PRACTICA N° 4

METABOLISMO ANAERÓBICO: GLUCÓLISIS Y FERMENTACIÓN

I. OBJETIVOS
 Interpretar la utilidad de las reacciones glucolíticas en la producción de energía
para las células.
 Identificar los sustratos utilizables para la vía de la glucólisis.
 Valorar el proceso de fermentación para permitir la continuidad de la glucólisis
en ausencia de oxígeno.
 Identificar los productos de la fermentación.

II. MARCO TEÓRICO

Las células requieren un suministro continuo de energía para llevar a cabo reacciones
metabólicas indispensables para su supervivencia; la mayoría de veces, metabolizan
glucosa para producir un tipo de energía utilizable, el trifosfato de adenosina o ATP.
Las reacciones iniciales para la degradación de la glucosa se denominan: vía glucolítica,
y permiten que la glucosa se convierta en dos moléculas de piruvato, a la vez que se
produce una ganancia neta de dos moléculas de ATP.
Sin embargo, durante este proceso oxidativo (degradación parcial de la glucosa), se
transfieren electrones de la glucosa al NAD+ y este se convierte a NADH. En un proceso
posterior a la glucólisis, denominado respiración celular (proceso oxidativo total), el
oxígeno molecular (O2) actúa como aceptor final de los electrones del NADH; pero en
ausencia de éste último, ocurre otro proceso denominado fermentación.
Durante la fermentación, se generan como productos finales: etanol, dióxido de carbono
(CO2) entre otros, dependiendo el organismo que la realice. No se produce más ATP,
como ocurre durante la respiración celular, pero sí se regenera el NAD+ para que la
glucólisis continúe.
El hombre ha utilizado estos procesos a su favor, obteniendo productos como: pan, vino
y otras bebidas; vinagre, salsa soya, yogur y otros fermentos a partir azúcares, las cuales
son transformadas a través de enzimas específicas producidas por diversos
microorganismos (levaduras, bacterias, protozoos y otros).
En el ser humano, ocurre otro tipo de fermentación, denominada láctica, ya que los
productos son: ácido láctico y NAD+.

III. MATERIALES Y REACTIVOS

 10g de Levadura granulada
 4 Tubos de ensayo
 4 Tubos de hemólisis
 3 pipetas de 2 a 5 ml
 Gradilla
 Termómetros
 Hornilla eléctrica
 Solución de glucosa al 1%
 Solución de almidón al 1%
 Solución de maltosa al 1%
 Agua destilada
 1 Beaker de 500 ml.
 3 goteros

IV. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

1. Rotular 5 tubos y agregue:
Tubo 1: 4 ml de agua destilada y 0,2 gr de levadura
Tubo 2: 2 ml de agua destilada, 2 ml de glucosa y 0,2 gr de levadura
Tubo 3: 2 ml de agua destilada, 2 ml de almidón y 0,2 gr de levadura
Tubo 4: 2 ml de agua destilada, 2 ml de maltosa y 0,2 gr de levadura
Tubo 5: 2 ml de fructuosa, 2 ml de fructuosa y 0,2 gr de levadura
2. Homogenizar las muestras
3. Coloque los tubos dentro del baño María durante 30 minutos, teniendo cuidado
de que la temperatura sea constante a 37°C.
 4. Observe los cambios en los tubos a lo largo del proceso de incubación.
a. Realice la medición cada 5 minutos de la altura de gas producido.
Realice la gráfica correspondiente a tiempo vs altura de gas producido
(aumento de volumen debido a la fermentación).
b. Anote cada 5 minutos la variación observada, utilice un signo negativo
(-) al no observar cambio y un signo positivo (+) cuando sí hay.
5. Analice e intérprete los resultados obtenidos y concluya.

V. RESULTADOS

Tabla 1: Descripción de los resultados

TIEMPO (MINUTOS)
Sustrato 0 5 10 15 25 30 OBSERVACIONES
Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

Tubo 4

Tubo 5

Tabla 2: Altura de gas (debido a la fermentación)

TIEMPO (MINUTOS)
0 5 10 15 25 30
Tubo 1

Tubo 2

Tubo 3

Tubo 4

Tubo 5

Graficar el aumento de volumen debido a la fermentación

DISCUSIONES
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VI. CONCLUSIONES
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VII. RECOMENDACIONES
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VIII. CUESTIONARIO

De acuerdo a los resultados obtenidos en el laboratorio, responda las siguientes

preguntas:

1. ¿Cuál fue el papel de la levadura en el proceso de fermentación?

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2. ¿En qué sitio celular ocurrió el metabolismo de los carbohidratos?

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3. ¿Qué carbohidratos fueron los utilizados como sustrato?

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4. Haga un resumen de la secuencia enzimática del proceso catabólico:

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5. Explique sí existe alguna(s) diferencia(s) entre fermentación y glucolisis, y por qué
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6. ¿Por qué razón es necesario mantener la temperatura de 37°C?

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IX. BIBLIOGRAFÍA
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X. ANEXOS