung der Zelle (Zytokinese) führt.
Nach der DNA-Replikation in der vorhergehenden
S-Phase des Zellzyklus besteht jedes Chromosom aus
zwei identen Chromatiden, die in der Zentromerregion
zusammenhängen. Zwei Proteinkomplexe, der Cohesin-
und der Condensinkomplex, sind maßgeblich für den
Zusammenhalt der Chromosomen und die Chromatin-
kondensation, die zur typischen Fadenform der
Chromosomen als Transportstrukturen während der
Mitose führen. Ausgehend von den Zentriolen wird der
Mitosespindelapparat aus Mikrotubuli und assoziierten
Proteinen aufgebaut. Nach Fragmentierung der
Kernhülle in der Prophase, setzen Mikrotubuli am
Kinetochor in der Zentromerregion der Chromosomen
an und die Chromosomen werden in der Äquatorial-
ebene der Zelle aufgereiht. Cohesin ist für die
Orientierung der Chromosomen notwendig. Am Über-
gang von der Meta- zur Anaphase leitet der Abbau des
Cohesinkomplexes die Trennung der Chromatiden ein,
die in der Folge zu den gegenüberliegenden Polen der
Zelle transportiert und in den sich wieder aufbauenden
Kernen der Tochterzellen organisiert werden. Die
Kernhülle wird Hand in Hand gehend mit der Chroma-
tindekondensation und Organisation der Chromo-
somenterritorien wieder aufgebaut. Ein kontraktiler
Aktin-Myosinring entsteht in der Äquatorialregion der
sich verlängernden Zelle und bewirkt ihre zunehmende
Einschnürung, die in der Folge zur eigentlichen Zell-
teilung führt.
Die beiden Abbildungen zeigen unterschiedlich
differenzierte hämatopoetische Zellen aus dem mensch-
lichen Knochenmark in der Metaphase. Der sich in
Teilung befindliche eosinophile Myelozyt in Abb. A
enthält bereits zahlreiche spezifische eosinophile
Granula, während die hämatopoetische Zelle in Abb. B
sich in einem sehr frühen Differenzierungstadium
Der Zellkern
befindet. Das dicht gepackte kondensierte Chromatin
(C) dominiert in beiden Zellen, Nukleolen und andere
nukleäre Körperchen und Funktionsdomänen sind
während der Zellteilung nicht erkennbar. In Abb. B ist
die Zentromerregion eines Chromosoms angeschnitten
(Pfeile). Die Kernhülle ist nicht mehr vorhanden. Der
ursprüngliche Kernraum befindet sich mit dem
Zytoplasma in einem gemeinsamen Kompartiment,
dem Mixoplasma. Die Fragmentierung der Kernhülle ist
eng verbunden mit der Auflösung der Kernlamina
(siehe Abb. 3). Mikrotubuli und Dynein sind wichtig für
die Entwicklung von Zugkräften, die dazu führen, dass
sich in den initialen Stadien der Ablösung Löcher in den
Membranen der Kernhülle bilden.
Die beiden Abbildungen zeigen, dass das endoplas-
matische Retikulum nach wie vor gut organisiert, doch
der Golgi Apparat nicht sichtbar ist. In Säugetierzellen
„verschwindet“ der Golgi Apparat Hand in Hand
gehend mit dem Eintritt in die Mitose und wird in der
Telophase im Bereich der zukünftigen Tochterzellen
wieder aufgebaut. Sein Schicksal während der Mitose
und Details der daran beteiligten Mechanismen stehen
im Mittelpunkt des Interesses. Es werden hauptsächlich
zwei Modelle diskutiert, die einerseits das Bestehen-
bleiben von Golgi Apparat Material während der Mitose
in Form von Schablonen und andererseits ein kom-
plettes „Eintauchen“ des Golgi Apparats in das endo-
plasmatischen Retikulum und die post-mitotische Neu-
bildung ausschließlich aus dem ER heraus favorisieren.
Andere Befunde weisen darauf hin, dass die Golgi
Apparat-Auflösung nicht nur eine Begleiterscheinung
der Mitose ist, sondern auch als ein die Mitose voraus-
setzender Prozess eine wichtige Rolle spielt.
Literatur
Beaudouin J, Gerlich D, Daigle N, Eils R, and Ellenberg J
(2002) Nuclear envelope breakdown proceeds by
microtubule-induced tearing of the lamina. Cell 108: 83
Lavoie BD, Hogan E, and Koshland D (2002) In vivo dissection
of the chromosome condensation machinery: reversibility of
condensation distinguishes contributions of condensin and
cohesin. J Cell Biol 156: 805
Rabouille C, and Jokitalo E (2003) Golgi apparatus par-
titioning during cell division (Review). Mol Membr Biol 20:
117
Tanaka TU (2002) Bi-orienting chromosomes on the mitotic
spindle. Curr Opin Cell Biol 14: 365
Vergrößerung: x 10,300 (A), x 13,500 (B)
Abbildung 10 21

B
22
APOPTOSE
Für die normale Entwicklung und Funktion der Gewebe
und Organe ist nicht nur Zellvermehrung durch
Zellteilung, sondern auch die kontrollierte Eliminierung
von Zellen durch programmierten Zelltod unbedingt
notwendig. Apoptose ist eine physiologisch ablaufende
Form des programmierten Zelltods (Typ I) und wird von
mehrzelligen Organismen eingesetzt, um „ungewollte“
Zellen, überschüssige und nicht notwendige, beschädigte,
überalterte und gefährliche Zellen auszuschalten. Eine
Störung des normalen Ablaufs der Apoptose kann zu
krankhaften Zuständen führen. Im Gegensatz zur
Nekrose, die nach irreversibler Schädigung von Zellen zu
ihrem Absterben führt, läuft die Apoptose entsprechend
einem genetisch determinierten Programm ab und ist ein
aktiver Prozess, der über externe Signale oder Ereignisse
innerhalb der Zellen, zum Beispiel DNA-Schädigung oder
irreparable Organellenschädigung durch zellulären Stress
initiiert wird. Beide Wege, über die Apoptose ausgelöst
und reguliert wird, der Weg über „Todesrezeptoren“ an
der Zelloberfläche und der mitochondriale Weg, führen zu
einer Aktivierung spezieller Proteasen, der Caspasen (cys-
teine aspartic acid-specific proteases). Eine Kaskade von
Caspase-gesteuerten Prozessen führt zu dramatischen
Zellveränderungen, die für das typische morphologische
Apoptose-Bild der Zellen verantwortlich sind. Die Zellen
verlieren ihre Plasmamembranasymmetrie und die
speziellen Oberflächendifferenzierungen und werden
kugelförmig. DNA-Fragmenierung führt zur
Chromatinhyperkondensation. In „explosionsartigen“
Vorgängen werden Teile der Zelle als Apoptosekörperchen
abgeschnürt; diese werden dann von Zellen in der
Umgebung phagozytiert und auf diese Weise eliminiert.
Abbildung A zeigt typisch aussehende abgerundete
Apoptosekörperchen aus menschlichen Lymphozyten.
Sie enthalten Kern und Organellenreste. Hyper-
kondensiertes Chromatin (Sternchen) ist in zahlreichen
Kernfragmenten enthalten und zeigt oft typische Halb-
mondform, die durch die Lokalisation in der Peripherie
des Kernraums zustande kommt (rechts in Abb. A)
In einer anderen Form des programmierten Zelltods
(Typ II) ist Autophagie wesentlich beteiligt. Noch vor
der Zerlegung des Kerns werden zytoplasmatische
Bestandteile abgebaut. Es besteht eine enge Beziehung
zwischen Apoptose und der autophagischen Form des
programmierten Zelltods. Beide Formen können
eventuell auch simultan auftreten.
Literatur
Abraham MC, and Shaham, S (2004) Death without caspases,
caspases without death. Trends Cell Biol 14: 184
Bursch W, Ellinger A, Gerner Ch, and Schulte-Hermann R (2003)
Der Zellkern
Caspase-independent and autophygic cell death. In: When cells
die (Lockshin R, Zakeri Z, and Tilly JL, eds). New York Chichester
Weinheim Brisbane Singapore Tokyo: Wiley-Liss
Cohen I, Castedo M, and Kroemer G (2002) Tantalizing
Thanatos: unexspected links in death pathways. Trends Cell Biol
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Cuervo AM (2004) Autophagy: in sickness and in health. Trends
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Machamer, CE (2003) Golgi disassembly in apoptosis: cause or
effect? Trends Cell Biol 13: 279
Penninger JM, and Kroemer G (2003) Mitochondria, AIF and
caspases – rivalling for cell death execution. Nat Cell Biol 5: 97
Zhang J, and Xu M (2002) Apoptotic DNA fragmentation and tis-
sue homeostasis. Trends Cell Biol 12: 84
VIRALE EINSCHLÜSSE
Viren verursachen eine Vielzahl akuter Infektionen,
die häufig im Gefolge von angeborenen oder erworbe-
nen Formen von Immunschwäche auftreten. Einzelne
Viruspartikel können wegen ihrer Größe von 20-300 nm
nur mit dem Elektronenmikroskop nachgewiesen wer-
den. Viren können Einschlusskörper im Zellkern
und/oder im Zytoplasma der infizierten Zellen bilden.
Solche Virusaggregate sind dann auch licht-
mikroskopisch sichtbar. Polyoma Viren sind ubiquitär
vorkommende Viren, die häufig in den
Tubulusepithelien transplantierter Nieren beobachtet
werden. Die Abbildungen B und C stammen von einer
solchen Nierenbiopsie. Die sphärischen Viruspartikel
mit einem Durchmesser von 30-45 nm bilden Aggregate
mit parakristalliner Anordnung im Zellkern (Abb. B)
und im Zytoplasma (Abb. C). Die parakristalline
Anordnung ist bei stärkerer Vergrößerung im Nebenbild
zu Abbildung B gut erkennbar. Solche nukleären viralen
Einschlüsse können vom Nukleolus (Nu in Abb. B) ein-
deutig unterschieden werden. Das Zytomegalievirus,
welches zur Familie der Herpesviren gehört, verursacht
ebenfalls nukleo-zytoplasmatische Einschlüsse in ver-
schiedenen Organen (Lunge, Niere, Pankreas, etc.).
Typischerweise treten Infektionen mit Zytomegalieviren
bei immunsupprimierten Patienten nach Organtrans-
plantation oder bei AIDS Erkrankten auf.
Literatur
Colvin RB (1998) Renal transplant pathology. In: Heptinstall’s
pathology of the kidney (Jenette J, Olson J, and Schwartz M, eds).
Philadelphia: Lippincott-Raven, pp 1409
Vergrößerung: x 6,800 (A), x 10,000 (B), 10,000 (C), x 32,000
(Nebenbild)
Abbildung 11 23

Viruseinschlüsse

Nukleus Zytoplasmatische
Viruseinschlüsse
N
Nu

B C
24
DER SEKRETORISCHE APPARAT EXOKRINER PANKREASZELLEN
Die klassischen Untersuchungen zur Eiweißsekretion
von Nobelpreisträger George Palade und seinen
Mitarbeitern wurden am exokrinen Pankreas durch-
geführt. Die nebenstehende Abbildung zeigt bei
schwacher Vergrößerung seröse azinäre Zellen des
Pankreas und Immungoldmarkierung für ihr Haupt-
sekretionsprodukt, das Verdauungsenzym Amylase.
Diese Abbildung vermittelt einen allgemeinen Eindruck
über die Feinstruktur der verschiedenen Elemente des
sekretorischen Apparats einer hochspezialisierten
sekretorischen Zelle, die in den folgenden Abbildungen
detailliert illustriert und besprochen werden. Der hier
gezeigte immunelektronenmikroskopische Nachweis
eines intrazellulären Antigens am Ultradünnschnitt von
Geweben konnte durch die Verwendung von Gold-
partikeln als elektronendichter Marker entscheidend
verbessert werden. Die zum Amylasenachweis ver-
wendete zweistufige Protein A-Gold Technik ist im
Schema dargestellt.
Mehrere seröse Zellen bilden einen Azinus, der die
prinzipielle Struktur-Funktionseinheit von Verdauungs-
drüsen, wie des Pankreas, darstellt (siehe auch Abb. 1
und 87).
Protein A-Gold
Antikörper
Antigene
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Das raue endoplasmatische Retikulum (RER) ist in
sekretorischen Zellen besonders stark ausgeprägt und
füllt das basale und juxtanukleäre Zytoplasma fast voll-
ständig aus. Es stellt das erste Strukturelement des sek-
retorischen Apparats dar, der auch als Endomem-
branensystem bezeichnet wird, und weist eine deutliche
Immungoldmarkierung (schwarze Pünktchen) für
Amylase auf. Eine weitere Hauptorganelle ist der üb-
licherweise supranukleär gelegene Golgi Apparat, der
eine durchgehende Markierung für Amylase aufweist.
Die zwischen dem RER und dem Golgi Apparat
gelegenen Prä-Golgi Transportintermediäre sind bei
der schwachen Vergrößerung nicht zu erkennen. Im
supranukleären Zytoplasma finden sich zahlreiche
membranbegrenzte Sekretgranula, die aufgrund ihres
Proenzymgehalts Zymogengranula (ZG) genannt
werden. Erwartungsgemäß sind sie deutlich positiv für
Amylase.
AL: Azinuslumen; M: Mitochondrien.
Literatur
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Basel: Karger
Palade G (1975) Intracellular aspects of the process of protein
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tion of intracellular antigens by the use of protein A-gold com-
plex. J Histochem Cytochem 26: 1074
Steer C, and Hanover J (1991) Intracellular trafficking of proteins.
Cambridge: Cambridge University Press
Vergrößerung: x 15,500
Abbildung 12 25

ZG

AL
Nukleus

ZG
ZG

Nukleus
Golgi

RER
Nukleus

RER
26
RIBOSOMEN, RAUES ENDOPLASMATISCHES RETIKULUM
Ribosomen sind komplexe, sich aus zwei Untereinheiten
zusammensetzende, Ribonukleoproteinpartikel. Als die
zellulären Maschinerien für die Proteinsynthese er-
möglichen sie Basenpaarung zwischen den Kodons
einer Messenger-RNA (mRNA) und den Antikodons
von Transfer-RNAs (tRNA), sodass die Synthese eines
Polypeptids mit einer bestimmten Aminosäuresequenz
entsprechend der Vorgabe durch die Abfolge der
Basenpaare in der mRNA erfolgen kann.
Beide Untereinheiten, die kleine 40S und die große
60S Untereinheit, werden im Nukleolus vorgebildet. Im
Diagramm nach Olson et al (2002) sind die wichtigsten
Schritte der Ribosomenbildung in eukaryoten Zellen
zusammengefasst.
Nukleus
NPC
rDNA
Prä-rRNA
snoRNA
Nukleolus
18S 28S, 5.8S
Nichtribosomale 5S
Proteine
Ribosomale Nmd3
Proteine
Crm1
Zytoplasma 60S
40S
Die ersten Transkripte der prä-ribosomalen RNA
(Prä-rRNA), die in der ribosomalen DNA (rDNA)
kodiert sind, werden während und nach der Trans-
kription an kleine nukleoläre RNAs (snoRNAs) und
nicht-ribososmale Proteine gebunden, modifiziert und
in 18S, 28S und 5.8S rRNAs zerlegt. Zusammen
mit ribosomalen Proteinen und der außerhalb des
Nukleolus synthetisierten 5S rRNA assemblieren sie zu
den Ribosomen Untereinheiten. Die kleinen und
großen Untereinheiten werden getrennt aus dem
Zellkern exportiert. Ribosomen existieren als eigen-
ständige Partikel nur während der Proteinsynthese. Die
40S and 60S Untereinheiten befinden sich in einem
gemeinsamen zytoplasmatischen Pool und setzen sich
erst in der Initiationsphase der Proteinsynthese zum
Ribosom zusammen. NPC: Kernporenkomplex, Nmd3
Das Zytoplasma: das sekretorische System
und Crm1: Adaptorprotein und Exportfaktor für die
große Untereinheit.
In den Polysomen sind mehrere Ribosomen an einer
mRNA aktiv und produzieren gleichzeitig mehrere
Kopien desselben Proteins. Abhängig davon, welche
Klasse von Proteinen synthetisiert wird, sind Riboso-
men an die Membran des rauen endoplasmatischen
Retikulums (RER) gebunden oder nicht („gebundene
Ribosomen“ vs. „freie Ribosomen“). Das Andocken an
die Membran des RER ist ein rezeptorgesteuerter
Prozess über ein Signalpeptid und das zytoplasmatische
Signalpeptiderkennungspartikel.
Abbildungen A und B zeigen Ausschnitte aus
sekretorisch sehr aktiven Zellen. Das basale Zytoplasma
der Pankreasazinuszelle in Abb. A enthält dicht gepackt
flache RER-Zisternen, die gemeinsam ein Kompar-
timent bilden, das als Ergastoplasma („arbeitsreiches
Plasma“) bezeichnet wird. Die Membran ist mit Ribo-
somen dicht besetzt (Pfeilköpfe in Abb. A) und das
Lumen, in das die neu synthetisierten sekretorischen
Proteine abgegeben werden, enthält fein filamentöses
Material. Polysomen erscheinen im Flachschnitt wie
einfache oder Doppelreihen von Perlen (Pfeilköpfe in
Abb. B) oder als schlangenförmige Strukturen (Pfeile in B).
An RER-gebundenen Ribosomen werden neben
sekretorischen Proteinen auch die luminalen und
Membranproteine des gesamten sekretorischen Systems
gebildet, ebenso die lysosomalen Enzyme und die
integrierten und nach außen orientierten Plasma-
membranproteine. Im Gegensatz dazu binden Ribo-
somen, an denen Proteine, die an der zytoplasmatischen
Seite der Membranen sitzen, nicht an das RER. An
solchen „freien“ Ribosomen werden auch die Zytoske-
lettproteine, die Proteine für den Zellkern, die peroxi-
somalen Proteine und ein Teil der mitochondrialen
Proteine synthetisiert.
Literatur
Baumann O, and Walz B (2001) Endoplasmic reticulum of
animal cells and its organization into structural and functional
domains. Int Rev Cytol 205: 149
Nikonov AV, Snapp E, Lippincott-Schwartz J, and Kreibich G
(2002) Active translocon complexes labeled with GFP-Dad1
diffuse slowly as large polysome arrays in the endoplasmic
reticulum. J Cell Biol 158: 497
Olson MOJ, Hingorani K, and Szeneni A (2002) Conventional
and nonconventional roles of the nucleolus. Int Rev Cytol 219:
199
Vergrößerung: x 52,000 (A), x 46,000 (B)
Abbildung 13 27

zisternales Lumen

B
28
DIE KERNHÜLLE UND DAS RAUE ENDOPLASMATISCHE RETIKULUM
Die Kernhülle besteht aus der inneren und äußeren
Kernmembran, die ein Lumen, die perinukleäre
Zisterne, begrenzen. Die äußere Kernmembran steht
lokal in direkter Verbindung zum rauen endo-
plasmatischen Retikulum (RER). Somit besteht eine
räumlich begrenzte luminale Kontinuität zwischen der
Kernhülle und dem rauen endoplasmatischen
Retikulum (Klammern in Abb. A). Die äußere
Kernmembran ist mit Ribosomen besetzt und ist somit
ein Teil des rauen endoplasmatischen Retikulums und
in die Proteinsynthese einbezogen. Offensichtlich finden
in der perinukleären Zisterne auch posttranslationelle
Glykoproteinmodifikationen statt, da sich hier
Oligosaccharid-trimmende Glykosidasen nachweisen
lassen (siehe Abb. 16).
Obwohl eine luminale Kontinuität zwischen der
Kernhülle und dem rauen endoplasmatischen Reti-
kulum besteht, existieren lokale funktionelle Domänen
in diesem offenen Netzwerk von Zisternen. Die
Verteilung des Apomuzins in den mukösen Zellen der
Submandibulardrüse ist ein Beispiel hierfür, wie in den
nebenstehenden Abbildungen gezeigt. Das Apomuzin
stellt das Hauptsekretionsprodukt dieser Zellen dar.
Durch Immungoldmarkierung ist es im Lumen des
rauen endoplasmatischen Retikulums nachweisbar, aber
nicht in der perinukleären Zisterne, obwohl die Lumina
beider kontinuierlich sind. Zum anderen ist die Immun-
goldmarkierung für Apomuzin im Lumen der Zisternen
des rauen endoplasmatischen Retikulums eindeutig
heterogen. Im Verlauf einzelner Zisternen lassen sich
intensiv markierte und nicht markierte Abschnitte
unterscheiden (Striche in Abb. B). Diese Befunde, die
auch in Untersuchungen an ultradünnen Serien-
schnitten bestätigt werden konnten, sind ein eindrück-
liches Beispiel für die Segregation eines löslichen
sekretorischen Glykoproteins im Lumen eines konti-
nuierlichen Netzwerks, wie es das raue endoplas-
matische Retikulums darstellt. Es ist gegenwärtig unbe-
kannt, wie solche funktionellen Domänen im rauen
das Zytoplasma: Das sekretorische System
endoplasmatischen Retikulum zustande kommen und
aufrechterhalten werden. Eine Hypothese besagt, dass
das endoplasmatische Retikulum selber zur Lokali-
sierung von mRNA beiträgt und diese dann langfristig
mit bestimmten membrangebundenen Polysomen ver-
bunden bleibt. Auf diese Weise würde die Synthese eines
bestimmten Eiweißes nur an diesem Ort stattfinden,
d. h. kompartmentalisiert sein.
Literatur
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Vergrößerung: x 98,000 (A); x 38,500 (B)
Abbildung 14 29

Kernhülle

RER

Nukleus

RER

Kernhülle

B
30
DAS RAUE ENDOPLASMATISCHE RETIKULUM: ORT DER EIWEISSTRANSLOKATION UND DES
BEGINNS DER EIWEISS N-GLYKOSILIERUNG
Die Membranen des endoplasmatischen Retikulums
(ER) sind Orte des kotranslationellen vektoriellen
Transfers de novo synthetisierter Eiweiße vom Zytosol in
sein Lumen und der Lipidbiosynthese. Während und
nach abgeschlossener Translokation finden Modifika-
tionen an den Eiweißen statt.
Im Gegensatz zu den löslichen luminalen Proteinen
werden die Membranproteine nur partiell transloziert
und sind in der Membran des rauen ER (RER) ver-
ankert, um dort entweder als residenzielle Proteine zu
verbleiben oder an andere Orte in der Zelle exportiert
zu werden. Die Translokation der Eiweiße erfolgt über
das Translokon (auch Sec61-Komplex genannt), eine
komplizierte, modular aufgebaute Eiweißmaschinerie.
Das Translokon ist auch für die Retrotranslokation
nicht korrekt gefalteter Eiweiße in das Zytosol wichtig.
Seine Hauptkomponenten stellen das heterotrimere
Sec61 Protein, TRAM (translocation associated mem-
brane protein) und TRAP (translocon associated pro-
tein) dar. Mit Immungoldmarkierung kann das Sec61-
Protein sowohl in der äußeren Kernhülle als auch im
RER nachgewiesen werden, wie am Beispiel von
Hepatozyten der Rattenleber in Abbildung A gezeigt
wird. Seine Struktur und Funktion sind phylogenetisch
hoch konserviert, wie anhand von Untersuchungen an
prokaryotischen und eukaryotischen Organismen
gezeigt werden konnte. Hochauflösende elektronen-
mikroskopische Analysen des Translokons haben eine
Doughnut-artige Struktur mit einer zentralen hydro-
philen Pore als hervorstechendes Strukturmerkmal
aufgedeckt. Der Porendurchmesser beträgt 40-60 Å,
wenn ein Ribosom an das Translokon gebunden ist,
ansonsten beträgt er 9-15 Å. Der Ribosomentunnel und
die Translokonpore sind koaxial aufeinander aus-
gerichtet.
Bedeutende Translokon-assoziierte Proteine sind
aufgrund ihrer Funktion die Oligosaccharyltransferase
und die Signalpeptidase. Die Oligosaccharyltransferase
stellt einen phylogenetisch ebenfalls hoch konservierten,
aus etwa neun Untereinheiten aufgebauten he-
terooligomeren Eiweißkomplex dar. Sie vermittelt den
en bloc Transfer eines Lipid-verknüpften vorgefertigten
Oligosaccharids (Glukose3Mannose9N-Azetylglukosa-
min2-Dolichol Diphosphat) auf bestimmte Asparagin-
reste naszenter Polypeptide. Als Glykosilierungssequenz
Das Zytoplasma: das sekretorische System
fungiert das Tripeptid Asn-X-Ser/Thre (X kann mit
Ausnahme von Prolin jede Aminosäure sein). Der
Oligosaccharidtransfer geschieht ausschließlich an der
luminalen Seite der ER Membran und stellt den ersten
Schritt bei der N-Glykosilierung von Eiweißen dar, die
nicht nur eine hoch konservierte, sondern auch funk-
tionell bedeutsame Eiweißmodifikation ist. Die
Asparagin-verknüpften Oligosaccharide (N-Glykane)
können mit dem pflanzlichen Lektin Concanavalin A
(Con A) aufgrund seiner Spezifität für Glukose- und
Mannosereste nachgewiesen werden. In den
Abbildungen B und C ist eine Con A-Goldmarkierung
über dem rauen (RER) und glatten ER (SER) und glyko-
genhaltigen Teilen des Zytoplasmas von Hepatozyten
der Rattenleber gezeigt. Lektin-Goldmarkierungen kön-
nen an Ultradünnschnitten Lowicryl-eingebetteter
Gewebe (Abb. B und C) oder ultradünnen Gefrier-
schnitten ausgeführt werden.
GK: Gallekapillare; M: Mitochondrium.
Literatur
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Vergrößerung: x 71,500 (A); x 11,000 (B); x 35,500 (C)
Abbildung 15 31

Sec61p

Nukleus
M

Con A GK

SER
Sinus

RER
B

Con A

RER SER

C
32 Das Zytoplasma: das sekretorische System

TRIMMEN DER OLIGOSACCHARIDE, REGLUKOSILIERUNG UND EIWEISSQUALITÄTSKONTROLLE

IM ENDOPLASMATISCHEN RETIKULUM

Die Asparagin-verknüpften Oligosaccharide (N-Gly-
kane) von Glykoproteinen werden im endoplasmati-
schen Retikulum (ER) über das sogenannte Trimmen
modifiziert. Dabei werden alle drei Glukosereste durch
die Glukosidase I (Gls I) und Glukosidase II (Gls II) und
einige Mannosereste über die ER-Mannosidase I (ER
Man I) und ER-Mannosidase II (ER Man II) entfernt,
wie im Schema illustriert. Das Trimmen und daraus
resultierende spezifische Oligosaccharide sind wichtig
für die Eiweißqualitätskontrolle. Der Faltungszustand
und die Oligomerisierung von Glykoproteinen werden
im ER durch verschiedene Chaperone, die Lektine
Calnexin und Calreticulin sowie Glukosidase II und die
UDP-Glukose:Glykoprotein Glukosyltransferase fort-
während kontrolliert (Details in Abb. 22). Bestimmte
kongenitale Erkrankungen der Glykosilierung sind
durch defektes Trimmen von Oligosacchariden verur-
sacht.
Abbildung A zeigt einen ultradünnen Gefrierschnitt
der Rattenleber mit Immungoldmarkierung für
Glukosidase II in der Kernhülle (Pfeilköpfe) und im
rauen ER in Form von Mikrodomänen. Das Nebenbild
zeigt eine Doppelmarkierung für Glukosidase I (große
Goldpartikeln) und Glukosidase II (kleine Gold-
partikeln) im rauen ER. Die Bedeutung der Entfernung
GIs I
GIs II ER Man I
α2
GIs II
α3
α3
α2 α2 α2
α2 α3 α6
α3 α6
β4
Asn
β4
des äußeren Glukoserestes durch Glukosidase I ist
unklar. Hingegen stellt die Entfernung des zweiten
Glukoserests durch Glukosidase II ein positives Signal
für die Eiweißfaltung dar. Glukosidase II bewirkt auch
die Dissoziation von Komplexen zwischen
Calnexin/Calreticulin und monoglukosilierten N-
Glykanen von Glykoproteinen.
Abbildung B zeigt einen ultradünnen Gefrierschnitt
vom Rattenpankreas mit Immungoldmarkierung für
Glukosyltransferase in der Kernhülle (Pfeilköpfe) und
im rauen ER in Form von Mikrodomänen.
Glukosyltransferase ist einzigartig, indem sie eine
zweifache Funktion ausübt: zum einen als Eiweiß-
faltungssensor und zum anderen als Glykosyltrans-
ferase. Sie erkennt nicht korrekt gefaltete Glykoproteine
und reglukosiliert sie, so dass sie einen weiteren
Calnexin/Calreticulin Zyklus im Rahmen der Qualitäts-
kontrolle durchlaufen können.
M: Mitochondrien.
Literatur
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Vergrößerung: x 53,000 (A); x 70,300 ( Nebenbild); x 48,000 (B).

Abbildung 16 33

Glukosidase II Glukosidase I und II

Nukleus
A
Glukosyltransferase
M

Nukleus

B
34
RAUES ENDOPLASMATISCHES RETIKULUM : EIN SPEICHERORT FÜR NICHT KORREKT
GEFALTETE , AGGREGIERTE GLYKOPROTEINE
Falsch gefaltete Glykoproteine können als Ausschuss-
produkte bei der de novo Eiweißsynthese auftreten, als
Konsequenz von Mutationen oder im Gefolge von zel-
lulärem Stress (Fieber, Hypoxie, Hunger, etc.) sowie
nach experimenteller Hemmung der Eiweißsynthese
durch Puromycin oder der N-Glykosilierung durch
Tunicamycin und der Verhinderung der Disulfid-
brückenbildung durch reduzierende Agenzien. Ange-
borene Krankheiten wie die zystische Fibrose und
Alpha-1-Antitrypsinmangel gehören zur großen
Familie der Eiweißfaltungskrankheiten, die mit der
Akkumulation nicht korrekt gefalteter Glykoproteine
einhergehen.
Unter günstigen Umständen werden nicht korrekt
gefaltete Glykoproteine zurück in das Zytosol trans-
loziert und ohne schädliche Folgen für die Zellen mittels
des Ubiquitin-Proteasom Systems abgebaut. Anderer-
seits können aber im Lumen des rauen endoplasmati-
schen Retikulums (RER) Proteinaggregate entstehen, die
nicht retrotransloziert und abgebaut werden können.
Die klassische Manifestation eines solchen Geschehens
besteht im Auftreten von Mott-Zellen, d.h. Plasma-
zellen, die nicht korrekt gefaltete Immunglobuline pro-
duzieren. Diese zellulären Einschlüsse werden als
Russell-Körper bezeichnet, die auch in anderen sekre-
torischen Zellen auftreten können. In den Mott-Zellen
der Milz von NZB-Mäusen ist typischerweise das
gesamte RER dilatiert (Abb. A, Sterne). Andererseits
kann es auch zum Auftreten lokalisierter Protein-
aggregate im Lumen des RER kommen, den sogenann-
ten intrazisternalen Granula. Sie können als eine
Sonderform der Russel-Körper aufgefasst werden und
entstehen als Folge von Fasten oder nach experimen-
teller Behandlung mit Puromycin (Abb. B) in serösen
Pankreaszellen. Sowohl die intrazisternalen Granula als
auch Zymogengranula (ZG) enthalten Enzyme, wie die
hier mit der Immungoldmarkierung nachgewiesene
Amylase.
Die Ansammlung nicht korrekt gefalteter Glyko-
proteine im RER hat unter anderem die Induktion der
Unfolded Protein Response (UPR) und eine ER-
Overload Response zur Folge. Die Signaltransduktion
Das Zytoplasma: das sekretorische System
bei der Unfolded Protein Response erfolgt über eine
transmembranäre Kinase/Ribonuklease (Ire1P), eine
tRNA-Ligase (Rlg1P) und den Transkriptionsfaktor
Hac1qP und kontrolliert nicht nur die Genexpression
von verschiedenen ER-Chaperonen, sondern kann auch
Apoptose induzieren. Dieser Signaltransduktionsweg
wird von Hefen bis zu Mammalierzellen benutzt. Die
Signaltransduktion bei der ER Overload Response
geschieht über die Induktion des Transkriptionsfaktors
NF-gB. Daraus resultiert die Synthese und Freisetzung
von Zytokinen mit nachfolgender Entzündung
und/oder Apoptose.
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Vergrößerung: x 20,500 (A); x 95,000 (B)
Abbildung 17 35

Golgi
*

Nukleus

A
*

intrazisternale Granula

ZG

B
36
RUSSELL-KÖRPER UND AGGRESOMEN SIND VERSCHIEDENE TYPEN VON
EIWEISSEINSCHLUSSKÖRPERN
Wie erwähnt sind Russell-Körper Aggregate nicht kor-
rekt gefalteter Glykoproteine im Lumen des rauen
endoplasmatischen Retikulums (RER), die entweder zur
Dilatation des gesamten RER (siehe Abb. 17) oder nur
umschriebener Anteile des RER führen können. Ein von
der Ribosomen-besetzten ER-Membran umgebener
Russell-Körper von der Größe eines Zellkerns ist in
Abbildung A zu sehen; andere Anteile des RER er-
scheinen unauffällig.
Ein weiterer Typ von zellulären Einschlusskörpern
sind die Aggresomen (Abb. B), die ebenfalls als Folge der
Bildung nicht korrekt gefalteter Glykoproteine entste-
hen können. Sie unterscheiden sich jedoch prinzipiell
von den Russell-Körpern bezüglich ihrer subzellulären
Lage. Aggresomen bestehen aus amorphen elektronen-
dichten Eiweißaggregaten (Sterne in Abb. B), die ohne
eine begrenzende Membran im Zytosol liegen. Im
Gegensatz zu den Russell-Körpern handelt es sich bei
den Aggresomen um Eiweißaggregate, die aus nicht kor-
rekt gefalteten, retrotranslozierten, ubiquitinierten
Glykoproteinen, Proteasomen und Chaperonen zusam-
mengesetzt sind. Typischerweise liegen die Aggresomen
perizentriolär und sind von Vimentinfilamenten (Typ-
III-Intermediärfilamente) umgeben. Aggresomen
bilden sich durch die Zusammenlagerung kleinerer
Proteinaggregate, die entlang von Mikrotubuli (MT) zur
Gegend des Zentriols transportiert werden. Aggresomen
können experimentell über eine Hemmung der prote-
olytischen Aktivität der Proteasomen induziert werden
oder treten auf, wenn ihre proteolytische Kapazität
durch die übermäßige Anwesenheit aggregationsanfäl-
liger Eiweiße erschöpft ist. Offenbar können aggregierte
Proteine die Funktion der Proteasomen direkt nachteilig
beeinflussen.
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Trotz dieser Unterschiede sind sowohl Russell-
Körper als auch Aggresomen und andere Typen von
Eiweißeinschlusskörpern letztlich eine morphologische
Manifestation zellulärer „Obstipation“ im Gefolge ver-
schiedener krankhafter Zustände. Insbesondere werden
Eiweißeinschlusskörper häufig bei chronisch degenera-
tiven neurologischen Erkrankungen wie der Alz-
heimer’schen und der Parkinson’schen Erkrankung
sowie der familiären amyotrophen Lateralsklerose
beobachtet.
M: Mitochondrien; Ly: Lysosomen.
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Vergrößerung: x 19,000 (A); x 48,000 (B)
Abbildung 18 37

RER

Ly Russell-Körper

Nukleus

Ly
M
A

Aggresom

MT

*
IF

Nukleus

B
38
GLATTES ENDOPLASMATISCHES RETIKULUM
Das glatte, nicht mit Ribosomen besetzte, endoplasma-
tische Retikulum (SER – smooth endoplasmic reticu-
lum, ) bildet ein komplexes Membransystem mit unter-
schiedlichen Aufgaben, zu denen die Lipidsynthese
ebenso gehört, wie die Aufrechterhaltung der Kalzium-
homeostase und Entgiftungsreaktionen durch Um-
wandlung schädigender Substanzen in gut ausscheid-
bare wasserlösliche Verbindungen. Eine spezialisierte
Form des SER ist das sarkoplasmatische Retikulum, das
in der quergestreiften Skelettmuskulatur Netzwerke um
die Myofibrillen bildet und mit den Terminalzisternen
einen wichtigen Teil des Signalübertragungssystems der
Triaden aufbaut (siehe Abb. 138).
Das SER steht mit dem RER in Verbindung (siehe
Nebenbild), doch ist seine Architektur eine ganz andere.
Das wird auch in dem Ausschnitt einer Leberzelle auf
der gegenüberliegenden Seite deutlich. Während das
raue endoplasmatische Retikulum (RER, in der linken
oberen Ecke der Abbildung) parallel angeordnete
Stapeln flacher Zisternen bildet, ist das SER aus knäuel-
artig verschlungenen Membrankonvoluten tubulärer
und fingerförmiger Abschnitte aufbaut. Solche SER
Membrankonvolute sind in den Steroidhormon
produzierenden Zellen der Nebennierenrinde und in
Organen des Genitaltrakts besonders ausgeprägt und
dominieren auch das elektronenmikroskopische Bild
der Leberzellen. Funktionszusammenhänge mit dem
Kohlenhydratstoffwechsel spiegeln sich in der räum-
lichen Nähe zu den zahlreichen Glykogenpartikeln
(Stern).
Membrankontinuitäten von RER und SER, wie im
Nebenbild gezeigt (Pfeilspitze), sind Ausdruck der
engen Funktionszusammenhänge, wie zum Beispiel bei
der Bildung von Lipoproteinpartikeln. Very low density
lipoprotein Partikel (VLDLs), die von den Leberzellen
produziert und in den Disse Raum sezerniert werden
(siehe auch Abb. 98 und 99), werden in den SER Lumina
als elektronendichte Partikel sichtbar (Pfeile) und sind
Das Zytoplasma: das sekretorische System
an den SER-RER Übergängen besonders zahlreich
(Nebenbild).
ER Membranen und Kompartimente sind außeror-
dentlich dynamisch und verändern laufend ihre Gestalt.
Form und Größe der Kompartimente werden durch
gegensätzliche Kräfte und Vorgänge verbunden mit
Membranfusion einerseits und Dissoziation und
Fragmentierung andererseits, bestimmt. Export von
Membranen aus dem ER wird begleitet von Membran-
rezirkulation, sodass die SER-Gesamtoberfäche konstant
gehalten wird.
Für die ER Organisation spielen sowohl das Zyto-
skelett und als auch das Umgebungsmikromilieu eine
wichtige Rolle. Im Elektronenmikroskop werden Unter-
schiede in der zytosolischen Matrix, in die RER und SER
Membranen eingebettet sind, stellenweise sehr deutlich
sichtbar. Die Zisternen des rauen endoplasmatischen
Retikulums links oben im Bild und im Nebenbild sind
von einer dichten, kompakten zytosolischen Matrix
umgeben, die in den SER Bereichen fehlt (siehe auch
Abb. 97–99).
M: Mitochondrien, PO: Peroxisomen
Literatur
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Vergrößerung: x 32,800, x 47,500 (Nebenbild)
Abbildung 19 39

M
RER

SER

PO

M
40
PROLIFERATION DES GLATTEN ENDOPLASMATISCHEN RETIKULUMS
Im Gegensatz zu den meisten anderen Zelltypen
besitzen Hepatozyten und Steroid-produzierende Zellen
reichlich glattes endoplasmatisches Retikulum (SER).
Beispielsweise stellen die Membranen des SER der
Hepatozyten 16% der gesamten zellulären Membranen
dar, während sie in den serösen Pankreaszellen weniger
als 1% ausmachen. Die Menge des SER kann bei funk-
tionellem Bedarf schnell und reversibel zunehmen. Das
klassische Beispiel hierfür stellt die Barbiturat-
induzierte Proliferation des SER von Hepatozyten dar.
Nach Beendigung der funktionellen Stimulation wird
das überschüssige SER über Autophagozytose eliminiert
(siehe Abb. 57 für Details der Autophagozytose).
Angeborenen Störungen des Bilirubinstoffwechsels
führen auch zur Proliferation des SER. Zu diesen
Erkrankungen gehören das Crigler-Najjar-Syndrom I
und II und das Gilbert-Syndrom, die eine
Hyperbilirubinämie mit überwiegend nicht kon-
jugiertem, freiem Bilirubin verursachen. Die nebenste-
hende elektronenmikroskopische Aufnahme stammt
von einer Leberbiopsie eines Patienten mit Crigler-
Najjar-Syndrom und zeigt die Veränderungen auf ein-
drückliche Weise. Das Zytoplasma der Hepatozyten ist
auf Kosten des rauen ER fast vollständig mit SER ausge-
füllt und enthält Bilirubinablagerungen (Sterne in der
Abbildung und im Nebenbild).
Beim Crigler-Najjar-Syndrom handelt es sich um
eine autosomal rezessiv vererbte Krankheit. Der
molekulare Defekt betrifft die hepatische Bilirubin-
UDP-Glukoronyltransferase A 1 Isoform, deren Gen-
lokus sich auf Chromosom 2q37 befindet. In jedem der
fünf Exone des Gens konnten Deletionen, Insertionen,
Misssensmutationen oder vorzeitige Stopkodons nach-
Das Zytoplasma: das sekretorische System
gewiesen werden. Als Folge dieser genetischen Ver-
änderungen ist keine oder nur eine geringe Restaktivität
der hepatischen Bilirubin-UDP-Glukoronyltransferase
nachweisbar. Aufgrund der erhöhten Serumwerte von
freiem Bilirubin tritt ein nicht hämolytisch bedingter
Ikterus in den ersten Lebenstagen auf. Ohne Behand-
lung kommt es zum fatalen Kernikterus mit einer
Bilirubinenzephalopathie. Durch orthotope Lebertrans-
plantation konnte eine langfristige Besserung der
Krankheit erzielt werden.
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Vergrößerung: x 9,600; x 13,000 (Nebenbild)
Abbildung 20 41

Hyperbilirubinämie (Crigler-Najjar)

SER

SER

Golgi
M

SER M

Nukleus
42
PRÄ-GOLGI TRANSPORTINTERMEDIÄRE
Zwischen den transitorischen Elementen des rauen
endoplasmatischen Retikulums (RER) und dem Golgi
Apparat befinden sich die Prä-Golgi Transportinter-
mediäre, die auch als intermediäres Kompartiment,
ERGIC-53 oder vesikulo-tubuläre Kluster bezeichnet
werden. Allgemein ausgedrückt handelt es sich um eine
komplexe und dynamische Struktur für den antero- und
retrograden Transport zwischen dem RER und dem
Golgi Apparat.
Der Austritt von Cargo aus dem RER erfolgt an
morphologisch definierten Orten, den transitorischen
Elementen des RER (TE in Abb. A–C). Es handelt sich
um Zisternen des RER, die lokal begrenzt keine
Ribosomen besitzen und Membranknospen ausbilden
(Pfeilköpfe in Abb. A–C), die zur Bildung von Vesikeln
führen. Zwischen den TE und der Cis-Seite des Golgi
Apparates befinden sich 60–80 nm große Vesikeln und
Tubuli von etwa 120 nm Durchmesser, die Prä-Golgi
Transportintermediäre (pGI in Abb. A, B, D). Prä-Golgi
Transportintermediäre gemeinsam mit den TE
existieren auch verteilt im Zytoplasma (Abb. C), von wo
sie entlang von Mikrotubuli zum Golgi Apparat trans-
portiert werden. Sie sind nicht nur Bestandteile sekre-
torischer Zellen wie Insulin-produzierender Beta-Zellen
(Abb. A), sondern auch weniger differenzierter Zellen
wie Chinese Hamster Ovary (CHO)-Zellen (Abb. B). In
Prä-Golgi Transportintermediären sind das p53
(menschliche Zellen) und das p58 (Nagetierzellen)
Protein angereichert und entsprechende Antikörper
können zu seiner immunelektronenmikroskopischen
Identifikation eingesetzt werden, wie in Abbildung D in
einem ultradünnen Gefrierschnitt von kultivierten
Rattenhepatozyten gezeigt ist.
Wesentliche Aspekte des molekularen Mechanismus
der Cargoselektion in den transitorischen Elementen
des RER und des Transports sowie des Rezyklierens
zwischen dem ER und dem Golgi Apparat sind bekannt.
Sar1p
COPII (Secps)
Cargo Rezeptor
(p53)
Cytosol
Cargo
Lumen
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Der gegenwärtige Stand ist, dass zytosolische COPII-
Proteine wie Sar1-, Sec23-Sec24- und Sec13-Sec31-
Proteine über die Bindung an die Membranaußenseite
transitorischer Elemente die Bildung von Membran-
knospen induzieren, in die Cargo aktiv sortiert wird
(siehe Diagramm). Mittels COPII-überzogener Vesikeln
erfolgt der anterograde Cargotransport. Nach der
Dissoziation der COPII-Proteine verschmelzen die
Vesikel wahrscheinlich miteinander oder mit vorbeste-
henden vesikulo-tubulären Elementen. Neuerdings wird
auch die direkte Bildung großer, tubulärer Trans-
portintermediäre mit einer Länge bis zu 500 nm
angenommen. Die Prä-Golgi Transportintermediäre
sind nicht nur in den anterograden Cargotransport
involviert, sondern auch in den retrograden, COPI-ver-
mittelten Transport. Elektronenmikroskopisch unter-
scheiden sich COP-überzogene Vesikeln von Clathrin-
überzogenen Membranknospen und Vesikeln der Trans-
Seite des Golgi Apparats (Pfeil in Abb. B).
Literatur
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Abbildung 21 43

Golgi pGI SG

A TE

Golgi

pGI
trans

TE

Golgi

pGI

B Nukleus

TE p58

Golgi

pGI

M
C D
44
PRÄ-GOLGI TRANSPORTINTERMEDIÄRE : TRIMMEN VON OLIGOSACCHARIDEN UND
EIWEISSQUALITÄTSKONTROLLE
Die Elemente der Eiweißqualitätskontrolle, wie diverse
Chaperone, Protein Disulfidisomerase, Lektine
(Calnexin und Calreticulin), ERp57, Glukosidase II und
Glukosyltransferase befinden sich im endoplasmati-
schen Retikulum (ER). Das Diagramm fasst die wesent-
lichen Vorgänge bei der Kontrolle des Faltungszustandes
von Glykoproteinen vereinfacht zusammen. Mono-
glukosilierte N-Glykane an Glykoproteinen sind von
Bedeutung, da diese von Calnexin/Calreticulin erkannt
und gebunden werden. Derartige Glykoprotein-Lektin
Komplexe werden durch die Glukosidase II (Gls II) dis-
soziiert. Korrekt gefaltete Glykoproteine können dann
durch die ER-Mannosidase I (ER-Man I) getrimmt wer-
den und das ER verlassen. Nicht korrekt gefaltete
Glykoproteine werden von der Glukosyltransferase
erkannt und reglukosiliert und erneut von Calnexin
oder Calreticulin gebunden. Somit stellen die gegen-
sätzlichen Wirkungen von Glukosidase II und Gluko-
syltransferase die Grundlage für diesen „on-and-off“
Zyklus dar. N-Glykane nicht korrekt gefalteter
Glykoproteine werden schließlich durch die ER-
Mannosidase I zum Mannose8N-Azetylglukosamin2-
Isomer B getrimmt, der von EDEM, einem Mannose8-
bindenden Lektin, erkannt wird. EDEM forciert die
Freisetzung dieser Glykoproteine vom Calnexin, verhin-
dert ihre Reglukosilierung durch die Glukosyl-
transferase und beschleunigt letztendlich ihren Abbau
durch das Ubiquitin-Proteasom System. Der komplexe
Vorgang der Erkennung nicht korrekt gefalteter
Glykoproteine, ihre Retrotranslokation und der
anschließende proteasomale Abbau werden als ER-asso-
ziierter Eiweißabbau, ERAD, bezeichnet.
Glukose
Mannose
N-Azetylglukosamin
ERp57 GIs II, ER Man I
Calnexin falsch gefaltet
Calreticulin
GIs II
α3
α2 α2 α2
α2 α3 α6
α3 α6
β4
GIs I β4 GIs II ER Man I
korrekt gefaltet
Asn Asn
falsch
gefaltet
GT
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Durch elektronenmikroskopische Immungold-
markierungen wurden sowohl Glukosidase II als auch
Glukosyltransferase nicht nur im ER, sondern auch in
den Prä-Golgi Transportintermediären (pGI) von
Mammaliergeweben (Abb. A: Schweineleber; Abb. B:
Rattenpankreas; Abb. C: periphere Prä-Golgi
Transportintermediäre in Rattenleber, markiert mit
Pfeilköpfen) und Speicheldrüsen von Drosophila
melanogaster nachgewiesen. Bemerkenswerterweise sind
diese Enzyme in den Prä-Golgi Transportintermediären
angereichert. Diese Befunde deuten daraufhin, dass die
Qualitätskontrolle der Faltung von Glykoproteinen
nicht nur im ER, sondern auch in Prä-Golgi
Transportintermediären stattfindet. Ein eindeutiger
Hinweis auf eine solche Funktion besteht im Nachweis
der Akkumulation nicht korrekt gefalteter Eiweiße in
den Prä-Golgi Transportintermediären.
M: Mitochondrien; TE: transitorisches Element des
RER.
Literatur
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Asn
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in protein quality control. Proc Natl Acad Sci USA 98: 10710
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accumulates in expanded pre-Golgi intermediates and endoplas-
Export
mic reticulum subdomains in pancreatic beta cells of Akita mice.
Asn FASEB J 18: 917
Vergrößerung: x 90,000 (A); x 71,500 (B); x 43,700 (C)
Abbildung 22 45

Glukosidase II Golgi

pGI

M ER

Glukosidase II

Golgi

pGI

RER
B

Glukosyltransferase
M

M
C
46
DER GOLGI APPARAT: EINE SCHALTZENTRALE DES SEKRETORISCHEN TRANSPORTWEGS
Der Golgi Apparat bildet eine zentrale Kreuzung in den
sekretorischen Transportwegen, spielt aber auch eine
wichtige Rolle im Zusammenhang mit der Endozytose
(siehe Abb. 30 und 43). Im Golgi Apparat werden
neusynthetisierte sekretorische Proteine, lysosomale
Enzyme und Membranproteine modifiziert (siehe Abb.
25–27) und für den Weitertransport zu ihren Zielkom-
partimenten sortiert.
Bezeichnet wird der Golgi Apparat nach seinem
Entdecker Camillo Golgi, der dieses komplexe
Membransystem 1898 in Zellkörpern von Spinal-
ganglienzellen als „apparato reticulare interno“ erstmals
beschrieb. Schon die Zeichnungen von Camillo Golgi
weisen darauf hin, dass es sich um ein zusammenhän-
gendes Membransystem mit Untereinheiten handelt.
Diese Untereinheiten bestehen aus Stapeln flacher
Zisternen, die über Tubuli und Netzwerke zusammen-
hängen (siehe Zeichnung, Abb. 32). In jedem der
Stapeln existieren funktionelle Subkompartimente mit
ganz bestimmten Aufgaben.
Die Abbildung auf der gegenüberliegenden Seite
zeigt einen der Golgi Stapel in einer sezernierenden
Pankreasazinuszelle. So wie auch in anderen reguliert
sezernierenden Zellen spiegelt die Architektur des
Golgi Apparats deutlich sein Eingebundensein in den
Sekretionsweg. Der Zisternenstapel zeigt hier eine aus-
geprägte Polarität mit einer deutlich differenzierbaren
cis- und trans-Seite. Bezogen auf die Sekretionswege ist
die cis-Golgi Seite die Region für den Import, wo die
vom endoplasmatischen Retikulum kommenden
neusynthetisierten Moleküle in den Golgi Apparat auf-
genommen werden, während die trans-Seite mit dem
trans-Golgi Netzwerk (siehe Abb. 30–32) die Export-
Region darstellt, wo die Moleküle, die in den Zisternen
modifiziert wurden, den Golgi Apparat wiederum ver-
lassen und zu ihren Bestimmungsorten sortiert werden.
Diese klar von cis nach trans orientierte Richtung des
Transports kommt morphologisch deutlich zum Aus-
druck, wenn es auch über die Mechanismen des Trans-
ports über die Zisternenstapel unterschiedliche Ergeb-
nisse gibt und verschiedene Modelle diskutiert werden
(siehe Abb. 36).
Übergangselemente (transitorische Elemente, TE) des
rauen endoplasmatischen Retikulums (RER) und prä-
Golgi Transportintermediäre (pGI, siehe Abb. 21 und 22)
sind an der cis-Golgi Seite zu sehen. Die transitorischen
Elemente entsprechen den RER Exportregionen und
zeigen typischerweise Ribosomen nur an einer Seite, wie
besonders in dem Anschnitt rechts unten im Bild deutlich
wird. Den cis-Zisternen benachbart sind Membranprofile
Das Zytoplasma: das sekretorische System
von prä-Golgi Intermediären erkennbar. Es wird ange-
nommen, dass hier aus diesen komplexen, dynamischen
Strukturen Kompartimente für den anterograden
Transport in den Golgi Stapel aufgenommen werden und
zur Neubildung von Golgi Zisternen beitragen. Die
unterschiedlich weiten Zisternen an der cis-Seite und im
mittleren Bereich der Stapel enthalten fein flockiges
Material, das auch in den trans-Zisternen und konden-
sierenden Vakuolen (KV) sichtbar ist. Die letzteren
entsprechen noch nicht ausgereiften Sekretgranula und
werden aus erweiterten Abschnitten von trans-Golgi
Zisternen (Stern) gebildet. Das Bild zeigt nahe der trans-
Seite eine Ansammlung kondensierender Vakuolen und
auch reifer Sekretgranula, die in der Bauchspeicheldrüse
Zymogengranula (ZG) genannt werden. Die morpholo-
gisch erkennbaren Veränderungen vom fein flockigem
Inhalt in den Lumina der Golgi Zisternen und konden-
sierenden Vakuolen zum elektronendichtem Inhalt in den
Zymogengranula sind Ausdruck der Kondensation und
Veränderungen des Sekrets, die in den kondensierenden
Vakuolen stattfinden (siehe Abb. 39–40).
M - Mitochondrien
Literatur
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Vergrößerung: x 45,000
Abbildung 23 47

KV

ZG
*
ZG

ZG
cis
KV

trans Golgi

pGI KV

RER
pGI
TE

M
M
48
IMMUNELEKTRONENMIKROSKOPIE : EINE TECHNIK FÜR UNTERSUCHUNGEN ZUR SEKRETION
VON EIWEISSEN
Allgemein formuliert ist die Immunelektronen-
mikroskopie eine Technik, um zelluläre Bestandteile,
wie Eiweiße, Lipide und Nukleinsäuren mit bekannter
Funktion zellulären Organellen oder Teilen von ihnen
zuzuordnen. Dadurch können organisatorische und
funktionelle Prinzipien von zellulären Organellen oder
von Organellenkompartimenten aufgeklärt werden.
In den Abbildungen A–C sind die hauptsächlichen
Kompartimente des sekretorischen Systems einer
exokrinen Pankreaszelle (siehe auch Abb. 23) und
Immungoldmarkierung für Amylase zu sehen. Amylase
konnte im Lumen der Zisternen des rauen endoplasma-
tischen Retikulums (Abb. A) und seiner transitorischen
Elemente, in Prä-Golgi Transportintermediären und im
Golgi Apparat (Abb. B) nachgewiesen werden.
Gleichermaßen waren dilatierte Abschnitte von Trans
Golgi Zisternen (Sterne in Abb. B), die elektronendich-
tes Material enthalten, markiert. Hierbei handelt es sich
um frühe Stadien der Bildung von Sekretgranula
(unreife Sekretgranula oder Condensing Vacuole). Die
reifen Sekretgranula im Pankreas werden als Zymogen-
granula (ZG) bezeichnet. In nicht stimulierten Pan-
kreaszellen ist das apikale Zytoplasma mit Zymogen-
granula erfüllt. Die Membran der Zymogengranula
kann nach Stimulation mit der apikalen Plasmamem-
bran fusionieren (Pfeile in Abb. C) und der Inhalt der
Zymogengranula in das Azinuslumen sezerniert werden
(siehe auch Abb. 39). Erwartungsgemäß sind sowohl die
Zymogengranula als auch der Inhalt des Azinuslumens
für Amylase positiv.
Immungoldmarkierung kann quantifiziert werden
und ermöglicht es, die Organellen in Zellen zu identi-
fizieren, in denen die Konzentration von sekretorischen
Eiweißen oder beispielweise die Umwandlung von
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Prohormonen in reife Hormone stattfindet. Auf diese
Weise gelang es nachzuweisen, dass Eiweiße das endo-
plasmatische Retikulum über einen selektiven Transport
in Vesikeln und nicht über „bulk flow“ verlassen (siehe
auch Abb. 21).
Literatur
Aridor M, Fish KN, Bannykh S, Weissman J, Roberts TH,
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Vergrößerung: x 62,000 (A); x 55,000 (B); x 45,000 (C)
Abbildung 24 49

ZG

* Golgi
*

Azinuslumen

ZG
C
50 Das Zytoplasma: das sekretorische System

PROTEIN N-GLYKOSILIERUNG : TRIMMEN VON N-GLYKANEN IM GOLGI APPARAT UND PRÄ-

GOLGI TRANSPORTINTERMEDIÄREN

Die Glykosylierung von Proteinen wird im Golgi
Apparat durch Trimmen und Verlängern der Asparagin-
verknüpften Oligosaccharide weitergeführt und resul-
tiert in der Bildung von komplexen N-Glykanen.
Hierbei spielen Mannosidasen eine wichtige Rolle.
Nachdem die Golgi Mannosidase I die noch verbliebe-
nen _1,2-verknüpften Mannosereste entfernt hat,
kommt es zur ersten Verlängerungsreaktion durch die
N-Azetylglukosaminyltransferase I. Danach werden ein
_1,3 und ein _1,6-verknüpfter Mannoserest durch die
Golgi-Mannosidase II entfernt (Schema A). Die Endo-
_-Mannosidase, die eine der Glukosidase II ähnliche
Substratspezifität hat, trimmt noch vorhandene
monoglukosilierte N-Glykane (Schema B) und stellt
einen Glukosidase II-unabhängigen Weg dar. Bestimmte
Mannosidase-getrimmte, monoglukosilierte N-Glykane
sind ausschließlich ein Substrat für die Endomanno-
sidase (Schemata C und D).
Golgi Mannosidase I wird generell als ein Cis Golgi
Marker angesehen. Allerdings kann das nicht verallge-
meinert werden, da sich das Enzym je nach Zelltyp in
medialen und Trans Golgi Zisternen befindet. Das trifft
auch für die Golgi Mannosidase II zu. In NRK und
CHO Zellen findet sie sich in medialen Golgi Zisternen,
in exokrinen Pankreaszellen in medialen und Trans-
Zisternen, in Becherzellen in Trans Zisternen, und in
Hepatozyten (Abb. A, ultradünner Gefrierschnitt von
Rattenleber) und Enterozyten diffus in allen Golgi
Zisternen.
Endomannosidase hat eine doppelte Verteilung:
überwiegend in Cis- und medialen Golgi Zisternen und
zusätzlich in p58-positiven Prä-Golgi Transportinter-
mediären (pGI in Abb. B, ultradünne Gefrierschnitte
kultivierter Hepatozyten). Abbildung C zeigt eine
Immungold Doppelmarkierung für Endomannosidase
(kleine Goldpartikeln) und p58 (große Goldpartikeln,
Pfeile). Die subzelluäre Verteilung der Endomannosi-
dase beweist, dass das Trimmen von Glukoseresten nicht
ausschließlich im endoplasmatischen Retikulum, son-
dern auch im Golgi Apparat und in Prä-Golgi Trans-
portintermediären stattfindet.
M: Mitochondrium.

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Glukose (n=1-3)
Mannose
N-Azetylglukosamin Asn Asn Vergrößerung: x 83,000 (A); x 101,000 (B); x 94,000 (C)
Abbildung 25 51

Golgi-Mannosidase II

trans Golgi

cis Golgi

Endomannosidase Endomannosidase + p58

trans Golgi trans Golgi

pGI
B C
52
DER GOLGI APPARAT: ABSCHLUSS DER SYNTHESE VON ASPARAGIN-VERKNÜPFTEN GLYKANEN
Im Golgi Apparat wird die Synthese der Asparagin-
verknüpften Glykane beeendet. Die Glykosylierungs-
reaktionen beinhalten sowohl die Entfernung von
Mannoseresten durch Golgi Mannosidase I und II
(siehe Abb. 25) als auch die Verlängerung der Mannose3-5-
GlcNAc2 Oligosaccharid Kernstruktur durch N-
Azetylglukosamin, Galaktose, Fukose und Sialinsäure.
Diese Zuckerreste werden schrittweise durch diverse
N-Azetylglukosaminyl-, Galaktosyl-, Fukosyl- und
Sialyltransferasen übertragen und daraus resultieren die
komplexen N-Glykanstrukturen. Die komplexen
N-Glykane können in Form kompliziert aufgebauter
tetra-antennärer Oligosaccharide vorliegen, die oft
Polylaktosaminketten (Aufeinanderfolgen von Galak-
tose–N-Azetylglukosamin Disacchariden) aufweisen
(Schema C). Am häufigsten liegen komplexe
N-Glykane jedoch in Form einfach aufgebauter bi-
antennärer Oligosaccharide vor (Schema D). Von den
komplexen N-Glykanen müssen die mannosereichen N-
Glykane unterschieden werden, die aus fünf bis neun
Mannoseresten und zwei N-Azetylglukosaminresten
aufgebaut sind. Die Hybrid N-Glykane bestehen sowohl
aus komplexen als auch aus mannosereichen N-
Glykanen.
Die enzymatische Verlängerung der N-Glykane
geschieht schrittweise, wie an einem Fließband, wobei
das Produkt einer Glykosilierungsreaktion zum
Akzeptorsubstrat für die nachfolgende Glykosilierungs-
reaktion wird. In Übereinstimmung mit der sequen-
tiellen Weise der Glykan Synthese sind die N-Azetyl-
glukosaminyl-, Galaktosyl-, Fukosyl- und Sialyltrans-
ferasen in dieser Reihenfolge in medialen und Trans
Zisternen des Golgi Apparates sowie dem Trans Golgi
Netzwerk vorhanden (Abb. A und B). Sie stellen somit
auch immunzytochemische Marker für diese Anteile des
Golgi Apparates dar. Es ist jedoch hervorzuheben, dass
die verschiedenen Glykosyltransferasen im Golgi
Apparat in sich gegenseitig überlappenden Verteilungen
vorkommen (siehe Abb. 27).
Glykosyltransferasen übertragen einen Zuckerrest
vom entsprechenden Nukleotidzucker (UDP-N-
Azetylglukosamin, GDP-Fukose, UDP-Galaktose, CMP-
Sialinsäure) auf ein spezifisches Akzeptorsubstrat, wie
beispielsweise Galaktose von UDP-Galaktose auf N-
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Azetylglukosamin-R. Diese Reaktion findet im Lumen
der Golgi Zisternen statt. Mit Ausnahme von CMP-
Sialinsäure, die im Zellkern synthetisiert wird, werden
alle anderen Zuckernukleotide im Zytosol synthetisiert
und müssen in das Lumen der Golgi Zisternen trans-
portiert werden. Dies geschieht über spezifische
Transporterproteine der Golgimembranen. Bei den
Transporterproteinen handelt es sich um Antiporter, die
im miteinander gekoppelten Transport von Nukleotid-
zuckern aus dem Zytosol in das Golgi Lumen und von
Nukleotidabkömmlingen (GMP, UMP) aus dem Golgi
Lumen in das Zytosol funktionieren. Das während der
Glykosilierung anfallende UDP und GDP wird zuerst
durch Nukleosid Diphosphatasen in den Golgi
Zisternen zu GMP und UMP hydrolysiert.
AV: Autophagozytose Vakuole; Ly: Lysosom; M:
Mitochondrium.
Literatur
Berninsone PM, and Hirschberg CB (2000) Nucleotide sugar
transporters of the Golgi apparatus. Curr Opin Struct Biol 10:
542
Hirschberg CB (1997) Transport of nucleotide sugars, nucleotide
sulfate and ATP. In: The Golgi apparatus (Berger E, and Roth J,
eds). Basel Boston Berlin: Birkhäuser, pp 163
Perez M, and Hirschberg CB (1987) Transport of sugar
nucleotides into the lumen of vesicles derived from rat liver rough
endoplasmic reticulum and Golgi apparatus. Meth Enzymol 138:
709
Rabouille C, and Nilsson T (1995) Redrawing compartmental
boundaries in the exocytic pathway. FEBS Lett 369: 97
Roth J, and Berger E (1982) Immunocytochemical localization of
galactosyltransferase in HeLa cells: codistribution with thiamine
pyrophosphatase in trans-Golgi cisternae. J Cell Biol 93: 223
Roth J, Taatjes D, Lucocq J, Weinstein J, and Paulson J (1985)
Demonstration of an extensive trans-tubular network continuous
with the Golgi apparatus cisternal stack that may function in gly-
cosylation. Cell 43: 287
Taniguchi N, Honke K, and Fukuda M (2002) Handbook of gly-
cosyltransferases and related genes. Tokyo Berlin: Springer
Taylor M, and Drickamer K (2003) Introduction to glycobiology.
Oxford New York: Oxford University Press
Varki A, Cummings R, Esko J, Freeze H, Hart G, and Marth, J
(1999) Essentials of glycobiology. Cold Spring Harbor New York:
Cold Spring Harbor Laboratory Press
Vergrößerung: x 62,500 (A); x 46,200 (B)
Abbildung 26 53

Galaktosyltransferase Sialyltransferase

Ly

cis Golgi

Nukleus
A AV

Sialinsäure
Lipid-
α3/6 tropfen M
Galaktose
β4
Fukose
β3
Mannose
β4
N-Azetylglukosamin
β3
β4
β3
trans Golgi
β4 β4 β4 β4
Netzwerk
β2 β6 β2 β6
α3 α6
β4
β4

C Asn

α3/6 α3/6
β4 β4
β2 β4

α3 α6
β4
β4

D Asn B cis Golgi

54
ZELLTYP-ABHÄNGIGE UNTERSCHIEDE IN DER TOPOGRAPHIE VON GLYKOSILIERUNGS -
REAKTIONEN IM GOLGI APPARAT
Biochemische Untersuchungen zum Ablauf der ver-
schiedenen N-Glykosilierungsreaktionen im Golgi
Apparat haben gezeigt, dass sie schrittweise durch
sequentiell tätige Glykosyltransferasen ausgeführt wer-
den. Über die Fraktionierung von zellulären Mem-
branen gelang es, die Aktivität diverser Glykosyl-
transferasen Membranfraktionen unterschiedlicher
Dichte zuzuordnen. Des Weiteren gelang es mittels
Immunelektronenmikroskopie verschiedene Glykosyl-
transferasen in unterschiedlichen Regionen des Golgi
Apparates nachzuweisen. Auf diesen Ergebnissen
beruhte das ursprüngliche Konzept der funktionellen
Unterteilung des Golgi Apparats in voneinander ge-
trennte Cis, mediale und Trans Subkompartimente. In
weiterführenden immunelektronenmikroskopischen
Untersuchungen zeigte sich, dass diese Subkomparti-
mente des Golgi Apparats nicht scharf voneinander
getrennt sind, sondern sich partiell überlappen. Zum
anderen gelang durch kombinierte Immungold und
Lektin-Gold Markierungen der Nachweis von Zelltyp-
abhängigen Unterschieden in der Anordnung von
Glykosilierungsreaktionen im Golgi Apparat.
Als Beispiel soll hier die Glykosilierungsreaktion
dienen, die zur Anheftung von _2,6 verknüpfter
Sialinsäure an Galaktosereste von N-Glykanen führt.
Die hierfür verantwortliche `-Galaktose _2,6 Sialyl-
transferase (ST6Gal-I) ist in Trans Zisternen des Golgi
Apparats von Becherzellen des Rattendickdarms nach-
weisbar (Abb. A). Erwartungsgemäß beginnt die Mar-
kierung mit einem goldmarkierten sialinsäurespezi-
fischen Lektin auch in Trans Golgi Zisternen (Abb. B).
Die Immungoldmarkierung für die Sialyltransferase in
den Schleimtröpfchen der Becherzellen ist durch prote-
olytisch abgespaltenes Enzym bedingt. Im Gegensatz zu
den Becherzellen war in den benachbarten absorptiven
Enterozyten die Markierung für die Sialyltransferase
(Abb. C) und für Sialinsäurereste (Abb. D) im Golgi
Apparat diffus verteilt. Eine derartige Zelltyp-ab-
hängige, unterschiedliche Verteilung im Golgi Apparat
von Becherzellen und absorptiven Enterozyten konnte
auch für die Blutgruppe A Transferase und ihr Produkt,
die Blutgruppe A Substanz, im menschlichen Dünn-
Das Zytoplasma: das sekretorische System
darmepithel nachgewiesen werden. Es ist hervorzu-
heben, dass beide Glykosilierungsreaktionen terminale
Glykosilierungsreaktionen bei der Synthese von
N-Glykanen und von O-Glykanen (siehe Abb. 25, 26
und 29) darstellen.
RER: raues endoplasmatisches Retikulum; TE: tran-
sitorisches Element des RER.
Literatur
Dunphy WG, Brands R, and Rothman JE (1985) Attachment of
terminal N-acetylglucosamine to asparagine-linked oligosaccha-
rides occurs in central cisternae of the Golgi stack. Cell 40: 463
Dunphy WG, Fries E, Urbani LJ, and Rothman JE (1981) Early
and late functions associated with the Golgi apparatus reside in
distinct compartments. Proc Natl Acad Sci USA 78: 7453
Goldberg DE, and Kornfeld S (1983) Evidence for extensive sub-
cellular organization of asparagine-linked oligosaccharide pro-
cessing and lysosomal enzyme phosphorylation. J Biol Chem 258:
3159
Hedman K, Pastan I, and Willingham MC (1986) The organelles
of the trans domain of the cell. Ultrastructural localization of
sialoglycoconjugates using Limax flavus agglutinin. J Histochem
Cytochem 34: 1069
Rabouille C, Hui N, Hunte F, Kieckbusch R, Berger EG, Warren,
G, and Nilsson T (1995) Mapping the distribution of Golgi
enzymes involved in the construction of complex oligosaccha-
rides. J Cell Sci 108: 1617
Roth J, and Berger EG (1982) Immunocytochemical localization
of galactosyltransferase in HeLa cells: codistribution with thi-
amine pyrophosphatase in trans-Golgi cisternae. J Cell Biol 93:
223
Roth J, Taatjes DJ, Lucocq JM, Weinstein J, and Paulson JC (1985)
Demonstration of an extensive trans-tubular network continuous
with the Golgi apparatus cisternal stack that may function in gly-
cosylation. Cell 43: 287
Roth J, Taatjes DJ, Weinstein J, Paulson JC, Greenwell P, and
Watkins WM (1986) Differential subcompartmentation of termi-
nal glycosylation in the Golgi apparatus of intestinal absorptive
and goblet cells. J Biol Chem 261: 14307
Weinstein J, UE L, McEntee K, PH L, and Paulson J (1987)
Primary structure of `-galactoside _2,6 sialyltransferase.
Conversion of membrane bound enzyme to soluble form by
cleavage of the N-terminal signal anchor. J Biol Chem 262: 17735
Vergrößerung: x 49,500 (A); x 52,000 (B); x 51,000 (C, D)
Abbildung 27 55

Sialyltransferase Sialinsäure

Schleimgranula Schleimgranula

Golgi Golgi

RER
TE
A B

Sialyltransferase Sialinsäure

trans Golgi trans Golgi

cis Golgi cis Golgi

C D
56
ZELLTYP-ABHÄNGIGE UNTERSCHIEDE IM AUFBAU VON GLYKANEN DER GLYKOPROTEINE
Glykosyltransferasen sind große Familien von En-
zymen. So sind gegenwärtig etwa 15 verschiedene
Sialyltransferasen bekannt, die alle CMP-Sialinsäure als
Donorsubstrat benutzen, um Sialinsäure kovalent an
verschiedene Akzeptoroligosaccharide zu transferieren.
Allerdings kann nicht nur der Aufbau des Akzeptor-
oligosaccharides variieren, sondern auch die Natur der
ketosidischen Bindung (_2,3, _2,8 oder _2,9), in der die
Sialinsäure vorliegt. Darin liegt eine der Ursachen für
die Diversität im Aufbau von N-Glykanen. Eine weitere
Ursache für die Diversität im Aufbau von N-Glykanen,
und auch von O-Glykanen, liegt in unterschiedlichen
zellulären Expressionsmustern von Glykosyltrans-
ferasen. Die CHO Zellen liefern ein eindrückliches
Beispiel für einen Zelltyp-spezifischen Sialogly-
kanaufbau, da sie nur Glykane mit _2,3- aber nicht mit
_2,6-verknüpfter terminaler Sialinsäure synthetisieren.
Ein Lektin, das spezifisch _2,6-verknüpfte Sialinsäure
erkennt, markiert somit nicht die Plasmamembran
(PM), den Golgi Apparat oder Lysosomen (Ly) der
CHO Zellen (Abb. A und B). Nach erfolgreicher
Transfektion kann mittels Immunelektronen-
mikroskopie die `-Galaktose-_2,6-Sialyltransferase im
Golgi Apparat der CHO Zellen nachgewiesen werden
(Abb. C) und mit der Lektin-Gold Technik _2,6-
verknüpfte terminale Sialinsäureste in der
Plasmamembran (PM in Abb. D), im Golgi Apparat und
in den Lysosomen (Abb. E).
Die Diversität im Aufbau von Glykanen muss vor
dem Hintergrund ihrer verschiedenen biologischen
Funktionen gesehen werden, wie beispielsweise der
Beeinflussung der Aktivität von Glykoproteinen, bei
immunologischen Reaktionen, von Zell-Zell und Zell-
Substrat-Interaktionen, bei der Eiweißqualitätskontrolle
und dem intrazellulären Routing. Die korrekte
Glykosilierung ist bei der Herstellung rekombinanter
Glykoproteine wichig. Nicht richtig glykosiliertes
rekombinantes Erythropoetin ist nicht aktiv. Deshalb
kann es notwendig sein, die Glykosilierungsmaschinerie
der zur Glykoproteinherstellung benutzten Wirtszellen
gentechnologisch so zu beeinflussen, dass normaler-
weise von ihnen nicht synthetisierte Glykane hergestellt
Das Zytoplasma: das sekretorische System
werden. Die genetische Manipulation der zellulären
Glykosylierung ist auch von Bedeutung bei der
möglichen Xenotransplantation von Schweineorganen.
Die durch die Anwesenheit von terminalen _1,3-
verknüpften Galaktoseresten verursachte hyperakute
Abstoßungsreaktion hat man durch die Inaktivierung
der _1,3-Galaktosyltransferase mittels homologer
Rekombination zu unterdrücken versucht. Zum
anderen wurden transgene Tiere erzeugt, bei denen eine
Fukosyltransferase kompetitiv die _1,3-Galaktosy-
lierung verhinderte.
RER: raues endoplasmatisches Retikulum.
Literatur
Chen CG, Fisicaro N, Shinkel TA, Aitken V, Katerelos M,
Vandenderen BJW, Tange MJ, Crawford RJ, Robins AJ, Pearse MJ,
and Dapice AJF (1996) Reduction in Gal-alpha 1,3-Gal epitope
expression in transgenic mice expressing human H-transferase.
Xenotransplantation 3: 69
Galili U (1993) Evolution and pathophysiology of the human
natural anti-_-galactosyl IgG(anti-Gal) antibody. Springer Semin
Immunopathol 15: 155
Kitagawa H, and Paulson JC (1994) Differential expression of five
sialyltransferase genes in human tissues. J Biol Chem 269: 17872
Koike C, Kannagi R, Takuma Y, Akutsu F, Hayashi S, Hiraiwa N,
Kadomatsu K, Muramatsu T, Yamakawa H, Nagai T, et al (1996)
Introduction of alpha(1,2)-fucosyltransferase and its effect on
alpha-Gal epitopes in transgenic pig. Xenotransplantation 3: 81
Lee EU, Roth J, and Paulson JC (1989) Alteration of terminal gly-
cosylation sequences on N-linked oligosaccharides of Chinese
hamster ovary cells by expression of `-galactoside-_2,6 sialyl-
transferase. J Biol Chem 264: 13848
Osman N, McKenzie IFC, Ostenried K, Ioannou YA, Desnick RJ,
and Sandrin MS (1997) Combined transgenic expression of
alpha-galactosidase and alpha 1,2-fucosyltransferase leads to
optimal reduction in the major xenoepitope Gal alpha(1,3)Gal.
Proc Natl Acad Sci USA 94: 14677
Paulson J, Weinstein J, and Schauer A (1989) Tissue specific
expression of sialyltransferases. J Biol Chem 264: 10931
Rosenberg A (1995) Biology of the sialic acids. New York: Plenum
Press
Taniguchi N, Honke K, and Fukuda M (2002) Handbook of gly-
cosyltransferases and related genes. Tokyo Berlin: Springer
Vergrößerung: x 45,000 (A); x 55,500 (B); x 83,00 (C); x 51,000
(D); x 79,000 (E)
Abbildung 28 57

_ 2,6 Sialinsäure _ 2,6 Sialinsäure

PM Ly
Ly

Nukleus RER Golgi

A B

_ 2,6 Sialyltransferase _ 2,6 Sialinsäure

Golgi

cis

Ly
C

_ 2,6 Sialinsäure
Golgi
PM

cis

Nukleus
D E
58
DIE TOPOGRAPHIE DER BIOSYNTHESE VON SERIN -/THREONIN-VERKNÜPFTEN GLYKANEN
Viele Glykoproteine besitzen nicht nur Asparagin-
verknüpfte Oligosaccharide (N-Glykane), sondern auch
Serin- oder Threonin-verknüpfte Oligosaccharide (O-
Glykane). Die hier besprochenen O-Glykane besitzen
N-Azetylgalaktosamin als Verbindungszucker in _-gly-
kosidischer Bindung zu Serin oder Threonin. Andere
O-Glykane weisen Xylose, Fukose oder N-Azetyl-
glukosamin als Verbindungszucker auf. Muzine des
Verdauungs-, Atmungs- und Urogenitaltrakts sind reich
an Glykoproteinen mit O-Glykanen, die Wasser und
Ionen binden, als Gleit- und Transportmittel funktio-
nieren und gegen pathogene Mikroorganismen schützen.
Die Biosynthese der O-Glykane beginnt im Cis Golgi
Apparat und nicht wie die der N-Glykane im endoplas-
matischen Retikulum. Die Abbildungen A bis C illus-
trieren diesen Vorgang mittels Immungold und Lektin-
Gold Markierungen in ultradünnen Gefrierschnitten
von schleimproduzierenden Zellen der Submaxillar-
drüse des Schweins. Ein Antikörper, der ausschließlich
mit dem nicht glykosilierten Apomuzin reagiert,
markiert das endoplasmatische Retikulum (RER) und
Prä-Golgi Transportintermediäre (pGI), aber nicht den
Golgi Apparat (Abb. A). Hingegen markiert ein
Antikörper gegen die Polypeptid-GalNAc Transferase,
die die initiale O-Glykosilierungsreaktion ausführt,
weder das RER noch die pGI, wohl aber den Cis Golgi
Apparat (Abb. B). In Übereinstimmung hiermit steht
das Resultat der Lektin-Gold Markierung für Serin-
oder Threonin-gebundenes N-Azetylgalaktosamin, die
im Cis Golgi Apparat beginnt (Abb. C). Alle nachfolgen-
den O-Glykosilierungsreaktionen finden ebenfalls im
Golgi Apparat statt.
Sowohl die Biosynthese als auch der Aufbau der O-
Glykane mit N-Azetylgalaktosamin als Verbindungs-
zucker zu Serin oder Threonin sind wesentlich einfa-
cher als die der N-Glykane. Es wird weder ein Lipid-
verknüpftes Glykan synthetisiert, noch finden Trimm-
reaktionen an den O-Glykanen statt. Weiterhin ist keine
Konsensussequenz für die O-Glykosilierung bekannt.
Wahrscheinlich hat das seinen Grund in der Vielzahl
von bekannten Polypetid-GalNAc Transferasen, die sich
in ihrer Spezifität für Aminosäuresequenzen unterschei-
den. Die Biosynthese der O-Glykane läuft als eine
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Aufeinanderfolge klassischer Glykosilierungsreaktionen
ab, die vorwiegend zur Bildung von bi-antennären
Glykanen führen. Solche einfach strukturierten
O-Glykane sind typische Komponenten von Muzinen
menschlicher Karzinome. Beispiele hierfür sind das
Tn-Antigen (Serin- oder Threonin-gebundenes
N-Azetylgalaktosamin) und seine sialylierte Form
(Sialinsäure _2,6-N-Azetylgalaktosamin gebunden an
Serin oder Threonin) oder das Thomsen-Friedenreich
Antigen (Galaktose `1,3 N-Azetylgalaktosamin gebun-
den an Serin oder Threonin). Der Nachweis dieser
O-Glykane ist in bestimmten menschlichen Karzi-
nomen von prognostischer Bedeutung für den klini-
schen Verlauf.
Sterne: Schleimtröpfchen.
Literatur
Brockhausen I (1999) Pathways of O-glycan biosynthesis in can-
cer cells. Biochim Biophys Acta 1473: 67
Clausen H, and Bennett EP (1996) A family of UDP-GalNAc:
polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferases control the initi-
ation of mucin-type O-linked glycosylation. Glycobiology 6: 635
Deschuyteneer M, Eckhardt AE, Roth J, and Hill RL (1988) The
subcellular localization of apomucin and nonreducing terminal
N-acetylgalactosamine in porcine submaxillar glands. J Biol
Chem 263: 2452
Elhammer AP, Kezdy FJ, and Kurosaka A (1999) The acceptor
specificity of UDP-GalNAc : polypeptide N-acetylgalactosaminyl-
transferases. Glycoconjugate J 16: 171
Hagen KGT, Fritz TA, and Tabak LA (2003) All in the family: the
UDP-GalNAc:polypeptide N-acetylgalactosaminyltransferases.
Glycobiology 13: 1R
Roth J, Wang Y, Eckhardt AE, and Hill RL (1994) Subcellular
localization of the UDP-N-acetyl-D-galactosamine: polypeptide
N-acetylgalactosaminyltransferase-mediated O-glycosylation
reaction in the submaxillary gland. Proc Natl Acad Sci USA 91:
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Strahl Bolsinger S, Gentzsch M, and Tanner W (1999) Protein
O-mannosylation. Biochim Biophys Acta 1426: 297
Taylor M, and Drickamer K (2003) Introduction to glycobiology.
Oxford New York Oxford: University Press
Varki A, Cummings R, Esko J, Freeze H, Hart G, and Marth J
(1999) Essentials of glycobiology. Cold Spring Harbor New York:
Cold Spring Harbor Laboratory Press
Vergrößerung: x 60,000 (A); x 76,000 (B); x 86,000 (C)
Abbildung 29 59

Apomuzin
Golgi

pGI

RER

Polypeptid-GalNAc Transferase
*
*
Golgi

RER pGI

Polypeptid-gebundenes GalNAc

Golgi

C TE
60
GOLGI APPARAT UND TGN – BEDEUTUNG FÜR SEKRETION UND ENDOZYTOSE
Der Golgi Apparat ist nicht nur eine Schaltzentrale ent-
lang der Sekretionswege, sondern spielt auch im
Zusammenhang mit der Endozytose eine wichtige Rolle
(siehe Abb. 43). Endozytosewege von der Plasma-
membran zum Golgi Apparat, die frühe und späte
Endosomen einbinden, wurden in verschiedenen Zellen
beschrieben. Für internalisiertes Material ist die trans-
Seite Importregion in den Golgi Apparat und der
Transport scheint von der trans- zur cis-Seite gerichtet
zu sein, entgegengesetzt dem Transport sekretorischer
Moleküle, die an der cis-Seite in den Golgi Apparat ein-
treten und von cis nach trans transportiert werden
(siehe Abb. 21–23). Sekretorische und internalisierte
Moleküle können innerhalb derselben Golgi Kom-
partimente aufeinandertreffen.
Die Aufnahme rezirkulierender Membranproteine
und internalisierter Moleküle in den Golgi Apparat
dient Veränderungs- und Wiederherstellungsprozessen,
zum Beispiel der Komplettierung der Zuckerketten.
Kenntnisse über die Einbindung des Golgi Apparats in
Endozytosewege sind auch im Zusammenhang mit dem
retrograden Transport von Toxinen, zum Beispiel
Rizinus-, Pertussis- und Choleratoxin, von besonderer
Bedeutung. Die Toxine müssen zum Teil über den Golgi
Apparat transportiert werden, um zurück in das endo-
plasmatische Retikulum und Zytosol zu gelangen. In
einigen Fällen wurde gezeigt, dass eine Zerlegung des
Golgi Apparats vor Intoxikation schützt.
Die beiden Bilder zeigen den Golgi Apparat im
Zusammenhang mit Sekretion (Abb. A) und Endo-
zytose (Abb. B). Sekretorische und endozytische
Moleküle sind sowohl im trans-Golgi Netzwerk (TGN),
als auch in den gestapelten Zisternen nachweisbar. Mit
Immunogold-Markierung ist in Abb. A sekretorisches
Albumin in einer Rattenleberzelle in allen Zisternen von
der cis- zur trans-Seite und auch im TGN (Pfeile)
lokalisiert. Das TGN bildet ein ausgeprägtes Netzwerk,
das mit trans-Golgi Zisternen in Verbindung steht. Es ist
deutlich erkennbar, dass das TGN aus zwei zusammen-
hängenden Teilen besteht, wobei ein Teil in den
Zisternenstapel integriert ist und der andere ein
Netzwerk abseits von den gestapelten Golgi Zisternen
bildet (siehe auch Abb. 31–32). Erweiterte End-
abschnitte entsprechen absprossenden Sekretvesikeln.
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Abbildung B zeigt eine Beta-Zelle aus der Bauch-
speicheldrüse einer Ratte nach Internalisation von
Ferritin-markiertem Concanavalin A (ConA). Die
Markierung ist am intensivsten in der letzten trans-
Golgi Zisterne und in zwei auffälligen TGN-Abschnitten
mit einem ausgeprägten „Stachelsaum“ (Pfeile, siehe
auch Abb. 41), ist aber auch in medialen Golgi Zisternen
nachweisbar und findet sich außerdem in zahlreichen
tubulo-vesikulären Strukturen in der Nachbarschaft.
Die Untersuchungskinetik zeigte, dass der Golgi
Apparat mit zunehmender ConA-Internalisationszeit
vermehrt in die Endozytose einbezogen wird. Während
nach 1 Stunde die Golgi Zisternen nur vereinzelt
markiert waren, zeigten nach 3 Stunden 10% der Golgi
Stapel ConA-Aufnahme und 65% der Stapel waren nach
14 Stunden markiert.
Ly – Lysosomen, M – Mitochondrien
Literatur
Griffiths G, and Simons K (1986) The trans-Golgi network: sort-
ing at the exit site of the Golgi complex. Science 234: 438
Majoul IV, Bastiaens PI, and Söling HD (1996) Transport of an
external Lys-Asp-Glu-Leu (KDEL) protein from the plasma
membrane to the endoplasmic reticulum: studies with cholera
toxin in Vero cells. J Cell Biol 133: 777
Mallard F, Antony C, Tenza D, Salamero J, Goud B, and Johannes
L (1998) Direct pathway from early/recycling endosomes to the
Golgi apparatus revealed through the study of Shiga toxin B-frag-
ment transport. J Cell Biol 143: 973
Pavelka M, Ellinger A, Debbage P, Loewe C, Vetterlein M, and
Roth J (1998) Endocytic routes to the Golgi apparatus.
Histochem Cell Biol 109: 555
Roth J, Taatjes D, Lucocq J, Weinstein J, and Paulson J (1985)
Demonstration of an extensive trans-tubular network continuous
with the Golgi apparatus cisternal stack that may function in gly-
cosylation. Cell 43: 287
Sandvig K, and van Deurs B (2000) Entry of ricin and Shiga toxin
into cells: molecular mechanisms and medical perspectives.
EMBO J 19: 1
Volz B, Orberger G, Porwoll S, Hauri H-P, and Tauber R (1995)
Selective reentry of recycling cell surface glycoproteins to the
biosynthetic pathway in human hepatocarcinoma HepG2 cells. J
Cell Biol 130: 537
Vergrößerung: x 45,000 (A), x 45,000 (B)
Abbildung 30 61

Ly

M
cis Golgi
A

M
Ly

cis Golgi
B
62
GOLGI APPARAT, TGN UND TRANS-GOLGI-ER
Der Golgi Apparat mit seinem komplexen Zisternen-
system ist ein außerordentlich dynamisches Organell,
das seine Form und Architektur Hand in Hand gehend
mit dem kontinuierlichen Transportfluss und Verkehr, in
den seine Subkompartimente eingebunden sind, verän-
dert. Chemische Fixierung ist zu träge, um die raschen
Gestaltsänderungen zu erfassen. Auch verschleiern bei
hoher Vergrößerung die durch chemische Fixierung
hervorgerufenen Artefakte vielfach den kritischen Blick
auf die Strukturen. Diesen Problemen und
Beschränkungen kann durch die Verwendung von
Kryotechniken, insbesondere durch ultraschnelles
Immobilisieren der Zellen und ihrer Membranen und
Kompartimente bei Verwendung der Hochdruck-
gefriertechnik, begegnet werden. Dabei wird die
Zelldynamik in weniger als einer halben Sekunde
gestoppt. Durch Hochdruckkryofixierung wird dadurch
sowohl die zeitliche Auflösung der dynamischen
Prozesse in der Zelle, als auch durch Vermeidung von
Fixierungsartefakten die örtliche Auflösung der
Ultrastrukturen beträchtlich erhöht. Dies erlaubt
Einblicke in die Zellen, die dem in vivo-Zustand
wesentlich näher kommen, als diejenigen unter chemi-
scher Fixierung.
Die Abbildungen A und B zeigen Golgi Zisternen-
stapel in HepG2 Hepatomzellen, die auf kohlebe-
dampften Saphirgläsern gezüchtet, in der Hochdruck-
maschine kryoimmobilisiert, anschließend gefriersub-
stituiert und in Epon eingebettet wurden. Die Stapel
lassen in beiden Abbildungen eine klare Architektur und
Endozytose
EE
LE
Ly
Sekretion
trans - Golgi ER
TGN
trans
TGN
trans
Golgi Golgi
ER
cis
pGI
ER
Das Zytoplasma: das sekretorische System
deutliche Unterschiede der cis- und trans-Seiten er-
kennen. Auch sind deutliche Unterschiede an den
Membranen der Zisternen sichtbar. Während die
Membranen der medialen Zisternen mit einer deutlich
3-lamellären Struktur „ausgefranst“ erscheinen, stehen
im Gegensatz dazu die klar gezeichneten Membran-
profile des trans-Golgi Netzwerks (TGN), das in den
Hepatomzellen aus 2 Teilen besteht: Der eine Teil ist in
den Zisternenstapel integriert und entspricht der letzten
Zisterne an der trans-Seite (Pfeilköpfe in Abb. A und B);
der andere Teil zieht vom Stapel weg, verzweigt sich und
zeigt zahlreiche Vesikelknospen (TGN in Abb. A und B).
In enger Nachbarschaft zu beiden TGN-Abschnitten
liegen Zisternen des endoplasmatischen Retikulums
(Pfeile). Dieses trans-Golgi-ER ist weitflächig mit dem
TGN assoziiert und Ribosomen sind nur an der Golgi-
abgewandten Seite angedockt.
Das differenzierte Bild der Golgi Zisternen und des
TGN, das sich nach Kryoimmobilisierung bietet, unter-
streicht die funktionellen Spezialisierungen dieser
Kompartimente, die sowohl in das sekretorische System
als auch in die Endozytosewege an zentraler Stelle einge-
bunden sind.
Die Zeichnung zeigt eine Zusammenfassung der
beteiligten Kompartimente und Transportwege im
Bereich der Golgi Stapel. Modelle zum Transport über
den Golgi Apparat und die in Rede stehenden
Mechanismen werden im Text zu Abbildung 36 ange-
sprochen.
pGI – Prä-Golgi Intermediäre, Ly – Lysosom, EE –
„Frühes“ (early) Endosom, LE – „spätes“ (late) Endosom
Literatur
Griffiths G and Simons K (1986) The trans Golgi network:
Sorting at the exit site of the Golgi complex. Science 234: 438
Hess MW, Müller M, Debbage PL, Vetterlein M, and Pavelka M
(2000) Cryopreparation provides new insight into effects of
Brefeldin A on the structure of the HepG2 Golgi apparatus.
J Struct Biol 130: 63
Mogelsvang S, Marsh BJ, Ladinsky MS, and Howell KE (2004)
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Moor H (1987) Theory and practice of high pressure freezing.
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brecht RA, and Zierold K, Eds). Berlin Heidelberg: Springer,
pp 175–191,
Vergrößerung: x 74,000 (A), x 74,000 (B)
Abbildung 31 63

trans Golgi

TGN

cis Golgi

trans Golgi

TGN

cis Golgi

B
64
GOLGI APPARAT, TGN UND TRANS-GOLGI-ER: KIPPSERIE
Viele Details des komplexen, dynamischen Golgi Mem-
bransystems mit seinen vielgestaltigen Subkomparti-
menten, Netzwerken, fein dimensionierten, oft tempo-
rären Membrankontinuitäten, dynamischen Transform-
ationen und Fusionsprozessen werden leicht übersehen,
wenn sich die Untersuchungen im Elektronen-
mikroskop auf einzelne Dünnschnitte beschränken. Erst
die Analyse von Semidünnschnitten, dicken Schnitten
und Schnittserien unter Verwendung eines euzen-
trischen Goniometers mit kontrollierter Kippung
erlaubt, feinste Architekturdetails herauszuarbeiten.
Eine revolutionär neue Sicht in den Innenraum der
Zellen und auf Moleküle in ihrer natürlichen Umge-
bung hat die Entwicklung der Elektronentomographie
in Kombination mit Kryotechnologien ermöglicht. So
konnte auch der Blick auf die enorme Komplexität des
Golgi Apparats wesentlich erweitert werden.
Die Abbildungen A, B und C zeigen eine Kippserie
aus einem Schnitt durch den Golgi Apparat einer
hochdruckgefrorenen HepG2 Hepatomzelle bei Kipp-
winkeln von minus 43°, plus 3° und plus 33°. Die Serie
macht deutlich, wie viele Details der komplexen Struk-
turen nicht zur Darstellung gekommen wären, wäre der
Schnitt unter nur einem Kippwinkel untersucht wor-
den. Besonders hingewiesen sei auf die Exportregion an
einem transitorischen Element des endoplasmatischen
Retikulums (TE) und auf die vielgestaltigen Strukturen
der prä-Golgi Transportintermediären (pGI) links im
Bild. Ebenso kommen zahlreiche Details im Bereich der
cis- und trans-Golgi Architektur zur Darstellung. Die
kleinen Vesikelchen mit einem dichten zytoplasma-
Das Zytoplasma: das sekretorische System
tischen Coat in den Randbereichen von cis- und medi-
alen Zisternen entsprechen COP I-Vesikelknospen
(Pfeilspitzen, COP I-Coat Protein I, siehe auch Abb. 21).
Das trans-Golgi-Netzwerk wird in enger Nachbarschaft
von trans-Golgi-ER-Zisternen (Pfeile) begleitet.
Die Zeichnung zeigt eine Rekonstruktion eines Golgi
Apparat Stapels aus einer Hauptzelle des Neben-
hodengangs der Ratte (übernommen von Hermo and
Smith, 1998), in dem eine kompakte Zone gestapelter
Zisternen (Säckchen, S) und eine Verbindungszone
(intersakkuläre Zone, IS) dargestellt sind.
An der cis-Golgi Seite zeigt das endoplasmatische
Retikulum (sER) Knospung von Vesikeln, die prä-Golgi
Transportintermediäre (pGI) zwischen ER und der
cis-Golgi-Region bilden. Im Golgi Stapel liegen acht
abgeflachte Zisternen an den beiden Seiten zwischen
cis-Golgi und trans-Golgi Netzwerk (CGN und TGN).
Perforierte Regionen in den Zisternen an der cis-Seite
bilden Einschnitte im Stapel (w – „wells“), wo kleine
Vesikel (v) besonders zahlreich sind. An der trans-Seite
ist spärlich granuliertes endoplasmatisches Retikulum
(sER) den trans-Golgi Zisternen und dem TGN eng
benachbart. Die letzte Zisterne im Stapel ist ausgeprägt
fenestriert und erweiterte Stellen im TGN (Sternchen)
weisen auf die Bildung von Prosekretgranula hin. Durch
eine mögliche TGN-Fragmentierung entstehen Sekret-
granula (offener Stern), tubuläre (T) und vesikuläre
Bruchstücke (v), und kompaktere TGN-Reste (RTGN).
Die ausgeprägte trans-Golgi-ER Nachbarschaft, wie
sie in der Zeichnung gezeigt wird und auch in den
Bildern der Kippserie sehr deutlich sichtbar ist, wird mit
einem möglichen nicht-vesikulären ER-TGN Lipid-
transfer in Verbindung gebracht.
Literatur
Baumeister W (2004) Mapping molecular landscapes inside cells.
Biol Chem 385: 865
Hermo L, and Smith CE (1998) The structure of the Golgi appa-
ratus: a sperm’s eye view in principal epithelial cells of the rat epi-
didymis. Histochem Cell Biol 109: 431
Marsh BJ, Mastronarde DN, Buttle KF, Howell KE, and
McIntosh JR (2001) Organellar relationships in the Golgi region
of the pancreatic beta cell line, HIT-T15, visualized by high reso-
lution electron tomography. Proc Natl Acad Sci USA 98: 2399
McIntosh R, Nicastro D, and Mastronarde D (2005) New views of
cells in 3D: an introduction to electron tomography. Trends Cell
Biol 15: 43
Munro S (2003) Earthworms and lipid couriers. Nature 426: 775
Vergrößerung: x 62,000 (A), x 62,000 (B), x 62,000 (C)
Abbildung 32 65

-43˚
cis Golgi

pGI

trans Golgi
A TE

+3˚
cis Golgi

pGI

TE
trans Golgi
B

+33˚

cis Golgi

pGI

TE
trans Golgi
C
66
BREFELDIN A -VERURSACHTE DISSOZIATION DES GOLGI APPARATS
Brefeldin A (BFA) gehört zu den am häufigsten verwen-
deten Substanzen, wenn es darum geht, in die
Organisation und die Funktionen des Golgi Apparats
gezielt einzugreifen. Es handelt sich um eine aus dem
Pilz Penicillium brefeldianum isolierte Substanz, die gut
charakterisiert ist. Über Interaktion mit Guanin-
nukleotid-Austauschfaktoren hemmt BFA die Akti-
vierung von ADP-Ribosylierungsfaktoren und greift
damit in grundlegende Golgi Apparat Funktionsabläufe
ein. Dazu gehört die Rekrutierung von Coat-Proteinen
an der zytoplasmatischen Seite der Membranen ebenso,
wie die Bindung Lipid-modifizierender Enzyme. BFA
hemmt die Bildung von COP I-Vesikeln (COP I – coat
protein I, siehe Abb. 21), die am Golgi Apparat und im
Bereich der prä-Golgi Intermediären gebildet werden
und denen antero- und retrograde Transport-
funktionen, aber auch morphogenetische Aufgaben
zugeschrieben werden. Nach BFA-Verabreichung zerfällt
der Golgi Apparat innerhalb weniger Minuten und die
im Golgi Apparat gestapelten Zisternen formen sich in
ein tubuläres Netzwerk um. Aus der Golgi Region wach-
sen lange Tubuli aus. Sowohl endogene Golgi Moleküle,
wie zum Beispiel Zuckerketten-modifizierende Golgi
Enzyme, als auch solche Moleküle, die über den Golgi
Apparat transportiert werden, wie zum Beispiel sekre-
torische Proteine, werden in das endoplasmatische
Retikulum rückverlagert.
Abbildung A zeigt den Golgi Apparat perinukleär in
einer HepG2 Hepatomzelle nach Hochdruckgefrier-
immobilisierung mit allen seinen Charakteristika.
Polymorphe Membrankompartimente bilden ein kom-
plexes Konvolut an der cis-Seite. Vesikel mit einem
feinen zytoplasmatischen Coat hängen an den Zister-
nenrändern (Pfeilköpfe). An der trans-Seite dominiert
das ausgeprägte trans-Golgi Netzwerk (TGN) und
Membranen des endoplasmatischen Retikulums (Pfeile)
sind dem TGN angelagert und schieben sich zwischen
trans-Golgi Zisternen und TGN. Die kleinen Vesikel mit
dem dichten Coat (Pfeilköpfe) entsprechen vermutlich
COP I-Vesikeln, denen Transportfunktion innerhalb der
Golgi Stapel und zurück zum ER und, in einem anderen
Konzept, auch eine morphogenetische Rolle für die
Organisation des Golgi Apparats zugeschrieben wird.
Durch Hochdruckkryoimmobilisierung mit der im
Vergleich zur chemischen Fixierung wesentlich
verbesserten zeitlichen Auflösung (siehe Abb. 31 und
Das Zytoplasma: das sekretorische System
32) wurde deutlich, dass die durch BFA induzierte
Umformung des Golgi Apparats in charakteristischen
Schritten erfolgt. Schon 30 Sekunden nach BFA-
Applikation verschwinden die Coats von den Membra-
nen, während der Zerfall der Golgi Stapel erst nach
90–120 Sekunden eintritt. Zu diesem Zeitpunkt beginnt
die Umformung in Tubuli und Netzwerke (siehe
Abb. 34). Nach 3–5 Minuten sind gestapelte Golgi
Zisternen nicht mehr sichtbar.
In Abbildung B ist in einer Hepatomzelle das peri-
nukleolär gelegene Zytozentrum mit einem Zentriol (Z)
5 Minuten nach BFA-Applikation zu sehen. An Stelle
der gestapelten Golgi Zisternen, die komplett ver-
schwunden sind, durchziehen auffällige, zum Teil auch
verzweigte, Membrantubuli das Zytoplasma. Große
Vakuolen mit auffällig dicken Membranen und intralu-
minalen Vesikeln zeigen Charakteristika von multi-
vesikulären Endosomen (siehe Abb. 34 und 42).
Literatur
Dinter A, and Berger EG (1998) Golgi-disturbing agents.
Histochem Cell Biol 109: 571
Hess MW, Müller M, Debbage PL, Vetterlein M, and Pavelka M
(2000) Cryopreparation provides new insight into Brefeldin A-
effects on the structure of the HepG2 Golgi apparatus.
J Struct Biol 130: 63
Klausner RD, Donaldson JG, and Lippincott-Schwartz J (1992)
Brefeldin A: insights into the control of membrane traffic and
organelle structure. J Cell Biol 116: 1071
Lippincott-Schwartz J, Yuan L, Tipper C, Amherdt M, Orci L, and
Klausner RD (1991) Brefeldin A’s effects on endosomes, lyso-
somes, and TGN suggests a general mechanism for regulating
organelle structure and membrane traffic. Cell 67: 601
Niu T-K, Pfeifer AC, Lippincott-Schwartz J, and Jackson CL
(2005) Dynamics of GFB1, a Brefeldin A-sinsitive Arf1 exchange
factor at the Golgi. Mol Biol Cell 16: 1213
Pavelka M, and Ellinger A (1993) Early and late transformations
occurring at organelles of the Golgi area under the influence of
Brefeldin A. An ultrastructural and lectinocytochemical study.
J Histochem Cytochem 41: 1031
Wagner M, Rajasekaran AK, Hanzel DK, Mayor S, and Rodriguez-
Boulan E (1994) Brefeldin A causes structural and functional
alterations of the trans-Golgi network of MDCK cells. J Cell Sci
107: 933
Wood SA, Park JE, and Brown WJ (1991) Brefeldin A causes a
microtubule-mediated fusion of the trans-Golgi network and
early endosomes. Cell 67: 591
Vergrößerung: x 44,000 (A), x 27,000 (B)
Abbildung 33 67

Golgi Region

cis Golgi

TGN

trans Golgi

Golgi Region - Brefeldin A

B
68
BREFELDIN A -VERURSACHTE BILDUNG VON MEMBRANTUBULI
Die Veränderungen des Golgi Apparats und trans-Golgi
Netzwerks (TGN) setzen 90–120 Sekunden nach
Verabreichung von Brefeldin A (BFA) ein, nachdem
bereits vorher, nach 30–60 Sekunden BFA-Behandlung,
die zytoplasmatisch orientierten Coats von den
Membranen verschwunden sind. BFA hemmt die
Rekrutierung von Coat-Proteinen an der zytoplasma-
tischen Seite der Membranen und verhindert die
Bildung von COP I-Vesikeln. Die Stapel der Golgi
Zisternen verlieren ihre differenzierte Organisation und
sind nach kurzer Zeit nicht mehr erkennbar. Die Golgi
Membrankompartimente werden in Netzwerke umge-
formt und lange Tubuli beginnen aus der Golgi Region
auszuwachsen. Nach 3–5 Minuten ist der Golgi Apparat
in seiner charakteristischen Ausprägung verschwunden.
Stattdessen dominiert ein Netzwerk von Membran-
tubuli, das mit Membranen des endoplasmatischen
Retikulums eng verwoben ist. Die Membrantubuli
bilden stellenweise knäuelähnliche Strukturen, die im
Zytoplasma BFA-behandelter Zellen als kleine, glome-
rulusartige Organellen erkennbar sind (siehe Abb. 35
und 36).
Alle drei Abbildungen zeigen Ausschnitte aus dem
Zytoplasma hochdruckimmobilisierter HepG2 Hepa-
tomzellen, in den Abbildungen A und C nach 3 Minuten
und in Abbildung B nach 5 Minuten BFA-Behandlung.
Gestapelte Golgi Zisternen sind nicht erkennbar. Die
BFA-induzierten Membrantubuli, die ausgedehnte Be-
reiche des Zytoplasmas beherrschen, zeigen unter-
schiedliche Dimensionen und auch deutliche Unter-
schiede im Aussehen ihrer Membranen. Dies entspricht
ihrer unterschiedlichen Abstammung. BFA verursacht
nicht nur eine Tubulisierung des Golgi Apparats und
trans-Golgi Netzwerks (TGN). Auch Endosomen und
Lysosomen wandeln sich in Tubuli um. Die volu-
minösen Tubuli mit den distinkten dicken Membranen,
wie sie in Abbildung A gezeigt werden, sind stellenweise
dilatiert und enthalten intraluminale Vesikelchen, wie
Das Zytoplasma: das sekretorische System
sie für endosomale multivesikuläre Organellen bekannt
sind (siehe Abb. 42). Sie unterscheiden sich von den
weniger voluminösen Tubuli, wie sie in den
Abbildungen B und C dargestellt sind. Diese sind mit
den ausgedehnten Membrannetzen in Verbindung
(Abb. C), die kurz nach BFA-induzierter Zerlegung des
Golgi Apparats entstehen. Der funktionellen Interaktion
entsprechend verlaufen die BFA-induzierten Membran-
tubuli (Abb. B, Pfeilkopf) vielfach parallel und in enger
Nachbarschaft zu Mikrotubuli des Zytoskeletts (Abb. B,
Pfeil).
Die aus der Golgi Region und dem TGN auswach-
senden Tubuli werden auch mit dem Rücktransport von
Golgi Molekülen in das endoplasmatische Retikulum in
Zusammenhang gebracht. Andererseits ist in BFA-
behandelten Zellen auf Grund der gestörten COP I-
Coat Bildung der Transport über COP I-Vesikel unter-
bunden.
Literatur
Hess MW, Müller M, Debbage PL, Vetterlein M, and Pavelka M
(2000) Cryopreparation provides new insight into Brefeldin
A-effects on the structure of the HepG2 Golgi apparatus.
J Struct Biol 130: 63
Knoll G, Verkleij AJ, and Plattner H (1987) Cryofixation of
dynamic processes in cells and organelles. In: Cryotechniques in
biological electron microscopy (Steinbrecht RA, and Zierold K,
eds). Berlin Heidelberg: Springer, pp 258
Lippincott-Schwartz J, Yuan L, Tipper C, Amherdt M, Orci L, and
Klausner RD (1991) Brefeldin A´s effects on endosomes, lyso-
somes, and TGN suggests a general mechanism for regulating
organelle structure and membrane traffic. Cell 67: 601
Sciacky N, Presley J, Smith C, Zaal KJ, Cole N, Moreira JE,
Terasaki M, Siggia E, and Lippincott-Schwartz J (1997) Golgi
tubule traffic and the effects of Brefeldin A visualized in living
cells. J Cell Biol 139: 1137
Wood SA, Park JE, and Brown WJ (1991) Brefeldin A causes a
microtubule-mediated fusion of the trans-Golgi network and
early endosomes. Cell 67: 591
Vergrößerung: x 48, 000 (A), x 50,000 (B), x 46,000 (C)
Abbildung 34 69

B C
70 Das Zytoplasma: das sekretorische System

BREFELDIN A : EINFLUSS AUF DEN RETROGRADEN TRANSPORT INTERNALISIERTER LEKTINE

Brefeldin A (BFA)-Behandlung schützt Zellen vor der
Wirkung einer Reihe von Toxinen. Vermutlich steht das
im Zusammenhang mit dem BFA-induzierten Zusam-
menbruch des Golgi Apparats (GA), womit einer der
retrograden Wege von der Plasmamembran zum endo-
plasmatischen Retikulum (ER) unterbrochen wird
(siehe Abb. 43).
Brefeldin A kann aber in diesem Zusammenhang
nicht nur eingesetzt werden, um retrograde Trans-
portwege zu unterbrechen. Mit Hilfe von BFA kann ret-
rograder Transport in das endoplasmatische Retikulum
auch induziert und kontrolliert werden. Voraussetzung
dafür ist die genaue Kenntnis der dynamischen Pro-
zesse, die sich während des Transports internalisierter
Moleküle in den Golgi Apparat abspielen und die
Einhaltung eines präzisen Zeitplans für die BFA-
Applikation. Detaillierte Untersuchungen mit Peroxi-
dase-markiertem Weizenkeimagglutinin (WGA) in
HepG2 Hepatomzellen haben gezeigt, dass die Auf-
nahme internalisierter Moleküle in den Golgi Apparat
in einem komplexen Mehrstufenprozess abläuft (siehe
Zeichnung und Abb. 42 und 43).
Vesikuläres Stadium
GA
Im Stadium I („Vesikuläres Stadium“) akkumulieren
vesikuläre Endosomen in der trans-Golgi Region. Im
Stadium II („TGN Stadium“) wird ein ausgedehntes
endozytisches trans-Golgi Netzwerk gebildet, von dem
sich Teile an trans-Golgi Zisternen anlagern und in den
Golgi Stapel integriert werden. Im Stadium III („Golgi
Stadium“) finden sich große Mengen des interna-
lisierten WGA auch in den Lumina der gestapelten Golgi
Zisternen.
Der Zeitpunkt der BFA-Applikation bestimmt den
weiteren Weg des internalisierten Lektins. Über den
Zeitpunkt der BFA-Applikation kann gesteuert werden,
ob internalisiertes WGA in das ER aufgenommen wird
oder nicht (jeweils rechter Teil der Zeichnung). BFA
Behandlung während der Stadien I oder II, wenn sich
internalisiertes WGA hauptsächlich in vesikulären
Endosomen oder im endozytischen TGN befindet, führt
zu Transformation und Tubulisierung des Golgi
Apparats (siehe Abb. 34), jedoch zu keiner wesentlichen
Aufnahme von WGA in das ER (oberer und mittlerer
Teil der Zeichnung). Wird BFA während des Stadiums
III, wenn sich große WGA-Mengen in den Lumina der
gestapelten Golgi Zisternen befinden, verabreicht, wer-
den nach BFA-induzierter Golgi Dissoziation gleichzei-
tig mit der Rückverlagerung von Golgi Kompartimen-
ten in das ER auch große Mengen von internalisiertem
WGA in das ER aufgenommen (unterer Teil der
Zeichnung).
Diese Situation ist in der Abbildung einer BFA-

pGI
G behandelten Hepatomzelle dargestellt. Die Lumina fast
ER
aller ER-Zisternen, einschließlich der perinukleären
ER
Zisterne (Doppelpfeil), zeigen intensive Markierung für
Spätes TGN Stadium
das internalisierte Lektin. Reguläre Golgi Stapel sind
trans
nicht erkennbar, doch mehrere glomeruläre Körperchen
ER
(G), von denen angenommen wird, dass sie Prä-Golgi
TGN
Intermediären (pGI) oder Golgi Resten entsprechen
(siehe auch Abb. 36).
GA

pGI G Literatur
ER
ER Sandvig K, and van Deurs B (2000) Entry of ricin and Shiga toxin
into cells: molecular mechanisms and medical perspectives.
Golgi Stadium
EMBO J 19: 1
Vetterlein M, Niapir M, Ellinger A, Neumüller J, and Pavelka M
trans - ER
(2003) Brefeldin A-regulated retrograde transport into the endo-
plasmic reticulum of internalised wheat germ agglutinin.
Histochem Cell Biol 120: 121

GA

pGI G

ER Vergrößerung: x 24,000
ER
Abbildung 35 71

ER

ER

G
G

ER
72
BREFELDIN A: EINFLUSS AUF TRANSITORISCHES ER UND PRÄ-GOLGI TRANSPORTINTERMEDIÄRE
Während der Golgi Apparat, das trans-Golgi Netzwerk
(TGN), Endosomen und Lysosomen unter dem Einfluss
von Brefeldin A (BFA) massiv verändert und Golgi
Komponenten in das endoplasmatische Retikulum (ER)
rückverlagert werden, erscheinen die ER-Exportregio-
nen nicht auffällig. Zahlreiche Knospen mit feinen
Coats an der zytoplasmatischen Seite sind am ER
erkennbar (siehe auch Abb. 21). Das sieht man sowohl
in den hochdruckgefrorenen (Abb. A) als auch in den
chemisch fixierten HepG2 Hepatomzellen (Abb. B),
wenn auch der feine Coat in den kryoimmobilisierten
Zellen viel besser sichtbar ist. Sowohl einzelne Knospen
an ER-Zisternen (Doppelpfeilköpfe in Abb. A), als auch
Knospen an typisch becherförmigen Übergangsele-
menten des ER (transitorische Elemente – TE; Pfeilkopf
in B) sind häufig. Vielgestaltige tubulo-vesikuläre
Strukturen finden sich in der Nachbarschaft. Sie ähneln
den Prä-Golgi Transportintermediären (pGI) in den
Kontrollzellen (siehe Abb. 21, 23, und 32). Stellenweise
zeigt das ER Einschnürungen, wie besonders deutlich in
den kryoimmobilisierten Zellen zu sehen ist (Abb. A).
Prä-Golgi Transportintermediäre scheinen die
Grundlage für die auffälligen glomerulären Organellen
zu bilden, die in BFA-behandelten Zellen besonders her-
vortreten und in der Zeitspanne von 5–10 Minuten nach
BFA-Applikation häufiger werden. Ein Beispiel wird in
Abbildung C gezeigt. Mehrere dieser Körperchen sind
auch in der Übersichtsaufnahme in Abbildung 35 zu
sehen. Sie wurden auch als Golgi Reste angesehen und
mit der Wiederherstellung des Golgi Apparats in
Zusammenhang gebracht. Die Lektininternalisations-
versuche zeigten, dass ihre Lumina internalisiertes
Weizenkeimagglutinin (WGA) enthalten (siehe
Abb. 35), das sowohl direkt von Golgi Resten abstam-
men als auch indirekt über Rücktransport in das ER,
anschließenden Export über ER-Knospen (Pfeilköpfe
in Abb. A und B) und neugebildete Transportinter-
mediäre in die glomerulären Körperchen gelangen
könnte.
Wenn auch viele Details über die Mechanismen und
Maschinerien der Vesikelknospung, Membranfusion,
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Sortierungsprozesse, Weiterentwicklung und Reifung
von Membranen und Kompartimenten bekannt und die
involvierten Moleküle zum Teil gut charakterisiert sind,
ist noch immer fraglich, wie sich der Transport über den
Golgi Apparat von der cis- zur trans-Seite abspielt. Es
gibt mehrere Modelle mit zahlreichen Variationen.
Neben der Vorstellung, dass die Golgi Zisternen sta-
tionäre Kompartimente sind und Vesikel, die sich von
Zisternen abschnüren und mit anderen verschmelzen,
den Transport, eventuell in beiden Richtungen, bewerk-
stellen, gibt es Hinweise, dass die Zisternen an der cis-
Seite neu gebildet werden, sich Hand in Hand gehend
mit „Reifungsprozessen“ und Rezirkulation von cis nach
trans durch den Stapel schieben und an der trans-Seite
mit der Bildung der Transportvehikel, zum Beispiel der
Sekretgranula, wieder auflösen. Auch die Möglichkeit
des Transports über direkte tubuläre Verbindungen
zwischen den Zisternen, die eventuell durch den
Sekretfluss selbst ausgelöst werden, wird diskutiert.
Immer mehr wird klar, dass die zu transportierende
Ladung selbst ein wichtiger Faktor ist, der die Golgi
Organisation und Architektur beeinflusst.
Literatur
Hendricks LC, McClanahan SL, McCaffery M, Palade GE, and
Farquhar MG (1992) Golgi proteins persist in the tubulovesicular
remnants found in Brefeldin A-treated pancreatic acinar cells. Eur
J Cell Biol 58: 202
Marsh BJ, Volkmann N, McIntosh JR, and Howell KE (2004)
Direct continuities between cisternae at different levels of the
Golgi complex in glucose-stimulated mouse islet beta cells. Proc
Natl Acad Sci USA 101: 5565
Trucco A, Polishchuk RS, Martella O, Di Pentima A, Fusella A, Di
Giandomenico D, San Pietro E, Beznoussenko GV, Polishchuk EV,
Baldassarre M, Buccione R, Geerts WJC, Koster AJ, Burger KNJ,
Mironov AA, and Luini A (2004) Secretory traffic triggers the for-
mation of tubular continuities across Golgi sub-compartments.
Nat Cell Biol 6: 1071
Weidman P (1995) Anterograde transport through the Golgi
complex: Do Golgi tubules hold the key? Trends Cell Biol 5: 302
Vergrößerung: x 50,000 (A), x 50,000 (B), x 50,000 (C)
Abbildung 36 73

pGI

TE

B C
74
STRUKTURVERÄNDERUNGEN DES GOLGI APPARATS DURCH HITZESCHOCK
Zellen in lebenden Organismen oder in vitro in Kultur
reagieren spezifisch auf unphysiologisch hohe
Temperaturen, den sogenannten Hitzeschock oder
andere Formen von Stress. Als Folge werden bestimmte
Gene, die sogenannten Hitzeschockgene, akut und
vorübergehend aufreguliert. Das führt zur erhöhten
Synthese von Hitzeschockproteinen, die ihrerseits eine
Schutzfunktion für Eiweiße ausüben, indem sie als
Chaperone wirken. Eine weitere Gruppe von
Stressproteinen stellen die Glukose-regulierten Eiweiße
dar. Gleichzeitig mit der stressbedingten Induktion von
Hitzeschockgenen wird eine Vielzahl anderer zellulärer
Gene herunterreguliert. In Zellkulturen führt das zur
Blockierung des Zellwachstums und der Zellteilung.
Im Gefolge eines Hitzeschocks treten Struktur-
veränderungen von Zellorganellen und Umverteilungen
des Zytoskeletts ein. Erstere betreffen in eindrücklicher
Weise den Golgi Apparat, dessen normale Architektur
in CHO Zellen in Abbildung A zu sehen ist. An Stelle des
geordneten Stapels von Zisternen finden sich im
Gefolge eines Hitzeschocks unterschiedlich große
Vesikeln und nur Reste von Zisternen, wie in
Abbildung B ersichtlich ist. Zum anderen können auch
Zisternen des rauen endoplasmatischen Retikulums
erweitert sein, wie in Abbildung B illustriert und ver-
mehrt das Glukose-regulierte Eiweiß BiP, ein wichtiges
Chaperon, enthalten. Die Mitochondrien hitze-
geschockter Zellen sind insgesamt aufgetrieben wie
auch ihre Cristae und als Folge ist die oxidative
Phosphorylierung gestört. Durch die Umordnung des
Zytoskeletts sind die Mitochondrien um den Zellkern
angereichert. Der Hitzeschock hat offenbar keinen
Effekt auf Mikrotubuli. Hingegen sind Aktinfilamente
und Stressfasern vermehrt und das Netzwerk der
Intermediärfilamente ist kollabiert. Hitzeschock-
bedingte Veränderungen des Zellkerns bestehen im
Auftreten intranukleärer Aktinfilamentbündel, in der
Aggregation oder dem Verlust der granulären Kom-
ponente des Nukleolus und in der Akkumulation und
Aggregation der Perichromatin Granula.
Als Folge eines schweren Hitzeschocks kann Zelltod
eintreten. Allerdings kann Thermotoleranz durch einen
vorherigen milden Hitzeschock erworben werden. Für
die Induktion einer Thermotoleranz scheint das HSP70
Das Zytoplasma: das sekretorische System
bedeutsam zu sein. Hitzeschockproteine können bei
verschiedenen mit Ischämie, Fieber und Entzündung
einhergehenden Erkrankungen sowie als Konsequenz
der Bildung freier Sauerstoffradikale und Tumor-
erkrankungen erhöht sein.
Die zelluläre Reaktion auf einen Hitzeschock oder
einen anderen Stress ist universell und nicht über-
raschend sind Hitzeschockproteine hoch konserviert. In
Prokaryonten und in Eukaryonten existieren ver-
schiedene Familien von Hitzeschockproteinen. Zum
einem ist das die HSP90-Familie (83 bis 90 kDa
Molekularmasse) und zum anderen die HSP70-Familie
(66 bis 78 kDa Molekularmasse) sowie eine heterogene
Gruppe von kleinen (15 bis >30 kDa Molekularmasse)
Hitzeschockproteinen, zu denen DnaJ und GrpE
gehören. Viele der Hitzeschockproteine sind frei im
Zytosol und im Nukleoplasma vorhanden. Andererseits
existieren auch membrangebundene Hitzeschock-
proteine am endoplasmatischen Retikulum, dem Golgi
Apparat und den Mitochondrien.
Ly: Lysosomen.
Literatur
Cervera J (1978) Effects of thermic shock on HEp-2 cells. An
ultrastructural and high-resolution autoradiographic study.
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Iida K, Iida H, and Yahara I (1986) Heat shock induction of
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Pelham HR (1984) Hsp70 accelerates the recovery of nucleolar
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Welch WJ (1992) Mammalian stress response-cell physiology,
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cine and disease. Physiol Rev 72: 1063
Welch WJ, and Suhan JP (1985) Morphological study of the
mammalian stress response: characterization of changes in cyto-
plasmic organelles, cytoskeleton, and nucleoli, and appearance of
intranuclear actin filaments in rat fibroblasts after heat-shock
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Welch WJ, and Suhan JP (1986) Cellular and biochemical events
in mammalian cells during and after recovery from physiological
stress. J Cell Biol 103: 2035
Vergrößerung: x 25,500 (A); x 23,500 (B)
Abbildung 37 75

Ly Ly

Golgi

Nukleus

Ly

Ly

Golgi

Ly

Nukleus

B
76
ATP-ABHÄNGIGE STRUKTURVERÄNDERUNGEN DES GOLGI APPARATS
Neben Brefeldin A, dessen Einfluss auf den Golgi
Apparat auf vorangehenden Seiten beschrieben wird,
gibt es zahlreiche andere Substanzen, die Golgi Funk-
tionen beeinträchtigen und den Transport von
Membranen und luminaler Ladung über den Zisternen-
stapel stören oder hemmen. Verschiedene Mechanismen
können beteiligt sein, und in den meisten Fällen kommt
es zu massiven Veränderungen der Golgi Architektur.
Der intrazelluläre Verkehr ist auch unterbrochen,
wenn die Energiezufuhr gedrosselt wird. Der Export aus
dem endoplasmatischen Retikulum (ER) ist gehemmt,
wenn der zelluläre Adenosintriphosphat (ATP)-Gehalt
unter 65% gesenkt wird. Unter kontrollierter ATP-
Verminderung und Wiederauffüllung kann untersucht
werden, wie sich der zunächst behinderte und dann
wiederhergestellte ER-Golgi Transport auf die weiter
distal gelegenen Kompartimente auswirkt. Versuche mit
verschiedenen Zelltypen zeigten Tubulisierung von
Golgi Membranen, Zerlegung von cis-Golgi Kom-
partimenten, ihre Umformung in lange Tubuli und auch
Umverteilung von cis-Golgi Bestandteilen in das ER.
Nach ATP-Wiederauffüllung zeigt auch der Golgi
Apparat wieder eine reguläre Organisation und
Architektur. Nachdem eine Verminderung der
Energiezufuhr zu einer reversiblen Golgi Zerlegung
führt und der Golgi Apparat nach Normalisierung des
ATP-Gehalts wieder aufgebaut wird, kann mit einem
präzisen ATP-Depletions- und Wiederauffüllungs-
protokoll die Neubildung des Golgi Apparats im Detail
untersucht werden.
Abbildung A zeigt die perinukleäre Golgi Region
einer HepG2 Hepatomzelle unter ATP-Depletion nach
Inkubation in einem Glukose- und Pyruvat-freien
Medium unter Zusatz von 50 mM 2-Deoxy-D-Glukose
(DOG Medium). In den Abbildungen B und C ist im
Gegensatz dazu die Golgi Region nach ATP-Wieder-
auffüllung durch Inkubation in einem Medium mit
100 mM Glukose-Zusatz (GLUC-Medium) dargestellt.
In den hier untersuchten menschlichen Hepatomzellen
führt ATP-Depletion zu einer Zerlegung des Golgi
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Apparats (Abb. A). Reguläre Golgi Zisternenstapel sind
nicht mehr zu sehen. Stattdessen finden sich An-
sammlungen zahlreicher kleiner Stückchen von
Membrantubuli. Manche bilden kleine Ringe, Halbringe
oder stab- und keulenförmige Stückchen.
Das Bild ändert sich rasch in der Erholungsphase.
Schon nach 15 Minuten Inkubation in einem GLUC-
Medium enthalten einige Zellen wieder kleine Golgi
Zisternenstapel (Abb. C). Die meisten Zellen zeigen
jedoch noch nicht fertig gebildete Stapel von Zisternen,
sondern charakteristische Zwischenstadien der Golgi
Neubildung (Abb. B). Die kleinen stab- und keulenför-
migen Stückchen der Membrantubuli sind nach wie vor
zu sehen, doch liegen sie nicht so locker zerstreut, wie in
Abbildung A unter ATP-Depletion zu sehen ist, sondern
sind zusammengefügt in kompakten Körperchen, in
denen feine Netzwerke und honigwabenartige Struk-
turen erkennbar sind. Häufig sitzen im Randbereich
dieser Membrantubuli vesikuläre Knospen (Pfeile in B).
Ebensolche sind auch in den Randbereichen der kurzen
Zisternen des wieder gebildeten Golgi Stapels in
Abbildung C zu sehen (Pfeile). Es ist eine der vielen,
noch nicht beantworteten Fragen zur Golgi Neu-
bildung, ob diese Knospen Transportvesikel bilden, bei
der Morphogenese neuer Golgi Zisternen eine Rolle
spielen oder andere Funktionen haben.
Literatur
Banta M, Polizotto RS, Wood SA, de Figueiredo P, and Brown WJ
(1995) Characterization of a cytosolic activity that induces the
formation of Golgi membrane tubules in a cell-free reconstitu-
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of Golgi membranes in vivo and in vitro in the absence of
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Del Valle M, Robledo Y, and Sandoval IV (1999) Membrane flow
through the Golgi apparatus: specific disassembly of the cis-Golgi
network by ATP depletion. J Cell Sci 112: 4017
Vergrößerung: x 37,000 (A), x 43,000 (B), x 43,000 (C))
Abbildung 38 77

ATP-Depletion 45 min

ATP-Wiederauffüllung 15 min

B C
78
SEKRETGRANULA
Sekretgranula sind die Speicherkompartimente für
sekretorisches Material in Zellen mit regulierter
Sekretion. Die Ausschleusung ihrer Inhalte erfolgt unter
definierten lokalen Bedingungen nach externer, nervö-
ser oder hormoneller, Stimulierung. Die Abbildungen A
und B zeigen reife Sekretgranula (Zymogengranula – ZG)
im apikalen Zytoplasma einer Pankreasazinuszelle der
Ratte. Die ultrastrukturellen Details, die in der Abbil-
dung eines Dünnschnitts in A zu sehen sind, ent-
sprechen denjenigen in einem Gefrierbruchabdruck in
Abbildung B. Das Azinuslumen (AL) ist im Zentrum der
Bilder sichtbar. Die Pfeile markieren die apikalen junk-
tionalen Komplexe, über die die Zellen verbunden sind.
Im Gefrierbruckabdruck in Abbildung B können die
ausgeprägten Netzwerke der Tight Junctions, die hier
eine breite Abdichtungszone (zonula occludens) auf-
bauen, verfolgt werden. Sie verhindern ein Zurück-
fließen des Pankreassekrets aus dem Azinuslumen in
den Interzellularraum (siehe auch Abb. 78, 87 und 88).
In beiden Abbildungen sind die Plasmamembranen an
den lateralen Zelloberflächen der benachbarten Zellen
mit Pfeilköpfen markiert.
Zymogengranula entwickeln sich aus den konden-
sierenden Vakuolen (KV in Abb. 23 und 88), den
zunächst entstehenden unreifen Sekretgranula, die an
der trans-Seite des Golgi Apparats aus der letzten trans-
Zisterne und dem trans-Golgi Netzwerk (TGN) geformt
werden. Die Bildung der Zymogengranula spielt sich in
mehreren aufeinanderfolgenden Schritten ab.
Sekretorische Proteine aggregieren und werden im
trans-Golgi und TGN aussortiert. Die Bildung der
unreifen Sekretgranula (kondensierenden Vakuolen)
erfolgt durch Knospung vom TGN. Unreife Sekret-
granula fusionieren, und Membranen und Inhalte wer-
den weiter umgeformt und verändert. Ein wichtiger
Schritt für das Aussortieren sekretorischer Proteine in
den regulierten Sekretionsweg ist ihre Aggregation im
TGN-Lumen in einem leicht sauren pH-Bereich und die
Bindung an akzessorische Proteoglykane, sulphatierte
Glykoproteine und Lektine in der TGN-Membran und
den Membranen der kondensierenden Vakuolen.
Diffizile Interaktionen zwischen Proteinen und Lipiden
und auch spezielle Lipidmikrodomänen (Lipidflöße –
Rafts) sind beteiligt.
Nicht nur in den basalen Zellregionen der Azinus-
zellen (siehe Abb. 1 und 87) liegt das endoplasmatische
Das Zytoplasma: das sekretorische System
Retikulum dicht gepackt, sondern auch zwischen den
Zymogengranula in den apikalen Zellbereichen, wie es
in Abbildung A deutlich zu sehen ist. Calziumionen, die
aus dem endoplasmatischen Retikulum freigesetzt wer-
den, lösen die kontrollierte Ausschleusung des Inhalts
der Zymogengranula über Exozytose aus (siehe auch
Abb. 40). Die apikale Zelloberfläche der Azinuszellen ist
mit Mikrovilli besetzt. Mikrovilli fehlen im Bereich von
Exozytosedomänen. Die große luminale Bucht im
oberen Bereich des Azinuskanälchens in Abbildung A
könnte einer solchen Region entsprechen.
Im apikalen Zytoplasma sind neben coated Vesikeln
für Endozytose und Membraninternalisation (siehe
Abb. 41) auch kleine unauffällige Sekretvesikel nahe der
Plasmamembran zu sehen (offener Pfeil in Abb. A).
Diese kleinen Vesikel gehören wahrscheinlich zu den
konstitutiven und „minor regulated“ Sekretionswegen,
die für die Basissekretion im Ruhezustand zuständig
sind. Detaillierte Untersuchungen der Sekretion in den
Azinuszellen der Ohrspeicheldrüse weisen darauf hin,
dass über solche Sekretionswege Regionen an der
apikalen Plasmamembran für das Andocken und die
Fusion der Zymogengranula bei der Exozytose vorberei-
tet werden.
Literatur
Arvan P Zhang B-Y, Feng L, Liu M, and Kuliawat R (2002)
Luminal protein multimerization in the distal secretory path-
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A submembranous matrix of proteoglycans on zymogen granule
membranes is involved in granule formation in rat pancreatic aci-
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Tooze SA, Martens GJM, and Huttner WB (2001) Secretory
granule biogenesis: rafting to the SNARE. Trends Cell Biol 11: 116
Vergrößerung: x 31,000 (A); x 22,000 (B)
Abbildung 39 79

ZG

AL

ZG

AL
ZG

ZG
B
80
DIE FEINSTRUKTUR EXOKRINER UND ENDOKRINER SEKRETGRANULA
Die verschiedenen exokrinen und endokrinen Drüsen
wie auch disseminierte sekretorische Zellen und
manche Neuronen speichern Sekretprodukte in Form
von Sekretgranula. Sie finden sich auch in Leukozyten
(Abb. 156, 157), Makrophagen (Abb. 125), Mastzellen
(Abb. 127), Thrombozyten (Abb. 161), T-Lymphozyten,
Melanozyten (Abb. 85), Typ II Alveolarepithelien
(Abb. 113) und Endothelzellen. Sekretgranula sind von
einer Membran begrenzt, und ihre Größe und Form
kann bedingt durch die chemische Natur des Sekret-
produkts und in Abhängigkeit vom Zelltyp variieren.
Innerhalb der Sekretgranula kann es zur Segregation
verschiedener Komponenten kommen.
Die Submandibulardrüse ist eine aus mukösen und
serösen Zellen aufgebaute gemischte Speicheldrüse
(siehe auch Abb. 90). Ihr Sekret trägt zur Bildung des
Speichels bei, der aus Schleim, Wasser, Elektrolyten und
Verdauungsenzymen besteht. Sezernierte Muzine bin-
den Wasser und bilden eine unlösliche Gelschicht an der
Oberfläche der Schleimhäute, die als Schmiermittel und
als Schutzschicht gegen physikalische und chemische
Noxen wirkt. Speichel wirkt auch bakterizid wegen
seines Gehaltes an IgA, Lysozym und Laktoferrin. Die
mukösen Zellen synthetisieren Schleim, der aus hoch
glykosilierten Glykoproteinen besteht. Elektronen-
mikroskopisch erscheint der Inhalt ihrer Sekretgranula
vorwiegend strukturlos und nur teilweise granulär
(Abb. A). Im Gegensatz dazu sind die Sekretgranula der
serösen Zellen auf Grund ihres hohen Eiweißgehalts
elektronendicht (Abb. B; siehe auch die Zymogen-
granula in Abb. 39 und 87).
Endokrine und neuroendokrine Zellen und auch
gewisse Neurone enthalten Sekretgranula mit einem
hoch elektronendichten Inhalt, deren Größe abhängig
vom Zelltyp stark variieren kann. Die Sekretgranula
einer menschlichen Insulin-produzierenden pankreati-
schen Beta-Zelle sind in Abbildung C zu sehen.
Typischerweise bestehen sie aus einem elektronendich-
ten Kern, der von einem hellen Hof und der Sekret-
granulamembran (Pfeile) umgeben ist. Insulin im elek-
tronendichten Kern wurde mit Immungoldmarkierung
nachgewiesen. Über Komplexbildung mit Zink bildet
das Insulin kristalloide Strukturen in den Sekretgranula
(Pfeilköpfe). Das C-Peptid befindet sich vorwiegend im
umgebenden Hof. Die Sekretgranula anderer endokri-
ner Zellen können aus einem elektronendichten Kern
Das Zytoplasma: das sekretorische System
mit eng anliegender Sekretgranulamembran bestehen,
wie in Abbildung D am Beispiel einer Wachstums-
hormon-produzierenden Zelle der menschlichen
Hypophyse illustriert ist. Die Goldpartikel weisen die
Anwesenheit von Wachstumshormon nach.
Die Sekretgranula sind die Organellen der regu-
lierten Sekretion, durch die die kontrollierte Freisetzung
der Sekretprodukte auf physiologische Reize erfolgt. Die
Sekretion erfolgt über Exozytose, einem vielstufigen
Prozess, der entweder zur Freisetzung aller oder eines
Teils der Sekretgranula einer Zelle führt. Der hauptsäch-
liche Auslöser ist der Anstieg des intrazellulären Ca2+,
und Synaptogamin ist hierbei der Ca2+-Sensor. Hieran
schließen sich ATP-abhängige Vorgänge, die zu einer
Reorganisation des kortikalen Aktin-Zytoskeletts füh-
ren, damit die Sekretgranulamembran in Kontakt mit
der Plasmamembran treten kann und die Modifi-
kationen von SNARE-Proteinen bewirken kann. Darauf
folgt das ATP-abhängige Andocken der Sekretgranula,
die ATP-unabhängige Fusion der Sekretgranula-
membran mit der Plasmamembran und die nachfol-
gende Freisetzung des Inhalts der Sekretgranula. Die
Membranfusion schließt die Bildung einer Fusionspore
ein. Sie kann eine temporäre Struktur darstellen,
wodurch nur ein Teil des Inhalts des Sekretgranulums
sezerniert wird; sogenannte „kiss and run“ Exozytose.
Die volle Ausformung der Fusionspore ist von der voll-
ständigen Freisetzung des Sekretgranuluminhalts und
des Einbaus der Sekretgranulummembran in die
Plasmamembran gefolgt. Die überschüssige Membran
wird über Endozytose eliminiert.
RER: raues endoplasmatisches Retikulum.
Literatur
Burgoyne RD, and Morgan A (2003) Secretory granule exocyto-
sis. Physiol Rev 83: 581
Bennett M (1997) Ca2+ and the regulation of neurotransmitter
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Apps O, Shipston M, and Chow R (2003) Functional and spatial
segregation of secretory vesicle pools according to vesicle age.
Nature 422: 176
Vergrößerung: x 20,000 (A); x 30,200(B); x 22,000 (C); x 20,500 (D)
Abbildung 40 81

RER

A B

C D
82
CLATHRIN-ABHÄNGIGE REZEPTOR -VERMITTELTE ENDOZYTOSE
Die adsorptive und Rezeptor-vermittelte Endozytose
mit der Abschnürung von Clathrin-coated Vesikeln ist
molekular und morphologisch sehr gut charakterisiert
und ist einer der wichtigsten Aufnahmemechanismen in
die Zelle. Über Clathrin-abhängige Endozytose bekom-
men Zellen Nahrungsstoffe, regulieren Rezeptoren und
andere Plasmamembranbestandteile, nehmen Antigene
auf und entfernen überalterte, überschüssige, und
potentiell gefährliche Substanzen aus der Extrazellular-
flüssigkeit.
Der typisch stachelig aussehende, zum Zytoplasma
orientierte, Belag (Coat) an den Membranen der Grüb-
chen, Knospen und Vesikeln, die während der Endo-
zytose gebildet werden, erlaubt eine einfache Diagnose
im Elektronenmikroskop (Abb. A und C). Der Coat
wird durch Clathrin und Adapterproteine gebildet. Die
individuellen Clathrin Moleküle besitzen eine charak-
teristische Triskelion Form und setzen sich im Zu-
sammenspiel mit Adapterproteinen und den Membran-
lipiden an der zytoplasmatischen Seite der Membran zu
einem hauptsächlich hexagonalen Gitterkorb zusam-
men. In einem dynamischen Prozess, in dem das
Clathrin Gitter stellenweise wiederum zerfällt und neu
gebildet wird, verformt sich die Membran zu Grübchen
und tiefer invaginierten Knospen (coated pits, coated
buds). Der Clathrincoat bildet ein stabilisierendes
Gerüst für die Konzentration von Membranproteinen in
den endozytischen Grübchen. Adapterproteine verbin-
den den Clathrin Coat mit Transmembranrezeptoren,
über die selektiv bestimmte Moleküle und Partikel für
die Aufnahme in die Zelle aufgeladen werden. Unter
Einbeziehung von Dynaminen kommt es zur Abschnü-
rung der Knospen von der Plasmamembran und zur
Bildung von Clathrin-coated Vesikeln. Schon kurz nach
der Vesikelabschnürung löst sich der Clathrin Coat von
der Membran ab, und die jetzt vom Coat befreiten
Vesikel sind bereit für die Fusionsprozesse in den
Endozytosewegen.
Die Abbildungen A und C zeigen Coated Pits mit
dem typischen „Stachelsaum“ während der Inter-
nalisation von Ferritin-gekoppeltem Ricinus communis I
Lektin in eine endokrine Pankraes Beta-Zelle. Die
Lektinbindung an die Galaktosereste der Zuckerketten
an der äußeren Oberfläche der Plasmamembran (PM)
wird durch die Ferritinpartikel sichtbar. Die endozyti-
schen Vesikel mit internalisiertem Lektin-Ferritin in
Abbildung C haben den Clathrin Coat bereits abge-
stoßen. Im Gefrierbruchabdruck in Abbildung B sind
Filipin-Sterolkomplexe als kleine buckelförmige und
knopfartige Vorwölbungen der Plasmamembran sicht-
Das Zytoplasma: das endozytische System
bar. Entsprechend ihrem niedrigeren Cholesteringehalt
im Vergleich zu benachbarten Membranabschnitten sind
die Endozytosegrübchen (coated pits) frei von Filipin-
Sterolkomplexen.
VIRUSENDOZYTOSE
Die Abbildungen D und E zeigen HIV (human immuno-
deficiency) Virus Partikel (Pfeilköpfe) an der Oberfläche
eines Makrophagen. Die Viruspartikel hängen nicht nur
an der Plasmamembran (PM), sie sind auch in großen
endozytischen Vakuolen zu sehen (Pfeile in Abb. E).
Viren benützen verschiedene Endozytosewege, die
sowohl Clathrin-coated Vesikel als auch Caveolae (siehe
Abb. 46), Lipid Raft-vermittelte Endozytose,
Makropinozytose, und andere Mechanismen ein-
schließen. HIV1 betritt die Zellen entweder direkt durch
Fusion mit der Plasmamembran oder über Fusion mit
der Membran von Makropinosomen. Die großen
Vakuolen in Abbildung E entsprechen vermutlich
solchen Makropinosomen, die durch tiefe Plasma-
membraneinstülpungen im Bereich sehr dynamischer
Oberflächenbereiche nach Membranschluss enstehen.
SG – Sekretgranulum
Literatur
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formation in fibroblasts. J Cell Biol 84: 560
Lafer EM (2002) Clathrin-protein interactions. Traffic 3: 513
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tors in endocytic cargo selection. J Cell Biol 163: 203
Vergrößerung: x 35,000 (A); x 35,000 (B); x 102,000 (C); x 26,500
(D); x 71,000 (E)
Abbildung 41 83

PM PM

coated pits
coated pits
RER

A B

coated pits

endozytotische
Vesikel
SG

PM PM

Nukleus

D E
84
ENDOSOMEN UND ENDOZYTISCHE WEGE
In Säugetierzellen existieren verschiedene endozytische
Eingänge und Wege nebeneinander (Zeichnung), die als
Clathrin-abhängig (1, Abb. 41) und Clathrin-unab-
hängig grob klassifiziert werden. Zu den letzteren gehört
das Abknospen von „glatten“ Vesikeln ohne sichtbaren
Coat (2, siehe Abb. 47), Endozytose über Lipid Rafts (3),
Aufnahme über Caveolae (4, siehe Abb. 46) und
Caveosomen (C), Phagozytose (5, siehe Abb. 47) und
Makropinozytose (6) mit Bildung großer Vakuolen
(Makropinosomen – MP, siehe Abb. 41). Die von den
aufgenommenen Molekülen eingeschlagenen Wege ver-
laufen über komplexe Endosomenkompartimente mit
speziell strukturierten und funktionellen Domänen.
Endosomen sind außerordentlich dynamisch und for-
men und verändern sich in Beantwortung auf
Endozytosesignale. Frühe Endosomen, die Sortierungs-
und Rezirkulationskompertimente bilden (SE – sorting
endosomes, RE – recycling endosomes), sind erste
Stationen, von wo Proteine und Lipide über ver-
schiedene Wege zu verschiedenen Zielen geschickt wer-
den. Das können Degradationswege über multi-
vesikuläre und späte Endosomen (MVB/LE – multi-
vesicular bodies/late endosomes) zu den Lysosomen
(LY) sein, oder Rezirkulationswege zur Plasmamembran
(PM), oder Wege zum trans-Golgi Netzwerk (TGN) und
Golgi Apparat (GA). Das endoplasmatische Retikulum
(ER) wird sowohl über den Golgi Apparat und Prä-
Golgi Intermediäre (pGI), als auch über direkte Wege,
wie zum Teil im Fall der Caveolae-Endozytose, erreicht.
Die Abbildungen A–E zeigen frühe endosomale
Kompartimente nach Aufnahme von Peroxidase-
markiertem Weizenkeimagglutinin (WGA, Abb. A, B, D
und E) und ein multivesikuläres Körperchen mit inter-
5
6 out clathrin coats. Trends Cell Biol 11: 406
2
3 Pavelka M, Ellinger A, Debbage P, Loewe C, Vetterlein M, and
PM
1 Roth J (1998) Endocytic routes to the Golgi apparatus.
4
MVB / LE
P Histochem Cell Biol 109: 555
SE
LY
MP
TGN
C
RE GA
pGI
ER
Das Zytoplasma: das endozytische System
nalisiertem Ferritin-markiertem Ricinus communis I-
Lektin (Abb. C). Die frühen Endosomen zeigen deutlich
verschiedene Domänen. Die von großen vakuolären
Kompartimenten (Sternchen in Abb. A und E) nach
außen abknospenden kleinen Vesikel und langen Tubuli
spiegeln Sortierungsprozesse. Vesikelknospung nach
innen führt zur Bildung von multivesikulären Endoso-
men, die Transportvehikel zwischen frühen und späten
Endosomen bilden (MVB, Abb. B und C). Die multi-
vesikulären Endosomen in Abbildungen B und C zeigen
auffällige Areale, die von stachelig aussehenden Belägen
überzogen sind (Pfeile). Speziell aufgebauten Clathrin
Coats an vakuolären Endosomen wird eine Rolle bei der
Sortierung von Proteinen zu Lysosomen zugeschrieben.
In den HepG2 Hepatomzellen erfolgt die Aufnahme
von internalisiertem WGA in den Golgi Apparat über
einen komplexen mehrstufigen Prozess (siehe auch
Abb. 43), der mit der Akkumulation von frühen
vesikulären Endosomen an der trans-Golgi Seite beginnt
(Abb. D) und sich mit der Bildung eines endozytischen
trans-Golgi Netzwerks fortsetzt. In Abbildung D sind
diskrete trans-Golgi Netzwerke (TGN) bereits zu sehen.
Literatur
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domains. Nat Rev Mol Cell Biol 2: 721
Gruenberg J, and Stenmark H (2004) The biogenesis of multi-
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Traffic 3: 311
Sachse M, Ramm G, Strous G, and Klumperman J (2002)
Endosomes: multipurpose designs for integrating housekeeping
and specialized tasks. Histochem Cell Biol 117: 91
Vergrößerung: x 35,000 (A); x 41,000 (B); x 51,000 (C); x 33,800
(D); x 42,000 (E)
Abbildung 42 85

cis Golgi

trans Golgi

TGN

*
A

MVB

MVB
*

C E
86
ENDOZYTISCHES TGN UND ENDOZYTOSEWEGE IN DEN GOLGI APPARAT
Von der Plasmamembran und den frühen Endosomen
zum Golgi Apparat gibt es direkten Transport und indi-
rekte Wege, die über späte Endosomen führen (siehe
Zeichnung zu Abb. 42). Endozytosestudien mit Peroxi-
dase-markiertem Weizenkeimagglutinin (WGA) in
HepG2 Hepatomzellen haben gezeigt, dass frühe Endo-
somenkompartimente schon wenige Minuten nach dem
Beginn der Internalisation in enger Nachbarschaft zum
Golgi Apparat lokalisiert sind (Abb. 42A). Nach
Akkumulation früher vesikulärer Endosomen an der
trans-Golgi Seite (Abb. 42D) erfolgt die Aufnahme von
internalisiertem WGA in den Golgi Apparat in einem
komplizierten mehrstufigen Prozess, der mit aus-
geprägter Membrandynamik, vor allem im trans-Golgi
Bereich, vor sich geht. Innerhalb von 15–30 Minuten
wird ein ausgedehntes endozytisches trans-Golgi
Netzwerk gebildet (Abb. A, 30 min WGA), das stellen-
weise mit trans-Golgi Zisternen engen Kontakt auf-
nimmt und in den Zisternenstapel integriert wird
(oberer Bereich in Abb. A). An einer anderen Stelle ent-
fernt sich das endozytische TGN vom Zisternenstapel
und ist abgesetzt von den Golgi Zisternen lokalisiert
(unterer Bereich in Abb. A). An diesen TGN-Ab-
schnitten hängen zahlreiche Knospen mit Clathrin
Coats (Pfeilkopf). Alle endozytischen TGN-Bereiche
zeigen eine besonders enge Beziehung zu trans-Golgi
Vesikuläres Stadium Frühes TGN Stadium
trans - ER
GA GA
pGI pGI
ER ER
Spätes TGN Stadium Golgi Stadium
trans
ER trans - ER
TGN
GA GA
pGI pGI
ER
ER
Das Zytoplasma: das endozytische System
endoplasmatischem Retikulum (trans-Golgi ER).
Während der anschließenden 30 Minuten nimmt das
endozytische TGN an Ausdehnung wiederum ab und
internalisiertes WGA findet sich zunehmend in den
Lumina der gestapelten Golgi Zisternen (Abb. B, 60 min
WGA). Ein endozytisches TGN ist nicht mehr er-
kennbar, doch beherrschen zahlreiche Clathrin-coated
Vesikel das Bild (Pfeilköpfe). Die meisten der gestapel-
ten Golgi Zisternen enthalten jetzt internalisiertes WGA
(Pfeile). Große vakuoläre Endosomen (Sternchen) fin-
den sich in jedem Stadium in enger Nachbarschaft zum
Golgi Apparat. Die aufeinanderfolgenden Stadien des
endozytischen Verkehrs in den Golgi Apparat mit ihren
Charakteristika, das vesikuläre Stadium, die frühen und
späten TGN Stadien und das Golgi Stadium, sind in der
Zeichnung zusammengefasst.
Der endozytische Verkehr in und über den Golgi
Apparat ist von besonderem Interesse im Zusam-
menhang mit dem retrograden Transport von Arznei-
mitteln und Toxinen, die solche Routen benützen und
missbrauchen und auf diesem Weg in das endoplasma-
tische Retikulum (ER) und von dort aus in das Zytosol
gelangen. Die enge und sehr konstante Beziehung von
endozytischem TGN und trans-Golgi ER (Abb. A) wirft
die Frage auf, ob es über diese Kontaktnahme einen
direkten Transfer zwischen Endosomenkompartimen-
ten und ER gibt.
pGI – Prä-Golgi Transportintermediäre
Literatur
Mallard F, Antony C, Tenza D, Salamero J, Goud B, and Johannes
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Vergrößerung: x 43,000 (A); x 56,000 (B)
Abbildung 43 87

trans ER

cis

trans ER
*

TGN

A B
88
TUBULÄRE PERIZENTRIOLÄRE ENDOSOMEN
Endosomen bestehen aus pleomorphen 0.5–1 µm
messenden Vakuolen und Tubuli von etwa 250 nm
Durchmesser und unterschiedlicher Länge (siehe auch
Abb. 42). In kultivierten Fibroblasten, CHO Zellen und
verschiedenen epithelialen und endokrinen Zelltypen
existieren zusätzliche endosomale Strukturen. Sie beste-
hen aus verzweigten Tubuli mit einem Durchmesser von
etwa 60 nm und einer Länge bis zu 2 µm, die als tubuläre
Endosomen bezeichnet werden. Sie sind positiv für
Rab11, aber nicht für EEA1, einem Marker für frühe
Endosomen. Tubuläre Endosomen bilden Netzwerke
vorzugsweise in der Umgebung der Zentriolen, aber
auch in anderen zellulären Regionen. Sie sind sowohl in
die Aufnahme klassischer Flüssigkeitsphase-Marker, wie
Meerrettichperoxidase, und auch in die Rezeptor-ver-
mittelte Endozytose von Transferrin, _-2-Makroglo-
bulin und Lektinen einbezogen.
Endozytose Experimente mit Transferrin haben
gezeigt, dass tubuläre Endosomen funktionell ein in das
Rezeptor-Rezyklieren involviertes spezialisiertes distales
Segment früher Endosomen darstellen und von späten
Endosomen zu unterscheiden sind. Die Transferrin-
Rezeptoren gelangen zunächst in frühe Endosomen, um
von dort in perizentrioläre tubuläre Endosomen über-
zutreten, bevor sie wieder an die Zelloberfläche rezyk-
liert werden. Es ist jedoch anzumerken, dass dieser Weg
nur von einem Teil der rezyklierenden Transferrin
Rezeptoren genommen wird. Zum anderen gelangen
rezyklierende Rezeptoren über tubuläre Endosomen
entlang von Mikrotubuli zu bestimmten Regionen der
Oberfläche kultivierter und wandernder Zellen. So wer-
den Transferrin Rezeptoren vorzugsweise in die Plasma-
membran im Bereich der „leading lamella“ von mig-
rierenden Fibroblasten eingebaut.
Abbildung A zeigt eine perinukleär gelegene Gruppe
tubulärer Endosomen (begrenzt durch eine unterbro-
chene Linie) in als Monolayer gewachsenen Ehrlich-
Tumorzellen. Im angrenzenden Zytoplasma sind auch
große endozytische Vakuolen erkennbar. Abbildung B
zeigt die räumliche Beziehung zwischen tubulären
Endosomen und einem Zentriol (Pfeil). Obwohl zahl-
Das Zytoplasma: das endozytische System
reiche tubuläre Endosomen sichtbar sind, kann das von
ihnen gebildete Netzwerk nicht in einem 60 nm dünnen
Schnitt erkannt werden, sondern nur in etwa 1 µm di-
cken Schnitten mittels Höchstspannungselektronen-
mikroskopie. Zusätzlich sind in Abbildung B Endo-
somen und Lysosomen ekennbar. Die Goldpartikeln
rühren von einer Lektinmarkierung her. Abbildung C
zeigt einen Ausschnitt einer kultivierten pankreatischen
Beta-Zelle mit endozytiertem Ferritin-konjugiertem
Ricinus communis Lektin. Das Ferritin ist in tubulären
Endosomen (Pfeilköpfe) in der Umgebung eines
Zentriols (Pfeile) und in Lysosomen (Ly) vorhanden.
Gelegentlich ist die enge räumliche Beziehung zwischen
tubulären Endosomen and Mikrotubuli sichtbar (oben
rechts).
SG: Insulin Sekretgranulum.
Literatur
Hopkins C, Gibson A, Shipman M, and Miller K (1990)
Movement of internalized ligand-receptor complexes along a
continuous endosomal reticulum. Nature 346: 335
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Verges R, Havel RJ, and Mostov KE (1999) A tubular endosomal
fraction from rat liver: Biochemical evidence of receptor sorting
by default. Proc Natl Acad Sci USA 96: 10146
Vergrößerung: x 7,300 (A); x 28,000 (B); x 19,250 (C)
Abbildung 44 89

Nukleus

Ly

Ly

Ly Ly

Ly

Ly

SG
Nukleus

B C
90
LANGERHANS -ZELLEN UND BIRBECK -GRANULA: ANTIGEN-PRÄSENTIERENDE DENDRITISCHE
ZELLEN DER EPIDERMIS
Langerhans-Zellen haben phagozytische Eigenschaften
und sind Antigen-aufnehmende Zellen der Epidermis.
Im Anschluss an die Endozytose von Antigenen wan-
dern sie aus der Epidermis in regionale Lymphknoten.
Während der Wanderung reifen sie zu aktivierten den-
dritischen Zellen, die Antigene naiven T-Lymphozyten
präsentieren. Langerhans-Zellen spielen somit eine wich-
tige Rolle bei Immunreaktionen im Bereich der Haut.
Langerhans-Zellen unterschieden sich von dendriti-
schen Zellen in anderen Geweben durch die Anwesen-
heit von Langerin in ihrer Plasmamembran und durch
Birbeck-Granula im Zytoplasma. Birbeck-Granula
bilden sich im Gefolge der Endozytose von Langerin,
welches in tubulären Endosomen akkumuliert. Somit
sind Birbeck-Granula endozytotische Organellen. Da
Langerin und Rab11 gemeinsam in ihnen vorkommen,
sind Langerin-enthaltende intermediäre endozytotische
Strukturen und Birbeck-Granula das Äquivalent peri-
zentriolärer Endosomen in anderen Zelltypen (siehe
Abb. 44). Endozytiertes Langerin wird an die Zell-
oberfläche rezykliert. Allerdings geht diese Eigenschaft
während der Reifung in dendritische Zellen verloren
und ist die Erklärung für die starke Abnahme der Größe
und der Zahl der Birbeck-Granula.
Abbildung A zeigt eine Langerhans-Zelle der
menschlichen Epidermis, die viele Birbeck-Granula in
der Umgebung des Golgi Apparats enthält. Langerhans-
Zellen entsenden zahlreiche lange Fortsätze zwischen
die Keratinozyten, von denen einige angeschnitten sind
(Pfeile). In Abbildung B und im Nebenbild ist die
charakteristische stäbchenförmige Gestalt der Birbeck-
Granula zu erkennen. Sie weisen eine innere periodische
Streifung auf, die durch die Anwesenheit von Langerin
bedingt ist. Oftmals weisen Birbeck-Granula Coated
Buds an ihrer Spitze auf (Pfeilkopf im Nebenbild), als
morphologischer Hinweis auf Rezeptor-vermittelte
Endozytosevorgänge. Charakteristisch sind auch lokal
begrenzte luminale Erweiterungen der Birbeck-Granula
(Sterne in Abb. B und Pfeil im Nebenbild).
Das Zytoplasma: das endozytische System
Literatur
Hanau D, Fabre M, Schmitt D, Stampf J, Garaud J, Bieber T,
Grosshans E, Benezra C, and Cazenave J (1987) Human epider-
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Langerhans cells, is an endocytic receptor that induces the forma-
tion of Birbeck granules. Immunitiy 12: 71
Vergrößerung: x 11,500 (A); x 80,000 (B und Nebenbild)
Abbildung 45 91

Langerhans-Zelle

Birbeck-
Granula
Nukleus

Keratinozyt

Golgi

Birbeck-
Birbeck
Granula

*
*
B
92
CAVEOLAE
Caveolae sind speziell aufgebaute, kolbenförmig invagi-
nierte Domänen der Plasmamembran mit Durch-
messern von 50–100 nm. Obwohl sie schon seit den
frühen Tagen der Elektronenmikroskopie bekannt sind,
gibt es immer noch Kontroversen in Bezug auf ihre
Eigenschaften und Funktionen. Die Membran der
Caveolae ist reich an Cholesterin und Glykosphingo-
lipiden. Der charakteristische Coat an der zytoplasma-
tischen Seite der Membran besteht aus Caveolinen, den
wichtigsten Caveolae Strukturproteinen, die Choles-
terin mit hoher Affinität binden. Sie sind notwendig für
die Ausbildung der kleinen Höhlen und stabilisieren sie
in der Plasmamembran. Caveolae sind besonders
zahlreich in Fettzellen, Endothelzellen (Abb. 116 und
117) und Muskelzellen (Abb. A) und fehlen in manchen
anderen Zellen, zum Beispiel in den Lymphozyten und
Nervenzellen.
Abbildung A zeigt Ausschnitte aus glatten Muskel-
zellen, an denen ausgedehnte Areale mit Caveolae
(Pfeile) besetzt sind. Die Kolbenform mit den engen
Hälsen ist gut zu erkennen. Benachbarte Caveolen hän-
gen zusammen und bilden komplex aufgebaute Räume
(Pfeilköpfe). Das Zytoplasma ist in der Nachbarschaft
von Caveolae myofibrillenfrei, doch sind glatte
Membranen des endoplasmatischen Retikulums den
Caveolenmembranen eng benachbart (Sterne). Zusam-
menhänge mit Funktionen in der Ca2+-Signaltrans-
duktion und in der Regulierung der Kalziumhomeo-
stase werden diskutiert. Die Caveolae in den glatten
Muskelzellen werden auch als Äquivalente der Transver-
saltubuli in der quergestreiften Skelettmuskulatur ange-
sehen (Abb. 138). Zahlreiche weitere Funktionen wur-
den den Caveolae zugeschrieben, doch scheint es da
große Unterschiede zwischen den verschiedenen Zell-
typen zu geben. Caveolae werden mit verschiedenen
Mechanismen der Signalübertragung in Zusammen-
hang gebracht. Sie sind in den Cholesterintransport
involviert, in den transendothelialen Transport, in
Mechanismen der Aufnahme von Bakterien, und in die
Ausbildung des transversalen Tubulussystems in den
Muskelfasern. Caveolae werden vielfach mit Endozytose
in Verbindung gebracht (siehe auch Abb. 42) und sind
verantwortlich für die Potozytose, einen speziell regu-
lierten Aufnahmemechanismus für kleine Moleküle
durch die Caveolenmembran. Eine wichtige Rolle spie-
len Caveolen auch in der Virusinternalisation; es werden
spezielle Endosomen, die Caveosomen, gebildet. Die
Das Zytoplasma: das endozytische System
Meinungen über die Eigenschaften und Funktionen der
Caveolae, vor allem bezüglich ihrer Beweglichkeit und
Internalisation, sind allerdings geteilt. Wenn sie auch
vor allem als immobile, stabile Plattformen innerhalb
der Plasmamembran gesehen werden, können Caveolen
in bestimmten Situationen und auf spezifische Reize hin
internalisiert werden. Ganz spezielle Endozytosewege
führen entweder über den Golgi Apparat oder direkt
zum endoplasmatischen Retikulum.
Die Abbildungen B und C zeigen Choleratoxin-
Goldpartikel im Bereich der Eingänge in die Caveolae
(Pfeile in Abb. B) und innerhalb der kleinen Höhlen
(Pfeile in Abb. C). Die Choleratoxin B-Untereinheit
bindet an einen Glykolipidrezeptor, das GM1-Ganglio-
sid, in der Membran der Caveolen. Da Choleratoxin-
Goldkomplexe auf Grund dieser Bindung in den
Caveolae-Invaginationen der Plasmamembran konzen-
triert werden, wurden sie auch als Caveolenmarker ver-
wendet. Jedoch sind Caveolae nicht die einzigen
Strukturen, über die Choleratoxin aufgenommen wird.
Es wurde gezeigt, dass die Internalisation von
Choleratoxin Lipid Raft-abhängig ist. Der Rezeptor
GM1 wurde auch in Clathrin-abhängigen Endozytose-
grübchen nachgewiesen.
Literatur
Isshiki M, and Anderson RGW (2003) Function of caveolae in
Ca2+ entry and Ca2+-dependent signal transduction. Traffic 4:
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Traffic 3: 311
Van Deurs B, Roepstorff K, Hommelgaard AM, and Sandvig K
(2003) Caveolae: anchored, multifunctional platforms in the lipid
ocean. Trends Cell Biol 13: 92
Vergrößerung: x 55,000 (A); x 96,000 (B); x 96,000 (C)
Abbildung 46 93

*
*

*
A

B C
94
PINOZYTOSE
Über Pinozytose (Flüssigphaseendozytose) nehmen
Zellen aus ihrer Umgebung laufend Flüssigkeit auf, ohne
dass es dabei zu einer spezischen Bindung von Mole-
külen an die Plasmamembran kommt. Man nimmt an,
dass über diese kontinuierlich stattfindende Endozytose
eine Überwachung der Umgebung der Zellen stattfindet
und auch eine „Reinigung“ der Plasmamembran im
sauren Milieu auf ihrem Weg durch die verschiedenen
endosomalen Kompartimente. Für diese unspezifische
Flüssigkeitsaufnahme stehen verschiedene, Clathrin-
abhängige und noch wenig charakterisierte Clathrin-
unabhängige, Mechanismen zur Diskussion. Gemein-
sam mit spezifisch aufgenommener Ladung über
Rezeptor-gesteuerte Endozytose werden kleine Flüssig-
keitsmengen aus der Umgebung in Clathrin-coated
Vesikeln (Abb. 41) und auch in Caveolae (Abb. 46) inter-
nalisiert. In einigen Zelltypen werden große Mengen
Flüssigkeit über Makropinozytose aufgenommen.
Dendritische Zellen verwenden einen solchen Mecha-
nismus für die Immunüberwachung ihrer Umgebung.
Für die ultrastrukturelle Darstellung der Pinozytose
wird häufig Peroxidase (HRP – horseradish peroxidase)
verwendet, da dieses Enzym zytochemisch durch das
elektronendichte Reaktionsprodukt nach Oxidation von
Diaminobenzidin im Elektronenmikroskop gut sichtbar
gemacht werden kann. Abbildung A zeigt einen
Ausschnitt aus der Dünndarmwand einer Ratte, der
Peroxidase intravenös verabreicht wurde. Nicht nur ist
dichtes Peroxidasereaktionsprodukt in allen Extra-
zellularräumen um die glatten Muskelzellen (offener
Pfeilkopf) und die Wand einer Lymphkapillare (Pfeil-
kopf) zu erkennen. Das Bild zeigt auch, dass vesikulärer
transendothelialer Transport von HRP durch die
Lymphkapillarwand stattfindet (Pfeile) und stellenweise
feine Kanäle durch Fusion der Vesikel gebildet werden.
Die apikale Endothelzelloberfläche ist dicht mit HRP-
gefüllten Transportgrübchen besetzt (Nebenbild).
Durch das dichte Peroxidasereaktionsprodukt erschei-
nen die Lipoproteinpartikel im Lumen der Lymph-
kapillare negativ gefärbt als helle Körnchen vor dunk-
lem Hintergrund (Sterne). Die benachbarten glatten
Muskelzellen besitzen an ihrer Oberfläche ausgedehnte
HRP-markierte Caveolenareale (Pfeile, siehe auch
Abb. 46).
PHAGOZYTOSE
Phagozytose bedeutet, dass „die Zelle frisst“. Über diese
Art der Endozytose können spezialisierte Fresszellen des
Das Zytoplasma: das endozytische System
Abwehrsystems, die Mikrophagen und Makrophagen,
große Partikel und Körper, zum Beispiel auch ganze
Zellen, internalisieren, um sie abzubauen. So werden
überaltete und tote Zellen, Apoptosekörperchen, Bak-
terien, Rußpartikel und andere Fremdmaterialien aus
dem Körper eliminiert. Die Aufnahme durch Phago-
zytose wird durch Kontaktnahme mit der Plasma-
membran und Aktivierung von Rezeptoren eingeleitet.
Über eine Signalkaskade wird die Umorganisation des
Aktinzytoskeletts und die Bildung von Pseudopodien
ausgelöst. Diese Zellfortsätze umfangen den aufzu-
nehmenden Körper, der zunehmend internalisiert und
letztlich in einer phagozytischen Vakuole eingeschlossen
wird. Die phagozytische Vakuole verändert sich und
„reift“ durch zahlreiche Fusionsprozesse, hauptsächlich
mit Endosomen, in speziellen Fällen auch mit dem
endoplasmatischen Retikulum, und wird vorbereitet für
die Fusion mit Lysosomen. Außerordentlich wichtig ist
die Ausschaltung schädigender Noxen durch Phago-
zytose im Abwehrsystem, ebenso die gesteuerte Elimi-
nierung von Zellen und Matrixbestandteilen bei der
Gewebsneubildung und Umbildung. Abbildung A zeigt
eine Kupffer’sche Sternzelle im Lumen eines Lebersinus
der Ratte nach Phagozytose eines Erythrozyten. Das
riesige Phagosom mit der internalisierten roten Blutzelle
besetzt einen großen Teil des Zytoplasmas dieses
Makrophagen, in dem Galaktosereste mit Gold-
Markierung für Ricinus communis I Lektin
nachgewiesen wurden. Die Markierung ist besonders
intensiv in einem Lysosom (Ly).
Literatur
Dejardins M, and Griffiths G (2003) Phagocytosis: latex leads the
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Russell DG (2003) Phagosomes, fatty acids and tuberculosis. Nat
Cell Biol 5: 776
Vergrößerung: x 34,500 (A); x 47,000 (Nebenbild); x 6,400 (B)
Abbildung 47 95

*
Endothel

glatte Muskelzelle

Erythrozyt

Nukleus

Ly

cellular interdigitations
B
96
LYSOSOMEN
Lysosomen enthalten eine große Zahl verschiedener
hydrolytisch spaltender Enzyme mit einem pH-Opti-
mum im sauren Bereich, Proteasen, Lipasen, Nukleasen,
Glykosidasen, Phosphatasen und Sulfatasen, die den
Abbau „nicht gewünschter“ Moleküle bewerkstellen. Je
nachdem, ob diese aus der Zelle selbst oder aus dem
Extrazellularbereich stammen, spricht man von Auto-
phagie oder Heterophagie. Im Gegensatz zum histori-
schen Bild, in dem Lysosomen hauptsächlich als termi-
nale, unflexible Abfallkompartimente gesehen wurden,
besteht zunehmend Klarheit darüber, dass es sich bei
den Lysosomen um außerordentlich dynamische Or-
ganellen handelt, die kontinuierlich Zufluss vom 3 Sei-
ten, aus den zellulären Synthesewegen, dem Endozy-
tosesystem und dem autophagischen System, erhalten.
Sie kontaktieren späte Endosomen über „kiss-and-run“-
Mechanismen und sind auch imstande, mit der
Plasmamembran zu fusionieren.
Die Abbildungen A–C zeigen Lysosomen (Ly) im
Zytoplasma resorbierender Dünndarmepithelzellen
(Abb. A und B) und einer Leberepithelzelle (Abb. C) der
Ratte. In Abbildung C stellen sich die Lysosomen nach
einer Uranylazetat/Methylzellulose-Adsorptionsfärbung
der Dünnschnitte nach Einbettung in Lowicryl K4M
besonders distinkt und intensiv kontrastiert dar (siehe
auch Abb. 80). Die Abbildungen zeigen deutlich die aus-
geprägte Heterogenität der Lysosomen in Größe, Gestalt
und Inhalt. Dicht gepackte Membrankonvolute sind in
den Lysosomen in Abbildung B und im Nebenbild
besonders auffällig. Obwohl Lysosomen in allen Zyto-
plasmabereichen zu finden sind, besteht eine bevorzugte
Konzentration in der Golgi Region (Abb. A und C), für
die ein Regulationsmechanismus über Rab7 und Rab34
Proteine, die mit einem Rab-bindenden lysosomalen
Protein interagieren, verantwortlich gemacht wird. Die
dilatierten Zisternen des Golgi Apparats in der Dünn-
P P
GlcNAc-1-Phosphotransferase GlcNAc-1-Phosphodiester
+ 2 UDP-GlcNAc α-N-Azetylglukosaminidase
Asn Asn
Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
darmepithelzelle in Abbildung A enthalten zahlreiche
Lipoproteinpartikel (LP). In allen drei Bildern sind auch
Autophagosomen (AV) und zahlreiche Mitochondrien
(M) zu sehen.
Die lysosomalen Enzyme werden am rauen endo-
plasmatischen Retikulum synthetisiert und dort initial
glykosyliert. Im Golgi Apparat werden die Zuckerketten
in einer für lysosomale Enzyme charakteristischen
Weise modifiziert. In einem 2-Stufen Prozess, der an
der cis-Golgi Seite beginnt und in den medialen
Zisternen fortgesetzt wird, werden durch die beiden
Enzyme N-Azetyl-Glukosaminyl (GlcNAc)-1-Phospho-
transferase and GlcNAc-1-Phosphodiester alpha-N-
Azetylglukosaminidase (siehe die Darstellung in der
Zeichnung) an den Asparagin-gebundenen Oligo-
saccharidketten die für lysosomale Enzyme typischen
Mannose-6-Phosphat Reste eingesetzt. Die Mannose-6-
Phosphat-tragenden Zuckerketten sind für eine effek-
tive Sortierung der lysosomalen Enzyme in die lysoso-
malen Transportwege notwendig (siehe Abb. 49).
Literatur
Bucci C, Thomsen P, Nicoziani P, McCarthy J, and van Deurs B
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distinguishes it from its related proteins in its regulation of lyso-
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Asn Biol Cell 15: 815
Vergrößerung: x 26,500 (A); x 26,000 (B); x 17,000 (Nebenbild);
x 43,000 (C)
Abbildung 48 97

M
Ly
Ly
M

LP AV

Golgi

A B

Ly
AV

AV
Ly

Ly

M
AV Golgi
M

C
98 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
LOKALISATION SAURER PHOSPHATASE , LAMP UND POLYLAKTOSAMIN
Lysosomale Enzyme und Membranproteine können mit
Hilfe zytochemischer Methoden und Immunogold-
markierung lokalisiert werden. Abbildung A zeigt eine
enzymzytochemische Darstellung der sauren Phospha-
tase in einer Pankreasazinuszelle der Ratte. Das sehr
elektronendichte, bleihältige Reaktionsprodukt ist
innerhalb der Zisternen an der trans-Golgi Seite, in
coated Vesikeln, die sich von dort abschnüren (Pfeil), in
kondensierenden Vakuolen (CV) und in Lysosomen
(Ly) lokalisiert. Die reifen Sekretgranula (Zymogen-
granula – ZG) sind im Gegensatz dazu nicht reaktiv. Die
Lokalisation der sauren Phosphatase an der trans-Golgi
Seite spiegelt den gut charakterisierten Weg der lysoso-
malen Enzyme vom Golgi Apparat zu den Endosomen
und Lysosomen. Zum Teil werden die Reaktionen aber
auch mit Endoproteasen und mit der Spaltung von
Cytidinmonophosphat, das während der terminalen
Glykosylierung entsteht (siehe Abb. 26), in Zusammen-
hang gebracht.
Lysosomale Enzyme werden vom Golgi Apparat und
trans-Golgi Netzwerk (TGN) über spezifische Rezeptor-
bindung ihrer Mannose-6-Phospat-tragenden Zucker-
ketten (siehe Abb. 48) in die lysosomalen Transportwege
aussortiert. Die entsprechenden Rezeptoren, der Kat-
ionen-abhängige und Kationen-unabhängige Mannose-
6-Phosphatrezeptor, sitzen in den trans-Golgi und
TGN-Membranen. Über Interaktion von Dileuzin-
Signalen in ihren zytosolischen Domänen mit GGAs
(Golgi lokalisierten, Gammaohr-tragenden ARF-
bindenden Proteinen) und Zusammenspiel der GGAs
mit Adapterproteinen (Adapterprotein-1 – AP-1) und
Clathrin werden die Enzym-Rezeptorkomplexe in
Clathrin-coated Vesikel, die vom trans-Golgi und TGN
absprossen, gepackt und gelangen auf diesem Weg zu
endosomalen Kompartimenten. Durch das saure Milieu
in den Endosomen dissoziieren die lysosomalen
Enzyme von den Rezeptoren und werden in der flüssi-
gen Phase zu Lysosomen transferriert (siehe Abb. 48),
während die Rezeptoren unter Einbeziehung von AP-1
und einem „Retromer“-Proteinkomplex zum TGN
rücktransportiert werden.
Die Abbildungen B und C zeigen Markierungen für
Bestandteile lysosomaler Membranen. Die Membran
der Lysosomen, die Protonenpumpen für den Transport
von Wasserstoffionen in das Lumen und Proteine für
den Transport der Abbauprodukte zurück in das
Zytoplasma enthält, muss der Auflösung durch die im
Lumen aktiven Enzyme widerstehen. Die Struktur-
proteine der lysosomalen Membranen, die Lamps
(Lysosomen-assoziierte Membranproteine), Limps
(lysosomale integrale Membranproteine) und Lgps
(lysosome Membranglykoproteine) sind luminal
hochglykosyliert. Die humanen Proteine Lamp-1 und
Lamp-2 wurden als Sialoglykoproteine mit Poly-
laktosaminketten charakterisiert. In Abbildung B wird
Lamp an Lysosomen (Ly) von HeLa-Zellen durch
Immunogoldmarkierung nachgewiesen. Abbildung C
zeigt den Nachweis von Polylaktosamin in HeLa-Zell-
Lysosomen mit Hilfe von Gold-markiertem Datura stra-
monium Lektin.
In Zellen vorwiegend hämatopoetischer Abstam-
mung sind Lysosomen auch sekretorische Organellen.
Dazu gehören Granulozyten (Abb. 156, 157), Mastzellen
(Abb. 127), Makrophagen (Abb. 125, 127) und dendri-
tische Zellen, B- und T-Lymphozyten (Abb. 159),
Thrombozyten (Abb. 160, 161) und Osteoklasten
(Abb. 136).
Literatur
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Vergrößerung: x 21,000 (A); x 42,000 (B); x 55,000 (C)
Abbildung 49 99

CV

ZG
Golgi

ZG Golgi
CV
ZG

Golgi

Ly

LAMP Polylaktosamin

Ly Ly

Ly

Ly
Ly

B C
100 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
DIE I-ZELLKRANKHEIT
Die I-Zellkrankheit (Mukolipidose II) ist eine autoso-
mal rezessiv vererbte lysosomale Speicherkrankheit. Der
zugrundeliegende Defekt besteht in einer gestörten
Synthese des Mannose-6-Phosphats an lysosomalen
Enzymen, das für das Erkennen und Targeting dieser
Enzyme in die Lysosomen essentiell ist. Die
N-Azetylglukosaminyl-1-Phosphotransferase, welche
den ersten Schritt bei der Biosynthese des Mannose-
6-Phosphats bewerkstelligt, ist defekt (siehe Abb. 48).
Da alle lysosomalen Enzyme betroffen sind, sind die
Folgen der I-Zellkrankheit besonders schwerwiegend.
Wegen des fehlenden Erkennungsmarkers werden alle
de novo synthetisierten lysosomalen Enzyme nach
extrazellulär sezerniert. Ein erhöhter Serumspiegel ver-
schiedenster lysosomaler Enzyme ist somit von diagnos-
tischer Bedeutung.
Morphologisch lassen sich zahlreiche membranbe-
grenzte Vakuolen nachweisen, die der Krankheit ihren
Namen gegeben haben: Inklusions-Zellkrankheit.
Abbildung A zeigt Fibroblasten der Dermis einer
Hautbiopsie mit zahlreichen, das Zytoplasma ausfüllen-
den membranbegrenzten Vakuolen. Das Nebenbild
illustriert den charakteristischen Inhalt der Vakuolen,
der aus granulärem elektronendichtem Material besteht.
Gelegentlich finden sich, wie hier sichtbar, auch größere
Ablagerungen. Abbildung B ist von der gleichen
Hautbiopsie und zeigt von der Speicherung betroffene
Schwann-Zellen und Fibroblasten (Pfeile). Ein kleiner
myelinierter Nerv (NF) ist nicht betroffen. Solche elek-
tronenmikroskopischen Befunde sind eindeutige
Hinweise auf das Vorliegen einer I-Zellkrankheit.
Klinisch ist die I-Zellkrankheit charakterisiert durch
frühes Auftreten und fortschreitende psychomotorische
Retardation, die mit Skelettabnormalitäten und groben
Gesichtszügen („Wasserspeiergesicht“) verbunden sind.
Überraschenderweise sind verschiedene Zellen, wie
Hepatozyten, Kupffer-Zellen und Leukozyten nicht vom
Mangel an lysosomalen Enzymen betroffen. Das
bedeutet, dass sie lysosomale Enzyme über einen gegen-
wärtig noch unbekannten Mannose-6-Phosphat unab-
hängigen Mechanismus endozytieren können.
Die N-Azetylglukosaminyl-1-Phosphotransferase ist
ein komplex aufgebautes Molekül, das aus drei Unter-
einheiten (_2`2a2) besteht. Das für die _- und `-Unter-
einheiten kodierende Gen liegt auf Chromosom 12p
und dasjenige für die a-Untereinheit auf 16p. Die
genetischen Defekte bei der I-Zellkrankheit sind wenig
charakterisiert. Wahrscheinlich sind Punktmutationen
oder kleine Deletionen die Ursache für das Fehlen von
Transkripten für die _- und `-Untereinheiten.
Die Behandlung der Patienten ist rein symptoma-
tisch. Die pränatale Diagnose der I-Zellkrankheit gelingt
durch den Nachweis erhöhter lysosomaler Enzym-
aktivitäten in der Fruchtwasserflüssigkeit und ihrem
gleichzeitigen weitgehenden Fehlen in kultivierten
Amnionzellen.
Literatur
Carey WF, Jaunzems A, Richardson M, Fong BA, Chin SJ, and
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Vergrößerung: x 7,500 (A); x 21,000 (Nebenbild); x 7,000 (B)
Abbildung 50 101

Mukolipidose II (I-Zellkrankheit)

Nukleus

NF

B
102 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
MORBUS GAUCHER
Der Morbus Gaucher, der in drei Typen unterteilt wird,
die sich hinsichtlich ihres klinischen Verlaufs und des
Organbefalls unterscheiden, ist die häufigste lysosomale
Speicherkrankheit. Allen gemeinsam ist eine gestörte
Hydrolyse des Glukosylzeramids (Glukozerebrosid), die
zur lysosomalen Akkumulation dieses Glykolipids
vorzugsweise in Phagozyten führt.
Beim Typ 1 Gaucher sind Leber und Milz durch
Makrophagen vergrößert und gelegentlich funktionell
beeinträchtigt. Das Knochenmark kann von Speicher-
zellen (Makrophagen) erfüllt sein, was zur Beein-
trächtigung der Hämatopoese führt. Die resultierende
Thrombozytopenie verursacht häufig Blutungen.
Die ultrastrukturell beobachteten Merkmale der
befallenen Zellen in Typ 1 Gaucher sind derart charak-
teristisch, dass sie die zweifelsfreie Diagnose ermög-
lichen. Die lysosomale Speicherung wird in Phagozyten
vornehmlich des Knochenmarks, der Leber und der
Milz beobachtet. Abbildung A zeigt eine Gaucher-Zelle,
die durch das Vorhandensein zahlreicher aufgeblähter
Lysosomen enorm vergrößert ist (Durchmesser bis zu
200 µm). Abbildung B zeigt eine betroffene Kupffer-
Zelle in einer Leberbiopsie mit den pathognomonischen
Veränderungen. In dieser Gaucher-Zelle erscheint das
Zytoplasma wie zerknittertes Seidenpapier. Bei stärkerer
Vergrößerung, wie in Abbildung B gezeigt, sind die
Lysosomen mit den typischen Bündeln von verdrehten
tubulusartigen Strukturen erfüllt.
Der Morbus Gaucher ist eine X-chromosomal, auto-
somal rezessiv vererbte Erkrankung und bedingt durch
Mutationen im Gen der lysosomalen `-Glukosidase
(Glukozerebrosidase), das sich auf Chromosom 1q21
befindet. Die Krankheit tritt am häufigsten unter den
Ashkenazi Juden auf. In der Regel handelt es sich um
Misssensmutationen, unter denen die N370S Mutation
die häufigste ist. Die Mutationen haben die Synthese
eines Enzyms zur Folge, dessen katalytische Aktivität
und Stabilität herabgesetzt sind.
Wie bereits erwähnt existieren drei Typen des
Morbus Gaucher: der Typ 1 ohne, der Typ 2 mit akuter
und der Typ 3 mit subakuter primärer Einbeziehung des
zentralen Nervensystems. Charakteristischerweise ist die
Krankheit sowohl geno- als auch phänotypisch hetero-
gen und der Typ 1 ist der häufigste.
Typ 1 Gaucher stellt ein klassisches Beispiel für
Enzymersatztherapie dar. Die Effizienz der Therapie
konnte durch den Einsatz von rekombinantem Enzym
gesteigert werden, dessen Glykane so konstruiert wur-
den, dass sie vom Mannoserezeptor an der Oberfläche
von Makrophagen erkannt wurden. Das resultierte in
effizienter Rezeptor-vermittelter Endozytose des Enzyms
durch Makrophagen.
Literatur
Barneveld RA, Keijzer W, Tegelaers FP, Ginns EI, Geurts van
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Jordan S (1964) Electron microscopy of Gaucher cells. Exp Mol
Pathol 3: 76
Vergrößerung: x 7,000 (A); x 29,000 (B)
Abbildung 51 103

Morbus Gaucher

Gaucher-Zelle

Nukleus

B
104 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
MORBUS FABRY
Der Morbus Fabry ist eine X-chromosomal, rezessiv
vererbte lysosomale Speicherkrankheit, die durch einen
Mangel oder das Fehlen von _-Galaktosidase A bedingt
ist. Dadurch kommt es zur lysosomalen Speicherung
von Glykosphingolipiden mit terminalen _-Galaktose-
resten, wie beispielsweise Globotriaosylzeramid und in
geringerem Ausmaß von Galabiosylzeramid und Blut-
gruppe B Substanz.
Das Verteilungsmuster der Glykosphingolipid-
ablagerung beim Morbus Fabry ist charakteristisch und
bezieht hauptsächlich das Endothel und die glatte
Muskulatur der Blutgefäße ein, wie in Abbildung A
illustriert ist. Sowohl die aufgetriebenen Endothelzellen
wie auch die glatten Muskelfasern enthalten zahlreiche
vergrößerte, multilamelläre Einschlüsse aufweisende
Lysosomen (Sterne). Dieses Material erscheint licht-
mikroskopisch doppeltbrechend. Die lysosomalen
Ablagerungen bestehen aus konzentrisch oder parallel
angeordneten Lamellen, wie aus Abbildung B ersichtlich
ist. Bei stärkerer Vergrößerung sind die alternierend
elektronendichten und -luzenten Linien klar erkennbar
(Abb. C). Die gleichen Einschlüsse können in den
Lysosomen von Neuronen des peripheren und zentralen
Nervensystems, in Podozyten und Tubulusepithelien
der Niere, Epithelien der Kornea und Myokardiozyten
beobachtet werden. Typischerweise finden sich in der
Haut Angiokeratome, die aus beträchtlich erweiterten
Kapillaren der dermalen Papillen bestehen. Die
Hauptquellen für die gespeicherten Glykosphingolipide
stellen zum einem das von Hepatozyten synthetisierte
und mit Low-Density-Lipoprotein assoziierte
Globotriasylzeramid und zum anderen das High-
Density-Lipoprotein und Globosid von Erythrozyten
dar.
Die gespeicherten Glykosphingolipide können zyto-
chemisch mit dem Bandeiraea simplicifolia Lektin, das
mit terminalen _-Galaktoseresten reagiert, oder mit
einem gegen Globotriasylzeramid gerichteten mono-
klonalen Antikörper nachgewiesen werden.
Das für die _-Galaktosidase A kodierende Gen
befindet sich auf Chromosom Xq22.1. Beim Morbus
Fabry existiert keine Genotyp-Phänotyp Korrelation.
Weder der Typ noch die Lage der Mutation ist von
prädiktivem Wert. Klinisch sind klassische hemizygote
Patienten mit fehlender Enzymaktivität und frühem
Auftreten von Krankheitssymptomen von den atypi-
schen Hemizygoten mit unterschiedlicher Restenzym-
aktivität und daraus resultierenden fehlenden oder erst
spät auftretenden Krankheitssymptomen zu unterschei-
den. Bei letzteren können sich die Speicherungen auf
das Myokard begrenzen.
Die klinischen Folgen der lysosomalen Speicherun-
gen in den Gefäßen von Niere, Herz und Gehirn mani-
festieren sich als Ischämie und Thrombenbildung, die
zu Infarkten in diesen Organen führen. Die Gefäß- und
Parenchymläsionen in der Niere führen zur Bildung von
Schrumpfnieren, gefolgt von Niereninsuffizienz und
Hypertonie. Die Ablagerungen in den Nervenzellen sind
die wahrscheinliche Ursache für Parästhesien,
Schmerzattacken, Hypohydrose und andere allgemeine
neurologische Symptome. Zusätzlich zur chronischen
ischämischen Herzkrankheit treten Linksventrikel-
hypertrophie und Mitralklappeninsuffizienz auf. In
atypischen hemizygoten Patienten kann die einzige
klinische Manifestation in einer Kardiomyopathie mit
Linksventrikelhypertrophie bestehen.
Literatur
Cable WJ, Dvorak AM, Osage JE, and Kolodny EH (1982) Fabry
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334
Vergrößerung: x 9,800 (A); x 25,000 (B); x 220,000 (C)
Abbildung 52 105

Morbus Fabry Endothel

*
*

Elastica interna

glatte Muskelzelle

B C
106 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
GM2-GANGLIOSIDOSEN
Die GM2-Gangliosidosen stellen eine heterogene
Gruppe autosomal rezessiv vererbter lysosomaler
Speicherkrankheiten dar, die durch die Speicherung von
GM2-Gangliosid und verwandten Glykolipiden charak-
terisiert sind. Die Ursachen für das Auftreten der ver-
schiedenen GM2-Gangliosidosen liegen im kompli-
zierten Abbauweg des GM2-Gangliosids. Zunächst
erfolgt die Komplexbildung mit dem GM2-Aktivator,
die von der Hydrolyse des GM2-Gangliosids durch die
`-Hexosaminidase A and B gefolgt ist. Somit können
Mutationen in jedem der für diese drei Proteine
kodierenden Gene krankheitsverursachend sein. Der
Morbus Tay-Sachs und seine Varianten sind durch
Mutationen des auf Chromosom 15 befindlichen
HEXA-Gens bedingt, das für die _-Untereinheit der
Hexosaminidase A kodiert. Der Morbus Sandhoff und
seine Varianten sind durch Mutationen des auf
Chromosom 5 lokalisierten HEXB-Gens verursacht, das
für die gemeinsame `-Untereinheit der Hexosaminidase
A und B kodiert. Mutationen des auf Chromosom 5
befindlichen GM2A-Gens verursachen GM2-Aktivator-
Mangel.
Nicht unerwartet manifestieren sich die komplexen
genetischen Ursachen der GM2-Gangliosidosen in kom-
plexen Krankheitsbildern, denen allen die Einbeziehung
des Nervensystems mit lysosomaler Speicherung in allen
Neuronen gemeinsam ist. Charakteristischerweise sind
die Perikarya wegen der Anwesenheit zahlreicher ver-
größerter Lysosomen aufgetrieben. Elektronen-
mikroskopisch bestehen die Speicherungen aus konzen-
trisch angeordneten multilamellären Membranen, die
sich somit feinstrukturell von denen der I-Zellkrankheit
(Abb. 50), dem Morbus Fabry (Abb. 52) und dem
Morbus Farber (Abb. 54) sowie der metachromatischen
Leukodystrophie (Abb. 153) und der neuronalen
Zeroid-Lipofuszinose (Abb. 154) unterscheiden. Beim
Morbus Sandhoff sind die lysosomalen Speicherungen
nicht nur in Neuronen, sondern auch in Leber, Lunge,
Niere, Milz und Lymphknoten vorhanden. In der Leber
sind Hepatozyten und Kupffer-Zellen betroffen, wie in
den Abbildungen A und B illustriert ist. Die Hepato-
zyten sind von herdförmig angeordneten, manchmal
konfluierenden Einschlusskörpern erfüllt (Pfeile in
Abb. B). Bei dieser Vergrößerung sind die konzen-
trischen multilamellären Einschlüsse gut erkennbar.
Die zytoplasmatischen Einschlusskörper in den
Perikarya der Neuronen verursachen Fehlfunktionen
von neuronalen Schaltkreisen, die zu Dystonie, spino-
zerebellarer Degeneration und Erkrankungen der
Motoneuronen führen. Die abnormale Vernetzung der
neuronalen Schaltkreise mit der Bildung aberranter
synaptischer Kontakte scheint kausal zu sein. Allerdings
ist der genaue pathogenetische Mechanismus unbekannt.
Verschiedene Behandlungsarten für die GM2-Gan-
gliosidosen sind evaluiert worden, wie Enzym-
ersatztherapie und Knochenmarkstransplantation. Die
pränatale Diagnose kann durch die Messung der
Aktivität für `-Hexosaminidase A and B gestellt werden,
die ohne weiteres durch die Untersuchung von Amnion-
flüssigkeit gelingt.
SER: glattes endoplasmatisches Retikulum; M: Mito-
chondrien; Pfeilköpfe: Glykogen.
Literatur
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A review. Dev Neurosci 13: 205
Vergrößerung: x 11,000 (A); x 36,000 (B)
Abbildung 53 107

GM2-Gangliosidose (Sandhoff)

M SER

A M Nukleus

B
108 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
MORBUS FARBER
Der Morbus Farber, auch als saurer Zeramidase-Mangel
oder Farber’sche Lipogranulomatose bezeichnet, ist eine
autosomal rezessiv vererbte lysosomale Speicherkrank-
heit, die mit Zeramidspeicherung einhergeht. Da das
gespeicherte Zeramid in Lysosomen eingeschlossen ist,
hat es keine Funktion als Signalmolekül.
Die auffallenden histologischen Veränderungen
bestehen in Granulomen, die aus mit Lipiden beladenen
Schaumzellen zusammengesetzt sind und von Lympho-
zyten, Makrophagen und vielkernigen Riesenzellen
umgeben sein können. Abbildung A zeigt eine
Schaumzelle in der Hautbiopsie eines an Morbus Farber
erkrankten Patienten. Sie enthält zahlreiche große (bis
zu 3 µm messende) Einschlusskörper von irregulärer
Gestalt (Sterne in Abb. A), die von der lysosomalen
Membran umgeben sind. Bei stärkerer Vergrößerung,
wie in Abbildung B gezeigt, können die ultrastrukturell
kennzeichnenden Einschlüsse erkannt werden. Es han-
delt sich um kommaförmige, kurviglineare Tubuli, die
als Farber Bodies bezeichnet werden. Wegen ihrer be-
sonderen Form werden sie auch Bananen-Körperchen
genannt. Ihr Nachweis ermöglicht die zweifelsfreie
Diagnose eines Morbus Farber.
Die Erkrankung ist durch einen Mangel an lysoso-
maler saurer Zeramidase bedingt, die aus einer 13 kDa
_-Untereinheit und einer 40 kDa `-Untereinheit be-
steht. Es handelt sich um eine typische Bilanzstörung
mit einer normalen Syntheserate von Zeramid. Jedoch
kann das vom Abbau komplexer Glykolipide herstam-
mende Zeramid nicht hydrolysiert werden. Das für die
beiden Enzymuntereinheiten kodierende Gen liegt auf
Chromosom 8p21.3/22. Gegenwärtig sind als Krank-
heitsursache sowohl Punktmutationen als auch zwei
Spleissort Mutationen, die zur Deletion von Exon 6 und
Exon 13 führen, bekannt. Klinisch werden sieben
Phänotypen der Krankheit unterschieden, wobei fünf
von ihnen sich lediglich durch die Schwere der
Erkrankung und unterschiedliche Organmanifes-
tationen unterscheiden. Der Typ 6 stellt eine Kombi-
nation von Morbus Farber und Morbus Sandhoff dar,
und Typ 7 ist durch einen gleichzeitigen Mangel an
saurer Zeramidase, Glukozerebrosidase und Galakto-
zerebrosidase verursacht. Die klassischen klinischen
Symptome bestehen in schmerzhaften Gelenk-
schwellungen und dem Auftreten von subkutanen
Knoten im Bereich der betroffenen Gelenke und
Druckpunkte sowie fortschreitender Heiserkeit durch
Kehlkopfveränderungen. Bei Typ 4 bestehen zusätzlich
Hepatosplenomegalie und bei Typ 5 progrediente neu-
rologische Symptome. Die Diagnose kann anhand der
erwähnten klassischen Symptome, durch den Nachweis
einer dramatisch reduzierten Aktivität der sauren
Zeramidase () 6% vom Normalwert) und die elektro-
nenmikroskopische Untersuchung einer Hautbiopsie
gestellt werden. Die pränatale Diagnose gelingt durch
Enzymaktivitätsbestimmung in kultivierten Amnion-
zellen oder Chorionzotten.
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Vergrößerung: x 8,500 (A); x 41,000 (B)
Abbildung 54 109

Morbus Farber

*
*

B
110 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
MORBUS WOLMAN
Der Morbus Wolman ist eine autosomal rezessiv
vererbte lysosomale Speicherkrankheit, die durch einen
Mangel an lysosomaler saurer Lipase bedingt ist.
Die gezeigte elektronenmikroskopische Abbildung
stammt von der Leberbiopsie eines Patienten und zeigt
die typischen feinstrukurellen Veränderungen. Das Zyto-
plasma der Hepatozyten ist von zahlreichen, in ihrer
Größe stark variierenden, tropfenartig aussehenden
Lysosomen erfüllt (Sterne), die erwartungsgemäß von
einer Membran begrenzt sind, wie bei starker Ver-
größerung im Nebenbild zu sehen ist. Das gespeicherte
Material stellt sich elektronenmikroskopisch strukturlos
dar, was in deutlichem Kontrast zur auffälligen Struktur
der Ablagerungen bei anderen lysosomalen Speicher-
krankheiten, wie dem Morbus Gaucher (Abb. 51), Fabry
(Abb. 52) und Farber (Abb. 54) steht. Gleichwohl sind
die strukturlos erscheinenden lysosomalen Einschlüsse
charakteristisch und ähnlich pathognomonisch bedeu-
tend wie ihre strukturierten Gegenbeispiele. An dieser
Stelle sollte erwähnt werden, dass die elektronen-
mikroskopischen Untersuchungen von Haut- oder
Leberbiopsien einen bedeutenden Platz bei der
Diagnosestellung lysosomaler Speicherkrankheiten ein-
nehmen.
Das Gen für die saure Lipase befindet sich auf
Chromosom 10q23 und diverse Typen von Mutationen
wie Nonsens- und Misssens-Mutationen, Frameshifts
und das Überspringen von Exons sind krankheitsverur-
sachend. Durch den Mangel an saurer Lipase kommt es
zur massiven Speicherung von Cholesterinestern und
Triglyzeriden in den Lysosomen, was zur Hepatomegalie
führt. Lysosomale Speicherungen treten auch in den
Nebennieren auf und verursachen Nekrosen mit nach-
folgenden dystrophischen Verkalkungen. Bedingt durch
das fehlende Austreten von freiem Cholesterin aus
Lysosomen werden die Low-Density-Lipoprotein
Rezeptoren und die HMG-CoA Reduktase aufreguliert.
Das führt zu einer vermehrten de novo Cholesterin-
synthese und vermehrter Rezeptor-vermittelter
Endozytose von Cholesterin. Hierbei handelt es sich um
einen typischen Circulus vitiosus, der zu vermehrter
lysosomaler Speicherung und insgesamt einer
Verschlechterung der Krankheit führt.
Die klinischen Symptome des Morbus Wolman
bestehen in Hepatosplenomegalie und gastrointesti-
nalen Beschwerden wie Erbrechen und Durchfall. Die
Therapie ist symptomatisch und besteht in einer
Behandlung mit HMG-CoA Reduktasehemmern und
Hemmern der Cholesterinsynthese und Apolipo-
protein B Produktion.
Literatur
Anderson R, Byrum R, Coates P, and Sando G (1994) Mutations
at the lysosomal acid cholesteryl ester hydrolase gene locus in
Wolman disease. Proc Natl Acad Sci USA 91: 2718
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Mutat 12: 44
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ial xanthomatosis with involvement and calcification of the
adrenals: report of two more cases in siblings of a previously
described infant. Pediatrics 28: 742
Vergrößerung: x 7,900; x 120,000 (Nebenbild)
Abbildung 55 111

Morbus Wolman

Nukleus

*
112 Das Zytoplasma: das lysosomale System und Erkrankungen
GLYKOGENOSE VOM TYP II
Diese lysosomale Speicherkrankheit ist eine autosomal
rezessiv vererbte Erkrankung und wird auch als saurer
Maltasemangel oder Pompe’sche Krankheit bezeichnet.
Das Glykogen wird in den Lysosomen gespeichert,
im Gegensatz zu allen anderen Glykogenspeicher-
krankheiten, bei denen die Speicherung zytosolisch ist
(siehe Abb. 64B). Die Leber ist am stärksten betroffen.
Abbildung A zeigt die lysosomale Glykogenspeicherung
(Sterne) in Hepatozyten einer Leberbiopsie. Das
Nebenbild zeigt einen Ausschnitt eines Glykogen-spei-
chernden Lysosoms mit seiner Membran. Das gespei-
cherte Glykogen erscheint strukturell normal. Zu-
sätzlich sind in Abbildung A auch typische Glykogen-
partikeln im Zytosol sichtbar (siehe Abb. 64A).
Die Krankheit ist durch einen Mangel an lysosomaler
saurer _-Glukosidase verursacht, deren Gen auf Chro-
mosom 17q25 liegt. Es sind eine Vielzahl krankheits-
verursachender Mutationen bekannt. Klinisch können
verschiedene Krankheitsbilder unterschieden werden,
die alle mit einer Myopathie einhergehen aufgrund der
Glykogenspeicherungen in der Herz- und Skelett-
muskulatur sowie der glatten Muskulatur. Thera-
peutisch wird Enzymsubstitution durchgeführt. Die
somatische Gentherapie befindet sich im experi-
mentellen Stadium. Knochenmarkstransplantationen
haben bislang keine befriedigenden Resultate erbracht.
Literatur
Hirschhorn R, and Reuser A (2001) Glycogen storage disease type
II: acid _-glucosidase (acid maltase) deficiency. In: The metabolic
and molecular bases of inherited diseases (Scriver C, Beaudet A,
Valle D, and Sly W, eds). New York: McGraw Hill, pp 3389
Huie M, Chen A, Tsujino S, Shanske S, DiMauro S, Engel A, and
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storage disease type II (GSDII): molecular identification of an
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Pompe J-C (1932) Over idiopatische hypertrophie van het hart.
Ned Tijdschr Geneesk 76: 304
ZYSTINOSE
Die Zystinose ist eine seltene, autosomal rezessiv
vererbte Erkrankung, die den lysosomalen Membran-
transport betrifft. Bedingt durch einen Defekt im
Carrier-vermittelten Zystintransport durch die lysoso-
male Membran kommt es zu einem zehn- bis einhun-
dertfach erhöhten Gehalt an freiem Zystin in den
Lysosomen. Das führt zur Ausbildung von Kristallen in
den Lysosomen (Sterne in Abb. B), die dadurch enorm
vergrößert sind und die verschiedensten Formen
aufweisen können. Rechteckige Einschlüsse verursachen
Doppeltbrechnung im Lichtmikroskop. Die Speiche-
rung kann in den Lysosomen der verschiedensten
Gewebe und Organe nachgewiesen werden und führt
zu einem fortschreitenden Schaden der Lysosomen.
Hauptsächlich sind die Nieren betroffen mit nachfol-
gender Ausbildung eines tubulären Fanconi-Syndroms
und glomerulären Schäden, die eine Dialyse oder
Nierentransplantation nötig machen.
Der krankheitsverursachende Defekt betrifft das
Zystinosin, ein polytopes Membranprotein. Das
Zystinose Gen, CNTS, liegt auf Chromosom 17p13. Für
die Diagnosestellung ist der Nachweis eines erhöhten
Zystingehalts im peripheren Blut maßgebend.
Literatur
Gahl W, Thoene J, and Schneider J (2001) Cystinosis: a disorder
of lysosomal membrane transport. In: The metabolic and
molecular bases of inherited diseases (Scriver C, Beaudet A, Valle
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Shotelersuk V, and Bouffard G (2000) The genomic region
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gene within the common cystinosis-causing deletion. Genome
Res 10: 165
Town M, Jean G, Cherqui S, Attard M, Forestier L, Whitmore S,
and Callen D (1998) A novel gene encoding an integral mem-
brane protein which is mutated in nephropathic cystinosis. Nat
Genet 18: 319
Vergrößerung: x 12,000 (A); x 117,000 (Nebenbild); x 8,200 (B)
Abbildung 56 113

Glykogenose Typ II (Pompe)

*
*

Zystinose

Nukleus

* *

*
B
114
AUTOPHAGOSOMEN : ORGANELLEN FÜR DIE LIMITIERTE SELBSTVERDAUUNG
Autophagozytose ist ein unter physiologischen und
pathologischen Bedingungen auftretender Prozess. Es
handelt sich um einen komplexen und regulierten
Vorgang, der als Folge von Fasten, zellulärer Überbelas-
tung oder Zellschädigung eintritt und zur Entfernung
überzähliger oder geschädigter Organellen und Anteile
des Zytosols führt. Makrophagozytose ist die Segrega-
tion und anschließende Verdauung von Organellen und
Anteilen des Zytosols, Makropexie die Autophagozytose
von Peroxisomen, Krinophagie die von Sekretgranula
endokriner Zellen, und Mikroautophagie die von
kleinen Anteilen des Zytosols.
Ein bewährtes experimentelles System zur Analyse
der Makropexie ist die Behandlung von Ratten mit Di-
(2-Äthylexyl) Phthalatin, die zur Proliferation von
Peroxisomen führt. Die überzähligen Peroxisomen wer-
den durch Autophagozytose eliminiert. Am Beginn steht
die Entwicklung der Autophagie Vakuole. Es bildet sich
eine Doppelmembran (Pfeilköpfe in Abb. A) um die
Organelle(n), die sich schließt und zur Sequestrierung
der Organelle(n) führt. Die Sequestrierungsmembran
stammt wahrscheinlich vom endoplasmatischen
Retikulum ab, da sie Marker wie Glukose-6-Phospha-
tase, Karboxyesterase 1 und Glukosidase II enthält.
Frühe Autophagie Vakuolen enthalten keine lysosoma-
len Hydrolasen und die Sequestrierungsmembran
besitzt keine lysosomalen Membranproteine. Durch die
Fusion mit Lysosomen oder späten Endosomen werden
lysosomale Enzyme und Membranbestandteile in die
Autophagie Vakuole eingebracht. Abbildung B zeigt die
Fusionsstelle (Pfeile) eines Lysosoms mit einer
Autophagie Vakuole (Pfeilköpfe). Abbildung C illus-
triert eine solche Fusion mit dem zusätzlichen
Immungold Nachweis eines lysosomalen Membran-
glykoproteins. Die Markierung ist auf die Membran des
fusionierenden Lysosoms (Pfeile) begrenzt. Die Pfeil-
köpfe weisen auf die nicht markierte Sequestrierungs-
membran hin. Dieser Vorgang leitet die Bildung von
Autophagolysosomen ein. Der Immungold Nachweis
von Kathepsin B in Autophagolysosomen (Sterne) ist in
Abbildung D dargestellt. Ein frühes Autophagolysosom
(Pfeilköpfe) weist nur eine spärliche Markierung auf.
Nach erfolgter Verdauung des Inhalts enthalten die
Autophagolysosomen gewöhnlich einen elektronen-
Das Zytoplasma: die Autophagozytose
dichten Kern nicht verdaubaren Materials und werden
als Restkörper bezeichnet.
Durch Untersuchungen der Autophagozytose an
Hefen konnten die meisten der involvierten Gene und
anschließend ihre Mammalier Homologe identifiziert
werden. Die Tor-Protein Kinase der Hefe ist Bestandteil
eines Signalübertragungssystems für Nährstoffe, das bei
Nährstoffmangel inaktiviert wird. Das führt zur Bildung
von Autophagosomen unter der Beteiligung von drei
Eiweißklassen: den Apg* (Autophagie defizient), Aut*
(Autophagie), und Cvt* (Zytoplasma zu Vakuole)
Proteinen. Aut7p*, ein Ubiquitin-artiges Protein, ist
während der Initialphase der Autophagosomenbildung
von kritischer Bedeutung und fungiert gemeinsam mit
anderen Apg-Proteinen auch in späteren Phasen.
M: Mitochondrium; PO: Peroxisomen.
Literatur
Dunn W (1990) Studies on the mechanism of autophagy: forma-
tion of the autophagic vacuole. J Cell Biol 110: 1923
Dunn W (1990) Studies on the mechanism of autophagy: matu-
ration of the autophagic vacuole. J Cell Biol 110: 1935
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tin-like systems. Nat Rev Cell Biol 2: 211
Shintani T, Klionsky DJ (2004) Autophagy in health and disease:
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Formation of autophagosomes during degradation of excess per-
oxisomes induced by di-(2-ethylhexyl)phthalate treatment. II.
Immunocytochemical analysis of early and late autophagosomes.
Eur J Cell Biol 62: 372
* Entsprechend einer kürzlich eingeführten Nomenklatur für
Autophagie Gene der Hefe werden alle Gene mit ATG bezeichnet.
Vergrößerung: x 32,000 (A, C); x 45,000 (B); x 23,000 (D)
Abbildung 57 115

M
M

PO

PO PO

A B

*
*

M
C D
116 Das Zytoplasma: die Mitochondrien und Abnormitäten
MITOCHONDRIEN VOM CRISTA - UND TUBULUS -TYP
Obwohl Mitochondrien seit den frühen Tagen der
Mikroskopie bekannt sind, ziehen sie wegen ihrer ein-
maligen Eigenschaften und Funktionen, sowohl im zel-
lulären Leben als auch im Zusammenhang mit dem
Zelltod, nach wie vor die größte Aufmerksamkeit auf
sich. In ihrer Größe, Form und Verteilung im Zyto-
plasma bestehen zwischen den Mitochondrien in ver-
schiedenen Zelltypen und auch funktionsabhängig
große Unterschiede. Mitochondrien folgen jedoch in
allen Zellen einem einheitlichen Bauprinzip mit einer
Doppelmembran und einer charakteristischen Kompar-
timentierung. Dadurch ist es auch sehr leicht, Mito-
chondrien elektronenmikroskopisch von anderen Zell-
organellen, zum Beispiel den Peroxisomen (siehe
Abb. 60) zu unterscheiden.
Die Abbildungen A und B zeigen Mitochondrien
vom Crista-Typ in Pankreasazinuszellen der Ratte
eingebettet in Zytoplasma mit dicht gepacktem endo-
plasmatischem Retikulum (Ergastoplasma, siehe Abb.
13). Mitochondrien sind bevorzugt dort zu finden, wo
Energie gebraucht wird. Den Anforderungen entspre-
chend ändern sie ihren Standort und verändern sich
auch temporär in ihrer Form. In beiden Abbildungen
sind die Membranen, die den Intermembranraum
umfassen und begrenzen, die äußere und innere
Mitochondrienmembran, gut zu erkennen. Die äußere
Membran enthält spannungsabhängige Anionenkanäle,
die mitochondrialen Porine, die Ionen und kleine
Moleküle in den Intermembranraum lassen, wodurch
das dortige Milieu dem im Zytoplasma vergleichbar ist.
Die innere Membran ist durch Anreicherung des
Phospholipids Cardiolipin undurchlässig. Sie umgibt
das innerste Kompartiment, die Mitochondrienmatrix,
und enthält die Proteine für die Oxidationsreaktionen
der Atmungskette für die Adenosintriphosphat (ATP)-
Synthese und für den regulierten Transports in die
Matrix und in umgekehrter Richtung. Die innere
Membran ist durch Faltenbildung vergrößert. In den
meisten Zellen zeigt die innere Membran leistenförmige
Oberflächenvergrößerungen, die Cristae (Pfeilköpfe in
Abb. B), die sich kulissenartig in den Matrixraum
schieben. In Steroidhormon-produzierenden Zellen
bildet die innere Mitochondrienmembran typischer-
weise tubuläre Oberflächenvergrößerungen (T in Abb.
C), wie sie am Beispiel von Mitochondrien vom
Tubulus-Typ in einer endokrinen Zelle aus dem Ovar zu
sehen sind (Abb. C).
Die Matrix enthält die Enzyme des Zitronensäure-
zyklus und der Fettsäure-`-Oxidation. Dichte Matrix-
granula, wie sie in den Abbildungen A und B auffällig
sind, dienen der Speicherung von Ca2+-und anderen
divalenten Kationen. Auch die mitochondriale DNA ist
in der Matrix lokalisiert, ebenso die Maschinerien für
die Proteinsynthese, Ribosomen und tRNAs. Allerdings
sind nur einige der mitochondrialen Proteine im mito-
chondrialen Genom kodiert und werden in der Matrix
synthetisiert. Die Mehrzahl der mitochondrialen Pro-
teine wird an freien Ribosomen im Zytoplasma syn-
thetisiert und zur Erreichung ihrer spezifischen Ziele in
den Mitochondrien posttranslational durch die
Mitochondrienmembranen durchgeschleust. Es sind
drei Membranproteinkomplexe, TOM (translocase of
the outer membrane) mit der Import Pore (GIP-gener-
al import pore), TIM 23 und TIM 22 (translocase of the
inner membrane 23 und 22), die bei der Erkennung und
Translokation der mitochondrialen Vorläuferproteine
eine zentrale Rolle spielen.
Mitochondrien sind sehr dynamische Organellen.
Sie vermehren sich durch Teilung in der Interphase
unabhängig vom Zellzyklus. Ununterbrochen stattfin-
dende Teilungs- und Fusionsprozesse schaffen die
Grundlage für die Aufrechterhaltung ihrer Struktur,
Funktion und Vererbung. Mitochondrien sind außeror-
dentlich empfindlich gegenüber zellulären Stress-
situationen und haben eine Schlüsselfunktion bei der
Einleitung des programmierten Zelltods (siehe Abb. 11).
Literatur
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targeting the mitochondrial cell death pathway. Oncogene 21:
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er superfamily, enhances dendritic cell endocytosis. Biochem
Biophys Res Commun 314: 292
Vergrößerung: x 40,000 (A); x 49,000 (B); x 49,500 (C)
Abbildung 58 117

B C
118 Das Zytoplasma: die Mitochondrien und Abnormitäten
STRUKTURABNORMITÄTEN VON MITOCHONDRIEN
Abnormitäten der Ultrastruktur von Mitochondrien
werden am häufigsten bei vererbbaren Krankheiten der
Skelettmuskulatur (Myopathien) und des Zentral-
nervensystems beobachtet. Sie treten aber auch im
Gefolge toxischer Einflüsse auf (Alkohol, Hydrazin, ver-
schiedene gegen Retroviren gerichtete Medikamente).
Obwohl es sich um sehr unterschiedliche Ursachen und
verschiedenartige pathogenetische Mechanismen han-
delt, sind die auftretenden Strukturveränderungen der
Mitochondrien oftmals ähnlich. Sie bestehen in einer
Vermehrung und Vergrößerung der Mitochondrien
sowie in abnormalen Formen wie auch Veränderungen
der Zahl und Gestalt der Cristae und abnormalen
Matrixeinschlüssen. Diese Veränderungen können
wegen der beeinträchtigten oxidativen Phosphory-
lierung schwerwiegende und systemische Folgen haben.
Abbildung A zeigt einen Ausschnitt von einer
Skelettmuskelfaser mit quergeschnittenen Myofibrillen
(Stern). Alle Mitochondrien weisen parakristalline
Einschlüsse auf. Solche Einschlüsse können bei
Enzephalomyopathien und bei speziellen Mitochon-
drien-bedingten Erkrankungen auftreten.
Abbildung B zeigt vergrößerte Mitochondrien, die
unterschiedliche Formen aufweisen und vollständig mit
konzentrisch angeordneten Cristae erfüllt sind (Pfeil-
köpfe), so dass keine Matrix mehr erkennbar ist.
Normal große und strukturierte Mitochondrien sind
mit Pfeilen markiert.
Abbildung C zeigt durch Arzneimittel verursachte
Strukturveränderungen der Mitochondrien von
Hepatozyten einer Leberbiopsie. Als Folge der Therapie
mit einem gegen Retroviren gerichteten Medikament ist
es zum fast vollständigen Verlust der Cristae mit kon-
sekutiver Matrixzunahme gekommen. Vereinzelt sind
Reste von Cristae (Pfeil) zu erkennen. Hingegen sind
sowohl die äußere wie auch die innere Mitochondrien-
membran eindeutig sichtbar, was diese abnormen
Mitochondrien von Peroxisomen (siehe Abb. 60) unter-
scheidbar macht. Gelegentlich können auch para-
kristalline Einschlüsse, wie in Abbildung B gezeigt
beobachtet werden. Die Nebenwirkungen einer anti-
retroviralen Therapie können in einer Beeinträchtigung
der oxidativen Phosphorylierung mit nachfolgender
Myopathie, Neuropathie, Leberverfettung und Azidose
bestehen. Behandlung mit AZT (Zidovidin) führt zur
Schädigung der mitochondrialen DNA durch
Peroxidbildung. Das bedingt eine Beeinträchtigung der
Replikation der mitochondrialen DNA und führt zur
Verminderung der Mitochondrienneubildung. Diese
Nebenwirkung kann durch Radikalfänger unterdrückt
werden.
Literatur
Barile M, Valenti D, Quagliariello E, and Passarella S (1998)
Mitochondria as cell targets of AZT (zidovudine). Gen
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series of muscle biopsy specimens with ultrastructural changes in
the mitochondria. Ultrastruct Pathol 16: 263
Vergrößerung: x 56,000 (A); x 9,500 (B); x 62,500 (C)
Abbildung 59 119

A B

C
120 Das Zytoplasma: die Peroxisomen und peroxisomale Erkrankungen
PEROXISOMEN: ORGANELLEN MIT VIELFÄLTIGEN FUNKTIONEN
Peroxisomen, ehemals Mikrobodies genannt, sind ubi-
quitäre Organellen, die Katalase und H2O2-produzie-
rende oxidative Enzyme enthalten.
Abbildung A zeigt die typische Ultrastruktur der
Peroxisomen (PO). Sie sind von einer einzelnen
Membran begrenzt und enthalten eine elektronendichte
Matrix, die einen kristallinen Einschluss (Stern in Abb.
A) in einigen Spezies besitzt (z. B. in Hepatozyten von
Ratten), der in anderen fehlt (z. B. in Hepatozyten von
Menschen). Sie sind eindeutig von den in Abbildung A
enthaltenen Mitochondrien (M) unterscheidbar.
Peroxisomen sind oftmals von Zisternen des endoplas-
matischen Retikulums (ER) umgeben. Üblicherweise
sind Peroxisomen sphärisch; in Nierentubulusepithelien
einiger Säuger jedoch eckig. In Hepatozyten haben sie
einen Durchmesser von bis zu 1 µm, während sie in
Fibroblasten lediglich 0,1 µm messen. In spezialisierten
Epithelien, proliferierenden Hepatozyten nach partieller
Hepatektomie und bestimmten Hefestämmen bilden
Peroxisomen ein peroxisomales Retikulum.
Trotz ihres einfachen Aufbaus sind Peroxisomen
bemerkenswert kompartmentalisiert, wie mittels
Immunelektronenmikroskopie nachgewiesen wurde.
Abbildung B zeigt eine Immungoldmarkierung für
Katalase, die nur in der Matrix von Peroxisomen der
Rattenleber nachweisbar ist. Im Unterschied dazu
befinden sich die Uratoxidase (Abb. C) und die
Xanthinoxidase nur im kristallinen Einschluss. Die
kristallinen Einschlüsse der Peroxisomen sind aus paral-
lel angeordneten Bündeln hohler Tubuli zusammenge-
setzt. Jeweils zehn solcher primärer Tubuli bilden kreis-
förmige sekundäre Tubuli mit einem äußeren Durch-
messer von 20 nm. Im Lumen der primären Tubuli
befinden sich die Urat- und Xanthinoxidase. Ein wei-
teres eindrucksvolles Beispiel für die Kompartimen-
tierung in Peroxisomen haben die eckigen Peroxisomen
der Rinderniere geliefert. Ihr kristalliner Einschluss
enthält Uratoxidase, die sich anschließende zentrale
Matrixregion die _-Hydroxysäure Oxidase A, die
periphere Matrixregion sowohl Katalase als auch _-
Hydroxysäure Oxidase A und die der begrenzenden
Peroxisomenmembran innen anliegenden Marginal-
platten ausschließlich _-Hydroxysäure Oxidase B.
Abbildung D zeigt die Immungoldmarkierung für das
70 kDa peroxisomale Membranprotein (PMP-70).
Unter den Bedingungen einer Peroxisomenproliferation
findet sich das PMP-70 zusätzlich in Membranschleifen,
die mit den Peroxisomen verbunden sind. Das PMP-70
wurde biochemisch in peroxisomalen Membranen von
geringer Dichte nachgewiesen, die möglicherweise Prä-
Peroxisomen darstellen (siehe Abb. 61).
Die Hauptfunktion der Peroxisomen besteht im
Lipidstoffwechsel. Peroxisomale Oxidasen wandeln
langkettige ungesättigte Fettsäuren über `-Oxidation in
Azetyl-CoA um und oxidieren Intermediärprodukte der
Gallensäuren, Leukotriene und Prostaglandine. Die
oxidativen Enzyme benutzen hierfür molekularen
Sauerstoff, der in H2O2 umgewandelt wird. Peroxi-
somale Katalase spaltet einerseits H2O2 in O2 und
Wasser und oxidiert andererseits verschiedene Subs-
trate, wie Alkohol, Phenol, Formaldehyd und Ameisen-
säure unter Verwendung von H2O2. Hierbei handelt es
sich um wichtige Entgiftungsreaktionen der Hepato-
zyten und Nierentubulusepithelen. Die Peroxisomen
der Hepatozyten sind auch in den Cholesterinstoff-
wechsel und die Glukoneogenese involviert. Weiterhin
katalysieren sie die erste Reaktion bei der Biosynthese
der Plasmalogene, welche die häufigsten Phospholipide
der Myelinscheiden darstellen. In den Talgdrüsen der
Haut sind sie in die Synthese der komplexen Lipide des
Talgs einbezogen.
Literatur
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Vergrößerung: x 50,000 (A); x 63,000 (C-D)
Abbildung 60 121

ER

*
PO

PO

Katalase Urat Oxidase PMP-70

B C D
122 Das Zytoplasma: die Peroxisomen und peroxisomale Erkrankungen
BIOGENESE DER PEROXISOMEN
Peroxisomen besitzen keine DNA. Ihre Membran- und
Matrixproteine werden im Zytosol an freien Poly-
ribosomen synthetisiert. Über peroxisomale Er-
kennungssignale (PTS) werden sie von Peroxinen (Pex)
erkannt und importiert. Das PTS 1 ist eine stark kon-
servierte, aus drei Aminosäuren (Serin-Lysin-Leuzin)
bestehende Sequenz am extremen C-Terminus der
meisten Matrixproteine, die vom Pex5p Rezeptor
erkannt wird. Das PTS 2 besteht aus einer am
N-Terminus einiger Matrixproteine gelegenen
Nonapeptid-Konsensus Sequenz und ist der Partner für
den Pex7p Rezeptor. Die Erkennungssignale für peroxi-
somale Membranproteine sind nicht gut charakterisiert,
obwohl bekannt ist, dass Pex3p, Pex17p und Pex19p
wichtige Rezeptoren für sie darstellen. Die Matrix-
proteine durchtreten die peroxisomale Membran als voll
gefaltete Oligomere. Im Gegensatz dazu müssen die
Membranproteine während ihres Einbaus entfaltet wer-
den. Die grundlegenden Phospholipide der Peroxi-
somenmembran sind Phosphatidylcholin und
Phosphatidyläthanolamin, die im endoplasmatischen
Retikulum synthetisiert werden. Ihr Einbaumechanis-
mus in die Peroxisomenmembran ist unklar. Es wird
u.a. angenommen, dass Phospholipidaustausch-Pro-
teine involviert sind und der Austausch an Orten enger
Kontakte mit dem endoplasmatischen Retikulum
geschieht.
Hinsichtlich der Neubildung der Peroxisomen
existieren verschiedene Modelle. Am besten etabliert ist
das Wachstums-Teilungs Modell, das davon ausgeht,
dass Peroxisomen autonome Organellen sind. Es beruht
auf experimentellen Daten über das Targeting der per-
oxisomalen Proteine und auf elektronenmikroskopi-
schen Analysen. Letztere haben gezeigt, dass die Bildung
neuer Peroxisomen durch die Fragmentierung exis-
tierender Peroxisomen und deren anschließendes
Wachstum geschieht. Die dreidimensionale elektronen-
mikroskopische Rekonstruktion proliferierender Pero-
xisomen in der regenerierenden Leber unterstützt dieses
Modell. Es wurden nicht nur sphärische Peroxisomen,
sondern auch miteinander verbundene Netzwerke von
Peroxisomen gefunden. Die Abbildungen A und B
zeigen Katalase-positive Peroxisomen (PO), die eine
hantelförmige Gestalt haben (Pfeilköpfe in Abb. A) oder
schwanzförmige Fortsätze aufweisen (Pfeile in Abb. B),
die Peroxisomen miteinander verbinden. Hierbei könn-
te es sich um Teilungsintermediäre von Peroxisomen
handeln.
Ursprünglich wurde angenommen, dass Peroxi-
somen sich direkt vom endoplasmatischen Retikulum
abschnüren. Dieses Modell hat kürzlich in erweiterter
Form neue Aktualität erlangt. Es muss aber vermerkt
werden, dass der Beweis seiner Allgemeingültigkeit noch
aussteht, da die Daten an wenigen hochspezialisierten
Zelltypen (dendritische Zellen und bestimmte Hefe-
stämme) erhoben wurden. In dendritischen Zellen wur-
den die peroxisomalen Membranproteine Pex13p und
PMP-70 in mit dem peroxisomalen Netzwerk verbunde-
nen Subdomänen des endoplasmatischen Retikulums
immunelektronenmikroskopisch gefunden. Es ist un-
klar, ob letztere die mutmaßlichen Prä-Peroxisomen-
vesikeln repräsentieren, die sich über Verschmelzung
und Matrixproteineinbau zu reifen Peroxisomen ent-
wickeln.
Ein weiteres Modell schließt das endoplasmatische
Retikulum als Ort der Peroxisomenbildung aus und
geht von der Existenz eines autonomen prä-peroxiso-
malen Endomembransystems im Zytosol aus. Das prä-
peroxisomale Endomembransystem, das initial ein
begrenztes Sortiment von Peroxinen enthält, soll über
den Einbau weiterer peroxisomaler Proteine in reife
Peroxisomen umgewandelt werden.
M: Mitochondrium.
Literatur
Baumgart E, Völkl A, Hashimoto T, and Fahimi HD (1989)
Biogenesis of peroxisomes: immunocytochemical investigation of
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J Cell Biol 105: 713
Vergrößerung: x 49,000 (A); x 83,000 (B)
Abbildung 61 123

PO

Glykogen

M
PO

B
124 Das Zytoplasma: die Peroxisomen und peroxisomale Erkrankungen
PEROXISOMEN: ADAPTIVE VERÄNDERUNGEN
Peroxisomen sind bemerkenswert flexible Organellen,
die sich schnell auf ändernde Ansprüche einstellen kön-
nen. Sowohl ihre Zahl und Größe als auch die
Zusammensetzung und der Gehalt an Enzymen ändert
sich im Gefolge der Behandlung mit bestimmten
Substanzen und als Reaktion auf Umweltgifte. Die
Induktion peroxisomaler Enzyme ist nicht nur dosisab-
hängig, sondern fällt in der Regel in männlichen
Versuchstieren stärker aus als in weiblichen. Zudem ist
sie noch abhängig von der Spezies, da Mäuse und Ratten
stärker reagieren als Meerschweinchen und Menschen.
Die adaptiven Veränderungen werden durch Eiweiße
vermittelt, die der Superfamilie der Steroidhormon
Kernrezeptoren angehören und als Peroxisompro-
liferation aktivierte Rezeptoren (PPAR) bezeichnet wer-
den. So ist beispielsweise das Peroxin Pex11 in die
Regulation der Peroxisomenproliferation einbezogen,
während das Peroxin Pex14 für den Peroxisomenabbau
wichtig ist.
Die Abbildungen A und B zeigen Veränderungen in
der Rattenleber, die im Gefolge der Behandlung der
Tiere mit einem hypocholesterinämischen Mittel
(BM15766, ein 7-Dehydrocholesterin-67-Reduktase
Hemmer) eingetreten sind. Der histochemische
Nachweis der Katalase in den Peroxisomen hat zur
Bildung eines elektronendichten Reaktionsprodukts
geführt und erleichtert ihre Identifikation. Abbildung A
zeigt Katalase-positive, schwarze Peroxisomen (PO),
Mitochondrien (M) und sowohl raues wie auch glattes
endoplasmatisches Retikulum eines Hepatozyten eines
Kontrolltieres. Wie in Abbildung B zu sehen ist, hat die
Behandlung mit BM15766 zu einer deutlichen
Proliferation der Peroxisomen (PO) geführt, die oftmals
und vorzugsweise bei weiblichen Tieren in Gruppen
angeordnet sind und in Größe und Gestalt stark vari-
ieren. Diese Veränderungen sind am stärksten in der
perivenösen Zone des Leberläppchens ausgeprägt und
werden in gleicher Weise regional bevorzugt durch
andere Fremdstoffe ausgelöst. Zusätzlich kann auch eine
Proliferation des glatten endoplasmatischen Retikulums
beobachtet werden, welches die Peroxisomen in
mehreren Lagen umgeben kann. Diese Reaktion ist bei
weiblichen Versuchstieren stärker ausgeprägt.
Die Abbildungen C–D illustrieren immunelektro-
nenmikroskopisch nachweisbare Veränderungen im
Gehalt peroxisomaler Enzyme als Folge unterschied-
licher Behandlungen. Durch die Quantifizierung der
Immungoldmarkierung (Bestimmung der Goldparti-
kelzahl pro µm2 peroxisomaler Matrix) gelang es
nachzuweisen, dass eine Behandlung von Ratten mit
rekombinantem menschlichem Tumornekrose Faktor-_
(TNF-_) zu einer deutlichen Verminderung von
Hydratase-Dehydrogenase Epimerase führte (Abb. C).
Die Behandlung mit einem Cholesterinsynthese-
hemmer (Bezafibrat) hingegen führte zu einer
Induktion der Hydratase-Dehydrogenase Epimerase,
nachweisbar als vermehrte Immungoldmarkierung
(Abb. D). In Abbildung E ist die Markierungsintensität
für dieses multifunktionale peroxisomale Matrixenzym
in einem Kontrolltier zu sehen und die Unterschiede im
Ausmaß der Immungoldmarkierung zu Abbildungen C
und D sind klar ersichtlich.
Literatur
Baumgart E, Stegmeier K, Schmidt F, and Fahimi HD (1987)
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ultrastructural changes in rat liver induced by the peroxisome
proliferator SaH 42-348. J Cell Biol 71: 768
Vergrößerung: x 35,000 (A, B); x 62,000 (C-E)
Abbildung 62 125

PO

PO
M
M

M PO

PO
M

A B

TNF-_ Bezafibrat Kontrolle

C D E
126 Das Zytoplasma: die Peroxisomen und peroxisomale Erkrankungen
PEROXISOMEN PATHOLOGIE
Peroxisomale Erkrankungen sind rezessiv vererbt und
entweder durch den Mangel eines bestimmten peroxiso-
malen Enzyms oder durch eine Störung der Biogenese
der Peroxisomen bedingt. Enzymdefekte beeinträchti-
gen in der Regel den Lipidstoffwechsel und führen zu
Störungen der `-Oxidation, der Plasmalogen- und
Isoprenoidsynthese und der Entgiftungsfunktionen. Die
durch Störungen der Peroxisomenbiogenese bedingten
Erkrankungen sind komplexer Natur. Bei ihnen handelt
es sich um das Spektrum der Zellweger’schen Erkran-
kungen, zu denen das Zellweger-Syndrom, die neonatale
Adrenoleukodystrophie und die infantile Refsum’sche
Erkrankung gehören. Allen gemeinsam sind strukturell
und funktionell unterschiedlich stark defekte Peroxi-
somen. Klassischerweise fehlen die Peroxisomen beim
Zellweger-Syndrom, und die Mitochondrien weisen
Strukturabnormitäten auf. Jedoch können in Abhän-
gigkeit von der Schwere der Biogenesestörung Peroxiso-
men durchaus elektronenmikroskopisch nachgewiesen
werden. Allerdings handelt es sich bei ihnen in der Regel
um Membransäcke, da die Biogenesestörung den
Import der Matrixproteine, aber nicht den der peroxiso-
malen Membranproteine betrifft. Mitunter können bei
geringgradigen Biogenesedefekten Peroxisomen mit
einem gewissen Gehalt an Matrixproteinen beobachtet
werden.
Die durch Biogenesestörungen bedingten peroxiso-
malen Krankheiten sind durch Mutationen der ver-
schiedensten Peroxin Gene verursacht. Das Peroxin
Pex5, ein Rezeptor für das peroxisomale Erkennungs-
signal 1, ist wichtig während der Anfangsphase des
Imports von Matrixproteinen. Ein schwerer Mangel an
Pex5 Protein verursacht das Zellweger-Syndrom und ein
leichterer die infantile Adrenoleukodystrophie. Bei
Patienten mit Pex5 Protein Mangel kann sich die
Erkrankung elektronenmikroskopisch durch die
Anwesenheit zahlreicher Peroxisomen manifestieren,
denen jedoch die Matrixproteine in unterschiedlichem
Ausmaß fehlen.
Die nebenstehenden Abbildungen zeigen die ultra-
strukturellen Befunde in der Leber von Pex5p-defizienten
Mäusen mit dem Zellweger-Syndrom. In Abbildung A
sind Katalase-positive Peroxisomen (PO), reichlich
Glykogen und Mitochondrien (M) in Hepatozyten einer
gesunden Kontrollmaus (PEX+/+) zu sehen. Im Gegen-
satz dazu sind bei der Zellwegermaus (PEX5-/-) aufgrund
des schweren Importdefekts für Matrixproteine keine
Peroxisomen nachweisbar (Abb. B und C). Lediglich in
einigen Hepatozyten konnten vereinzelte PMP-70
positive Peroxisomen Ghosts nachgewiesen werden.
Zusätzlich wiesen die Mitochondrien eindrückliche
feinstrukturelle Veränderungen auf, die sowohl ihre
äußere und innere Membran als auch insbesondere die
Cristae betrafen (Abb. B und C). Die Zahl der Cristae
war entweder vermindert oder sie waren von kurvigli-
nearer und kreisförmiger Gestalt (Pfeile in Abb. C).
Damit einhergehend fanden sich eine verminderte
Menge und Aktivität der mitochondrialen Atem-
kettenkomplexe. Aufgrund der Funktionsstörungen der
Peroxisomen wird angenommen, dass die Struktur-
veränderungen der Mitochondrien Folge von Schädi-
gungen durch Sauerstoffradikale sind.
Literatur
Baumgart E, Vanhoorebeek I, Grabenbauer M, Borgers M,
Declerq P, Fahimi HD, and Baes M (2001) Mitochondrial alter-
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model for Zellweger syndrome (PEX5 knockout mouse). Am
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Chang C, South S, Warren D, Jones J, and Moser A (1999)
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Wiemer E, Nuttley W, Bertolaet B, Li X, Franke U, Wheelock M,
Anné U, Johnson K, and Subramani S (1995) Human peroxiso-
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J Cell Biol 130: 51
Peroxisome web site: www.peroxisome.org
Vergrößerung: x 54,000 (A); x 36,000 (B, C)
Abbildung 63 127

PEX+/+

Glykogen

PO

Zellweger Maus (PEX-/-)

B C
128
GLYKOGEN
Glukose ist ein wichtiger Energiespender und als Glyko-
gen vorzugsweise in der Leber und der Muskulatur
gespeichert. Glykogen findet sich im Zytoplasma in
Form von hoch elektronendichten Granula mit einem
Durchmesser von 10 bis 40 nm, den sogenannten
`-Partikeln, die typisch für die Muskulatur sind. In
Hepatozyten der Leber bilden die `-Partikeln charakte-
ristische Rosetten, die sog. _-Partikeln (Pfeile in Abb. A).
Die _-Partikeln bestehen nicht nur aus Glykogen, son-
dern zusätzlich aus verschiedenen, in die Glykogen-
synthese einbezogenen Enzymen, was zu ihrer
Bezeichnung als Glykosomen geführt hat.
Die Glykosomen enthalten Glykogenin, welches die
Glykogensynthese initiiert und Glykogensynthase,
welche die Glukoseketten verlängert. Die Glykosomen
sind räumlich eng mit dem glatten endoplasmatischen
Retikulum verbunden, in welchem auch die letzte Stufe
des Glykogenabbaus stattfindet. Hierbei kommt es
durch die Glukose-6-Phosphatase zur Hydrolyse von
Glukose-6-Phosphat. Bemerkenswerterweise finden
sich bedeutende Mengen an Glukose-6-Phosphatase
nur in der Leber, den Nieren und den Insulin-pro-
duzierenden Beta-Zellen des Pankreas. Ein angeborener
Enzymmangel führt zu Glykogenosen (siehe unten).
Literatur
Burchell A, and Waddell ID (1991) The molecular basis of the
hepatic microsomal glucose-6-phosphatase system. Biochim
Biophys Acta 1092: 129
Rybicka KK (1996) Glycosomes – the organelles of glycogen
metabolism. Tissue Cell 28: 253
GLYKOGENOSE VOM TYP I
Die Komplexität der Glykogenbiosynthese und des
Glykogenabbaus spiegelt sich auch in den verschiedenen
Glykogenspeicherkrankheiten wider, von denen gegen-
wärtig über zwölf bekannt sind. Je nach Typ der
Krankheit können unterschiedliche Enzymrestaktivi-
täten gemessen werden oder ein vollständiger Enzym-
mangel bestehen.
Die Glykogenose vom Typ I (Glukose-6-Phospha-
tase Mangel, von Gierke’sche Krankheit) stellt einen
autosomal rezessiv vererbten Mangel an Glukose-6-
Phosphatase dar. Abbildung B zeigt die klassischen
Das Zytoplasma: zytosolische Partikeln
zytosolischen Glykogenablagerungen im Zytosol von
Hepatozyten einer Leberbiopsie. Hierbei handelt es sich
um Ablagerungen massiven Ausmaßes, die das
Zytoplasma der Hepatozyten fast vollständig ausfüllen.
Ähnliche ultrastrukturelle Veränderungen finden sich
auch bei den anderen Typen von Glykogenosen mit
Ausnahme der Glykogenose vom Typ II, bei der die
Ablagerungen in den Lysosomen gelegen sind (siehe
Abb. 56A). Die Glykogenspeicherungen finden sich
außer in der Leber auch in den Nieren und der
Darmschleimhaut und gehen mit Hypoglykämie und
einer Azidose einher.
Das für die Glukose-6-Phosphatase kodierende Gen
liegt auf Chromosom 17q21 und das für die Glykogen
Translokase auf 11q23. Besonders schwerwiegenden
Enzymaktivitätsmangel lösen Mutationen in der trans-
membranären Domäne des Enzyms aus, während
solche in einer der beiden luminalen Domänen mit
höheren Restenzymaktivitäten einhergehen. Das Ziel
aller Therapien besteht in der Aufrechterhaltung eines
normalen Blutglukosespiegels.
Literatur
Annabi B, Hiraiwa H, Mansfield BC, Lei KJ, Ubagai T,
Polymeropoulos MH, Moses SW, Parvari R, Hershkovitz E,
Mandel H, et al (1998) The gene for glycogen-storage disease
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von Gierke E (1929) Hepato-nephro-megalia glycogenica
(Glykogenspeicherkrankheit der Leber und Nieren). Beitr Pathol
Anat 82: 497
Vergrößerung: x 23,500 (A); x 7,200 (B)
Abbildung 64 129

Nukleus

PO

Glykogenose vom Typ I

Nukleus

B M
130
ERYTHROPOETISCHE PROTOPORPHYRIE
Es handelt sich um eine autosomal dominant vererbte
Krankheit, die durch einen relativen Mangel an
Ferrochelatase bedingt ist. Die Ferrochelatase ist ein
Enzym der inneren Mitochondrienmembran und be-
werkstelligt die letzte Stufe der Hämbiosynthese, die im
Einbau von Eisen in das Protoporphyrin IX besteht.
Bei Befall der Leber können elektronenmikrosko-
pisch typische Veränderungen nachgewiesen werden.
Die nebenstehende Abbildung zeigt Anteile von Hepa-
tozyten einer Leberbiopsie eines Patienten, die sternför-
mige, kristalline Einschlüsse von verschiedener Größe
(Pfeile) im Zytoplasma aufweisen. Die aus fadenförmi-
gem kristallinem Material aufgebauten Einschlüsse sind
sehr charakteristisch und können auch in den Kupffer-
Zellen, den Gallengangsepithelien und im Lumen der
Gallengänge vorhanden sein.
Das Gen für die Ferrochelatase liegt auf Chromosom
18q23.1 und eine Vielzahl krankheitsverursachender
Mutationen wurden in allen 11 Exonen gefunden.
Infolge der Veränderungen in der Leber kommt es zu
charakteristischen hepatobiliären Komplikationen, die
durch den Anstieg von freiem Protoporphyrin bedingt
sind. Freies Protoporphyrin akkumuliert in den
Vorläuferzellen der Erythrozyten im Knochenmark und
in zirkulierenden Erythrozyten und sein Spiegel im
Blutplasma, der Galle und im Fäzes ist erhöht. Klinisch
steht die Photosensibilität im Vordergrund, die im
Gefolge von UV-Bestrahlung zu Erythemen, Ödemen,
Blasenbildung und Juckreiz führt.
Das Zytoplasma: zytosolische Partikeln
Literatur
Dickersin G (2000) Diagnostic Electron Microscopy. A text/atlas.
New York: Springer
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Rufenacht UB, Gouya L, Schneider-Yin X, Puy H, Schafer BW,
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Taketani S, Inazawa J, Nakahashi Y, Abe T, and Tokunaga R (1992)
Structure of the human ferrochelatase gene. Exon/intron gene
organization and location of the gene to chromosome 18. Eur J
Biochem 205: 217
Vergrößerung: x 18,000
Abbildung 65 131

Erythropoetische Protoporphyrie

Nukleus
132
ZYTOZENTRUM, ZENTROSOM UND MIKROTUBULI
Die Abbildung zeigt das Zentrosom im Zytozentrum
einer granulopoetischen Zelle aus dem Knochenmark.
Das Zytozentrum ist dem Kern, von dem 2 Segmente im
oberen Teil des Bildes zu sehen sind, benachbart. Vom
Paar der Zentriolen, die in die Matrix des Zentrosoms
eingebettet sind, ist eines angeschnitten. Zahlreiche
Mikrotubuli (Pfeile) strahlen radiär von hier aus und
Golgi Zisternenstapel sind kreisförmig um das
Zentrosom organisiert. Das Zentrosom bildet das
Organisationszentrum für das mikrotubuläre Zytoske-
lett und enthält Gamma-Tubulin in den Nukleations-
regionen für das Auswachsen der Mikrotubuli.
Mikrotubuli sind in zahlreiche Zellfunktionen ein-
bezogen. Intrazellulärer Vesikel- und Organellen-
transport gehört ebenso dazu, wie die Zellwanderung,
Bildung von Kinozilien und Trennung der Chromo-
somen während der Zellteilung. Die Wand der Mikro-
tubuli mit 24nm Durchmesser besteht aus 13 zirkulär
angeordneten Protofilamenten aus Alpha- und Beta-
Tubulin Dimeren, die sich End-zu-End aneinanderrei-
hen. Das stabile Minusende der Mikrotubuli liegt im
Zentrosom eingebettet. Das dynamische Plusende ver-
längert sich in Richtung Zellperipherie. Es entstehen
zelluläre Mikrotubuli-„Schienen“, an denen entlang im
Zusammenspiel mit Motorproteinen Vesikel und
Organellen transportiert werden. Dieses Netzwerk für
den intrazellulären Transport wird laufend umgebildet.
Mikrotubuli wachsen aus, verlängern sich, brechen
schlagartig zusammen, um anderswo wiederum auszu-
wachsen, ein Prozess, der als dynamische Instabilität
bezeichnet wird. Die Zentriolen, in deren Umfeld die
Mikrotubuli verankert sind, haben eine Schlüssel-
funktion bei der Organisation des Zytozentrums. Ein
Zentriol besitzt die Form eines Zylinders mit einer
Länge von ungefähr 0.2µm. Die Wand besteht aus 9 par-
allel angeordneten Mikrotubuli Tripletten, in denen die
Mikrotubuli zum Teil eine gemeinsame Wand besitzen;
nur der innerste A-Tubulus ist mit 13 Protofilamenten
komplett, B- und C-Tubuli sitzen mit jeweils 10 Proto-
filamenten halbmondförmig dem A-Tubulus auf. Die
Mikrotubuli Tripletten sind im Querschnitt durch das
Zentriol im Zentrum des Bildes gut erkennbar, ebenso
die radiären, radspeichenförmigen Strukturen im
Lumen des Zentriols, wo Zentrin (Z in der Zeichnung)
lokalisiert ist.
Die Zeichnung (neu gezeichnet nach Bornens, 2002)
zeigt die Komponenten eines Zentrosoms einer Zelle in
der G1 Phase mit einem differenzierten Mutterzentriol
(MZ) und einem Tochterzentriol (DZ). Die Zentriolen
sind über die Matrix (strichlierte Linien) in Verbindung
Das Zytoplasma: das Zytoskelett
*
MZ
+
Mt
Z Matrix
_
S
_
Z S
Mt + Mt
DZ
und eingebettet in einen weiteren perizentriolären
Bereich (äußere Linie mit Doppelpfeilen). Es wird
angenommen, dass der Zusammenbau der Matrix
durch die Zentriolen über mikrotubulibindende
Proteine (offene Pfeilköpfe) ausgelöst wird. Juxtazen-
trioläre Strukturen, die Satelliten (S), werden als Vor-
stufen bei Vorgängen der Duplikation der Zentriolen
gesehen. Mikrotubuli (Mt) wachsen in der Umgebung
beider Zentriolen aus, doch nur ausdifferenzierte
Mutterzentriolen besitzen distale (Pfeil) und subdistale
Appendices (Stern), wo Mikrotubulisterne (gefüllte
Pfeilköpfe) verankert sind.
Die elektronenmikroskopische Aufnahme zeigt einen
Querschnitt des distalen Teils eines differenzierten
Zentriols, in dem sowohl der Zentrinbereich mit den
Speichen, als auch ein Kranz subdistaler Appendices mit
hervorragenden Spitzen zu sehen sind. An der Appendix
rechts unten ist ein Mikrotubulistern (Pfeile) zu erkennen.
Literatur
Bornens M (2002) Centrosome composition and microtubule
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Stearn T (2004) The centrosome yields its secrets. Nat Cell Biol 6:
14
Vergrößerung: x 78,500
Abbildung 66 133

Golgi
134
AUSSCHALTUNG DER MIKROTUBULI
Die Bedeutung der Mikrotubuli für verschiedene
Zellfunktionen kann indirekt durch ihre funktionelle
Ausschaltung durch Zerstörung des Mikrotubuli-
netzwerks, zum Beispiel mit dem Herbstzeitlosen-
alkaloid Colchicin, oder durch Mikrotubulistabilisie-
rung mit Taxol gezeigt werden. Ein Zusammenbruch des
Mikrotubulisystems führt zu charakteristischen Zellver-
änderungen.
Die Ausschaltung der Mikrotubuli bewirkt eine viel-
fache Blockierung des intrazellulären Transports im Zu-
sammenhang mit Sekretion, Endozytose und Trans-
zytose. Eng verbunden damit ist die Beeinträchtigung
der regulären Organisation und Lokalisation des Golgi
Apparats und Veränderungen der Zellpolarität. In vielen
Zellen ist der Golgi Apparat im Zytozentrum um das
Zentrosom herum lokalisiert (siehe Abb. 66) und
Mikrotubuli-bindende Proteine werden assoziiert mit
dem Golgi Apparat gefunden. Der Transport der Prä-
Golgi Intermediären von den Exportregionen des endo-
plasmatischen Retikulums in der Peripherie der Zellen
zum Golgi Apparat im Zytozentrum erfolgt entlang von
Mikrotubuli im Zusammenspiel mit minus-End-orien-
tierten Motorproteinem. Nach Zusammenbruch des
Mikrotubulisystems verliert der Golgi Apparat seine
charakteristische Position im Zytozentrum und vakuoli-
sierte Golgi Kompartimente sind im gesamten Zyto-
plasma verstreut.
Die Abbildungen A–C zeigen resorbierende Dünn-
darmepithelzellen der Ratte 6 Stunden nach der Ver-
Kontrolle Colchicin
aB aB
GA
Z Z
Mt
G bB
Das Zytoplasma: das Zytoskelett
abreichung von Colchicin. Vakuolisierte Teile des Golgi
Apparats (G), der normalerweise in diesen Zellen
supranukleär gelegen ist (siehe Abb. 101), sind im
Zytoplasma verstreut und auch in sehr ungewohnter
Position nahe der basalen Zelloberfläche zu finden. Die
Pfeilköpfe (Abb. A und B) zeigen auf die Basallamina an
der benachbarten basalen Plasmamembran. Trotz der
veränderten Lage und Gestalt enthalten die Golgi
Vakuolen Lipoproteinpartikel (Sterne), wie das auch
normalerweise als Ausdruck ihrer Einbindung in den
Lipoproteintransport der Fall ist (siehe Abb. 102). Die
typische Polarität der Dünndarmepithelzellen ist aufge-
hoben und Areale mit einem Bürstensaum, wie er nor-
malerweise nur die apikalen Zelloberflächen bedeckt,
erscheinen an vielen Stellen als Differenzierung der
basolateralen Plasmamembran (Bb in den Abb. A und
C). Nach 6 Stunden Colchicinbehandlung bedecken
solche Areale 3% der basolateralen Zelloberfläche. Die
Zeichnung fasst die Zellveränderungen nach 6 Stunden
Colchicinbehandlung zusammen.
Z – Zytozentrum, Mt – Mikrotubuli, GA – Golgi
Apparat, G – veränderte, zerstreute Golgi Apparate, aB -
apikaler Bürstensaum, bB – basolateraler Bürstensaum.
Literatur
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organization of the Golgi complex. Exp Cell Res 159: 1
Vergrößerung: x 14,000 (A); x 32,000 (B); x 25,000 (C)
Abbildung 67 135

Bb

G
*

*
A

Bb

*
* Bb

B C
136
AKTINFILAMENTE
Aktinfilamente bilden in allen Eukaryonten ein dyna-
misches Skelett- und Bewegungssystem, das gemeinsam
mit den anderen Zytoskelettkomponenten, den Mikro-
tubuli (Abb. 66) und Intermediärfilamenten (Abb. 69),
bei allen Prozessen der Zellbewegung, Zellwanderung
und Zellteilung, Exo- und Endozytose, Bildung von Filo-
podien und Lamellipodien, Transport von Partikeln
und Mikroorganismen eine unverzichtbare Rolle spielt.
Freie Aktinmoleküle (G-Aktin) im Zytoplasma setzen
sich durch Polymerisation in einer Doppelschraube
zum filamentösen Aktin (F-Aktin) mit einem Durch-
messer von 6–8nm zusammen. Aktinfilamente sind, so
wie die Mikrotubuli, polar aufgebaut mit einem
dynamischen, rasch wachsenden Plusende und einem
stabileren Minusende. Die Aktinpolarisation zu, even-
tuell auch verzweigten, Filamenten und das Arrange-
ment der Filamente in den übergeordneten Architek-
turen zu Bündeln, Platten oder Netzwerken wird im
Zusammenspiel mit zahlreichen Aktin-assoziierten
Proteinen bewerkstelligt. Aktin ist für die visko-elasti-
schen Eigenschaften einer Zelle verantwortlich. Je nach
den speziellen Anforderungen bauen Aktinfilamente
stabile oder dynamische Zonen auf. Netzwerke unter
der Zelloberfläche bilden eine Rindenzone, die die
Plasmamembran verstärken und bewirken, dass Orga-
nellen von dort ausgeschlossen werden. Verspannungs-
fasern (stress fibers) zwischen Zell-Zell Kontakten und
Haftkomplexen führen zu einer Verkabelung der Zellen.
Im Zusammenspiel mit Myosinmotorproteinen wird
ein Aktinfilamentgleissystems für den intrazellulären
Transport aufgebaut. Durch Aktinpolymerisation wer-
den Organellen raketenartig angetrieben durch das
Zytoplasma bewegt. Dieses Bewegungssystem wird von
einigen Klassen von Bakterien missbraucht. Sie indu-
zieren die Ausbildung eines Aktinkometenschwanzes,
mit dessen Hilfe sie sich selbst antreiben, im Zytoplasma
fortbewegen und wie ein Geschoß in benachbarte Zellen
katapultieren.
Die Abbildungen A–E zeigen in einigen Beispielen,
wie Aktinfilamente in Zellen arrangiert sein können. In
den Bürstensaummikrovilli resorbierender Epithel-
zellen sind Aktinfilamente mit Proteinen, wie Fimbrin,
Faszin und Villin, kreuzvernetzt und mit der Plasma-
membran über Myosine und Calmodulin verbunden. In
diesem stabilisierenden Gerüst bilden sie regelmäßige
Bündel, die in Abbildung A längs- und in Abbildung C
quergeschnitten zu sehen sind. Die Filamentbündel der
Mikrovilli setzen sich als Wurzelfasern in das apikale
Zytoplasma fort, wo sie, verbunden mit Spektrinen und
in Kontakt zu Zytokeratin Intermediärfilamenten, am
Das Zytoplasma: das Zytoskelett
Aufbau des terminalen Netzwerks (Terminalgespinst)
mitwirken. Dieses zusammenhängende Filamentsystem
hat gleichzeitig eine stabilisierende und Bewegungs-
funktion. Es ist einerseits verantwortlich für die auf-
rechte Stellung der Mikrovilli und die Organisation des
Bürstensaums. Andererseits bildet es durch Interaktion
mit dem Gürteldesmosom (siehe Abb. 77) ein zellüber-
greifendes Bewegungssystem, das Kippbewegungen der
Mikrovilli zur Erleichterung der Resorption bewirkt.
Abbildung D zeigt einen Ausschnitt aus dem Termi-
nalgespinst mit Aktinfilamentwurzeln im Querschnitt.
Eng benachbart liegen tief invaginierte Abschnitte der
apikalen Plasmamembran, die als Membranreservoir
für Adaptationen der apikalen Zelloberfläche gesehen
werden. Die Abbildungen B und E zeigen Aktinfila-
mentbündel und büschelartige Filamentarrangements
im Zytoplasma von Hepatomzellen nach Hochdruck-
kryoimmobilisierung. Die enge Assoziation mit Vesikeln
rechts in Abbildung B und mit Zisternen des endoplas-
matischen Retikulums in Abbildung E entspricht der
wichtigen Rolle der Aktinfilamente als zelluläres Trans-
portsystem.
Literatur
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Vergrößerung: x 45,000 (A); x 44,000 (B); x 134,000 (C); x 77,500
(D); x 41,000 (E)
Abbildung 68 137

Terminalgespinst

B E
138
INTERMEDIÄRFILAMENTE
Die Intermediärfilamente gehören, ebenso wie die
Mikrotubuli (Abb. 66) und Aktinfilamente (Abb. 68), zu
den wichtigsten Komponenten des Zytoskeletts. Die
einzelnen Filamente sind oft zu dicken Fibrillen gebün-
delt, die im Zusammenspiel mit Mikrotubuli und
Aktinfilamenten ein unterstützendes Skelett für die
Zellen aufbauen. Diese filamentöse Architektur ist
jedoch nicht starr, sondern dynamisch und mobil, in
besonderer Weise sogar mobiler als andere Komponen-
ten des Zytoskeletts. Filamentvorstufen und kurze Fila-
mente werden unter Mitwirkung molekularer Motoren,
Kinesinen und Dyneinen, mit hoher Geschwindigkeit zu
spezifischen Zellarealen, wo sie dann zu Filamenten
zusammengesetzt werden, transportiert.
Die Abbildungen zeigen als Beispiel Zytokeratin
Intermediärfilamente. Zytokeratine, die in saure (Typ I)
und basische (Typ II) Keratine unterteilt werden, sind
die Intermediärfilamentproteine der Epithelzellen. Die
Bilder zeigen Keratinozyten aus dem Stratum spinosum
der Epidermis. Die Intermediärfilamente sind zu dicken
Fibrillen, den Tonofilamenten (Tonofibrillen, Pfeile in
Abb. A und B), gebündelt. Sie bilden im Zytoplasma ein
dichtes Netzwerk, das nur den perinukleären Bereich
ausspart. Die Tonofilamente strahlen über die Inter-
zellularbrücken in die Plaques der Desmosomen ein
(siehe Abb. 79). So wird ein zellübergreifenden
Stützsystem, das der Epidermis Festigkeit und dem
darunter liegenden Gewebe Schutz bietet, aufgebaut.
Die Immunogoldmarkierung für Keratin in Abbildung
C zeigt eine intensive Reaktivität über dem Netzwerk
der Intermediärfilamente im Zytoplasma eines Kera-
tinozyten.
Die Bezeichnung „Intermediärfilament“ bezieht sich
auf den Durchmesser der Filamente, der mit 10nm
zwischen den Durchmessern der Mikrotubuli mit 24nm
und dem der Aktinfilamente mit 6-8nm liegt. Die
Intermediärfilamente setzen sich aus Proteinen einer
Multigenfamilie mit mehr als 50 Mitgliedern zusam-
men. Diese Proteine besitzen eine hauptsächlich
_-helikal aufgebaute stabförmige Region im Zentrum,
die an jedem Ende von globulären Domänen flankiert
ist. Durch ein Umeinanderwickeln der stabförmigen
Domänen entstehen die apolaren dimeren Protofila-
Das Zytoplasma: das Zytoskelett
mente mit einem Durchmesser von 3nm, die sich ihrer-
seits antiparallel umwickeln und so gestaffelte Tetra-
meren aufbauen. Durch weitere laterale Assoziation
werden die Protofibrillen gebildet. Je vier Protofibrillen
setzen sich zum 10nm Intermediärfilament zusammen.
Die Klassifizierung der Intermediärfilament-
proteine, einschließlich der Lamine der Kernlamina
(siehe Abb. 3), erfolgt auf Basis der Aminosäure-
sequenzen in der zentralen Stabregion in 6 Typen. Die
Expressionsmuster sind zelltypspezifisch und be-
stimmte Proteine werden in charakteristischer Weise in
bestimmten Phasen der Differenzierung (siehe Abb. 109
und 110) und bestimmten Stadien der Embryonal-
entwicklung koexprimiert.
Literatur
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Vergrößerung: x 8,500 (A); x 27,000 (B); x 20,000 (C)
Abbildung 69 139

Nukleus

A B

C
140
MALLORY -KÖRPER
Mallory-Körper sind zytoplasmatische Einschluss-
körper, die sich von Aggresomen (siehe Abb. 18) unter-
scheiden und charakteristischerweise in Hepatozyten
bei chronischem Alkoholabusus beobachtet werden
können. Mallory-Körper sind aber nicht alkohol-spezi-
fische Veränderungen, da sie unter verschiedenen
anderen pathologischen Bedingungen auftreten und
experimentell durch chronische Intoxikation von
Mäusen mit Griseofulvin und Diäthoxydihydro-
Collidin erzeugt werden können. Sie sind auch nicht
spezifisch für Hepatozyten, sondern können beispiels-
weise auch in Alveolarepithelien und Muskelfasern
auftreten. Bezüglich ihrer Zusammensetzung haben
Mallory-Körper gewisse Ähnlichkeiten mit Lewy-
Körpern beim Morbus Parkinson, neurofibrillären
Knäueln beim Morbus Alzheimer und neuronalen
Einschlüssen bei Motoneuronerkrankungen.
Abbildung A zeigt einen Mallory-Körper (MB) in
der Nachbarschaft des Zellkerns eines kultivierten
Hepatozyten. Seine Größe kann variieren und, wie in
Abbildung A zu sehen, der eines Zellkerns gleichen.
Mallory-Körper bestehen aus einem dichten irregulären
Netzwerk von hyperphosphoryliertem und ubi-
quitiniertem Zytokeratin 8 und 18 und verschiedenen
nicht Zytokeratin Proteinen, wie Protein 62 und den
Hitzeschockproteinen 25 und 70. Abbildung B zeigt
einen Ausschnitt eines Mallory-Körpers bei stärkerer
Vergrößerung, bei der das Netzwerk irregulär angeord-
neter Intermediärfilamente klar sichtbar ist. Mallory-
Körper sind eindeutig vom umgebenden Zytoplasma
abgegrenzt und enthalten keine Organellen, wie
Mitochondrien (M), den Golgi Apparat und endoplas-
matisches Retikulum (Abb. A und B). Die unterbro-
chene Linie in Abbildung B markiert die Grenze eines
Mallory-Körpers zum umgebenden Zytoplasma. Die
Intermediärfilamente der Mallory-Körper können mit-
tels Immunelektronenmikroskopie als Zytokeratin
charakterisiert werden. Abbildung C zeigt den
Immungoldnachweis von Zytokeratin im Mallory-
Körper in einem ultradünnen Gefrierschnitt.
Die in Abbildungen A–C gezeigten Mallory-Körper
wurden in kultivierten Rattenhepatozyten in vitro durch
die Anwesenheit eines falsch gefalteten polytopen
Das Zytoplasma: das Zytoskelett
Membranproteins im endoplasmatischen Retikulum
erzeugt. Mallory-Körper treten im Gefolge verschiede-
ner Formen von zellulärem Stress auf.
Literatur
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Vergrößerung: x 14,600 (A); x 50,000 (B); x 22,000 (C)
Abbildung 70 141

MB

Nukleus

MB
M

MB

B C
142
DIE PLASMAMEMBRAN
Zellen sind von einer Plasmamembran (Plasmalemma)
umgeben, die die Grenze zwischen ihrem Zytoplasma
und der Umgebung bildet. Die hauptsächlichen Bau-
steine der Plasmamembran, wie auch aller anderen Zell-
membranen, sind (Glyko)lipide und (Glyko)proteine.
Abbildung A zeigt die Plasmamembranen zweier
benachbarter Enterozyten mit einem schmalen interzel-
lulären Raum. Im Ultradünnschnitt erscheint die Plas-
mamembran als eine etwa 75 nm messende, recht ein-
fache Struktur, die aus zwei elektronendichten Linien
besteht, die einen hellen Spalt begrenzen (Unit Mem-
brane). Diese trilamellare strukturelle Monotonie
widerspiegelt weder den asymmetrischen und komple-
xen Aufbau noch die dynamische Natur der Plasma-
membran.
Die Gefrierbruch Elektronenmikroskopie ist eine für
Membranuntersuchungen sehr geeignete Technik und
hat früh den Beweis für die Anwesenheit von integralen
Membranproteinen erbracht. Abbildung B zeigt eine
Gefrierbruchpräparation zweier benachbarter Erythro-
zyten. Da der Gefrierbruch durch das hydrophobe
Membraninnere verläuft, entstehen zwei Membran-
bruchflächen: die dem Zytoplasma zugewandte P-Fläche
und die extrazelluläre E-Fläche. Beide Membran-
bruchflächen sind mit intramembranären Partikeln
übersät, die integralen Membranproteinen entsprechen.
Üblicherweise enthält die P-Fläche eine größere Zahl
von Partikeln. Die glatten Anteile der Membranbruch-
flächen entsprechen Membranlipiden. Durch Modifi-
kation der ursprünglichen Gefrierbruch Technik gelang
es, großflächige Plasmamembranflächen von kultivier-
ten Zellen zu erhalten, wie in Abbildung C gezeigt. Im
Gegensatz zur Plasmamembran von Erythrozyten sind
die Partikeln der Plasmamembran von Hepatozyten un-
regelmäßig angeordnet. Gruppen solcher Partikeln
entsprechen Coated Pits (siehe Abb. 41). Die zahlreichen
Erhebungen entsprechen Membranausstülpungen
(siehe Abb. 72).
Die Plasmamembran hat zwei grundsätzliche
Funktionen. Zum einem stellt der Lipidbilayer eine
Barriere für die meisten wasserlöslichen Moleküle dar.
Zum anderen gewährleisten die integralen Membran-
proteine den bidirektionalen Stofftransport und die
Diffusion und damit einhergehende Kommunikation
und Signaltransduktion wie auch Zell-Zell und Zell-
Matrix Interaktionen. Der Lipidbilayer stellt eine zwei-
dimensionale fluide Phase dar, in der die Proteine und
Die Zelloberfläche
die Lipide mobil angeordnet sind. Bestimmte Proteine
und Lipide können in begrenzten Membranregionen
angereichert sein, sogenannten Mikrodomänen. Daher
stammt auch das Fluid-Mosaik Modell der Struktur
biologischer Membranen.
Der Lipidbilayer besteht aus Phospholipiden,
Cholesterin und Glykolipiden, die unterschiedlich zwi-
schen den beiden Membranhälften verteilt sind. Die
Zuckerseitenketten der Glykolipide gemeinsam mit
denen der Glykoproteine sind ausschließlich an der
extrazellulären Oberfläche der Plasmamembran gelegen
und bilden die Glykokalyx (siehe Abb. 74 und 75). Die
Membranproteine können in verschiedene Gruppen
eingeteilt werden. Die integralen Membranproteine
durchtreten den Lipidbilayer vollständig, entweder ein-
malig oder mehrfach. Andere Proteine sind nur teilweise
über eine amphipatische _-Helix oder einen Glykosyl-
phosphatidylinositol-Anker in den Lipidbilayer einge-
bettet. Die zweite Hauptgruppe von Proteinen sind die
peripheren Membranproteine, die nicht in den Lipid-
bilayer eingebettet sind. Sie lassen sich leicht ablösen, da
sie nicht kovalent mit der Membran verbunden sind.
Wie erwähnt sind die Lipide asymmetrisch in den
beiden Membranhälften verteilt. In polarisierten Zellen
besteht eine weitere Membranasymmetrie, da sowohl
die Lipid- als auch die Proteinzusammensetzung der
apikalen und der basolateralen Plasmamembran-
domäne unterschiedlich sein können.
Literatur
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Vergrößerung: x 75,000 (A); x 85,000 (B); x 39,000 (C)
Abbildung 71 143

P-Spaltfläche

E-Spaltfläche

C
144
ZELLEN IN KULTUR
Verschiedene Zelltypen wie Stammzellen, epitheliale,
mesenchymale und neuronale Zellen und diverse
Tumorzellen können in vitro in Zellkulturflaschen oder
Petrischalen kultiviert werden. Routinemässig werden
Petrischalen aus Plastik verwendet, in denen die Zellen
in einem geeigneten Kulturmedium bei 37oC in einer
feuchtigkeitsgesättigten Sauerstoff-Kohlendioxidatmo-
sphäre als Zellrasen (Monolayer) oder in Suspension
wachsen und sich vermehren können. Polarisierte
Monolayer von Epithelzellen können auf porösen
Membranen gezogen werden. Zellkulturen sind vor-
zügliche experimentelle Systeme für morphologische
und biochemische Analysen und für die Herstellung von
rekombinanten Proteinen und monoklonalen Anti-
körpern.
Die lichtmikroskopische Beobachtung lebender
Zellen und die fixierter Zellen mittels Rasterelektronen-
mikroskopie hat eine Fülle von Befunden zur Fort-
bewegung von Zellen in Kultur erbracht. Suspendierte
Zellen etablieren den initialen Kontakt mit dem Substrat
über lange fadenförmige Fortsätze, die Filopodien
(Pfeilkopf in Abb. A), die mit dem Rasterelektronen-
mikroskop gut sichtbar gemacht werden können.
Adhärente Zellen sind abgeflacht und haben zahlreiche
Kontaktstellen mit dem Substrat. Adhärente Zellen kön-
nen über das Substrat wandern. Hierbei handelt es sich
um eine gerichtete Bewegung, die mit der Bildung von
Lamellipodien einhergeht. Lamellipodien sind flache
Fortsätze im Bereich der aktiv wandernden Zellfront
(Pfeile in Abb. A). Sowohl Filopodien als auch
Lamellipodien enthalten Aktin. In ersteren bildet es
lange gebündelte Filamente und in letzteren ein parallel
zum Substrat ausgerichtetes orthogonales querver-
bundenes Netzwerk. Gemeinsam mit Myosin und
Mikrotubuli und ihren akzessorischen Proteinen sind
die Aktinfilamente in den Lamellipoden für die
Zellbewegung verantwortlich. Während der Zell-
bewegung unterliegt dieses Zytoskelett Veränderungen,
die mit der Bildung, Kontraktion und Auflösung der
Aktinnetzwerke einhergehen.
Abbildung B zeigt einen Teil eines geschlossenen
Monolayers von Rattenhepatozyten im Raster-
elektronenmikroskop. Die freie Oberfläche der Zellen ist
Die Zelloberfläche
von unzähligen Mikrovillus-artigen Membranaus-
stülpungen überzogen, die auch in einem Ultra-
dünnschnitt einwandfrei sichtbar sind (Abb. C). Wie im
Ultradünnschnitt in Abbildung C erkennbar ist, sind die
Mikrovillus-artigen Fortsätze auf die freie Zellober-
fläche begrenzt, während die basale Zelloberfläche flach
ist und fokale Adhäsionsplaques aufweist. Epitheliale
Zellen, die als Monolayer auf einer Plastik- oder
Glasunterlage gewachsen sind, haben eine diskusartige
Gestalt und bilden Adhärens Junctions und Desmo-
somen im Bereich lateraler Zellkontakte. Wenn sie aber
auf porösen Membranen kultiviert werden, bilden sie
zylindrische, polarisierte, über Junktionen verknüpfte
Zellmonolayer. Unter Verwendung von Nierenepithel-
zelllinien konnten wichtige Aspekte der Zellpolarität
und damit verbundener Transportvorgänge analysiert
werden.
Die Fortbewegung von Zellen stellt ein grundlegen-
des Phänomen während der Embryogenese und in er-
wachsenen Organen dar. Sie ist eine wichtige Eigen-
schaft von Zellen bei der Entzündung und der Immun-
abwehr, der Wundheilung und Gewebereparation und
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Vergrößerung: x 500 (A); x 2,900 (B); x 3,500 (C)
Abbildung 72 145

Nukleus

B C
146
BÜRSTENZELLE
Spezialisierte Differenzierungen existieren an der
apikalen Oberfläche der Bürstenzellen. Diese besonders
differenzierten Epithelzellen werden auch als Tuft Cells
und Caveolated Cells bezeichnet und liegen disseminiert
in den Epithelien des Gastrointestinal- und Respira-
tionstrakts, zum Bespiel im Magen, im Dünndarm und
Dickdarn, in der Gallenblase, den Gallenwegen und im
Pankreasgang, sowie im Flimmerepithel der Trachea
und der Lunge. Die Bezeichnung der Zellen leitet sich
von den charakteristischen bürsten- oder büschelförmi-
gen apikalen Oberflächendifferenzierungen ab. Die
Büschel werden von besonders langen und voluminösen
Mikrovilli gebildet, die sich von den Mikrovilli des
Bürstensaums der resorbierenden Zellen (Enterozyten,
siehe auch Abb. 68 und 101) deutlich unterscheiden.
Die Abbildung zeigt eine Bürstenzelle aus dem
Colon der Ratte mit dem charakteristischen apikalen
Mikrovillibüschel. Die Mikrovilli (Pfeil) springen in das
Darmlumen vor und überragen deutlich die Mikrovilli
des Bürstensaums der benachbarten Enterozyten
(Pfeilkopf). Die Unterschiede in den Dimensionen der
beiden Klassen von Mikrovilli sind deutlich erkennbar.
Dicht gebündelte Aktinfilamente bilden den zentralen
Kern der Mikrovilli und setzen sich als ebenfalls dicht
gebündelte Wurzelstrukturen (offener Pfeil) in das
apikale Zytoplasma fort, wo sie gemeinsam mit
Mikrotubuli, Intermediärfilamenten und Membran-
vesikeln ein für die Bürstenzellen charakteristisches
apikales Kompartiment bilden. Die feine Lektinogold-
markierung lokalisiert Sialinsäure.
Die Bürstenzellen werden mit Chemorezeption und
mit der Regulation der Elektrolytkonzentrationen in
den Sekreten der jeweiligen Hohlorgane in Verbindung
gebracht. Die apikale Ultrastruktur hat Ähnlichkeit mit
der von Rezeptorzellen in Sinnesepithelien, zum
Beispiel mit den sensorischen Zellen in den Ge-
schmacksknospen. Die Bürstenzellen im Magen, Darm
und pankreatischen Gangsystem exprimieren ein für
geschmacksensorische Zellen charakteristisches GTP-
bindendes Protein, Alpha-Gustducin, das im Bereich des
apikalen Pols der Zellen konzentriert ist, vergleichbar
mit der Lokalisation in den Geschmackszellen, wo es
mit Geschmacksfunktionen für süß und bitter in
Zusammenhang steht. Bürstenzellen enthalten auch
besonders reichlich Enzyme für die Produktion von
Die Zelloberfläche
Stickstoffoxiden, zum Beispiel NO-Synthase I. Eine
Funktion der Bürstenzellen als Chemorezeptoren mit
NO als parakrinem gasförmigen Botenstoff wird in
Erwägung gezogen. Auch die Tatsache, dass die
Plasmamembran der Bürstenzellmikrovilli eine beson-
dere Glykokonjugatzusammensetzung aufweist und
rasch umgesetzt und erneuert wird, wird zu Gunsten
einer rezeptorischen Funktion diskutiert. Dieses
Konzept findet zusätzlich Untermauerung durch die
Existenz neuronencharakterischischer Intermediär-
filamente. Bürstenzellen exprimieren sowohl Zyto-
keratin Intermediärfilamente, als auch Neurofilamente,
eine Kombination, die unter normalen Bedingungen in
anderen Zellen nicht vorkommt. Zytokeratin 18 findet
sich in hoher Konzentration in Intermediärfila-
mentbündeln, die von der Zellperipherie zu zentralen
Zytoplasmaregionen strahlen, sind aber im charakteris-
tischen apikalen Zytoplasmakompartiment der Bürsten-
zellen unterhalb der Mikrovillibüschel nicht vorhanden.
Hier sind es Neurofilamente, die im Zusammenspiel mit
Aktinfilamenten und Mikrotubuli das für Bürstenzellen
typische Zytoskelettnetzwerk bilden.
Literatur
Gebert A, Al-Samir K, Werner K, Fassbender S, and Gebhard A
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Vergrößerung: x 29,500
Abbildung 73 147

Enterozyt

Enterozyt

Bürstenzelle
148
DIE GLYKOKALYX (CELL COAT )
Die äussere Oberfläche aller tierischen Zellen ist von der
Glykokalyx überzogen. Sie besteht aus den Zucker-
seitenketten (Glykane) der Membranproteine und -lipi-
de und zusätzlich aus sezerniertem Schleim an der
Oberfläche der Schleimhäute des Verdauungs-, Atem-
wegs- und Urogenitaltrakts. Die Funktionen der
Glykokalyx sind mannigfaltig. Allgemein ausgedrückt
übt sie eine schützende und stabilisierende Funktion
aus. Spezifischere Funktionen, die von der Struktur der
Glykane und vom Zelltyp abhängig sind, sind Er-
kennungsfunktionen und Interaktionen mit anderen
Glykanen. Spezifische Glykane sind von Bedeutung
während der Entwicklung und Differenzierung von
Organen und beim Tumorwachstum (siehe Abb. 76), da
sie in Zell-Zell und Zell-Matrix Wechselwirkungen und
in die Signaltransduktion involviert sind. Glykane kön-
nen auch Rezeptoren für pathogene Mikroorganismen
sein oder als Liganden für verschiedene Rezeptoren
fungieren und für den Umsatz und Transport von
Glykoproteinen bedeutend sein. Letztendlich spielen sie
auch eine Rolle bei der Erkennung falsch gefalteter
Glykoproteine (siehe Abb. 16 und 22).
Bestimmte Zellen besitzen eine stark entwickelte
Glykokalyx, die ohne spezielle Kontrastierung im
Ultradünnschnitt sichtbar ist. Abbildung A zeigt einen
Teil des Bürstensaums eines absorptiven Enterozyten.
Auf der Spitze der Mikrovilli ist die Glykokalyx in Form
der geweihartigen Antennulae microvillares (Pfeile)
sichtbar. Abbildung B zeigt den Bürstensaum im
Querschnitt und die Kontrastierung der Glykokalyx mit
Rutheniumrot. Rutheniumrot ist ein kationischer
Farbstoff, der elektrostatisch an ionisierte Karboxyl-
gruppen saurer Mukopolysaccharide bindet und deren
Kontrast im Transmissionselektronenmikroskop stei-
gert. Die Reaktion ist jedoch relativ unspezifisch und auf
die Zelloberfläche beschränkt, da der Farbstoff zelluläre
Membranen nicht durchdringen kann.
Diese Nachteile konnten durch die Anwendung von
Lektinen und monoklonalen Antikörpern gegen
definierte Glykanepitope an Ultradünnschnitten von
Lowicryl-eingebetteten Geweben oder ultradünnen
Gefrierschnitten überwunden werden. Abbildung C
zeigt den Nachweis von Sialinsäure in der Glykokalyx
Die Zelloberfläche
eines absorptiven Enterozyten mit dem Limax flavus
Lektin. Eine Lektin-Goldmarkierung findet sich im
Bereich des Bürstensaums und seiner Antenullae
microvillares sowie endozytotischer Strukturen. In
Abbildung D ist der Nachweis der Blutgruppe A
Substanz mit einem monoklonalen Antikörper am
Lowicryl Ultradünnschnitt von einer Duodenum-
schleimhautbiopsie eines Patienten mit Blutgruppe A
gezeigt. Es findet sich eine dichte Goldpartikel-
markierung über den Mikrovilli des Bürstensaums und
dem anheftenden Schleim sowie endozytotischen
Strukturen.
Literatur
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Vergrößerung: x 87,500 (A); x 120,000 (B); x 55,500 (C); x 52,000 (D)
Abbildung 74 149

Bürstensaum

A B

C D
150
DIE GLYKOKALYX: KOMPOSITIONELLE UNTERSCHIEDE ZWISCHEN ZELLTYPEN UND
DOMÄNENBILDUNG
Die verschiedenen Glykosyltransferasen haben unter-
schiedliche Verteilungsmuster in Abhängigkeit vom
untersuchten Gewebe, wie mittels Northern Blot
Analysen und spezifischen Enzymassays nachgewiesen
werden konnte. Darauf basiert die Annahme, dass die
Glykanstruktur in bestimmten Geweben Ausdruck der
Anwesenheit spezifischer Glykosyltransferasen ist.
Allerdings sind diese Techniken nur von begrenzter
Aussagekraft für Gewebe und Organe mit komplexer
zellulärer Zusammensetzung. Hierfür sind zytochemi-
sche in situ Techniken die Methoden der Wahl, da es nur
mit ihnen gelingt, definierte Glykane spezifischen
Zelltypen zuzuordnen. Die Anwendung von Lektinen
und monoklonalen Antikörpern gegen definierte
Glykanepitope hat wichtige Erkenntnisse bezüglich
Zelltyp-spezifischer Glykosilierungsmuster erbracht
und Rückschlüsse auf ihre Funktionen ermöglicht.
Abildung A zeigt Anteile von sogenannten dunklen
und hellen Epithelien der Milchgänge einer normalen,
nicht laktierenden Brustdrüse und ein Beispiel von
Zelltyp-spezifischer Glykosilierung. Die Inkubation von
Lowicryl-Ultradünnschnitten mit einem monoklonalen
Antikörper gegen ein Epitop eines O-Glykans resultierte
in der Markierung der Plasmamembran der dunklen
Zellen (gefüllte Pfeilköpfe), aber nicht der benachbarten
hellen Zellen (leere Pfeilköpfe). Bemerkenswert ist wei-
terhin, dass nur die apikale Plasmamembran der dunk-
len Zellen markiert ist, die durch Desmosomen (Pfeile)
von der nicht markierten lateralen Plasmamembran
getrennt ist.
Abbildung B zeigt einen Teil einer glomerulären
Kapillarschlinge und illustriert ein exquisites Beispiel
für Domänenbildung der Glykokalyx der Podozyten.
Der ultradünne Lowicrylschnitt wurde mit gold-
markiertem Helix pomatia Lektin inkubiert, das mit
terminalen, nicht reduzierten N-Azetylgalaktosamin-
resten reagiert. Im Bereich der Plasmamembran der
Podozyten wurde nur die Basis der Podozytenfortsätze
Die Zelloberfläche
markiert (Pfeilköpfe). Die Endothelzellen zeigten kei-
nerlei Markierung, was in Tangentialschnitten beson-
ders klar hervortritt (Stern). Gleichermaßen war die
glomeruläre Basalmembran unreaktiv. Somit konnte
gezeigt werden, dass die Plasmamembran der Podozyten
im Bereich der Basis ihrer Fußfortsätze bezüglich der
Zusammensetzung der Glykokalyx hochspezialisiert ist.
Abbildung C zeigt anhand einer Goldmarkierung mit
dem Weizenkeimling Lektin (WGA), dass im Gegensatz
hierzu N-Azetylglukosaminreste in allen Anteilen der
Plasmamembran der Podozyten und Endothelien und
auch der glomerulären Basalmembran nachgewiesen
werden können.
Literatur
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Vergrößerung: x 20,000 (A); x 35,500 (B, C)
Abbildung 75 151

Nukleus

Nukleus
A

Podozyt

Erythrozyt

B C
152
VERÄNDERUNGEN DER GLYKOKALYX IN TUMOREN
Bestimmte Glykane weisen während der Embryonal-
entwicklung geweblich und zeitlich begrenzte Ex-
pressionsmuster auf, die in malignen Tumoren
wiederkehren können. Solche Karzinom-assoziierten
Glykane der Zelloberfläche können für das invasive und
metastatische Tumorwachstum von Bedeutung sein
oder für die Klinik als prädiktiver Marker. Eine häufig
beobachtete Veränderung der Tumorglykane besteht im
vermehrten Auftreten von `-1,6-verzweigten tri- und
tetraantennären Glykanen. Diese Veränderungen korre-
lieren mit dem metastatischen Potentzial bestimmter
Tumoren und sind von Bedeutung als prädiktiver
Marker für den klinischen Verlauf des kolo-rektalen
Karzinoms. Gleichermaßen scheint die Expression von
Sialoglykanen mit terminaler _ 2,6-verknüpfter Sialin-
säure und das Sialosyl-Tn Antigen mit der Progression
des Kolonkarzinoms zu korrelieren und von prädik-
tivem Wert zu sein. Diese Feststellungen konnten aber
nicht auf andere Karzinome übertragen werden.
Sialinsäuren existieren auch in Form von _ 2,8-ver-
knüpften Homopolymeren und diese Polysialinsäure
wurde am neuralen Zelladhäsionsmolekül NCAM
nachgewiesen. Polysialinsäure ist von Bedeutung für die
Hirnentwicklung und für die Funktion von Nerven-
zellen im reifen Gehirn, da sie Zell-Zell und Zell-Matrix
Interaktionen des NCAM moduliert. Polysialyliertes
NCAM existiert auch während der embryonalen
Entwicklung der Niere und wird im Wilms Tumor,
einem hoch malignen Nierentumor re-exprimiert.
Abbildung A zeigt Anteile eines Wilms Tumors und
die Anwesenheit einer elektronendichten amorphen
Schicht von variabler Dicke (Pfeilköpfe) an der
Oberfläche der Tumorzellen. An Stellen besonderer
Ausprägung dieser Schicht können kleine Hohlräume
(Sterne in Abb. A und C) beobachtet werden. Wegen
ihrer strukturellen Ähnlichkeit wurde diese Schicht als
die Lamina densa einer Basalmembran angesehen. Wie
in Abbildungen B und C mittels Immungoldmarkierung
mit einem monoklonalen Antikörper gezeigt ist, besteht
sie aber aus Polysialinsäure des NCAM. Polysialinsäure
konnte auch in verschiedenen malignen neuroendokri-
nen Tumoren nachgewiesen werden und ist ein
Die Zelloberfläche
wichtiger immunzytochemischer Marker. Experimente
mit Zelllinien von kleinzelligen (neuroendokrinen)
Lungenkarzinomen haben die Bedeutung der
Polysialinsäure beim invasiven und metastatischen
Tumorwachstum direkt aufgezeigt. Klinische Studien
haben die Bedeutung der Bestimmung des Serum-
spiegels von Polysialinsäure bei Patienten mit neuroen-
dokrinen Karzinomen als Indikator für das Tumor-
stadium und die Tumorprogression nachgewiesen.
Literatur
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Vergrößerung: x 8,500 (A); x 58,000 (B); x 55,000 (C)
Abbildung 76 153

*
Nukleus

*
Nukleus

*
*
*
A

Nukleus

Nukleus *

B C Nukleus
154 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
JUNKTIONALE KOMPLEXE
Junktionale Komplexe sind charakteristisch lokalisierte,
aus 3 Klassen von Zell-Zell Verbindungen zusammenge-
setzte, Haftkomplexe im Epithelgewebe (Abb. A). In
oberster Position, dem Lumen am nächsten gelegen,
bilden Tight Junctions eine Abbdichtungszone (zonula
occludens, ZO, siehe auch Abb. 78), über die der para-
zelluläre Verkehr reguliert wird. Darunter, in mittlerer
Position, befindet sich ein gürtelförmiges Verbindungs-
band, das einer dynamischen Stabilisierung des Gewe-
bes dient (Gürteldesmosom, zonula adhaerens, ZA). Es
wird von einem darunter liegenden Kranz von Fleck-
desmosomen (maculae adhaerentens, MA, siehe auch
Abb. 79), die die Zellen wie Druckknöpfe aneinander-
heften, begleitet. Die Haftkomplexe sind meist in
apikalen Epithelbereichen lokalisiert. Abbildung A zeigt
in einem Ausschnitt aus dem Darmepithel alle 3 Teile
eines Haftkomplexes apikal nahe dem Bürstensaum
gelegen. Die Zone setzt sich nach basal hin in eine inter-
digitierte Adhäsionsregion (Pfeil) fort.
Die zuoberst gelegene abdichtende Zone (ZO)
definiert auch die Grenze zwischen apikalen und baso-
lateralen Regionen der Plasmamembran. Im Bereich der
Tight Junctions sind die Plasmamembranen der be-
nachbarten Zellen in regelmäßigen Abständen komplett
verschmolzen. Diese Verschmelzungsregionen laufen
als Stege und Netzwerke um die gesamte Zirkumferenz
der Zellen und bilden so ein abdichtendes Band, das zu
einer Versiegelung des Epithels und der Interzellular-
räume führt. Im Dünnschnitt (Abb. A) sind die Ver-
siegelungsregionen als Kontaktpunkte („kissing
points“) zu erkennen. Die Tight Junctions sind in Form
drahtartiger Linien und Netze besonders gut in
Gefrierbruchpräparaten (siehe Abb. 78A) zu erkennen.
Die Zonula adhaerens (ZA) liegt unmittelbar unter-
halb der Zonula occludens. Auch hier wird ein die
gesamte Zelle wie ein Gürtel umrundendes Band
gebildet. Im Schnittbild durch das Gürteldesmosom in
Abbildung A ist zu erkennen, dass die zytoplasmatische
Seite der Plasmamembranen zu Plaques verdichtet ist
und ein Filamentnetzwerk in den Bereich des Gürtel-
desmosoms einstrahlt. Die gürtelartig um die Zellen
herumlaufende Organisation der Zonula adhaerens mit
der dichten Zone der einstrahlenden Aktinfilamente ist
im Flachschnitt durch ein 3-Zellen Areal in Abbildung B
gut einsehbar. Die feine Verdichtung im Interzellular-
raum in Abbildung A entspricht den verbundenen
externen Domänen der membrandurchsetzenden
Cadherine (Desmokolline, Desmogleine) in den einan-
der gegenüberliegenden Abschnitten der Plasma-
membran benachbarter Zellen. Durch Interaktion ihrer
zytoplasmatisch orientierten Schwanzregionen mit
_- und `-Cateninen und Formin-1 wird Aktinpoly-
merisation für die Ausbildung des assoziierten Aktin-
filamentsystems induziert. So wird im Zusammenspiel
mit den Filamenten im Terminalgespinst und den
Aktinfilamentbündeln in den Mikrovilli ein zellüber-
greifendes Skelett- und Bewegungssystem aufgebaut
(siehe auch Abb. 68). In Abbildung B sind im
Terminalgespinst zahlreiche Querschnitte durch die
Aktinfilamentwurzeln der Mikrovilli des Bürstensaums
zu sehen (Pfeile).
Fleckdesmosomen (maculae adhaerentes) werden in
Abbildung A (MA) und, stärker vergrößert, in
Abbildung C gezeigt. Sie sind Teil der Haftkomplexe,
kommen aber auch unabhängig von anderen Zell-Zell
Verbindungen vor. Wie Druckknöpfe bilden sie an den
lateralen Zelloberflächen zahlreiche Haftstellen, die
über kabelartige Intermediärfilamentbündel unter-
einander und mit den Hemidesmosomen (Abb. 85) an
der basalen Plasmamembran verbunden sind. Der
Interzellularraum ist weiter als bei den Gürtel-
desmosomen. Die erkennbare Mittellinie (Pfeil, Abb. C)
entspricht den vernetzten glykosilierten extrazellulären
Domänen der Cadherine. Die zyoplasmatischen Plaques
(Pfeilkopf) dienen der Verankerung der Cadherine und
der Intermediärfilamente, die haarnadelförmig in die
Plaques einstrahlen (siehe Abb. 79).
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Vergrößerung: x 88,000 (A), x 20,300 (B), x 120,000 (C)
Abbildung 77 155

ZO

ZA

ZA

MA

A C
156 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
TIGHT JUNCTIONS UND GAP JUNCTIONS
Tight Junctions haben mehrere Hauptfunktionen. In
Epithelien und Endothelien dichten sie den Inter-
zellularraum ab und verhindern freien parazellulären
Verkehr. Tight Junctions bilden die Grenze zwischen
apikalen und basolateralen Plasmamembrandomänen,
verhindern Diffusion von Lipiden und Proteinen und
determinieren die Polarität der Epithelzellen. An ihren
zytoplasmatischen Oberflächen rekrutieren Tight
Junctions zahlreiche Zytoskelett- und Signalmoleküle,
ein Prozess, der mit der Regulation des Aktinomyosin-
zytoskeletts und Zell-Zell Adhäsionprozessen in
Zusammenhang gebracht wird. Tight Junctions können
zwar auch unabhängig von anderen Zellverbindungen
vorkommen, doch häufiger sind sie Teil eines junk-
tionalen Komplexes und bilden die in oberster Position
gelegene Zonula occludens (Abb. 77A).
Gefrierbruchabdrucke vermitteln Einblick in den
Verlauf der Tight Junction Verbindungsstege, die als
kontinuierliche, anastomosierende Kämme, drahtför-
mige Linien und Netzwerke erkennbar sind (TJ in Abb.
A und B). In Form einer abdichtenden Zone (zonula
occludens) umzirkeln sie die Zellen. Die Anzahl der
Tight Junction Kämme bestimmt die Barriereeigen-
schaften der Abdichtungszone und die Dichte des
Epithels; der transepitheliale Widerstand nimmt mit der
Anzahl der Kämme zu. Die Tight Junction Kämme
bestehen aus Claudin und Occludin Proteinaggregaten,
die mit den Zonulaproteinen ZO-1, ZO-2 und ZO-3
assoziiert sind. Die Einzelkämme verbinden sich mit
denen der Partnermembran der Nachbarzelle zu Paaren.
Sie bilden die im Elektronenmikroskop sichtbaren „kiss-
ing points“ (Abb. 77A). Claudine scheinen das
Rückgrad der Kämme zu bilden, doch auch Lipide sind
mit der Bildung von invertierten zylindrischen Mizellen
am Aufbau der Abdichtungszone beteiligt. Abdichtende
Zell-Zell Verbindungen finden sich in den meisten
Epithelien und Endothelien. Besonders wichtig sind
Tight Junctions auch bei der Ausbildung distinkter
Barrieren, wie beim Aufbau der Blut-Hirnschranke
(Abb. 145) und der Blut-Thymusschranke in Endo-
thelien, der Blut-Hodenschranke, die von den Sertoli
Zellen gebildet wird, und der Barriere im Bereich der
Gallekanälchen im Leberepithel. Dieses Beispiel ist im
Nebenbild von Abbildung A in einem in-vitro-Kultur-
system gezeigt. In der dreidimensionalen Organisation
kultivierter Hepatomzellen entstehen durch Ausbildung
junktionaler Komplexe anastomosierende Kanälchen
mit einem dichten apikalen Mikrovillibesatz. Peroxi-
dase-konjugiertes Weizenkeimagglutinin markiert so-
wohl die apikale Mikrovillimembran rechts im Bild als
auch die basolaterale Plasmamembran links, während
die Zone der Tight Junctions (TJ) ausgespart ist.
Gap Junctions (maculae communicantes, Nexus)
sind diejenigen Zell-Zell Verbindungen, die interzel-
luläre Kommunikation durch Austausch von Ionen und
kleinen Molekülen bis zu 1 kDa erlauben. Sie werden
durch hexagonale Assemblierung integraler Membran-
proteine, der Connexine, gebildet. Sechs Connexine
formieren sich zu einem hohlen zylindrischen
Körperchen, dem Connexon und durch Paarung der
Connexonen benachbarter Zellen bilden sich feine,
hydrophile, die Nachbarzellen verbindende Kanäle, die
unter hoher Ca2+-Konzentration geschlossen werden.
Die funktionelle Kopplung benachbarter Zellen über
Gap Junctions ist eine wichtige Grundlage der
Gewebsorganisation und speziell wichtig während der
Embryonalentwicklung. Über Gap Junctions erfolgt
auch die elektrische Kopplung und Erregungsweiter-
leitung im Herzmuskel und in der glatten Muskulatur.
In Gefrierbruchabdrucken kann man die Con-
nexonen elektronenmikroskopisch als Partikelchen, die
in Flecken (maculae communicantes) oder auch großen
Flächen akkumuliert sind, erkennen (GJ in Abb. B). Sie
sind deutlich von den Tight Junction Kämmen (TJ) zu
differenzieren. Dünnschnittuntersuchungen zeigen die
im Bereich der Gap Junctions eng aneinander liegenden
Membranen der benachbarten Zellen (GJ im Nebenbild
von Abb. B). Der Interzellularraum ist sehr regelmäßig
und, wenn auch extrem eng, doch als distinkter Spalt,
von dem sich auch die Bezeichnung Gap Junction
ableitet, zu erkennen.
Literatur
Kachar B, and Reese TS (1982) Evidence for the lipid nature of
tight junction strands. Nature 296: 464
Kumar NM, and Gilula NB (1996) The gap junction communica-
tion channel. Cell 84: 381
Tsukita S, Furuse M, and Itoh M (2001) Multifunctional strands
in tight junctions. Nat Rev Mol Cell Biol 2: 285
Vergrößerung: x 90,500 (A), x 34,000 (Nebenbild), x 71,000 (B),
x 81,000 (Nebenbild)
Abbildung 78 157

TJ

A TJ
GJ

GJ

TJ

B
158 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
FLECKDESMOSOMEN
Fleckdesmosomen (maculae adhaerentes) sind Zell-Zell
Verbindungen, die mit Intermediärfilamenten assoziiert
sind und hauptsächlich der Gewebsstabilisierung
dienen. Fleckdesmosomen bilden in den Haftkom-
plexen (Abb. 77) unter dem Gürteldesmosom einen
Kranz von Zellverankerungspunkten, kommen aber
auch außerhalb der Komplexe vor und sind in Zellen,
die mechanischem Stress ausgesetzt sind, besonders
häufig. Verbunden mit dicken, kabelartigen Inter-
mediärfilamentbündeln, die innerhalb der Zellen Ver-
strebungen aufbauen (Abb. 69), heften sie die benach-
barten Zellen wie Druckknöpfe aneinander, stabilisieren
so Zellen und Gewebe und tragen zum Schutz vor
mechanischen Schädigungen bei. Zunehmend wird aber
auch klar, dass Fleckdesmosomen nicht nur mechani-
sche, sondern auch Signalfunktion haben und in
Reaktion auf Signale aus Zellen und Umgebung ihre
Organisation und Funktion ändern.
Abbildung A zeigt einen Ausschnitt aus dem Stratum
spinosum der Epidermis (siehe auch Abb. 109 und 110).
Die Keratinozyten werden in dieser Epidermisschicht
von dicken Intermediärfilamentbündeln, den Tonofila-
menten (TF), durchzogen und über zahlreiche Fleck-
desmosomen (Pfeile) aneinander geheftet. Es ist an
mehreren Stellen erkennbar, dass die Tonofilamente in
die dichten Plaques der Fleckdesmosomen einstrahlen.
In der stärker vergrößerten Aufnahme eines Fleck-
desmosoms im Nebenbild ist die dichte Mittellinie im
regelmäßig weiten Interzellularraum deutlich sichtbar.
Innerhalb der Plaques kann eine Außen- und Innenzone
differenziert werden. Die Immunogoldmarkierung in
Abbildung B lokalisiert Zytokeratin mit Hilfe eines
Antikörpers, der ein konserviertes Epitop an der
Oberfläche der Zytokeratinfilamente nachweist. Die
Goldpartikel markieren die innere, zum Zytoplasma hin
orientierte, Plaquezone (Pfeile), wo die Zytokeratin-
filamente in Interaktion mit Desmoplakin, einem der
Plaqueproteine, verankert sind. Desmoplakin steht
wiederum über andere Plaqueproteine, Plakoglobin und
Plakophilin, mit den membrandurchspannenden
Proteinen der Cadherin Familie, Desmocollinen und
Desmogleinen, in Verbindung. Ihre, eher heterophilen
als homophilen, Interaktionen mit den Partnern in der
benachbarten Zelle bewirken das feste Aneinander-
haften der Zellen in diesem Bereich. Die Inter-
aktionsregion von Desmoplakin, Plaqueproteinen und
Cadherinen entspricht der äußeren, zum Inter-
zellularraum hin orientierten, dichten Plaquezone der
Fleckdesmosomen. Der deutlich sichtbare Mittelstreifen
(Nebenbild in Abb. A, Abb. 77A, C) resultiert aus der
Vernetzung der glykosilierten extrazellulären Domänen
der Cadhrine und stellt die eigentliche Adhäsionsregion
dar.
Die Pfeilköpfe in Abbildung A markieren
Melanosomen im Zytoplasma der Keratinozyten.
Literatur
Borrmann CM, Mertens C, Schmidt A, Langbein L, Kuhn C, and
Franke WW (2000) Molecular diversity of plaques of epithelial-
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Green KJ, and Gaudry CA (2000) Are desmosomes more than
thethers for intermediate filaments? Nat Rev Mol Cell Biol 1: 208
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er growing multigene family of adhesion molecules. Curr Opin
Cell Biol 6: 682
Schmidt A, Heid HW, Schafer S, Nuber UA, Zimbelmann R, and
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epithelial differentiation: cell type-specific plaque components
and intermediate filament anchorage. Eur J Cell Biol 65: 229
Von Overbeck J, Stahli C, Gudat F, Carmann H, Lautenschlager C,
Durmuller U, Takacs B, Miggiano V, Staehelin T, and Heitz PU
(1985) Immunohistochemical characterization of an anti-eipthe-
lial monoclonal antibody (mAB lu-5). Virch Arch A Pathol Anat
Histopathol 407: 1
Vergrößerung: x 30,000 (A), x 60,000 (Nebenbild), x 72,000 (B)
Abbildung 79 159

Nukleus

TF

TF

Nukleus
A

B
160 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
ZELL-ZELL VERZAHNUNGEN
In Geweben und Organen bilden spezialisierte Verbin-
dungen der Zellen die Grundlage für ihre mechanische,
chemische und elektrische Kopplung und den Aufbau
spezifischer Barrieren (Abb. 77–79). Benachbarte Zellen
sind aber auch außerhalb der spezifischen Zell-Zell
Verbindungen und Komplexe in Kontakt. Zum Beispiel
erfordert die Ausbildung der kontinuierlichen Epithel-
überzüge, die die Lumina der inneren Hohlorgane
auskleiden, eine enge Adhäsion benachbarter Zellen
und Bindung an die Basalmembran. Die Abbildungen A
und B zeigen Aufnahmen des Dünndarmepithels, das in
Abbildung A quer und in Abbildung B senkrecht zur
Oberfläche geschnitten ist. Die Epithelzellen liegen Seite
an Seite und ihre Plasmamembranen sind über weite
Areale eng verbunden. Zusätzlich stabilisiert wird diese
Flächenhaftung durch die ausgeprägte Verzahnung der
benachbarten Zellen (Pfeile in Abb. A und B). Die zum
Teil flachen, zum Teil auch hohen Kämme an der la-
teralen Oberflächen der benachbarten Epithelzellen
sind in den Interdigitationsregionen (Pfeile) ineinander
geschoben. Die Interzellularräume sind extrem eng und
kaum erkennbar. Jedoch sind diese Kontakte nicht starr,
sondern variabel und die Öffnung der Interzellular-
räume ist vom jeweiligen Funktionszustand der Zellen
und des Gewebes abhängig, wie das in Abbildung 102B
zu sehen ist. Das Bild zeigt ebenfalls einen Ausschnitt
aus dem Dünndarmepithel, hier unter dem Aspekt des
Lipoproteintransports. Die benachbarten Zellen sind
stellenweise intensiv verbunden und verzahnt, die
Interzellularräume geschlossen. Zwischen diesen Inter-
digitationsregionen sind die Interzellularräume jedoch
dilatiert und zeigen sich eingebunden in den Transport
der Lipoproteinpartikel, die an der basolateralen Zell-
oberfläche sezerniert werden.
Die Aufnahmen der Abbildungen A und B zeigen das
Resultat einer speziellen Uranylazetat/Methylzellulose
Adsorptionsfärbung an Dünnschnitten von Lowicryl
K4M-eingebettetem Gewebe. Die Behandlung führt zu
einer intensiven Kontrastierung der Plasmamembranen
und der Interzellularverbindungen (Abb. 77A). Intra-
zellulär sind insbesondere Membranen und Organellen
des Sekretionssystem, die in Synthese und Transport
komplexer Glykane eingebunden sind, intensiv gefärbt.
Besonders ausgeprägt ist diese Kontrastierung im
Bereich der Zisternen des Golgi Apparats (Golgi in
Abb. A und B).
Literatur
Gumbiner BM (1996) Cell adhesion: The molecular basis of tis-
sue architecture and morphogenesis. Cell 84: 345
Roth J, Taatjes DJ, and Tokuyasu KT (1990) Contrasting of
Lowicryl K4M thin sections. Histochemistry 95: 123
Vergrößerung: x 34,500 (A), x 34,500 (B)
Abbildung 80 161

Golgi

Golgi

B
162 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
BASALES LABYRINTH
Epithelzellen, die in transepitheliale Transportvorgänge
intensiv eingebunden sind, zeigen nicht nur typische
apikale Oberflächendifferenzierungen (Abb. 103 und
104), sondern auch basale Charakeristika, die unter dem
Begriff „Basales Membranlabyrinth“ zusammengefasst
werden. Das basale Labyrinth ist ein riesiges Membran-
konvolut, das aus den Einfaltungen der basalen Plasma-
membran und verzahnten Falten der lateralen Plasma-
membranen der benachbarten Zellen besteht und insge-
samt zu einer enormen Oberflächenvergrößerung der
basolateralen Zelloberfläche führt. In enger Nachbar-
schaft zu den Membranen sind Mitochondrien ange-
häuft und vertikal zwischen den Membranfalten
aufgereiht. Basale Labyrinthe sind besonders prominent
in den transzellulär transportierenden Epithelien der
proximalen und distalen Nierentubuli, in den
Sammelrohren der Niere und in den Streifenstücken
(Sekretrohren) der Speicheldrüsen. Die im Licht-
mikroskop sichtbaren „Streifen“ kommen durch die
vertikal ausgerichteten Mitochondrien zustande.
Ihrer Transportfunktion entsprechend besitzen
sowohl proximale als auch distale Nierentubuluszellen
ein ausgeprägtes basales Membranlabyrinth. In
Abbildung A ist ein Segment eines proximalen Tubulus
(PT) im oberen Teil und ein Segment eines distalen
gewundenen Tubulus (DCT) im unteren Teil des Bildes
zu sehen. Einen stärker vergrößerten Ausschnitt aus
einem Tubulus proximalis zeigt Abbildung B. An den
Epithelzellen des proximalen Tubulus fallen beide in
den transepithelialen Transport eingebundenen Ober-
flächendifferenzierungen, der hohe apikale Bürsten-
saum und das ausgeprägte basale Labyrinth, besonders
auf. Die basalen Membraneinfaltungen reichen bis in
das apikale Zytoplasma der Epithelzellen. In den dista-
len Tubulusepithelzellen sind die Membraneinfaltungen
in der Regel zwar nicht so tief, doch liegen sie dichter
aneinander und sind regelmäßiger angeordnet. Ein ähn-
liches Bild dichter und besonders regelmäßiger
Invaginationen der basalen Plasmamembran zeigen die
Streifenstücke der Speicheldrüsen. Ein Segment daraus
ist in Abbildung C zu sehen. Die beiden Kanälchen-
abschnitte aus einem proximalen Nierentubulus einer-
seits (Abb. B) und einem Speicheldrüsen Streifenstück
andererseits (Abb. C) zeigen eine Sialinsäure-spezifische
Lektinogoldmarkierung.
In den polarisierten Epithelzellen des proximalen
Tubulus der Niere wird am apikalen Zellpol ein großer
Teil der Substanzen, die das Filtersystem in den
Glomerula passiert haben, aus dem Primärharn rück-
resorbiert, metabolisiert, abgebaut oder basolateral
wiederum abgegeben. So findet apikal die Rück-
resorption eines großen Teils der Glukose statt, ebenso
die Wiederaufnahme von Wasser, Ionen, Vitaminen und
die Reabsorption kleiner Proteine (siehe Abb. 103). Der
basale Zellpol mit dem basalen Labyrinth ist für die
Exkretion in den Extrazellularraum ausgestattet.
Enzyme für aktiven Ionentransport sind in den
Membranen des basalen Labyrinths konzentriert. Die
für den aktiven Transport notwendige Energie kommt
aus den benachbart lokalisierten Mitochondrien.
Literatur
Fukudome H (2001) A combined SEM and TEM study on the
basal labyrinth of the collecting duct in the rat kidney. Arch Histol
Cytol 64: 339
Roth J, Lucocq JM, and Charest PM (1984) Light and electron
microscopic demonstration of sialic acid residues with the lectin
from Limax flavus: A cytochemical affinity technique with the use
of fetuin-gold complexes. J Histochem Cytochem 32: 1167
Tsuchiya K, Wang W, Giebisch G, and Welling PA (1992) ATP is a
coupling modulator of parallel Na, K-ATPase-K-channel activity
in renal proximal tubule. Proc Natl Acad Sci USA 89: 6418
Vergrößerung: x 73,000 (A), x 15,200 (B), x 18,000 :(C)
Abbildung 81 163

PT

basales Labyrinth

DCT

B C
164 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
DIE BASALMEMBRAN
Basalmembranen aus speziell aufgebauter extrazellulär-
er Matrix überziehen die Oberflächen der Zellen kom-
plett oder zum Teil. Im Fall des Epithelgewebes sind es
nur die basalen Oberflächen, die mit diesem Matrix-
überzug in Kontakt sind. Die Basalmembran bildet hier
eine basale Grenzschicht zum Bindegewebe, auf der die
Epithelzellen aufsitzen. Von dieser speziellen Situation
leitet sich auch der Begriff Basalmembran ab. Im
Gegensatz dazu sind Muskelzellen komplett in eine
Basalmembran eingehüllt, ebenso die Gliazellen der
Nervenfasern im peripheren Nervensystem. Basal-
membranen bilden nicht nur stabisilierende Schichten
und Hüllen für die Zellen, sondern spielen bei zahl-
reichen physiologischen und pathologischen Prozessen
in Zellen, Geweben und Organen eine zentrale Rolle, so
bei der Zellwanderung und Differenzierung, der Mor-
phogenese und Organneubildung, beim Tumorwachs-
tum und der Metastasenbildung. Basalmembranen
bestehen aus 2 Komponenten unterschiedlicher Ab-
stammung, die auch im Elektronenmikroskop unter-
scheidbar sind, der Lamina basalis (Lb, Basallamina)
und der Lamina fibroreticularis (Lf).
Die Basallamina ist in Kontakt mit der Plasma-
membran derjenigen Zellen, die ihre Bestandteile pro-
duzieren und sezernieren, den Epithelzellen, Muskel-
zellen und Gliazellen. Im Fall der hier gezeigten glatten
Muskelzelle ist die Lamina basalis als eine feine Schicht
nahe der Zelloberfläche deutlich zu erkennen. Die stär-
ker kontrastierte, von der Plasmamembran etwas abge-
setzte Region bildet die Lamina densa (Ld); die feine
hellere Schicht, die Lamina rara (Lr), ist der Zell-
oberfläche direkt benachbart (siehe auch Abb. 85). Typ
IV Kollagen, Fibronektin, Laminin, Entaktin (auch als
Nidogen bezeichnet) und Heparansulfat Proteoglykane
(Perlakan) sind wichtige Bestandteile der Basallamina.
Die typische Struktur und Verdichtung der Matrix zur
Lamina densa entsteht durch Assemblierung von
Lamininmolekülen mit Typ IV Kollagen, Entaktin und
Proteoglykanen. Integrine in der Plasmamembran sind
die wichtigsten Adhäsionsrezeptoren für die Anheftung
der Zellen an die Matrix. Integrine interagieren auf der
einen Seite direkt mit Laminin und Fibronektin in der
Basallamina und sind auf der anderen Seite intrazellulär
über Verbindungsproteine, wie _-Aktinin, Vinkulin und
Talin, mit dem Aktinzytoskelett in Kontakt. Integrin-
vermittelte Zelladhäsion moduliert Signalübertra-
gungskaskaden und beeinflusst die Expression von
Genen, die mit Differenzierungsprozessen verknüpft
sind. Andere Proteine der Lamina basalis gehören
zur Familie der Fibuline. ADAMs, die nach ihren
Adhäsions- und Metalloproteinasedomänen benannt
sind, modulieren Zell-Zell und Zell-Matrix Interak-
tionen und spielen eine wichtige Rolle bei Umfor-
mungsprozessen in der Matrix.
Die Basallamina wird von einer unterstützenden
fibroretikulären Schicht begleitet. Im Gegensatz zur
Basallamina, die von den Epithel-, Muskel- und
Gliazellen gebildet wird, ist die Lamina fibroreticularis
ein Produkt der Fibroblasten des benachbarten
Bindegewebes und besteht vor allem aus Typ III
Kollagen Fibrillen, die ein feines Gitterfasernetzwerk
bilden. Das Nebenbild zeigt die feinen Fibrillen der
Lamina fibroreticulais in sehr regelmäßiger Ausrichtung
und enger Beziehung zur Lamina basalis.
Literatur
Brown E, and Dejana E (2003) Cell-to-cell contact and extracel-
lular matrix. Editorial overview: Cell-cell and cell-matrix interac-
tions – running, jumping, standing still. Curr Opin Cell Biol 15:
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Sakai T, Larsen M, and Yamada KM (2003) Fibronectin require-
ment in branching morphogenesis. Nature 423: 876
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sis: a paradigm for extracellular matrix assembly. Curr Opin Cell
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Timpl R (1996) Macromolecular organization of basement mem-
branes. Curr Opin Cell Biol 8: 618
Timpl R, Sasaki T, Kostka G, and Chu M-L (2003) Fibulins: A ver-
satile family of extracellular matrix proteins. Nat Rev Mol Cell
Biol 4: 479
White JM (2003) ADAMs: modulators of cell-cell and cell-matrix
interaction. Curr Opin Cell Biol 15: 598
Vergrößerung: x 55,600, x59,000 (Nebenbild)
Abbildung 82 165

F
Ld Lb
Basalmembran
Lr Lf

Kollagen

Lamina basalis

Lamina fibroreticularis
166 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
DIE GLOMERULÄRE BASALMEMBRAN
Die in Abbildung A gezeigte glomeruläre Basalmembran
(GBM) unterscheidet sich von Basalmembranen in
anderen Standorten dadurch, dass sie beidseits von
Zellen begrenzt ist. Hierbei handelt es sich um die
Endothelien der Kapillaren und die Podozyten. Zum
anderen weist sie eine größere Dicke auf, da sie das
Produkt der Fusion der Basalmembranen dieser zwei
Zelltypen ist. Die glomeruläre Basalmembran besteht
aus drei Schichten: einer zentralen elektronendichten
Lamina densa, an die beidseits eine Schicht geringerer
Elektronendichte anschließt. Die den Endothelzellen
zugewandte Schicht wird als Lamina rara interna und
die den Podozyten zugewandte als Lamina rara externa
bezeichnet.
Die Lamina densa besteht aus einem dichten
Netzwerk von 3 nm dicken Filamenten. Die Lamina rara
interna enthält 10 nm dicke Filamente und beide
Laminae rarae sind von filamentösem Material durch-
setzt, das auf der einen Seite an die Podozyten und auf
der anderen an die Endothelien reicht. Das die
glomeruläre Basalmembran aufbauende Material ist
über Disulfidbrücken und Kollagen-artige Bindungen
stark quervernetzt. Es besteht, wie auch in anderen
Basalmembranen, aus Typ IV Kollagen, Heparansulfat
und Chondroitinsulfat, Proteoglykanen, Laminin,
Nidogen und BM-40/Osteonektin/SPARC. Das nicht
Fibrillen bildende Typ IV Kollagen bildet das Grund-
gerüst der Lamina densa. Die Proteoglykane bilden qua-
sireguläre, gitterartige Anordnungen in beiden Laminae
rarae. Sowohl Laminin als auch Nidogen sind in allen
drei Basalmembranschichten vorhanden. Gegenwärtig
ist nicht eindeutig erwiesen, ob Fibronektin ein
Bestandteil der glomerulären Basalmembran ist.
Pfeile: Schlitzdiaphragmen zwischen den Podozyten
Fußfortsätzen; Pfeilköpfe: angeschnittene Poren der
Endothelien.
Literatur
Farquhar M (1991) The glomerular basement membrane. A
selective macromolecular filter. In: Cell biology of extracellular
matrix (Hay E, ed). New York: Plenum Press, pp 365
Kriz A, and Kaissling B (2000) Structural organization of the
mammalian kidney. In: The kidney: physiology and pathophysi-
ology (Seldin D, and Giebisch G, eds). New York Lippincott:
Williams and Wilkins, pp 587
ALPORT-SYNDROM
(HEREDITÄRE NEPHRITIS )
Es handelt sich um eine X-chromosomal dominant
vererbte Krankheit, die sich in der Kindheit manifestiert
und einen progredienten Verlauf hat.
In Abbildung B sind einige der charakteristischen
elektronenmikroskopischen Befunde illustriert. Typisch
ist die Verdickung der glomerulären Basalmembran
(GBM), die von einer longitudinalen Lamellierung,
Aufsplitterung, Fragmentierung und der Bildung net-
zartiger Muster begleitet ist. Andere Anteile der
glomerulären Basalmembran können extrem dünn sein
(nicht sichtbar in Abb. B). Weitere ultrastrukturelle
Veränderungen in Abbildung B bestehen in einer
Hypertrophie der Endothelien, einem Ödem der
Podozyten und dem Verlust oder der Verschmelzung der
Fußfortsätze der Podozyten. Die gezackten Konturen
der glomerulären Basalmembran sind ebenfalls in
Abbildung B ersichtlich. Die Gesamtheit dieser
Strukturveränderungen ermöglicht die Diagnose.
Die krankeitsverursachende Mutation betrifft das
COL4A5-Gen, das für die _5-Ketten des Typ IV
Kollagens kodiert. Das autosomale Alport-Syndrom ist
durch Mutationen der COL4A3- und COL4A4-Gene
verursacht, die für die _3- und _4-Ketten des Typ IV
Kollagens kodieren. Die klinischen Symptome bestehen
in Hämaturie, Proteinurie und Ödemen sowie sen-
soneuraler Schwerhörigkeit. Als Therapie empfiehlt sich
die Nierentransplantation.
Literatur
Barker DF, Hostikka SL, Zhou J, Chow LT, Oliphant AR,
Gerken SC, Gregory MC, Skolnick MH, Atkin CL, and
Tryggvason K (1990) Identification of mutations in the COL4A5
collagen gene in Alport syndrome. Science 248: 1224
Dickersin G (2000) Diagnostic electron microscopy. A text/atlas.
New York: Springer
Jefferson JA, Lemmink HH, Hughes AE, Hill CM, Smeets HJ,
Doherty CC, and Maxwell AP (1997) Autosomal dominant
Alport syndrome linked to the type-IV collage alpha-3 and alpha-4
genes (COL4A3 and COL4A4). Nephrol Dial Transplant 12: 1595
Tryggvason K, and Martin PT (2001) Alport syndrome and base-
ment membrane collagen. In: The metabolic and molecular bases
of inherited disease (Scriver C, Beaudet A, Valle D, and Sly W,
eds). New York: McGraw-Hill, pp 5453
Zollinger H, and Mihatsch M (1978) Renal pathology in biopsy.
Berlin Heidelberg New York: Springer
Vergrößerung: x 65,000 (A); x 28,000 (B)
Abbildung 83 167

Bowmann'scher
Podozyten Raum
Fussfortsätze

GBM

A Endothel Kapillarlumen

Alport-Syndrom
Podozyt

GBM

Endothel

B
168 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
DIE DESCEMET ’SCHE MEMBRAN
Die Descemet’sche Membran ist eine besonders auffäl-
lige, 5-10µm dicke Basalmembran im hinteren Bereich
der Hornhaut des Auges, die im Aufbau und der
molekularen Zusammensetzung außergewöhnlich ist
und sich an keiner anderen Stelle des Körpers in dieser
Form findet. Sie ist mit dem einschichtig platten Epithel,
dem Hornhautendothel, das die hintere Hornhaut-
oberfläche überzieht, verbunden und zum Teil auch ein
Produkt dieser Endothelzellen. Wie andere Basal-
membranen besteht die Descemet’sche Membran aus
2 Schichten, einer hinteren dem Hornhautendothel
benachbarten Schicht und einer vorderen Schicht, die
reich ist an kollagenen Fibrillen und sich in das
Hornhautstroma fortsetzt (posterior und anterior in
Abb. A). Beide Schichten der Descemet’schen Membran
sind in Abbildung A zu sehen, ebenso das Hornhaut-
endothel im obersten Teil des Bildes und das Horn-
hautstroma im unteren Bildsegment. Die Unterschiede
im Aufbau der Descemet’schen Membran im Vergleich
zum Stroma mit den regelmäßigen Lamellen von kolla-
genen Fibrillen sind gut erkennbar. Abbildung B zeigt
den hinteren Teil der Membran in stärkerer Vergröße-
rung.
Die Descemet’sche Membran enthält Laminin und
Fibronektin, ebenso Proteoglykane mit einem hohen
Anteil an Keratansulfat, Heparansulfat und Dermatan-
sulfat. Vergleichbar mit der Situation im Hornhaut-
stroma ist die Konzentration der Proteoglykane und
ihre Zusammensetzung ausschlaggebend für den Was-
sergehalt des Gewebes und seine Transparenz. Die
Descemet’sche Membran enthält bevorzugt Typ-IV und
Typ VIII Kollagen. Typ IV Kollagen ist ein üblicher
Bestandteil von Basallaminae (Abb. 82). Im Gegensatz
dazu ist Typ VIII Kollagen in anderen Geweben kaum
vorhanden, doch in der Descemet’schen Membran
hochkonzentriert. Es bildet charakteristische Gitter und
Netzwerke, die im elektronenmikroskopischen Bild wie
Stufenleitern erscheinen. Das ist vor allem in Abbildung
A zu sehen.
Die Dicke der Descemet’schen Membran ändert sich
im Lauf des Lebens. In der Hornhaut des Menschen
misst sie zum Zeitpunkt der Geburt ungefähr 3µm und
besteht hauptsächlich aus der vorderen Schicht. Die hin-
tere Schicht wird erst nach der Geburt von den
Hornhautendothelzellen gebildet und nimmt langsam
an Ausdehnung, bis 10µm Dicke in der Hornhaut älter-
er erwachsener Personen, zu.
Das Hornhautendothel, das in beiden Abbildungen
im oberen Bildsegment zu sehen ist, erlaubt die Passage
von Substanzen aus dem Kammerwasser für die Ver-
sorgung der Kornea, die ja keine eigenen Blutgefäße
besitzt, und spielt bei der Regulierung des Wassergehalts
der Hornhaut eine besondere Rolle. Die Aufrecht-
erhaltung eines kritischen Hydratisierungsgrads ist
ausschlaggebend für die Transparenz des Gewebes. Ein
Anschwellen des Kornealstromas wird durch Ableitung
überschüssiger Flüssigkeit durch den Einsatz von
Ionenpumpen in der basolateralen Plasmamembran der
Endothelzellen verhindert. Aquaporine bilden wasser-
selektive Kanäle in den Membranen der Hornhaut-
endothelzellen und spielen für die Regulierung des
transendothelialen Flüssigkeitstransports eine zentrale
Rolle.
Literatur
Abrams GA, Bentley E, Nealey PF, and Murphy CJ (2002)
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Benya PD, and Padilla SR (1986) Isolation and characterization of
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ized extracellular matrices. J Cell Biol 107: 721
Verkman AS (2003) Role of aquaporin water channels in eye
function. Exp Eye Res 76: 137
Vergrößerung: x 15,200 (A), x 60,000 (B)
Abbildung 84 169

Endothel Endothel

Posterior

Descemet'sche
Membran

Anterior Descemet'sche
Membran

Stroma

A B
170 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
DIE BASALMEMBRAN DER HAUT UND DIE HEMIDESMOSOMEN DER KERATINOZYTEN :
EINE EPITHEL -BINDEGEWEBE VERBINDUNG
Die beiden Komponenten der Haut, das Plattenepithel
der Epidermis und das Bindegewebe der darunter gele-
genen Dermis, sind fest miteinander verbunden und
bilden die Dermis-Epidermis Junktion (Abb. A und B).
Die diese Aufgabe erfüllenden Strukturen stellen ein
vorzügliches Beispiel dafür dar, wie zwei unterschied-
liche Gewebekomponenten mechanisch miteinander
verankert werden können.
Die involvierten Komponenten sind die Basal-
membran, deren Lamina densa von der Basalzellen-
schicht gebildet wird, die Verankerungsfibrillen der
Dermis (Stern in Abb. B) und die Hemidesmosomen
der basalen Plasmamembran der Basalzellen der
Epidermis (Pfeile in Abb. A und B).
Die Basalmembran setzt sich aus der Lamina densa
und einer den Basalzellen zugewandten dünnen Lamina
rara zusammen (Abb. A und B). Der in Abbildung A zu
sehende Anteil der Dermis besteht aus Fibroblasten,
Kollagenfaserbündeln und anderen Fibrillen. Die
Hemidesmosomen der Basalzellen stellen im Gegensatz
zu den Desmosomen asymmetrische, hoch spezialisierte
Integrin-enthaltende Junktionen dar, die sich in ihrem
molekularen Aufbau sehr stark von den Desmosomen
(siehe Abb. 79) unterscheiden. Ultrastrukturell besteht
jedes Hemidesmosom aus einem dichten zytoplasmati-
schen Fleck, der einer Platte anliegt und aus dünnen ver-
ankernden Filamenten, die vom Flecken ausgehend die
Lamina rara und densa der Basalmembran durchtreten
(Pfeile in Abb. A und B). Die Hauptbestandteile der
Hemidesmosomen sind das _6`4 Integrin, Typ IV
Kollagen (entspricht dem bullösen Pemphigoid
Antigen-2) und das bullöse Pemphigoid-Antigen-1.
Keratin Intermediärfilamente, die mit den dichten zyto-
plasmatischen Flecken verbunden sind, bilden die
Zytoskelett-Hemidesmosom Verankerung. Hierbei han-
delt es sich um die Keratine K5 und K18. Sie sind mittels
Plektin und dem bullösen Pemphigoid Antigen mit dem
`4-Integrin verknüpft. Die Hemidesmosom-Basalmem-
bran Verankerung wird über Komplexe, die aus `4-
Integrin und Laminin 5 bestehen, gebildet. Die 2–4 nm
dicken fadenförmigen Lamininmoleküle stellen die
Verankerungsfilamente dar. Hierin besteht ein weiterer
wesentlicher Unterschied zu den Desmosomen, die
benachbarte Epithelzellen über die glykosilierten extra-
zellulären Domänen ineinander verzahnter Cadherine
(Desmoglein 1 und Desmokollin 3) verbinden. Die
Lamina densa der Basalmembran ist durch Fibrillen mit
der Dermis verbunden. Für diese Interaktion sind Typ
VII Kollagen und Laminin 5 wichtig. Typ VII Kollagen-
fasern selber sind mit Gruppen von Kollagenfasern,
elastischen Fibrillen und perlenförmigen Fibrillen
verknüpft, die Bestandteile der Dermis sind.
Wie bereits erwähnt, ist die klassische Funktion der
Hemidesmosomen die Verankerung der Epithelzellen
mit der Basalmembran und krankhafte Veränderungen
führen zu Störungen in dieser Verankerung mit
Blasenbildung (siehe Abb. 86). Es mehren sich aber
Hinweise, dass die Hemidesmosomen neben ihrer
mechanischen Funktion auch in die Signaltransduktion
einbezogen sind.
Die Sterne in Abbildung A markieren Dendriten von
Melanozyten zwischen den Keratinozyten und die Pfeil-
köpfe in Abbildung A Melanosomen in Keratinozyten.
Literatur
Borradori L, and Sonnenberg A (1996) Hemidesmosomes: roles
in adhesion, signaling and human diseases. Curr Opin Cell Biol 8:
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Shc/Grb2 and association with the cytoskeleton of hemidesmo-
somes. EMBO J 14: 4470
Vergrößerung: x 15,000 (A); x 60,000 (B)
Abbildung 85 171

Nukleus

Tonofilamente

* *

Basalzellenschicht

Kollagen

Lamina rara
Fibroblast Lamina densa
A

* Lamina densa
Lamina rara

B
172 Zell-Zell und Zell-Matrix Verbindungen und krankhafte Veränderungen
EPIDERMOLYSIS BULLOSA SIMPLEX
Krankheiten der Dermis-Epidermis Junktion sind mit
einer Brüchigkeit der Haut und der Bildung von Blasen
verbunden. Die Veränderungen sind im Bereich mecha-
nisch stark beanspruchter Hautpartien wie den
Handflächen und Fußsohlen besonders ausgeprägt.
Die Epidermolysis bullosa simplex ist eine Krankheit
der Keratine K5 und K14, die in den Basalzellen der
Epidermis vorhanden sind. In den Abbildungen A und B
sind die auftretenden feinstrukturellen Veränderungen
illustriert. Es handelt sich um eine Hautbiopsie eines
Patienten mit der milden Weber-Cockayne Form der
Epidermolysis bullosa simplex. Die mit einer Bläschen-
bildung einhergehende Separation der Dermis-Epider-
mis Junktion ist in Abbildung A eindeutig zu erkennen.
Hierbei kommt es auch zur Zerstörung von Basalzellen.
Der Bläscheninhalt besteht aus Zelldetritus und
Exsudat. Die Keratinfilamente und von ihnen gebildete
Bündel und die Hemidesmosomen (Pfeile in Abb. B)
erscheinen bei dieser milden Form elektronen-
mikroskopisch normal. Bei der schweren Dowling-
Meara Form der Epidermolysis bullosa simplex kann es
allerdings zur Verklumpung von Keratinfilamenten in
basalen Anteilen der Basalzellen kommen, die diagnos-
tisch pathognomonisch sind.
Unterschiedliche Punktmutationen der Keratine K5
und K14 führen zu Defekten beim Zusammenbau dieser
Intermediärfilamente. In Abhängigkeit von der Lage der
Punktmutation können klinisch milde oder schwere
Formen unterschieden werden. Erstere sind durch eine
beeinträchtigte laterale Interaktion in den Keratin-
filamenten verursacht und letztere durch Defekte bei
der Verlängerung der Keratinfilamente. Die schweren
Formen sind immer durch Mutationen im N-termi-
nalen Ende der Helix 1A oder dem C-terminalen Ende
der Helix 2B bedingt.
Weitere mit Keratinen verbundene Krankheiten
betreffen die suprabasalen Zellschichten der Epidermis.
Hier handelt es sich um die Keratine K1 und K10, deren
Störungen sich als epidermolytische Hyperkeratose
manifestieren, die mit einer übermäßigen Kerati-
nisierung und der teilweisen Zerstörung der Epidermis
einhergehen. Von diesen degenerativen Veränderungen
sind die Basalzellen, die die Keratine K5 und K14
enthalten, nicht betroffen. Krankhafte Veränderungen
des Plektins und des bullösen Pemphigoid Antigens-1
beinträchtigen die Verankerung der Keratinfilamente
mit den Hemidesmosomen.
Bei der Gruppe der Epidermolysis bullosa sind eine
Vielzahl von Komponenten krankhaft verändert wie
Laminin 5, Typ VII Kollagen, Verankerungsfibrillen, die
Basalmembran und auch Dermisbestandteile. So ist die
junktionale Epidermolysis bullosa durch fehlendes
Laminin 5 verursacht. Elektronenmikroskopisch sind
Bläschen nachweisbar, die durch Spaltbildung innerhalb
der Lamina rara verursacht sind. Die Lamina densa und
die Verankerungsfibrillen sind normal. Die dystrophi-
sche Epidermolysis bullosa ist durch Mutationen im
Gen des Typ IV Kollagens bedingt und als Folge sind die
Verankerungsfibrillen betroffen, die zahlenmäßig
reduziert sein können oder fehlen.
Literatur
Chan Y, Yu Q, Fine J, and Fuchs E (1993) The genetic basis of
Weber-Cockayne epidermolysis bullosa simplex. Proc Natl Acad
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Wilgram G, and Caulfield J (1966) An electron microscopic study
of epidermolytic hyperkeratosis. Arch Dermatol 94: 127
Vergrößerung: x 3,000 (A); x 45,000 (B)
Abbildung 86 173

Basalzellenschicht

Bläschen

Dermis

B
PRINZIPIEN DER GEWEBEORGANISATION
176
DER PANKREASAZINUS
Die Bauchspeicheldrüse ist eine kombiniert exokrine
und endokrine Drüse, die retroperitoneal gelegen, ana-
tomisch in vier Regionen, eine Kopf-, Hals-, Körper-
und Schwanzregion, gegliedert ist. Im exokrinen Teil des
Pankreas (zum endokrinen Pankreas siehe Abb. 94 und
95), in dem die Vorstufen einer großen Anzahl ver-
schiedener Verdauungsenzyme produziert und über den
Pankreasgang in das Duodenum abgegeben werden,
bildet der Azinus die morphologische und funktionelle
Einheit. Wie ein Kranz von Weinbeeren sitzen die sezer-
nierenden Endstücke, die Azini, an den Endverzwei-
gungen des tubulären Ausführungsgangsystems. Ein
solcher Azinus mit den sezernierenden Epithelzellen
und dem engen Lumen im Zentrum (AL – Azinus-
lumen) ist hier abgebildet. Die noch inaktiven Sekret-
vorstufen sind intrazellulär in den Zymogengranula
(ZG) gespeichert, werden nach nervöser oder hor-
moneller Stimulierung in das Azinuslumen abgegeben
und über den Pankreasgang abgeleitet. Erst im Lumen
des Duodenums erfolgt die Aktivierung der Enzyme.
Die pyramidenförmigen sezernierenden Zellen in
den Azini sind über Haftkomplexe in Verbindung und
ihre apikalen Oberflächen bilden die Wand des zentral
gelegenen Kanälchens (AL). Dieses feine Azinus-
kanälchensystem setzt sich außerhalb der Azini in die
Schaltstücke (Abb. 88, 89) fort. Die Ultrastruktur der
Azinuszellen spiegelt ihre Funktion als Drüsenzellen, die
als Hauptaufgabe große Mengen eines proteinhältigen
Sekrets bilden. Die Zisternen des endoplasmatischen
Retikulums (RER) liegen dicht gepackt in den basalen
und lateralen Zellarealen. Sie bilden das „Ergasto-
plasma“, in dem die Pankreasenzyme synthetisiert wer-
den (siehe Abb. 13). Nach ko- und posttranslationalen
Sekretorische Epithelien
Modifikationen, Abgabe in das RER-Lumen und
Passieren einer Qualitätskontrolle werden die neu
gebildeten Proteine aus dem RER exportiert und gelan-
gen zum Golgi Apparat (Golgi), der mit seinen Stapeln
von Zisternen typisch supranukleär gelegenen ist. Hier
werden die Enzyme modifiziert und an der trans-Golgi
Seite in Sekretvesikel abgepackt (siehe Abb. 23). In den
neu gebildeten, noch „unreifen“ Sekretgranula (kon-
densierenden Vakuolen) spielen sich unter zuneh-
mender Konzentration des Sekrets Reifungsprozesse ab,
die zur Bildung der „reifen“ Sekretgranula, der
Zymogengranula (ZG), führen. Diese enthalten dicht
gepackt die Vorstufen der Verdauungsenzyme. Die
zahlreichen Zymogengranula, die im apikalen Zyto-
plasma akkumuliert sind, bilden die Speicherkompar-
timente für die Pankreasenzyme, die erst über spezifi-
sche Stimulierung nach Nahrungsaufnahme in das
Lumen der Azini gelangen.
Die Pankreasazini liegen eng Seite an Seite in einer
dünnen Hülle aus retikulären Bimdegewebe und bilden
in der Gesamtheit das Hauptvolumen des Pankreas-
parenchyms. Im lockeren Bindegewebe eingebettet
liegen Blut- und Lymphkapillaren und feine, nicht
myelinisierte Nervenfasern (siehe auch Abb. 117).
Literatur
Palade G (1975) Intracellular aspects of the process of protein
synthesis. Science 189: 347
Schmidt K, Dartsch H, Linder D, Kern H-F, and Kleene R (2000)
A submembranous matrix of proteoglycans on zymogen granule
membranes is involved in granule formation in rat pancreatic aci-
nar cells. J Cell Sci 113: 2233
Vergrößerung: x 6,200
Abbildung 87 177

Kapillare

Mitochondrien

Golgi

RER Golgi

ZG

AL
Golgi

RER

Nukleus

RER

Kapillare
178
DAS AZINUSZENTRUM MIT SEKRETORISCHEN UND ZENTROAZINÄREN ZELLEN
Die feinen Kanälchen im Zentrum der Azini bilden die
ersten Abschnitte des sekretableitenden Systems. Sie
setzen sich in die schmalen Schaltstücke, die aus den
Azini herausführen, fort. Diese leiten zu den noch in-
tralobulär gelegenen kleinen Ausführungsgängen, die
sich zu größeren interlobulären Ausführungsgängen
vereinigen.
Die Abbildung zeigt Details aus dem Zentrum eines
Azinus. Die sezernierenden Azinuszellen sind unter-
einander und mit den zentroazinären Zellen (Z) über
Haftkomplexe (Stern) verbunden. Diese bestehen, so
wie auch in anderen Epithelien, aus Tight Junctions,
einer Zonula adhaerens und einem Kranz von Desmo-
somen (siehe Abb. 77). Die apikale Abdichtung durch
die Tight Junctions verhindert das Auslaufen des Sekrets
aus dem Azinuslumen (AL) in den Interzellularraum.
In der Abbildung sind alle Kompartimente des sekre-
torischen Systems der Azinuszellen zu sehen, das dicht
gepackte raue endoplasmatische Retikulum, der Golgi
Apparat (Golgi), kondensierende Vakuolen (KV) und
Zymogen Granula (ZG). Die verstärkte Elektronen-
dichte des Inhalts der Zymogengranula im Vergleich zu
der in den kondensierenden Vakuolen spiegelt die
Kondensation des Sekrets auf dieser Ebene des Sekre-
tionswegs (siehe auch Abb. 23 und 39). Kondensierende
Vakuolen werden von trans-Golgi Zisternen und dem
trans-Golgi Netzwerk gebildet und sind daher an der
trans-Golgi Seite besonders häufig, während die reifen
Zymogengranula im gesamten apikalen Zytoplasma
und auch in enger Beziehung zur apikalen Plasma-
membran lokalisiert sind.
Die Zymogengranula beinhalten die konzentrierten
Proenzyme, die über regulierte Exozytose durch Ver-
schmelzen der Membran des Zymogengranulums mit
der Plasmamembran und Bildung einer Pore in das
Azinuslumen abgegeben werden (siehe Abb. 39-40). Die
regulierte Sekretion der Proenzyme nach Nahrungs-
aufnahme wird hauptsächlich durch Bindung von
Cholezystokinin an spezifische Rezeptoren in der baso-
lateralen Plasmamembran der Azinuszellen ausgelöst.
Die zahlreichen Autophagosomen und Lysosomen (Ly)
im apikalen Zytoplasma der Azinuszellen sind Ausdruck
des lysosomalen Abbaus von übermäßig produziertem
Sekret durch einen, in Drüsenzellen mit regulierter
Sekretorische Epithelien
Sekretion, häufigen Mechanismus, der als Krinophagie
bezeichnet wird. Die Existenz eines flexiblen Systems, in
dem Produktion der Enzyme, Speicherung, Ausschleu-
sen aus der Zelle und Abbau zusammenspielen, ist
notwendig, da sowohl die Menge an produziertem
Pankreassaft, als auch die Konzentration der Proenzyme
in den Zymogengranula je nach Nahrungszufuhr vari-
ieren. Eine kohlenhydratreiche Diät induziert die selek-
tive Produktion von Amylase und vermindert Protea-
senbildung. Das Hormon Insulin, das in den Beta-
Zellen der endokrinen Pankreasinseln produziert wird
(Abb. 94), reguliert die Amylase Genexpression in den
Azinuszellen. Dieser Prozess unterstreicht die
Bedeutung des insulo-azinären Portalsystems, das durch
hintereinander geschaltete Kapillarnetze in den
endokrinen Pankreasinseln und den die Inseln
umgebenden Azini aufgebaut ist.
Die Abbildung zeigt an Hand zweier Anschnitte des
Azinuslumens (AL) die Plastizität der Kanälchenwand
und ihre Anpassung an den jeweiligen Funktions-
zustand. Das im mittleren Bereich der Abbildung dar-
gestellte Azinuskanälchen ist frei von Sekret; zahlreiche
Mikrovilli besetzen die Wand des Kanälchens. In das
etwas darüber angeschnittene Kanälchen wurde Sekret
abgegeben. Sein Lumen ist gefüllt, die Wände sind abge-
flacht und nur wenige Mikrovilli ragen in das Lumen.
Aus der Abbildung ist auch ersichtlich, dass nicht nur
die apikalen Plasmamembranen der sekretorischen Azi-
nuszellen, sondern auch die der zentroazinaren Zellen
die Auskleidung der Kanälchen bilden. Die zentro-
azinären Zellen entsprechen den am weitesten peripher,
noch im Zentrum der Azini, liegenden Zellen der
Schaltstückkanälchen. Sie sind nicht dazu differenziert
Pankreassekret zu bilden, unterscheiden sich daher in
ihrer Ultrastruktur deutlich von den sekretorischen
Azinuszellen, sind jedoch über Haftkomplexe mit den
sezernierenden Zellen verbunden. In dieser Ausprägung
sind zentroazinäre Zellen ausschließlich in der Bauch-
speicheldrüse zu finden.
Literatur
Jahn R, and Südhof TC (1999) Membrane fusion and exocytosis.
Annu Rev Biochem 68: 863
Vergrößerung: x 20,000
Abbildung 88 179

ZG

AL
Z

AL

Golgi
KV

Ly
180
DAS SCHALTSTÜCK
Die feinen Sekretkanälchen im Zentrum der Azini
(Abb. 87, 88) setzen sich in die Schaltstücke, die aus den
Azini herausführen, fort. Diese konfluieren zu den
intralobulären kleinen Ausführungsgängen, die ihrer-
seits wieder durch Zusammenfluss die größeren Aus-
führungsgänge bilden. Die Schaltstückepithelzellen
bilden eine eigene Basallamina und sind in feines
Bindegewebe eingebettet. Im Pankreasgangsystem gibt
es keine Streifenstücke, wie sie in anderen Speichel-
drüsen regulär vorkommen (siehe Abb. 81, 90); auch ist
das Pankreasgewebe frei von Myoepithelzellen.
In Abbildung A ist ein Querschnitt, in Abbildung B
ein Längsschnitt durch ein Schaltstück zu sehen. Das
Lumen ist in beiden Bildern mit Sekret gefüllt, das als
dichtes oder flockiges Material erscheint. Abbildung B
zeigt im Pankreassekret Immunogoldmarkierung für
Amylase.
Der Pankreassaft enthält die nach wie vor inaktiven
Vorstufen der Enzyme, die erst im Lumen des Duo-
denum durch HCO3- -Ionen und das alkalische Sekret
Sekretorische Epithelien
der Brunner’schen Drüsen in der Submukosa des Duo-
denums aktiviert werden. Eine frühzeitige Aktivierung
von Trypsin und anderen Proteasen im Pankreasgang
wird durch einen Inhibitor, der ebenfalls ein Produkt
der Azinuszellen ist und gemeinsam mit den Enzymen
in das Lumen des Pankreasgangsystems gelangt, verhin-
dert. Vergleichbar mit der Situation in anderen exokri-
nen Drüsen wird das primäre Pankreassekret im
Ausführungsgangsystem modifiziert. Im Schaltstück
löst das intestinale Hormon Sekretin durch spezifische
Bindung an Rezeptoren in der Plasmamembran die Bei-
mengung von Bikarbonat und Wasser aus. Zahlreiche
basolaterale Faltenbildungen, wie sie vor allem links in
Abbildung A und rechts in Abbildung B im Kanäl-
chenepithel zu sehen sind, weisen auf Ionentransport
hin. Die Epithelzellen sind untereinander über Zell-Zell
Kontakte verbunden. Ausgeprägte Haftkomplexe (Pfeile)
sind nahe der apikalen Zelloberfläche lokalisiert. Die
lumennahe gelegenen Tight Junctions verhindern, dass
Pankreassekret in den Interzellularraum gelangt.
Vergrößerung: x 23,500 (A), x 18,000 (B)
Abbildung 89 181

B
182
DIE SUBMANDIBULARDRÜSE
In dieser Übersichtsaufnahme, die einen Ausschnitt aus
einer Schweinesubmandibulardrüse zeigt, sind alle peri-
pheren Abschnitte einer zusammengesetzten Speichel-
drüse, ein gemischtes sezernierendes Endstück mit mu-
kösen Drüsenzellen (1) und serösen Halbmonden (2),
kleine Schaltstückkanälchen (3) und ein Streifenstück
(4) zu sehen.
Die Gandula submandibularis ist eine zusammenge-
setzte tubulo-azinöse Drüse, die ein gemischt schleimig-
seröses Sekret bildet, das bis zu 70% des Speichels aus-
macht. Zusammen mit dem Produkt der anderen
großen und kleinen Speicheldrüsen dient das Sekret der
Submandibulardrüse der Anfeuchtung der Mund-
schleimhaut, die es mit einem dünnen Schutzfilm
überzieht. Nahrungsmittel werden befeuchtet und
gelöst. Der Speichel enthält Verdauungsenzyme,
Immunglobuline, Laktoferrin und Lysozym und spielt
eine wichtige Rolle im Abwehrsystem.
Die sekretorischen Endstücke der Drüse bilden
entweder seröse Azini oder gemischte Formen, in denen
schleimbildende und serös sezernierende Zellen neben-
einander vorkommen. Die Abbildung zeigt ein gemischt
sero-muköses Endstück mit schleimproduzierenden
Zellen (1), in denen im apikalen Zytoplasma die zahl-
reichen Schleimtröpfchen dicht gepackt liegen. Die
mukösen Zellen begrenzen mit ihren apikalen Ober-
flächen das Lumen, während die serösen Drüsenzellen
(2) an der Basis des sezernierenden Epithels liegen, halb-
mondförmig den mukösen Zellen aufsitzen („seröse
Halbmonde“) und über feine interzelluläre Kanälchen
ihr Sekret in das Lumen abgeben. Die serösen Zellen
stehen mit der Basallamina in Kontakt oder sind
myoepithelialen Zellen benachbart, die allerdings in
dieser Übersichtsaufnahme kaum zu erkennen sind. Die
Myoepithelzellen formen eine Art von Korb um die
Azini und unterstützen die Sekretion.
Sekretorische Epithelien
Das Sekret wird über Schaltstücke, Streifenstücke
und große interlobuläre Ausführungsgänge abgeleitet.
Zwei Schaltstücke (3) im linken oberen Feld des Bildes
zeigen ein isoprismatisches Epithel und wenige sehr
platte Myoepithelzellen in den basalen Abschnitten des
Epithels. Im linken unteren Bildausschnitt ist ein
Streifenstück (4) zu erkennen. Der Gang besteht aus
hochprismatischen Zellen, die eine ausgeprägte Falten-
bildung der basalen Plasmamembran aufweisen, ein
Hinweis auf ihre Funktion im Ionen- und Wassertrans-
port. Solch ein basales Labyrinth aus einem Speichel-
drüsenstreifenstück wird in Abbildung 81C stärker ver-
größert gezeigt. In den Streifenstücken wird der primäre
Speichel modifiziert. Kallikrein bewirkt eine Prozessie-
rung von Proteinen. Na+- und Cl--Ionen werden
reabsorbiert, das Sekret wird hypoosmotisch und
Immunglobulin A, ein Produkt der Plasmazellen im
umgebenden Bindegewebe, gelangt über Transzytose in
das Kanälchenlumen.
Das Gangsystem der Speicheldrüsen wird während
der Embryonalentwicklung durch komplexe Verzwei-
gungsmechanismen in einer Abfolge wiederholter
Knospungen und Spaltbildungen modelliert. Wachs-
tumsfaktoren, das Aktinzytoskelett und Komponenten
der Basalmembran haben dabei Schlüsselfunktionen.
Speziell hervorzuheben ist Fibronektin, dem bei der
Morphogenese des verzweigten Ausführungsgang-
systems im Zusammenhang mit der Umorganisation
von Zell-Zell zu Zell-Matrix Verbindungen eine beson-
dere Rolle zukommt.
Literatur
Sakai T, Larsen M, and Yamada KM (2003) Fibronectin require-
ment in branching morphogenesis. Nature 423: 876
Vergrößerung: x 1,500
Abbildung 90 183

1
2

1
1

2
4
2

2
1

2
184
DIE BECHERZELLEN : EINZELLIGE DRÜSEN
Exokrine sekretorische Zellen bilden in der Regel kom-
plex strukturierte Drüsen wie die Speicheldrüsen (siehe
Abb. 87 und 90). Andererseits existieren sekretorische
Zellen als einzellige Drüsen in den Schleimhäuten der
Atemwege, des Verdauungstrakts und des Urogenital-
trakts und auch in der Konjunktiva oder der Gallen-
blase. Den Prototyp einer solchen einzelligen Drüse
stellen die wegen ihrer charakteristischen Gestalt als
Becherzellen bezeichneten schleimproduzierenden
Zellen dar. Zusätzlich zu den Becherzellen existieren
weitere spezialisierte schleimproduzierende Einzelzellen
in verschiedenen Organen. Muzine gemeinsam mit
Wasser, Ionen und verschiedenen anderen Glyko-
proteinen bilden eine visko-elastische Schleimschicht,
die gegen mechanische und chemische Irritationen und
bakterielle Infektionen schützt sowie die Austrocknung
der Schleimhäute verhindert und die spezifische lokale
Flora reguliert.
Die gegenüberliegende Abbildung zeigt eine Becher-
zelle flankiert von absorptiven Enterozyten mit ihrem
charakteristischen apikalen Bürstensaum. Die Pfeile
zeigen auf die miteinander verzahnten lateralen Plasma-
membranen. Das Zytoplasma der Becherzelle wird von
supranukleär gelegenen Schleimtröpfchen dominiert.
Ihre Bildung beginnt in erweiterten Anteilen von Trans-
Golgi Zisternen, in Analogie zur Sekretgranulabildung
in anderen sekretorischen Zellen. In speichernden
Becherzellen ist der Zellkern in den untersten Zell-
abschnitt gedrängt. Das ihn umgebende Zytoplasma
weist weitlumige Zisternen des rauen endoplasmati-
schen Retikulums auf.
Die Schleimtröpfchen bestehen vorwiegend aus
Muzinen und sind reich an Kalzium. Muzine stellen eine
heterogene Gruppe sekretorischer oder membrange-
bundener Glykoproteine dar. Ihnen gemeinsam ist ihr
hoher Gehalt an vornehmlich O-glykosidisch verknüpf-
ten Oligosacchariden, die mehr als 50% ihrer Molekül-
masse ausmachen können. Je nach Gewebe unterschei-
den sich die Struktur des Apomuzins (nicht glyko-
siliertes Eiweißgerüst) und die seiner Oligosaccharide.
Obwohl sie eine heterogene Gruppe sind, haben alle
Muzine eine gleichartige Domänenstruktur. Sie beste-
hen aus einer zentralen Domäne von hintereinander
angeordneten Serin- und Threonin-reichen Sequenzen,
die potentiell Akzeptoren für die O-Glykosilierung sind
Sekretorische Epithelien
und aus Cystin-reichen N- und C-terminalen Domä-
nen. De novo synthetisierte Apomuzine erhalten im
endoplasmatischen Retikulum N-glykosidisch ver-
knüpfte Oligosaccharide und werden hier über die
Bildung von Disulfidbrücken im Bereich der C-termi-
nalen Domäne dimerisiert. Im Cis Golgi Apparat be-
ginnt die Synthese der O-glykosidisch verknüpften
Oligosaccharide (siehe Abb. 29). Im sauren Mileu des
Trans Golgi Apparates werden die Muzin Dimere über
Disulfidbrücken im Bereich des N-Terminus in die
reifen Muzin-Multimere umgewandelt und gelangen in
die Schleimtröpfchen.
Die Sekretion der Muzine der Becherzellen geschieht
über Exozytose. Hierbei ist eine stetig vor sich gehende
basale Sekretion durch die Exozytose einzelner peripher
gelegener Schleimtröpfchen von der Stimulus-indu-
zierten Massensekretion der zentral gelegenen Schleim-
tröpfchen zu unterscheiden. Letztere kann durch eine
Vielzahl von Stimuli induziert werden. Zum einem kann
es sich um unspezifische mechanische und chemische
Irritation handeln und zum anderen um spezifische
Stimulation durch Aktivatoren der Phospholipase C
und der Adenylat- und Guanylatzyklase. Details des
Mechanismus der Exozytose sind im Zusammenhang
mit den Abbildungen 39 und 40 beschrieben.
Literatur
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Vergrößerung: x 10,500
Abbildung 91 185
186
DIE BELEGZELLEN DES MAGENS : ORTE DER SALZSÄUREPRODUKTION
Die Belegzellen (BZ) befinden sich im mittleren Bereich
der Drüsen der Fundus-Korpus Region des Magens. Sie
bilden Salzsäure (ungefähr 0,16 M, pH Wert * 0,8) und
sezernieren den Intrinsic Factor (ein Vitamin B12-bin-
dendes Glykoprotein).
Die hochspezialisierte Funktion der BZ wider-
spiegelt sich in ihrer Feinstruktur und deren funktionell
bedingten Veränderungen. Die apikale Plasmamembran
bildet zahlreiche verzweigte Kanäle, die Canaliculi, die
tief in das Innere der BZ reichen (Sterne in Abb. A).
Abbildung B zeigt eine quergeschnittene BZ und ihre
zahlreichen Canaliculi (Sterne). Direkt unterhalb der
apikalen Plasmamembran und um die Canaliculi
befindet sich ein aus Tubuli und Vesikeln sowie aus
Zisternen bestehendes Membransystem, die Tubulo-
vesikeln (tv in Abb. C), die neuerdings als Tubulozis-
ternen bezeichnet werden. Ein weiteres Charakteris-
tikum sind die zahlreichen Mitochondrien (M). Sie wer-
den benötigt, da die H+-K+-ATPase für den miteinander
gekoppelten Export eines Wasserstoffions und den
Import eines Kaliumions ein ATP Molekül verbraucht.
Die H+-K+-ATPase der BZ ist eine ATPase vom P-Typ,
die aus einer katalytischen _-Untereinheit und einer
`-Untereinheit besteht. Erstere besitzt eine Erkennungs-
sequenz für das apikale Sorting und letztere stabilisiert
die _-Untereinheit und enthält eine Erkennungssequenz
für die Endozytose und damit für das Rezyklieren. Die
H+-K+-ATPase ist die primäre Protonenpumpe des
Magens. In ruhenden BZ befindet sie sich vorwiegend in
den Tubulovesikeln.
Die dreidimensionale Struktur des zytoplasmati-
schen Membransystems ist seit seiner Entdeckung
Gegenstand der Kontroverse. Eine Vielfalt von elektro-
nenmikroskopischen Befunden wurde durch Hoch-
druck/Schnellgefrierfixierung und Gefriersubstitution
mit anschließender Analyse von Serien ultradünner
Schnitte erhalten. In ruhenden BZ besteht es über-
wiegend aus Zisternen, die nicht mit den Canaliculi in
Verbindung stehen und einem Netzwerk gewundener
Tubuli. Nach Stimulierung der BZ kommt es zur Trans-
lokation der ATPase-haltigen Tubulovesikeln in die
apikale Plasmamembran, deren Oberfläche um etwa das
Zehnfache zunimmt. Die Zahl der Mikrovilli der
Canaliculi nimmt ebenfalls zu. Die H+-K+-ATPase
besitzt hier Leitfähigkeit für Kalium- und Chloridionen,
Sekretorische Epithelien
was zur Ausschleusung von Wasserstoff- und
Chloridionen und von Wasser führt. Gegenwärtig ist das
Membrane Recruitment/Recycling Model für die
Salzsäureproduktion das am meisten akzeptierte. Nach
Beendigung der Stimulierung der BZ kommt es über das
Membranrezyklieren zur Wiederherstellung des typi-
schen zytoplasmatischen Membransystems. Die erhöhte
Endozytoseaktivität der Zellen manifestiert sich in vie-
len Coated Vesikeln.
Die Salzsäureproduktion ist ein kontrollierter
Prozess, die durch parakrine, endokrine und neurale
Stimuli angeregt wird, die an spezifische Rezeptoren in
der basolateralen Plasmamembran der BZ binden. Die
histaminergische Stimulation durch Histamin, das von
benachbarten entero-endokrinen Zellen freigesetzt
wird, ist am bedeutendsten. Weiterhin kann die Stimu-
lation cholinergischer und gastrinergischer Natur sein.
Es kommt zunächst zur Erhöhung von zyklischem AMP
und intrazellulärem Ca2+ und anschließend zur Aktivie-
rung verschiedener Proteinkinasen und Stimulus-
assoziierter Eiweißphosphorylierung. Das kortikale auf
Aktinfilamenten beruhende Zytoskelett ist ebenfalls in
die Rekrutierung von Membranen einbezogen und so-
mit von wesentlicher Bedeutung für die BZ Aktivierung.
Die Autoimmungastritis des Menschen durch Anti-
körper gegen die H+-K+-ATPase bewirkt Mangel an
Salzsäure und an Intrinsic Factor. Der resultierende
Vitamin B12-Mangel verursacht die perniziöse Anämie.
N: Zellkern.
Literatur
Duman JG, Pathak NJ, Ladinsky MS, McDonald KL, and Forte JG
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parietal cell. Annu Rev Physiol 65: 103
Vergrößerung: x 6,000 (A); x 7,500 (B); x 46,000 (C)
Abbildung 92 187

* N

*
*

A B

tv
M

C
188
DIE SCHALTZELLEN DER NIERE : REGULATOREN DES SÄURE -BASEN HAUSHALTS
Die Schaltzellen finden sich entlang der Sammelröhr-
chen der Nierenrinde und der äußeren Markschicht
sowie in den Verbindungsstücken und, abhängig von
der Spezies, sowohl in den gewundenen distalen Tubuli
und in Sammelröhrchen distal der äußeren Mark-
schicht. Sie vermitteln die H+ und HCO3- Sekretion
sowie die Cl- und K+ Reabsorption. Die Schaltzellen
sind zwischen den Hauptzellen gelegen, wie aus
Abbildung A und B ersichtlich ist, und sind mit ihnen
seitlich verzahnt (Pfeilköpfe in Abb. B). Sie enthalten
Markerproteine wie Karboanhydrase, H+-ATPase und
Band 3, mit denen sie immunzytochemisch identifiziert
werden können, wobei die vakuoläre H+-ATPase der
verlässlichste Marker ist.
Elektronenmikroskopisch zeichnen sich die
Schaltzellen durch ein dunkel erscheinendes
Zytoplasma (Abb. A), zahlreiche Mitochondrien und
Mikrovilli der apikalen Plasmamembran sowie
tubulovesikuläre Membranen im apikalen Zytoplasma
aus. Letztere sind selbst bei schwacher Vergrößerung in
Abbildung A erkennbar. Das basale Membranlabyrinth
ist weniger ausgeprägt als das der Hauptzellen (Abb. A
und B).
Schaltzellen sind strukturell sehr variabel. Das
Zytoplasma der Schaltzellen der äußeren Schicht des
Nierenmarks ist heller (Abb. B) als das derjenigen der
Nierenrinde (Abb. A). Der apikale Zellpol kann weit in
das Tubuluslumen ragen sowie zahlreiche Mikrovilli
und nur wenige tubulovesikuläre Membranen
aufweisen (Abb. A). Andererseits kann er auf der Höhe
der Tight Junctions stark eingeschnürt und von den
umgebenden Hauptzellen weitgehend überdeckt sein
und massenhaft zytoplasmatische tubuläre Membranen
aufweisen (Abb. B). Diese Variabilität in der apikalen
Struktur ist abhängig vom Funktionszustand der
Schaltzellen und Ausdruck extensiven Rezyklierens
zwischen der Plasmamembran und den apikalen
intrazellulären Vesikeln.
Funktionell und immunzytochemisch können min-
destens zwei Haupttypen von Schaltzellen unter-
schieden werden: die _- und die `-Schaltzellen. Beide
finden sich in den Sammelröhrchen der Nierenrinde.
Gemeinsam ist beiden Typen von Schaltzellen die
Sekretorische Epithelien
Anwesenheit von Chloridkanälen und von H+K+-ATPase
in ihrer basolateralen Plasmamembran. Die Sammel-
röhrchen der äußeren Markschicht enthalten nur die
_-Schaltzellen. Letztere besitzen apikal gelegene
H+-ATPase und basolateral befindliche Cl-:HCO -3
Anionen Austauscher und sezernieren basolateral
HCO 3-, was mit apikaler Protonen (H+)-Sekretion
gekoppelt ist. Die `-Schaltzellen weisen eine entge-
gengesetzte Polarität für diese Transporter auf und
sezernieren HCO 3- apikal in das Tubuluslumen. Es gibt
Hinweise darauf, dass die `-Schaltzellen sich in einen
_-Schaltzellen ähnlichen Phänotyp umwandeln kön-
nen.
Literatur
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Nierenrinde des Kaninchens.
Abbildung 93 189

Hauptzelle Schaltzelle

Hauptzelle

Schaltzelle

B
190
ENDOKRINE SEKRETION : INSULIN-PRODUZIERENDE BETA -ZELLEN
DER LANGERHANS’SCHEN INSELN
Endokrine Zellen können Organe wie die Schilddrüse
und die Nebennieren oder Mikroorgane in größeren
Organen wie die Langerhans’schen Inseln des Pankreas
bilden und existieren zudem als Einzelzellen verstreut in
anderen Organen wie den Atmungs- und Verdauungs-
organen (siehe Abb. 96). Endokrine Zellen bilden, spei-
chern und sezernieren Polypeptide oder Steroid-
hormone, die wichtige Moleküle für die Signal-
transduktion sind. Sie sezernieren ihre Produkte in das
Blut, über das sie zu entfernten Organen transportiert
werden und ihre Wirkung entfalten. Dementsprechend
sind endokrine Drüsen reich an Kapillaren. Nach erfolg-
ter Bindung an spezifische Rezeptoren der Plasma-
membran der Zielzellen werden Signalkaskaden aus-
gelöst, die so wichtige Funktionen wie die Proliferation
und Differenzierung von Zellen und den Stoffwechsel
regulieren.
In der gegenüberliegenden Abbildung sind Beta-
Zellen einer Langerhans’schen Insel zu sehen, die
Insulin bilden. Wie andere professionelle sekretorische
Insulin
C-Peptid
Endoproteasen
& Literatur
Carboxypeptidase H
Proinsulin
Signalpeptidase
Arg 65
COOH
Lys 64
Prä-Proinsulin 31 Arg
32 Arg
Sekretorische Epithelien
Zellen enthalten sie reichlich raues endoplasmatisches
Retikulum, zahlreiche Mitochondrien, einen gut ent-
wickelten Golgi Apparat und viele Sekretgranula (SG).
Die Sekretgranula bestehen aus einem elektronendich-
ten Kern aus Insulin und einem luzenten Hof aus über-
wiegend C-Peptid. Die anastomosierenden Stränge von
Beta-Zellen und das Kapillarnetzwerk bilden eine
Funktionseinheit. Insulin wird über regulierte Exozyto-
se der Sekretgranula sezerniert (siehe Abb. 40).
Wie andere Polypeptidhormone wird das Insulin als
Prä-Prohormon synthetisiert (siehe Schema). Die
Entfernung des Signalpeptids vom Prä-Proinsulin im
endoplasmatischen Retikulum führt zum Proinsulin,
das aus einer durch zwei Disulfidbrücken verbundenen
A- und B-Kette besteht, die über das C-Peptid verknüpft
sind. Über limitierte Endoproteolyse wird das
Proinsulin in Insulin umgewandelt. Die Endoprotease
PC2 schneidet beim basischen Aminosäurepaar Arg31-
Arg32 der B-Kette/C-Peptid Junktion und die Endo-
protease PC 3 bei Lys64-Arg65 der A-Kette/C-Peptid
Junktion. Die freigelegten basischen Aminosäurepaare
werden durch die Karboxypeptidase H entfernt. Die
Proinsulin-Insulin Konversion erfolgt in sauren pH-
Wert aufweisenden, partiell Clathrin-überzogenen
unreifen Sekretgranula der Trans Region des Golgi
Apparates. Insulin spielt eine bedeutende Rolle bei der
Kontrolle der Homeostase der Blutglukose und ist auch
in den Lipid- und Eiweißstoffwechsel einbezogen. Seine
Zielzellen sind die Hepatozyten, die Skelett- und
Herzmuskelfasern, die Adipozyten und die Fibroblasten.
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Vergrößerung: x 11,200
Abbildung 94 191

SG

Golgi

SG

Kapillare

Nukleus
192
STÖRUNGEN DER HORMONKONVERSION IN MENSCHLICHEN INSULINOMEN
Störungen der Funktion der Beta-Zellen verursachen
verschiedene Krankheiten. So können die funktionellen
(d.h. Insulin bildenden) Insulinome zu lebensbedroh-
lichen Zuständen infolge einer hyperinsulinämischen
Hypoglykämie führen, die durch fehlerhafte Insulin-
sekretion und gestörte Proinsulin-Insulin Konversion
bedingt ist.
Wie in Abbildung A und B gezeigt, bilden funk-
tionelle Insulinome Sekretgranula. Es handelt sich um
Aufnahmen von zwei aufeinanderfolgenden ultradün-
nen Serienschnitten, in denen die gleichen Organellen
einer Insulinomzelle zu sehen sind. Mittels Immun-
elektronenmikroskopie kann in den Sekretgranula
Insulin mit einem monoklonalen Antikörper nachge-
wiesen werden, wie die intensive Markierung mit
Goldpartikeln zeigt (Abb. A). Jedoch unterscheiden sich
die Sekretgranula von denen normaler Beta-Zellen
(Abb. 93). Die meisten weisen keinen Hof auf und
kristalline Kerne sind selten. Insgesamt ähneln sie ultra-
strukturell unreifen Sekretgranula normaler Beta-
Zellen, obwohl sie sich nicht in der Nachbarschaft des
Trans Golgi Apparates befinden.
Patienten mit funktionellen Insulinomen haben in
der Regel nicht nur hohe Insulin Plasmaspiegel als
Ausdruck einer gestörten Hormonsekretion, sondern
auch erhöhte Proinsulin Plasmaspiegel. Immun-
elektronenmikroskopisch ist Proinsulin in funktionellen
Insulinomen im Gegensatz zu normalen Beta-Zellen
nicht nur im Golgi Apparat und in assoziierten unreifen
Sekretgranula nachweisbar, sondern auch in den meis-
ten anderen Sekretgranula und in unter der Plasa-
membran befindlichen Sekretgranula. Abbildung B
zeigt diesen Befund im konsekutiven Ultradünnschnitt
zu dem in Abb. A gezeigten. Somit kann gefolgert wer-
den, dass viele Sekretgranula Proinsulin enthalten,
welches gemeinsam mit dem Insulin sezerniert wird
und als eine Ursache für die beobachteten hohen
Proinsulin Plasmaspiegel angesehen werden kann. In
diesem Zusammenhang ist zu erwähnen, dass die
Menge von Endoprotease PC3 in Insulinomzellen
reduziert ist, was eine verminderte Proinsulin-Insulin
Konversion zur Folge hat. Sekretion von Proinsulin
kann aber auch durch gestörtes Sorting in die
Sekretgranula verursacht sein. Karboxypeptidase E ist
Sekretorische Epithelien
ein im Trans Golgi Netzwerk gelegener Sorting Rezeptor
für Proinsulin und Prohormone anderer neuroen-
dokriner Zellen. In transgenen Mäusen mit fehlender
Karboxypeptidase E wurde eine Hyperproinsulinämie
als Folge konstitutiver Proinsulinsekretion beobachtet.
Inwieweit ein Bezug zu menschlichen Insulinomen
besteht, ist unbekannt. Es ist andererseits bekannt, dass
in normalen Beta-Zellen und anderen neuroendokrinen
Zellen der Inhalt unreifer Sekretgranula bevorzugt se-
zerniert werden kann.
Die Proinsulin-Insulin Konversion scheint in funk-
tionellen Insulinomen auf unterschiedliche Weise
gestört zu sein. Zusätzlich zur oben erwähnten inkom-
pletten Konversion sind auch Abweichungen in der
Topographie der Hormonkonversion bekannt. In den
Insulinomzellen beginnt die Konversion schon im Golgi
Apparat und nicht erst in unreifen Sekretgranula wie in
den normalen Beta-Zellen. Die Usache hierfür ist unbe-
kannt.
Literatur
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Vergrößerung: x 38,500 (A, B)
Abbildung 95 193

Insulin

Nukleus

Proinsulin

Nukleus

B
194
DAS DIFFUSE ENDOKRINE SYSTEM
Endokrine Zellen existieren in der Schleimhaut des Ver-
dauungs- und Atemwegstrakts sowie des Urogenital-
trakts und der Haut und seltener im Bindegewebe dieser
Organe. Sie kommen als Einzelzellen oder in kleinen
Zellgruppen vor. Obwohl die Zellen des diffusen
(neuro)endokrinen Systems viele morphologische und
biochemische Gemeinsamkeiten haben, unterscheiden
sie sich nicht nur hinsichtlich ihres Standortes, sondern
hauptsächlich durch die Art der gebildeten regula-
torischen Peptide. Trotz aller Unterschiede bilden sie
aber ein funktionelles System. So stellt das diffuse
endokrine System des Verdauungstrakts die größte
endokrine Drüse des Körpers dar. Die Pathologie des
(neuro)endokrinen Systems ist komplex und schließt
Hyperplasien und Tumoren ein, die mit schweren hor-
monellen Dysregulationen einhergehen können.
Abbildung A zeigt zwei endokrine Zellen in der
Schleimhaut des Duodenums. Beide enthalten eine
Vielzahl der für endokrine Zellen charakteristischen
Dense Core Sekretgranula, die typischerweise im
basalen Zytoplasma der Zellen liegen. Eine der Zellen ist
eine Somatostatin-produzierende D-Zelle. Sie ent-
spricht dem sogenannten geschlossenen Typ einer intra-
epithelialen endokrinen Zelle, da sie keinen Kontakt
zum Lumen hat. Die andere endokrine Zelle ist eine TG-
Zelle, die ein dem Gastrin-Cholezystokinin ähnliches
Hormon produziert. Sie stellt den sogenannten offenen
Typ einer endokrinen Zelle dar, deren apikale, mikrovil-
litragende Plasmamembran (Pfeilköpfe) in das Lumen
reicht. Die Pfeile weisen auf junktionelle Komplexe mit
den angrenzenden absorptiven Zellen hin. Es ist
bemerkenswert, dass in Abhängigkeit vom Standort der
gleiche endokrine Zelltyp geschlossen oder offen sein
kann. So sind die Gastrin-produzierenden G-Zellen des
Magens in der Pylorusschleimhaut vom offenen Typ
und in der Korpusschleimhaut vom geschlossenen Typ.
Abbildung B zeigt eine solitäre Insulin-produzieren-
de Zelle im Epithel eines kleinen Sekretgangs des
Pankreas mit Immungoldmarkierung für Insulin über
ihren Sekretgranula. Im Hauptbild erscheint sie als ge-
schlossene Zelle, die vom Zytoplasma der angrenzenden
Duktepithelien überzogen ist (Pfeilköpfe). Die Unter-
suchung von Serienschnitten zeigte aber, dass sie eine
Zelle vom offenen Typ ist, wie im Nebenbild zu sehen
ist. Ein Pfeilkopf markiert die in das Duktlumen
reichende apikale Plasmamembran und die Pfeile einen
junktionalen Komplex.
Sekretorische Epithelien
Nach entsprechender Stimulation sezernieren die
offenen und geschlossenen endokrinen Zellen ihre
Sekretprodukte in das umgebende Bindegewebe, von wo
es in Lymph- oder Blutkapillaren und somit in die
Blutzirkulation gelangt. Nach ihrer Freisetzung in die
Umgebung können die Peptide eine parakrine Wirkung
auf dort vorhandene Zellen entfalten, wie andere
endokrine Zellen, exokrine Zellen, Muskelfasern und
Nervenzellen. Sie können auch autokrin wirken, d.h.
die endokrine Zelle stimulieren, von der sie gebildet
wurden. Die verschiedenen Zellen des diffusen
(neuro)endokrinen Systems produzieren mehr als 100
bioaktiv wirksame Substanzen einschließlich klassischer
Polypeptidhormone, Neuropeptide und Wachstums-
faktoren wie Insulin, Somatostatin, Gastrin, Histamin,
Motilin, Substanz P, EGF, etc. und erst kürzlich entdeck-
te regulatorische Peptide wie NO, Orexine, Leptin und
Ghrelin. Bemerkenswerterweise kann ein endokriner
Zelltyp verschiedene Arten von Polypeptiden bilden.
Literatur
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Vergrößerung: x 5,800 (A); x 12,000 (B, Nebenbild)
Abbildung 96 195

D-Zelle

TG-Zelle
N

B-Zelle

B
196
DAS LEBEREPITHEL
Innerhalb der, wenige Millimeter messenden, prismati-
schen Leberläppchen bildet das Epithel mit den Hepato-
zyten radiär ausgerichtete verzweigte Platten, zwischen
denen die weiten Blutkapillaren, die Lebersinus oder
Sinusoide, liegen. Diese verlaufen ebenfalls radiär in
Richtung zum Läppchenzentrum, wo sie in die ab-
leitende Vena centralis einmünden. Die Leberzellplatten
sind aus einer einzelligen Lage von Hepatozyten aufge-
baut (siehe Zeichnung Abb. 98). Mit ihren apikalen
Oberflächen bilden sie die Wand der zwischen den
Leberzellen gelegenen feinen Gallencanaliculi, die
innerhalb der Zellplatten ein verzweigtes Kanälchen-
system um die Hepatozyten herum ausbilden. Die basa-
le Plasmamembran der Hepatozyten ist großflächig zu
den Sinusoiden hin gerichtet.
Die Abbildung zeigt einen Ausschnitt aus einem
Leberläppchen mit den aus Hepatozyten bestehenden
Zellplatten, rechts im Bild quer und links flach geschnit-
ten. Im Flachschnitt im linken oberen Teil des Bildes
sind zwischen den Hepatozyten Gallencanaliculi mit
Pfeilen markiert. Die benachbarten Leberzellen liegen
Seite an Seite und sind an ihren lateralen Oberflächen in
Kontakt. Sie bilden sowohl Haftkomplexe mit abdich-
tenden Tight Junctions, die einen Ausfluss der Galle in
den Interzellularraum und in das Blut verhindern (siehe
Abb. 98), als auch Desmosomen und kommunizierende
Verbindungen in Form von Gap Junctions. Mit dem
basalen Pol bilden die Leberzellen die Kommunika-
tionsregion für den Stoffaustausch mit dem Blut. Die
Lebersinus sind mit einem extrem dünnen, vielfach
durchlöcherten Endothel ausgekleidet. Durch die
zahlreichen großen und kleinen Poren (Pfeilköpfe)
kann Blutplasma aus dem Sinuslumen in den schmalen
Spaltraum zwischen Hepatozytenoberfläche und
Sinusendothel, den Disse’schen Raum, gelangen und
mit der basalen Hepatozytenoberfläche in direkten
Kontakt treten. Eine kontinuierliche Lamina basalis ist
nicht vorhanden. Die unruhige, mit zahlreichen
Mikrovilli besetzte basale Leberzelloberfläche spiegelt
die vielfachen hier stattfindenden Transportvorgänge.
Im Disse’schen Raum und zwischen den Hepatozyten
liegen spezielle Bindegewebszellen, die Ito Zellen oder
Fettspeicherzellen. Die Ito Zellen haben Fibroblasten-
Sekretorische Epithelien
funktion, produzieren extrazelluläre Matrix (EZM) ein-
schließlich Prokollagen, und EZM-abbauende Metallo-
proteinasen. Sie spielen eine wichtige Rolle beim Auf-
und Umbau der Matrix innerhalb der Leberläppchen.
Eine Ito Zelle ist im rechten oberen Bildsegment zwi-
schen 2 Hepatozyten zu sehen. Die zahlreichen Fett-
tröpfchen im Zytoplasma (Sterne) spiegeln die Funk-
tion dieser Zellen als Speicher fettlöslicher Vitamine. Ito
Zellen beinhalten einen hohen Prozentsatz des
gesamten, im Körper gespeicherten, Vitamin A und
spielen eine wichtige Rolle für die Aufrechterhaltung der
Vitamin A Homeostase. Unter pathologischen Bedin-
gungen aktiviert, können Ito Zellen zu Myofibroblasten
transformieren und Typ I Kollagen exprimieren. Sie
sind bei der Entstehung von Leberfibrosen und Leber-
zirrhose maßgeblich involviert.
Im Gegensatz zu den Ito Zellen, die außerhalb der
Sinus gelegen sind, sitzen die Kupffer’schen Sternzellen
mit ihrem voluminösen Zellkörper und den zahlreichen
Fortsetzen im Lumen der Sinusoide mitten im Blut-
strom. Der enge Kontakt mit dem Blut ist wichtig für
ihre Filterfunktion. Sie sind Phagozyten des unspezifi-
schen Abwehrsystems und befreien das Blut von unge-
wünschten Materialien, überalterten und umzubauen-
den Substanzen und schädigenden Stoffen. Durch ihre
bevorzugte Position mitten im Blutstrom können sie
mit zirkulierenden Substanzen in direkten Kontakt
treten. Die Abbildung zeigt eine typisch sternförmige
Kupfferzelle, die mit ihren Fortsätzen das sinusoidale
Lumen überbrückt. Über die Fortsätze ist sie mit dem
Sinusendothel in Kontakt und erreicht durch die Poren
den Disse’schen Raum.
Literatur
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late T cell response in rats. Liver Transpl 9: 489
Vergrößerung: x 9,400
Abbildung 97 197

Ito Zelle

* *
Kupffer'sche
Sternzelle Sinus

Endothel

Hepatozyten Disse'scher
Raum

Sinus
8
9
1 Sekretorische Epithelien
DAS LEBEREPITHEL – GALLEKANÄLCHEN
Die Leber ist das zentrale Stoffwechselorgan des Orga-
nismus und hat gleichzeitig die Funktion einer exokri-
nen und einer endokrinen Drüse. Das exokrine Sekret,
die Galle, gelangt in die Gallekanälchen, das endokrine
Sekret, zum Beispiel Lipoproteinpartikel und Gerin-
nungsfaktoren, wird direkt in das Blut abgegeben. Die
initialen Abschnitte des Gallengangsystems liegen als
feine Kanälchen zwischen den Leberepithelzellen (GK in
Abb. A und B). Ihre Wand wird von der apikalen Zell-
oberfläche der Hepatozyten gebildet.
Die Zeichnung illustriert den Verlauf der feinen, ver-
zweigten Gallekanälchen um die annähernd würfel-
förmigen Hepatozyten in einer Leberzellplatte. Die
lateralen Zelloberflächen kontaktieren die Nachbar-
zellen und die basalen Domänen sind zu den sinusoi-
dalen Kapillaren hin gerichtet (Sinusoid). Die weißen
Pfeile weisen auf die exokrinen Sekretionsdomänen, die
schwarzen Pfeile auf die Domänen für die endokrine
Sekretion. K – Kupffer’sche Sternzelle, Ito – Ito Zelle
(Fettspeicherzelle).
apikal GK
basal
Sinusoid
K Ito
Die Galle wird am apikalen Pol der Hepatozyten in
die engen Lumina der Gallekanälchen abgegeben. An
der Peripherie der Leberläppchen setzen sich die
Gallekanälchen in die Hering’schen Gänge fort, die aus
den Läppchen herausleiten und an der Grenze zum
Bindegewebe zu den größeren Gallengängen in den
Periportalfeldern konfluieren. Mit der Galle gelangen
Gallensäuren, Cholesterin, Phospholipide, konjugiertes
Bilirubin und Elektrolyte in das Lumen des Duode-
nums. Die Galle bewirkt die Emulierung der im Speise-
brei enthaltenen Fette und ist notwendig für den regu-
lären Ablauf der Lipidresorption im Dünndarm. Auch
werden über die Galle metabolisierte Arzneimittel und
Schwermetalle ausgeschieden und Immunglobulin A in
den Darm transportiert.
Die Wand der Gallekanälchen (GK) ist durch Mikro-
villi, die manchmal fast das ganze Lumen ausfüllen
(Abb. A), vergrößert. Das den Gallekanälchen benach-
barte Zytoplasma enthält dicht gepackt Membranen des
endoplasmatischen Retikulums, Stapel von Golgi Zister-
nen (Golgi) mit Lipoproteinpartikeln, Mitochondrien
(M), Peroxisomen (PO), Lysosomen und autophagische
Vakuolen (AV). Sekretgranula sind nicht zu sehen, da
der Export der Gallenbestandteile über ATP-abhängige
Pumpen erfolgt. Diese molekularen Transporter (ABC
Transporter) besetzen einen wesentlichen Teil der
apikalen Plasmamembran der Hepatozyten. Das Kanäl-
chenlumen ist gegenüber dem Interzellularraum durch
ein Abdichtungsband aus Tight Junctions (Pfeile in
Abb. B) versiegelt. Diese Zonula occludens verhindert,
dass Galle über den Interzellularraum in den
Disse’schen Raum und in das Lumen der Lebersinus
gelangt. Durch Defekte im Abdichtungssystem kann
sich Galle mit Blut mischen; die Folge ist das Entstehen
von Gelbsucht.
Literatur
Wolkoff AW, and Cohen DE (2003) Bile acid regulation of hepat-
ic physiology. I. Hepatocyte transport of bile acids. Am J Physiol-
Gastr L 284: G175
Vergrößerung: x 24,000 (A), x 32,500 (B)
Abbildung 98 199

Golgi
GK

PO
AV

GK
GK

B
200
DAS LEBEREPITHEL – LIPOPROTEINTRANSPORT
Die basale Zelloberfläche der Hepatozyten ist in direk-
tem Kontakt mit dem Blutplasma, das durch die Poren
in den Sinusendothelzellen in den Disse’schen Raum
gelangt (siehe Abb. 97). Zahlreiche Produkte der
Hepatozyten, Lipoproteinpartikel, Albumin und Plas-
maproteine für die Blutgerinnung, wie Prothrombin,
Fibrinogen und die Faktoren V, VII und IX, werden im
Sinn einer endokrinen Sekretion direkt in das Blut
abgegeben.
Lipoproteinpartikel (LPs) werden in den Hepato-
zyten im Lumen des endoplasmatischen Retikulums
(ER) zusammengesetzt und, nach Passage des Golgi
Apparats, mikrotubuliabhängig zu den basolateralen
Zelloberflächen transportiert. Die von den Leberzellen
gebildeten Lipoproteinpartikel mit einem Durchmesser
von 50–80nm gehören hauptsächlich zu der Klasse der
Very Low Density Lipoproteine (VLDLs). Auf Grund
ihres intensiven Kontrasts noch Fixierung in Osmium
sind sie im Elektronenmikroskop gut sichtbar und ihr
Weg vom Ort ihrer Bildung im ER (Abb. A) über den
Golgi Apparat (Abb. B) zu den Exozytoseregionen an
der basolateralen Zelloberfläche und ihrem extrazel-
lulären Ziel im Disse’schen Raum (Abb. C) kann gut
verfolgt werden. Abbildung A zeigt die Grenzregion
zwischen rauem (RER) und glattem (SER) endoplasma-
tischen Retikulum. In enger Nachbarschaft zu Mito-
chondrien (M), Peroxisomen (PO) und Glykogenpar-
tikeln (siehe auch Abb. 64) sind zahlreiche Anschnitte
von ER-Segmenten mit luminalen Lipoproteinpartikeln
(Pfeile) zu sehen. Ihre bevorzugte Lokalisation im
Grenzbereich von rauem und glattem endoplasmati-
Sekretorische Epithelien
schen Retikulum entspricht der Region im RER-SER-
Übergangsbereich, wo sie zusammengesetzt werden
(siehe auch Abb. 19).
LPs werden in den Golgi Apparat, wo die hauptsäch-
liche Glykosylierung der Proteine stattfindet, transpor-
tiert (Abb. B). Innerhalb des Golgi Apparats sind die LPs
in den dilatierten Abschnitten der Zisternen (Pfeile)
lokalisiert. Vesikel in Golgi Nähe, die LPs einzeln oder in
dicht gepackten Gruppen (Pfeil) enthalten, entsprechen
Transport Kompartimenten.
Vesikel, die LPs enthalten, sind auch zahlreich nahe
der basolateralen Plasmamembran der Hepatozyten
(Pfeile in Abb. C). Hier sind es jedoch ausschließlich
solche, die nur ein Lipoproteinpartikelchen beinhalten.
Die LPs gelangen über Exozytose in den Disse’schen
Raum und damit in das Blutplasma und über die Poren
in den Sinusendothelzellen in das Lumen der Sinus. LPs
im Disse’schen Raum sind mit Pfeilköpfen markiert. Im
Disse’schen Raum sind auch feine Kollagenfibrillen (C),
die ein lockeres Gitterfasernetzwerk um die Endothel-
zellen aufbauen, zu sehen. Eine kontinuierliche
Basallamina ist nicht vorhanden.
Literatur
Cenedella RJ, Crouthamel WG, and Mengolf HF (1974) Intestinal
versus hepatic contribution to circulating triglyceride levels.
Lipids: 35
Reaven EP, and Reaven GM (1980) Evidence that microtubules
play a permissive role in hepatocyte very low density lipoprotein
secretion. J Cell Biol 84: 28
Vergrößerung: x 33,800 (A), x 34,800 (B), x 26,500 (C)
Abbildung 99 201

Golgi
RER PO

PO

A B

C
Endothelzelle
Disse'scher Raum

Hepatozyt

C
202
PLEXUS CHOROIDEUS
Das die Gehirnventrikel und den Zentralkanal im
Rückenmark auskleidende Ependym besteht aus einer
einzelligen Lage einfacher iso- bis hochprismatischer
Zellen, die über Gürteldesmosomen in Verbindung
sind. Spezialisierte Ependymregionen existieren in der
Wand des 3. Ventrikels. Die dort lokalisierten Tanyzyten
sind mit Tight-Junction-Zonen barrierebildend und mit
langen Fortsätzen und Endfüßchen in Kontakt mit der
Wand der Blutgefäße.
Eine andere spezialisierte Form zeigt das Ependym
im Bereich der Plexus choroidei, die sich während der
Entwicklung an den Kontaktregionen mit den aus-
geprägt vaskularisierten Meningen im Bereich des
Dachs des 3. und des 4. Ventrikels und in den Wänden
der Seitenventrikel ausbilden. Hier differenzieren sich
die Ependymzellen zu Zellen mit sekretorischer und
resorptiver Funktion und bilden zusammen mit dem
lockeren Bindegewebe, das ein dichtes Netzwerk von
Blutgefäßen führt, die Areale der Plexus choroidei. In
den Plexus choroidei wird die Zerebrospinalflüssigkeit,
der Liquor cerebrospinalis (CSF – cerebrospinal fluid),
produziert. Der Liquor zirkuliert durch die Hirn-
ventrikel, den Zentralkanal und die Subarachnoidal-
räume und bildet um das zentrale Nervensystem herum
eine Mantelschicht, die Gehirn und Rückenmark vor
Stößen von außen schützt.
Die Abbildung zeigt Ausschnitte aus beiden, an der
Liquorproduktion maßgeblich beteiligten, Schichten
des Plexus choroideus, das Plexusependym und das
direkt darunter in enger Beziehung zur Basallamina
gelegene Kapillarnetz. Das Endothel der Kapillaren ist
fenestriert (Pfeilköpfe) und besitzt keine Tight
Junctions. Bei der Liquorproduktion wird in einem
ersten Schritt ein Ultrafiltrat des Blutes produziert und
gelangt in das umgebende Bindegewebe; im zweiten
Schritt wird das Ultrafiltrat im Plexusependym modi-
fiziert und in ein exkretorisches Produkt, den Liquor
cerebrospinalis, umgewandelt. Eine direkte Passage des
Sekretorische Epithelien
Ultrafiltrats in das Ventrikellumen wird durch das
Plexusependym verhindert. Die benachbarten Epen-
dymzellen sind ausgeprägt verzahnt und der Inter-
zellularraum ist durch Tight Junctions (Kreis), durch
die eine Barriere für den Liquor aufgebaut wird,
abgedichtet. Die Ependymzellen besitzen zahlreiche
Mitochondrien, dicht gepackt Membranen des endo-
plasmatische Retikulums und einen prominenten Golgi
Apparat. Das Plexusependym zeigt Charakteristika von
Epithelien, die in transzellulären Transport intensiv
eingebunden sind. Die Oberflächen beider Zelldomä-
nen, der apikalen und basolateralen, sind massiv ver-
größert, apikal durch einen Bürstensaum aus dicht
gepackten Mikrovilli und basal durch ausgeprägte inter-
digitierende Faltenbildungen. Die Komponenten des
Ultrafiltrates betreten die Zellen basolateral. Durch die
Na+, K+-ATPasen in den Mikrovillimembranen wird Na+
in den Extrazellularraum gepumpt. Das entstehende
osmotische Gefälle erleichtert den Transport von Wasser
in das Ventrikellumen. Auch in Endozytoseprozesse ist
die sehr unruhige, apikale Mikrovillioberfläche der
Ependymzellen, eingebunden. Wie in anderen Organen
(siehe Abb. 103) wird auch in den Plexusependymzellen
der Endozytoserezeptor Megalin exprimiert.
Zellen des Immunsystems, die nicht nur unter
pathologischen Bedingungen, sondern auch im Liquor
gesunder Personen zu finden sind, scheinen die
Meningen und die Plexus choroidei zu passieren.
Literatur
Christensen E, and Birn H (2002) Megalin and cubilin: multi-
functional endocytic receptors. Nat Rev Mol Cell Biol 3: 258
Kivisäkk P, Mahad DJ, Callahan MK, Trebst C, Tucky B, Wei T,
Wu L, Baekkevold ES, Lassmann H, Staugaitis SM, Campbell JJ,
and Ransohoff RM (2003) Human cerebrospinal fluid central
memory CD4+T cells: Evidence for trafficking through choroids
plexus and meninges via P-selectin. Proc Natl Acad Sci USA 100:
8389
Vergrößerung: x 11,000
Abbildung 100 203

Plexus choroideus
204
DAS RESORBIERENDE DÜNNDARMEPITHEL
Die Ultrastruktur der resorbierenden Epithelzellen
(Saumzellen), die in einer einzelligen Lage die Dünn-
darmzotten überziehen, reflektiert ihre Hauptaufgabe
bei der Resorption der aufgenommenen Nahrungs-
stoffe. Die Abbildungen A und B zeigen eine Übersicht
und einen Ausschnitt aus dem apikalen Bereich von
Saumzellen mit dem prominenten Bürstensaum (B) aus
dicht gepackten und sehr regelmäßigen Mikrovilli. Die
zahlreichen Mikrovilli führen zu einer immensen
Vergrößerung der apikalen Oberfläche der resorbieren-
den Zellen. Jede Saumzelle besitzt ungefähr 3000
Mikrovilli. Sie enthalten ein filamentöses Zentrum aus
gebündelten Aktinfilamenten, die mit Fimbrin und
Villin vernetzt sind und über Myosin I and Calmodulin
mit der Plasmamembran in Verbindung stehen. Die
Filamentbündel setzen sich in Wurzelstrukturen, die in
das Terminalgespinst (TG, Terminales Netzwerk) unter-
halb des Bürstensaums einstrahlen, fort. Verbunden mit
Spektrin und Zytokeratin Intermediärfilamenten sind
sie Teil des apikalen Zytoskeletts, das für die aufrechte
Stellung der Mikrovilli und ihre Organisation im
Bürstensaum zuständig ist (siehe auch Abb. 68).
Aktinfilamente des terminalen Netzwerks sind mit dem
Gürteldesmosom im mittleren Teil der apikalen
Haftkomplexe (2 in Abb. B; siehe auch Abb. 77) assozi-
iert. Durch diese Verbindungen wird im apikalen
Zellpol ein zellübergreifendes Stütz- und Bewegungs-
system aufgebaut, das Kippbewegungen der Mikrovilli
im Bürstensaum ermöglicht. Der Kontakt mit den in die
Zellen aufzunehmenden Substanzen wird dadurch
begünstigt und die Resorption erleichtert.
An der luminalen Zelloberfläche ist die Plasma-
membran mit 10nm besonders dick. Die Membran ist
in Abbildung B, die einen Ausschnitt aus dem Bürsten-
saum von Dünndarmepithelzellen der Ratte zeigt, als
deutlich 3-lamelläre Struktur, bedeckt mit dem feinen
filamentösen Netzwerk, der Glykokalyx (siehe auch
Abb. 74), erkennbar. Die Glykokalyx ist als distinkte
Schicht in der Darstellung einer Saumzelle aus dem
menschlichen Dünndarm in Abbildung A besonders gut
zu sehen. Im Bürstensaum wird der Verdauungsprozess
abgeschlossen. In der Plasmamembran lokalisierte
Enzyme bewirken die abschließende Zerlegung von
Oligosascchariden und Oligopeptiden. Die Produkte,
Aminosäuren, Di- und Tripeptide und Zucker werden
über spezifische Membrankanäle und Transportsysteme
durch die Plasmamembran transportiert. Fettsäuren
und Monoglyzeride diffundieren in die Mikrovilli.
Resorptive Epithelien
Die Bürstensaumenzyme und andere Membran-
komponenten werden laufend erneuert. Die neusyn-
thetisierten Membranbestandteile werden zwischen den
Mikrovilli in die Plasmamembran eingesetzt. Nur diese
Areale der apikalen Plasmamembran sind für Fusions-
prozesse zugänglich. Von hier reichen Membranin-
vaginationen tief in das Terminalgespinst. Entsprechen-
de Membranprofile sind in Abbildung B links und
rechts neben dem Haftkomplex, ebenso in Abbil-
dung 68A und besonders schön in Flachschnitten in den
Abbildungen 68D und 77B zwischen den filamentösen
Wurzeln der Mikrovilli zu sehen. Diese Membranareale
unterscheiden sich in ihren Mikrodomänen von den
Mikrovillimembranen und werden als Membranre-
servoir für Anpassungsvorgänge an der apikalen Zell-
oberfläche angesehen.
In Abbildung A ist der gesamte apikale Zellbereich
einer Saumzelle aus dem menschlichen Dünndarm-
epithel mit zahlreichen Mitochondrien und Lysosomen
(Ly) und dem Golgi Apparat in typischer Position nahe
dem Zellkern (Golgi) zu sehen. Ein distinkt polarer
Aufbau der Saumzellen mit apikalen und basolateralen
Plasmamembranarealen ist für ihre Funktion unbedingt
notwendig. Die Polarität wird durch die Tight-Junction-
Zone im obersten Bereich der die Zellen verbindenden
Haftkomplexe bestimmt. Links im Bild und in Abbil-
dung B stärker vergrößert ist ein Haftkomplex mit der
Zonula occludens (1), der Zonula adhaerens (2) und
einer Macula adhaerens (3) dargestellt (siehe auch Abb.
77). Abbildung C zeigt eine etwas weiter basal gelegene
Region der lateralen Zelloberfläche, wo die benach-
barten Zellen ausgeprägte Zell-Zell Verzahnungen
bilden (siehe auch Abb. 80).
Literatur
Affleck JA, Helliwell PA, and Kellett GL (2003) Immuno-
cytochemical detection of GLUT2 at the rat intestinal brush-bor-
der membrane. J Histochem Cytochem 51: 1567
Hansen GH, Pedersen J, Niels-Christiansen L, Immerdal L, and
Danielsen EM (2003) Deep-apical tubules: dynamic lipid-raft
microdomains in the brush-border region of enterocytes.
Biochem J 373: 125
Louvard D, Kedinger M, and Hauri HP (1992) The differentiating
intestinal epithelial cell: establishment and maintenance of func-
tions through interactions between cellular structures. Annu Rev
Cell Biol 8: 157
Sanco E, Batlle E, Clevers H (2003) Live and let die in the intes-
tinal epithelium. Curr Opin Cell Biol 15: 763
Vergrößerung: x 9,000 (A), x 57,000 (B), x 57,000 (C)
Abbildung 101 205

TG

1
Ly
Ly
2

Golgi
B

A C
206
DÜNNDARMEPITHEL – LIPOPROTEINTRANSPORT
In den resorbierenden Dünndarmepithelzellen (Saum-
zellen, Enterozyten) passieren die Endprodukte der mit
der Nahrung aufgenommenen und im Lumen des
Verdauungstrakts abgebauten Nahrungsbestandteile das
Darmepithel. Nach Aufnahme an der apikalen Ober-
fläche und spezifischer Verarbeitung in den Zellen er-
folgt der Export der Produkte in den Interzellularraum
und das Bindegewebe an der basolateralen Zellober-
fläche. Von dort wird über Blut- und Lymphgefäße ab-
und weitertransportiert. Spezielle Wege nehmen die
Lipide, deren trans- und extrazellulärer Transport im
Elektronenmikroskop gut nachvollziehbar ist.
Im Darmlumen werden die Produkte der Lipid-
verdauung gemeinsam mit Gallesalzen in gemischte
Mizellen verpackt, die mit dem Bürstensaums direkt in
Kontakt treten. Durch die Kippbewegungen der
Mikrovilli wir der Kontakt mit den Mizellen begünstigt.
Aus den Mizellen freigesetzte freie Fettsäuren und
Monoglyzeride diffundieren in die Mikrovilli und
verbinden sich mit fettsäurebindenden Proteinen, mit
deren Hilfe sie in das apikale Zytoplasma gelangen. Dort
werden im glatten endoplasmatischen Retikulum (ER)
Triglyzeride und andere Lipide resynthetisiert und an
den Übergangsregionen von glattem zu rauem ER in
Lipoproteinpartikel (LPs) gepackt. Nach Weitertrans-
port erfolgt in den Golgi Zisternen die hauptsächliche
Glykosylierung, die Verpackung in Transportvesikel und
der Transport zur basolateralen Zelloberfläche. Die LPs
gelangen über Exozytose in den Interzellularraum (IZR)
und von dort in die Lamina propria der Darmschleim-
haut. Besonders voluminöse Lipoproteinpartikel, die
Chylomikronen, entstehen während der postprandialen
Lipidabsorption, doch werden in den resorbierenden
Dünndarmepithelzellen auch unabhängig von der
Nahrungsaufnahme und im Hungerzustand kleine 50-
80nm messende Lipoproteinpartikel (VLDLs – very low
density lipoprotein particles) gebildet, deren Lipide
hauptsächlich aus der Galle und abgeschilferten Zellen
stammen.
Die Abbildungen A–D zeigen die intrazellulären (A)
und extrazellulären (B–D) Wege der kleinen intestinalen
VLDLs in der Darmschleimhaut einer Ratte im Hunger-
zustand. VLDL-Partikel sind in allen Kompartimenten
der intrazellulären Sekretionswege zu finden. Besonders
Resorptive Epithelien
auffällig sind sie in den dilatierten Zisternen des Golgi
Apparats (Abb. A, Pfeile) und in großen Transport-
vesikeln (Abb. A, links neben dem Golgi Stapel).
Extrazellulär sind VLDLs in den dilatierten Abschnitten
der Interzellularräume (Abb. B, IZR) zwischen den
Verzahnungsarealen auffällig (Pfeilköpfe in Abb. B).
Abbildung C zeigt Lipoproteinpartikel akkumuliert im
lockeren Bindegewebe der Lamina propria (Pfeilköpfe
in Abb. C). Von dort werden sie hauptsächlich über das
Lymphgefäßsystem abtransportiert. Abbildung D zeigt
einen Ausschnitt aus einer Lymphkapillare in der
Lamina propria der Darmschleimhaut einer Ratte nach
intravenöser Verabreichung von Peroxidase. Die zahlrei-
chen großen und kleinen Lipoproteinpartikel im Lumen
(Pfeilköpfe) erscheinen durch das elektronendichte
Reaktionsprodukt, das im Rahmen der Peroxidase-
reaktion durch Oxidation von Diaminobenzidin ein-
steht, negativ gefärbt hell vor dunklem Hintergrund. In
den Lumina der Blutkapillaren (Abb. C) sind keine LPs
zu sehen.
Literatur
Ikeda I, Mitsui K, Matsuoka R, Hamada T, Imabayashi S, Uchino
A, Yamada K, and Imaizumi K (2003) Cholesterol esterase bound
to intestinal brush border membranes does not accelerate incor-
poration of micellar cholesterol into absorptive cells. Biosci
Biotechnol Biochem 67: 2381
Jones AL, and Ockner RK (1971) An electron microscopic study
of endogenous very low density lipoprotein production in the
intestine of rat and man. J Lipid Res 12: 580
Marcil V, Delvin E, Seidman E, Poitras L, Zoltowska M, Garofalo
C, and Levy E (2002) Modulation of lipid synthesis, apolipopro-
tein biogenesis, and lipoprotein assembly by butyrate. Am J
Physiol Gastrointest Liver Physiol 283: G340
Pavelka M, and Gangl A (1983) Effects of colchicine on the intes-
tinal transport of endogenous lipid. Ultrastructural, biochemical,
and radiochemical studies in fasting rats. Gastroenterology 84:
544
Pepper MS, and Skobe M (2003) Lymphatic endothelium: mor-
phological, molecular and functional properties. J Cell Biol 163:
209
Siddiqi SA, Gorelick FG, Mahan JT, and Mansbach CM (2002)
COPII proteins are required for Golgi fusion but not for endo-
plasmic reticulum budding of the pre-chylomicron transport
vesicle. J Cell Sci 116: 415
Vergrößerung: x 33,500 (A), x 28,000 (B), x 18,300 (C),
x 36,500 (D)
Abbildung 102 207

Golgi

IZR

Lymphkapillare

Blut-
kapillare

C D
208
PROXIMALE TUBULI DER NIERE : MODIFIKATION DES PRIMÄRHARNS
Das von den Glomeruli der Nieren generierte Plasma
Ultrafiltrat, der Primärharn, wird entlang der Nieren-
tubuli modifiziert, so dass täglich von etwa 180 Litern
Primärharn zirka 1,5 Liter endgültiger Harn aus-
geschieden werden. In den proximalen Tubuli werden
annähernd 70% des Wassers, die gesamte Glukose,
Ionen, Vitamine, kleine Eiweiße, Arzneimittel und
andere Substanzen reabsorbiert und entweder lysoso-
mal abgebaut oder in das Blut zurückgebracht.
Die Feinstruktur der proximalen Tubulusepithelien
widerspiegelt ihre Funktion. Der apikale Bürstensaum
dient der Absorption und das basale Labyrinth von
Membranen (siehe Abb. 81) der Exkretion. Beide
Membranspezialisierungen führen zu einer enormen
Oberflächenvergrößerung, die für den transzellulären,
durch Rezeptoren und Transporter der Plasma-
membran vermittelten Transport von Wichtigkeit ist.
Aufgrund des unterschiedlichen Gehalts der apikalen
und der basolateralen Plasmamembran an solchen
funktionellen Eiweißen besteht eine epitheliale Asym-
metrie. Neben der transzellulären Route existiert noch
ein parazellulärer Weg, über den Wasser und Ionen
transportiert werden, da sie die Tight Junctions über
Osmose passieren können.
Eine besondere Spezialisierung der proximalen
Tubulusepithelien besteht im apikalen endozytotischen
Apparat, der den Großteil des apikalen Zytoplasmas
erfüllt (Abb. A und B). Er besteht aus endozytotischen
Vesikeln (Pfeil in Abb. A) und Tubuli (Pfeilköpfe in Abb.
B). Die ausgeprägte Glykokalyx dieser Strukturen ist
durch eine ihren Elektronenkontrast verstärkende
Chemikalie hervorgehoben worden. Verschiedenste
Substanzen, die über rezeptorvermittelte Endozytose
durch die zwischen den Mikrovilli gelegenen Coated Pits
internalisiert werden, gelangen in den endozytotischen
Apparat und von hier in die Lysosomen. Die Tubuli des
endozytotischen Apparats sind für das Membran-
Rezyklieren verantwortlich.
In den proximalen Tubuli befinden sich zwei
wichtige Rezeptoren für die Endozytose: das Megalin
und das Kubilin. In Abbildung C ist Megalin mittels
Immungoldmarkierung im Bürstensaum und dem
apikalen endozytotischen Apparat nachgewiesen. Die
laterale Plasmamembran (PM) ist nicht markiert.
Megalin wurde ursprünglich als das Heymann-
Resorptive Epithelien
Nephritis Antigen gp330 identifiziert. Es ist in vielen
anderen Zelltypen und Organen nachgewiesen worden,
wie den Typ II Pneumozyten, dem Innenohr, der Schild-
drüse und dem Plexus chorioideus. Megalin ist ein
Mitglied der Low-Density-Lipoprotein Rezeptorfamilie
und ein Typ I Membranglykoprotein mit einer Masse
von über 600 kDa. Es unterscheidet sich vom Kubilin,
welches ein 460 kDa peripheres Membranprotein ist.
Beide Rezeptormoleküle bilden Komplexe und haben
jedes eine große extrazelluläre Domäne, die Liganden
bindet. Da Megalin eine große Zahl unterschiedlichster
Liganden bindet, ist es auch mit einem Staubsauger oder
Lumpensammler verglichen worden. Es ist bedeutend
für die Vitaminhomeostase, da es mindestens drei vita-
minbindende Eiweiße (Transcobalmin-Vitamin B12,
Retinol-bindendes Protein, Vitamin D-bindendes
Protein) bindet. Verschiedene Trägerproteine (Albumin,
Laktoferrin, Transerythrin, etc.), Enzyme und Enzym-
hemmer sind Liganden des Megalins. Stark basisch
geladene Arzneimittel wie Aprotinin, Polymyxin B und
Aminoglykoside wie das Gentamycin werden durch die
Bindung an das Megalin reabsorbiert und akkumulieren
in den Lysosomen der proximalen Tubuli. Darin
begründet sich die Nephrotoxizität von Polymyxin B
und Gentamycin.
Literatur
Christensen E, and Birn H (2002) Megalin and cubilin: multi-
functional endocytic receptors. Nat Rev Molec Cell Biol 3: 258
Christensen EI, and Willnow TE (1999) Essential role of megalin
in renal proximal tubule for vitamin homeostasis. J Am Soc
Nephrol 10: 2224
Farquhar MG, Saito A, Kerjaschki D, and Orlando RA (1995) The
Heymann nephritis antigenic complex: Megalin (gp330) and
RAP. J Am Soc Nephrol 6: 35
Kerjaschki D, and Farquhar MG (1982) The pathogenic antigen
of Heymann nephritis is a membrane glycoprotein of the renal
proximal tubule brush border. Proc Natl Acad Sci USA 79: 5557
Moestrup SK, Cui SY, Vorum H, Bregengard C, Bjorn SE,
Norris K, Gliemann J, and Christensen EI (1995) Evidence that
epithelial glycoprotein 330/megalin mediates uptake of polybasic
drugs. J Clin Invest 96: 1404
Orlando RA, Rader K, Authier F, Yamazaki H, Posner BI,
Bergeron JJM, and Farquhar MG (1998) Megalin is an endocytic
receptor for insulin. J Am Soc Nephrol 9: 1759
Vergrößerung: x 20,000 (A); x 50,500(B); x 45,000 (C)
Abbildung 103 209

Bürstensaum

Nukleus
A B

Megalin

Bürstensaum

PM M
C
210
DER EINFLUSS VON PARATHORMON AUF DIE PROXIMALEN TUBULI
Entsprechend ihrer wichtigen Funktion im Wasser- und
Elekrolythaushalt des Körpers müssen sich die
Epithelien der proximalen Tubuli den fortwährend
wechselnden Ansprüchen anpassen. Besonders auf-
schlussreich hierfür sind Experimente an Tieren, die
speziellen Diäten unterworfen wurden oder mit
Hormonen, die den Wasser- und Elektrolythaushalt re-
gulieren, behandelt wurden. Als ein Beispiel für adaptive
Veränderung soll die Phosphationen Reabsorption
durch die proximalen Tubuli dienen.
Phosphationen (Pi) passieren die Glomeruli und
werden zu etwa 80% aus dem Primärharn in den pro-
ximalen Tubuli reabsorbiert. Die Reabsorption erfolgt
über den Bürstensaum und erfordert die Anwesenheit
von Natriumionen (Na). Es existieren drei Typen von
Na/Pi Ko-Transportern, von denen der Na/Pi Ko-
Transporter NaPi-IIa der wichtigste für die Phosphat-
reabsorption in den proximalen Tubuli ist. Es handelt
sich um eine polytopes Membranglykoprotein, das aus
acht transmembranären, vier extrazellulären und drei
intrazellulären Schleifen besteht. Die intrazelluläre
Schleife 1 und die extrazelluläre Schleife 3 sind in den
Na/Pi Ko-Transport involviert. Der NaPi-IIa Ko-
Transporter befindet sich im Bürstensaum der pro-
ximalen Tubuli und die hier vorhandene Menge des Ko-
Transporters bestimmt, wieviel Phosphat reabsorbiert
werden kann. Der NaPi-IIa Ko-Transporter wird unter
dem Einfluss von Parathormon rasch herunterreguliert,
was zur Hemmung der tubulären Reabsorption von
Phosphat führt. Mittels quantitativer Elektronen-
mikroskopie und Immungoldmarkierung wurden die
Vorgänge des Parathormon-induzierten Verschwindens
der NaPi-IIa Ko-Transporter analysiert und sind teil-
weise in den Abbildungen A (Kontrollsituation) und B
(nach Gabe von Parathormon) illustriert. Unter dem
Einfluss des Parathormons kam es zu einer starken
Reduktion der Mikrovilli des Bürstensaums der pro-
ximalen Tubuli, was immunelektronenmikroskopisch
mit einem fast vollständigen Verlust der Markierung für
den NaPi-IIa Ko-Transporter einherging. Gleichzeitig
vergrößerte sich der apikale endozytotische Apparat
infolge der Endozytose von Anteilen der apikalen
Plasmamembran (vergleiche die vertikalen Markie-
rungslinien in Abb. A und B). Insbesondere trat eine
Resorptive Epithelien
Vermehrung der Tubuli ein. Die Membranverlagerun-
gen waren mit einer Umverlagerung der Markierung für
den NaPi-IIa Ko-Transporter in den apikalen endozyto-
tischen Apparat verbunden. Die NaPi-IIa Ko-Trans-
porter befanden sich allerdings nur transient im
endozytotischen Apparat und wurden anschließend in
Lysosomen abgebaut. Der Transport des NaPi-IIa
Ko-Transporters in die Lysosomen war abhängig von
einer Taxol-empfindlichen Umverteilung der Mikro-
tubuli von apikal nach basal.
Mit Phosphatverlust einhergehende vererbbare
Erkrankungen des Menschen sind mit einer Vermin-
derung der NaPi-IIa Ko-Transporter verbunden, die
offenbar durch erhöhte Serumspiegel des Fibroblasten
Wachstumsfaktors 23 bedingt sind.
M: Mitochondrien.
Literatur
Beck L, Karaplis A, Amizuka N, Hewson A, Ozawa H, and et al
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Internalization of proximal tubular type-II Na/Pi-cotransporter
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study. Am J Physiol Renal Physiol 278: F148
Vergrößerung: x 42,000 (A, B)
Abbildung 104 211

M M

Nukleus

A B
212
DIE PHOTOREZEPTOREN DER RETINA : UMWANDLUNG VON LICHTQUANTEN
IN ELEKTRISCHE SIGNALE
Die Photorezeptoren sind Teil der inneren sensorischen
Retina und werden durch Lichteinfall aktiviert. Es
existieren zwei Typen von Photorezeptoren, die in spe-
zifischen Regionen der Retina vorkommen. Die Stäb-
chen-Photorezeptoren liegen in der Peripherie der
Retina und sind für das Schwarz/Weiß Sehen bei ge-
ringer Lichtintensität (Dämmerungssehen) verant-
wortlich. Die Zäpfchen Photorezeptoren hingegen
befinden sich in den zentral gelegenen Anteilen der
Retina und sind für das Farbsehen bei hellem Licht
zuständig. Es existieren drei Typen von Zäpfchen
Photorezeptoren, welche die Unterscheidung von Blau,
Grün und Rot ermöglichen.
Beide Typen von Photorezeptoren sind längliche,
hoch polarisierte Neuronen, die aus einem supranukleär
gelegenen inneren und äußeren Segment bestehen.
Infranukleär befindet sich die synaptische Region, durch
die der Kontakt mit Interneuronen hergestellt wird,
welche die Licht-induzierten elektrischen Signale zu den
Ganglienzellen der Retina übertragen. Die Grenze zwi-
schen dem inneren und äußeren Segment eines Stäb-
chen Photorezeptors ist im Hauptbild durch offene
Pfeile markiert und bei starker Vergrößerung im
Nebenbild zu sehen. Die inneren Segmente enthalten
zahlreiche sehr lange Mitochondrien zusätzlich zum
endoplasmatischen Retikulum und dem Golgi Apparat.
Innere und äußere Segmente sind über ein modi-
fiziertes Zilium (9+0 Symmetrie) miteinander verbun-
den, wie im Nebenbild illustriert (Stern). Die äußeren
Segmente enhalten Stapel von geschlossenen
Membranscheiben, auch Disks genannt (Details in Abb.
106A), die das lichtempfindliche Photopigment
Rhodopsin enthalten. Die Synthese der Scheiben-
bestandteile geschieht in den inneren Segmenten, von
wo sie durch die enge Zytoplasmaregion beim
Verbindungszilium in das äußere Segment gelangen.
Die Scheiben selber werden durch Einstülpungen der
Plasmamembran des Verbindungsstücks gebildet, die
sich von ihr abschnüren. Das Rhodopsin der Scheiben
ist ein hochspezialisierter G-Protein-gekoppelter Re-
zeptor und ein polytopes Membranprotein, das von
Lichtquanten aktiviert wird. Die zwei N-Glykane des
Rhodopsins sind für seine Fähigkeit zur Signalüber-
mittlung notwendig. Jedes Rhodopsinmolekül besteht
aus dem Opsin Apoprotein, das kovalent gebundenes
Chromophor 11-cis Retinal enthält. Letzteres ent-
Sensorische Epithelien
stammt dem Vitamin A1. Durch Absorption von Licht
wird das 11-cis-Retinal unmittelbar zu all-trans-Retinal
photoisomerisiert, was zu einer Konformations-
änderung des Rhodopsins führt. Hieran schließt sich
eine Signalkaskade an, die letztlich zum Schließen der
Na+-Kanäle und zur Hyperpolarisierung der Plasma-
membran führt.
Die apikalen Enden der äußeren Segmente der
Stäbchen und Zäpfchen Rezeptoren sind in das Pig-
mentepithel eingebettet, das Melaningranula enthält,
die überschüssiges Licht absorbieren und somit seine
Reflektion verhindern. Zwischen den Photorezeptoren
und dem Pigmentepithel liegt eine beide Zelltypen
verbindende Matrixsubstanz. Die Retinaablösung ist die
Folge der Trennung der beiden Zellschichten und kann
zur Erblindung führen. Im Zusammenhang mit Abbil-
dung 105 wird die spezielle Funktion des Pigment-
epithels für die äußeren Segmente besprochen werden.
Es übt eine Ernährungsfunktion für die Retina aus und
spielt zudem eine essentielle Rolle bei der Regeneration
des Rhodopsins. Durch Lichtexposition gebleichtes
Rhodopsin zerfällt in Opsin und all-trans-Retinal. Das
all-trans-Retinal wird reduziert, zum Pigmentepithel
transportiert, enzymatisch oxidiert und zu 11-cis-
Retinal re-isomerisiert. Der Transport der Chromo-
phore vom Pigmentepithel zurück in die Photo-
rezeptoren geschieht mittels des interstitiellen Retinoid-
bindenden Proteins.
Literatur
Borhan B, Souto M, Imai H, Shichida Y, and Nakanishi K (2000)
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Wald G (1968) The molecular basis of visual excitation. Science
162: 230
Vergrößerung: x 8,200; x 65,000 (Nebenbild)
Abbildung 105 213

Endothel

Pigmentepithel

äusseres Segment

inneres Segment

inneres
Segment
214
UMSATZ VON PHOTOREZEPTOREN UND LICHT-INDUZIERTE APOPTOSE
Photorezeptoren sind hochspezialisierte, differenzierte
Zellen, die sich nicht mehr teilen können. Jedoch kann
an ihnen ein außergewöhnliches Phänomen beobachtet
werden. Es besteht darin, dass Teile der lichtempfind-
lichen äußeren Segmente kontinuierlich erneuert wer-
den, während der restliche Anteil der Zellen relativ sta-
bil bleibt.
In Abbildung A und dem zugehörigen Nebenbild
sind die feinstrukturellen Details eines äußeren
Segments gezeigt. Es besteht aus parallel angeordneten,
dicht gepackten Membranen, welche die Scheiben
bilden. Die Scheiben sind von der umgebenden
Plasmamembran getrennt (Nebenbild in Abb. A). Der
extrazelluläre Raum zwischen dem apikalen Ende des
äußeren Segments ist von Ausläufern der Pigment-
epithelien erfüllt. Mittels Histoautoradiographie wurde
die intrazelluläre Wanderung metabolisch markierter
Proteine sichtbar gemacht. Sie konnten zunächst im
Golgi Apparat der inneren Segmente nachgewiesen wer-
den und von dort auf ihrem Weg über sich neu bildende
Scheiben an der Basis der äußeren Segmente bis in die
Scheiben der Segmentenden verfolgt werden. Die Schei-
ben enthaltenden Spitzen der äußeren Segmente schnü-
ren sich letztlich ab und werden vom Pigmentepithel
phagozytiert und abgebaut. Auf diese Weise werden
kontinuierlich große Mengen von Photorezeptor
Scheiben durch das Pigmentepithel abgebaut und
rezykliert. Die Erneuerung der äußeren Segmente ist
reguliert und folgt einem zirkadianen Rhythmus.
Entsprechend ihrer unterschiedlichen Funktion werden
Anteile der Zäpfchen Photorezeptoren unmittelbar nach
Lichteinfall phagozytiert, während die Phagozytose der
Stäbchen Photorezeptoren erst mit dem Eintreten der
Dämmerung beginnt.
Die phagozytotische Aktivität des Pigmentepithels
ist naturgemäß auch von großer Bedeutung bei sich
abrupt ändernden Lichtintensitäten, Licht-induzierten
Schädigungen und der Apoptose von Photorezeptoren.
Abbildung B zeigt eindrücklich die Veränderungen an
äußeren Segmenten von Stäbchen der Retina von
Albinoratten nach akuter starker Lichtexposition (bis zu
1000 lx für 2 Stunden). Sie bestehen in der Auflösung
der geordneten Strukturen. Bei noch stärkerer Licht-
Sensorische Epithelien
exposition tritt Photorezeptor Apoptose ein, die vor-
zugsweise durch weißes Licht und andererseits durch
blaues Licht verursacht werden kann. Auch die Menge
vorhandenen Rhodopsins ist für das Eintreten der
Licht-induzierten Apoptose von Bedetung. Bei fort-
bestehender Lichtexposition kommt es schließlich auch
zur Apoptose des Pigmentepithels. Somit kann es im
Gefolge andauernder intensiver Lichtexposition zur
Degeneration der Retina kommen. Experimente mit
Mäusen haben gezeigt, dass zwei unterschiedliche
Vorgänge bei der Licht-induzierten Retinadegeneration
ablaufen. Durch helles Licht verursachte Apoptose
erfordert die Aktivierung von Rhodopsin und ist unab-
hängig vom Transduzin-vermittelten Signalweg. Durch
schwache Lichtintensitäten ausgelöste Apoptose ist
hingegen abhängig vom Transduzin-vermittelten
Signalweg.
Literatur
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apoptosis: differential timing in the retina and pigment epitheli-
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Young R (1976) Visual cells and the concept of renewal. Invest
Ophthalmol 15: 700
Vergrößerung: x 35,000 (A); x 73,000 (Nebenbild); x 36,000 (B)
Abbildung 106 215

B
216
DAS RIECHEPITHEL
Das Riechepithel in der Regio olfactoria der Nasenhöhle
ist das sensorische Organ für die hoch sensible Geruchs-
rezeption. Es enthält, eingebettet in hochprismatische
Stützzellen, die bipolaren sensorischen Neuronen, deren
periphere dendritische Fortsätze die charakteristischen
Riechkolben bilden. Die Neuriten (Axonen) werden
nach Verlassen des Epithels von Schwannzellen umhüllt
und ziehen als Fila olfactoria zu spezifischen Synapsen-
regionen im Bulbus olfactorius. Vorläuferzellen der
Neuronen und der Stützzellen liegen als kleine runde
und horizontal ausgerichtete Zellen an der Basis des
Epithels. Auch existieren mindestens zwei verschiedene
Typen spezieller Epithelzellen mit regelmäßigen Mikro-
villi. Zum Teil werden ihnen sensorische Eigenschaften
zugeordnet, zum Teil sind sie vergleichbar mit Bürsten-
zellen (siehe Abb. 73), und zum Teil eingebunden in
Transportprozesse für den Aufbau eines optimalen
Ionenmilieus an der Epitheloberfläche.
Des Riechepithel zeigt in allen Vertebraten einen
bemerkenswert ähnlichen Aufbau. Ausschnitte aus dem
Riechepithel der Maus sind in den Abbildungen A und
B im Dünnschnitt und in Abbildung C in einer Gefrier-
ätzpräparation zu sehen. Abbildung A zeigt den apikalen
Bereich des Epithels, in dem die dendritischen Fortsätze
dreier Rezeptorneuronen mit den zilientragenden
Riechkolben besonders auffällig sind. Die Neuronen
sind über Haftkomplexe aus Tight Junctions, Zonulae
und Maculae adhaerentes in Verbindung mit den
Stützzellen (SZ), in denen das terminale Netzwerk als
helle Zone ganz apikal gelegen und abgesetzt vom dich-
ten Zytoplasma mit zahlreichen Mitochondrien und
endoplasmatischen Membrankonvoluten deutlich sicht-
bar ist. Die Pfeilköpfe im Gefrierbruchabdruck in
Abbildung C weisen auf die parallel gereihten Ver-
schmelzungsstege im breiten Band der Zonula occlu-
dens hin (siehe Abb. 77, 78). Die knöpfchenartigen
Auftreibungen der Riechkolben mit den langen Zilien,
in denen die Rezeptormoleküle in der Plasmamembran
lokalisiert sind, überragen die Epitheloberfläche. Sie
sind von den zahlreichen unregelmäßige Fortsätzen der
Stützzellen, die an der apikalen Oberfläche des Epithels
ein dichtes Geflecht bilden, umgeben. Zilien und
Stützzellfortsätze schwimmen im Sekret der
Bowman’schen Drüsen, die im subepithelialen
Bindegewebe liegen und mit kurzen Ausführungs-
Sensorische Epithelien
gängen an der Epitheloberfläche münden. Im Zyto-
plasma der Riechkolben sind die Basalkörper und die
Ansatzregionen der Zilien besonders prominent. Die
langen, peitschenförmigen Zilien besitzen breite
Ansatzstellen (Pfeile in Abb. C) und eine, für Zilien ty-
pische, 9-malige Anordnung von Mikrotubulidoubletten
mit 2 zentralen Mikrotubuli in den proximalen Be-
reichen, ebenso wie halskettenförmig angeordnete
Plasmamembranpartikel (Abb. C), wie sie auch in den
Zilien der Flimmerzellen vorkommen. Die Mikrotubuli-
doubletten fehlen in den sich stark verjüngenden dista-
len Segmenten der Zilien (siehe Querschnitte in Abb. B);
die Mikrotubuli liegen hier einzeln und ungeordnet.
Die Überführung chemischer Stimuli in neuronale
Signale findet durch Bindung der Geruchstoffe an
spezische Rezeptoren in der Plasmamembran der Zilien
statt. Im olfaktorischen System der Säugetiere werden
Duftstoffe durch eine große Familie von Rezeptoren
detektiert, doch wird in einem individuellen Neuron
nur eines von 1000 Rezeptorgenen exprimiert. Die je-
weils einen bestimmten Rezeptor tragenden Neuronen
sind im olfaktorischen Epithel weit verstreut, doch kon-
vergieren ihre Axonen zu präzisen Arealen im Bulbus
olfactorius. Die Rezeptoren sind nicht nur in den den-
dritischen Riechkolben und in den Perikarya innerhalb
des Epithels, sondern auch im Bereich der Axon-
terminalregionen im Bulbus olfactorius nachweisbar.
Literatur
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1192
Vergrößerung: x 16,500 (A); x 39,000 (B); x 35,000 (C)
Abbildung 107 217

SZ SZ

B C
218
DAS VORDERE HORNHAUTEPITHEL
Das geschichtete Epithel an der Vorderseite der Horn-
haut ist ein Teil der korneo-skleralen Hülle, die den
äußeren Mantel des Augapfels bildet, die Organe im
Inneren schützt und, gemeinsam mit dem Druck durch
das Kammerwasser, das Auge in Form hält. Die vordere
Oberfläche der Hornhaut wird von einem mehr-
schichtigen Epithel überzogen.
Das vordere Hornhautepithel zeigt alle Charakteris-
tika eines einfachen geschichteten Plattenepithels mit
5–7 Zelllagen. Die Basalzellenschicht besteht aus hohen
polygonalen Zellen, die der Basallamina aufsitzen und
mit ihr und der benachbarten Bowman’schen Schicht
über Hemidesmosomen verbunden sind (siehe auch
Abb. 129). Zahlreiche Desmosomen heften die Zellen
aneinender. Sie sind mit dicken Intermediärfilament-
bündeln (Tonofilamenten), die ein intrazelluläres stabi-
lisierendes Trabekelwerk aufbauen, in Verbindung. Die
weiten Interzellularräume zwischen den Basalzellen
werden durch feine Interzellularbrücken, in die Tono-
filamente einstrahlen, überspannt.
Die Bowman’sche Schicht, die im untersten Teil des
Bildes zu sehen ist, entspricht dem vordersten Teil des
Kornealstromas. Das Hornhautepithel wird laufend
erneuert. Die Basalzellen sind mitotisch sehr aktiv und
ersetzen die sich abschilfernden Oberflächenzellen. Die
Hornhaut besitzt eine große Wundheilungsfähigkeit.
Die Zellen verändern ihre Form Hand in Hand
gehend mit der Differenzierung und Wanderung zur
Epitheloberfläche. Sie werden zunehmend platter. Die
oberflächlichen „Pflasterzellen“ sind besonders reich an
Zytokeratinfilamenten. Sie schützen die darunter gele-
genen Zellen vor Einwirkungen von außen. Ihre apikale
Plasmamembran mit feinen Mikrovilli wird von einem
Plattenepithelien
dünnen Schutzfilm aus Tränenflüssigkeit, der durch den
Lidschlag gleichmäßig verteilt wird und die Epithel-
oberfläche kontinuierlich feucht hält, überzogen.
Beimengungen schleimiger Komponenten halten die
Oberfläche während des Lidschlags gleitfähig, stabili-
sieren den Tränenfilm, verhindern die Austrocknung
des darunterliegenden Gewebes und bilden eine
schützende Barriere gegenüber schädigenden Substan-
zen.
Eine Barriere, die das Hornhautgewebe gegenüber
wasserlöslichen Substanzen undurchlässig macht, wird
durch Tight Junctions in der oberflächlichen Zelllage
aufgebaut. Tight Junctions bilden sich während der
Differenzierung von den basalen zu den superfizialen
Schichten aus und können nach Abschilferung der ober-
flächlichen Zellen binnen einer Stunde regenerieren.
Für die Aufrechterhaltung der Durchsichtigkeit der
Hornhaut ist eine präzise Regulierung des Wassergehalts
notwendig (siehe auch Abb. 128). Dabei spielen Aqua-
porine im Hornhautepithel und Hornhautendothel
(Abb. 84) eine wichtige Rolle.
Literatur
Argüeso P, and Gipson IK (2001) Epithelial mucins of the ocular
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Vergrößerung: x 4,300
Abbildung 108 219

Oberflächenzellen

Basalzellenschicht
220
DIE EPIDERMIS
Das geschichtete verhornte Plattenepithel der Epidermis
bildet die äußerste Schicht der Haut und schützt den
Körper gegenüber Einflüssen von außen, mechanischen
Einwirkungen, Strahlen, Chemikalien und Mikroorga-
nismen. Das Epithel erneuert sich laufend und differen-
ziert sich von den zuinnerst gelegenen germinativen
Schichten, wo sich die Zellen mitotisch teilen, zur Epi-
dermisoberfläche hin Hand in Hand gehend mit dem
Verhornungsprozess und der Ausbildung einer Flüssig-
keitsbarriere, die vor Austrocknung des Körpers schützt
und Voraussetzung für das terrestrische Leben ist (siehe
Abb. 110). Diese Barriere besteht aus 3 Hauptkompo-
nenten, den terminal differenzierten Zellen mit ihrer
speziellen Umhüllung, einer extrazellulären Lipid-
schicht und Tight Junctions. Die meisten Epidermis-
zellen sind Keratinozyten, die entsprechend ihrer
Funktion in 4 Schichten (strata) organisiert sind. Die
Epidermis bedeckt das Bindegewebe der Haut, die Der-
mis, die im untersten Abschnitt des Bildes zu sehen ist.
Die polygonalen Zellen der Basalschicht (stratum
basale) sitzen der Basallamina auf. Sie enthalten
hochkonzentriert Zytokeratin Intermediärfilamente
von den Keratin Typen 5 und 14, die als dichte Tono-
filamente (Abb. 69 und 85) im Zytoplasma der Keratino-
zyten zu erkennen sind. Sie sind mit den Desmosomen,
die die benachbarten Zellen aneinanderheften, und mit
den Hemidesmosomen, die die basalen Zellabschnitte in
der Basalmembran verankern, in Verbindung. Die
Basalmembran (siehe Abb. 85) bildet eine Grenzschicht
zwischen Epidermis und Dermis.
Im der Dornenzellschicht (stratum spinosum) sind
die Tonofilamente besonders prominent und strahlen in
die Desmosomen im Bereich der Interzellularbrücken,
die sich über die weiten Interzellularräume spannen
und sie überbrücken, ein. Im Lichtmikroskop erschei-
nen die Interzellularbrücken als dornenförmige Fort-
sätze der Zellen; davon leitet sich die Bezeichnung der
Schicht ab. Die Zellen der Basal- und der Dornen-
zellschicht enthalten zahlreiche Melaningranula (siehe
auch Abb. 85), die als besonders dichte Einschlüsse im
Zytoplasma zu erkennen sind (Pfeile). Melanin wird in
den Melanozyten (M) mit Hilfe des Enzyms Tyrosinase
durch Oxidation von Tyrosin zu 3,4-Dihydroxy-
phenylalanin gebildet, in Prä-Melanosomen gespeichert
und weiter in Melanin, das in den Melanosomen
Plattenepithelien
akkumuliert, umgewandelt. Melanozyten stammen aus
der Neuralleiste und wandern sekundär in die
Epidermis ein. Sie besiedeln die basalen Zelllagen und
bilden zahlreiche lange Fortsätze. Melanosomentransfer
in die Keratinozyten erfolgt durch Endozytose der
Spitzen der Fortsätze, ein Prozess, der als zytokrine
Sekretion bezeichnet wird. Ein Melanozyt versorgt in
der funktionellen Melanineinheit ungefähr 36
Keratinozyten. In der Abbildung ist ein Melanozyt (M)
zwischen den Basalzellen zu sehen. In Abbildung 85 sind
zwischen den Keratinozyten zahlreiche Melanozyten-
fortsätze zu erkennen (Sterne).
Die dritte Schicht der Epidermis wird auf Grund der
auffälligen Keratohyalingranula, die im Zytoplasma der
Keratinozyten vermehrt sichtbar werden, als Körner-
schicht (stratum granulosum) bezeichnet. Die Zellen
werden am Übergang vom Stratum spinosum zum
Stratum granulosum platt. Noch immer sind sie über
zahlreiche Desmosomen verbunden, aber auch Tight
Junctions, die eine wichtige Komponente der Flüssig-
keitsbarriere als Schutz gegen das Austrocknen des
Körpers aufbauen, werden in dieser Schicht gebildet.
Die Hornschicht (stratum corneum) besteht im tie-
feren Teil aus den sich transformierenden Keratinozyten
(siehe auch Abb. 110). In der extrem dicken Epidermis
an den Handflächen und Fußsohlen erscheint diese
Schicht als hell leuchtendes Stratum lucidum. Die
äußerste Lage der Hornschicht wird von den terminal
differenzierten Keratinozyten mit ihrer komplexen
zusammengesetzten Oberflächenumhüllung gebildet
(siehe Abb. 110). In ihnen sind Kern und Zellorganellen
nicht mehr erkennbar.
Literatur
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function of the skin: how to keep a tight lid on water loss. Trends
Cell Biol 12: 355
Vergrößerung: x 6,100
Abbildung 109 221

Stratum
corneum

Stratum
granulosum

Stratum
spinosum

Stratum
basale

Dermis
222
DIFFERENZIERUNG DER KERATINOZYTEN UND AUSBILDUNG DER FLÜSSIGKEITSBARRIERE IN
DER EPIDERMIS
Im Verlauf ihres Weges von den basalen Schichten zur
Oberfläche durchlaufen die Keratinozyten ein spezifi-
sches Differenzierungsprogramm, das zu charakteristi-
schen Transformationen der Zellen und letztendlich zu
ihrem Tod führt. Die abgestorbenen Zellen bilden, in
ihren Sekreten eingebettet und versiegelt, die unlösliche
und flüssigkeitsundurchlässige oberflächliche Horn-
schicht der Epidermis.
Abbildung A zeigt Keratinozyten im Stratum spin-
osum mit dicken Tonofilamentbündeln, die in die dor-
nenförmigen Interzellularbrücken und in die Plaques
der Fleckdesmosomen einstrahlen. Die Intermediär-
filament Keratine vom Typ 5 und 14 in den basalen
Keratinozyten werden im Verlauf ihrer Differenzierung
und Wanderung durch das Stratum spinosum zum
Stratum granulosum durch die Keratine 1 und 10 und
letztlich durch Keratine vom Typ 2e und 9 ersetzt. Im
Nebenbild sind 2 Fleckdesmosomen stärker vergrößert
zu sehen. Es sind sowohl die besonders dichten Plaques
und die dichte interzelluläre Vernetzungszone, wo durch
die Verbindung der extrazellulären Domänen der
Cadherine die Nachbarzellen aneinander haften (siehe
Abb. 79), gut erkennbar. Die den Maculae adhaerantes
direkt benachbarten dichten Netzwerke entsprechen
den gebündelten Tonofilamenten, die haarnadelförmig
in die Desmosomenplaques einstrahlen und dort ver-
ankert sind.
In Abbildung B ist ein Ausschnitt aus der Körner-
schicht (Stratum granulosum) und der Übergangs-
bereich zur Hornschicht (Stratum corneum) dargestellt.
Das Stratum granulosum ist durch die besonders
prominenten Keratohyalingranula (KG) charakterisiert.
Sie enthalten das Protein Filaggrin und sind mit den
Keratin Tonofilamenten (Pfeilköpfe), die ihrerseits in
den Desmosomen (Pfeile) verankert sind, verbunden.
Die Keratinozyten der Körnerschicht wandeln sich in
einem stufenweisen Prozess in die abgeflachten ver-
hornten Zellen, die in ihrer Gesamtheit die Hornschicht
aufbauen, um. Hand in Hand gehend werden Kerne und
Zellorganellen abgebaut und es beginnt ein Prozess, der
zu Veränderungen an der Plasmamembran und zur
Ausbildung einer speziellen Schicht unterhalb der
Plasmamembran führt. Bestandteile dieser speziellen
Plattenepithelien
Zellhülle der verhornenden Zellen sind Keratin-
Filaggrin-Komplexe, Involukrin und die Plakinproteine
Envoplakin und Periplakin. Die Hülle wird durch den
Einbau zusätzlicher Strukturproteine verstärkt.
Während dieser Vorgänge werden die Zellen permeabel,
durch Ca2+-Einstrom werden Transglutaminidasen
aktiviert und es kommt zu einer irreversiblen Ver-
netzung beteiligter Proteine, sodass an der Innenseite
der Plasmamembran ein kontinuierlicher gerüstbilden-
der Überzug (Pfeilköpfe in Abb. C) entsteht. Im
Zytoplasma der Keratinozyten sind in der Körnerschicht
zahlreiche Lamellenkörperchen (Odland bodies; Pfeile
in Abb. C) zu sehen. Ihr glykolipidhältiger Inhalt mit
Azylglukosylceramid wird in den Interzellularraum se-
zerniert (Sterne) und bindet an Involukrin. Es entsteht
damit eine komplexe, zusammengesetzte Zellhülle, die
den barrierebildenden Eigenschaften der Hornschicht
der Epidermis zugrunde liegt. In Abbildung C sind
beide Teile, das lipidhältige, multilamellär erscheinende
Sekret im Interzellularraum und die dichte kompakte
Zelloberfläche gut zu erkennen (Sterne und Pfeilköpfe).
Veränderungsprozesse in der Zellhülle spielen sich
auch noch dann ab, wenn die Zellen nicht mehr tran-
skriptorisch aktiv sind. Auch ultrastrukturell sind
Zellveränderungen von den inneren zu den äußeren
Lagen in der Hornschicht deutlich zu sehen (Abb. B).
Die oberflächlichsten Zellen werden kontinuierlich
abgeschilfert. Dabei werden die Desmosomen aus-
geschaltet. In Abbildung B sind in der Hornschicht die
veränderten Desmosomen gut erkennbar.
Literatur
Doering T, Holleran WM, Potratz A, Vielhaber A, Elias PM,
Suzuki K, and Sandhoff K (1999) Sphingolipid activator proteins
are required for epidermal permeability barrier formation. J Biol
Chem 274: 11038
Furuse M, Hata M, Furuse K, Yoshida Y, Haratake A, Sugitani Y,
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tions are crucial for the mammalian epidermal barrier: a lesson
from claudin-1-deficient mice. J Cell Biol 156: 1099
Segre J (2003) Complex redundancy to build a simple epidermal
permeability barrier. Curr Opin Cell Biol 15: 778
Vergrößerung: x 21,00 (A); x 74,000 (Nebenbild); x 60,000 (B);
x 10,000 (C)
Abbildung 110 223

Stratum spinosum

Tonofilament

Stratum corneum
* *

KG
B C
224 Epithelien der Atemwege und Kinoziliendyskinesien
DAS TRACHEOBRONCHIALEPITHEL
Die oberen Abschnitte der Atemwege dienen der
Luftleitung, wobei die Atemluft während ihrer Passage
erwärmt und befeuchtet wird und von Schmutz-
partikeln befreit wird. Das auskleidende respiratorische
Epithel besteht aus vier verschiedenen Zelltypen, von
denen die zwei erstgenannten in Abbildung A gezeigt
sind: (1) den zylindrischen Flimmerzellen, die zahl-
reiche Kinozilien aufweisen, die dem Transport des
Schleims und inhalierter Partikeln dienen; (2) den
Becherzellen (Sterne), die einzellige schleimprodu-
zierende Drüsen darstellen; (3) den disseminierten
neuroendokrinen Zellen (auch Kultschinsky-Zellen
genannt) und (4) den Basalzellen, die als Stammzellen
für die Regeneration des Epithels verantwortlich sind.
Die Kinozilien der Flimmerzellen sind 4–6 µm lange,
bewegliche Ausstülpungen des Zytoplasmas (Abb. A).
Ihre Grundstruktur ist das Axonem (AX in Abb. B), das
aus Mikrotubuli besteht und von der Plasmamembran
umgeben ist (Abb. B bis D und Zeichnung). Das Axo-
nem setzt sich aus einem zentralen Paar von Mikro-
tubuli (C in der Zeichnung) und neun peripher gelege-
nen Mikrotubulipaaren zusammen, der sogenannten
9+2 Anordnung. Die peripheren Mikrotubulipaare
bestehen aus einem kompletten Mikrotubulus, dem
A-Mikrotubulus aus 13 Protofilamenten und einem
unvollständigen Mikrotubulus, dem B-Mikrotubulus
aus 10 Protofilamenten. Im Bereich des freien Endes der
Zilien weisen die Axonema neun einzelne periphere
Mikrotubuli und ein zentrales Paar auf (Abb. D).
Die 9+2 Anordnung der Mikrotubuli wird durch
akzessorische Proteine stabilisiert. Von den A-Mikro-
tubuli gehen radiale Speichen in Richtung des zentralen
C Cytoskeleton 32: 114
S motility: current studies of arm structure and activity pattern.
I M
O A N
B x 94,000 (E)
Mikrotubuluspaares aus (S in der Zeichnung). Sie sind
in die Umwandlung der Gleitbewegung der Zilien in
eine Schlagbewegung einbezogen. Die peripheren
Mikrotubulipaare sind über Nexinfilamente (N in der
Zeichnung) miteinander verbunden, die auch für die
Aufrechterhaltung der Axonemstruktur während der
Gleitbewegung wichtig sind. Von den A-Mikrotubuli
gehen Paare von Dyneinarmen aus (O und I in der
Zeichnung). Es handelt sich bei ihnen um Mikrotubuli-
assoziierte ATP-asen, die eine wichtige Rolle beim
Gleiten der Mikrotubuli spielen. Im Gefolge der ATP-
Hydrolyse durch Dynein gleiten die Mikrotubulipaare
aneinander vorbei und bewirken so das Biegen der
Kinozilien. Beides, die Gleitbewegung und das Biegen
sind die Grundlage für die Kinozilienbewegung. Sie
besteht aus einem schnellen Vorwärtsschlag und einer
langsamen peitschenartigen Rückwärtsbewegung. Alle
Kinozilien schlagen leicht phasenversetzt in der gleichen
Richtung und bewegen die Schleimschicht und in ihr
enthaltene Partikel in Richtung Kehlkopf. Das Fehlen
der äußeren Dyneinarme geht mit einer verlangsamten
Kinozilienbewegung einher.
Die Axonema sind an den Basalkörpern (BK in Abb.
B) verankert, die aus neun Mikrotubulitriplets bestehen
(Abb. E). Die Basalkörper stellen modifizierte Zen-
triolen dar, die als Schablone für die Bildung der
äußeren Mikrotubulipaare dienen. Die distalen Enden
der Basalkörper weisen Wurzelfäden auf (R in Abb. B).
Zwischen den Zilien befinden sich kurze verzweigte
Mikrovilli-artige Plasmamembranausstülpungen (Abb. A,
MV in Abb. B).
M: Mitochondrien.
Literatur
Goodenough UW, and Heuser JE (1985) Substructure of inner
dynein arms, radial spokes, and the central pair/projection com-
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Satir P (1988) Dynein as a microtubule translocator in ciliary
Cell Motil Cytoskeleton 10: 263
Sleigh MA, Blake JR, and Liron N (1988) The propulsion of
mucus by cilia. Am Rev Respir Dis 137: 726
Vergrößerung: x 6,000 (A); x 25,000 (B); x 60,500 (C); x 68,000 (D);
Abbildung 111 225

Kinozilien

*
*
A

AX

MV

BK

B R C E
226 Epithelien der Atemwege und Kinoziliendyskinesien
DIE PATHOLOGIE DER KINOZILIEN
Chronische Atemwegserkrankungen können durch
Funktionsbeeinträchtigungen oder das Fehlen der
Kinozilien verursacht sein. Sie werden als das Syndrom
der unbeweglichen Kinozilien oder als ziliäre Dyskinesie
bezeichnet und schließen das Kartagener-Syndrom ein.
Die Folgen sind eine beeinträchtigte Reinigung der
Atemwege mit Schleimstau und Entzündungen. Die
ziliäre Dyskinesie ist ein heterogenes Krankheitsbild, das
mit einer Vielzahl ultrastruktureller Abweichungen der
Kinozilien vergesellschaftet ist. Jedoch ist es nicht immer
möglich, eine Beziehung zwischen Funktionsstörung
und abnormer Feinstruktur herzustellen, da strukturell
völlig normal erscheinende immotile oder dysmotile
Kinozilien vorkommen können.
Abbildung A zeigt die Extremsituation eines fast
vollständigen Fehlens der Kinozilien. Der Pfeil in Abbil-
dung B weist auf eine einzelne Kinozilie. Stattdessen
finden sich vermehrt Mikrovilli-artige Fortsätze (MV in
Abb. A und B) und gelegentlich unregelmäßig angeord-
nete Basalkörper-ähnliche Strukturen (Pfeilköpfe in
Abb. A). Häufiger zu beobachtende Kinoziliendefekte
bestehen in: (a) Verlust oder Verminderung der Zahl der
inneren und äußeren Dyneinarme, (b) Fehlen entweder
der äußeren oder der inneren Dyneinarme, (c) Ver-
kürzung der äußeren Dyneinarme und Fehlen der inne-
ren (Abb. C), (d) Speichendefekte wie völliges Fehlen
oder vereinzelt fehlende Speichenköpfe, (e) Abnormali-
täten der äußeren Mikrotubulipaare wie Verlust eines
Mikrotubulus (Abb. D), (f) fehlendes zentrales Mikro-
tubuluspaar und damit verbundene Transposition eines
peripheren Mikrotubuluspaars (oberes Axonem in
Abb. E), (g) überzählige zentrale Mikrotubulipaare
(oberes Axonem in Abb. F), (h) oder Fehlen des zentra-
len Mikrotubuluspaars (oberes Axonem in Abb. G).
Üblicherweise besteht eine gute Korrelation zwischen
Kinozilien- und Spermienmotilität, so dass die gleichen
ultrastrukturellen Veränderungen in beiden Zelltypen
beim selben Patienten beobachtet werden können.
Das Kartagener-Syndrom ist ein ist durch Dynein-
mangel verursachter Subtyp der ziliären Dyskinesie.
Klinisch besteht ein Situs inversus, Bronchiektasen und
chronische Sinusitis. Der Zusammenhang zwischen zi-
liärer Dyskinesie und Situs inversus ist schleierhaft.
Möglicherweise besteht eine Funktionsstörung der
Monozilien während der frühen Embryonalent-
wicklung. Monozilien an embryonalen Zellen, ins-
besondere des Primitivknotens, drehen sich schnell im
Uhrzeigersinn und scheinen für die Ausbildung der
Links-Rechts Körperasymmetrie wichtig zu sein. Bei
einer Funktionsstörung wie Dysmotilität oder Immo-
tilität besteht eine fünfzigprozentige Wahrscheinlichkeit
für die Ausbildung eines Situs inversus.
Das Syndrom immotiler Kinozilien stellt eine auto-
somal rezessive erbliche Belastung dar. Da viele axone-
male Proteine betroffen sind, sind unterschiedliche
Gene mutiert. Das Fehlen der äußeren Dyneinarme ist
durch Mutationen im Gen für die Intermediärketten des
Dyneins auf Chromosom 9p13-p21 verursacht.
Literatur
Afzelius B, Mossberg B, and Bergström S (2001) Immotile cilia
syndrome (primary ciliary dyskinesia), including Kartagener syn-
drome. In: The metabolic and molecular bases of inherited dis-
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McGraw-Hill, pp 4817
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Jorissen M, and Cassiman J (1991) Relevance of the ciliary ultra-
structure in primary and secondary ciliary dyskinesia: a review.
Am J Rhinol 5: 91
Pennarun G, Escudier E, Chapelin C, Bridoux AM, Cacheux V,
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Supp DM, Potter SS, and Brueckner M (2000) Molecular motors:
the driving force behind mammalian left-right development.
Trends Cell Biol 10: 41
Vergrößerung: x 13,000 (A, B); x 121,000 (C); x 125,000 (D);
x 110,000 (E); x 101,000 (F); x 67,000 (G)
Abbildung 112 227

MV

A C

MV

B D

E F G
228
DIE ALVEOLEN : GASAUSTAUSCH UND ABWEHRSYSTEM
Die Alveolen sind die Endabschnitte der Atemwege und
dienen primär dem Gasaustausch. In der menschlichen
Lunge bilden sie eine etwa 75 m2 große Oberfläche für
den Austausch von Sauerstoff und Kohlendioxid zwi-
schen der Atemluft und dem Blut, der über passive
Diffusion geschieht. Der in den Gasaustausch einbezo-
gene Teil des Alveolarseptums ist in Abbildungen A
und B gezeigt und besteht aus (1) einer dünnwandigen
kontinuierlichen Kapillare, (2) einer von Endothelien
und Typ I Alveolarepithelien (Pneumozyten) synthe-
tisierten doppelten Basalmembran (BM in Abb. B), (3)
den dünnen Zytoplasmaausläufern der Typ I Alveolar-
epithelien, und (4) den Erythrozyten. Die flach ausgezo-
genen Typ I Alveolarepithelien stellen etwa 40% der
Alveolarzellpopulation dar und überziehen annähernd
90% der Alveolaroberfläche. Die in den Alveolarnischen
gelegenen kuboidalen Typ II Alveolarepithelien bede-
cken nur 10% der Alveolaroberfläche (Abb. C). Sie sind
indirekt in den Gasaustausch einbezogen, da sie den
Surfactant produzieren, der aus Phospholipiden,
Cholesterin und Eiweißen besteht. Die Surfactant
Phospholipide, insbesondere das Dipalmitoylphosphat-
idylcholin, reduzieren die Oberflächenspannung in den
Alveolen und verhindern ihren Kollaps. Der Surfactant
ist in speziellen Sekretgranula, den Lamellenkörperchen
(LK in Abb. C und D), gespeichert und wird in das
Alveolarlumen sezerniert, wie in Abbildung D zu sehen.
Der Inhalt der Lamellenkörperchen besteht aus
konzentrischen und parallelen Anordnungen von
Phospholipiden. Die sezernierten Phospholipide des
Surfactant bilden einen Monolayer (Pfeile in Abb. D) an
der Luft-Flüssigkeitsgrenze. Zwischen ihm und den
Alveolarzellen befindet sich die wässrige Hypophase, die
tubuläres Myelin (Stern) als Speicherform der
Surfactant Phospholipide und Surfactant Proteine
enthält. Sowohl die Typ I als auch die Typ II
Alveolarepithelien sind in den Ionen- und Wasser-
transport einbezogen und somit wichtig für die
Homöostase der Hypophase.
Die Surfactant Proteine B und C sind nicht nur für den
Aufbau der Lamellenkörperchen und des tubulären Mye-
lins wichtig, sondern auch für die Bildung eines stabilen
Surfactant Monolayers. Angeborener Mangel an Surfactant
Protein B führt zu schwerem, tödlich verlaufendem
Respiratory-Distress-Syndrom des Neugeborenen.
Epithelien der Atemwege und Kinoziliendyskinesien
Die Surfactant Proteine A und D haben primär
Abwehrfunktionen, wobei das erstere zusätzlich für den
Stoffwechsel der Surfactant Phospholipide wichtig ist.
Beide gehören der Familie der Collectine an, die an
ihrem C-Terminus eine C-Typ Lektindomäne besitzen,
die mit Glykanen von Bakterien (beispielsweise Gruppe
B Streptokokken, Pseudomonas aeruginosa), Viren
(bspw. Respiratory Syncitial Virus, Haemophilus
influenzae), Pilzen und Mykobakterien reagieren. Die
durch die Surfactant Proteine opsonisierten Pathogene
werden dann von Lungenmakrophagen und Monozyten
phagozytiert. Zum anderen haben die Surfactant
Proteine A und D eine direkte antimikrobielle Wirkung
auf Gram-negative Bakterien, indem sie deren Wachs-
tum hemmen.
Die Typ II Alveolarepithelien sind die Stammzellen
des Alveolarepithels und somit die Vorläufer der Typ I
Alveolarepithelien und für die Reparation nach
Lungenschädigung zuständig.
M: Mitochondrium.
Literatur
Crouch E, and Wright JR (2001) Surfactant proteins A and D and
pulmonary host defense. Annu Rev Physiol 63: 521
Dietl P, and Haller T (2005) Exocytosis of lung surfactant: from
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tal respiratory in multiple kindreds. J Clin Invest 93: 1860
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growth of Gram-negative bacteria by increasing membrane per-
meability. J Clin Invest 111: 1589
Vergrößerung: x 2,200 (A); x 48,000 (B); x 10,200 (C); x 36,000 (D)
Abbildung 113 229

Alveole

Typ I Pneumozyt
Kapillare
Erythrozyt

Typ II
Pneumozyt
Typ I
Erythrozyt Typ I Pneumozyt Alveole
Aveolus

A BM
Endothel
B Erythrozyt

LK
MLB
M
Alveole
Aveolus

Hypophase

LK
MLB

Typ II Pneumozyt
*

LK

Endothel LK
MLB

C D
230
DIE DECKZELLEN – OBERFLÄCHENDIFFERENZIERUNGEN
Alle Abschnitte der harnableitenden Wege, Nieren-
becken, Ureteren, Harnblase und proximale Abschnitte
der Harnröhre, sind von einem ausschließlich hier vor-
kommenden Epithel, dem Übergangsepithel oder
Urothel, überzogen. Das Urothel ist ein spezielles
geschichtetes Epithel, in dem die Basalzellen und die
benachbarten Intermediärzellen von großen, sehr volu-
minösen oberflächlichen Deckzellen wie von einem
Schirm überspannt und bedeckt werden. Davon leitet
sich auch die in der englischen Literatur übliche
Bezeichnung „Umbrella Cells“ ab. Die Deckzellen sind
lumenbildend und für die spezifischen Urotheleigen-
schaften mit dem Aufbau einer wasserundurchlässigen
Barriere, die die Passage von Ionen und Metaboliten
verhindert, verantwortlich. In der Harnblase passt sich
das Urothel den zyklischen Veränderungen des Lumens
und den Änderungen der Druckverhältnisse bei Füllung
und Entleerung an. Die spezifischen Funktionen der
Deckzellen spiegeln sich in den charakteristischen
apikalen Membranspezialisierungen, die auch im
Elektronenmikroskop sichtbar sind.
Die Übersichtsaufnahme in Abbildung A zeigt ein
Segment aus dem Mäuseurothel mit den wenig differen-
zierten basalen Zellen im unteren Bildbereich, benach-
barten Intermediärzellen im Zentrum und einer
Deckzelle im oberen Bildteil. Die im Transmissions-
elektronenmikroskop sichtbare runzelige apikale
Oberfläche (Abb. A) ist in den Abbildungen B und C in
einer rastermikroskopischen Aufnahme zu sehen. Die
Pfeile innerhalb des Rechtecks in Abbildung B weisen
auf die Zellgrenzen zwischen den benachbarten Zellen.
Das runzelige, faltige Aussehen der apikalen Zell-
oberfläche, auf das in Abbildung B durch Pfeilköpfe
innerhalb des Kreises hingewiesen wird, kommt durch
höhlen- oder schüsselförmige Einkerbungen der Ober-
fläche zustande (Abb. C). Eine noch stärkere Ver-
größerung zeigt das Nebenbild in Abbindung C. Die
Kämme und Mikrofalten, die die Einkerbungen begren-
zen, entsprechen den Scharnierregionen, wo die Wand
der Einkerbungen beweglich ist und gefaltet werden
kann. Die anderen Teile der Wand sind nicht faltbar, da
sie fast vollständig mit Plaques besetzt sind. Die Plaques
bestehen aus zweidimensional organisierten Kristall-
strukturen, die sich aus dicht gepackten hexagonalen
16 nm Uroplakin (UP) Partikeln zusammensetzen
Das Urothel
(siehe Zeichnung zu Abb. 115). Zur Uroplakinfamilie
gehören mindestens 5 Proteine, die 4fach die Membran
durchspannenden UPIa und UPIb Proteine und die Typ I
Proteine UPII, UPIIIa und UPIIIb.
Morphologisch sind die Plaqueareale durch eine
deutliche Asymmetrie (AUM – asymmetric unit mem-
brane) gekennzeichnet, wie das im Nebenbild zu
Abbildung A zu sehen ist. Durch die besondere Form
und Lokalisation der Uroplakin Partikel innerhalb der
Membran (siehe Zeichnung zu Abb. 115), erscheint das
äußere Blatt der Plasmamembran etwa doppelt so dick,
wie das innere Blatt. Die Plaques bilden einen wesent-
lichen Teil des Urothel Barrieresystems. Auch ist die
runzelige Oberflächenarchitektur Ausdruck der Zell-
dynamik, die im Rahmen der zyklischen Veränderungen
durch Füllen und Entleeren der harnableitenden
Organe, notwendig ist. Die oberflächlichen schüssel-
förmigen Einkerbungen sind in ihren Abmessungen mit
den fusiformen Membranvesikeln im Zytoplasma der
Deckzellen (siehe Abb. 115) vergleichbar. Durch
Vesikelfusion mit der luminalen Plasmamembran kann
die Oberfläche der Deckzellen bei der Anpassung an
eine vermehrte Füllung vergrößert werden. Im Zentrum
von Abbildung C stoßen drei Zellen aneinander. Die
Zellgrenzen sind als feine Linien deutlich erkennbar.
Hier sind die Zellen durch Haftkomplexe verbunden.
Literatur
Apodaca G (2004) The uroepithelium: Not just a passive barrier.
Traffic 5: 117
Hu P, Meyers S, Liang FX, Deng FM, Kachar B, Zeidel M, and Sun
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function: uroplakin ablation elevates urothelial permeability. Am
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mouse urinary bladder development. Anat Rec 235: 533
Min G, Zhou G, Schapira M, Sun T-T, and Kong X-P (2003)
Structural basis of urothelial permeability barrier function as
revealed by cryo-EM studies of the 16 nm uroplakin particle.
J Cell Sci 116: 4987
Truschel ST, Ruiz WG, Shulman T, Pilewski J, Sun TT, Zeidel ML,
and Apodaca G (1999) Primary uroepithelial cultures: a model
system to analyse umbrella cell barrier function. J Biol Chem 274:
15020
Veranic P, Romih R, and Jezernik K (2004) What determines
differentiation of urothelial umbrella cells? Eur J Cell Biol 83: 27
Vergrößerung: x 3,500 (A); x 193,000 (Nebenbild); x 3,700 (B);
x 5,200 (C); x 10,000 (Nebenbild)
Abbildung 114 231

Deckzelle

B C
232
DIE FUSIFORMEN VESIKEL IN DEN DECKZELLEN
Uroplakin Plaques (siehe Abb. 114) sind nicht auf die
apikale Plasmamembran der Deckzellen beschränkt,
sondern sind auch Bestandteil der Membranen der
fusiformen Vesikel, die im apikalen Zytoplasma der
Deckzellen sehr zahlreich sind (Abb. A) und die mit den
Anpassungsprozessen der Deckzelloberfläche beim
Füllen und Entleeren der Harnblase in Zusammenhang
gebracht werden. Fusiforme Vesikel liegen als einzelne
Vesikel oder in Gruppen gestapelt und in enger
Verbindung mit dem Zytoskelett und einem speziellen
Netzwerk aus Zytokeratin Filamenten im apikalen
Zytoplasma, oft in unmittelbarer Nähe zur apikalen
Plasmamembran. Die Abbildungen A und B zeigen
fusiforme Vesikel in Urotheldeckzellen der Maus in
einem Dünnschnitt (Abb. A) und einem Gefrierbruch-
abdruck (Abb. B). Unter starker Vergrößerung ist die
durch die Uroplakin Partikel hervorgerufene Asymme-
trie der Vesikelmembran deutlich erkennbar. Sie
entspricht dem Bild der asymmetrischen Membran in
den Plaques der apikalen Plasmamembran (Abb. 114A,
Nebenbild). Für die Darstellung der Partikel in den
Uroplakin Plaqueregionen der Deckzellmembranen
eignen sich besonders gut Gefrierbruchpräparationen.
Abbildung B zeigt das an Hand eines Gefrierbruch-
abdrucks aus dem apikalen Deckzellzytoplasma. Die
Membranen fusiformer Vesikel sind mit zahlreichen
Partikeln in dicht gepackter Aufstellung besetzt
(Pfeilköpfe).
Fusiforme Vesikel scheinen im Golgi Apparat
gebildet zu werden. Sie werden zur apikalen Plasma-
membran der Deckzellen transportiert und im Rahmen
der Anpassung des Urothels an den luminalen Füllungs-
zustand in die Membran eingebaut. Zunehmende
Füllung der Blase stimuliert die Fusion der Vesikel mit
der Plasmamembran, wodurch sich die luminale
Oberfläche der Deckzellen vergrößert. Die Exozytose
der fusiformen Vesikel scheint mit Endozytose gekop-
pelt zu sein und der Reservepool nach Entleerung der
Blase sowohl durch Endozytose, als auch Vesikelneu-
bildung wieder aufgebaut zu werden.
In der Zeichnung werden die Charakteristika der
Deckzellen zusammengefasst und Vorstellungen über
den Aufbau der asymmetrischen Membran mit den
AUM-Uroplakin Partikeln in einem Modell präsentiert.
Das Urothel
Apikale Plasmamembran
*
Fusiforme Vesikel
Ly
?
Golgi
AUM-Partikel
E
P
Dicke Linien weisen auf die Lokalisation der
Plaqueregionen in der apikalen Plasmamembran und in
den fusiformen Vesikeln. Dem Modell entsprechende
Membranabschnitte sind mit Rechtecken und einem
zusätzlichen Stern (im Fall der Plasmamembran)
markiert. E – nach außen gerichtete Seite der Membran;
P – zum Zytoplasma gerichtete Seite der Membran; Ly –
Lysosom.
Die AUM-Partikel und Plaques sind nicht starr. Es
besteht die Vorstellung, dass über Interaktion ihrer
Kopfregionen Formveränderungen und Dynamik
ermöglicht werden.
Literatur
Kachar B, Liang F, Lins U, Ding M, Wu X-R, Stoffler D, Aebi U,
and Sun T-T (1999) Three-dimensional analysis of the 16 nm
urothelial plaque particle: Luminal surface exposure, preferential
head-to head interaction, and hinge formation. J Mol Biol 285:
595
Min G, Zhou G, Schapira M, Sun T-T, and Kong X-P (2003)
Structural basis of urothelial permeability barrier function as
revealed by cryo-EM studies of the 16 nm uroplakin particle.
J Cell Sci 116: 4087
Veranic P, and Jezernik K (2002) Trajectorial organization of
cytokeratins within the subapical region of umbrella cells. Cell
Motil Cytoskeleton 53: 317
Vergrößerung: x 40,500 (A); x 80,000 (B); x 194,000 (Nebenbild)
Abbildung 115 233

Fusiforme Vesikel

Fusiforme Vesikel

B
234
KONTINUIERLICHES ENDOTHEL , PERIZYT
Ein einfaches, plattes Epithel, als Endothel bezeichnet,
bildet die luminale Auskleidung der Blut- und
Lymphgefäße. Das Endothel hat zahlreiche Aufgaben,
die sich zum Teil auch im ultrastrukturellen Bild
spiegeln. Auch bestehen Unterschiede in den verschiede-
nen Abschnitten des makro- und mikrovaskulären
Systems. In Kapillaren existieren spezielle transendothe-
liale Transportmechanismen. Bezogen auf die Organisa-
tion des Endothels können kontinuierliche Kapillaren
(Abb. A und B), diskontinuierliche und fenestrierte
Kapillaren (Abb. 97 und 117) differenziert werden.
Abbildung A zeigt eine kontinuierliche Kapillare mit
dem Endothel (E) und einem das Endothel um-
fassenden Perizyten. Details des Endothels sind in
Abbildung B zu sehen. An den Überlappungsregionen
der benachbarten Endothelzellen sind die Zellen in
Kontakt (Pfeile in Abb. B) und über Haftkomplexe ver-
bunden. Tight junctions bilden eine Barriere, die den
interzellulären Verkehr beschränkt. In kontinuierlichen
Kapillaren erfolgt der transendotheliale Transport
hauptsächlich intrazellulär über Vesikel, die in beiden
Richtungen transportieren. In den Endothelzellen, die
in den Abbildungen A und B gezeigt werden, sind
Vesikelknospen nahe der Zelloberfläche und zahlreiche
kleine Transportvesikel im Zytoplasma zu sehen. Der
endotheliale Verkehr wird zum Teil über transzellulären
Transport von Albumin und anderen Makromolekülen
über Caveolae (siehe Abb. 46) reguliert. In mikro-
vaskulären Endothelzellen wurden Interaktionen zwi-
schen einem 60-kDa albuminbindendem Plasma-
membranprotein und Caveolin-1 mit Signalwirkung für
die Aktivierung von Vesikelbildung und transendothe-
lialen Vesikeltransport identifiziert. Andere Proteine,
zum Beispiel Transferrin, werden über einen Clathrin-
vermittelten Mechanismus transportiert (siehe Abb.
41). Die Endothelzellen bilden prominente basale
Fortsätze, die streckenweise die Kapillaren begleiten und
eine zweite Lage zwischen Basallamina und Perizyten
bilden (Abb. A). Das Endothel wird von einer kon-
tinuierlichen Basallamina umscheidet (Pfeilköpfe in
Abb. A und B) und auch der Perizyt ist von einer kon-
tinuierliche Lamina basalis (Pfeilköpfe in Abb. A)
umgeben.
Die Endothelien
Endothelzellen produzieren zahlreiche bioaktive
Substanzen, Hormone, Adhäsionsmoleküle und
Gerinnungsfaktoren, die in den Zellen gespeichert und
im Fall von Endothelschädigungen prompt an die
Oberfläche abgegeben werden können. Dadurch kön-
nen Endothelzellen die Mikroumgebung von beein-
trächtigten Regionen rasch verändern und pathologi-
sche Abläufe im Gerinnungssystem oder entzündliche
Prozesse kontrollieren. Das Nebenbild in Abbildung B
zeigt Weibel-Palade-Körperchen. Es handelt sich um
endothelspezifische Speicherorganellen für den multi-
meren von Willebrand-Faktor, dem eine Schlüsselrolle
bei der Thrombozytenadhäsion und Aggregation am
Ort von Gefäßschädigungen zukommt. Auch ist der von
Willebrand-Faktor Trägerprotein für den Blutge-
rinnungsfaktor VIII. Sowohl im Querschnitt (a) als
auch im Längsschnitt (b) sind die charakteristischen
tubulären Innenstrukturen gut erkennbar. Die Weibel-
Palade Körperchen beinhalten auch eine Reihe anderer
Proteine, Endothelin, Interleukin-8 und P-Selektin, die
ebenfalls reguliert exportiert werden und bei
Gefäßschädigungen lokale und systemische vasoaktive
Reaktionen und Entzündungsprozesse modulieren.
Literatur
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Vergrößerung: x 16,000 (A); x 29,500 (B); x 65,000 (Nebenbild a);
x 90,000 (Nebenbild b)
Abbildung 116 235

Perizyt

Weibel-Palade-Körperchen

a b

B
236
FENESTRIERTES ENDOTHEL
In fenestrierten Endothelien werden extrem dünne
Endothelzellausläufer von zahlreichen speziell aufge-
bauten Poren durchsetzt. Kapillaren mit solch fenes-
trierten Endothelien sind typisch für die endokrinen
Organe und bilden die dichten Kapillaretze in der
Lamina propria der Schleimhaut des Intestinaltrakts, in
der Bauchspeicheldrüse, in den Plexus choroidei und
den Ziliarfortsätzen des Auges. Im Gegensatz zu den
offenen Poren im Sinusendothel der Leber (Abb. 97–99)
sind die Poren (fenestrae) in den fenestrierten
Endothelien nicht frei passierbar, sondern von einem
Diaphragma aus radiär ausgerichteten Fibrillen überzo-
gen. Sie sind sehr homogen in ihrem Durchmesser
(70–80nm) und entsprechen speziellen Transport-
regionen innerhalb der Endothelzellen. Basal sind die
Porenregionen von einer durchgehenden Basallamina
überzogen. Auch dadurch unterscheiden sie sich von
den Sinusendothelien in der Leber und auch von den
diskontinuierlichen Kapillaren in der Milz und im
Knochenmark, die alle nur rudimentäre Basallamina-
segmente besitzen.
Die Aufnahme einer fenestrierten Kapillare aus einer
Rattenbauchspeicheldrüse in Abbildung A zeigt, dass
das Endothel auch in diesem Kapillartyp kontinuierlich
ist, sich die Endothelzellen überlappen und durch
Haftkomplexe verbunden sind. In den Endothelzellen
existieren unterschiedliche Domänen. Der Abschnitt
links im Bild mit den zahlreichen Caveolae und
Transzytosevesikeln ist vergleichbar mit dem Bild der
kontinuierlichen Kapillare in Abbildung 116, während
im rechten unteren Abschnitt das Endothel extrem flach
und durch mehrere fenestrae durchsetzt ist (Pfeilköpfe).
Die Basallamina ist nicht unterbrochen und überzieht
Die Endothelien
fenestrierte und nicht-fenestrierte Endotheldomänen
gleichermaßen. Aus den Abbildungen B und C ist
ersichtlich, dass extrem flache, fenestrierte Endothelzell-
domänen (Pfeilköpfe) Seite an Seite zu anderen
Endothelabschnitten lokalisiert sind. Das Endothel ist
zwischen den fenestrierten Abschnitten höher.
Caveolae, Transzytosevesikel und feine, fast das gesamte
Endothel durchsetzende, Transportkanälchen (siehe
auch Abb. 47A) bestimmen hier das ultrastrukturelle
Bild.
Abbildung C zeigt zwischen dem sekretorischen
Pankreasepithel links und dem fenestrierten Endothel
rechts eine marklose Nervenfaser des vegetativen
Nervensystems. Im Axon (A), das im zentralen Teil des
Bildes zu sehen ist, liegen dicht gepackt zahlreiche
synaptische Vesikel.
Literatur
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Res 61: 87
Vergrößerung: x 28,400 (A); x 55,600 (B); x 35,000 (C)
Abbildung 117 237

B C
238
ENDOTHELZELLKONTAKTE MIT PERIZYTEN UND GLATTEN MUSKELZELLEN
Die Abbildungen zeigen Ausschnitte aus der Wand einer
Kapillare (Abb. A) und einer Arterie (Abb. B) mit beson-
derem Hinblick auf die Endothelzellen und ihre
Interaktionen mit der Umgebung. In den dargestellten
Endothelzellen sind die Strukturen des biosynthetischen
Systems mit zahlreichen freien und gebundenen Ribo-
somen, Membranen des endoplasmatischen Retikulums
und ausgeprägten Golgi Apparaten besonders promi-
nent und weisen darauf hin, dass die Endothelien nicht
eine simple Auskleidung der Gefäße bilden, sondern
hochaktive Zellen sind und wichtige sekretorische
Leistungen erfüllen. Nicht nur sind Produkte der
Endothelzellen bei der Auslösung der Blutgerinnung bei
Gefäßwandschädigungen besonders wichtig (Weibel-
Palade Körper siehe Abb. 116), sie sind ebenso beteiligt
an Prozessen zur Verhinderung intravaskulärer
Koagulation und Thrombosebildung. Durch die
Produktion von Substanzen mit muskelrelaxierender
und kontrahierender Wirkung beeinflussen Endothel-
zellen die Aktivität der glatten Muskulatur in der Gefäß-
wand. Auch spielen die Endothelzellen eine wichtige
Rolle bei der transendothelialen Wanderung von Zellen
des Abwehrsystems und kontrollieren Gefäßwachstums-
vorgänge. Das Endothel reorientiert und reorganisiert
sich unter der Einwirkung von Scherkräften.
Die unruhige apikale Oberfläche der Endothelzellen
spiegelt die ausgeprägte Dynamik durch Exozytose und
Endozytosevorgänge. Auch die basale Oberfläche der
Endothelzellen ist vielgestaltig. Das ultrastrukturelle
Bild reflektiert die Interaktionen der Endothelzellen mit
anderen Abschnitten der Gefäßwand. Endothelzellen
bilden Fortsätze, mit denen sie entweder die Basalla-
mina penetrieren und mit der Matrix und benachbarten
Zellen Kontakt aufnehmen (Abb. A) oder innerhalb der
Basallamina Strukturen für die Interaktion mit der
Umgebung (Abb. B) ausbilden. Ein Beispiel aus dem
Kapillarendothel mit einem basalen Fortsatz (Pfeile),
der durch die Lamina basalis hindurchtretend über
einen pfotenförmigen Endbereich mit dem benach-
barten Perizyten in Kontakt tritt, zeigt Abbildung A.
Breite, leistenförmige Zytoplasmafortsätze bilden stel-
lenweise parallel zur basalen Endothelzelloberfläche
eine zusätzliche dünne zelluläre Schicht, wie das in
Abbildung 116A zu sehen ist.
Abbildung B zeigt ein Beispiel aus einer Arterien-
wand. Lange, von Basallamina überzogene, Endothel-
zellfortsätze (Pfeile) penetrieren die breite Membrana
Die Endothelien
elastica interna. Mit ihren feinen, fingerförmigen
Endformationen stecken sie in der Basallamina, die jede
der zuinnerst liegenden glatten Muskelzellen umgibt
und mit der Basallamina des Endothels in Verbindung
steht. Der subendotheliale Raum wird fast komplett von
der Membrana elastica interna eingenommen, die in
Arterien eine distinkte elastische Schicht zwischen
Endothel und glatter Muskulatur bildet. Die Vorstufen
der elastischen Fasern werden hier nicht von Fibro-
blasten produziert (siehe Abb. 125 und 126), sondern
sind ein Produkt der glatten Muskelzellen der
Gefäßwand. Die Pfeilköpfe in Abbildung B markieren
eine Area densa in der zuinnerst lokalisierten glatten
Muskelzelle, eine der Anheftungsregionen für die Aktin-
filamente, die hier wie ein Sporn von der Zellperipherie
in das Zellinnere ausgerichtet ist.
Endothelzell-Matrixinteraktionen und Kontakte mit
benachbarten Zellen der Gefäßwand sind für den
Aufbau und die Organisation der Gefäßwände not-
wendig. Ebenso spielen sie eine wichtige Rolle bei der
Neubildung von Gefäßschläuchen während der
embryonalen Vaskulogenese und während der Angio-
genese, ausgehend von bereits existierenden Gefäßen im
Rahmen von physiologischen und pathologischen
Prozessen, wie Wundheilung, chronischer Entzündung,
Ausbildung von Kollateralkreisläufen und Gefäß-
neubildung in Tumoren.
Literatur
Brooke BS, Karnik SK, and Li DY (2003) Extracellular matrix in
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Vergrößerung: x 31,200 (A), x 18,700 (B)
Abbildung 118 239

Endothelzelle

A Perizyt

Endothelzelle

glatte
Muskelzelle

Membrana
elastica
interna

B
240
DAS GLOMERULUM : EIN HOCHSPEZIALISIERTER FILTERAPPARAT
Die Glomeruli der Nieren sind exquisite und komplex
gebaute Filter. Sie bestehen aus einem Konvolut von
Kapillaren, denen die Podozyten aufsitzen und den
mesangialen Zellen (Abb. A). Zwischen den Endothel-
zellen und den Podozyten liegt die glomeruläre Basal-
membran (GBM; siehe auch Abb. 83A). Die gefensterten
Endothelzellen (Pfeilköpfe in Abb. B) unterscheiden
sich von anderen fenestrierten Endothelien (siehe Abb.
117) durch größere Poren und fehlende Poren-
diaphragmen. Die spezielle Gestalt der in den Harnspalt
(Sterne in Abb. A und B) ragenden Podozyten kann am
besten mit der Rasterelektronenmikroskopie dargestellt
werden (Abb. C). Vom Körper der Podozyten gehen
lange, sich verzweigende Fortsätze aus, die Primär-
fortsätze, welche die Kapillaren umschlingen. Von ihnen
werden die Sekundärfortsätze gebildet, die sogenannten
Fußfortsätze, die die etwa 40 nm weiten Filtrations-
schlitze bilden, die durch die Filtrationsdiaphragmen
überbrückt werden (Pfeile in Abb. B). Die Filtrations-
diaphragmen bilden die Grenze zwischen der apikalen
und basalen Plasmamembran der Podozyten. Die abge-
flachten Enden der Fußfortsätze inserieren in die GBM.
Die Membranglykoproteine Podocalyxin und Podo-
planin sind für die Aufrechterhaltung der speziellen
Podozytengestalt verantwortlich. Das an Sialinsäure
reiche Podocalyxin wirkt auch als Antiadhäsin und hält
mittels elektrostatischer Repulsion die Filtrations-
schlitze offen. Nephrin, das zur Ig-Superfamilie der
Adhäsionsmoleküle gehört, befindet sich ausschließlich
in den Filtrationsdiaphragmen und stellt die Haupt-
komponente eines reißverschlussartig aufgebauten
porösen Filters dar. Es ist auch für die Aufrechterhaltung
der Filtrationsschlitze wichtig. Der komplexe glomeru-
läre Filter besteht somit aus den Endothelzellen, der
stark hydratisierten GBM und den die Filtrationsporen
überbrückenden Filtrationsdiaphragmen.
Durchtretende Moleküle werden entsprechend ihrer
Ladung, Masse und Gestalt selektioniert. Der glomeru-
läre Filter ist durchlässig für Wasser. Für das Filtern von
Makromolekülen entsprechend ihrer elektrischen
Ladung sind die negativen Ladungen der Endothelzellen
und der GBM verantwortlich. Das Filtern von Makro-
Das Glomerulum und krankhafte Veränderungen
molekülen entsprechend ihrer Masse und Gestalt
geschieht in der GBM und auf der Ebene der
Filtrationsdiaphragmen. Das Nephrin der Filtrations-
diaphragmen spielt hierbei eine entscheidende Rolle.
Die endozytotisch aktiven Podozyten und mesan-
gialen Zellen üben eine Reinigungsfunktion für den
glomerulären Filter aus, indem sie Eiweiße von den
Filtrationsdiaphragmen und aus dem subendothelialen
Raum entfernen.
Literatur
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Vergrößerung: x 7,000 (A); x 45,000 (B); x 15,000 (C)
Abbildung 119 241

Kapillare
*

Podozyt

GBM
* Erythrozyten

Kapillare

*
Kapillare
Mesangium

Podozyt
*
Podozyt

GBM

B Kapillare C
242
PATHOLOGIE DES GLOMERULÄREN FILTERS : MINIMAL CHANGE GLOMERULOPATHIE UND
KONGENITALE NEPHROTISCHE SYNDROME
Schädigungen des glomerulären Filters treten im
Rahmen verschiedener erworbener und vererbter Er-
krankungen auf und führen zum nephrotischen
Syndrom, das durch Proteinurie, Ödeme, Hypo-
albuminämie und Hyperlipidämie charakterisiert ist.
Abbildungen A und B zeigen die charakteristischen
Veränderungen der Minimal Change Glomerulopathie,
die im Verlust der Fußfortsätze der Podozyten und der
Filtrationsdiaphragmen (Pfeile in Abb. B) sowie im
Auftreten von Fetttröpfchen in den Podozyten (Sterne
in Abb. B) und einer Vermehrung der Mikrovilli
(Pfeilköpfe in Abb. A und B) bestehen. Ferner kann es
zur Ablösung der Fußfortsätze von der glomerulären
Basalmembran (GBM) kommen, was hier nicht zu
sehen ist. Infolge der Proteinurie und nachfolgender
Proteinreabsorption treten Eiweiß-gefüllte Vakuolen in
den proximalen Tubulusepithelien auf (offene Sterne in
Abb. C). Im Puromycin-induzierten nephrotischen
Syndrom der Ratte, einem Tiermodell der menschlichen
Minimal Change Glomerulopathie, ist der Sialinsäure-
gehalt des Podocalyxins vermindert und die Menge an
Podoplanin herabgesetzt.
Die verschiedenen kongenitalen nephrotischen
Syndrome weisen ultrastrukturelle Veränderungen auf,
die denen der Minimal Change Glomerulopathie
entsprechen. Einige der involvierten Gene konnten
identifiziert werden. Das kongenitale nephrotische
Syndrom vom Finnischen Typ ist durch Mutationen im
NPHS1-Gen verursacht, das für Nephrin kodiert.
Mutationen im NPHS2-Gen, welches für Podocin
kodiert, verursachen das Steroid-resistente, familiäre
nephrotische Syndrom. Somit sind diese Krankheiten
indirekte Hinweise für die Bedeutung von Nephrin und
Podocin bei der normalen glomerulären Filtration.
In Mäusen ist das CD2-assoziierte Protein (CD2-
AP) mit dem Nephrin der Filtrationsdiaphragmen der
Podozyten verbunden. Seine Abwesenheit verursacht in
transgenen Mäusen ein nephrotisches Syndrom. Somit
könnte CD2-AP-Mangel auch für ein menschliches
nephrotisches Syndrom verantwortlich sein.
Das Glomerulum und krankhafte Veränderungen
Literatur
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Vergrößerung: x 8,000 (A); x 14,000 (B); x 17,500 (C)
Abbildung 120 243

Minimal Change Glomerulopathie

Mesangium

Kapillare

GBM
Kapillare

Podozyt

Podozyt
*

*
*
GBM
*
*
Kapillare
B C
244
GLOMERULÄRE ERKRANKUNGEN : MEMBRANÖSE GLOMERULONEPHRITIS
Die membranöse Glomerulonephritis ist durch die
Bildung und Ablagerung von Immunkomplexen verur-
sacht und mit einem nephrotischen Syndrom oder einer
isolierten Proteinurie verknüpft. Primäre idiopathische
Formen mit unbekannten auslösenden Antigenen wer-
den von sekundären Formen unterschieden, die durch
Infektionen (Hepatitis B, Syphillis, Malaria, etc.),
Autoimmunkrankheiten (systemischer Lupus erythe-
matodes, rheumatische Arthritis) und Arzneimittel
(Penicillamin, Gold) verursacht sind. Vier Stadien der
membranösen Glomerulonephritis können anhand der
strukturellen Veränderungen unterschieden werden.
Die nebenstehende Abbildung zeigt die typischen
elektronenmikroskopischen Befunde bei membranöser
Glomerulonephritis. Sie bestehen aus amorphen elek-
tronendichten Ablagerungen (Sterne) zwischen den
Podozyten und der glomerulären Basalmembran
(GBM), die aus Immunkomplexen bestehen. Aufgrund
ihrer Lage werden sie als subepitheliale Ablagerungen
bezeichnet und können in allen Kapillarschlingen
beobachtet werden. In der post-infektiösen sekundären
Form erscheinen die Ablagerungen in Form eindrück-
licher hügelförmiger Depots (siehe auch Nebenbild)
gemeinsam mit neutrophilen Granulozyten im Lumen
der Kapillaren. Zusätzlich zu den subepithelialen
Ablagerungen kommt es zum Verlust der Fußfortsätze
und einer Abflachung der Podozyten. Die hier gezeigten
Abbildungen, insbesondere das Nebenbild, entsprechen
frühen Stadien einer membranösen Glomerulo-
nephritis, da weder eine deutliche Verdickung der
glomerulären Basalmembran noch eine Umhüllung der
Immunkomplexe durch die Basalmembran eingetreten
sind.
Die Immunkomplexe in Form der subepithelialen
Ablagerungen können mittels Immunfluoreszenz
nachgewiesen werden und bestehen vorwiegend aus IgG
und zum anderen aus C3 und leichten Ketten bei den
primären Formen von glomerulärer Glomerulo-
nephritis oder C1q bei sekundären Formen im Gefolge
eines systemischen Lupus erythematodes. Die Bildung
der Immunkomplexe erfolgt über die Bindung
Das Glomerulum und krankhafte Veränderungen
zirkulierender Antikörper an nicht weiter charakteri-
sierte Antigene der glomerulären Kapillarschlingen oder
in situ.
Die experimentell erzeugte Heymann Nephritis ist
der primären idiopathischen Form der membranösen
Glomerulonephritis sehr ähnlich. Das involvierte
Antigen ist das Megalin (früher als gp330 bezeichnet),
welches Bestandteil der Coated Pits entlang der freien
Oberfläche der Podozyten und der in die glomeruläre
Basalmembran eingebetteten Basis der Fußfortsätze ist.
Megalin findet sich auch in den proximalen Tubuli
(siehe Abb. 103). Zirkulierende Anti-Megalin Anti-
körper binden das Antigen in situ, was zur progressiven
Bildung von subepithelialen Immunkomplexen führt.
Literatur
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Vergrößerung: x 8,800; x 10,500 (Nebenbild)
Abbildung 121 245

Membranöse Glomerulonephritis

* Granulozyt

GBM

Podozyt
Granulozyt

GBM

Podozyt

* * *
GBM
246
GLOMERULÄRE ERKRANKUNGEN : MEMBRANOPROLIFERATIVE GLOMERULONEPHRITIS
Die membranoproliferative Glomerulonephritis wird in
unterschiedliche Typen unterteilt, die sich ätiologisch
und klinisch voneinander unterscheiden. Die hier
besprochene Typ 1 membranoproliferative Glomerulo-
nephritis ist eine Immunkomplex Nephritis, bei der
primäre idiopathische und sekundäre Formen unter-
schieden werden können. Letztere treten verge-
sellschaftet mit verschiedenen Krankheiten auf wie
beispielsweise Infektionskrankheiten (überwiegend
Hepatitis C), Tumoren und systemischen Immun-
abnormalitäten (Sichelzellenanämie, Kryoglobulinä-
mie). Die Typ 1 membranoproliferative Glomerulo-
nephritis wird durch zirkulierende Immunkomplexe
verursacht, die zur Aktivierung des klassischen Kom-
plementsystems führen.
Die elektronenmikroskopischen Veränderungen bei
membranoproliferativer Glomerulonephritis bestehen
im Auftreten von amorphen elektronendichten Ab-
lagerungen (Sterne) zwischen den Endothelzellen und
der glomerulären Basalmembran (GBM). Aufgrund
ihrer Lage werden sie als subendotheliale Ablagerungen
bezeichnet und können in allen Kapillarschlingen eines
glomerulären Läppchens beobachtet werden. Sie werden
auch in der mesangialen Matrix beobachtet. Die suben-
dothelialen Ablagerungen können massiv sein, wie in
Das Glomerulum und krankhafte Veränderungen
den nebenstehenden Abbildungen illustriert. Sie beste-
hen aus C3, IgG und IgM, die immunhistochemisch
nachgewiesen werden können. Weitere charakteristische
Veränderungen bestehen in der Verdopplung der
glomerulären Basalmembran, die in den nebenstehen-
den Abbildungen nicht vorhanden ist und der
Verschmelzung von Fußfortsätzen der Podozyten. Im
Hauptbild ist die hochgradige Einengung des
Kapillarlumens durch die aufgetriebenen Endothel-
zellen und die Mesangialzellproliferation deutlich
erkennbar.
Literatur
Burstein DM, and Rodb RA (1993) Membranoproliferative
glomerulonephritis associated with hepatitis C virus infection.
J Am Soc Nephrol 4: 1288
Cohen A, and Nast C (1996) Kidney. In: Anderson’s pathology.
(Damjanov I, and Linder J, eds). St. Louis: Mosby, pp 2073
Dickersin G (2000) Diagnostic electron microscopy. A text/atlas.
New York: Springer
West CD (1992) Idiopathic membranoproliferative glomeru-
lonephritis in childhood. Pediatr Nephrol 6: 96
Zollinger H, and Mihatsch M (1978) Renal pathology in biopsy.
Berlin Heidelberg New York: Springer
Vergrößerung: x 7,000; x 9,500 (Nebenbild)
Abbildung 122 247

Membranoproliferative Glomerulonephritis

Kapillare

*
GBM
*
*
Podozyt

Podozyt

GBM

*
248
GLOMERULÄRE ERKRANKUNGEN : TRANSPLANTATGLOMERULOPATHIE
Die morphologischen Veränderungen im Gefolge einer
chronischen Abstoßungsreaktion sind komplex und
durch immunologische Reaktionen an den Nieren-
gefäßen und im Interstitium verursacht. Klinisch findet
sich eine fortschreitend abnehmende Nierenfunktion.
Die chronische Transplantatglomerulopathie ist nur
eine Fazette der morphologischen Veränderungen bei
der chronischen Abstoßungsreaktion und kann im
Gefolge einer akuten Abstoßung auftreten. Elektronen-
mikroskopisch werden Veränderungen aller Bestandteile
des Glomerulum, gefunden, wie aus der nebenstehen-
den Abbildung ersichtlich ist. Die glomeruläre Basal-
membran ist deutlich verdickt, streckenweise verdoppelt
und aufgesplittert (Pfeilkopf). Ablagerungen amorphen
elektronendichten Materials in subendothelialen
Regionen der glomerulären Basalmembran (Sterne)
können über weite Strecken gefunden werden. Weiter-
hin kann die Lamina rara interna der glomerulären
Basalmembran verbreitert sein und Fragmente von
Zellen, vesikuläre Strukturen und Membranprofile
Das Glomerulum und krankhafte Veränderungen
enthalten (offener Pfeil). Segmental zu beobachtendes
Verschwinden der Fußfortsätze der Podozyten ist ty-
pisch in fortgeschrittenen Phasen. Die Endothelien sind
ebenfalls verändert im Sinne einer De-Differenzierung
mit Verlust der Fenestrationen und die Kapillarlumen
sind eingeengt. Mit Immunhistochemie können IgM,
C1q und C3 in den Kapillarschlingen und im verbrei-
terten Mesangium nachgewiesen werden.
Literatur
Briner J (1987) Transplant glomerulopathy. Appl Pathol 5: 82
Cohen A, and Nast C (1996) Kidney. In: Anderson’s ´pathology.
(Damjanov I, and Linder J, eds). St. Louis: Mosby, pp 2073
Dickersin G (2000) Diagnostic electron microscopy. A text/atlas.
New York: Springer
Olsen S, Bohman SO, and Petersen VP (1974) Ultrastructure of
the glomerular basement membrane in long term renal allografts
with transplant glomerular disease. Lab Invest 30: 176
Zollinger H, and Mihatsch M (1978) Renal pathology in biopsy.
Berlin Heidelberg New York: Springer
Vergrößerung: x 8,000
Abbildung 123 249

Glomerulopathie bei chronischer Abstossungsreaktion

Podozyt

*
*
*

Kapillare
250
LOCKERES FASRIGES BINDEGEWEBE
Das Bindegewebe, aus Zellen und extrazellulärer Matrix
aufgebaut, bildet das Stroma der Organe des Körpers.
Als Hüll- und Füllgewebe begleitet es die anderen
Gewebe und baut ein Rahmenwerk auf, das die grund-
legende Architektur bestimmt, die Organe gliedert,
Blut- und Lymphgefäße führt und die Hüllen um die
Nervenfasern bildet. Jedoch ist das Bindegewebe nicht
nur Stütze und Gerüst, sondern ist außerordentlich
dynamisch und der Ort, wo sich zahlreiche Regulations-
prozesse für die Gewebsbildung und Organisation,
Immunantwort, Wundheilung, Blutbildung und Organ-
neubildung abspielen. Die extrazelluläre Matrix ist ein
Produkt der Bindegewebszellen und wird laufend
erneuert. Umgekehrt beeinflussen Moleküle der
extrazellulären Matrix Funktion und Aktivität der
Zellen. Die Matrix spielt auch bei pathologischen
Prozessen eine Schlüsselrolle und ist involviert in
Pathomechanismen bei entzündlichen und degenerati-
ven Erkrankungen, Tumorinvasion, Metastasierung und
Tumorangiogenese.
In der Regel sind es die Fibroblasten, die sowohl die
Vorstufen der Bindegewebsfibrillen und Fasen, als auch
die Moleküle der Grundsubstanz synthetisieren und
sezernieren. Die Matrix besteht im wesentlichen aus
kollagenen und elastischen Fibrillen und Fasern, einge-
bettet in eine Grundsubstanz von nicht-kollagenen
Glykoproteinen und Proteoglykanen. Der Wassergehalt
des Gewebes wird von der Konzentration und
Zusammensetzung der Proteoglykane wesentlich beein-
flusst. Die Fibrillen, Fasern und die Komponenten der
Grundsubstanz unterscheiden sich in den verschiede-
nen Bindegewebsklassen, wobei die Konzentration und
der Aufbau der verschiedenen kollagenen und elasti-
schen Fasern die Eigenschaften des jeweiligen Gewebes,
seine Konsistenz und Elasitzität bestimmen. Das
wiederum gibt die Basis für die Klassifizierung des
Bindegewebes in lockeres fasriges Bindegewebe, das im
Bild hier gezeigt wird, in dichtes fasriges Bindegewebe
(siehe Abb. 128) und in retikuläre und elastische Binde-
Das Bindegewebe
gewebsklassen. Zahlreiche Kollagentypen sind bekannt.
Das Kollagen vom Typ I assembliert zu dicken Fasern,
die dem Gewebe Stabilität geben und überall dort, wo
hohe Festigkeit gefordert wird, vorkommen (Abb. 126).
Feine retikuläre Fasern bestehen hauptsächlich aus Typ
III Kollagen. Sie bilden die feinen fasrigen Gitterwerke
(Gitterfasern) in der Lamina fibroreticularis der
Basalmembranen (Abb. 82) und im retikulären Gewebe
im Knochenmark und in den lymphatischen Organen.
Das Übersichtsbild zeigt lockeres fasriges Binde-
gewebe in der Wand des Dünndarms einer Ratte. Binde-
gewebe dieser Art findet sich in zahlreichen Organen in
den Septen und Hüllen für die Blut- und Lymphgefäße,
Nervenfasern und Muskelzellen. Eine Gruppe glatter
Muskelzellen (M) aus der Muskelwand des Darms ist im
linken unteren Bildbereich zu sehen. Der größte Teil des
Bildes zeigt das lockere Bindegewebe der Submukosa
mit Fibroblasten und einem Makrophagen. Der Fibro-
blast links oben im Bild enthält dicht gepackt
Membranen des endoplasmatischen Retikulums und
einen prominenten Golgi Apparat (G), wie das für
aktive Bindegewebszellen, die reichlich Matrixkompo-
nenten synthetisieren, typisch ist. In der Abbildung ist
auch deutlich erkennbar, dass in diesem Gewebe die
Grundarchitektur aus 2 Netzwerken gebildet wird,
einem Netzwerk aus den feinen Fortsätzen der Fibro-
blasten (F) und einem Netzwerk aus kollagenen
Fibrillen und Fasern (K). Kollagenfibrillenbündel
begleiten auch die zahlreichen marklosen Nervenfasern
des vegetativen Nervensystems (Sterne).
Literatur
Bosman FT, and Stamenkovic I (2003) Preface to extracellular
matrix and disease. J Pathol 200: 421
De Wever O, and Mareel M (2003) Role of tissue stroma in cancer
cell invasion. J Pathol 200: 429
Stamenkovic I (2003) Extracellular matrix remodelling: the role
of matrix metalloproteinases. J Pathol 200: 448
Vergrößerung: x 7,100
Abbildung 124 251

K *
Fibroblast

Makrophage

F
*
K

M
252
FIBROBLAST, FIBROZYT UND MAKROPHAGE
Der in Abbildung A dargestellte aktive Fibroblast mit all
seinen ultrastrukturellen Charakteristika ist in Ab-
bildung B einer inaktiven Bindegewebszelle, in dieser
Phase als Fibrozyt bezeichnet, gegenübergestellt.
Fibroblasten machen den Hauptanteil der residenten
Bindegewebszellen aus. Sie synthetisieren und sezer-
nieren alle Komponenten der extrazellulären Matrix,
sowohl die Moleküle der Grundsubstanz als auch die
Vorstufen der verschiedenen Typen von Kollagenen und
die Vorstufen der elastischen Fasern. Das Sekretions-
programm der Fibroblasten determiniert die Zu-
sammensetzung der Matrix und bildet die Basis für die
Konstruktion der verschiedenen Bindegewebsklassen.
Fibroblasten sind spindelförmig und präsentieren
sich ultrastrukturell mit allen Charakteristika von
Zellen, die als Hauptaufgabe große Mengen eines pro-
teinhältigen Sekrets bilden. Im Kern sind die Nukleolen
prominent. Die langen Zytoplasmafortsätze zeigen aus-
geprägte Oberflächeneinfaltungen und enthalten dicht
gepackt raues endoplasmatisches Retikulum (Ergasto-
plasma). Im Golgi Apparat werden die Sekretproteine
modifiziert und nach Fertigstellung in Post-Golgi
Transportkompartimente verpackt, unmittelbar an-
schließend zur Oberfläche transportiert und über
Exozytose abgegeben. Alle Komponenten der Grund-
substanz und ebenso die Prokollagene und Kompo-
nenten der elastischen Fasern nehmen den konstituti-
ven Sekretionsweg. Im Gegensatz zur regulierten
Sekretion (siehe Abb. 39, 40, 87, 88) werden im konsti-
tutiven Sekretionsweg die Zellprodukte im Golgi
Apparat kontinuierlich verpackt und sofort im An-
schluss daran exportiert. Sie werden nicht intrazellulär
gespeichert. Über die Transportwege von neusyn-
thetisiertem Prokollagen aus dem endoplasmatischen
Retikulum heraus und über den Golgi Apparat zur
Zelloberfläche gibt es detaillierte Untersuchungen, die
darauf hinweisen, dass Prokollagen gemeinsam mit
anderen Proteinen die Golgi Stapel passiert, ohne das
Zisternenlumen zu verlassen (siehe auch Abb. 36). Die
feinen Endabschnitte der Fibroblastenfortsätze (Pfeile)
stehen untereinander in Kontakt und bilden im Gewebe
Das Bindegewebe
ein Netzwerk, das zusammen mit den Kollagen-
fibrillenbündeln (K) die Grundarchitektur des Binde-
gewebes aufbaut.
Der inaktive Fibrozyt (Abb. B) ist schmäler und
weniger voluminös im Vergleich zur aktiven Zelle. In
den Fibrozyten ist das endoplasmatische Retikulum nur
spärlich ausgebildet, sie besitzen kein Ergastoplasma.
Mit ihren schmalen Zytoplasmafortsätzen umgeben sie
die Kollagenfibrillenbündel (K) wie mit Flügeln.
Dadurch kommt eine Kompartimentierung des
Gewebes zustande. In den Sehnen werden die ent-
sprechenden Fibrozyten auch als „Flügelzellen“ bezeich-
net.
Abbildung C zeigt den Makrophagen aus Abbildung
124 stärker vergrößert. Die Oberfläche ist eingebuchtet
und oft auch extrem tief invaginiert und zahlreiche
Endozytosevesikel hängen als Knospen an der Plasma-
membran. Makrophagen sind mobile Zellen des
Abwehrsystems, die von Monozyten aus dem Blut
abstammen. Die besitzen ausgeprägt Phagozytose-
fähigkeit und enthalten auffällige Phagosomen und
Lysosomen (siehe auch Abb. 47B, 127, 158). Neben den
wichtigen Aufgaben bei der Eliminierung von
Mikroorganismen und schädigenden Substanzen im
Abwehrsystem, spielen Makrophagen im Bindegewebe
beim Abbau überalteter Fasern und beim Umsatz von
Matrixmolekülen eine wichtige Rolle. Elastische Fasern
(E) und Kollagenfibrillen (K) sind in Abbildung C sehr
nahe an der Makrophagenoberfläche zu sehen und
liegen auch innerhalb der tief invaginierten Ober-
flächenbereiche.
Literatur
Mironov AA, Beznoussenko GV, Nicoziani P, Martella O, Trucco
A, Kweon H-S, Di Giandomenico D, Polishchuk RS, Fusella A,
Lupetti P, Berger EG, Geerts WJC, Koster AJ, Burger KNJ, and
Luini A (2001) Small cargo proteins and large aggregates can
traverse the Golgi by a common mechanism without leaving the
lumen of cisternae. J Cell Biol 155: 1225
Vergrößerung: x 13,400 (A); x 7,600 (B); x18,200 (C)
Abbildung 125 253

Fibroblast Fibrozyt

Makrophage

E
K

A C
254
KOLLAGENE UND ELASTISCHE FASERN
Abbildung A zeigt kollagene (K) und elastische Fasern (E)
im lockeren Bindegewebe der Dünndarmwand. Es ist das
Typ I Kollagen, das besonders dicke Fasern, bis zu 20µm
im Durchmesser, bildet. Diese dicken, auch lichtmikro-
skopisch gut sichtbaren, Typ I Kollagen Fasern bestehen
aus gebündelten kollagenen Fibrillen, die im Elektronen-
mikroskop im Längsschnitt als feingestreifte fädige
Strukturen (K in den Abb. A, B, C) und quergeschnitten
als runde Strukturprofile (Abb. A) gut erkennbar sind.
Das Streifenmuster, das in der stärkeren Vergrößerung in
Abbildung B besonders gut zu sehen ist, resultiert aus der
unterschiedlichen Kontrastierung auf Grund der gestuf-
ten Anordnung der Tropokollagenmoleküle (siehe Zeich-
nung) und der dazwischen entstehenden Spalten, in die
die kontrastgebenden Farbstoffe bevorzugt eindringen.
Die wichtigsten Schritte bei der Bildung der kollage-
nen Fasern sind im Diagramm (nach Kierszenbaum 2002,
mit Modifikationen neu gezeichnet) zusammengefasst.
1 2
4 3
64 nm
5 Funktion. Durch Aggregation entstehen aus den vorerst
300 nm
6 Die Pfeile in Abbildung A weisen auf nicht-myelini-
1. Prokollagensynthese am rauen endoplasmatischen
Retikulum der Fibroblasten, Hydroxylierung von Prolin
und Lysin, initiale Glykosylierung und Bildung von
Tripelhelices.
2. Terminale Glykosylierung im Golgi Apparat.
3. Verpackung in Transportkompartimente und
Exozytose.
4. Extrazelluläre Entfernung nicht-helikaler Ab-
schnitte durch Prokollagenpeptidase und Bildung von
Tropokollagen.
5. Aggregation der Tropokollagenmoleküle und
Bildung der kollagenen Fibrillen. Durch Assemblierung in
versetzter Ordnung entsteht ein Stufenmuster. Die Quer-
vernetzung wird durch Lysyloxidase (Pfeil) katalysiert.
Das Bindegewebe
6. Quervernetzung der Fibrillen zu kollagenen Fasern
vermittelt durch Proteoglykane (Doppelpfeile) und FACIT
Kollagene (Pfeil; FACIT – fibril associated collagens with
interrupted triple helices, Typ IX, XII, and XIV Kollagene).
Elastische Fasern (E in den Abb. A, C, D) sind grund-
legend für die elastischen Eigenschaften der Gewebe, die
Dehnung und Rückführung in die Ausgangslage ermög-
lichen. Sie bestehen aus Elastin, das im Elektronenmikro-
skop als homogenes Material erscheint, und Mikro-
fibrillen (Pfeile in Abb. D), die ihrerseits aus Fibrillin 1
und 2 und assoziierten Glykoproteinen zusammengesetzt
sind. Die Mikrofibrillen, sowohl im Innern der Fasern als
auch in den Randbereichen lokalisiert (Abb. D), initiieren
die Faserbildung und bilden ein Gerüstwerk für das Elas-
tin. Die enge Verbindung von Elastin und Mikrofibrillen
kommt besonders gut in Abbildung D zur Darstellung.
Eng benachbart liegen feine Fibroblastenfortsätze (F).
Alle Komponenten der elastischen Fasern, Tropo-
elastin, Fibrillin 1 und 2 und assoziierte Glykoproteine,
werden am rauen endoplasmatischen Retikulum der
Fibroblasten synthetisiert, nach Glykosylierung im Golgi
Apparat in Sekretvesikel verpackt und exportiert.
Extrazellulär beginnt die Assemblierung von Tropo-
elastin. Im Rahmen der Quervernetzung, katalysiert
durch Lysyloxidase, bilden die oxidierten Lysine
Desmosinringe. Analog entstehen Isodesmosinringe. Die
Fibrilline haben in diesem Prozess der Tropoelastin-
assemblierung eine unterstützende und regulierende
gebildeten unreifen die reifen elastischen Fasern mit
einem hohen Gehalt an Desmosin und Isodesmosin, den
für Elastin charakteristischen Aminosäuren, die die
Grundlage für seine gummiartigen Eigenschaften bilden.
sierte Nervenfasern.
Literatur
Chiquet-Ehrismann R, and Chiquet M (2003) Tenascins: regulation
and putative functions during pathological stress. J Pathol 200: 488
Kierszenbaum AL (2002) Histology and cell biology. An intro-
duction to pathology. Mosby: St. Louis
Kreis T, and Vale R (1999) Guidebook to the extracellular matrix and
adhesion proteins, 2nd ed. Oxford New York: Oxford University Press
Rosenblom J, Abrams WR, and Mecham R (1993) Extracellular
matrix 4: The elastic fiber. FASEB J 7: 1208
Timpl R, Sasaki T, Kostka G, and Chu M-L (2003) Fibulins: A versa-
tile family of extracellular matrix proteins. Nat Rev Mol Cell Biol 4:
479
Vergrößerung: x 16,000 (A); x 85,000 (B); x 77,000 (C); x 30,000 (D)
Abbildung 126 255

E
E
K
E

F
C

F E
A
F

K F
B D
256
EOSINOPHILER GRANULOZYT, PLASMAZELLE, MAKROPHAGE UND MASTZELLE
Im Gegensatz zu den Fibroblasten und Fibrozyten, die
im Bindegewebe ortsständig sind, wandern Zellen des
Abwehrsystems, aus dem Blut und Knochenmark stam-
mend, sekundär in das Bindegewebe ein. Sie werden
unter dem Begriff „mobile Bindegewebszellen“ zusam-
mengefasst. Mobile Zellen, die Schlüsselfunktionen in
der spezifischen und unspezifischen Immunabwehr
innehaben, sind besonders zahlreich in Geweben, wo
Kontakte mit schädigenden Substanzen, Mikro-
organismen und Viren bevorzugt möglich sind, wie zum
Beispiel in den Schleimhäuten des Verdauungs- und
Respirationstrakts.
Abbildung A zeigt einen eosinophilen Granulozyten
(E) und eine Plasmazelle (P) eingebettet in eine Matrix
mit zahlreichen kollagenen Fibrillen und in enger
Beziehung zu Fibroblastenfortsätzen (F). Eosinophile
Granulozyten (siehe auch Abb. 157) machen etwa 2–4%
der Leukozyten im Blut aus und sind als mobile
Bindegewebszellen besonders zahlreich in der Lamina
propria des Dünndarms. Die spezifischen eosinophilen
Granula bieten durch ihr kristallines Zentrum (Stern)
ein charakteristisches Bild. Dieses Kristalloid beinhaltet
ein basisches Protein („major basic protein“), das
Parasitenmembranen angreift und nach Bindung an
Parasitenoberflächen freigesetzt wird. Andere Produkte
der eosinophilen Granulozyten modulieren die Akti-
vität von Mastzellen und schützen gegenüber potentiell
gefährlichen Effekten der Mastzelldegranulierung. Die
eosinophilen Granula werden, ebenso wie die Mastzell-
granula, zu den sekretorischen Lysosomen gerechnet
(Lysosomen siehe Abb. 48 und 49).
Plasmazellen gehören zum spezifischen Abwehr-
system und entstehen aus B-Lymphozyten nach
Antigen-Stimulierung. Sie synthetisieren und sezer-
nieren die spezifisch gegen das aktivierende Antigen
gerichteten Antikörper und bilden damit die Grundlage
für die spezifische humorale Immunität. Die Plasma-
zellen selbst bleiben im Gewebe, während ihre Produkte
als Immunglobuline über den Kreislauf in alle
Körperregionen gelangen. Die Plasmazellkerne zeigen
eine charakteristische Chromatin Radspeichenstruktur.
Zwei der „Speichen“ sind in dem Anschnitt in
Abbildung A erkennbar. Im Zytoplasma liegt dicht
gepackt raues endoplasmatisches Retikulum (Ergasto-
plasma), das die Aufgabe der Plasmazellen in der
Produktion großer Mengen sekretorischer Glyko-
proteine widerspiegelt. Auch Abbildung C zeigt einen
kleinen Ausschnitt aus einer Plasmazelle (P).
Das Bindegewebe
In Abbildung B ist ein Makrophage (MA) mit riesi-
gen Lysosomen (Ly) im Zytoplasma zu sehen. Das ultra-
strukturelle Bild spiegelt die Aufgabe der Makrophagen
im Abwehrsystem und beim physiologischen Gewebs-
umbau. Mit ausgeprägter Phagozytosefähigkeit ausge-
stattet, stehen Makrophagen im Mittelpunkt bei der
Eliminierung schädigender Materialien und Mikro-
organismen ebenso, wie beim Abbau von überalterten
Fibrillen, Fasern und anderen Matrixkomponenten. Das
einverleibte Material wird in den Lysosomen abgebaut
und umgebaut und Produkte an der Oberfläche den
spezifischen Abwehrzellen präsentiert.
Eine Mastzelle (M) gemeinsam mit einem Teil einer
Plasmazelle (P) zeigt Abbildung C. Mastzellen sind
wichtige Zellen des Abwehrsystems, aber auch involviert
in pathologische Immunreaktionen, insbesondere
Allergien. Mastzellprodukte erleichtern die Bewegung
von Zellen und Molekülen hin zu Fremdinvasions-
regionen. Das nach Mastzellaktivierung freigesetzte
Histamin erhöht die Gefäßdurchlässigkeit und chemo-
taktisch wirksame Substanzen aus den Mastzellen
wirken auf mobile Zellen, Monozyten, neutrophile und
eosinophile Granulozyten, anziehend. Die Mastzell-
produkte sind in den nicht-aktivierten Zellen in
Speichergranula (Sterne) angereichert. Hauptsächlich
enthalten die Granula Histamin, Heparin, Proteo-
glykane und eine Reihe von Proteasen. Die Freisetzung
erfolgt nach Aktivierung gemeinsam mit Entzündungs-
aktivatoren, die zum Zeitpunkt der Aktivierung pro-
duziert werden. Aktiviert werden die Zellen durch
Bindung eines spezifischen Antigens, das sich mit zwei
Immunglobulin E Molekülen, die über einen Rezeptor
in der Plasmamembran verankert sind, verbindet. Eine
besonders rapide Freisetzung der Granulainhalte wird
dadurch möglich, dass die Speichergranula nach
Aktivierung schon innerhalb der Zelle untereinander
fusionieren und Extrusionskanäle zur Zelloberfläche
ausgebildet werden. Mikrotubuliabhängige Bewegungen
der Sekretgranula scheinen bei der Mastzellentleerung
eine bedeutende Rolle zu spielen.
Literatur
Smith AJ, Pfeiffer JR, Zhang J, Martinez AM, Griffiths GM, and
Wilson BS (2003) Microtubule-dependent transport of secretory
vesicles in RBL-2H3 cells. Traffic 4: 302
Swanson MS, and Fernandez-Moreira E (2003) A microbial strat-
egy to multiply in macrophages: A pregnant pause. Traffic 3: 170
Vergrößerung: x 10,400 (A); x 7,500 (B); x11,600 (C)
Abbildung 127 257

Eosinophiler Granulozyt Makrophage

MA
E F
F
Ly
Ly

Ly
*
P
A B

Plasmazelle, Mastzelle
M

*
P *

C
258
DIE BINDEGEWEBSSCHICHT DER KORNEA
Die Hornhaut bildet den vordersten Teil der äußeren
Augenhaut, die das Augeninnere schützt und mithilft,
das Auge in Form zu halten. Der zentrale Bereich der
Kornea entspricht dem vorderen Pol des Augapfels. Als
Teil des optischen Apparats des Auges muss die
Hornhaut transparent sein. Zahlreiche feine Nerven-
fasern durchziehen das Hornhautstroma, doch enthält
die Kornea weder Blut- noch Lymphgefäße. Aus diesem
Grund werden auch Komponenten des Abwehrsystems
am Eindringen in die Kornea gehindert. Das macht die
Hornhaut mit einem minimalen Abstoßungsrisiko zu
einem idealen Organ für die Transplantation. Das
Kornealstroma (Substantia propria) nimmt etwa 90%
der Gesamtdicke der Kornea ein. Es besteht aus einem
außergewöhnlich dichten, ganz speziell aufgebauten fas-
rigen Bindegewebe, in dem hauptsächlich Kollagene
vom Typ I und Typ V vertreten sind.
Die Abbildung zeigt einen Ausschnitt aus dem mitt-
leren Teil des Kornealstromas mit den geschichteten
und unterschiedlich orientierten Kollagenfibrillen,
zwischen denen auch ein Fibroblast und ein dünner
Fortsatz eines zweiten zu sehen sind. Die Zellen sind
extrem flach zwischen den Lagen von Kollagenfibrillen
ausgespannt. Im Stroma der Kornea sind die kollagenen
Fibrillen in flachen, zum Teil untereinander verflochte-
nen, Lamellen organisiert. Die Fibrillenausrichtung ist
in den benachbarten Lamellen unterschiedlich und
wechselt von Lamelle zu Lamelle. Die Lamellen
überkreuzen einander in verschiedenen Winkeln und
bilden ein komplexes Gitterwerk, das fast den gesamten
Extrazellularraum einnimmt und die Kornea gegenüber
Deformierung und Traumata sehr widerstandsfähig
macht. Im elektronenmikroskopischen Bild ist die
Das Bindegewebe
Architektur der Lamellen auf Grund der unterschiedlich
angeschnittenen Fibrillen gut erkennbar. Sowohl im
Längs-, als auch im Querschnitt kommt gut zur
Darstellung, dass der Abstand zwischen den einzelnen
Kollagenfibrillen sehr regelmäßig ist. Dieser regel-
mäßige Raum zwischen den Fibrillen hängt eng mit der
Organisation der wasserbindenden Moleküle und mit
dem Wassergehalt der Kornea zusammen, dessen präzise
Regulierung für ihre Durchsichtigkeit Voraussetzung ist.
Die kollagenen Fibrillen sind in eine Grundsubstanz
eingebettet, die reich an Proteoglykanen mit Keratan-
und Dermatansulfat ist. Vor allem die hohe Konzen-
tration von Keratansulfat scheint für die Regulierung
des Wassergehalts der Kornea und die Aufrecht-
erhaltung eines für die Transparenz kritischen Hydra-
tionsgrades eine Hauptrolle zu spielen. Die mit Keratan-
sulfat verbundenen Proteine sind hauptsächlich
Lumikan, Keratokan und Mimekan. Keratansulfat- und
Dermatansulfat-verbundene Proteoglykane haben unter-
schiedliche Wasserbindungseigenschaften. Während
Dermatansulfat unter Hydrationstufen, die für normales
Korneagewebe typisch sind, voll hydriert ist, zeigt
Keratansulfat nur eine partielle Hydrierung und scheint
als Hydrationspuffer zu wirken.
Literatur
Funderburgh JL (2000) Keratan sulfate: structure, biosynthesis,
and function. Glycobiology 10: 951
Radner W, and Mallinger R (2002) Interlacing of collagen lamel-
lae in the midstroma of the human cornea. Cornea 21: 598
Verkman AS (2003) Role of aquaporin water channels in eye
function. Exp Eye Res 76: 137
Vergrößerung: x 30,000
Abbildung 128 259

Kollagen

Stromazelle

Kollagen
260
DIE BOWMAN’SCHE SCHICHT IN DER KORNEA
Ursprünglich wurde die Bowman’sche Schicht im
vorderen Bereich der Kornea, auf der das vordere
Hornhautepithel mit der Basallamina aufsitzt, als
Bowman’sche Membran, analog zur Descemet’schen
Membran im hinteren Hornhautbereich, bezeichnet.
Die Bowman’sche Schicht entspricht jedoch nicht wie
die Descemet’sche Membran (Abb. 84) einer Basal-
membran. Es handelt sich bei der Bowman’schen
Schicht vielmehr um den vordersten Teil des Korneal-
stromas, wenn auch die Fibrillenarchitektur eine ganz
andere ist. Die Bowman’sche Schicht ist 6–9 µm dick
und besteht aus einem dichten Geflechtwerk von haupt-
sächlich Typ I kollagenen Fibrillen.
Die Ausschnitte aus der menschlichen Kornea in den
Abbildungen A und B zeigen Teile der Basalzellenschicht
des vorderen Hornhautepithels (siehe auch Abb. 108)
und die Basallamina mit der Lamina rara nahe der
basalen Plasmamembran der Epithelzellen und der
benachbarten Lamina densa. Die Lamina densa ist in
Abbildung B mit einem Stern markiert. Sie setzt sich in
die Bowman’sche Schicht fort, die in der Übersichtsauf-
Das Bindegewebe
nahme in Abbildung A im mittleren Bildteil dargestellt
ist. Das anschließende Kornealstroma ist im unteren
Bildsegment zu sehen. Die unterschiedliche Organi-
sation der kollagenen Fibrillen in der Bowman’schen
Schicht im Vergleich zu der im Kornealstroma ist gut
erkennbar. Während im Kornealstroma die kollagenen
Fibrillen in flachen Lamellen gestapelt sind (siehe auch
Abb. 128), bilden sie in der Bowman’schen Schicht ein
dichtes Geflechtwerk. Einen Ausschnitt daraus zeigt
Abbildung B in stärkerer Vergrößerung.
Die Bowman’sche Schicht ist, wie alle Bereiche der
Kornea, transparent und bildet eine Schutzschicht
gegenüber externen Traumata und mikrobieller
Invasion.
Literatur
Abrams GA, Bentley E, Nealey PF, and Murphy CJ (2002)
Electron microscopy of the canine corneal basement membranes.
Cells Tiss Org 170: 251
Vergrößerung: x 15,000 (A); x 91,000 (B)
Abbildung 129 261

Basalzellenschicht Basalzellenschicht

* *

Bowman'sche Schicht

Bowman'sche Schicht

Stroma

A B
262
DIE AMYLOIDOSE DER NIERE
Mit dem Begriff Amyloidose werden Ablagerungen
unterschiedlicher Eiweiße im Gefolge verschiedenar-
tiger Krankheiten bezeichnet. Die im extrazellulären
Raum abgelagerten Eiweiße bilden Fibrillen mit einem
Durchmesser zwischen 75 und 100 Å. Das gemeinsame
Bauprinzip der Fibrillen besteht in einer `-Faltblatt-
struktur. Die geordnet abgelagerten Amyloidfibrillen
sind doppeltbrechend und haben eine starke Affinität
gegenüber dem Farbstoff Kongorot, mit dem sie nicht
nur histochemisch nachgewiesen, sondern auch von
anderen fibrillären Eiweißablagerungen unterschieden
werden können.
Ablagerungen von Amyloid in der Niere werden in
den Glomeruli, den Blutgefäßen, dem Interstitium und
in den peritubulären Basalmembranen gefunden. Die
nebenstehende Abbildung zeigt Amyloidablagerungen
im dadurch vergrößerten Mesangium (Sterne) eines
Glomerulums sowie entlang und auch innerhalb der
glomerulären Basalmembran. Die Amyloidablagerun-
gen können zur Aufsplitterung der glomerulären
Basalmembran führen oder sie gar vollständig ersetzen.
Das Nebenbild zeigt massive Ablagerungen von
Amyloidfibrillen (Stern) zwischen dem Endothel und
Podozyten, die zum Ersatz der glomerulären Basal-
membran geführt haben. Im Gefolge ist es zum Verlust
der Fußfortsätze der Podozyten gekommen. Die
Podozyten können sich fokal von der glomerulären
Basalmembran ablösen und als Folge kann es zum
Austritt von Amyloidfibrillen in den glomerulären
Harnspalt kommen. Diese Veränderungen sind in den
gezeigten Abbildungen nicht vorhanden. Die nicht
verzweigten Amyloidfibrillen sind überwiegend wahllos
angeordnet. In der unmittelbaren Nachbarschaft der
Podozyten können sie oftmals in nadelförmigen
Anordnungen gefunden werden. Diese sind Ausdruck
aktiver Bildung von Amyloid und häufig bei primärer
Amyloidose zu beobachten. Sie verschwinden im
Verlaufe der Rückbildung der Amyloidose. Die in der
nebenstehenden elektronenmikroskopischen Abbildung
Das Bindegewebe
erkennbare Störung der Architektur des Glomerulums
ist deutlich ausgeprägt und hat zur Vergrößerung des
Mesangiums, zur Verbreiterung der glomerulären
Basalmembranen und einer Lumeneinengung der
Kapillaren geführt. Solche pathologischen Veränderun-
gen sind nicht mehr mit einer normalen glomerulären
Funktion vereinbar.
Die Amyloidose kann vererbt (primär) oder erwor-
ben (sekundär) sein und entweder ein einzelnes Organ
oder ganze Organsysteme befallen. Je nach der Zu-
sammensetzung der Fibrillen Untereinheiten können
verschiedene Typen der Amyloidose unterschieden wer-
den. Der häufigste Typ ist die Amyloidose durch leichte
Ketten von Immunglobulinen (AL-Amyloidose), bei der
die Untereinheiten der Fibrillen aus den variablen Teilen
von leichten Ketten monoklonaler Immunglobuline
bestehen. Bei der reaktiven Amyloidose (AA-Amy-
loidose) bestehen die Untereinheiten der Fibrillen aus
dem Amyloid A. Als Folge der fortschreitenden
Amyloidablagerungen wird die normale Gewebe-
struktur zerstört und die Organfunktion geschädigt. Bei
der Amyloidose der Niere herrscht der AA-Typ vor,
obwohl auch der AL-Typ gefunden werden kann.
Literatur
Benson M (2001) Amyloidosis. In: The metabolic and molecular
bases of inherited diseases (Scriver C, Beaudet A, Valle D, and
Sly WS, eds). New York: McGraw-Hill, pp 5345
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New York: Springer
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An ultrastructural immunogold study of the colocalization of
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Dikmann S, Churg J, and Kahn T (1981) Morphologic and clini-
cal correlates in renal amyloidosis. Hum Path 12: 160
Zollinger H, and Mihatsch M (1978) Renal pathology in biopsy.
Berlin Heidelberg New York: Springer
Vergrößerung: x 6,300 (A); x 29,000 (Nebenbild)
Abbildung 130 263

Amyloidose der Niere

Kapillare

Podozyt

*
*

Endothel
264
SICHTBARMACHUNG DES WACHSTUMS VON AMYLOIDFIBRILLEN DURCH ZEITRAFFER ATOM -
KRAFTMIKROSKOPIE
Amyloidablagerungen bestehen aus feinen Fibrillen, die
in ultradünnen Gewebeschnitten mittels Transmissions-
elektronenmikroskopie sichtbar gemacht werden kön-
nen (siehe Abb. 130). Die Amyloidfibrillen sind unlös-
lich und sehr stabile Strukturen. Amyloidfibrillen kön-
nen auch in vitro unter Verwendung synthetisch herge-
stellter Eiweiße erzeugt werden.
Beim hier gezeigten Beispiel wurde Amylin verwen-
det, das die Untereinheit der Amyloidablagerungen
beim Typ 2 Diabetes mellitus ist. Mittels Zeitraffer Atom-
kraftmikroskopie wurde das Wachstum der Fibrillen
untersucht. Die Atomkraftmikroskopie eignet sich her-
vorragend für hochauflösende Untersuchungen von
Makromolekülen in wässriger Umgebung und stellt eine
sinnvolle Ergänzung zur Dünnschnitt Elektronen-
mikroskopie dar, da sie Zeitrafferuntersuchungen unter
fast physiologischen Bedingungen ermöglicht.
Abbildung A zeigt eine Aufnahme von Protofibrillen, die
von in Puffer gelöstem Amylin an der Oberfläche von
Glimmer gebildet wurden. Die Protofibrillen entstehen
durch das Aneinanderreihen von verdrehten `-Faltblatt-
strukturen (twisted `-sheets) entlang ihrer Längsachse.
Sie stellen die Bausteine für die Amyloidfibrillen dar.
Abbildungen B, C und D zeigen den gleichen Ausschnitt
eines Präparates, der über einen Zeitraum von mehreren
Stunden analysiert wurde, und illustrieren das
Wachstum von Protofibrillen an der Glimmerober-
fläche. Auf diese Weise wurde es möglich, das Wachstum
einzelner Protofibrillen im Detail zu analysieren. So
konnte beispielsweise über Zeitrafferstudien das
Protofibrillenwachstum mit 1,1 (SD = 0,5) Nanometer
pro Stunde ermittelt werden. Zusätzlich zur Analyse
einzelner vorbestehender Protofibrillen und ihres
Wachstums konnte auch die de novo Bildung von
Protofibrillen studiert werden. Sie entstehen aus
Nukleationszentren, die als kleine Punkte in Erschei-
nung treten.
Das Bindegewebe
Eine mögliche Anwendung der Zeitraffer Atomkraft-
mikroskopie könnte im Testen von Arzneimitteln liegen,
die entwickelt wurden, um die Bildung von
Amyloidfibrillen zu unterdrücken.
Literatur
Binnig G (1992) Force microscopy. Ultramicroscopy 42: 7
Binnig G, Quate CF, and Gerber C (1986) Atomic force micro-
scope. Phys Rev Lett 56: 930
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Jena B, and Hörber H (2002) Atomic force microscopy in cell
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atomic force microscopy. Proc Natl Acad Sci USA 96: 13175
Muller DJ, Schabert FA, Buldt G, and Engel A (1995) Imaging
purple membranes in aqueous solutions at sub-nanometer reso-
lution by atomic force microscopy. Biophys J 68: 1681
Shirahama T, and Cohen A (1967) High resolution electron
microscopic analysis of the amyloid fibril. J Cell Biol 33: 679
Stolz M, Stoffler D, Aebi U, and Goldsbury C (2000) Monitoring
biomolecular interactions by time-lapse atomic force microscopy.
J Struct Biol 131: 171
Walsh DM, Hartley DM, Kusumoto Y, Fezoui Y, Condron MM,
Lomakin A, Benedek GB, Selkoe DJ, and Teplow DB (1999)
Amyloid beta-protein fibrillogenesis. Structure and biological
activity of protofibrillar intermediates. J Biol Chem 274: 25945
Vergrößerung: x 50,000 (A-D)
Abbildung 131 265

4,7 Std. 7,5 Std. 10,2 Std.

B C D
266
DAS WEISSE FETTGEWEBE
Das Fettgewebe existiert in zwei Formen, die bereits mit
dem bloßen Auge unterschieden werden können und
die feinstrukturell wesentliche Unterschiede aufweisen:
als weißes Fettgewebe und braunes Fettgewebe (siehe
Abb. 133). Weißes Fettgewebe findet sich vor allem in
der Subkutis, überwiegend als isolierte Adipozyten und
in der Bauchhöhle, vorwiegend als kompaktes Gewebe.
Die weißen Adipozyten werden wegen der Anwesenheit
eines einzelnen Fetttröpfchens als univakuoläre (oder
unilokuläre) Adipozyten bezeichnet. Je nach Größe des
Fettröpfchens können die weißen Adipozyten zwischen
40 und 120 µm messen.
In Abbildung A sind weiße Adipozyten der Subkutis
gezeigt. Sie werden von einem einzigen, schwach osmio-
philen Fetttröpfchen (L) dominiert, das den weißen
Adipozyten ihre sphärische Form und das Aussehen
eines Siegelrings verleiht. Das Zytoplasma existiert in
Form eines schmalen, in die Peripherie gedrängten
Saumes, in dem sich der stark abgeflachte Zellkern
befindet (Abb. A und N in Abb. B). Der in Abbildung A
eingerahmte Teil des weißen Adipozyten ist in
Abbildung B bei stärkerer Vergrößerung zu sehen und
lässt Details des Zytoplasmas erkennen. In der Nähe des
Zellkerns (N) befinden sich der Golgi Apparat,
Mitochondrien (M) und Zisternen des rauen endoplas-
matischen Retikulums. Die Plasmamembran weist
Caveoli (Pfeile) auf. Unmittelbar unterhalb von ihr
befinden sich zahlreiche pinozytotische Vesikeln. Das
angrenzende Fetttröpfchen, das zu etwa 95% aus
Triglyzeriden besteht, ist nicht durch eine Membran
vom Zytoplasma getrennt und stellt somit einen zyto-
plasmatischen Einschluss dar. An der Grenze zwischen
dem Zytoplasma und dem Fetttröpfchen befindet sich
ein flaches Netzwerk aus Intermediärfilamenten, dessen
Anwesenheit nur in Tangentialschnitten deutlich zu
Tage tritt. Die weißen Adipozyten sind von einer
Basalmembran umgeben, deren Lamina basalis (Lb) in
Abbildung B gut erkennbar ist.
Das weiße Fettgewebes stellt ein wichtiges Energie-
reservoir dar. In Abhängigkeit vom Energiebedarf des
Organismus werden die in den Fetttröpfchen enthalte-
nen Triglyzeride auf- oder abgebaut. Somit ist das weiße
Fettgewebe ein aktives, dynamisches Gewebe. Die Tri-
glyzeride der weißen Adipozyten werden im Wesent-
lichen aus Fettsäuren synthetisiert, die in eiweißgebun-
dener Form vom Darm (als Chylomikronen) oder der
Leber (als Very-Low-Density Lipoproteine) antrans-
Das Fettgewebe
portiert werden. Weiße Adipozyten synthetisieren die
Lipoprotein-Lipase, die zu den Endothelien benach-
barter Kapillaren transferiert wird und dort Fettsäuren
von den Chylomikronen oder Very-Low-Density
Lipoproteinen freisetzt, die zu den Adipozyten trans-
portiert werden. Im glatten endoplasmatischen Reti-
kulum der Adipozyten werden aus ihnen Triglyzeride
resynthetisiert, die in die Fetttröpfchen integriert wer-
den. Der Abbau der gespeicherten Triglyzeride geschieht
mittels einer Hormon-sensitiven Lipase. Phospho-
rylierung dieser Lipase durch Glukagon, ACTH oder
Adrenalin hat einen lipolytischen Effekt zur Folge,
während Insulin and Prostaglandine die Lipase hem-
men und die Speicherung von Triglyzeriden stimulie-
ren. Zusätzlich zu seiner Hauptfunktion im Energie-
stoffwechsel wirkt das weiße Fettgewebe als Isolator,
stellt einen Wasserspeicher dar und dient als Bau-
material zur lageerhaltenden Umhüllung von Organen
(z. B. für Niere und Auge) und als druckelastisches
Polstermaterial an Stellen mechanischer Beanspruchung
(Handteller, Fußsohlen, Gelenke).
Weißes Fettgewebe sezerniert zahlreiche Eiweiße,
unter denen das Hormon Leptin eines der bedeutend-
sten ist. Leptin, dessen Synthese über die sympathische
Innervation des weißen Fettgewebes reguliert wird, ist
ein Sattheits-Hormon, das den Appetit und das
Energiegleichgewicht steuert und somit von Bedeutung
bei der Fettsucht ist.
Literatur
Cinti S (1999) The adipose organ. Milan: Kurtis
Cinti S (2001) The adipose organ: morphological perspectives of
adipose tissues. Proc Nutr Soc 60: 319
Cushman S (1970) Structure-function relationship in the adipose
cell: I. Ultrastructure of the isolated adipose cell. J Cell Biol 46: 326
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Klaus S (2004) Adipose tissue as a regulator of energy balance.
Curr Drug Targets 5: 241
Novakofski J (2004) Adipogenesis: usefulness of in vitro and in
vivo experimental models. J Anim Sci. 82: 905
Rayner DV (2001) The sympathetic nervous system in white adi-
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Trayhurn P, and Beattie JH (2001) Physiological role of adipose
tissue: white adipose tissue as an endocrine and secretory organ.
Proc Nutr Soc. 60: 329
Vergrößerung: x 3,700 (A); x 27,500 (B)
Abbildung 132 267

L
A

M
Nukleus
Golgi

Lb
B
268
DAS BRAUNE FETTGEWEBE
Das braune Fettgewebe unterscheidet sich sowohl in sei-
ner Feinstruktur als auch seiner Funktion vom weißen
Fettgewebe. Obwohl es beim Neugeborenen reichlich
vorhanden ist, findet es sich beim erwachsenen Men-
schen und Tier nur als kleine Gewebedepots an ver-
einzelten Körperstellen; bei Nagetieren typischerweise
im Bindegewebe zwischen den Schulterblättern. Seine
braune Farbe rührt her vom Reichtum an Mitochon-
drien. Die braunen Adipozyten enthalten im Gegensatz
zu den weißen Adipozyten zahlreiche, unterschiedlich
große Fetttröpfchen und werden als plurivakuoläre
(oder plurilokuläre) Adipozyten bezeichnet. Braune
Adipozyten sind polyedrisch und generell kleiner (20 bis
40 µm) als ihre weißen Cousins. Das kompakt aufge-
baute braune Fettgewebe ist sehr reich an Kapillaren
und sympathischen Nervenfasern.
Die Abbildung zeigt den typischen ultrastrukturellen
Aufbau brauner Adipozyten. Charakteristisch ist der im
Gegensatz zu den weißen Adipozyten zentral gelegene,
rundliche Zellkern (N). Das Zytoplasma ist erfüllt von
unterschiedlich großen Fetttröpfchen (L) und zahl-
reichen großen Mitochondrien (M) und enthält raues
wie glattes endoplasmatisches Retikulum. Mitochon-
drien und Fetttröpfchen sind im Nebenbild bei stärke-
rer Vergrößerung abgebildet. Die Mitochondrien zeich-
nen sich durch große, parallel angeordnete Cristae aus.
Des weiteren sind kleine Gruppierungen von Peroxiso-
men (PO) vorhanden. Die braunen Adipozyten sind
von einer Basalmembran umgeben. Der Reichtum des
braunen Fettgewebes an Kapillaren (Kap) manifestiert
sich selbst in der hier gezeigten einzelnen elektronen-
mikroskopischen Aufnahme. Zu erwähnen ist die enge
topografische Beziehung zwischen Adipozyten und den
Kapillarendothelien, wobei letztere oftmals hyper-
trophisch sein können (Kap*) und wahrscheinlich von
den NO- und CO-synthetisierenden braunen Adipo-
zyten funktionell beeinflusst werden.
Im Gegensatz zum weißen Fettgewebe werden die
Fettsäuren durch das braune Fettgewebe für die Wärme-
bildung verwendet, und dieser Prozess setzt ein, wenn
die Grenze der Thermoneutralität unterschritten wird.
Die Thermogenese wird maßgeblich von Noradrenalin
kontrolliert und erfolgt im Wesentlichen über `-adren-
ergische Rezeptoren der braunen Adipozyten. Die enge
räumliche Beziehung zwischen den Fetttröpfchen und
den Mitochondrien, wie im Nebenbild ersichtlich, ist
Das Fettgewebe
für die Thermogenese von Bedeutung. Die durch Lipo-
lyse der Triglyzeride der Fetttröpfchen generierten
freien Fettsäuren im Zytosol werden überwiegend von
den Mitochondrien aufgenommen und `-oxidiert. Der
durch die Fettsäureverbrennung generierte Protonen-
gradient in den Mitochondrien wird nicht wie üblich
zur ATP-Synthese verwendet, sondern durch das in der
inneren mitochondrialen Membran gelegene Uncoup-
ling Protein UCP1 (Thermogenin) in Wärmeenegie
umgewandelt. Braunes Fettgewebe liefert Wärmeener-
gie zur Kompensation bei akuter und chronischer Kälte-
exposition, nach der Geburt zur Aufrechterhaltung der
Körpertemperatur und während der Aufwachphase von
Winterschläfern.
Neben der eminenten Rolle bei der Kontrolle der
Thermogenese besitzt das Noradrenalin weitere Funk-
tionen, die mit der Proliferation und Differenzierung der
braunen Adipozyten im Zusammenhang stehen. Braune
(und weiße) Adipozyten entwickeln sich aus morpho-
logisch undifferenziert erscheinenden mesenchymalen
Zellen der Umgebung von Kapillaren, die aber bereits
Adipozyten-spezifische Transkriptionsfaktoren besitzen
und somit schon determiniert sind. Noradrenalin
fördert die Proliferation von Prä-Adipozyten, aber führt
nicht zur Induktion von UCP1. In reifen braunen
Adipozyten reguliert es jedoch direkt die Expression des
Gens für UCP1 und hemmt die Apoptose.
Literatur
Cannon B and Nedergaard J (2004) Brown adipose tissue: func-
tion and physiological significance. Physiol Rev 84: 277
Cinti S (1999) The adipose organ. Milan: Kurtis
Cinti S (2001) The adipose organ: morphological perspectives of
adipose tissues. Proc Nutr Soc 60: 319
Cinti S (2002) Adipocyte differentiation and transdifferentiation:
plasticity of the adipose organ. J Endocrinol Invest 25: 823
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Curr Drug Targets 5: 241
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the control of white and brown fat cell function. J Lipid Res 34:
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Trayhurn P and Nicholls D (1986) Brown adipose tissue. London:
Edward Arnold
Vergrößerung: x 10,300 (A); x 33,000 (Nebenbild)
Abbildung 133 269

Kap
Nukleus
L

M
L

PO L

Kap*
M

Nukleus

L
L M

M L

Kap
270
DER GELENKKNORPEL
Das Knorpelgewebe stellt ein spezialisiertes Bindege-
webe dar, welches mit dem Knochengewebe das Stütz-
gewebe des Körpers bildet. Drei Typen von Knorpel-
gewebe können unterschieden werden: der hyaline und
der elastische Knorpel und der Faserknorpel. Sie unter-
scheiden sich in der Menge und der Zusammensetzung
der Fasern der Matrix und in ihrer Verteilung im
Körper. Alle drei Knorpelformen sind gekennzeichnet
durch einen niedrigen Stoffwechsel, das Fehlen von
Blutgefäßen und die Fähigkeit zu wachsen. Knorpel-
gewebe besteht aus Chondrozyten, die in kleinen
Gruppen angeordnet die Chondrone bilden, und einer
Matrix, die den Hauptbestandteil des Gewebes aus-
macht. Die Matrix ist reich an Kollagenen und Proteo-
glykanen und besteht zu 60–80% aus Wasser. Diese
Zusammensetzung bedingt die elastischen Konsistenz
des Knorpels und seine hohe Zugfestigkeit. Hyaliner
Knorpel ist die häufigste Knorpelform und überzieht
beispielsweise die knöchernen Gelenkflächen, daher der
Name Gelenkknorpel.
Detaillierte Analysen zum Aufbau der Matrix des
Gelenkknorpels sind durch die Technik des Hochdruck-
gefrierens möglich geworden, die im Gegensatz zur
chemischen Fixierung das Knorpelgewebe gewisser-
maßen in seiner nativen Struktur erhält. Abbildungen A
und B zeigen elektronenmikroskopische Aufnahmen
von Gelenkknorpel, der mittels Hochdruckgefrierens
fixiert wurde und nach Gefriersubstitution in Epon
eingebettet wurde. Abbildung A zeigt zwei benachbarte
Chondrone, die von je zwei Chondrozyten gebildet sind.
Chondrozyten synthetisieren und sezernieren die Kom-
ponenten der Matrix und enthalten reichlich endoplas-
matisches Retikulum und einen gut entwickelten Golgi
Apparat. Die Chondrone sind von der perizellulären
Matrix (PM) umgeben, an die sich die territoriale
Matrix (TM) anschließt. Diese Territorien werden von
der interterritorialen Matrix (ITM) umgeben und
begrenzt. Die drei Matrixkomponenten unterscheiden
sich durch die Zusammensetzung und Anordnung der
Kollagenfasern. Die perizelluläre Matrix ist relativ
homogen, da sie keine Kollagenfasern enthält und von
10–15 nm dicken Filamenten durchsetzt ist. Die sich
anschließende territoriale Matrix besteht aus dichten
Netzwerken von 10–20 nm dicken Kollagenfasern. Die
Der Knorpel
interterritoriale Matrix, die den Hauptteil der Matrix
darstellt, ist ausschnittsweise in Abbildung B bei starker
Vergrößerung gezeigt. Sie besteht aus einem dichten
Netzwerk von 50-150 nm dicken Kollagenfasern, die in
zwei unterschiedlichen Anordnungen vorliegen. Zum
einem finden sich parallel zur Oberfläche ausgerichtete
Kollagenfasern, die in den tieferen Regionen radiär bis
schräg verlaufen und damit arkadenartige Formationen
bilden. In einem einzelnen Ultradünnschnitt, wie in
Abbildung B gezeigt, sind daher sowohl längsgeschnit-
tene (Pfeile) als auch quergeschnittene (offener Pfeil)
Kollagenfasern von unterschiedlichen Durchmessern
sichtbar. Die zwischen ihnen gelegenen Proteoglykane
stellen sich als eine feingranuläre Struktur dar (G). Im
Gegensatz hierzu sind die Kollagenfasern im unreifen
Knorpel ungeordnet, isotrop angeordnet.
Gelenkknorpel kann lokalisiert oder diffus ver-
kalken. Abbildung C zeigt kleine Verkalkungsherde im
Interterritorium menschlichen Gelenkknorpels. Da das
Gewebe konventionell chemisch fixiert wurde, ist die
Erhaltung der Matrix suboptimal.
Literatur
Ghadially F (1983) Fine structure of synovial joints. A text and
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Hunziker EB, Michel M, and Studer D (1997) Ultrastructure of
adult human articular cartilage matrix after cryotechnical pro-
cessing. Microsc Res Tech 37: 271
Hunziker EB, and Schenk RK (1984) Cartilage ultrastructure after
high pressure freezing, freeze substitution, and low temperature
embedding. II. Intercellular matrix ultrastructure – preservation
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Poole C (1993) The structure and function of articular cartilage
matrices. In: Joint cartilage degradation. Basic and clinical aspects
(Woessner J, and Howell D, eds). New York: Marcel Dekker, pp 1
Vergrößerung: x 4,000 (A); x 34,000 (B); x 26,000 (C)
Abbildung 134 271

PM

Nukleus
PM

TM
TM

PM

ITM
A

B C
272
OSTEOBLAST UND OSTEOZYT
Das Knochengewebe ist das Gewebe des Skeletts, das
dem Körper Festigkeit und Halt gibt und empfindliche
Organe gegenüber schädigenden Einwirkungen schützt.
Es ist ein besonders stabiles Binde- und Stützgewebe,
charakterisiert durch die Imprägnierung der extrazel-
lulären Matrix mit Kalzium- und Phosphatsalzen. In
einem komplexen Mineralisationsprozess werden
Hydroxylapatitkristalle an Komponenten der Grund-
substanz und kollagene Fibrillen angelagert. Die resul-
tierende spezielle Festigkeit und Stabilität des Gewebes
machen es für die geforderten Stütz- und Schutz-
funktionen besonders geeignet. Das Knochengewebe ist
gut vaskularisiert. Es bildet ein Reservoir für Kalzium-
und Phosphationen und ist in die Regulierung des
Blutkalziumspiegels mit einbezogen. Wenn es auch starr
und unflexibel erscheint, ist es doch metabolisch sehr
aktiv und sensitiv gegenüber geänderten Funktions-
zuständen. Funktions- und Belastungsänderungen im
Organismus führen zur Reorganisation des Knochen-
gewebes und Umbau des Knochens. Nicht nur während
der Embryonalentwicklung, sondern auch im erwachse-
nen Körper wird der Knochen in Anpassung an die
funktionelleen Bedingungen und die jeweilige Belas-
tungssituation laufend umorganisiert. Das ist verbunden
mit Knochenresorption, Neubildung von mineralisierter
Matrix und Gefäßneubildung.
Die Abbildungen A, B und C zeigen Ausschnitte aus
Knochengewebe der Maus. Ein Gefäßkanal mit einer
Blutkapillare (Kap), eingebettet in lockeres Binde-
gewebe mit Fibroblasten und Osteoprogenitorzellen, ist
in Abbildung A dargestellt. Aktive Osteoblasten (Obl)
sind epithelartig aufgereiht. Sie produzieren Osteoid, die
noch nicht mineralisierte Knochenmatrix, die haupt-
sächlich aus Typ I kollagenen Fibrillen, weniger Typ V
Kollagen, und einer Reihe von Grundsubstanz-
molekülen, Glykosaminoglykanen und Glykoproteinen,
wie Osteokalzin, Osteopontin und Osteonektin, besteht.
Osteoid ist als feine fibrilläre Schicht den Osteoblasten
benachbart zu sehen. Die nach außen anschließenden,
extrem elektronendichten, Areale entsprechen der schon
mineralisierten Knochenmatrix.
Der Osteoblast in Abbildung C zeigt Charakteristika
einer hochaktiven sezernierenden Zelle mit großen
Nukleolen, dicht gepacktem rauen endoplasmatischen
Retikulum (Ergastoplasma) und prominenten Golgi
Apparaten. Einer der Osteoblasten hat die epithelähn-
Der Knochen
liche Osteoblastenschicht bereits verlassen. Die polare
Organisation ist nicht mehr erkennbar. Er ist zum Teil
von seinem Produkt, dem Osteoid (O), umgeben und
mit einem dünnen Fortsatz (Pfeil) tritt er in Kontakt
mit einem der Fortsätze des „jungen“ Osteozyten
(Pfeil), der im untersten Segment der Abbildung zu
sehen ist. Der Osteozyt liegt bereits innerhalb der mine-
ralisierten Matrix (M), doch ist er nach wie vor
hochaktiv, wie aus dem überreichlich vorhandenen
rauen endoplasmatischen Retikulum zu erkennen ist. Es
ist dies ein wesentlicher Unterschied zum Osteozyten in
Abbildung B. Dieser „ältere“ Osteozyt liegt in einer
kleinen Höhle eingebettet in der mineralisierten Matrix.
Der schmale Zytoplasmasaum um den Kern enthält nur
wenige Organellen. Ein dünner Fortsatz reicht in einen
feinen Kanal (Pfeil). Unzählige solcher Canaliculi
durchsetzen die mineralisierte Matrix und bauen ein
Kommunikationssystem für die Ernährung der Zellen
innerhalb der harten Knochenmatrix auf. Nährstoffe
diffundieren aus den Blutgefäßen, die in den
Gefäßkanälen liegen, durch die Canaliculi zu den
Osteozytenhöhlen. Auch die Osteozyten selbst kommu-
nizieren über Gap Junctions.
In der Osteoidschicht (O) in Abbildung C sind feine
kollagene Fibrillen zu erkennen. Diese werden, Hand in
Hand gehend mit der Transformation der Osteoblasten
zu Osteozyten, weiter zu dickeren Bündeln zusam-
mengefasst. Die elektronendichten Flecken und Büschel
sind Mineralisationsareale und weisen darauf hin, dass
die Einlagerung von Mineralsalzen, die von den
Osteoblasten initiiert und kontrolliert wird, bereits
eingesetzt hat.
Literatur
Boskey AL (1992) Mineral-matrix interactions in bone and carti-
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during enchondral ossification. Trends Cell Biol 14: 86
Vergrößerung: x 3,000 (A); x 1,800 (B); x 9,400 (C)
Abbildung 135 273

Obl
Kap
Osteozyt

Obl

A B

Osteoblast

M M
M

Osteozyt

C
274
OSTEOKLAST
Knochenabbau durch Resorption der Knochenmatrix
ist Aufgabe der Osteoklasten, voluminöser vielkerniger
Zellen, die sich durch Fusion und spezielle Differen-
zierungsprozesse aus Vorläuferzellen der Monozyten/
Makrophagenlinie aus dem Knochenmark entwickeln.
Der Knochenabbau ist ein Prozess, der mit der Knochen-
neubildung eng verbunden ist und gewährleistet, dass
Knochengewebe laufend umgebaut werden kann. Durch
die Kopplung von Knochenneubildung und Knochen-
resorption kann ein komplexer Skelettteil ausgeformt
werden, können die Gefäßkanäle entstehen und die not-
wendigen Anpassungen des knöchernen Skeletts an die
Funktions- und Belastungsänderungen des Körpers
stattfinden. Die Knochenresorption durch Osteo-
klastenaktivität ist eine der Grundlagen für die Regu-
lierung des Blutkalziumspiegels. Die Osteoklasten treten
mit dem abzubauenden Knochen in Kontakt. An der
dem Knochen anliegenden Oberfläche wird die
Plasmamembran durch die Ausbildung zahlreicher
Einfaltungen massiv vergrößert. Es bildet sich die für
Osteoklasten charakteristische gekrauste resorbierende
Oberfläche, die „Ruffled Border“ (RB). Durch Abbau
von Knochenmatrix entsteht in diesem Bereich eine
Ausnehmung in der Matrix, die „Resorptionsbucht“
oder Howship’sche Lakune.
Abbildung A zeigt einen Osteoklasten in einer
Lakune innerhalb der mineralisierten Knochenmatrix,
die als sehr dichte Fläche im Bild links unten zu sehen
ist. Drei der Kerne sind angeschnitten. Die zur Matrix
hin gerichtete, „ausgefranst“ wirkende, Oberfläche
entspricht der resorptionsaktiven Oberflächenregion
des Osteoklasten. Details der Knochenresorptions-
oberfläche mit der charakteristischen Ruffled Border
kommen in Abbildung B zur Darstellung. Zahlreiche
feine, aus dem Knochen freigesetzte, nadelförmige
Kristalle sind an der Resorptionsfront zwischen den
Membraneinfaltungen zu sehen. Die Knochenresorp-
tion ist ein komplexer Vorgang, bei dem die Matrix
demineralisiert wird, die Mineralsalze im sauren Milieu
gelöst und die organischen Bestandteile enzymatisch
abgebaut werden. Die zu resorbierenden Knochen-
matrixareale werden lysosomalen Enzymen, die aus
sekretorischen Lysosomen der Osteoklasten stammen,
ausgesetzt. Die Enzyme werden in den Osteoklasten
synthetisiert, an der trans-Golgi Seite abgepackt und
über Exozytose in die Spalten zwischen den
Membraneinfaltungen der Ruffled Border abgegeben.
Der Knochen
Die Membran der Ruffled Border enthält vakuoläre
H+-ATPase und zeigt Gemeinsamkeiten mit der
Membran später Endosomenkompartimente. Es wird
ein saures Milieu, das die Aktivität der lysosomalen
Enzyme begünstigt, geschaffen. Die Knochenresorp-
tionsfläche mit der Ruffled Border ist durch ringförmig
angeordnete, spezielle Zytoplasmadomänen, die mit
zahlreichen Aktinfilamenten ausgestattet, doch im
wesentlichen frei von Zellorganellen sind, begrenzt.
Dieser Zytoplasmaring bildet eine Versiegelungszone,
die den Raum der Knochenresorption mit dem sauren
Milieu von der Umgebung abgrenzt. Teile des
Abdichtungszone (clear zone – CZ) sind in Abbildung B
sichtbar.
Die abgebaute Knochenmatrix wird von den
Osteoklasten zur weiteren Verarbeitung internalisiert, in
transzytotische Vesikel aufgenommen und an der, den
Resorptionsarealen gegenüberliegenden, basolateralen
Plasmamembran in den Extrazellularraum abgegeben.
An der Ruffled Border findet Sekretion und Endozytose
in zwei Subdomänen, einer peripheren Sekretions-
domäne (Vesikelfusionszone) und einer zentralen
Endozytosedomäne (Matrixaufnahmezone) in sehr ge-
ordneter Weise statt. Endozytose von der Ruffled Border
und Transzytose sind sehr rasch über Mikrotubuli
ablaufende Prozesse und sind von der Ansäuerung des
Extrazellularraums abhängig.
Literatur
Holtrop ME, and King GJ (1977) The ultrastructure of the osteo-
clast and its functional implications. Clin Orthop 123: 177
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brane. Localization of vacuolar H+-ATPase with the a3 isoform
during osteoclast differentiation. J Biol Chem 278: 22023
Vergrößerung: x 8,600 (A); x 21,800 (B)
Abbildung 136 275

Osteoklast

RB

CZ

RB

CZ
B
276
MYOFIBRILLEN UND SARKOMER
Die Skelettmuskelzellen, häufiger als Muskelfasern be-
zeichnet, sind vielkernige Synzytien, die während der
Entwicklung durch Fusion von Vorläuferzellen, den
Myoblasten, entstehen. Sie messen im Durchmesser
10–100µm und können Längen von wenigen Milli-
metern bis fast einen Meter erreichen. Die Kerne,
Hunderte an Zahl, sind in der Zellperipherie nahe der
Plasmamembran lokalisiert, während fast der gesamte
Innenraum der Muskelfaser von den längs ausgerich-
teten Myofibrillen eingenommen wird. Die Myofibrillen
setzen sich aus den 2 Klassen von Myofilamenten
zusammen: Den dicken Myosinfilamenten, die aus den
Myosin II Molekülen mit stabförmigen Körpern und
globulären Kopfdomänen aufgebaut sind, und den aus
Aktindoppelhelices bestehenden dünnen Aktinfilamen-
ten (siehe auch Abb. 68).
Die Abbildung zeigt einen Ausschnitt aus dem
Zytoplasma einer quergestreiften Skelettmuskelfaser mit
den parallel angeordneten Myofibrillen. Die Mitochon-
drien (M) sind in den schmalen Zytoplasmasträngen
zwischen den Myofibrillen, wo auch Glykogen (Stern)
angereichert ist, aufgereiht. In regelmäßigen Abständen
sind Membranprofile des sarkoplasmatischen Retiku-
lums mit Triaden (Pfeile; siehe auch Abb. 138) zu sehen.
Das Querstreifungsmuster im Zytoplasma der
Muskelfaser kommt durch die geordnete Aneinander-
reihung der Myofibrillen, die in gleicher Anordnung
Seite an Seite liegen, zustande, während die Streifung
der Myofibrillen die Anordnung der Myofilamente
spiegelt (siehe auch Nebenbild). Intensiver kontrastierte
A-Bänder, in denen die Filamente deutlich erkennbar
sind (A-Zonen oder A-Streifen, A – anisotrop), kommen
durch die dicken Myosinfilamente zustande. In den
weniger intensiv gefärbten I-Bändern (I-Zonen oder I-
Streifen, I – isotrop), die frei von Myosin sind,
dominieren die Aktinfilamente. Die dichten Z-Linien
im Zentrum der I-Bänder entsprechen scheibenförmi-
gen Plattformen, in denen die Aktinfilamente über
Alpha-Aktinin verankert sind. Nebulin windet sich um
die Aktinfilamente und unterstützt die Aktin-
verankerung. Weitere assoziierte Proteine sind Tropo-
modulin, ein Aktin-kappenbildendes Protein, das die
Länge der Aktinfilamente reguliert, und Titin, ein
Riesenmolekül mit elastischen Eigenschaften, das die
Die Skelettmuskulatur und Dystrophien
dicken Myosinfilamente mit der Z-Scheibe verbindet.
Eine weniger dichte Region im Zentrum der A-Zonen,
die H-Zone, entspicht der aktinfilamentfreien Zone mit
den stabförmigen Anteilen der Myosinmoleküle. Die
H-Zone ist durch die stärker kontrastierte M-Linie
zweigeteilt. Im Zentrum der der A-Zone werden über
verbindende Proteine die Myosinfilamente in Stellung
gehalten. Ein Intermediärfilamentgitter aus Desmin
bildet stabilisierende Quervernetzungen zwischen den
benachbarten Myofibrillen, die mit der Plasma-
membran und der extrazellulären Matrix über die
Kostameren, die gegenüber den Z- und M-Linien posi-
tioniert sind, verbunden sind. Dystrophin, ein stabför-
miges dimeres Protein, stellt durch Bindung an Aktin
einerseits und an Transmembranproteine, die wiederum
mit Laminin und Agrin in der Basallamina interagieren,
andererseits die Verbindung zwischen dem Zytoskelett
der Muskelfaser und der extrazellulärer Matrix her.
Tropomyosin und die drei Troponinmoleküle haben
eine Schlüsselfunktion bei der Initiation der
Kontraktion. Ausgelöst durch Ca2+-Bindung an eines der
Troponine werden durch Positionsänderung des
Tropomyosins die Myosinköpfchenbindungsstellen an
den Aktinmolekülen freigelegt. In Kontraktionszyklen
mit definiert aufeinanderfolgenden Schritten kommt es
durch Bindung, Stellungsänderung, Lösung, und aber-
malige Bindung der Myosinköpfchen an die Aktin-
moleküle zur gleitenden Bewegung der dünnen Aktin-
filamente entlang den dicken Myosinfilamenten. Dies
führt durch Verkürzung der Sarkomere zur Kontraktion
der Muskelfaser. Die benachbarten Sarkomere kontra-
hieren mit jeweils kurzer Zeitverschiebung.
Literatur
Clark KA, McElhinny AS, Meckerle MC, and Gregorio CC (2002)
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function. Annu Rev Cell Dev Biol 18: 637
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Tskhovrebova L, and Trinick J (2003) Titin: Properties and family
relationships. Nat Rev Mol Cell Biol 4: 679
Vergrößerung: x 33,000, x 48,500 (Nebenbild)
Abbildung 137 277

Sarkomer
Z Z
M
A A
H
I I
278
DAS SARKOPLASMISCHE RETIKULUM , TRIADEN, SATELLITENZELLE
Für die Muskelkontraktion müssen Ca2+-Ionen zur
Verfügung sein und rasch wieder entfernt werden. Die
rapide Freisetzung und Entfernung von Ca2+ wird durch
ein komplexes Membransystem, das jede Myofibrille
umgibt und unter dem Begriff „sarkoplasmatisches
Retikulum“ zusammengefasst wird, ermöglicht. Das
sarkoplasmatische Retikulum besteht aus 2 Teilen, dem
Longitudinalsystem oder L-System und dem Trans-
versalsystem oder T-Tubulussystem. Das L-System ist
longitudinal um die Myofibrillen ausgerichtet. Es
entspricht dem glatten endoplasmatischen Retikulum,
umgibt als komplexes Zisternensystem jede Myofibrille
und dient als Hauptkalziumspeicher. Die Endbereiche
sind zu Terminalzisternen erweitert. Das T-System
besteht aus tubulären Einstülpungen der Plasma-
membran, die zirkulär jede Myofibrille umgeben. Von
manchen Autoren wird die Bezeichnung „sarkoplasma-
tisches Retikulum“ ausschließlich für das L-System ver-
wendet. L- und T-System bilden gemeinsam die Signal-
transduktionsorganellen, die Triaden.
Eine Triade besteht aus 2 Terminalzisternen des
L-Systems, die ein T-Tubulussegment umschließen. In
den Triaden wird das, an der motorischen Endplatte
(siehe Abb. 139) ausgelöste, Aktionspotential von der
Plasmamembran über das T-System auf das L-System
übertragen. Dies löst Ca2+-Freisetzung aus dem L-
System in das Zytoplasma und die Initiation der
Muskelkontraktion aus (siehe Abb. 137).
Abbildung A zeigt Triaden (Pfeile) quer geschnitten
in den Zytoplasmasträngen zwischen oberflächlichen
Myofibrillen. In Abbildung B sind Triaden zum Teil
flach geschnitten. Sowohl die Terminalzisternen des
L-Systems (L) als auch die zentral gelegenen T-Tubuli
(T) sind deutlich zu erkennen. In den engen intermem-
branösen Zytoplasmaschlitzen zwischen den T-Tubuli
und den Membranen der L-Zisternen ist dichtes
Material sichtbar. Es entspricht Proteinkomplexen, die
in die Signalübertragung eingebunden sind. Span-
nungssensorproteine in der T-Tubulusmembran wer-
den nach Depolarisation der Plasmamembran aktiviert
und führen zu Konformationsänderungen der Proteine,
die ihrerseits Ca2+-Kanäle in der Membran der benach-
barten Terminalzisternen des L-Systems öffnen und die
rapide Freisetzung von Ca2+ in das Zytoplasma
bewirken. Gleichzeitig wird über Ca2+-aktivierte
Die Skelettmuskulatur und Dystrophien
ATPasen in der Membran des L-Systems Ca2+ in das
Lumen der Terminalzisternen rücktransportiert. In den
Skelettmuskelfasern sind die Triaden regelmäßig an den
Übergangsregionen der A- und I-Zonen lokalisiert
(siehe Abb. 137).
Häufig besteht eine enge Nachbarschaft von T-
Tubuli und Caveolae in der Plasmamembran der
Muskelfasern, wie das in Abbildung A zu sehen ist. Die
T-Tubulusmembranen sind, ebenso wie die Membranen
der Caveolae (siehe Abb. 46), reich an Cholesterin.
Caveolae scheinen in die Entwicklung des T-Tubulus-
systems eingebunden. Die Pfeilköpfe in Abbildung A
markieren die Basallamina, die die gesamte Oberfläche
der Muskelfasern kontinuierlich überzieht.
In Abbildung C ist eine Satellitenzelle, die in einer
gemeinsamen Basallaminahülle (Pfeilköpfe) in unmit-
telbarer Nachbarschaft zur Plasmamembran einer
Muskelfaser lokalisiert ist, dargestellt. Im Zytoplasma
der Satellitenzelle sind zahlreiche Ribosomen, Membra-
nen des endoplasmatischen Retikulums und Vesikel zu
erkennen, doch keine Myofibrillen. Dies entspricht dem
Bild einer Muskelvorläuferzelle. Skelettmuskulatur
besitzt Regenerationsfähigkeit nach Zellschädigungen
durch Verletzungen oder Myopathien. Normalerweise
ruhende Satellitenzellen werden aktiviert, proliferieren
und können durch Fusion neue mehrkernige Muskel-
fasern hervorbringen.
Literatur
Franzini-Armstrong C, Protasi F, and Ramesh V (1998)
Comparative ultrastructure of Ca2+ release units in skeletal and
cardiac muscle. Ann NY Acad Sci 853: 20
Mazzarello P, Calligaro A, Vannini V, and Muscatello U (2003)
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Wagenknecht T, and Rademacher M (1997) Ryanodine receptors:
Structure and macromolecular interactions. Curr Opin Struct
Biol 7: 258
Vergrößerung: x 43,000 (A); x 69,000 (B); x 12,500 (C)
Abbildung 138 279

Triade
L T L

L L

A B

Satellitenzelle

C
280
MOTORISCHE ENDPLATTE
Als Motorische Endplatten werden die speziellen neuro-
muskulären chemischen Synapsen an den Skelett-
muskelfasern bezeichnet. Sie entstehen an den Kontakt-
stellen der Endverzweigungen des Neuriten (Axon, siehe
Abb. 144, 148) eines Motorneurons mit der Oberfläche
einer Muskelfaser. Motorische Endplatten haben einen
charakteristischen Aufbau. Die Verzweigungen des
Axons endigen in kolbenförmigen Auftreibungen, den
Endkolben, die einzeln in flachen Vertiefungen der
Muskelzelloberfläche eingebettet sind. Die Basallamina
um die Gliazellhülle des Axons (siehe Abb. 148) setzt
sich direkt in die Basallamina der Muskelzelle und auch
in den synaptische Spalt zwischen der Plasmamembran
der Endkolbens und derjenigen der Muskelfaser fort.
Der Endkolben des Axons bildet den präsynaptischen
Teil der neuromuskulären Verbindung, in dem der
Transmitter Azetylcholin in synaptischen Vesikeln
gespeichert ist. Die Erregungsübertragung erfolgt durch
Freisetzung des Azetylcholins durch Exozytose in den
synaptischen Spalt und Bindung an spezifische Rezep-
toren in der Plasmamembran der Muskelfaser. Die
Plasmamembran der Muskelfaser bildet den postsynap-
tischen Teil der motorischen Endplatte. Sie ist hier
durch extensive Faltung stark vergrößert und in funk-
tionell unterschiedliche Domänen gegliedert. Enge, zum
Teil verzweigte, trogartige Einsenkungen, in die hinein
sich der synaptische Spalt fortsetzt, wechseln mit
schmalen oberflächlichen Leisten. Die Membran-
domänen im Bereich der Leisten tragen die Azetyl-
cholinrezeptoren, während die Ionenkanäle in den
Membrandomänen im Bereich der Tröge lokalisiert
sind. Dadurch ist eine differenzierte Antwort auf einen
Nervenimpuls möglich. Die Bindung des in den synap-
tischen Spalt freigesetzten Azetylcholins an die Rezepto-
ren in der Leistenmembran führt zum Öffnen der
Kationenkanäle in den Trögen. Natriumeinstrom
bewirkt eine lokale Membrandepolarisation, die über
die Plasmamembran und das T-Tubulussysten die
Triaden erreicht, wo das Signal auf das L-System über-
tragen wird, aus dem die kontraktionsauslösende Ca2+-
Freisetzung erfolgt (siehe Abb. 138). Eine kontinuier-
liche Stimulierung wird durch den raschen Abbau des
Azetylcholins durch die Azetylcholinesterase verhindert.
Die Skelettmuskulatur und Dystrophien
Die Abbildung zeigt ein Segment aus einer quer-
gestreiften Muskelfaser im Bereich einer motorischen
Endplatte. Drei von den hier akkumulierten Kernen
sind angeschnitten. Das Zytoplasma enthält zahlreiche
Mitochondrien, endoplasmatisches Retikulum und freie
Ribosomen. Myofibrillen (Sterne) sind im engeren Um-
feld der motorischen Endplatte sehr spärlich. Im linken
unteren Bildsegment ist die eigentliche neuromuskuläre
Verbindung zu sehen. Der in einer Einsenkung der
Muskelfaser liegende Endkolben eines Axons ist in
diesem Querschnitt vom Zytoplasma der Muskelzelle
allseits umgeben. Im Zytoplasma des Axons sind
Mitochondrien und synaptische Vesikel erkennbar. Die
Pfeile weisen auf die für die motorische Endplatte
charakteristische labyrinthartige Faltenregion mit den
schmalen Trögen und den dazwischen liegenden
Leisten. Die Fortsetzung des synaptischen Spalts in die
Tröge hinein ist deutlich erkennbar, ebenso die feine
Basallamina, die die Plasmamembran auch im Bereich
der Einsenkungen kontinuierlich überzieht. Membran-
konvolute des postsynaptischen Apparats einer neuro-
muskulären Verbindungsregion sind auch im linken
oberen Bildteil zu sehen (Pfeile), doch ist hier das Axon
nicht angeschnitten.
Die Abbildung zeigt auch, dass die gesamte Muskel-
faser von einer Basallamina überzogen und in lockeres
Bindegewebe, das Endomysium, eingebettet ist.
Literatur
Burden SJ (2002) Building the vertebrate neuromuscular synapse.
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Towler MC, Kaufman SJ, and Brodsky FM (2004) Membrane
traffic in skeletal muscle. Traffic 5: 129
Vergrößerung: x 9,800
Abbildung 139 281

Motorische Endplatte

*
Axon
282
MUSKELDYSTROPHIEN
Muskeldystrophien sind eine Gruppe kongenitaler
Erkrankungen, die durch fortschreitenden Muskel-
schwund zu Muskelschwäche führen. Wegen der
Schädigung und infolge von Nekrosen der Muskelfasern
kommt es zu erhöhten Serumwerten von Kreatinkinase.
Die verschiedenen Typen von Muskeldystrophien sind
durch Mutationen im Dystrophin Gen oder den Genen
für die Komponenten des Dystrophin-Glykoprotein
Komplexes, des Sarkoglykan Komplexes und des
Laminin 2 verursacht. Durch die Schädigung auch nur
einer einzigen dieser Komponenten kommt es zur Un-
terbrechung der mechanischen Verbindung zwischen
dem Aktinzytoskelett der Muskelfasern und der Basal-
membran.
Bei der Duchenne Muskeldystrophie finden sich in
Gruppen angeordnete degenerierende und nekrotische
Muskelfasern, die von normal erscheinenden
Muskelfasern umgeben sind. In Abb. A ist eine dys-
trophische Muskelfaser (rechts) und eine benachbarte
fast normal erscheinende Muskelfaser zu sehen, Die
Veränderungen der dystrophischen Muskelfasern sind
komplex und betreffen primär die Struktur und
Funktion des Sarkolemmas (Plasmamembran). Früh-
zeitig kommt es zu fokalen Brüchen des Sarkolemmas
gefolgt von der Auflösung der Zellmembran. Das
geschädigte Sarkolemma ist durchlässig für Proteine.
Die Kalziumhomöostase der Muskelfasern ist ebenfalls
gestört. Eine erhöhte Konzentration von intrazellulärem
Kalzium führt nicht nur zur Hyperkontraktion der
Muskelfaser sondern auch über die Kalzium-bedingte
Aktivierung von Proteasen zur ihrer Lyse. Regelmäßig
werden keilförmig gestaltete abnormale Sarkomer-
abschnitte beobachtet. In den Abbildungen A und B ist
die pathologische Sarkomerstruktur klar ersichtlich.
Von den Z-Bändern sind nur noch Reste nachweisbar
(Pfeile). Die Myofibrillen sind zwar vorhanden, aber
unregelmäßig angeordnet. Es finden sich reichlich
Glykogenpartikeln (Sterne). In frühen Stadien der
Duchenne Muskeldystrophie kann es als Reaktion auf
Nekrosen zur Regeneration von Muskelfasern kommen.
Letztere sind oftmals dünner und weisen zentral und
nicht wie normalerweise peripher gelegene Zellkerne
auf (Abb. C). Als Reaktion auf die Muskelfaser-
untergänge kommt es zur Vermehrung des Binde- und
Fettgewebes.
Die Skelettmuskulatur und Dystrophien
Die Muskeldystrophien vom Typ Duchenne und
Becker werden X-chromosomal rezessiv vererbt und
sind durch das vollständige Fehlen oder die Anwesen-
heit geringer Mengen verkürzten Dystrophins verur-
sacht. Die kongenitale Muskeldystrophie vom Typ
Fukuyama ist durch die Unterglykosilierung des Dystro-
glykans verursacht. Dystroglykan ist der Hauptbestand-
teil des Dystrophin-Glykoprotein Komplexes. Mutati-
onen des Sarkoglykans, eines integralen Membran-
glykoproteins, verursachen mitunter die Gliedergürtel-
typ (Limb-Girdle) Dystrophie. Mutationen des Laminin
2 (Merosin) verursachen die Merosin-Mangel Muskel-
dystrophie.
Literatur
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Hill, pp 5493
Vergrößerung: x 12,000 (A); x 44,000 (B); x 6,500 (C)
Abbildung 140 283

Muskeldystrophie (Duchenne)

Nukleus

B
284
MYOFIBRILLEN , GLANZSTREIFEN
Bezogen auf die Myofibrillenorganisation gehört die
Herzmuskulatur, ebenso wie die Skelettmuskulatur,
zum Typ des quergestreiften Muskelgewebes. Die
Herzmuskelzellen sind voluminöse Zellen mit einem
großen, zentral gelegenen Kern. Über charakteristische
End-zu-End-Zellkontakte, die Disci intercalares (Glanz-
streifen), stehen sie mit den Nachbarzellen in Verbin-
dung und sind mit ihnen funktionell gekoppelt. Die
Endbereiche der Herzmuskelzellen sind verzweigt und
unterschiedlich lang, sodass die Zellverbindungs-
regionen stufenförmig, mit transversalen Abschnitten
im rechten Winkel zu den Myofibrillen und longitudi-
nalen Abschnitten parallel zu den Myofibrillen, aufge-
baut sind. In den Disci intercalares der Herzmuskulatur
sind 3 Klassen von Zell-Zell Kontakten in charakteristi-
scher Weise lokalisiert: Fasciae adhaerentes bilden band-
förmige Haftareale im transversalen Teil der Disci inter-
calares. In ihnen sind die Aktinfilamente der jeweils
endständigen Sarkomeren der Nachbarzellen verankert.
Die Fasciae adhaerentes bilden in der Herzmuskulatur
die Grundlage für ein zellübergreifendes Kontraktions-
system und ermöglichen die mechanische Kopplung der
benachbarten Zellen. Maculae adhaerentes (Fleck-
desmosomen, siehe auch Abb. 79) verbinden die be-
nachbarten Zellen sowohl in den transversalen, als auch
den lateralen Abschnitten der Disci intercalares und ver-
stärken die mechanische Fixierung der Nachbarzellen.
Gap Junctions (Nexus, Maculae communicantes, siehe
auch Abb. 78) befinden sich im longitudinalen Teil der
Glanzstreifen, wo sie gegenüber den Kontraktions-
kräften geschützt sind. Sie erlauben Ionentransport
zwischen den benachbarten Zellen, dienen der Erre-
gungsweiterleitung und bilden die Grundlage für die
elektrische Kopplung der Nachbarzellen. Wenn auch das
Gewebe aus Einzelzellen aufgebaut ist, besteht im Fall
der Herzmuskulatur doch ein funktionelles Synzytium.
Abbildung A zeigt aus dem Myocard eines Kanin-
chens die Zellkontaktregion eines Glanzstreifens im
Bereich einer Übergangszone des transversalen in den
logitudinalen Abschnitt. Pfeile markieren eine Gap
Junction im longitudinalen Abschnitt. Beidseits benach-
Die Herzmuskulatur
bart finden sich Haftareale in Form von Maculae
adhaerentes. Im transversalen Abschnitt verläuft die
Schnittebene durch die sehr dichte Plaqueregion einer
Fascia adhaerens. Die Plasmamembranen und der
Interzellularraum sind im Bereich der Fascia adhaerens
auf Grund der Schnittführung nicht dargestellt, doch
auf beiden Seiten außerhalb der Glanzstreifenregion
sichtbar. Die Zellen sind von einer kontinuierlichen
Basallamina überzogen und zeigen zahlreiche oberfläch-
lich lokalisierte Vesikel und Caveolae. Triaden sind nicht
so regelmäßig angeordnet und prominent wie in den
Skelettmuskelfasern, doch sind die Myofibrillen von
anastomosierenden Netzwerken des sarkoplasmatischen
Retikulums umgeben (Pfeilköpfe in Abb. A und B). An
Stelle von Triaden werden oft Diaden gebildet.
Mitochondrien (M) mit dicht gepackten Cristae sind
zahlreich in den Zytoplasmaarealen zwischen den
Myofibrillen, wo auch Glykogen eingelagert ist. Die
Energie-produzierenden und Energie-speichernden
Organellen und Strukturen liegen eng benachbart zu
den Energie-verbrauchenden Kontraktionseinheiten,
den Myofibrillen.
Die Region innerhalb des Rechtecks in Abbildung B
wird in stärkerer Vergrößerung im Nebenbild gezeigt. In
diesem Querschnitt durch eine A-Zone einer Myofibrille,
wo die dicken Myosinfilamente und die dünnen Aktin-
filamente ineinander geschoben sind und die Filament-
regionen sich überlappen, ist deutlich erkennbar, dass
jedes Myosinfilament von regelmäßig hexagonal ange-
ordneten Aktinfilamenten umgeben ist.
Literatur
Franzini-Armstrong C, Protasi F, and Ramesh V (1998) Compa-
rative ultrastructure of Ca2+ release units in skeletal and cardiac
muscle. Ann NY Acad Sci 853: 20
Miller MK, Granzier H, Ehler E, and Gregorio CC (2004) The
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Severs NJ (2000) The cardiac muscle cell. Bioessays 22: 188
Vergrößerung: x 35,500 (A); x 114,000 (B); x 273,600 (Nebenbild)
Abbildung 141 285

M
M

M
Fa
sci
a
ad
ha
er
en
s

B
286
GLATTE MUSKELZELLEN, SYNAPSE Á DISTANCE
Die glatte Muskulatur, die die kontraktile Wand der
inneren Hohlorgane und Gefäße bildet, besteht aus
spindelförmiger Zellen, die meist in Bündeln organisiert
sind und je nach Lokalisation und Aufgabe eine Länge
von 20µm in der Wand der Blutgefäße, über 200µm in
der Darmwand und bis zu 500µm in der Wand der
Gebärmutter während der Schwangerschaft erreichen
können. Die glatten Muskelzellen besitzen einen zentral
gelegenen länglichen Kern mit spitz zulaufenden Enden.
Im benachbarten, ebenfalls spindelförmigen Zyto-
plasmabereich sind die Organellen und Kompartimente
des biosynthetischen Systems konzentriert. Der größte
Teil des Zytoplasmas wird vom kontraktilen Apparat
aus Myosin II, Aktin und assoziierten Proteinen,
wie Tropomyosin und Caldesmon, eingenommen.
Calmodulin reguliert als Ca2+-bindendes Protein die
intrazelluläre Ca2+-Konzentration. Anders als bei der
Kontraktion der quergestreiften Muskulatur, wo der
Troponin-Tropomyosinkomplex die kontraktionsaus-
lösende Schlüsselrolle innehat, wird die Kontraktion der
glatten Muskulatur über das Ca2+-Calmodulin/Myosin-
Leichte Ketten-Kinasesystem reguliert und durch
Phosphorylierung einer der leichten Ketten in der
Myosin-Köpfchendomäne initiiert.
Ultrastrukturell dominieren die Aktinfilamente.
Über Alpha-Aktinin sind sie in den dichten Körpern,
Arealen und Plaques, die an der Plasmamembran haften
und als ein anastomosierendes Netzwerk in des
Zellinnere ausstrahlen (siehe auch Abb. 118), verankert.
Die dichten Körper und Plaques entsprechen den Z-
Scheiben in der quergestreiften Muskulatur. Die
Intermediärfilamente der glatten Muskelzellen bestehen
aus Desmin oder, im Fall der Gefäßmuskulatur, aus
Vimentin. Innerhalb eines Muskelzellbündels kommu-
nizieren die glatten Muskelzellen untereinander über
Gap Junctions.
Die Abbildungen A und B zeigen glatte Muskulatur
aus der Rattendünndarmwand. Der größte Teil des
Zytoplasmas der glatten Muskelzellen, die in Abbildung
A im unteren Bildteil längs und im oberen Teil quer
geschnitten sind, wird von den kontraktilen Filamenten
eingenommen. Mitochondrien (M) liegen zwischen den
Filamenten und in der Zellperipherie aufgereiht, vor
allem aber gemeinsam mit endoplasmatischem Retiku-
lum, freien Ribosomen, Golgi Apparat und Lysosomen
in den spindelförmigen Zytoplasmaarealen, die von der
Die glatte Muskulatur
Region um die Kernpole ausgehen. In Abbildung A ist in
der zuoberst liegenden, längs geschnittenen, glatten
Muskelzelle solch ein Zytoplasmabereich zu sehen.
Dichte Areale, die als Plattformen für die Verankerung
der Aktinfilamente dienen, sind im Zellinneren zwischen
den Filamenten erkennbar (Sterne in Abb. A) und an
denjeingen Stellen, wo sie mit der Plasmamembran ver-
bunden sind, besonders auffällig (Area densa, Abb. B).
Die glatten Muskelzellen produzieren Bestandteile der
die Zelloberfläche kontinuierlich überziehenden
Basallamina (Pfeilköpfe), zum Beispiel Typ IV Kollagen,
Laminin und Proteoglykane. In beiden Aufnahmen sind
Caveolae zu sehen, die in Gruppen die Oberfächenareale
der glatten Muskelzellen besetzen. Oft besteht eine enge
Nachbarschaft zu glatten Membranen des endoplasma-
tischen Retikulums (siehe Abb. 46A), die auf mögliche
Analogien zu den T- und L-Systemen in der querge-
streiften Muskulatur hinweisen.
Die glatten Muskelzellen sind von einem feinen,
lockeren Bindegewebe, dem Endomysium, umgeben.
Abbildung B zeigt in einiger Distanz zu der Oberfläche
der glatten Muskelzelle ein Axon des vegetativen
Nervensystems, eingescheidet in eine Basallamina und
eingebettet in ein Netzwerk von kollagenen Fibrillen
(K). Benachbart liegt ein Fibroblastenfortsatz (F). Im
Axon, das hier keine Gliahülle besitzt (siehe Abb. 146),
sind nahe der Plasmamembran zahlreiche synaptische
Vesikel (Pfeile) akkumuliert. Da die hier freigesetzten
Transmitter über eine gewisse Distanz zur Plasma-
membran der Muskelzelle, die die spezifischen Rezep-
toren trägt, diffundieren, wird diese Art der Synapsen als
„Distanzensynapse“ (synapse á distance) bezeichnet.
Literatur
Baron CB, and Coburn RF (2004) Smooth muscle raft-like mem-
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Vergrößerung: x 10,300 (A); x 52,000 (B)
Abbildung 142 287

M
*

Area densa

Caveolae

Axon
F

B K
288
CADASIL
CADASIL ist die Abkürzung für Cerebrale Autosomal
Dominante Arteriopathie mit subkortikalen Hirnin-
farkten und Leukoenzephalopathie und ist die häufigste
Form von vererbtem Schlaganfall. Üblicherweise tritt
die Krankheit um das 45. Lebensjahr auf und ist ge-
kennzeichnet durch wiederholte Schlaganfälle, Verän-
derungen der weißen Substanz des Gehirns, Migräne
und fortschreitende Demenz. CADASIL wird durch
Mutationen im Notch3 Gen verursacht, das auf Chro-
mosom 19q12 liegt. Die in den EGF-Motiven auftre-
tenden Mutationen führen entweder zum Verlust oder
zur Zunahme von Zystein. Die Notch Proteine sind
wichtige Regulatoren für das Schicksal von Zellen oder
sind in die Kontrolle von Signalen für die Zellprolifera-
tion und -reifung einbezogen.
Die charakteristischen Veränderungen bei CADASIL
bestehen in einer systemischen arteriellen Vaskulo-
pathie, die vorwiegend die glatte Muskulatur kleiner
Arterien betrifft. Es sind trotz der vorherrschenden kli-
nischen Symptomatik aber nicht nur die kleinen Arterien
der weißen Substanz betroffen, sondern auch die der
Haut. Dadurch kann mittels der elektronenmikrosko-
pischen Untersuchung einer Hautbiopsie die Diagnose
gestellt werden. In den Abbildungen A und B sind die
typischen Veränderungen sichtbar, die in einer Ein-
engung des Lumens der kleinen Arterien durch eine
Intimaverdickung (Abb. A rechts oben), einem fort-
schreitenden Zerfall der glatten Muskelfasern und einer
Vermehrung der extrazellulären Substanz bestehen.
Obwohl diese Veränderungen auch lichtmikroskopisch
nachweisbar sind, ist die entscheidende pathogno-
monische Veränderung für die eindeutige Diagnose-
stellung von CADASIL nur elektronenmikroskopisch
nachweisbar. Sie besteht im Auftreten begrenzter
Ablagerungen eines granulären elektronendichten
Materials zwischen der Plasmamembran der glatten
Muskelfasern und der sie umgebenden Basalmembran
(Pfeile in Abb. A und B). Bei starker Vergrößerung, wie
in Abbildung B gezeigt, können diese extrazellulären
CADASIL Ablagerungen (Pfeile) eindeutig von den
ebenfalls begrenzten elektronendichten, aber intra-
Die glatte Muskulatur
zellulär gelegenen Anheftungsstellen für Myofilamente
(Pfeilkopf) unterschieden werden.
Die chemische Natur der CADASIL Ablagerungen ist
gegenwärtig unklar. Es bleibt zu beweisen, ob es sich bei
ihnen um die extrazellulären Domänen von Notch3
Protein handelt, die bekanntermaßen in kleinen
Arterien bei CADASIL angehäuft sind.
Literatur
Baudrimont M, Chabriat H, Vahedi K, and Bousser M (1998)
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to chromosome 19q12. Nat Genet 3: 256
Vergrößerung: x 6,500 (A); x 36,000 (B)
Abbildung 143 289

Endothel

Erythrozyten

Nukleus

B
290 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
ZNS – NEURON, GLIAZELLEN
Das Nervengewebe mit den strukturellen und funktio-
nellen Grundlagen für die anspruchvollsten Funktionen
und Aufgaben des Organismus, einschließlich Gedächt-
nisleistungen und Kreativität, steht im Zentrum der
zell- und molekularbiologischen Forschung und zieht
die höchste Aufmerksamkeit auf sich. Aktuelle Befunde
über die Lokalisation neuronaler Stammzellen inner-
halb bestimmter Gehirnabschnitte erlauben revolutio-
när neue Einblicke in die Vorgänge bei der Neurogenese
und geben Hoffnung auf neue Behandlungsstrategien
zur Gewebserneuerung nach Verletzungen und bei
neurodegerativen Erkrankungen.
Die Abbildungen A und B zeigen Ausschnitte aus
dem Nervengewebe des zentralen Nervensystems. Der
erste Blick auf die Ultrastrukturen des Hirnparenchyms
ist verwirrend. Es ist schwer oder unmöglich, jedes
Detail zu identifizieren und mit Sicherheit einem der
beiden Zelltypen des Nervengewebes, Nervenzellen
(Neuronen) und Gliazellen, zuzuordnen. Der große
Zellkörper einer Nervenzelle mit dem Perikaryon und
mit einem dendritischen Fortsatz ist in Abbildung A zu
sehen. Das umgebende Hirnparenchym besteht aus
zahllosen Nerven- und Gliazellfortsätzen, die eng
benachbart Seite an Seite liegend den engen, spaltförmi-
gen Interzellularraum begrenzen.
Die Neuronen sind die strukturellen und funktio-
nellen Einheiten im Nervengewebe. Sie bestehen aus
dem Zellkörper mit Kern und Perikaryon, einem
Fortsatz für die Impulsleitung aus dem Zellkörper her-
aus in die Peripherie, dem Neuriten, einem oder
mehreren Fortsätzen, die hauptsächlich Impulse aus der
Peripherie zum Perikaryon leiten, den Dendriten, und
den Synapsenregionen, wo Impulse auf andere
Neuronen oder Effektorzellen übertragen werden (siehe
auch Abb. 139). Der Nervenzellkörper enthält den Kern
und das den Kern umgebende Zytoplasma, das Peri-
karyon, wo sich alle Teile des biosynthetischen Systems,
Ribosomen, endoplasmatisches Retikulum, Golgi
Apparat und alle anderen, für das zelluläre Leben
notwendigen, Organellen befinden. Eine dem Peri-
karyon vergleichbare Organellenausstattung besitzen
die Dendriten. In den Abbildungen ist zwar der Axon-
hügel, die Übergangsgangsstelle des Perikaryons in den
Neuriten, anschnittsbedingt nicht zu sehen, doch sind in
beiden Abbildungen zahlreiche Neuriten, die innerhalb
der Gliazellhüllen als Achsenzylinder (Axone) erschei-
nen, dargestellt. Die Nervenzellfortsätze liegen oft in
Gruppen und sind von feinen Gliazellfortsätzen ein-
gescheidet. In den Axonen sind Anschnitte von Mito-
chondrien zu sehen, ebenso zahlreiche Profile von
Neurofilamenten und Mikrotubuli (Neurotubuli), die
Schienen für den axoplasmatischen Transport bilden. In
beiden Abbildungen, vor allem im rechten Bildsegment
von Abbildung B, sind markhaltige Nervenfasern, in
denen die Axone von Myelinscheiden (Sterne, siehe
auch Abb. 148) umgeben sind, zu sehen. Die Axon-
scheiden aus Myelin werden im zentralen Nervensystem
von speziellen Gliazellen, den Oligodendrozyten, ge-
bildet. Andere Gliazellen sind die protoplasmatischen
und fibrillären Astrozyten, die mit ihren Fortsätzen in
enger Beziehung zu den Oberflächen der Neuronen all
ihre Teile, Perikaryon und Fortsätze, umhüllen.
Astrozyten bilden die Grenzschichten an der Oberfläche
des Nervengewebes zur Pia mater und, mit füßchenför-
migen Fortsätzen, die Grenzschichten um die Blut-
gefäße, die perivaskulären Hüllen (Abb. 145).
Literatur
Bannai H, Inoue T, Nakayama T, Hattori M, and Mikoshiba K
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Vergrößerung: x 5,500 (A); x 26,500 (B)
Abbildung 144 291

Dendrit

Perikaryon

B
292
ZNS – BLUT-HIRNSCHRANKE, SYNAPSEN
Seit mehr als 100 Jahren ist bekannt, dass das Gewebe
des Gehirns gegenüber schädigenden Substanzen aus
dem Blut durch eine spezielle Schranke geschützt ist.
Diese Blut-Hirn-Schranke beeinflusst den para- und
transzellulären Verkehr. Tight Junctions zwischen den
benachbarten Zellen im kontinuierlichen Endothel bil-
den abdichtende Versiegelungsbänder. In den Endothel-
zellmembranen existieren spezifische Transportmecha-
nismen auch für kleine Moleküle und die Anzahl der
Rezeptoren ist gering. Substanzen, die entkommen, wer-
den durch ein spezielles Transportsystem in den
Endothelzellen wieder in das Blut rücktransportiert.
Die zwei benachbarten kleinen Gefäße (Sterne) in
Abbildung A sind repräsentativ für die Mikrovaskulatur
im Gewebe des Gehirns. Sie werden von einem konti-
nuierlichen Endothel ausgekleidet. Transportvesikel
sind nur spärlich zu sehen, wie es dem eingeschränkten
transzellulären Transport entspricht. Aus dem Kno-
chenmark stammende perivaskuläre Zellen begleiten
die Gefäße. Noch innerhalb der Basallamina (Pfeil-
köpfe) befindet sich ein Perizyt in engem Kontakt zum
Endothel. In der Nachbarschaft der Gefäße sind Zell-
körper mehrerer Astrozyten zu sehen und zahlreiche
Profile von Gliazellfortsätzen liegen nahe der Basallami-
na, wo sie eine perivaskuläre Gliaschicht, die Membrana
gliae perivascularis, aufbauen.
Die Abbildungen B und C zeigen Beispiele che-
mischer Synapsen, wo an spezialisierten Haftregionen
der Neuronen die Nervenimpulse durch Neurotrans-
mitter übertragen werden. Eine Synapse besteht aus
einem präsynaptischen Teil (prä), oft der Endkolben
eines Axons, wo synaptische Vesikel, die den Transmitter
enthalten, angehäuft sind (Pfeile), und einem post-
synaptischen Teil (post), oft ein dornenförmiger
Fortsatz eines Dendriten. Ein solcher ist quergeschnit-
ten, umgeben von präsynaptischen Axonendigungen
mit synaptischen Vesikeln, in Abbildung B zu sehen. Die
prä- und postsynaptischen Membranen sind durch den
sehr regelmäßigen, 20–30nm messenden, synaptischen
Spalt getrennt. Ausgelöst durch Ca2+-Einstrom über
spannungsgesteuerte Kanäle, werden die Transmitter
durch Fusion der Vesikelmembran mit der präsynap-
tischen Membran in den synaptischen Spalt freigesetzt
und von spezifischen Rezeptoren in der postsynap-
tischen Membran gebunden. Als Folge kommt es durch
Öffnen von Ionenkanälen zu Änderungen der Pola-
risation der postsynaptischen Membran mit erregender
Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
oder hemmender Wirkung. Nach der Transmitter-
exozytose werden Membrankomponenten reinternali-
siert, entweder über „kiss and run“-Mechanismen oder
Rezeptor-gesteuerte Endozytose.
Die prä- und postsynaptischen Membranen besitzen
speziell aufgebaute Funktionsdomänen, die sich mor-
phologisch durch Membranverdichtungen auszeichnen.
Entsprechend werden asymmetrische und symmet-
rische Synapsentypen unterschieden. Ein Beispiel einer
asymmetrischen Synapse ist in Abbildung B zu sehen.
Asymmetrische Synapsen, die hauptsächlich exzita-
torischen Synapsen mit Glutamat als Transmitter ent-
sprechen, zeigen besonders prominente postsynaptische
Membranverdichtungen (Pfeilkopf). Auch sind über-
wiegend kugelförmige synaptische Vesikel (Pfeile)
charakteristisch. Im Gegensatz dazu zeigen die sym-
metrischen Synapsen (Abb. C), die hauptsächlich inhi-
bitorischen Synapsen entsprechen, prominente Mem-
branverdichtungen an Membranarealen beider, der
post- und auch präsynaptischen, Membranen und es
dominieren abgeflachte, scheibenförmige synaptische
Vesikel (Pfeile in C).
Literatur
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Yamagata M, Sanes JR, and Weiner JA (2003) Synaptic adhesion
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Vergrößerung: x 6,600 (A); x 53,000 (B);x 82,000 (C)
Abbildung 145 293

Blut-Hirnschranke

Perivaskuläre Zellen

*
* Astrozyten

Perizyt

Asymmetrische Synapse Symmetrische Synapse

prä

post
prä

post

B C
294 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
MARKLOSE NERVENFASER
Im peripheren Nervensystem sind die Nervenzellfort-
sätze, die Neuriten (Axone) und die langen Dendriten
(dendritische Axone), von spezialisierten Gliazellen, den
Schwann’schen Zellen, umhüllt. Die Axone, ihre
Schwann’sche Hülle und die umgebende Basallamina
bilden die impulsleitenden Strukturen, die Nerven-
fasern. Bezugnehmend darauf, ob eine Myelinscheide
(siehe Abb. 148) gebildet wird oder nicht, spricht man
von markhaltigen oder marklosen Nervenfasern. Ent-
lang der markhaltigen Nervenfasern erfolgt die
Erregungsleitung sehr rasch, da die Myelinscheide eine
isolierende Schicht bildet und der Impuls von einer
erregbaren Region an den Zellgrenzen der
Schwann’schen Zellen zur nächsten „springt“. In den
marklosen Nervenfasern, die keine Myelinscheide
besitzen, breitet sich die Erregung kontinuierlich und
weniger rasch aus. Marklose Nervenfasern gehören
hauptsächlich zu den postganglionären Fasern des vege-
tativen Nervensystems.
Die Abbildung zeigt eine marklose Nervenfaser in
der Dünndarmwand. Die Axone (A) liegen mehr oder
weniger tief im Zytoplasma der Schwann’schen Zelle,
deren Kern (N) rechts im Bild zu sehen ist, eingebettet
und eine Basallamina (Pfeilköpfe), ein Produkt der
Schwannzelle, umgibt kontinuierlich die gesamte
Nervenfaser. In der Regel wird von einer Schwannzelle
mehr als ein Axon umhüllt. In enger räumlicher
Beziehung ihrer Plasmamembran zur Plasmamembran
des Axons, dem Axolemm, umgibt die Schwann’sche
Zelle die Axone (A), von denen die meisten komplett
eingescheidet sind. In diesen Fällen bilden invaginierte
Plasmamembranareale ein Mesaxon (offene Pfeile), das
als Aufhängeapparat für das Axon die Verbindung mit
der Oberfläche herstellt. Ein Axon im linken
Bildsegment, in dem auch Mikrotubuli (Pfeile), ein
Mitochondrion (Stern) und synaptische Vesikel zu
sehen sind, ist hier nur teilweise von der Schwannzelle
umgeben. Zum Teil wird das Axon nur von der
Basallamina bedeckt. In solch superfizieller Position
befinden sich die Axone vor allem dort, wo Transmitter
freigesetzt werden, um zu den Oberflächen von
Zielzellen, zum Beispiel glatten Muskelzellen oder
Drüsenzellen, zu diffundieren (siehe auch Abb. 142B).
Im Axoplasma, dem Zytoplasma der Axone, sind
neben den Mikrotubuli (Pfeile), die hier als Neurotubuli
bezeichnet werden, auch Intermediärfilamente, hier
Neurofilamente genannt, zu sehen. Neurotubuli und
Neurofilamente bilden Schienen für den axoplasmati-
schen Transport. Der rasche axoplasmatische Transport
verläuft bidirektional, erfordert ein intaktes Mikro-
tubulisystem und Motorproteine, Kinesine und
Dyneine. Kinesin ist im anterograden Transport einge-
setzt, über den neusynthetisierte Moleküle und
Organellen, Mitochondrien und zahlreiche Vesikel, auch
synaptische Vesikel, vom Perikaryon in die Axon-
peripherie transportiert werden. Mit Dynein als Motor-
protein werden internalisierte Substanzen retrograd von
den Axonendbereichen zum Perikaryon transportiert.
Missbräuchlich werden solche Wege auch von Toxinen
und Viren verwendet.
Die Nervenfaser ist in lockeres Bindegewebe mit
feinen kollagenen Fibrillen, das Endoneurium, einge-
bettet.
Literatur
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Vergrößerung: x 33,300
Abbildung 146 295

N
*

Kollagene
Fibrillen

Lamina basalis Schwann'sche Zelle

296 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
PERIPHERER NERV, BINDEGEWEBSHÜLLEN
Die einzelnen Nervenfasern sind in den Nerven des
peripheren Nervensystems von drei unterschiedlichen
Bindegewebshüllen mit jeweils eigenen spezifischen
Funktionen umgeben, dem Endoneurium, Perineurium
und Epineurium. Abbildung A zeigt alle drei Kom-
ponenten. In der marklosen Nervenfaser im Zentrum
sind Axone mit zahlreichen Neurotubuli und Neuro-
filamenten von feinen Schwannzellausläufern (S) um-
hüllt. Die Nervenfaser liegt eingebettet in Endoneurium
mit feinen Netzwerken kollagener Fibrillen (K). In
größeren Nervenfaserbündeln (Nervenfaszikeln) wer-
den die einzelnen Nervenfasern und die Blutkapillaren
vom Endoneurium zusammengehalten. Es besteht eine
enge Verbindung der kollagenen Fibrillennetze mit den
Basallaminae der Schwannzellen einerseits und der
Perineuralzellen andererseits. Fibroblasten sind spärlich
innerhalb des Endoneuriums zu finden. Es wird ange-
nommen, dass Kollagenvorstufen auch von Schwann-
zellen produziert wird.
Das Perineurium umgibt die Nervenfasern eines
Nervenfaszikels und besteht aus einem ganz speziell
aufgebauten Bindegewebe, das eine epithelartige Grenz-
schicht aufbaut. In Abbildung A wird ein kleiner
Faszikel mit nur einer marklosen Nervenfaser gezeigt.
Große Faszikel enthalten zahlreiche marklose und
markhaltige Nervenfasern eingebettet in Endoneurium
und abgegrenzt vom umgebenden Epineurium durch
das Perineurium. Die Perineuralscheide eines größeren
Faszikels, der auch markhaltige Nervenfasern enthält, ist
in Abbildung B zu sehen. Das Perineurium besteht aus
einer oder mehreren Lagen flacher, abgeplatteter Zellen,
die über Haftkomplexe (Kreis) mit abdichtenden Tight
Junctions verbunden sind. Das Perineurium hat in
diesem Zusammenhang den Charakter eines Epithels
(Perineuralepithel) und bildet einen wichtigen Teil der
Blut-Nervengewebsschranke (siehe auch Blut-Hirn-
schranke, Abb. 145). Es können 5–6 Perineuralzelllagen
gebildet werden, wobei auch durch Verzweigungen eine
multilamelläre Organisation entsteht (Abb. A und B).
Die beiden dünnen Perineuralzelllagen in Abbildung B
sind durch feine Zytoplasmabrücken verbunden. Beide
Lamellen sind von einer Basallamina (Pfeilköpfe), die
mit den kollagenen Fibrillen im Endoneurium innen
und Epineurium außen in enger Verbindung steht,
überzogen. Kollagene Fibrillen (K in Abb. B) liegen auch
zwischen den Perineuralzelllamellen. Fibroblasten
fehlen hier; man nimmt an, dass die Kollagenvorstufen
von den Perineuralzellen produziert werden. Das Zyto-
plasma ist reich an Mitochondrien, Mikrotubuli und
Filamenten, die die hohe Transportaktivität und
Kontraktilität der Zellen widerspiegeln. Auf transzel-
lulären Verkehr weisen die zahlreichen Vesikel, die aus-
gedehnte Areale der Perineuralzellen besetzen, beson-
ders in den extrem dünnen Perineuralzelllamellen akku-
mulieren und häufig mit einer der beiden Oberflächen
in Verbindung sind (Abb. B). Ähnlich wie in den
Endothelzellen, die die Blut-Hirnschranke bilden,
wirken die Perineuralzellen als Barriere und sind mit
molekularen Maschinerien für spezifischen Transport
ausgestattet.
Das Epineurium mit dicken Bündeln kollagener
Fibrillen (K) bildet den äußersten Bindegewebsbereich
eines peripheren Nerven. In einem großen Nerven
umgibt das dicht fasrige Bindegewebe des Epineuriums
viele Nervenfaszikel und führt die größeren Blutgefäße,
deren Äste innerhalb des Perineuriums in die einzelnen
Faszikel eintreten.
Literatur
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Microsurg 21: 290
Terbo PM, Vuorinen VS, and Roytta M (2002) The endoneurium
response to microsurgically removed epi- and perineurium. J
Periph Nerve System 7: 155
Walbeehm ET, Afoke A, de Wit T, Holman F, Hovius SER, and
Brown RA (2004) Mechanical functioning of peripheral nerves:
linkage with the “mushrooming” effect. Cell Tiss Res 316: 115
Vergrößerung: x 24,000 (A); x 28,800 (B)
Abbildung 147 297

Perineurium

S
Axon

Endoneurium

Epineurium

A K

Per
ine
K uriu
m

B
298 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
MARKHALTIGE NERVENFASER , MYELIN
Nervenfasern, die für eine besonders rasche und effi-
ziente Erregungsleitfähigkeit ausgestattet sein müssen,
besitzen eine lipidangereicherte isolierende Myelin-
scheide, die von speziellen Gliazellen, den Oligodendro-
zyten im zentralen und den Schwann’schen Zellen im
peripheren Nervensystem produziert wird. Die Myelin-
scheide isoliert das Axon gegenüber dem umgebenden
Gewebe und reduziert die Erregungsausbreitung ent-
lang der Plasmamembran des Axons. Dies führt dazu,
dass der elektrische Impuls sich entlang der Nervenfaser
sprunghaft von einer zur nächsten myelinscheidenfreien
Region an den Zellgrenzen der Gliazellen, den
Ranvier’schen Schnürringen (Abb. 149), ausbreitet. Eine
Myelinscheide fehlt nur am Axonhügel und im Bereich
der terminalen Axonverzweigungen. Im zentralen
Nervensystem produzieren die Oligodendrozyten
Myelinscheiden für mehrere Axone, wobei der
Zellkörper dieser Gliazellen außerhalb der Nervenfasern
bleibt. Im Gegensatz dazu versorgen im peripheren
Nervensystem die Schwannzellen nur jeweils ein Axon
mit einer Myelinscheide. Es wird jedoch die gesamte
Schwannzelle in die Nervenfaser eingegliedert.
Die Abbildung zeigt eine markhaltige Nervenfaser
aus dem peripheren Nervensystem eingebettet in
Endoneurium. Das Axon im Zentrum wird von einer
Schwannzelle, von der alle Abschnitte, einschließlich der
Myelinscheide, dargestellt sind, umgeben. Die Aus-
bildung der Myelinscheide ist ein äußerst komplexer
Vorgang, der mit Membranneubildung, Umschichtung
des Zytoplasmas, Zellbewegung, Gestaltsveränderungen
und Zell-Zell-Interaktionen zwischen der myelini-
sierenden Gliazelle und dem Axon einhergehen. Im
peripheren Nervensystem wird vorerst ein Axonsegment
in das Zytoplasma einer Schwannzelle invaginiert. Ein
Mesaxon wird gebildet und Teile dieser Plasma-
membranbereiche bilden durch spiralige Wickelungen
um das Axon die erste Anlage der Myelinscheide. Das
Mesaxon wird in drei Abschnitte unterteilt, in das innere
und äußere Mesaxon und den mittleren Abschnitt, der
das Myelin bildet. Während des Umwickelungsprozesses
wird das Zytoplasma der Schwannzelle umverteilt. Der
größte Teil des Schwannzellkörpers mit dem Zellkern
bleibt außerhalb der Myelinscheide und bildet das
äußere Zellband (eingekreister Stern). An der Innenseite
der Myelinscheide bleibt nur ein dünnes Zytoplasma-
band, das das Axon umgibt (Stern). Gleichzeitig mit
dem Wickelungsprozess kommt es zur Membrankom-
paktierung. Das Zytoplasma wird aus dem Bereich
der Myelinscheidenanlage fast vollständig verdrängt
und die inneren Plasmamembranblätter fusionieren.
Die äußeren Blätter der Plasmamembran begrenzen den
spaltförmigen Extrazellularraum. Benachbarte
Membranlamellen werden über homophile Inter-
aktionen des myelinassoziierten Protein O stabilisiert.
Die hoch geordnete Organisation der Schwannzellplas-
mamembranen in der Myelinanlage führt zur charak-
teristischen, elektronenmikroskopisch erkennbaren
Periodizität innerhalb des kompakten Myelins, wie sie
im Nebenbild zur Darstellung kommt, mit den
Hauptlinien (Pfeile), die durch die Verschmelzung der
inneren Plasmamembranblätter entstehen, und mit den
beiden Intermediärlinien alternieren, die durch die
äußeren Blätter der Plasmamembran mit dem dazwi-
schen liegenden Extrazellularspalt (Pfeilkopf) zustande
kommen. Innerhalb des Myelins bleiben nur Zyto-
plasmareste, die als enge „Straßen“ durch die
Myelinscheide ziehen, die Schmidt-Lanterman’schen
Spalten oder Inzisuren. Durch diese Zytoplasmastraßen
werden kurze Diffusionswege zwischen innerem und
äußerem Zytoplasmaband der Schwannzelle aufgebaut.
Die Schmidt-Lanterman’schen Inzisuren gehören
zum nicht-kompakten Myelin, zu dem auch die
Ranvier’schen Schnürringe und die paranodalen
Schleifen (siehe Abb. 149) gerechnet werden. Im Verlauf
der Myelinbildung werden nicht nur heterotypische
Zell-Zell-Verbindungen zwischen der Schwannzelle und
dem Axon ausgebildet, sondern auch autotypische
Membranverbindungen an den inneren und äußeren
Mesaxonen, den Schmidt-Lanterman’schen Inzisuren
und in den paranodalen Regionen.
Literatur
Arroyo EJ, and Scherer SS (2000) On the molecular architecture
of myelinated fibers. Histochem Cell Biol 113: 1
Balice-Gordon RJ, Bone L, and Scherer SS (1998) Junctional gap
junctions in the Schwann cell myelin sheath. J Cell Biol 142: 1095
Lemke G (1996) Unwrapping myelination. Nature 383: 395
Peles E, and Salzer JL (2000) Functional domains in myelinated
axons. Curr Opin Neurobiol 10: 558
Spiegel I, and Peles E (2002) Cellular junctions of myelinated
nerves. Mol Membr Biol 19: 95
Vergrößerung: x 80,000; x 200,000 (Nebenbild)
Abbildung 148 299

*
Inneres Mesaxon

Äußeres Mesaxon
*

Axon

Myelin
300
RANVIER’SCHER SCHNÜRRING
Entlang einer markhaltigen Nervenfaser sind zahlreiche
Schwannzellen mit dem von ihnen gebildeten Myelin
hintereinander gereiht. Die isolierende Myelinschicht ist
nur im Bereich der Zellgrenzenregionen, wo die hinter-
einander geschalteten Schwannzellen aneinanderstoßen,
unterbrochen. Diese Bereiche, die Ranvier’schen
Schnürringe, sind von dünnen Schwannzellfortsätzen
eingehüllt. Im Verlauf einer markhaltigen Nervenfaser
sind die Ranvier’schen Schnürringe (Ranvier’sche
Knoten) die einzigen Stellen, wo die Nervenfaser erreg-
bar ist, während die langen Abschnitte zwischen den
Knoten, die Internodia, durch das kompakte Myelin
isoliert sind. Die nodalen Bereiche, zusammen mit den
paranodalen und juxtanodalen Regionen, bilden
spezielle Areale entlang den Nervenfasern, wo Na+- und
K+-Kanäle und andere spezifische Proteine in distinkten
Membrandomänen lokalisiert sind. Die Erregungs-
leitung erfolgt saltatorisch von einem Ranvier Knoten
zum nächsten. Die Internodalsegmente, die je nach
Größe der Schwann’schen Zellen bis zu 80–100µm
Länge erreichen können, werden übersprungen.
Die Abbildungen zeigen einen Ranvier’schen Knoten
entlang einer markhaltigen Nervenfaser des peripheren
Nervensystems und die benachbarten paranodalen
(PN) und juxtaparanodalen (JXP) Areale. In der
Knotenregion, die in Abbildung A mit Pfeilen markiert
ist und in Abbildung B stärker vergrößert gezeigt wird,
ist das Axon nur von flachen, zottenförmigen Aus-
läufern der Schwannzellen und einer Basallamina
(Pfeilköpfe) eingehüllt. Die zentrale nodale Zone setzt
sich lateral in die paranodalen Zonen fort. Dort öffnet
sich das kompakte Myelin und die Schwannzellen bilden
charakteristische zungenförmige Schleifen, deren
Spitzenareale mit dem Axolemm verbunden sind (Abb.
C). Der interzelluläre Spalt ist 2–3nm weit. Die hier
lokalisierten speziellen axo-glialen Verbindungen kön-
nen im Elektronenmikroskop als dichte Areale dar-
gestellt werden (Doppelpfeile). Sie entsprechen Kom-
plexen von Zelladhäsionsmolekülen, Kontaktin und
Caspr (contactin associated protein) in der axonalen
Membran und Neurofaszin 155 in der Schleifen-
Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
membran. Die paranodalen axo-glialen Verbindungen
an den Schleifenspitzen, die die Myelinscheide am Axon
befestigen, separieren die Membrandomänen in der
nodalen Zone, wo Na+-Kanäle konzentriert sind, von
den sich lateral anschließenden juxtaparanodalen
Domänen mit der Konzentration von K+-Kanälen und
Caspr2. Auch Signalübertragungfunktionen werden den
axo-glialen Verbindungen an den Schleifenspitzen
zugeschrieben. Die juxtaparanodalen Areale liegen im
Bereich der Endabschnitte der Internodia noch bedeckt
von kompaktem Myelin. Zusätzlich zu den heterotypi-
schen axo-glialen Verbindungen werden im Bereich der
paranodalen Schleifen auch autotypische, sowohl Tight
Junctions als auch Adhaerens und Gap Junctions ausge-
bildet, über die die Paranodalschleifen untereinander
verbunden sind.
Anders als im peripheren Nervensystem ist im
zentralen Nervensystem die zentrale Knotenregion
nicht von den myelinbildenden Oligodendrozyten
bedeckt, sondern von Fortsätzen der perinodalen
Astrozyten besetzt.
Literatur
Arroyo EJ, and Scherer SS (2000) On the molecular architecture
of myelinated fibers. Histochem Cell Biol 113: 1
Fannon AM, Sherman DL, Ilyina-Gragerova G, Brophy PJ,
Friedrich VL Jr, and Colman DR (1995) Novel E-cadherin-medi-
ated adhesion in peripheral nerve: Schwann cell architecture is
stabilized by autotypic adherens junctions. J Cell Biol 129: 189
Martin S, Levine AK, Chen ZJ, Ughrin Y, and Levine JM (2001)
Deposition of NG2 proteoglycan at nodes of Ranvier in the
peripheral nervous system. J Neurosci 21: 8119
Peles E, and Salzer JL (2000) Functional domains in myelinated
axons. Curr Opin Neurobiol 10: 558
Spiegel I, and Peles E (2002) Cellular junctions of myelinated
nerves. Mol Membr Biol 19: 95
Wiley CA, and Ellisman MH (1980) Rows of dimeric-particles
within the axolemma and juxtaposed particles within glia, incor-
porated into a new model for the paranodal glial-axonal junction
at the node of Ranvier. J Cell Biol 84: 261
Vergrößerung: x 10,700 (A); x 28,000 (B); x 46,600 (C)
Abbildung 149 301

Axon

JXP
PN
S

A B

Axon

C
302 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
AXONALE DEGENERATION
Die axonale Degeneration ist eine krankhafte Verände-
rung der peripheren Nerven, die durch verschiedene
Arten von Schädigungen wie mechanische Durch-
trennung, fehlende Durchblutung, virale Infekte und
Druck ausgelöst werden kann.
Die Waller’sche Degeneration nach experimenteller
Durchtrennung eines peripheren Nervs ist der Protoyp
einer axonalen Degeneration. Die hierbei zu beobach-
tenden ultrastrukturellen Veränderungen können auch
im Gefolge der oben erwähnten anderen Ursachen
auftreten. Die axonale Degeneration beginnt am Ort der
Schädigung und breitet sich von hier aus entlang des
gesamten Axons nach distal aus, wobei es zum komplet-
ten Nervenfaserzerfall kommt. Hierbei handelt es sich
um die anterograde Degeneration. Davon sind die
Veränderungen der Nervenfasern proximal des Schädi-
gungsortes zu unterscheiden, die als retrograde De-
generation bezeichnet werden und sich lediglich bis
zum nächsten Ranvier’schen Knoten ausbreiten.
Weiterhin kommt es zur Schwellung und Chromatolyse
des Perikaryons und der Verlagerung des Zellkerns in
die Zellperipherie. Die Strukturveränderungen entwi-
ckeln sich schrittweise und laufen nach einem be-
stimmten Zeitplan ab.
In Abbildung A (quergeschnittene nichtmyelinisierte
periphere Nervenfaser) und B (quergeschnittene myeli-
nisierte periphere Nervenfaser) sind unterschiedliche
Stadien der axonalen Degeneration illustriert. Anfäng-
lich kommt es zur ödematösen Schwellung des Axons
mit Zerfall von Neurofilamenten und Mikrotubuli und
dem Auftreten von Autophagolysosomen, etwa wie in
Abbildung A gezeigt. Die umgebenden Schwannzellen
erscheinen weitgehend unauffällig. Letzten Endes zer-
fällt das Axon in Stücke. In gleicher Weise kommt es bei
myelinisierten Nervenfasern (Abb. B) zu axonalen
Veränderungen, die im Zerfall des Axons münden. Die
Myelinscheiden werden zunächst eingeschnürt und zer-
fallen anschließend in ovale bis rundliche Fragmente,
wie in Abbildung B dargestellt. Hier ist der Verlust des
Axons und der fortgeschrittene Zerfall der Myelin-
scheide augenfällig. Die Fragmente der Nervenfasern
werden hauptsächlich von Phagozyten beseitigt.
Proliferierende Schwannzellen sind ebenfalls an der
Beseitigung der Zerfallsprodukte beteiligt. Wichtiger ist
aber ihre Funktion als Leitschiene für aussprossende
Axone während der Nervenregeneration. Die proli-
ferierenden Schwannzellen wandern entlang einer von
der verbliebenen Basalmembran und dem Endo-
neurium gebildeten röhrenförmigen Struktur, den soge-
nannten Büngner-Bändern. Ihnen entlang wachsen die
aussprossenden Axone, die nach Erreichen des Inner-
vationsortes eine Synapse bilden. Die Regeneration der
Nerven kann nach etwa vier Monaten abgeschlossen
sein.
Literatur
Chaudry V, Glass J, and Griffin J (1992) Wallerian degeneration in
peripheral nerve disease. Neurol Clin 10: 613
Griffin J, George R, and Lobato C (1992) Macrophage responses
and myelin clearance during Wallerian degeneration: relevance to
immune-mediated demyelination. J Neuroimmunol 40: 153
Schröder J (2001) Pathology of peripheral nerves. An atlas of
structural and molecular pathological changes. Berlin: Springer
Vergrößerung: x 12,000 (A); x 9,500 (B)
Abbildung 150 303

Axonale Degeneration

Schwann'sche Zelle

Nukleus

B
304 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
NEUROAXONALE DYSTROPHIE
Die neuroaxonale Dystrophie (Schindler’sche Krank-
heit) ist eine seltene, autosomal rezessiv vererbte Krank-
heit. Sie ist durch einen Mangel an lysosomaler _-N-
Azetylgalaktosaminidase (früher als _-Galaktosidase B
bezeichnet) verursacht. Klinisch werden drei Phäno-
typen der Krankheit unterschieden, von denen Typ I
und Typ II näher besprochen werden.
Der Typ I tritt im Kindesalter auf und stellt eine klas-
sische neuroaxonale Dystrophie dar. Die Speicherungen
treten nur im Nervensystem und nicht in anderen
Organen oder den Zellen des peripheren Bluts auf.
Durch die elektronenmikroskopische Untersuchung des
Plexus myentericus in Biopsien der Rektumschleimhaut
oder von Nervenfasern in Biopsien der Haut können die
sehr charakteristischen feinstrukturellen Veränderun-
gen in präterminalen und terminalen Axonen
nachgewiesen werden und sind in den Abbildungen A
und B gezeigt. Die stark erweiterten Axone enthalten
auffällige tubulo-vesikuläre Strukturen. Sie sind in
Abbildung B bei starker Vergrößerung abgebildet und
bestehen aus unzähligen verzweigten, unregelmäßig
gestalteten Tubuli und winzigen Vesikeln. Im Gefolge
kann es zum Verlust der Myelinscheiden kommen. In
Abbildung A ist ein Anfangsstadium der Auflösung der
Myelinscheide zu sehen. Bei der Typ I neuroaxonalen
Dystrophie finden sich keine Hinweise für lysosomale
Speicherungen. Sie sind aber ein typischer Befund beim
im Erwachsenenalter auftretenden Typ II der neuro-
axonalen Dystrophie. Hier finden sich zahlreiche zyto-
plasmatische Vakuolen, die entweder scheinbar keinen
Inhalt haben oder mit einem filamentösen Material
gefüllt sind. Sie können in der Haut und in verschiede-
nen anderen Zelltypen wie Endothelien, ekkrinen
Schweißdrüsenepithelien, Fibroblasten und glatten
Muskelfasern nachgewiesen werden.
Die neuroaxonale Dystrophie wird durch Misssense-
und Nonsensmutationen im Gen der _-N-Azetyl-
galaktosaminidase verursacht, das sich auf Chromosom
22q13.1-13.2 befindet. Durch den Enzymmangel
kommt es zur Anhäufung von Glykoproteinen, Glyko-
sphingolipiden und Proteoglykanen, deren Oligo-
saccharidseitenketten in abnormer Weise durch
N-Azetylgalaktosaminreste beendet sind.
Literatur
De Leon G, and Mitchel M (1985) Histological and ultrastructur-
al features of dystrophic isocortical axons in infantile neuroaxon-
al dystrophy (Seitelberger disease) Act Neuropathol (Berlin) 66:
89
Desnick R, and Schindler D (2001) _-N-acetylgalactosaminidase
deficiency: Schindler’s disease. In: The metabolic and molecular
bases of inherited disease (Scriver C, Beaudet A, Valle D, Sly WS,
Childs B, Kinzler K, and Vogelstein B, eds). New York: McGraw-
Hill, pp 3483
Kanzaki T, Wang A, and Desnick R (1991) Lysosomal _-N-acetyl-
galactosaminidase deficiency, the enzymatic defect in angioker-
atoma corporis diffusum with glycopeptiduria. J Clin Invest 88:
707
Schindler D, Bishop DF, Wolfe D, Wang A, Egge H, Lemieux R,
and Desnick R (1989) Neuroaxonal dystrophy due to lysosomal
_-N-acetylgalactosaminidase deficiency. N Engl J Med 320: 1735
Schröder J (2001) Pathology of peripheral nerves. An atlas of
structural and molecular pathological changes. Berlin: Springer
Walkey S, Baker H, Rattazzi M, Haskins M, and Wu J-Y (1991)
Neuroaxonal dystrophy in neuronal storage disorders: Evidence
for major GABAergic neuron involvement. J Neurol Sci 104: 1
Wolfe D, Schindler D, and Desnick R (1995) Neuroaxonal dystro-
phy in infantile _-N-acetylgalactosaminidase deficiency. J Neurol
Sci 132: 44
Vergrößerung: x 9,500 (A); x 105,000 (B)
Abbildung 151 305

Neuroaxonale Dystrophie

B
306 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
NEUROPATHIEN IM GEFOLGE VON DYSPROTEINÄMIEN
Die Neuropathien sind Erkrankungen des peripheren
Nervensystems und können in zwei Gruppen unterteilt
werden: vererbbare und erworbene Neuropathien.
Erworbene Neuropathien können im Zusammenhang
mit verschiedenen immunpathologischen Veränderun-
gen auftreten wie dem multiplen Myelom (lymphoplas-
mozytisches Lymphom, Morbus Waldenström), dem B-
Zellen Lymphom oder monoklonalen Gammopathien
unbekannter Genese. Diese Neuropathien stellen somit
Komplikationen dieser Grundkrankheiten dar.
Dysproteinämische Neuropathien führen vorzugs-
weise zu Strukturalterationen der Myelinscheiden, wie
in der nebenstehenden Abbildung illustriert ist. Im
speziellen Fall handelt es sich um die Folgen einer
monoklonalen IgM-Gammopathie. Es kommt zu einer
unterschiedlich stark ausgeprägten Separation der
Myelinlamellen, die zur Bildung ungleichmäßig weiter
Spalten im Bereich der Zwischenlinien führen. Diese
Veränderungen treten bevorzugt in den äußeren
Bereichen der Myelinscheiden auf, führen insgesamt zu
einer Auflockerung der normalerweise kompakten
Myelinscheiden und können letztlich zur Entmyelini-
sierung führen.
Die Pathogenese der mit monoklonalen IgM-
Gammopathien verbundenen Neuropathien ist bis zu
einem gewissen Grad aufgeklärt. Das in den Myelin-
scheiden abgelagerte IgM bindet spezifisch an das
Myelin-assoziierte Glykoprotein. Die Anwesenheit
dieser Immunkomplexe initiiert eine Komplement-ver-
mittelte Myelinschädigung und Entmyelinisierung. Im
Gegensatz hierzu konnten bei IgA- und IgG-Gammo-
pathien keine Immunglobulinablagerungen im Myelin
nachgewiesen werden.
Literatur
Bollensen E, Steck A, and Schachner M (1988) Reactivity with the
peripheral myelin glycoprotein Po in serum from patients with
monoclonal IgM gammopathy and polyneuropathy. Neurology
38: 1266
Braun P, Frail D, and Latov N (1982) Myelin-associate glycopro-
tein is the antigen for a monoclonal IgM in polyneuropathy.
J Neurochem 39: 1261
Jacobs JM (1996) Morphological changes at paranodes in IgM
paraproteinaemic neuropathy. Microsc Res Technique 34: 544
Lach B, Rippstein P, Atack D, Afar D, and Gregor A (1993)
Immunoelectron microscopic localization of monoclonal IgM
antibodies in gammopathy associated with peripheral demyeli-
nating neuropathy. Act Neuropathol (Berlin) 85: 298
Latov N, Hays A, and Sherman W (1988) Peripheral neuropathy
and anti-MAG antibodies. Crit Rev Neurobiol 3: 301
Lupski J, and Garcia C (2001) Charcot-Marie-Tooth peripheral
neuropathies and related disorders. In: The metabolic and molec-
ular bases of inherited disease (Scriver C, Beaudet A, Valle D,
Sly WS, Childs B, Kinzler K, and Vogelstein B, eds). New York:
McGraw-Hill, pp 5759
Meier C, Vandevelde M, Steck A, and Zurbriggen A (1984)
Demyelinating polyneuropathy associated with monoclonal IgM-
paraproteinemia. Histological, ultrastructural and immunocyto-
chemical studies. J Neurol Sci 63: 353
Monaco S, Bonetti B, Ferrari S, Moretto G, Nardelli E, Tedesco F,
Mollnes T, Nobile-Orazio E, Manfredini E, and Bonazzi L (1990)
Complement-mediated demyelination in patients with IgM
monoclonal gammopathy and polyneuropathy. N Engl J Med
322: 649
Schröder J (2001) Pathology of peripheral nerves. An atlas of
structural and molecular pathological changes. Berlin: Springer
Smith I, Kahn S, and Lacey B (1983) Chronic demyelinating neu-
ropathy associated with benign IgM paraproteinemia. Brain 106:
169
Vital C, and Vallat J (1987) Ultrastructural study of the human
diseased peripheral nerve, 2nd ed. New York: Elsevier
Vergrößerung: x 27,000
Abbildung 152 307

Dysproteinämische Neuropathie
308 Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
METACHROMATISCHE LEUKODYSTROPHIE
Die metachromatische Leukodystrophie ist eine autoso-
mal rezessiv vererbte lysosomale Speicherkrankheit. Sie
ist in der Regel durch einen Mangel an Arylsulfatase A
und in seltenen Fällen durch einen Mangel an Saposin
B, dem Sphingolipid Aktivatorprotein, verursacht. Wie
die Krankheitsbezeichnung impliziert, betreffen Leuko-
dystrophien vorwiegend die weiße Substanz. Die meta-
chromatische Leukodystrophie kann klinisch in drei
Formen unterteilt werden: die infantile Form mit
Auftreten vor dem 5. Lebensjahr, die juvenile Form mit
Auftritt zwischen dem 5. Lebensjahr und der Pubertät,
und die adulte Form.
Der Arylsulfatase A Mangel resultiert in einer ge-
störten Entfernung von Sulfatgruppen von 3-O-Sulfo-
galaktose-enthaltenden Glykolipiden, Sulfatiden, Sulfo-
galaktoglyzerolipiden und verschiedenen anderen sul-
fatierten Glykolipiden. Sulfatierte Glykolipide gemein-
sam mit Galaktozeramiden sind wichtige Komponenten
für die Isolatorfunktion des Myelins und des Weiteren
von Bedeutung bei der Reifung des Gehirns. Die
Veränderungen bei metachromatischer Leukodys-
trophie betreffen hauptsächlich das Nervensystem, da
die sulfatierten Glykolipide vorzugsweise in den
Myelinscheiden des peripheren und zentralen Nerven-
systems und nur in geringen Mengen in anderen
Organen vorkommen. Die nebenstehenden elektronen-
mikroskopischen Aufnahmen illustrieren die feinstruk-
turellen Veränderungen, die im Wesentlichen in der
Entmyelinisierung der Nervenfasern, dem Vorhanden-
sein metachromatischer Granula und der nachfolgen-
den Verminderung der weißen Substanz bestehen.
Abbildung A zeigt ein fortgeschrittenes Stadium der
Entmyelinisierung einer Nervenfaser in einer Haut-
biopsie, das mit dem Zerfall der Myelinscheide ein-
hergeht. Im Nebenbild ist bei starker Vergrößerung die
gestörte Periodizität der Myelinscheide zu erkennen.
Reaktiv kommt es zu einer Vermehrung der Schwann-
Zellen. Die Epithelzellen der Schweißdrüsen der Haut
zeigen auch die charakteristischen intrazellulären
Einschlusskörper in Form von sogenannten Zebra- und
Tuffsteinkörpern (Abb. B). Bei der adulten Form der
metachromatischen Leukodystrophie, von der die
Abbildung B stammt, treten zusätzlich zusammengeset-
zte Einschlusskörper auf (Sterne), die bei starker
Vergrößerung im Nebenbild zu Abbildung B zu sehen
sind.
Das Gen für die Arylsulfatase A liegt auf Chromo-
som 22q13 und die häufigsten krankheitsverursachen-
den Veränderungen sind Punktmutationen und Splice-
Donor-Site Mutationen. Eine Genotyp-Phänotyp
Korrelation besteht nur insofern als das der Schwere-
grad der Erkrankung umgekehrt proportional zur
Enzymrestaktivität ist.
Literatur
Berger J, Loschl B, Bernheimer H, Lugowska A, Tylki-Szymanska A,
Gieselmann, V., and Molzer, B. (1997) Occurrence, distribution,
and phenotype of arylsulfatase A mutations in patients with
metachromatic leukodystrophy. Am J Med Genet 69: 335
Bosio A, Binczek E, and Stoffel W (1996) Functional breakdown
of the lipid bilayer of the myelin membrane in central and
peripheral nervous system by disrupted galactocerebroside syn-
thesis. Proc Natl Acad Sci USA 93: 13280
Kappler J, Leinekugel P, Conzelmann E, Kleijer WJ, Kohlschutter A,
Tonnesen T, Rochel M, Freycon F, and Propping P (1991)
Genotype-phenotype relationship in various degrees of arylsulfa-
tase A deficiency. Hum Genet 86: 463
Leinekugel P, Michel S, Conzelmann E, and Sandhoff K (1992)
Quantitative correlation between the residual activity of beta-
hexosaminidase A and arylsulfatase A and the severity of the
resulting lysosomal storage disease. Hum Genet 88: 513
Phelan MC, Thomas GR, Saul RA, Rogers RC, Taylor HA,
Wenger DA, and McDermid HE (1992) Cytogenetic, biochemical,
and molecular analyses of a 22q13 deletion. Am J Med Genet 43:
872
Polten A, Fluharty AL, Fluharty CB, Kappler J, von Figura K, and
Gieselmann V (1991) Molecular basis of different forms of
metachromatic leukodystrophy. N Engl J Med 324: 18
von Figura K, Gieselmann V, and Jaeken J (2001) Metachromatic
leukodystrophy. In: The metabolic and molecular bases of inher-
ited disease (Scriver C, Beaudet A, Valle D, and Sly WS, eds). New
York: McGraw-Hill, pp 3695
Vergrößerung x 13,000 (A); x 80,000 (Nebenbild); x 32,500 (B);
x 84,500 (Nebenbild)
Abbildung 153 309

Metachromatische Leukodystrophie

B
310
NEURONALE ZEROIDLIPOFUSZINOSEN
Die neuronalen Zeroidlipofuszinosen (NZL) sind eine
Gruppe autosomal rezessiv vererbter, progressiver neu-
rodegenerativer Krankheiten, bei denen es sich um lyso-
somale Speicherkrankheiten handelt. Sie sind die häu-
figsten neurodegenerativen Erkrankungen des Kindes-
alters. Neben der kindlichen Form existieren noch eine
spätinfantile und eine juvenile Form. Die drei Formen
der NZL können aufgrund der charakteristischen
Feinstruktur der Einschlüsse elektronenmikroskopisch
voneinander unterschieden werden.
Bei der infantilen NZL treten vorzugsweise Ablage-
rungen von Saposin A und B sowie auch Anteile des
Gliafaserproteins auf. Der krankheitsverursachende
Defekt betrifft die Palmitoyl-Protein Thioesterase (PPT,
CLNI), deren Gen auf Chromosom 1p32 liegt. Die häu-
figsten Mutationen sind ein vorzeitiger Stopkodon beim
Arginin 151 und eine Misssensmutation (R122W).
Elektronenmikroskopisch werden pathognomonische
elektronendichte granuläre lysosomale Einschlüsse
beobachtet.
Bei der spätinfantilen NZL treten Ablagerungen der
C-Untereinheit der mitochondrialen ATP-Synthase auf.
Die Ursache liegt im Mangel an Pepinase (CLN2), einer
lysosomalen Protease, deren Gen auf Chromosom
11p15 liegt. Elektronenmikroskopisch bestehen die
lysosomalen Speicherungen aus kurviglinearen Struk-
turen (Sterne in Abb. A).
Die juvenile NZL ist verursacht durch Verän-
derungen des lysosomalen Membranproteins Battenin,
dessen Gen auf Chromosom 16p12 liegt. Es kommt zur
Ablagerung eines Lipopigments, das Ähnlichkeiten mit
dem Lipofuszin hat und vorwiegend aus der C
Untereinheit der mitochondrialen ATP-Synthase und
des Weiteren aus geringen Mengen von Saposin besteht.
Elektronenmikroskopisch bestehen die lysosomalen
Speicherungen aus Fingerabdruck-artig gestalteten
Einschlüssen (finger print bodies).
Da die morphologischen Veränderungen der ver-
schiedenen NZL nicht auf das Nervengewebe be-
schränkt sind, kann die elektronenmikroskopische
Diagnose an Hautbiopsien oder isolierten Leukozyten
des peripheren Bluts gestellt werden. Abbildungen A
Das Nervengewebe und krankhafte Veränderungen
und B entstammen einer Hautbiopsie und zeigen
die verschiedenartigen Einschlusskörper in Endothel-
zellen von Kapillaren. Der bei starker Vergrößerung in
Abbildung B gezeigte Einschlusskörper enthält sowohl
kurviglineare (Pfeilkopf) als auch Fingerabdruck-artige
Strukturen (Pfeile). Diese gemischten Einschlusskörper
wurden bei einer juvenilen NZL beobachtet. Üblicher-
weise finden sich bei der juvenilen NZL nur Fingerab-
druck-artig gestaltete Einschlüsse.
Literatur
Eiberg H, Bisgaard ML, and Mohr J (1989) Linkage between alpha
1B-glycoprotein (A1BG) and Lutheran (LU) red blood group sys-
tem: assignment to chromosome 19: new genetic variants of
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Vesa J, Hellsten E, Verkruyse LA, Camp LA, Rapola J, Santavuori P,
Hofmann SL, and Peltonen L (1995) Mutations in the palmitoyl
protein thioesterase gene causing infantile neuronal ceroid lipo-
fuscinosis. Nature 376: 584
Vergrößerung: x 32,000 (A); x 63,000 (B)
Abbildung 154 311

Neuronale Zeroidlipofuszinose

*
Nukleus

B
312
ROTE BLUTZELLEN – ERYTHROBLAST, RETIKULOZYT, ERYTHROZYT
Die Zellen der eryothropoetischen Blutbildungsreihe
entwickeln sich aus multipotenten Stammzellen unter
dem Einfluss von Erythropoetin, dem in der Niere pro-
duzierten und für die Bildung roter Blutzellen wichtig-
sten Regulatorhormon. Die Erythropoese wird stimu-
liert, wenn ein Missverhältnis von Sauerstoffbedarf und
Sauerstoffzufuhr vorliegt, zum Beispiel bei Hypoxie
durch eine Abnahme des Sauerstoffpartialdrucks in der
Einatmungsluft oder durch Verminderung der sauer-
stofftransportierenden Erythrozyten im zirkulierenden
Blut durch Blutverlust. Die Erythropoetin-sensitiven
Progenitorzellen CFU-E (erythroid colony forming
unit) differenzieren zu Proerythroblasten. Hand in
Hand gehend mit mehreren Zellteilungen entstehen
basophile, polychromatische und orthochromatische
(euchromatische) Erythroblasten und in weiterer Folge
Retikulozyten, die bereits in das zirkulierende Blut ein-
treten können. Die Erythropoese spielt sich über einen
Zeitraum von 4-6 Tagen ab und ist charakterisiert durch
die Synthese und zunehmende Anreicherung des
Zytoplasmas mit dem Sauerstoff- und Kohlendioxyd-
transportierenden Molekül Hämoglobin. Gleichzeitig
kommt es zu programmierten Kern- und Zyto-
plasmaveränderungen, die dazu führen, dass der Kern
ausgestoßen wird und die Zellorganellen verschwinden.
Die Abbildungen A und B zeigen Zellen der Erythro-
poese aus einem Knochenmarkspunktat. Erythroblasten
in einem frühen und späteren Entwicklungsstadium
sind in Abbildung A zu sehen. Mit zunehmender
Hämoglobinanreicherung wird das Zytoplasma elektro-
nendichter. Der nur teilweise sichtbare Erythroblast
rechts im Bild zeigt, einem polychromatischen
Erythroblasten (pE) entsprechend, ein weniger dichtes
Zytoplasma im Vergleich zu den beiden anderen Zellen,
die orthochromatische Erythroblasten (oE) darstellen.
Die Hämoglobinsynthese beansprucht verschiedene
Zellsysteme, Mitochondrien, wo das Häm des Hämo-
globinmoleküls gebildet wird und freie Ribosomen
(Pfeile im Nebenbild links), wo die Globinketten syn-
thetisiert werden. Das Eisen wird an Transferrin gebun-
den durch Rezeptor-gesteuerte Endozytose über
Clathrin-coated Vesikel (Pfeilkopf) aufgenommen. Die
Kerne zeigen durch das kondensierte Chromatin (C) ein
charakteristisches Schachbrettmuster und werden von
Zellen des Bluts
erweiterten perinukleären Zisternen begrenzt. In dieser
Entwicklungsphase finden keine Zellteilungen mehr
statt. Die orthochromatischen Erythroblasten stoßen
den Kern aus und werden damit zu Retikulozyten (Abb.
B und Nebenbild in Abb. A rechts oben).
Der Retikulozyt in Abbildung B fällt durch eine aus-
geprägt bizarre Oberflächenarchitektur mit vielgestalti-
gen Fortsätzen auf, wie sie nach der Kernausstoßung
typischerweise zu sehen ist. Doch sind Mitochondrien
und Polyribosomen (Pfeile im Nebenbild) noch vor-
handen und Endozytose (Pfeilkopf im Nebenbild) fin-
det statt. In den Retikulozyten wird nach wie vor
Hämoglobin synthetisiert. Innerhalb weniger Tage reift
der Retikulozyt zum Erythrozyten. In diesem letzten
Stadium der Entwicklung wird die Zelloberfläche umge-
formt und die Zellorganellen verschwinden. Der Abbau
der Zellorganellen wird durch Ubiquitinbindung ini-
tiiert. Membranbestandteile werden in multivesikuläre
und multilamelläre Organellen (Pfeilköpfe in Abb. B)
sortiert und durch Fusion mit der Plasmamembran aus-
gestoßen.
Der reife Erythrozyt (rechts in Abb. B) mit seiner
typisch bikonkaven Scheibenform, die ein für den
Gasaustausch günstiges Oberflächen-Volumen Verhält-
nis gewährleistet, dient vor allem als Behälter für das
Sauerstoff- und Kohlendioxyd-transportierende Hämo-
globin. Das durch die hohe Hämoglobinkonzentration
sehr homogen elektronendichte Zytoplasma ist frei von
Organellen. Ein Membranskelett aus Spektrin, einem
heterodimeren Protein, das mit Aktin und Plasma-
membranproteinen interagiert, bildet die Grundlage für
die bikonkave Form der reifen roten Blutzellen. Die sub-
membranöse elastische Matrix, die durch das Spektrin-
gitter entsteht, ermöglicht den Zellen nach Verformung
durch Scherkräfte zu ihrer bikonkaven Form zurück-
zukehren.
Literatur
Géminard C, de Gassart A, Blanc L, and Vidal M (2004)
Degradation of AP2 during reticulocyte maturation enhances
binding of Hsc70 and Alix to a common site on TfR for sorting
into exosomes. Traffic 5: 181
Vergrößerung: x 10,500 (A); x 39,200 (Nebenbild rechts oben);
x 17,200 (Nebenbild links unten); x 15,000 (B)
Abbildung 155 313

Retikulozyt

oE

C pE

Erythroblast

Erythrozyt

Retikulozyt

B
314
NEUTROPHILER GRANULOZYT
Unter den weißen Blutzellen und auch in der Klasse der
Granulozyten sind die neutrophilen Granulozyten, die
auf Grund ihres vielgestaltigen gelappten Kerns auch als
polymorphkernige Neutrophile bezeichnet werden, die
häufigsten. Sie machen im Blut etwa 65% aller Leuko-
zyten aus. Durch Interaktion mit Endothelzellen, Bin-
dung an extrazelluläre Matrixkomponenten und
Chemotaxis verlassen sie das zirkulierende Blut und
bewegen sich zu Fremdinvasionsregionen und anderen
Orten ihres Einsatzes. Neutrophile sind die ersten Zellen
in Entzündungsarealen. Sie sind aktive Phagozyten
(Mikrophagen) und befähigt, fremde Materialien und
Organismen zu internalisieren. Fc-Rezeptoren in der
Plasmamembran binden an die Fc-Region von Anti-
körpern, die zum Beispiel die Oberfläche von Bakterien
dekorieren. Neutrophile Granulozyten spielen eine zen-
trale Rolle im unspezifischen Abwehrsystems und
haben, gemeinsam mit anderen Leukozyten, eosino-
philen und basophilen Granulozyten, Monozyten/
Makrophagen und Lymphozyten, eine Schlüssel-
funktion bei Entzündungsreaktionen und in der Wund-
heilung.
Die Abbildung zeigt einen neutrophilen Granulo-
zyten aus dem menschlichen Blut. Zwei der Kernlappen
sind im Bild zu sehen. Das kondensierte Chromatin
dominiert und besetzt ausgedehnte Areale des Kern-
raums. Der Golgi Apparat ist zentral nahe den Kern-
segmenten positioniert. Der Hauptteil des Zytoplasmas
wird von den dicht gepackt liegenden Granula, deren
Inhalte die antimikrobiellen Eigenschaften der Zellen
ausmachen, besetzt. Drei Hauptklassen von Granula
existieren, die spezifischen neutrophilen Granula (Pfeil-
köpfe), die azurophilen Granula (Azurgranula, Pfeile)
und tertiäre Granula (offene Pfeile), unter denen weitere
Subtypen klassifiziert werden. Ultrastrukturell ist es
schwierig und zum Teil auch unmöglich, jedes der
Granula zu identifizieren. Die spezifischen neutrophilen
Granula sind kugelförmig oder ellipsoid. Sie sind unter
allen Granula die kleinsten, aber auch die zahlreichsten
und enthalten eine Reihe von Enzymen, wie Phospho-
lipasen und Typ-IV-Kollagenase, bakteriostatische und
bakterizide Substanzen, wie Lysozym, und Komple-
mentaktivatoren. Die azurophilen Granula sind größer
Zellen des Bluts
und weniger zahlreich als die spezifischen neutrophilen
Granula. Sie sind die ersten Granula, die währender
Granulopoese auftreten (primäre Granula), doch kom-
men sie nicht nur in den neutrophile Granulozyten vor,
sondern werden auch in Monozyten und Lymphozyten
gebildet. Die azurophilen Granula entsprechen Lyso-
somen und enthalten saure Hydrolasen, antibakterielle
Substanzen und die, für die Bildung des hoch bakterizid
wirkenden Hypochlorit verantwortliche, Myeloper-
oxidase. Die spezifischen und azurophilen Granula
fusionieren mit Phagosomen zu Phagolysosomen und
entleeren ihren Inhalt in einem Prozess, der als
Degranulierung bezeichnet wird. Die Abbauprodukte
werden zum Teil durch Exozytose freigesetzt. Subtypen
der tertiären Granula enthalten Phosphatasen und
Metalloproteinasen, Kollagenasen und Gelatinasen, die
in unterstützender Funktion die Wanderung der Zellen
im Bindegewebe erleichtern. Die Granula der neutro-
philen Granulozyten werden speziellen Typen der sekre-
torischen Lysosomen (siehe Abb. 48, 49) zugeordnet.
Neben den dicht gepackten spezifischen, Azur- und
tertiären Granula sind die anderen Zellorganellen nicht
auffällig, doch enthalten die Zellen eine beträchtliche
Menge an Glykogen, das im Zytoplasma in Form von
dichten, verstreut eingelagerten Granula (siehe auch
Abb. 64) sichtbar ist. Anaerobe Glykolyse erlaubt den
neutrophilen Granulozyten in einem von der Sauer-
stoffzufuhr abgeschnittenen Umfeld zu überleben.
Literatur
Blott EJ, and Griffiths GM (2002) Secretory lysosomes. Nat Rev
Mol Cell Biol 3: 122
Jiang X, Kobayashi T, Nahirney PC, del Saz EG, and Seguchi H
(2000) Ultracytochemical study on the localization of superoxide
producing sites in stimulated rat neutrophils. Anat Rec 258: 156
Lowe JB (2003) Glycan-dependent leukocyte adhesion and
recruitment in inflammation. Curr Opin Cell Biol 15: 531
Stephens L, Ellson CC, and Hawkins P (2002) Roles of PI3Ks in
leukocyte chemotaxis and phagocytosis. Curr Opin Cell Biol 14:
203
Weiner OD (2002) Regulation of cell polarity during eukaryotic
chemotaxis: the chemotactic compass. Curr Opin Cell Biol 14:
196
Vergrößerung: x 28,000
Abbildung 156 315

Neutrophiler Granulozyt

Nukleus

Golgi

Nukleus
316
EOSINOPHILER GRANULOZYT
Im Differentialblutbild machen die eosinophilen Gra-
nulozyten 2–4% aller Leukozyten aus. Eine Vermehrung
tritt bei parasitären Infektionen und Allergien auf,
Befunde, die auf die wichtige Rolle der eosinophilen
Granulozyten im Abwehrsystem und bei überschießen-
den Immunreaktionen hinweisen. Die eosinophilen
Granulozyten sind nach ihren auffällig großen, eosino-
philen Granula benannt. Sie sind, ebenso wie andere
Leukozyten, mobile Zellen, die das zirkulierende Blut
verlassen, in das Bindewebe auswandern, sich zu Ent-
zündungsherden bewegen und potentiell gefährdete
Körperregionen besiedeln. Besonders zahlreich sind die
eosinophilen Granulozyten im lymphoretikulären
Bindegewebe der Darmschleimhaut.
In der Abbildung eines eosinophilen Granulozyten
aus dem peripheren Blut ist eines der Kernsegmente
(Nukleus) zu sehen. Der Kern ist meist zweilappig. Das
kondensierte Chromatin bildet ein breites Band in der
Peripherie des Kernraums. Das ultrastrukturelle Bild des
Zytoplasmas wird von den großen spezifischen eosino-
philen Granula dominiert. Die Granula können auf
Grund des intensiv elektronendichten zentralen
Kristalloids leicht identifiziert werden. Die kristalloiden
Granulakörper enthalten ein basisches Protein (major
basic protein), das für die Eosinophilie der Granula ver-
antwortlich ist, und ebenso, wie einige Proteine, die in
der Granulamatrix lokalisiert sind, eine besonders aus-
Zellen des Bluts
geprägte Toxizität gegenüber Wurmparasiten und
Protozoen besitzt. Nach Bindung an die Parasiten-
oberfläche wird der toxische Inhalt der Granula direkt
auf die Membranen der Parasiten freigesetzt. Produkte
eosinophiler Granulozyten modulieren die Aktivität
von Mastzellen. Die eosinophilen Granula enthalten
Enzyme, die potentiell gefährliche Effekte vasoaktiver
Substanzen, die im Rahmen von Entzündungs-
reaktionen freigesetzt werden, abschwächen. So wie in
den neutrophilen (Abb. 156) werden auch in den
eosinophilen Granulozyten Azurgranula gebildet. Sie
entsprechen Lysosomen und enthalten eine Reihe saurer
Hydrolasen, die bei der Zerstörung von Parasiten und
dem Abbau von Antigen-Antikörperkomplexen beson-
dere Bedeutung haben. Nahe der Oberfläche des abge-
bildeten Eosinophilen sind große Vakuolen, die auf
Makropinozytose hinweisen, zu sehen. Besonders
spezialisiert sind eosinophile Granulozyten für die
Phagozytose von Antigen-Antikörperkomplexen.
Sowohl die spezifischen eosinophilen Granula, als
auch die Azurgranula werden zu speziellen Klassen
sekretorischer Lysosomen gerechnet.
Literatur
Blott EJ, and Griffiths GM (2002) Secretory lysosomes. Nat Rev
Mol Cell Biol 3: 122
Vergrößerung: x 29,000
Abbildung 157 317

Eosinophiler Granulozyt

Nukleus
318
MONOZYT
Monozyten, die größten der weißen Blutzellen, machen
2–8% der gesamten Leukozyten im Blut aus. Sie stam-
men aus dem Knochenmark und sind die Vorläufer-
zellen der Makrophagen und der Phagozyten des
mononukleären phagozytierenden Systems in ver-
schiedenen Geweben und Organen. Es gehören die
Alveaolarphagozyten der Lunge ebenso dazu wie die
Kupffer’schen Sternzellen in der Leber (Abb. 97), die
Mikrogliazellen im zentralen Nervensystem und die
Erythrozyten-abbauenden Phagozyten in der roten
Pulpa der Milz. Auch befinden sich unter den als
Monozyten klassifizierten Blutzellen die Vorläuferzellen
der Osteoklasten (Abb. 136).
Monozyten besiedeln fast jedes Organ des Körpers.
Sie werden im Blut zu den diversen Organen trans-
portiert, die weitere Differenzierung der Monozyten zu
Zellen, die zur Phagozytose (siehe Abb. 47B) befähigt
sind, den Makrophagen, findet jedoch außerhalb der
Gefäße im Bindegewebe statt. Makrophagen gehören zu
den mobilen Bindegewebszellen (siehe Abb. 124, 125,
127), die sowohl beim physiologischen Umbau von
Geweben und Organen als auch bei pathologischen
Gewebsreaktionen und bei der Ausschaltung schädigen-
der Substanzen, Mikroorganismen und Viren eine zen-
trale Rolle spielen. Sie bauen extrazelluläres
Matrixmaterial und überalterte Fibrillen und Fasern ab
und eliminieren Reste degenerierter Zellen und
Apoptosekörper (Abb. 11). Angezogen von Reaktions-
produkten nach Invasion von Mikroorganismen und
Gewebsschädigungen wandern Makrophagen zu Ent-
zündungsherden und Regionen pathologischen Ge-
websumbaus. Sie phagozytieren Zellen und Mikro-
organismen und reinigen das Gewebe von toten Zellen,
abgelagerten Materialien und Trümmern nach Gewebs-
zerstörung. Monozyten differenzieren auch in Antigen-
präsentierende Zellen, die internalisierte Antigene zum
Teil abbauen und die Fragmente, zusammen mit den
Histokompatibilitätsmolekülen II, an der Zelloberfläche
den Zellen des spezifischen Abwehrsystems (Abb. 159)
anbieten.
Zellen des Bluts
Die Abbildung zeigt einen Monozyten aus dem
menschlichen Blut. Der Kern hat eine charakteristisch
eingedellte Form. Im Zytozentrum sind Anschnitte der
Zentriolen zu sehen (Pfeile) und benachbart mehrere
Stapel von Golgi Zisternen. Monozyten werden zwar in
der Klassifizierung der Blutzellen zu den agranulären
Zellen gerechnet, besitzen aber, so wie die neutrophilen
und eosinophilen Granulozyten, azurophile Granula.
Die Azurgranula entsprechen Lysosomen (Ly), die in
den ausdifferenzierten Phagozyten durch Fusion mit
Phagosomen die Bildung von Phagolysosomen be-
wirken, in denen das den Zellen einverleibte Material
abgebaut wird. Das ultrastrukturelle Bild des Zyto-
plasmas mit den zahlreichen Mitochondrien (M), glat-
tem und rauem endoplasmatischen Retikulum (RER),
Transportvesikeln in der Golgi Region und Endozytose-
vesikeln an der Plasmamembran weist auf Aktivität der
Zellen, Syntheseleistungen und Transportfunktionen
hin.
Literatur
Ishibashi M, Hiasa K, Zhao QW, Inoue S, Ohtani K, Kitamoto S,
Tsuchihashi M, Sugaya T, Charo IF, Kura S, Tsuzuki T, Ishibashi T,
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alterations in subendothelial matrix perlecan leads to increased
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shear stress regulates monocyte adhesion to oxidized lipid-
induced endothelial cells via an IkappaBalpha dependent path-
way. Biorheol 41: 127
Vergrößerung: x 34,000
Abbildung 158 319

Monozyt

Nukleus

RER
Golgi M

Ly
320
LYMPHOZYT
Lymphozyten sind die immunkompetenten Zellen des
spezifischen Abwehrsystems, die dazu ausgebildet sind,
Antigene zu erkennen und eine spezifische Immun-
antwort zu geben. Sie sind als heterogene Zellpopula-
tion im peripheren Blut mit etwa 30%, bezogen auf alle
Leukozyten, vertreten. Lymphozyten werden im Blut
und in der Lymphe transportiert und rezirkulieren zu
ihren angestammten Bereichen in den lymphatischen
Geweben und Organen. Auch wenn sie sich morpholo-
gisch ähnlich darstellen, handelt es sich bei den
Lymphozyten doch um eine heterogene Population von
Zellen, die sich in verschiedenen Aspekten, Abstam-
mung, Funktion, Ort der Differenzierung, Oberflächen-
charakteristika, Lokalisation im lymphatischen Gewebe
und Lebensdauer, unterscheiden. Drei Haupttypen wer-
den klassifiziert, die T-Lymphozyten (T-Zellen), die B-
Lymphozyten (B-Zellen) und die natürlichen Killer-
zellen (natural killer cells – NK-Zellen).
Die Bezeichnung der T-Zellen leitet sich vom
Thymus, wo für diese Klasse der Lymphozyten die
Differenzierung zu immunkompetenten Zellen statt-
findet, ab. Die T-Zellen sind die Lymphozyten der zel-
lulären Immunität und werden weiter unterteilt bezo-
gen auf ihre Oberflächendifferenzierung und die An-
wesenheit von CD4- oder CD8-Proteinen in der
Plasmamembran, die entsprechend MHC II oder MHC
I (MHC – major histocompatibility complex)-gebun-
dene Antigene erkennen. CD4+-Helferlymphozyten
spielen eine zentrale Rolle bei der Einleitung einer
Immunantwort nach Auftreten eines Antigens. Bindung
ihres Rezeptors an ein MHC II-assoziiertes Antigen an
der Oberfläche einer Antigen-präsentierenden Zelle
aktiviert die Zellen, führt zur Proliferation und
Differenzierung weiterer T- und NK-Zellen und
Differenzierung von B-Lymphozyten in Plasmazellen,
die spezifische Antikörper synthetisieren und sezernie-
ren. CD8+-Lymphozyten sind im Gegensatz zu den
CD4+-Zellen primäre Effektorzellen. Stimuliert durch
die Bindung ihrer Rezeptoren an MHC I-assoziierte
Antigene an der Oberfläche virusinfizierter oder neo-
plastischer Zellen sezernieren sie Perforine, die in den
Membranen transformierter Zellen Kanäle bilden und
ihre Auflösung bewirken.
B-Lymphozyten sind nach der Bursa Fabricii im
Vogeldarm, wo sie ursprünglich entdeckt wurden,
beziehungsweise nach den Bursaäquivalenten in den
Zellen des Bluts
Säugetieren, zu denen das Knochenmark gehört, be-
nannt. Sie sind die kompetenten Zellen der humoralen
Immunität. Reife B-Zellen exprimieren auf ihrer Ober-
fläche MHC II-Moleküle und Antikörper und differen-
zieren nach Aktivierung in die Antikörper-sezernieren-
den Plasmazellen (siehe Abb. 127).
Natürliche Killerzellen besitzen unabhängig von
einer Antigenaktivierung zytotoxische Eigenschaften,
die bei der Ausschaltung von virusinfizierten Zellen und
Abtötung von Tumorzellen eine bedeutende Rolle spie-
len.
Die Abbildung zeigt einen Lymphozyten aus dem
menschlichen Blut. Die meisten der im Blut zirkulieren-
den Lymphozyten liegen mit ihrem Durchmesser in der
Größenordnung von 6–15µm. Das Zytoplasma enthält
zahlreiche freie Ribosomen. Einige Mitochondrien (M)
und wenige Zisternen des rauen endoplasmatischen
Retikulums (RER) sind im Zytoplasma zu sehen. Stapel
kurzer Golgi Zisternen begleitet von vielen Vesikeln mit
und ohne Coat sind im Zytozentrum nahe dem Zellkern
gelegen. Ein multivesikuläres Körperchen (MVB) ist
dem Golgi Apparat benachbart und weist auf das endo-
somale System hin, in dem in den B-Zellen MHC II
Moleküle mit den Antigenpeptiden beladen werden.
Die im Blut zirkulierenden Lymphozyten sind
hauptsächlich reife T-Zellen. Reife B-Zellen sind in
geringerer Zahl vorhanden. Zirka 5–10% der Zellen, die
als Lymphozyten diagnostiziert werden, besitzen weder
T-Zell- noch B-Zellcharakteristika. Dazu gehören NK-
Zellen und auch wenige, im Blut zirkulierende, hämato-
poetische Stammzellen.
Literatur
Boes M, Cuvillier A, and Ploegh H (2004) Membrane specializa-
tions and endosome maturation in dendritic cells and B cells.
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Vergrößerung: x 37,000
Abbildung 159 321

Lymphozyt

M
RER

MVB Golgi

Nukleus
322
MEGAKARYOZYT UND THROMBOZYTENBILDUNG
Megakaryozyten sind polyploide Riesenzellen im Kno-
chenmark, aus deren Zytoplasma die für die Blutge-
rinnung notwendigen Blutplättchen (Thrombozyten)
als kleine scheibenförmige Zellelemente abgeschnürt
und direkt in das zirkulierende Blut abgegeben werden.
Die Thrombozytenbildung durch die Megakaryozyten
und ihre Abgabe in das Blut wird über Thrombopoetin,
einem aus der Leber und Milz stammenden Glyko-
protein, reguliert. Im Verlauf der Megakaryozyten-
differenzierung entsteht bei fortlaufender DNA-Repli-
kation und gleichzeitiger Unterdrückung der Mitose ein
polyploider Kern. Die Polyploidisierung hängt mit der
Unterdrückung von Stathmin, einem Regulator der Mikro-
tubuliaktionen in der Zellteilungsspindel, zusammen.
Die Blutplättchen werden im Zytoplasma der Mega-
karyozyten vorgebildet. In den speziellen Plättchen-
bildungsregionen, an denen die Oberfläche vorgewölbt
ist, werden jeweils 10–20 Plättchen vorgeformt. Die
reifenden Plättchenvorstufen werden mit Organellen
und Granula, die aus den zentralen Zytoplasmaarealen
der Megakaryozyten in die Plättchenbildungszonen
transportiert werden, gefüllt und durch ein Demar-
kierungssystem, das sich aus Plasmamembran-
einstülpungen bildet, abgegrenzt. Nach Füllung mit
Organellen, Granula und Zytoskelettkomponenten wird
ein marginales Mikrotubulusband, das aus 8–12
Windungen eines einzigen Mikrotubulus besteht,
gebildet. Die oberflächlich gelegenen Plättchen-
bildungsregionen stülpen sich durch die Spalten zwi-
schen den Endothelzellen der Knochenmarkssinus vor,
sodass die sich abschnürenden Plättchen direkt in das
Blut gelangen.
Die Abbildungen A und C zeigen Megakaryozyten-
segmente aus dem menschlichen Knochenmark. Eine
grobe Abgrenzung der zukünftigen Plättchen durch
demarkierende Membranen (eingekreister Stern) ist
bereits erkennbar. Teilweise ist das Zytoplasma noch frei
von Organellen, teilweise gefüllt mit verschiedenen
Kompartimenten, Organellen und Granula, Alpha-
Granula und Dense Core Granula, entsprechend ihrem
Vorkommen in den zukünftigen Thrombozyten.
Zellen des Bluts
Demarkierende Membranen, die nicht für die
Abtrennung der Thrombozyten verwendet wurden,
bilden in den von den Megakaryozyten abgelösten
Plättchen das offene kanalikuläre System (Abb. B). Das
Lumen der tief in das Zytoplasma invaginierten Ka-
nälchen ist in Verbindung mit dem Extrazellularraum.
Das zweite Kanalsystem der Plättchen, das dichte
tubuläre System (Stern in Abb. B, Abb. 161), leitet sich
vom endoplasmatischen Retikulum ab und dient als
Kalziumspeicher.
In der Plättchendifferenzierung können zwei Phasen
unterschieden werden. In der ersten Phase, die durch
thrombozytenspezifische Wachstumsfaktoren induziert
wird und einige Tage dauert, kommt es zur Polyploidi-
sierung, zur Volumszunahme des Zytoplasmas und
Bildung der spezifischen Kompartimente und Granula.
In der zweiten Phase werden die Plättchenbildungs-
regionen mit den Organellen und Granula gefüllt und
die vorgebildeten Thrombozyten in das Blut abgegeben.
Diese Vorgänge spielen sich innerhalb von Stunden ab.
Literatur
Ebbeling L, Robertson C, McNicol A, and Gerrard JM (1992)
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megakaryocytes. Biophys J 84: 2646
Rubin CI, French DL, and Atweh GF (2003) Stathmin expression
and megakaryocyte differentiation: A potential role in polyploidy.
Exp Hematol 31: 389
Vergrößerung: x 15,000 (A); x 12,000 (B); x 34,500 (C)
Abbildung 160 323

*
A

Alpha "Dense core"

Granula Granula
*

Offenes kanalikuläres System

B C
324
THROMBOZYT
Die Thrombozyten (Blutplättchen) sind Zytoplasma-
fragmente der Megakaryozyten im Knochenmark (siehe
Abb. 160). Nach ihrer Abschnürung und Abgabe direkt
in das Blut zirkulieren die Thrombozyten im strömen-
den Blut in Form kleiner Scheiben (Plättchen) mit
einem Durchmesser von 3–4µm. Ihre Lebensdauer
beträgt etwa 10 Tage. Die Thrombozyten spielen eine
Schlüsselrolle bei der Blutgerinnung, sowohl bei der
Bildung der Blutgerinnsel als auch bei der Retraktion
der Gerinnsel und der Reparatur des verletzten Ge-
webes. Die Endothelauskleidung der Blutgefäße wird
durch die Plättchen laufend überwacht und auf
Beschädigungen hin kontrolliert. Die Blutplättchen sind
die ersten Zellen an Orten von Endothelschäden und
Verletzungen.
Die Abbildungen A und B zeigen Thrombozyten im
Lumen eines Blutgefäßes in der Darmwand. Im Zyto-
plasma sind Organellen, Granula und Teile der
Kanälchensysteme (siehe auch Abb. 160) zu sehen. In
beiden Abbildungen ist auch das prominente marginale
Mikrotubulusband (MT), das aus einem einzigen
Mikrotubulus in 8–12 Windungen besteht, zu erkennen.
In diesem Mikrotubulus werden über 90% des
`-Tubulins von einer `1-Isoform, die für Mega-
karyozyten und Thrombozyten spezifisch ist, ein-
genommen. Das Mikrotubulusband erhält die Schei-
benform der Thrombozyten und spielt auch bei der
Vorbildung der Plättchen im Zytoplasma der
Megakaryozyten eine Rolle. Neben dem Mikrotubulus-
band haben für die Erhaltung und Änderung der
Plättchenform vernetzte Aktinfilamente, die mit
Spektrin und assoziierten Proteinen des Membran-
skeletts interagieren, eine wichtige Funktion. Die
Plättchen müssen im zirkulierenden Blut Scherkräften
widerstehen. Eine rapide Umformung ist nach
Aktivierung notwendig, wenn die Thrombozyten auf
Gefäßschäden reagieren, sich abkugeln und Filopodien
und Lamellen ausbilden.
Der zentrale, organellenreiche Teil des Zytoplasmas
wird als Granulomer bezeichnet und dem oberfläch-
lichen, außerhalb des Mikrotubulusbandes gelegenen,
organellenfreien Hyalomer gegenübergestellt. Das
Granulomer enthält Mitochondrien, Peroxisomen,
Glykogeneinlagerungen und verschiedene Granula. Die
großen Alpha-Granula (Sterne in Abb. B) enthalten
hauptsächlich Gerinnungsfaktoren, Fibrinogen, Wachs-
tumsfaktoren, Plasminogen und Plasminogenaktivator-
Zellen des Bluts
inhibitor. In den Dense Core Granula (Delta-Granula,
siehe auch Abb. 160) ist Serotonin, Adenosindi-
phosphat, Adenosintriphosphat und Histamin ge-
speichert. Die Lamda-Granula enthalten, Lysosomen
entsprechend, verschiedene Hydrolasen. Die Inhalts-
stoffe der Alpha- und Delta-Granula sind vor allem in
den initialen Blutgerinnungsphasen für die Plättchen-
aggregation, Blutkoagulation und Vasokonstriktion im
Umfeld des beschädigten Gefäßabschnitts notwendig
und wichtig für die ersten Stadien der Gefäßreparatur.
Die Inhalte der Lamda-Granula dienen hauptsächlich
der Resorption des Gerinnsels in den späten Phasen der
Wiederherstellung der Gefäßwand.
Die Thrombozyten enthalten zwei verschiedene
Membransysteme, die Membrankanäle und Tubuli des
offenen kanalikulären Systems, das sich aus den De-
markationsmembranen der Plasmamembran ableitet
(siehe Abb. 160), und das als Speicher für Kalziumionen
dienende dichte tubuläre System (weiße Pfeile in
Abb. A), das sich aus dem endoplasmatischen Reti-
kulum ableitet und bei der Regulierung des Kalzium-
haushalts eine wichtige Rolle spielt.
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cultured human megakaryocytes. Thromb Hemost 90: 844
Vergrößerung: x 63,500 (A); x 43,500 (B)
Abbildung 161 325

Offenes kanalikuläres
MT System

MT

MT

*
*

MT

B
STICHWORTVERZEICHNIS

A –, Insulinom 192
–, Langerhans’sche Insel 190
Adipozyt 266, 268 –, Schaltstück 180
Aggresomen 36 Becherzellen 184, 224
Aktinfilamente 136, 144, 146, 154, 204, 276 Becker’sche Muskeldystrophie 282
–, Bürstensaum 136, 204 Belegzellen 186
–, F-Aktin 136 –, Canaliculi 186
–, G-Aktin 136 –, Salzsäureproduktion 186
–, terminales Netzwerk 136, 204 Bindegewebe 250, 252, 254, 256, 258, 262
–, Verspannungsfasern 136 –, Amyloidose der Niere 262
Alport-Syndrom 166 –, Cornea 258
Alveolen 228 –, elastische Fasern 250, 254
–, Abwehrsystem 228 –, eosinophiler Granulozyt 256
–, Alveolarepithelzellen Typ I 228 –, fasriges Bindegewebe 250
–, Alveolarepithelzellen Typ II 228 –, Fibroblast 250, 252
–, Gasaustausch 228 –, Fibrozyt 252
–, Surfactant 228 –, kollagene Fasern 250, 254
Amyloidfibrillen 264 –, kollagene Fibrillen 250, 252, 254
–, Zeitraffer Atomkraftmikroskopie 264 –, Makrophage 252, 256
Amyloidose der Niere 262 –, Mastzelle 256
Apoptose 22, 34, 214 Birbeck-Granula 90
–, Retina 214 Blut 312, 314, 316, 318, 320, 322, 324
Astrozyten 290, 292 –, eosinophiler Granulozyt 316
Atomkraftmikroskopie 18, 264 –, Erythroblast 312
–, Kernporenkomplexe 18 –, Erythrozyt 312
Autophagie 22 –, Lymphozyt 320
Autophagozytose 114 –, Megakaryozyt 322
–, Autophagosomen 114 –, Monozyt 318
Axon 290, 292, 294, 296, 300, 302 –, neutrophiler Granulozyt 314
Axonale Degeneration 302 –, Retikulozyt 312
–, Thrombozyt 324
B –, Thrombozytenbildung 322
Basales Labyrinth 162, 208 Blut-Hirnschranke 156, 292
Basalkörper 224 Bowman’sche Schicht 260
Basallamina 164, 234, 236, 238, 278, 280, 284, 286, 294, Brauner Adipozyt 268
296, 298, 300 Brefeldin A 66, 68, 70, 72
Basalmembran 164, 166, 168, 170, 240 –, Endosomen 68
–, Alport-Syndrom 166 –, Membrantubuli 68
–, Descemet’sche Membran 168 –, Prä-Golgi Transportintermediäre 72
–, Haut 170 –, retrograder Transport internalisierter Lektine 70
–, Lamina basalis 164 –, transitorisches ER 72
–, Lamina densa 164 Bromdeoxyuridin 8
–, Lamina fibroreticularis 164 5’Bromuridin-5-Triphosphat 14
–, Lamina rara 164 Bürstensaum 134, 136, 148, 204, 208
–, Nierenglomerulum 166, 240 Bürstenzelle 146
Bauchspeicheldrüse 176, 178, 180, 190, 192
–, Azinus 176, 178 C
–, Beta-Zellen 190
–, endokrine Sekretion 190, 192 CADASIL 288
–, exokrine Sekretion 176, 178, 180 Cadherine 154, 158
Stichwortverzeichnis
Cajal Körperchen 4, 10
Calnexin/Calreticulin Zyklus 32
Caspasen 22
Caveolae 92, 234, 236
–, Endothelzellen 234
–, glatte Muskelzellen 92
Choleratoxin 92
Cholezystokinin 194
Chondrozyt 270
Chromatin 4, 6, 8, 12, 20
Chromosomen 4, 8, 10, 20
Clathrin 82
Clathrin-coated Vesikel 82
Colchicin 134
Concanavalin A 30
COPI 42
COPII 42
COP-überzogene Vesikel 42
C-Peptid 190
Crigler-Najjar-Syndrom 40
D –, Endosomen 84
Deckzellen 232
–, fusiforme Vesikel 232
Dermis-Epidermis Junktion 170, 172
–, Epidermolysis bullosa simplex 172
Descemet’sche Membran 168
Desmin 276
Diffuses endokrines System 194
–, geschlossener Typ 194
–, offener Typ 194
Disci intercalares 284
–, Fasciae adhaerentes 284
–, Gap Junctions 284
DNA 6, 8
Duchenne Muskeldystrophie 282
Dünndarmepithel 184, 204, 206
–, Becherzellen 184
–, Bürstensaum 204
–, Haftkomplexe 204
–, Lipoproteintransport 206
–, resorbierende Epithelzellen 204, 206
–, Terminalgespinst 136, 204
Dystrophin 276
E –, Keratinozyten 220, 222
EDEM 44
Eiweißfaltungskrankheiten 34
327
Eiweiß N-Glykosilierung 30, 32, 50, 52, 54
–, Golgi Apparat 50, 52, 54
–, raues endoplasmatisches Retikulum 30, 32
–, Reglukosilierung 32
Eiweiß O-Glykosilierung 58
Eiweißqualitätskontrolle 32
Elastische Fasern 250, 254
–, Elastin 254
–, Mikrofibrillen 254
Endoneurium 296
Endosomen 84, 86, 88
Endothel 234, 236, 238
–, fenestriertes Endothel 236
–, Kontakte mit Perizyten und glatten Muskelzellen 238
–, kontinuierliches Endothel 234
–, von Willebrand-Faktor 234
–, Weibel-Palade-Körperchen 234
Endozytisches System 82, 84, 86, 88, 90, 92, 94
–, Caveolae 92
–, Choleratoxin 92
–, Clathrin 82
–, Endozytisches TGN 86
–, Endozytische Wege 84
–, Endozytose 84
–, Golgi Apparat 84, 86
–, Langerhans-Zellen 90
–, Makropinozytose 82
–, Phagozytose 94
–, Pinozytose 94
–, Potozytose 92
–, Rezeptor-vermittelte Endozytose 82
–, Tubuläre perizentrioläre Endosomen 88
–, Virusendozytose 82
–, Virusinternalisation 92
Endozytisches TGN 86
Entaktin 164
Eosinophiler Granulozyt 256, 316
Eosinophiler Myelozyt 20
Ependym 202
Epidermis 90, 220, 222
–, Basalschicht 220
–, Differenzierung der Keratinozyten 222
–, Dornenzellschicht 220
–, Flüssigkeitsbarriere 222
–, Hornschicht 220
–, Körnerschicht 220
–, Lamellenkörperchen 222
Epidermolysis bullosa simplex 172
328 Stichwortverzeichnis

Epineurium 296 –, Gap Junctions 284

ERAD 44 Glatte Muskelzelle 92, 286
ER-Mannosidase I 32 Glatte Muskulatur 164, 286, 288
ER-Overload Response 34 –, Area densa 286
Ergastoplasma 26 –, CADASIL 288
Erythroblast 312 –, Synapse á distance 286
Erythropoetin 312 Glattes endoplasmatisches Retikulum 38, 40
Erythropoetische Blutbildungsreihe 312 –, Proliferation 40
Erythropoetische Protoporphyrie 130 Gliazellen 290
Erythrozyt 312 Glomeruläre Basalmembran 240
Exozytose 78, 80 Glomeruläre Erkrankungen 244, 246, 248
–, membranoproliferative Glomerulonephritis 246
F –, membranöse Glomerulonephritis 244
–, Transplantatglomerulopathie 248
Fettgewebe 266, 268 Glukosidase I 32
–, brauner Adipozyt 268 Glukosidase II 32, 44
–, braunes Fettgewebe 268 Glukosyltransferase 32, 44
–, weißer Adipozyt 266 Glykogen 38, 128
–, weißes Fettgewebe 266 Glykogenose vom Typ I 128
Fibroblast 250, 252 Glykogenose vom Typ II 112
Fibronektin 164 Glykokalyx 142, 148, 150, 152
Fibrozyt 252 –, Antennulae microvillares 148
Filaggrin 222 –, Bürstensaum 148
Filopodien 144 –, Domänenbildung 150
Fleckdesmosomen 154, 158 –, Hirnentwicklung 152
–, Cadherin 158 –, Karzinom-assoziierte Glykane 152
–, Plaqueproteine 158 –, Polysialinsäure 152
–, Zytokeratinfilamente 158 –, Unterschiede zwischen Zelltypen 150
Flimmerzellen 224 –, Veränderungen in Tumoren 152
Flügelzellen 252 –, Wilms Tumor 152
Fukuyama Muskeldystrophie 282 GM2-Gangliosidosen 106
Fusiforme Vesikel 232 Golgi Apparat 20, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66,
–, AUM-Partikel 232 70, 74, 76, 84, 86, 134
–, Deckzellen 232 –, ATP-abhängige Strukturveränderungen 76
–, Uroplakin Plaques 232 –, N-Azetylglukosaminyl-, Galaktosyl-, Fukosyl-,
Sialyltransferasen 52
G –, N-Azetylglukosaminyltransferase I 50
–, Brefeldin A 66, 70
Gap Junctions 156 –, Camillo Golgi 46
–, Connexine 156 –, cis-Seite 46
–, Connexon 156 –, Endozytose 60, 86
–, Gefrierbruch 156 –, N-Glykan Trimmen 50
Gastrin 194 –, Golgi Mannosidase I 50, 52, 54
Gelenkknorpel 270 –, Glykosilierung von Proteinen 50
–, Chondrone 270 –, Golgi Stapel 46
–, Chondrozyt 270 –, Golgi-Mannosidase II 50
–, Matrix 270 –, Hitzeschock 74
Gilbert-Syndrom 40 –, Hochdruckkryofixierung 64, 66
Glanzstreifen 284 –, Immunelektronenmikroskopie 48
–, Fasciae adhaerentes 284 –, Kippserie 64
Stichwortverzeichnis 329

–, komplexe N-Glykane 52 –, Tonofilamente 138, 220, 222

–, mannosereiche N-Glykane 52 –, Zytokeratin 138
–, Mitose 20 Ito Zellen 196, 198
–, Polypeptid-GalNAc Transferase 58 I-Zellkrankheit 100
–, Protein N-Glykosilierung 54, 56
–, Protein O-Glykosilierung 58 J
–, Proteinsekretion 48
–, Sekretion 60 Junktionaler Komplex 154, 204
–, Synthese der Asparagin-verknüpften Glykane 52 –, Cadherine 154
–, trans-Golgi-ER 62, 64 –, _- und `-Catenine 154
–, trans-Seite 46 –, Desmogleine 154
Gürteldesmosom 154 –, Desmokolline 154
–, Dünndarmepithel 204
H –, Fleckdesmosom 154
–, Gürteldesmosom 154
Haftkomplex 154, 204 –, Macula adhaerens 154
Haut 170, 220, 222 –, Tight Junctions 154
–, Dermis-Epidermis Junktion 170 –, Zonula adhaerens 154
–, Epidermis 220, 222 –, Zonula occludens 154
–, Keratinozyten 170
–, Melanozyt 170, 220 K
Hemidesmosom 170
–, Integrin 170 Kapillare 234, 236
Hereditäre Nephritis 166 –, Endothel 234
Herzmuskulatur 284 –, fenestriertes Endothel 236
–, Glanzstreifen 284 –, kontinuierliches Endothel 234
–, Myofibrillen 284 –, Perizyt 234
Heymann-Nephritis Antigen gp330 208 Kartagener-Syndrom 226
Histamin 194, 256 Keratinozyt 170, 220
Hitzeschock 74 Keratohyalingranula 220, 222
–, Golgi Apparat 74 Kernhülle 4, 28
–, Mitochondrien 74 –, Kernporen 4
–, raues endoplasmatisches Retikulum 74 –, perinukleäre Zisterne 4, 28
–, Zytoskelett 74 Kernlamina 6, 138
Hitzeschockproteine 74 –, Lamin-assoziierte Proteine 1 und 2 6
HIV (human immunodeficiency virus) 82 –, Muskeldystrophie 6
Hochdruckkryofixierung 62, 64, 66, 72, 136, 270 Kernporenkomplexe 16, 18
–, Atomkraftmikroskopie 18
I –, dreidimensionale Struktur 16
–, Gefrierbruch 16
Insulin 190, 194 –, Kryo-Elektronenmikroskopie 16
Insulinom 192 Kinozilien 224, 226
Integrin 170 –, Axonema 224
Intermediärfilamente 6, 138, 140, 154, 158, 220, 222, –, Dynein 224
276, 294 –, Dyneinmangel 226
–, Desmin 276 –, Kartagener-Syndrom 226
–, Kernlamina 6 –, Kinozilienbewegung 224
–, Lamine 138 –, Pathologie 226
–, Mallory-Körper 140 –, Syndrom immotiler Kinozilien 226
–, Neurofilamente 294
330 Stichwortverzeichnis

Knochen 272, 274 –, I-Zellkrankheit 100

–, Mineralisation 272 –, metachromatische Leukodystrophie 308
–, Osteoblast 272 –, Morbus Fabry 104
–, Osteoid 272 –, Morbus Farber 108
–, Osteoklast 274 –, Morbus Gaucher 102
–, Osteozyt 272 –, Morbus Wolman 110
Knochenabbau 274 Lysosomales System 96, 98, 100, 102, 104, 106, 108, 110,
Knochenmark 322 112
Knorpel 270 –, Lamp 98
–, Gelenkknorpel 270 –, lysosomale Enzyme 96, 98
Kollagen vom Typ I 250 –, lysosomale Membranen 98
Kollagene Fasern 250, 254 –, Lysosomen 96, 98
Kollagene Fibrillen 250, 252, 254 –, Mannose-6-Phosphat 96
–, Streifenmuster 254 –, Polylaktosamin 98
Kornea 218, 258, 260 –, saure Phosphatase 98
–, Bindegewebsschicht 258 –, sekretorische Lysosomen 98, 256, 314, 316
–, Bowman’sche Schicht 260
–, Descemet’sche Membran 168 M
–, Vorderes Hornhautepithel 218
Krinophagie 114 Macula adhaerens 154, 158, 204, 222
Kubilin 208 Magen 186
Kultschinsky-Zellen 224 –, Belegzellen 186
Kupffer’sche Sternzelle 94, 196, 198 Makropexie 114
Makrophage 250, 252, 256, 318
L Makropinozytose 82
Mallory-Körper 140
Lamellipodien 144 –, Zytokeratin 8 und 18 140
Lamina basalis 164 Mannose-6-Phosphatrezeptoren 98
Lamina fibroreticularis 164 Markhaltige Nervenfaser 298, 300
Lamine 6, 138 –, Myelinscheide 298, 300
Laminin 164 –, paranodale und juxtaparanodale Areale 300
Langerhans’sche Insel 190 –, Schmidt-Lanterman’sche Inzisuren 298
Langerhans-Zellen 90 Marklose Nervenfaser 294, 296
–, Birbeck-Granula 90 Mastzelle 256
–, Langerin 90 Megakaryozyt 170, 322
Leber 196, 198, 200 Megalin 208
–, Disse’scher Raum 196, 200 Melanozyt 170, 220
–, Gallencanaliculi 196 Mesaxon 294
–, Ito Zelle 196 Metachromatische Leukodystrophie 308
–, Kupffer’sche Sternzelle 196 Mikrotubuli 132, 134
–, Leberepithel 196, 198, 200 –, Ausschaltung 134
–, Lipoproteintransport 200 –, Bürstensaum 134
–, VLDL 38 –, dynamische Instabilität 132
Lunge 228 –, Golgi Apparat 134
Lymphozyt 320 –, _-Tubulin 132
Lysosomale Enzyme 96 –, `-Tubulin 132
Lysosomale Speicherkrankheiten 100, 102, 104, 106, –, Zellpolarität 134
108, 110, 112, 308, 310 Mineralisierte Knochenmatrix 272
–, GM2-Gangliosidose 106 Mitochondrien 22, 116, 118
–, Glykogenose vom Typ II 112 –, Crista-Typ 116
Stichwortverzeichnis 331

–, Myopathien 118 –, Perikaryon 290

–, parakristalline Einschlüsse 118 Neurotubuli 294
–, programmierter Zelltod 116 Neutrophiler Granulozyt 314
–, Strukturabnormalitäten 118 Niere 166, 188, 208, 210, 240, 244, 246, 248, 262
–, toxische Einflüsse 118 –, AA-Amyloidose 262
–, Tubulus-Typ 116 –, AL-Amyloidose 262
Mitose 20 –, Bürstensaum 208
Monozyt 318 –, distaler Tubulus 162
Morbus Fabry 104 –, Einfluss von Parathormon auf die proximalen Tubuli
Morbus Farber 108 210
Morbus Gaucher 102 –, glomeruläre Erkrankungen 244, 246, 248
Morbus Wolman 110 –, Glomerulum 240
Motilin 194 –, proximaler Tubulus 208, 210
Motorische Endplatte 280 –, Regulation des Säure-Basen Haushalts 188
Mott-Zelle 34 –, Sammelröhrchen 188
Muskeldystrophien 282 –, Schaltzellen 188
Myelin 298 Nierenglomerulum 240
Myelinscheide 298, 300 –, Basalmembran 240
Myofibrille 276, 284 –, Filtrationsdiaphragmen 240
–, A-Bänder 276 –, Filtrationsschlitze 240
–, H-Zone 276 –, Podozyten 240
–, I-Bänder 276 Nukleolus 4, 10, 12, 14, 26
–, M-Linie 276 –, Architektur 10, 12
–, Z-Scheibe 276 –, dicht fibrilläre Komponente 10, 12
–, fibrilläres Zentrum 10, 12
N –, granuläre Komponente 10, 12
–, kompakte Nukleolen 12
Nebulin 276 –, Nukleolonema 12
Nephrin 240 –, Prä-rRNA Transkription 14
Nervengewebe 290, 292, 294, 296, 298, 300, 302, 304, –, ringförmige Nukleolen 12
306, 308, 310 Nukleoporine 16
–, axonale Degeneration 302
–, Blut-Hirnschranke 292 O
–, Gliazellen 290
–, markhaltige Nervenfaser 298, 300 Odland bodies 222
–, marklose Nervenfaser 294, 296 Oligodendrozyten 290
–, metachromatische Leukodystrophie 308 Oligosaccharyltransferase 30
–, Myelin 298, 300 Osteoblast 272
–, Nervenregeneration 302 Osteoid 272
–, neuroaxonale Dystrophie 304 Osteoklast 274
–, Neuron 290 –, ruffled Border 274
–, neuronale Zeroidlipofuszinosen 310 Osteozyt 272
–, Neuropathien im Gefolge von Dysproteinämien 306
–, peripherer Nerv 296 P
–, Ranvier’scher Schnürring 300
–, Synapsen 292 Pankreas 24
Neuroaxonale Dystrophie 304 Pankreasazinus 176, 178
Neuron 290 –, Azinuszellen 176, 178
–, Dendrit 290 –, Azinuszentrum 178
–, Neurit 290 –, Zentroazinäre Zellen 178
332 Stichwortverzeichnis

Pankreasazinuszelle 24, 26, 46, 78, 176, 178 –, Apoptose 22

–, Amylase 24 –, Autophagie 22
–, Proteinbiosynthese 24 –, Mitochondrien 116
–, raues endoplasmatische Retikulum 24 Prokollagensynthese 254
–, Zymogengranula 24, 46, 48, 78, 176, 178 Protein N-Glykosilierung 50, 52, 54, 56
Parathormon 210 –, Antiporter 52
Perineurium 296 –, N-Azetylglukosaminyl-, Galaktosyl-, Fukosyl-,
Peripherer Nerv 294, 296, 298, 300 Sialyltransferasen 52
–, Bindegewebshüllen 296 –, N-Azetylglukosaminyltransferase I 50
Perizyt 234, 238 –, N-Glykan Trimmen 50
Perlakan 164 –, Glykosyltransferasen 52
Peroxisomen 120, 122, 124, 126 –, Golgi-Mannosidase I 50
–, adaptive Veränderungen 124 –, Golgi-Mannosidase II 50
–, Biogenese 122 –, komplexe N-Glykane 52
–, Enzymdefekte 126 –, mannosereiche N-Glykane 52
–, Immungoldmarkierung 120 –, Zelltyp-abhängige Unterschiede im Aufbau von
–, Katalase 120 Glykanen 56
–, kristalliner Einschluss 120 –, Zelltyp-abhängige Unterschiede in der Topographie
–, Matrix 120 von Glykosilierungsreaktionen 54
–, Pathologie 126 Protein O-Glykosilierung 58
–, PMP-70 120 –, Polypeptid-GalNAc Transferase 58
–, Störungen der Peroxisomenbiogenese 126 –, Topographie der Biosynthese von Serin-/Threonin-
–, Uratoxidase 120 verknüpften Glykanen 58
–, Zellweger-Syndrom 126 Proteinsekretion 48
Phagozytose 94 –, Amylase 48
Pigmentepithel 212, 214 –, Golgi Apparat 48
Pinozytose 94 –, Immunelektronenmikroskopie 48
Plasmamembran 142 –, kondensierende Vakuolen 48
–, Fluid-Mosaik Modell 142 –, Prä-Golgi Transportintermediäre 48
–, Gefrierbruch Elektronenmikroskopie 142 –, raues endoplasmatisches Retikulum 46, 48
–, Glykokalyx 142 –, Sekretgranula 24, 46, 48, 78, 176, 178
–, integrale Membranproteine 142 –, Zymogengranula 24, 46, 48, 78, 176, 178
–, Lipidbilayer 142
–, Mikrodomänen 142 R
–, periphere Membranproteine 142
Plasmazelle 256 Ranvier’scher Schnürring 300
Plexus choroideus 202 Raues endoplasmatisches Retikulum 26, 28, 30, 32, 34,
PNS 294, 296, 298 36, 42
Podocalyxin 240 –, Aggresomen 36
Podoplanin 240 –, Apoptose 34
Podozyt 166, 240 –, Eiweiß N-Glykosilierung 30
–, Schlitzdiaphragmen 166 –, Eiweißqualitätskontrolle 32
Polyoma Viren 22 –, Eiweißtranslokation 30
Polysomen 26 –, Reglukosilierung 32
Potozytose 92 –, Russell-Körper 34, 36
Prä-Golgi Transportintermediäre 42, 44, 46, 72 –, Speicherort für nicht korrekt gefaltete, aggregierte
–, Eiweißqualitätskontrolle 44 Glykoproteine 34
–, Trimmen von Oligosacchariden 44 –, transitorische Elemente 42
Prä-rRNA 10, 14, 26 –, Trimmen der Oligosaccharide 32
Programmierter Zelltod 22, 116 Regulierte Sekretion 80
Stichwortverzeichnis 333

Retikulozyt 312 Skelettmuskulatur 276, 278, 280, 282

Retina 212, 214 –, Duchenne Muskeldystrophie 282
–, Licht-induzierte Apoptose 214 –, motorische Endplatte 280
–, Photorezeptoren 212, 214 –, Muskeldystrophien 282
–, Pigmentepithel 212 –, Myofibrille 276
–, Rhodopsin 212 –, Sarkomer 276
–, Stäbchen 212 –, sarkoplasmatisches Retikulum 278
–, Zapfen 212 –, Satellitenzelle 278
Rezeptor-vermittelte Endozytose 82 –, Triade 276, 278
Ribosomen 26 Somatostatin 194
Ricinus communis I Lektin 82, 84, 88 Submandibulardrüse 182
Riechepithel 216 –, Schaltstück 182
–, Fila olfactoria 216 –, sero-muköses Endstück 182
–, Riechkolben 216 –, seröser Halbmond 182
–, sensorische Neurone 216 –, Streifenstück 182
–, Stützzellen 216 Substanz P 194
RNA 6, 10, 14 Surfactant 228
Russell-Körper 34, 36 –, antimikrobielle Wirkung 228
Synapse á distance 286
S Synapsen 280, 286, 292
–, asymmetrische Synapsen 292
Sarkomer 276 –, symmetrische Synapsen 292
Sarkoplasmisches Retikulum 278 Syndrom immotiler Kinozilien 226
Satellitenzelle 278
Saumzelle 204 T
Schmidt-Lanterman’sche Inzisuren 298
Schwannzelle 294, 296, 298, 300, 302 Terminalgespinst 136, 204
Sec61-Komplex 30 Thrombozyt 322, 324
Sekretgranula 46, 48, 78, 80 –, Alpha-Granula 324
Sekretion 24, 26 –, Dense Core Granula 324
–, Protein A-Gold Technik 24 –, dichtes tubuläres System 324
–, raues endoplasmatisches Retikulum 24, 26 –, Granulomer 324
–, Ribosomen 26 –, Hyalomer 324
Sekretorische Lysosomen 98, 256, 314, 316 –, Mikrotubulusband 324
Sekretorisches System 24, 26, 28, 30, 32, 34, 36, 38, 40, –, offenes kanalikuläres System 324
42, 44, 46, 48, 50, 52, 54, 56, 58, 60, 62, 64, 66, 68, 70, 72, Thrombozytenbildung 322
74, 76, 78, 80 Tight Junctions 154, 156, 204, 218, 220, 234, 292
–, Aggresomen 36 –, Blut-Hirnschranke 156, 292
–, Brefeldin A 68, 72 –, Claudin 156
–, glattes endoplasmatisches Retikulum 38, 40 –, Gefrierbruch 156
–, Golgi Apparat 46, 50, 52, 54, 58, 60, 62, 64, 66, 74, 76 –, Occludin 156
–, Immunelektronenmikroskopie 48 –, Zonulaproteine 156
–, kondensierende Vakuolen 46 Titin 276
–, Prä-Golgi Transportintermediäre 42, 44, 50 Tonofilamente 138, 158
–, raues endoplasmatisches Retikulum 28, 30, 32, 34, 36, Tracheobronchialepithel 224
74 –, Basalkörper 224
–, Ribosomen 26 –, Basalzellen 224
–, Russell-Körper 36 –, Becherzellen 224
–, Sekretgranula 24, 46, 48, 78, 80 –, Flimmerzellen 224
–, TGN 60, 62, 64 –, Kultschinsky-Zellen 224
334 Stichwortverzeichnis

Trans-Golgi Netzwerk (TGN) 46, 60, 62, 64, 98 –, Architektur 4

Trans-Golgi-ER 62, 64, 86 –, Cajal Körperchen 4, 10
Translokon 30 –, Chromatinfibrillen 8
Triaden 276, 278 –, Chromosomen 4, 6, 8, 10, 20
–, T-Tubulussystem 278 –, Domänen in Interphasenchromosomen 8
–, Terminalzisternen des L-Systems 278 –, Interchromatingranula 4
Tropokollagen 254 –, Kernlamina 6
Tropomodulin 276 –, Kernporen 16, 18
Typ-IV Kollagen 164 –, Nachweis von Orten der DNA-Replikation 8
–, Nachweis von Ribonukleoproteinen 6
U –, Nukleolus 4, 10, 12, 14
–, Orte der RNA-Synthese 14
Übergangselemente (transitorische Elemente) –, Perichromatinfibrillen 6, 14
des rauen endoplasmatischen Retikulums 42, 46 –, Perichromatingranula 6
Unfolded Protein Response 34 –, Perichromatinregionen 8
Uroplakin Partikel 232 –, Prä-mRNA Partikel 6
Urothel 232 –, Virale Einschlüsse 22
–, fusiforme Vesikel 232 Zelloberfläche 142, 144, 146, 148, 150, 152
–, Gefrierbruch 232 –, Bürstenzelle 146
–, Glykokalyx 148, 150
V –, Plasmamembran 142
–, Zellen in Kultur 144
Very low density lipoprotein Partikel 38, 200, 206 Zellteilung 20
–, Leber 38, 200 Zell-Zell Verzahnungen 160
–, Dünndarm 206 Zellweger-Syndrom 126
Virale Einschlüsse 22 Zentriolen 20, 66, 132
Virusendozytose 82 Zentrosom 132
Virusinternalisation 92 ZNS 290, 292, 298
von Willebrand-Faktor 234 Zonula adhaerens 154, 204
Zonula occludens 154, 156, 204
W Zymogengranula 24, 46, 48, 78, 176, 178
Zystinose 112
Weibel-Palade-Körperchen 234 Zytokeratin 138, 158
Weißer Adipozyt 266 Zytokeratin 8 und 18 140
Weizenkeimagglutinin 70, 84 Zytomegalieviren 22
Wilms Tumor 152 Zytoskelett 132, 134, 136, 138, 140
–, Aktinfilamente 136, 144, 146, 276
Z –, Intermediärfilamente 6, 138, 140, 154, 158, 220, 222,
276, 294
Zeitraffer Atomkraftmikroskopie 264 –, Mallory-Körper 140
–, Amyloidfibrillen 264 –, Mikrotubuli 68, 132, 134
Zellbewegung 144 Zytosolische Partikel 128, 130
Zellen in Kultur 144 –, erythropoetische Protoporphyrie 130
–, Filopodien 144 –, Glykogen 128
–, Lamellipodien 144 –, Glykogenose vom Typ I 128
–, Zellbewegung 144 –, Glykosomen 128
Zellkern 4, 6, 8, 10, 14, 16, 18, 20, 22 Zytozentrum 132, 134