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CONTENIDO DE LA GUÍA
COMPETENCIAS
Interpreta los resultados de la técnica Kirby Bauer determinando el grado de sensibilidad de un
microorganismo ante un antibiótico específico.
Reconoce la limpieza y desinfección como un proceso secuencial cuyo objetivo es eliminar la suciedad y
reducir el número de microorganismos en una superficie y/o ambiente.
MARCO TEORICO
Los antibióticos son sustancias, producidas por microorganismos o sintetizadas en el laboratorio, que son
capaces de inhibir o impedir el crecimiento bacteriano. El ideal es que estos compuestos tengan efectos en
bajas cantidades y sin generar efectos tóxicos al individuo. Según su naturaleza química los antibióticos se
dividen según la tabla N°1.
FAMILIAS DE ANTIBIÓTICOS:
ANTIBIOGRAMA
Para determinar la susceptibilidad de los microorganismos a los agentes antimicrobianos, se realizan pruebas
in Vitro en el laboratorio clínico denominadas antibiogramas. La apropiada selección y uso de un agente
antimicrobiano está basado en las características del organismo etiológico, en el patrón de susceptibilidad, el
huésped y el fármaco. Los antibiogramas son reportes de test de susceptibilidad a los agentes
antimicrobianos y están indicados para cultivos bacterianos clínicamente relevantes. Existen ahora
numerosos métodos estandarizados por el National Commite for Clinical Laboratory Standards (NCCLS),
diseñadas para cuantificar la menor concentración de un antibiótico capaz de inhibir el desarrollo visible de
un microorganismo in vitro. Los métodos de referencia más conocidos son:
MACROPROCESO RECURSOS E INFRAESTRUCTURA Y LABORATORIOS
Nombre del Proceso:
CÓDIGO: LA-FM-007
LABORATORIOS
Nombre del Documento: VERSIÓN: 3
FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO FECHA: 18/Marzo/2017
E-Test:
Se emplea un cultivo en el cual se coloca una tira de antibiótico con un gradiente de concentración, permite
estudiar la CMI mediante el análisis del halo de inhibición producido. Figura 2.
Elipse. Halo de
inhibición
Punto de corte
Concentración
mínima Inhibitoria
LIMPIEZA Y DESINFECCIÓN
LIMPIEZA
Limpiar es retirar toda suciedad visible de una superficie usando sustancias químicas (detergentes –
limpiadores) y acción mecánica; Actualmente, con la masificación de los sistemas de gestión de calidad, se
diseñan procedimientos de limpieza en donde se puntualiza la secuencia de actividades que deben seguirse
para lograr este objetivo. Para establecer estos procedimientos es importante tener en cuenta las
características de la superficie que se va a limpiar y del tipo de suciedad que se encuentra presente en ella,
esto con el fin de seleccionar el detergente apropiado y elegir las actividades acordes con la necesidad
presentada.
DESINFECCIÓN
Se trata de procedimientos en los cuales a partir de la aplicación de una sustancia denominada desinfectante
se reduce la carga microbiológica de una superficie, lugar o ambiente; Para que este objetivo sea alcanzado
es preciso haber tenido un proceso eficiente de limpieza previa que haya eliminado cualquier resto de
materia orgánica y/o inorgánica que pudiera interferir con esta tarea.
MACROPROCESO RECURSOS E INFRAESTRUCTURA Y LABORATORIOS
Nombre del Proceso:
CÓDIGO: LA-FM-007
LABORATORIOS
Nombre del Documento: VERSIÓN: 3
FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO FECHA: 18/Marzo/2017
Es importante considerar que al igual que los antibióticos, los desinfectantes no pueden usarse de manera
indiscriminada puesto que podrían generar problemas tales como la resistencia de los microorganismos a las
moléculas activas de estos productos; En este orden de ideas las instituciones deben establecer un
cronograma de rotación de desinfectantes en el cual se usen periódicamente compuestos de diferentes
familias químicas con el fin de diversificar los mecanismos de acción de los mismos.
CONSULTA PREVIA
A partir de la información suministrada construya un mapa mental que permita explicar los mecanismos de
acción de los diferentes antibióticos, mecanismos de resistencia usados por las bacterias para eludirlos y
efectos secundarios que pueden aparecer tras su uso.
PALABRAS CLAVE
ANTIBIOGRAMA; ANTISEPSIA
METODOLOGIA
Esta práctica de laboratorio se va a realizar en dos sesiones de clase, en grupos de 5 estudiosos, cada grupo
realizará un montaje de antibiograma para evaluar la sensibilidad de ciertos microorganismos frente a varios
antibióticos de diferentes familias químicas; En la segunda sesión realizará un ensayo de CMI para
estandarizar la concentración más efectiva de diferentes desinfectantes ante ciertos microorganismos.
MACROPROCESO RECURSOS E INFRAESTRUCTURA Y LABORATORIOS
Nombre del Proceso:
CÓDIGO: LA-FM-007
LABORATORIOS
Nombre del Documento: VERSIÓN: 3
FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO FECHA: 18/Marzo/2017
Sesión No. 1
Materiales y Equipos Reactivos Materiales Estudiante
Medio Mueller – Hinton (12 cajas) Colorantes de Gram (5mL Láminas - Laminillas (1 caja
de c/uno) por grupo de cada una)
Staphylococcus aureus (1 caja) Alcohol al 70% (500 mL) Gorro
Streptococcus sp. (1 caja)
Salmonella sp (1 caja) Agua destilada (200 mL) Guantes
E. coli (1 caja)
Klebsiella sp (1 caja)
Patrón de Mac Farland de 0.5 (4) Solución salina estéril Tapabocas
Sensidiscos de papel estériles 0.9% (200 mL)
empacados de 5 unidades (4 paquetes)
paquetes de 3 hisopos estériles c/u (12) Azitromicina (Tableta 500 Bata blanca de manga larga
mg)
Tubos con solución salina estéril (12) Gentamicina (Tableta 500 Gafas de seguridad
mg)
Sensidiscos (Antibióticos). Cloranfenicol, Ampicilina (Tableta 500 Material de consulta
Penicilina y Eritromicina (1 empaque mg)
c/uno)
Pinzas metálicas sin garra estériles (8) Ciprofloxacina (Tableta Hojas blancas (2 por grupo)
Asas curvas (4) 500 mg)
Gradilla (4) Aceite de inmersión (5 Lápiz y colores (individual)
Capilares (4) mL)
Microscopios (8) Marcador de vidrio
(individual)
Morteros estériles(4)
Microespátulas estériles (4)
Balanza sensibilidad 1 mg (2)
Papel filtro estéril (8 hojas)
Micropipetas (4)
Puntas azules estériles en paquetes de 3
unidades (8 paquetes)
Tubos estériles tapa rosca(8)
Jeringas estériles (4)
Recipiente para descarte de hisopos y
puntas. (4)
Vortex (1)
MACROPROCESO RECURSOS E INFRAESTRUCTURA Y LABORATORIOS
Nombre del Proceso:
CÓDIGO: LA-FM-007
LABORATORIOS
Nombre del Documento: VERSIÓN: 3
FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO FECHA: 18/Marzo/2017
Sesión No. 2
Materiales y Equipos Reactivos Materiales Estudiante
Rhodotorula (1 caja) Frascos con 10 ml de Gorro
Staphylococcus aureus (1 caja) Hipoclorito de sodio al 5%
E. coli (1 caja) (4)
tubos con 9 ml de s. salina (24) Frascos con 10 ml de Guantes
Glutfar plus (4)
Patrón de Mac Farland de 0.5 (4) Frascos con 10 ml de Tapabocas
Alcohol 70% (4)
Vortex (1) Bata blanca de manga larga
Tubos tapa rosca vacíos estériles (64) Gafas de seguridad
Frascos con caldo triptona de soja Material de consulta
estéril (4)
Pipetas de 10 ml estériles (4)
Pipetas de 1 ml estériles (4)
Pipeteadores para pipetas de 1 y 10
(4)
Micropipeta de 100-1000
Puntas azules estériles (4 paquetes)
*El estudiante debe traer todos los elementos mencionados en la guía, de lo contrario no podrá entrar al
laboratorio.
PROCEDIMIENTO
SESIÓN 1.
MACROPROCESO RECURSOS E INFRAESTRUCTURA Y LABORATORIOS
Nombre del Proceso:
CÓDIGO: LA-FM-007
LABORATORIOS
Nombre del Documento: VERSIÓN: 3
FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO FECHA: 18/Marzo/2017
SESIÓN 2 CMI
Nombre: Equipo docentes Nombre: Mic. Andrea Cortés B. Nombre: Ing. Germán Vargas
laboratorio de microbiología Monroy
CARRERA:
TRABAJO GRUPAL TRABAJO INDIVIDUAL
Formule tres habilidades que desee adquirir o desarrollar a través de la práctica de laboratorio
RESULTADOS
Posterior a la incubación, revise sus cajas de petri y observe si hay crecimiento uniforme en ella.
Con una regla o calibrador mida la distancia que hay desde el disco hasta el borde del halo de inhibición.
Complete la siguiente tabla de acuerdo con los resultados obtenidos, no olvide revisar las tablas adjuntas
para concluir si la cepa evaluada es sensible S, intermedio I o resistente R al antibiótico evaluado.
La flecha muestra la
distancia en mm, indicando
la sensibilidad del
microorganismo frente al
antibiótico en estudio.
Fuente: http://www.reviberoammicol.com/photo_gallery/Candida/albicans/
CMI
Anote con (+) la presencia de turbidez y con (–) la ausencia de crecimiento, y a partir de esos resultados
anote EL RANGO de la CMI
CUESTIONARIO
Cabrera, C. E., Gómez, R. F., & Zúñiga, A. E. (2007). La resistencia de bacterias a antibióticos,
antisépticos y desinfectantes una manifestación de los mecanismos de supervivencia y
adaptación. Colombia médica, 38(2), 149-158. Recuperado de:
http://www.scielo.org.co/pdf/cm/v38n2/v38n2a07.pdf
CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFIA UTILIZADA
MACROPROCESO RECURSOS E INFRAESTRUCTURA Y LABORATORIOS
Nombre del Proceso:
CÓDIGO: LA-FM-007
LABORATORIOS
Nombre del Documento: VERSIÓN: 3
FORMATO PARA PRACTICAS DE LABORATORIO FECHA: 18/Marzo/2017
RUBRICA DE EVALUACIÓN MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA
INDIVIDUAL CRITERIOS DE EVALUACIÓN NOTA
estudiante 0 – 1,5 1,6 - 2,9 3,0 - 3,9 4,0 - 4,5 4,6 - 5,0
1.
Habilidad
2.
3.
4.
5.
GRUPAL % 0 – 1,5 1,6 - 2,9 3,0 - 3,9 4,0 - 4,5 4,6 - 5,0 NOTA ∑
Organiza los resultados No son precisos o Son organizados y Son organizados y Son precisos y Son organizados,
(aprender a conocer)
obtenidos a través del uso no ayudan a la algunas veces ayudan a la ayudan a la precisos y ayudan
de dibujos, gráficas, tablas y comprensión del ayudan a la entendimiento del comprensión del a la entendimiento
comprensión del
Cognitiva
sensibilidad de un
microorganismo ante un
Disciplinar
antibiótico específico.
25%
Reconoce la limpieza y
desinfección como un
proceso secuencial cuyo
objetivo es eliminar la
suciedad y reducir el
número de
microorganismos en una
superficie y/o ambiente.
Hace parte del Participa en el Participa
Desarrolla habilidades de activamente el
(aprender a ser y a convivir juntos)
básicos puntual
Socio afectiva
puntual
15%
requerimientos laboratorio
elaboración de informes incompleta mínimos laboratorio
15%
No hace uso de un Ocasionalmente Hace uso de un Hace un buen uso Hace un uso
Utiliza lenguaje técnico para lenguaje técnico hace uso de un lenguaje técnico del lenguaje sobresaliente del
referirse a los diferentes apropiado para la lenguaje técnico apropiado para la técnico apropiado lenguaje técnico
conceptos que relaciona en práctica de apropiado para la práctica de para la práctica de apropiado para la
la práctica experimental laboratorio práctica de laboratorio laboratorio práctica de
laboratorio laboratorio
Las fuentes de Las fuentes de Las fuentes de Las fuentes de Las fuentes de
Realiza la búsqueda información son información son información son información son información son
Investigativa