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INFORME DE PRÁCTICAS PRE-PROFESIONALES EN EL

LABORATORIO DEL CENTRO DE SALUD CONO SUR EN LA


CIUDAD DE JULIACA

I. INTRODUCCION

Hoy en día ser competitivo involucra una serie de factores en la cual no estaría completa,
si esta no tuviera la formación práctica que todo profesional necesita, es por esta razón
que se realizan prácticas Pre Profesionales, de tal manera que aprendamos a aplicar los
conocimientos teóricos aprendidos en el trascurso de nuestra formación académica y lo
más valioso es la experiencia adquirida para el desenvolvimiento en el mercado laboral
muy difícil y competitivo en estos tiempos.

La universidad es un primer filtro para los estudiantes, solo los más perseverantes y
capacitados logran terminar la universidad, pero eso es uno de los primeros pasos para
ser competitivos en mi opinión la competitividad de un profesional está determinada por
dos aspectos, el primero es el conocimiento y el segundo las aptitudes o características
profesionales. .

En el presente informe de prácticas, realizado con mucha dedicación y esmero, pongo de


manifiesto el resultado de mis actividades realizados en el tiempo que estuve en el
servicio de laboratorio del centro de salud Cono Sur como practicante, colaborando y
cumpliendo con las funciones que se me encomendaron.
De antemano me disculpo por los errores que se encontrase en este documento, esperando
sirva para generaciones futuras y colmen sus expectativas.

II. OBJETIVOS

2.1. Objetivo General:

Poner en práctica lo aprendido en el transcurso de mi formación profesional como


estudiante de Biología de la Universidad Nacional del Altiplano aplicando así los
conocimientos básicos como practicante en el laboratorio del centro de salud con sur de
la ciudad de Juliaca.

2.2. Objetivos Específicos:

Cumplir con responsabilidad, respeto y puntualidad en el periodo de ejecución de mis


prácticas.
Aplicar todo lo aprendido en las prácticas pre profesionales de los años de estudio en el
centro de salud.
Manejar adecuadamente los principales instrumentos y equipos de laboratorio en dicho
laboratorio.

III. GENERALIDADES DEL LABORATORIO

3.1. Nombre del lugar donde realizo practicas pre profesional.


“Servicio de Laboratorio del Centro de Salud Cono Sur de la ciudad de
Juliaca”.

3.2. Ubicación del laboratorio:


El servicio de laboratorio del Centro de Salud Cono Sur, que dicho laboratorio
está ubicado en el cuarto piso, que se está en el Jr. Almagro N° 588 de la
ciudad de Juliaca, provincia de San Román del departamento de Puno.

3.3. Jefe del laboratorio:


Blgo. Álvaro Luque Arapa
3.4.Finalidades del Laboratorio:
El servicio de laboratorio del Centro de Salud Cono Sur está dedicado a la
promoción de la salud para construir una cultura de salud y de solidaridad,
previniendo las enfermedades y garantizando la atención integral de salud de
todos los habitantes; cumpliendo las políticas y objetivos nacionales de salud
en concertación con todos los sectores públicos y privados y otros actores
sociales, también brindar servicios de salud en los campos de salud pública,
y apoyo materno infantil a las madres gestantes
3.5.Distribución del Laboratorio:
El servicio de laboratorio del Centro de Salud Cono Sur cuenta con seis
ambientes de trabajo donde se realizan los principales análisis:
Inmunoserologia se realizó VIH, RPR., en hematología; se realizó
hemogramas, tipo de sangre, también parasitología, microbiología se realizó
examen directo y tinción de muestras cervicovaginales en bioquímica se
realizaron exámenes de glucosa, urea y creatinina y el área de uruanalisis se
realizaron los exámenes físicos químicos y sedimento de orina y por último el
área de baciloscopia en los cuales se analizaron las muestras de esputo.
Mi persona realizo las prácticas rotando en las diferentes áreas empezando en
hematología y culminando en el área de baciloscopia

3.6.Equipos e instrumentos disponibles en el servicio de laboratorio:


 Baño Maria
 Estufa
 Refrigeradora
 Espectrofotómetro
 Centrifuga
 Mechero bunsen
 Lector de hemoglobina
 Microscopio

3.7.Material de Vidrio:
 Pipetas
 Probetas
 Tubos de ensayo
 Embudos
 Matraz
 Morteros
 Placas Petri
 Goteros
 Fiolas
 Porta objetos y cubre objetos
 Micropocillos
 Capilares

IV. ACTIVIDADES DE LABORATORIO


4.1.LIMPIEZA DE LOS MATERIALES DE LABORATORIO

4.1.1 Limpieza a mano.

Los aparatos de laboratorio en vidrio y en plástico pueden limpiarse a mano


por inmersión en baño, Los aparatos de laboratorio deben limpiarse
inmediatamente tras su utilización, a baja temperatura, con corto tiempo de
actuación y con baja alcalinidad. Los aparatos de laboratorio que hayan estado
en contacto con substancias infecciosas se limpian en primer lugar y a
continuación se esterilizan por vapor. Sólo así pueden evitarse incrustaciones
de suciedad y daños al aparato por residuos químicos eventualmente
adheridos.

4.2.ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL AREA DE INMUNOSEROLOGIA


4.2.1. TIPO DE MUETRA:
Obtener sangre venosa para realizar pruebas de inmunología.
MUESTRA REQUERIDA: 5 mL de sangre venosa sin anticoagulante (MAZA,
2007).
4.2.2. PRUEBAS RAPIDAS DE VIH.
Detectar in vitro los anticuerpos formados en el torrente sanguíneo por el virus de la
Inmunodeficiencia
Humana (VIH 1 y VIH 2).
a. Muestra requerida:
Suero, plasma y sangre completa.

b. Procedimiento:
 Centrifugar la sangre a 2,500 rpm durante 5 minutos.
 Separar los sueros del paquete globular.
 Llevar a temperatura ambiente las tiras reactivas a utilizar.
 Preparar el protocolo de trabajo.
 Cortar la línea de puntos de la bolsa para retirar las tiras reactivas.
 Retirar el plástico de protección de cada tira.
 Identificar las tiras reactivas a utilizar.
 Dispensar 50 μL de suero con una pipeta automática sobre la superficie
absorbente. (señalada con una flecha)
 Esperar un mínimo de 15 minutos y un máximo de 60 minutos.
 Leer el resultado. Observar el área de reacción.
c. Forma de reporte:
REACTIVO: Presenta barra roja en las dos ventanas del área de reacción, tanto la del
paciente con la ventana del control (MAZA, 2007).

4.2.3. PRUEBAS RAPIDAS DE RPR.


Detectar y cuantificar anticuerpos reagínicos en suero, que corresponde a un
diagnostico presuntivo de Sífilis, La prueba de RPR, es una modificación del antígeno
VDRL (pruebas no treponémicas). El RPR es una prueba que contiene
micropartículas de carbón para visualizar la reacción antígeno– anticuerpo (MAZA,
2007).

a. Procedimiento:

 Centrifugar la sangre a 2,500 rpm durante 5 minutos.


 Separar los sueros del paquete globular.
 Identificar los sueros y círculos de la tarjeta o lámina de reacción.
 Depositar en cada círculo de la tarjeta ó lámina, 50 uL. De los sueros en estudio y
controles positivo y negativo, manteniendo el dispensador verticalmente para que
el volumen sea exacto.
 Extender el suero sobre la superficie del círculo con el extremo opuesto del
dispensador.
 Homogenizar el antígeno y depositar una gota (equivalente a 16 uL) sobre el
suero.
 Colocar la tarjeta en el rotador serológico y cubrirla con la cámara húmeda.
 Rotar durante 8 minutos a 100 rpm.
 Inclinando la lámina de adelante hacia atrás observar a simple vista con buena
iluminación agregados bien diferenciados en el centro y en la periferia del círculo
(MAZA, 2007).
b. Resultados que se obtienen

 Resultado No Reactivo: aspecto liso de la suspensión, la cual aparece sin


agregados.
 Resultado Reactivo débil: Se observa reacción en la prueba cualitativa y no
aparecen agregados visibles en todas las diluciones semi cuantitativas.
 Resultado Reactivo: agregados bien diferenciados en el centro y en la periferia del
círculo (MAZA, 2007).
4.2.4. EXAMEN DE FACOTOR REUMATOIDEO

Los factores reumatoides son un grupo de anticuerpos dirigidos contra la fracción Fc


de las inmunoglobulinas G. Aunque se hallan presentes en un gran número de
desórdenes reumáticos, tales como el lupus eritematoso sistémico (SLE) y el síndrome
de Sjögren, su principal interés clínico radica en el diagnóstico de la artritis
reumatoide (RA). Un estudio actual realizado por el “American College of
Rheumatolgy” demostró que el 80,4% de pacientes con artritis reumatoide fueron
positivos para el FR.

a. Principio del metodo


El FR-Látex es una técnica de aglutinación en porta para la detección cualitativa y
semicuantitativa de factores reumatoides (FR) en suero humano. Las partículas de
látex recubiertas con gamma-globulina humana son aglutinadas por factores
reumatoides presentes en la muestra del paciente.

b. PROCEDIMIENTO
 Atemperar los reactivos y las muestras a temperatura ambiente. La
sensibilidad del ensayo disminuye a temperaturas bajas.
 Depositar 50 μL de la muestra a ensayar y una gota de cada uno de los
controles Positivo y Negativo, sobre círculos distintos de un porta.
 Homogeneizar suavemente el reactivo de FR- látex antes de usar. Depositar
una gota (50 μL) junto a cada una de las gotas anteriores.
 Mezclar las gotas con un palillo, procurando extender la mezcla por toda la
superficie interior del círculo. Emplear palillos distintos para cada muestra.
 Situar el porta sobre un agitador rotatorio a 80 – 100 r.p.m. y agitar durante 2
minutos. El exceso de tiempo puede originar la aparición de falsos positivos.

c. Lectura e interpretación
Examinar macroscópicamente la presencia o ausencia de aglutinación
inmediatamente después de retirar el porta del agitador. La presencia de aglutinación
indica una concentración de FR igual o superior a 8 UI/mL (DORNER, 1987)
4.2.5. PRUEBA DE EMBARAZO
Investigar en orina la presencia de la hormona gonadotropina coriónica (HCG); el método
se basa en la reacción de aglutinación de una suspensión de Látex recubiertas con
anticuerpos monoclonales Anti-hormona gonadotropina coriónica (MAZA, 2007).
a. Prueba de suero
La prueba en suero o plasma es típicamente un inmunoanálisis quimioluminiscente,
ELISA o fluorimétrico, que puede detectar niveles de βhCG tan bajos como 5 mUI/ml y
permite la cuantificación de la concentración de βhCG. La determinación cuantitativa de
βhCG es útil en el seguimiento de células germinales y tumores trofoblásticos, el se-
guimiento después del aborto involuntario, y el diagnóstico y seguimiento después de
tratar un embarazo ectópico. La ausencia de un feto visible en la vagina por ultrasonido
después de que la βhCG haya alcanzado niveles de 1500 UI/ml es muy indicativo de un
embarazo ectópico. Una enfermedad trofoblástica gestacional, como las molas
hidatidiformes (“embarazo molar”), o el coriocarcinoma, pueden producir altos niveles
de βhCG (debido a la presencia de sincitioltrofoblastos, parte de las vellosidades que
componen la placenta), a pesar de la ausencia de un embrión. Los altos niveles de hCG
también son un componente del triple test, una prueba de detección para determinadas
anormalidades cromosómicas fetales y defectos de nacimiento. En todos estos casos, un
ensayo cualitativo por un método sensible y confiable como el ELISA, permite tener un
dato preliminar, a menudo suficiente para el diagnóstico, antes de recurrir a métodos más
costosos como la cuantificación (BIRKEN, 1984).

4.3. ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL AREA DE HEMATOLOGIA


4.3.1. TOMA DE MUESTRA
a. Materiales utilizados:
 Algodón.
 Alcohol al 70%.
 Ligadura o torniquete de 25 a 30 cm de largo.
 Jeringas de 5, 10, 20 mL.
 Viales con anticoagulante EDTA (ZAMBRANO, 2005).
b. Obtención de la muestra:
 Verificar que los elementos por utilizar estén listos, y que el paciente se sienta
cómodo.
 Aplicar el torniquete aproximadamente cuatro dedos por encima de la flexión del
codo o a 10 cm del codo, sujetar con un medio nudo.
 Limpiar la zona con alcohol al 70% o alcohol yodado, en un área de 2 pulgadas.
 El paciente deberá abrir y cerrar la mano durante unos segundos y después la
mantendrá cerrada, esto ayudará a visualizar las venas superficiales.
 Se retira el estuche protector de la aguja y se coge la jeringa de tal manera que el
bisel se encuentre hacia arriba.
 Se coloca la aguja en dirección paralela a la vena, se perfora la piel haciendo
avanzar la aguja 0,5-1 cm en el tejido subcutáneo, luego se perfora la vena.
 Se aspira la jeringa hasta el volumen requerido.
 Retirar el torniquete e indicar al paciente que deje de hacer puño. Se coloca el
algodón seco encima de la punción y se retira la aguja.
 Retirar la aguja de la jeringa. Verter la muestra lentamente por las paredes del vial
con anticoagulante. No olvidar colocar una gota en la lámina portaobjeto para
realizar el frotis.
 Agitar el vial en círculos sobre la mesa para homogeneizar la muestra con el
anticoagulante (ZAMBRANO, 2005).
c. Sangre coagulada:

cuando la sangre se coloca en un tubo de vidrio se solidifica en 5-10 minutos


formando un coagulo. Se separa en dos componentes: el suero, unliquido de color
amarillo y el coagulo, masa solida de color rojo (MINISTERIO DE SALUD, 1999).

d. Sangre anti coagulada:


Si se añade a la sangre un anticoagulante especial tan pronto como se extraiga. Se
evitara que se coagule y seguirá siendo liquida. La sangre tratada con un
anticoagulante se separa en dos componentes: el plasma, un liquidom amarillo y
las células sanguíneas, que se sedimentan y forman; una capa delgada de
leucocitos y un precipitado de leucocitos (MINISTERIO DE SALUD, 1999).

4.3.2. HEMOGLOBINA
Es una proteína compleja que está formada por un grupo hem y por la globina, que se
encuentra en el citoplasma del glóbulo rojo, que llega a constituir el 95% del peso seco
de los hematíes. Esta proteína le confiere al hematíe sus características.
Su función principal es recoger el oxígeno de los alveolos pulmonares y llevarlo hacia
los tejidos y a su vez recoger el CO2 producido y llevarlo de nuevo hacia los pulmones
para ser liberado y volver a captar el O2. El CO2 que no sea transportado por la Hb ira
disuelto en el plasma en forma de bicarbonato (CASADO, 2012).
a. Procedimiento:
 En un tubo de 13 x 100 colocar exactamente 5 mL de reactivo de Drabkin.
 La sangre que puede utilizarse es de punción del dedo (sangre capilar) de sangre
venosa recién extraída.
 Con una pipeta automática o pipeta de Salhi se toma exactamente 0,02 mL (20
mL) de sangre total, limpiar luego la punta de la pipeta y se vierte en el tubo que
contenga reactivo de Drabkin. Se enjuaga 3 veces y se mezcla.
 Dejar en reposo por espacio de 5 a 15 minutos.
 Leer en absorbancia con filtro verde a 540 nm llevando a cero el fotómetro cona
agua destilada / Drabkin (ZAMBRANO, 2005).
b. Valores normales:
 Niños al nacer : 13.6 – 19.6 g/dl
 Niños de 1 año: 11.3 – 13.0 g/dl
 Niños de 10 a 12 años: 11.5 – 14.8g/dl
 Mujeres no embarazadas: 11.5 – 14.5g/dl
 Hombres adultos: 13.0 – 16.0g/dl (MINISTERIO DE SALUD, 1999)

4.3.3. HEMATOCRITO
Es un examen de sangre que mide el porcentaje del volumen de toda la sangre que
está compuesta de glóbulos rojos. Esta medición depende del número de glóbulos
rojos y de su tamaño. El hematocrito casi siempre se ordena como parte de un conteo
Sanguíneo completo (hemograma) (CASADO, 2012).
a. Procedimiento:
 Hacer que la sangre ingrese al tubo por capilaridad, llenar a los ¾ del tubo.
 Taponear el extremo contrario del tubo, que no ha estado en contacto con la
sangre, con la cera blanda o arcilla. Asegúrese que el taponamiento sea
hermético y que la cera llegue a unos 2mm de profundidad dentro del tubo.
 Disponer de una gradilla numerada en el que se haya colocado arcilla. Así el
tubo de cada paciente se puede fijar en posición vertical junto al número que
le corresponde.
 Colocar los tubos en las ranuras del cabezal de la centrifuga, el extremo del
tubo se ha taponeado con será deberá apuntar hacia afuera, lejos del centro.
 Centrifugar a 3500RPM por 5 minutos.
 Al finalizar la centrifugación de cada uno de los tubos se obtendrá en su
 interior tres capas: En la parte superior, una columna de plasma; a la mitad,
una capa delgada de glóbulos blancos y en la parte inferior y hasta el fondo,
una columna de glóbulos rojos. Se deberá trabajar a nivel del tope de la
columna de glóbulos rojos (MINISTERIO DE SALUD, 1999).
Valores normales:
 Hombres: 40 – 50%
 Mujeres: 37 – 42%
 Niños de 5 años: 38 – 44%
 Lactantes de 3 meses: 35- 40%
 Recién nacidos: 50 – 58% (MINOISTERIO DE SALUD, 1999).
GRUPO SANGUINEO Y FACTOR RH
Investigar en la sangre la presencia o ausencia de los antígenos A, B y Rh que se
localizan en la superficie de los glóbulos rojos, utilizando anticuerpos específicos para
cada uno de ellos (MAZA, 2007).
a. Muestra requerida:
1 mL de Sangre completa con o sin anticoagulante.
b. Procedimiento:
o Identificar previamente los tubos.
o Depositar 2-3 gotas de sangre en un tubo.
o Realizar 3 veces el lavado de células de la siguiente manera:
 Agregar 1 mL de solución salina 0.85%.
 Mezclar y llenar con solución salina 0.85% el tubo hasta
3/4 partes.
 Centrifugar por 2 minutos a 3400 rpm .
 Descartar toda la solución salina quedando en el fondo un
paquete de glóbulos rojos.
o Preparar una suspensión al 5%, colocando una gota de los glóbulos rojos
lavados y 19 gotas de solución salina y mezclar.
o Rotular 3 tubos con las letras A, B, Rh por cada muestra a analizar, a cada
uno agregar una gota de glóbulos rojos al 5%.
o Depositar los antisueros respectivos:
 Tubo A antisuero A.
 Tubo B antisuero B.
 Tubo Rh antisuero D.
o Centrifugar 15 segundos a 3400 rpm .
o Leer la presencia o ausencia de aglutinación agitando suavemente los
tubos (MINISTERIO DE SALUD, 1999).
c. Forma de reporte:
Se reporta:
Grupo A: si aglutina el tubo marcado A.
Grupo B: si aglutina el tubo marcado B.
Grupo O: si no aglutinan los tubos marcados A y B.
Grupo AB: si aglutinan los tubos marcados A y B (MAZA, 2007)
4.3.4. RECUENTO DE GLOBULOS BLANCOS
Evaluar la cantidad de células nucleadas que se encuentran en la muestra de sangre
(leucocitos y eritroblastos) (ZAMBRANO, 2005).
a. Muestra requerida:
2-3 mL de sangre venosa con EDTA o sangre capilar (ZAMBRANO, 2005).

b. Procedimiento (Técnica en tubo):


 Colocar 0.4 mL de ácido acético glacial al 3% en un tubo 12x75mm.
 Mezclar perfectamente la sangre, y tomar exactamente 20 μL con pipeta
automática. Y colocarla en el tubo que contiene el acido acético glacial al 3 %
lo que hace una dilución de la sangre 1:20.
 Mezclar por un mínimo de 2 minutos.
 Dispensar con pipeta automática o con capilar la dilución en el borde de la
laminilla para cámara Neubauer. (Anexo 8)
 Esperar 3 - 5 minutos Para que la célula se estabilicen.
 Luego se procede a contar los glóbulos blancos en el microscopio con el
objetivo 10x y con poca luz en las dos áreas primarias opuestas de la cámara,
contar las células que aparecen. Cuando el trabajo no es excesivo se cuentan
las cuatro áreas primarias para
 tener un dato más exacto.
 En caso de una leucopenia de menos de 1,000 leucocito/mm³, la dilución se
hace 1:10.
 En caso de una leucocitosis de más de 30,000 leucocito/mm³, la dilución se
hace 1:200 con diluyente de leucocitos (ZAMBRANO, 2005).
c. Valores normales
5000 - 10 000 leucocitos / mm3(MAZA, 2007).
4.3.5. RECUENTO DE GLOBULOS ROJOS
La sangre se diluye en un líquido que nos permite observar claramente los hematíes,
luego esta dilución se coloca en una cámara de Neubauer con la ayuda de una pipeta
automática o pipeta Pasteur y se cuentan en el microscopio a un objetivo de 40x para
calcular el número de glóbulos rojos por mm3 (ZAMBRANO, 2005).
a. Procedimiento
 Mezclar la sangre obtenida con el anticoagulante o tomar sangre capilar.
 Llenar la pipeta de glóbulos rojos con sangre hasta la marca de 0,5 para
realizar una dilución de 1/200, y si se carga hasta 1, la dilución será 1/100.
Limpiar la punta con gasa o papel absorbente.
 Introducir la pipeta en el tubo o frasquito conteniendo diluyente (Hayem) y
llenar de líquido de dilución hasta la marca de 101.
 Se coloca en un rotador automático o se hace rotar manualmente de 2 a 3
minutos.
 Agitar bien la pipeta y descartar 3 a 4 gotas del tallo, luego colocar una gota
pequeña cerca de un extremo de la cámara para que por capilaridad se llene
exactamente.
 Hacer el recuento con objetivo de 40x.
 Se puede realizar con la pipeta automática, se toma 20 mL (0,02mL) de sangre
total con anticoagulante, o sangre capilar y se deposita en un tubo de 12 x 75
que contenga 4 mL de solución de Hayem (aquí se tiene una dilución de
1:200). Se deja reposar aproximadamente 5 minutos y se procede a cargar la
cámara con la misma pipeta usando un nuevo tip. El inconveniente aquí es el
gasto de reactivo (4 mL) pero las medidas son más exactas.
 Dejar en reposo por 3 minutos.
 Enfocar la cuadrícula a 10x, luego con el objetivo de 40x contar sobre el
cuadrado grande central de la cámara sólo en 5 cuadrados pequeños: uno
central y cuatro angulares (80 cuadraditos en total).
 En el recuento se incluyen las células que cubren o tocan por dentro o por
fuera las líneas limitantes superior e izquierda en el cuadrado pequeño de
recuento y no se consideran los correspondientes a los límites inferior y
derecho.Se hace el recuento en los puntos ABCD y E y se sigue los mismos
parámetros del recuento de leucocitos (ZAMBRANO, 2005).
b. Valores normales
 Hombres 4 500 000 - 5 500 000
 Mujeres 4 000 000 - 5 000 000
 Niños (4 años) 4 200 000 - 5 200 000
 Lactantes (1 - 6 meses) 3 800 000 - 5 200 000
 Recién nacidos 5 000 000 - 6 000 000 (ZAMBRANO, 2005)

4.4.ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL AREA DE PARASITOLOGIA


4.4.1. TOMA DE MUESTRA

Se deben recolectar 5 gramos de heces recién emitidas, instruir al paciente que colecte
en el frasco la porción de muestra que evidencia el daño intestinal (Mucus, sangre,
parásitos). No son recomendables las muestras obtenidas con laxantes o enemas
(MAZA, 2007).
4.4.2. EXMEN AL DIRECTO

Por medio de la observación macroscópica de la muestra de heces determinar el color


la consistencia, presencia de mucus, sangre, restos alimenticios o parásitos en estado
quistes, huevos o trofozoitos.

a. Procedimiento:
 Observar el color de la muestra.
 Observar la consistencia de la muestra.
 Utilizar un aplicador de madera para buscar la presencia de mucus en la
muestra.
 Observar la presencia de restos alimenticios en la muestra.
 Observar la presencia de parásitos microscópicos
 Anotar los hallazgos (MAZA, 2007).
4.4.3. EXAMEN SERIADO

Se realiza el examen en fresco en suero fisiológico y con lugol, pero el paciente debe
traer las muestras por 3 días.

4.4.4. REACCION INFLAMATORIA

Este examen consiste en los siguientes reportes y también de la observación de los


parásitos microscópicos:

a. Forma de reporte:
- COLOR: Café, amarillo, verde, rojo, acólico (blanco), negro.
- CONSISTENCIA: Dura, cíbalos, blanda, pastosa y líquida.
- PRESENCIA DE MUCUS: Negativo o Positivo.
- RESTOS ALIMENTICIOS: Escasos, moderados o abundantes.
b. Valores de referencia:
- COLOR: Café.
- CONSISTENCIA: Pastosa a blanda.
- PRESENCIA DE MUCUS: No debe observarse.
- RESTOS ALIMENTICIOS: Escasos (MAZA, 2007).

4.5.ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL AREA DE MICROBIOLOGIA


4.5.1. EXAMEN MICROSCÓPICO (Coloración de Gram)
Colorear las bacterias presentes en un frotis mediante la tinción de Gram, la cual
permite diferenciar en dos grandes grupos, bacterias grampositivas que toman el color
violeta y bacterias gramnegativas que toman el color rosado.
a. Muestra requerida:
Frotis de la muestra a analizar correctamente identificado.
b. Procedimiento:
 Filtrar los colorantes antes de utilizar.
 Colocar los frotis a colorear en la bandeja o soporte de coloración.
 Cubrir el frotis completamente con Cristal Violeta, durante un minuto.
 Enjuagar con agua corriente y escurrir.
 Cubrir el frotis completamente con Lugol o solución de Yodo para Gram
durante un minuto.
 Enjuagar con agua corriente y escurrir.
 Aplicar alcohol acetona gota a gota hasta que no salga Cristal Violeta.
 Enjuagar con agua corriente y escurrir.
 Cubrir el frotis con Safranina.
 Dejar reposar por 30 segundos.
 Enjuagar suavemente con agua corriente.
 Dejar secar al aire libre.
 Observar al microscopio con lente de inmersión 100x.
c. Forma de reporte:
Reportar morfología bacteriana observada (iniciar con las más frecuente) indicando
la agrupación y la cantidad.
Reportar, si lo hubiere, la presencia de polimorfonucleares y/o linfocitos.
Indicar la presencia y cantidad de levaduras o micelios y células epiteliales (MAZA,
2007).
4.5.2. DIRECTO AL FRESCO DE SECRECIÓN VAGINAL
Investigar en una muestra de secreción vaginal, la presencia de Trichomonas
vaginalis, levaduras y/o pseudohifas.
a. Muestra requerida:
Secreción vaginal, tomada con un hisopo estéril y colocada en un tubo con 2 mL de
solución salina estéril 0.85%.
b. Procedimiento:
 Identificar la lámina portaobjeto.
 Colocar una gota en el portaobjeto y cubrir con laminilla cubre objeto, con el
cuidado de no formar burbujas de aire.
 Examinar toda la preparación al fresco en el microscopio con objetivo 10x.
 Buscar presencia de Trichomonas vaginalis, levaduras o pseudohifas.
c. Forma de reporte:
Se observan Trichomonas vaginalis: cuando están presentes en la preparación.
Se observan levaduras y pseudohifas: cuando están presentes en la preparación.
No se observan Trichomonas vaginalis ni levaduras y pseudohifas: cuando no están
presentes en la preparación ninguna de ellas (MAZA, 2007).

4.6.ACTIVIDADES REALIZADAS EN EL AREA DE BIOQUIMICA


4.6.1. GLUCOSA:
La glucosa se determina después de la oxidación enzimática en presencia de glucosa
oxidasa. El peróxido de hidrógeno formado reacciona bajo catálisis de la peroxidasa con
fenol y 4-aminofenazona produciendo un complejo rojo violeta usando la quinoneimina
como indicador (MAZA, 2007).
a. Muestras requerida:
Para valor de glucosa en ayunas: Suero Tomado completamente en ayunas de 12 horas.
Para valor de glucosa postprandial: primera muestra completamente en ayunas de 12
horas y segunda muestra 2 horas después de haber ingerido un desayuno completo
(MAZA, 2007).
b. Procedimiento
 Llevar los reactivos a temperatura ambiente.
 Los reactivos se preparan de acuerdo a las instrucciones del fabricante en el cual
estará indicado la estabilidad del reactivo.
 Rotular 4 tubos de la siguiente manera: blanco, estándar, muestra y control
normal.
 En caso que los Espectrofotómetros no lean la cantidad de 1 mL, duplicar las
cantidades.
 Mezclar e incubar de acuerdo a las indicaciones del fabricante.
 Leer a la longitud de onda indicada por el fabricante generalmente de 500 a 546
nm y de acuerdo al equipo utilizado (MAZA, 2007)
c. Valores normales
De 70 -110 mg/Dl
4.6.2. UREA
La úrea es producida en el hígado, como paso final de la desanimación de aminoácidos
y excretada posteriormente a través de la orina. Es una porción importante del
nitrógeno no proteico y vía final del metabolismo de este gran grupo metabólico. Su
relación con la función renal es clara, si bien se debe estudiar igualmente los factores
extra renales de su elevación en sangre (VELAZQUEZ, 2009).
a. Principio del Procedimiento
Se describirá un método enzimático espectrofotométrico al alcance de la mayoría de
por medio de kits comerciales. El uso de la ureasa como enzima principal ha permitido
establecer no sólo esta técnica colorimétrica, sino también modificaciones que
permiten reacciones para lectura en ultravioleta, lo cual no será materia del presente
manual. Para la técnica colorimétrica se establece la acción de la ureasa sobre la úrea,
descomponiéndola y permitiendo posteriores reacciones con el objeto de formar un
compuesto coloreado medible (VELAZQUEZ, 2009).

4.6.3. CREATININA
La creatinina es un producto de degradación formado en el músculo partir de la
creatina fosfato. El compuesto es muy estable en concentraciones a nivel de sangre y
excreción urinaria en individuos normales, de ahí que resulte un gran marcador de
disfunción renal. Su eliminación es casi exclusivamente por orina, siendo útil su
cuantificación en sangre y orina para los cálculos del clearance o depuración de
creatinina (INSTUTUTO NACIONAL DE SALUD, 2003).
a. Fundament0 del método
La reacción química aplicable para fotometría es la descrita por Jaffe, basada en el color
anaranjado que se produce al reaccionar la creatinina con el picrato alcalino. Hay varias
substancias en el suero y orina que actúan como cromógenos inespecíficos, lo que es un
problema principalmente para el cálculo del aclaramiento. Por este motivo tiene una gran
importancia la adecuación de todas las variables de la reacción, muy especialmente el pH,
con el fin de obtener la máxima sensibilidad para la creatinina y la mínima interferencia
de cromógenos. Adaptando la reacción a una medida cinética, se logra una gran
especificidad debido a que la creatinina reacciona con el picrato alcalino con más rapidez
que los cromógenos (metilguanidina, picramato,), por lo que la medida del incremento de
color en un breve período de tiempo inicial de la reacción valorarán principalmente
creatinina, con poca influencia de los cromógenos inespecíficos, por esto es
recomendable, de ser posible, la determinación cinética (VELAZQUEZ, 2009).

b. Muestra clínica
Suero o plasma heparinizado.
La creatinina en suero y plasma tiene una estabilidad de al menos de 24 horas a 2-8ºC.
Orina .Diluir previamente a 1:50 con agua destilada, multiplicar el resultado por 50
(VELAZQUEZ, 2009).
c. Valores normales
Cada laboratorio establecerá sus rangos referenciales de acuerdo a las sugerencias de
su proveedor o al estudio de su población. Se citan los siguientes valores como
referencia en la metodología descrita:
 Suero : 0.8-1.4 mg/dl
 Orina : 900-1500 mg/dl (INSTUTUTO NACIONAL DE SALUD, 2003).
4.6.4. ACIDO URICO
El ácido úrico en los mamíferos es el metabolito final del catabolismo de las bases
púricas y su elevación está asociada a la gota, es decir, los reumatismos
hiperuricémicos. En los pacientes con tal disfunción, aparecen cristales de ácido úrico
en las articulaciones y en los tendones, lo que origina las manifestaciones reumáticas
características. Niveles altos de ácido úrico están también asociados a patología renal
por retención de productos nitrogenados, asociándose en estos casos a valores también
altos de urea y de creatinina.
a. Fundamento del metodo
El ácido úrico es oxidado por la uricasa a alantoína y peróxido de hidrógeno que en
presencia de POD y 4-AF y DCPS forma un compuesto rosáceo.

4-AF = 4 aminofenazona
DCPS = 2,4,diclorofenol sulfonato
Guardar en refrigeración a 2-8 ºC. Estos productos son, solamente, para uso
delaboratorio y pruebas "in vitro"(VELAZQUEZ, 2009).
b. Muestra clínica
 Suero, plasma u orina.
Orina: Diluir la orina al 1:10 con agua destilada, mezclar y seguir la técnica.
Multiplicar el resultado por 10 (VELAZQUEZ, 2009).
c. Valores normales
 Hombre: 3.4 – 7.0 mg/dL.

 Mujer: 2.4 – 5.7 mg/dl (MAZA, 2007).

4.7.ACTIVIDSADES REALIZADAS EN EL AREA DE UROANALISIS

La orina es el producto de excreción del riñón y el líquido orgánico por el que se


excretan la mayoría de los metabolitos hidrosolubles del organismo. El proceso de
formación de orina comienza con la ultrafiltración de la sangre a nivel del glomérulo
renal, continúa en el sistema tubular renal donde se realizan procesos de secreción y
reabsorción de agua y solutos y culmina con la excreción. A través de este proceso,
los riñones conservan en equilibrio el volumen, composición y estado ácido-base de
los líquidos corporales, que además están sujetos al ingreso dietético de solutos
(incluyendo fármacos y tóxicos) y agua y a la velocidad y tipo de transformación
metabólica de glúcidos, lípidos, aminoácidos y ácidos nucleicos tanto endógenos
como exógenos (MINISTERIO DE SALUD, 1999).
4.7.1. PROCEDIMIENTOS PARA LA TOMA DE MUESTRA
 Limpiar cuidadosamente los genitales.
 Descartar el inicio y el final de la micción; recolectar la orina de la porción
intermedia. (En el caso de la mujer separar los labios genitales).
 Destapar y depositar la muestra de orina en un frasco plástico, transparente,
limpio, de boca ancha con tapón de rosca y capacidad de 30 a 40 mL.
 Tapar el frasco inmediatamente (MINISTERIO DE SALUD, 1999).
4.7.2. EXAMEN FISICO
Comprende la descripción del color, aspecto y olor, así como la determinación de
volumen, densidad y pH.
Aspecto, color y olor: se realiza por observación directa de la orina en un tubo limpio
de vidrio transparente. Normalmente, la orina posee:
 Aspecto: límpido
 Color: amarillo ámbar
 Olor: sui generis
 Espuma: blanca, no persistente (MINISTERIO DE SALUD, 1999).
4.7.3. EXAMEN QUÍMICO
Se observan los siguientes aspectos:
 pH: la tirilla contiene una mezcla de indicadores de pH que en contacto con
la orina dan una nítida graduación de colores, desde el naranja (pH 5) al azul
(pH 9). Resultado normal: 5-6 en orina fresca.
 Leucocitos: los granulocitos (un tipo de leucocitos) poseen la enzima esterasa,
que reacciona con los reactivos de la tirilla dando un producto de color violeta.
Resultado normal: negativo (no existe límite definido entre la excreción
fisiológica y patológicamente elevada de leucocitos. Mayormente se indica 10
a 20 leucocitos/ul como síntoma sospechoso y más de 20 como hallazgo
patológico).
 Nitritos: se utiliza una amina que en medio ácido reacciona con dando una sal
de diazonio, que reacciona con un cromógeno para formar color rosado.
Resultado normal: negativo.
 Proteínas: la tirilla contiene un indicador que en presencia de proteínas vira
del amarillo al verde. Resultado normal: negativo (hasta 30 mg% en orina
matinal, la tirilla no detecta esta cantidad). La excreción de proteínas por orina
debe ser menor a 150 mg/día. Este valor da una reacción negativa con los
métodos usuales de determinación cualitativa. Si la reacción da positiva, se
debe determinar la concentración en una muestra de orina de 24 hs con un
método químico. La proteinuria suele deberse a las siguientes causas:
Aumento de proteínas plasmáticas normales y anormales
 Glucosa: La glucosa, por la glucosa oxidasa presente en la tira, se oxida a
gluconolactona y peróxido de hidrógeno. El agua oxigenada, en presencia de
la peroxidasa también presente en la tirilla, oxida a su vez un indicador. La
cantidad de producto formado da una gama de color entre amarillo al verde.
Resultado normal: negativo (glucosuria fisiológica hasta 15 mg% en orina
matinal, la tirilla no la detecta).
 Cuerpos cetónicos: sólo el acetoacetato y la acetona reaccionan con
nitroprusiato de
 sodio y glicina en medio alcalino dando un complejo de color violeta. El -
hidroxibutirato no reacciona. Resultado normal: negativo (hasta 5 mg% en
orina matinal, la tirilla no los detecta) Los cuerpos cetónicos se forman cuando
el aporte de ácidos grasos al hígado supera su capacidad de utilización del
Acetil-CoA. Se vierten entonces a sangre desde donde son captados por
órganos aeróbicos para su oxidación y obtención de energía.
 Urobilinógeno: el urobilinógeno reacciona en medio ácido con una sal de
diazonio, dando un compuesto rojo. Resultado normal: hasta 1 mg%.
Urobilina y urobilinógeno aumentan por hemólisis y trastornos hepáticos.
 Bilirrubina: la bilirrubina reacciona con una sal de diazonio en medio ácido,
dando un compuesto rosa violáceo. Resultado normal: negativo.
 Sangre: la hemoglobina tiene actividad seudo-peroxidásica, por eso es capaz
de liberar O2 a partir del H2O2. En las tirillas reactivas se acopla esta
producción de oxígeno a la oxidación del indicador bencidina (forma oxidada
azul verdoso). Si la muestra contiene eritrocitos intactos (hematuria), se ven
como puntos verdes aislados o en grupos sobre el fondo amarillo. Si hay
hemoglobinuria (hemoglobina libre en orina) el color verde es homogéneo.
Estos resultados se deben corroborar con la observación del sedimento
urinario. Resultado normal: negativo (hasta 5 eritrocitos/ul) (MINISTERIO
DE SALUD, 1999).
4.7.4. EXAMEN MICROSCÓPICO DEL SEDIMENTO URINARIO

Observar microscópicamente en el sedimento urinario elementos celulares, cilindros,


cristales, parásitos, filamentos mucoides y bacterias. Con el fin de sugerir una
patología del tracto urinario u otras enfermedades que estén en diferente localización.
a. Procedimiento:
 Centrifugar durante 5 minutos a 2,500 rpm.
 Descartar el líquido sobrenadante.
 Suspender el sedimento urinario golpeando ligeramente con la mano.
 Colocar una gota de sedimento entre un porta y un cubre objeto.
 Observar la preparación con el objetivo 10x para lograr una visión general del
sedimento.
 Identificar los elementos formes a mayor aumento 40x.
 Anotar lo observado.
b. Forma de reporte:
 CÉLULAS EPITELIALES, ESCAMOSAS Y REDONDAS: reportar escasas,
moderadas o abundantes.
 GLÓBULOS ROJOS: Reportar el número estimado por campo.
 LEUCOCITOS: Reportar el número estimado por campo.
 CILINDROS: se pueden encontrar en la orina los siguientes cilindros:
hialinos, granulosos finos y gruesos, leucocitarios, hemáticos, grasos y céreos.
Reportar el número de cilindros observados por campo.
 FILAMENTOS MUCOIDES: reportar escasos, moderados o abundantes.
 CRISTALES: se pueden encontrar en la orina los siguientes cristales: oxalatos
de calcio, ácido úrico, uratos amorfos, fosfatos amorfos, fosfatos triples, urato
de amonio, leucina, cistina y tirosina. Reportar en la forma siguiente: escasos,
moderados o abundantes.
 LEVADURAS: Reportar escasos, moderada y abundantes.
 PARÁSITOS: Se pueden encontrar en orina Trichomonas vaginalis, Phitirus
pubis, huevos y quistes de parásitos por contaminación con heces.
 BACTERIAS: Reportar la presencia de bacterias moderadas o abundantes,
solamente cuando se observen más de 10 leucocitos por campo (MAZA,
2007).
c. Valores de referencia
 CÉLULAS EPITELIALES, ESCAMOSAS: Escasas a moderadas.
 CÉLULAS EPITELIALES REDONDAS: No deben observarse.
 GLÓBULOS ROJOS: No deben observarse.
 LEUCOCITOS: .0-5 por campo.
 CILINDROS: No deben observarse.
 FILAMENTOS MUCOIDES: No deben observarse.
 CRISTALES: Podrían observarse oxalatos, uratos y fosfatos amorfos de
escasa a moderada cantidad.
 LEVADURAS: No deben observarse.
 PARÁSITOS: No deben observarse.
 BACTERIAS: Escasas o no presentes(MAZA, 2007).
4.8. ACTIVIDADES REALIOZADAS EN EL AREA DE BACILOSCOPIA

ácido-alcohol resistencia es la propiedad que tienen las micobacterias de captar en su


pared fucsina fenicada (de color fucsia) o auramina (amarillo fluorescente) y retenerla
aun con la acción de decolorantes , como la mezcla de ácido y alcohol. Esta
característica se debe al alto contenido en lípidos, particularmente a los ácidos micó-
licos, que poseen en la pared celular. Así, utilizando una técnica adecuada es posible
identificar al bacilo de la tuberculosis en la muestra del enfermo como un bastoncito
rojo fucsia o fluorescente sobre una coloración de fondo que facilita su visualización
Esta propiedad no es específica del bacilo de la tuberculosis, sino que la tienen todos
los bacilos del género Mycobacterium, aun las micobacterias ambientales y otros
pocos microorganismos.

a. Procedimientos
 Cubrir con fucsina filtrada calentar hasta emisión de vapores tres veces
durante 5 minutos
 Lavar con agua
 Cubrir con decolorante durante 3 minutos
 Lavar con agua
 Cubrir con azul de metileno durante 1 minuto
 Lavar con agua
 Secar al aire
b. Informe de los resultados

La siguiente es la escala adoptada internacionalmente para el informe de los


resultados de extendidos examinados por la técnica de Ziehl Neelsen:

Resultado del examen microscópico Informe

No se encuentran BAAR en los 100 campos observados: No se observan bacilos


ácidoalcohol resistentes

Se observan de 1 a 9 BAAR en 100 campos observados Nº exacto de bacilos en 100


campos Se observa entre 10 y 99 BAAR en 100 campos observados Positivo (+)

Se observan de 1 a 10 BAAR por campo en 50 campos observados Positivo (++)

Se observan más de 10 BAAR por campo en 20 campos observados Positivo (+++)


(ORGANIZACIÓN PANAMERICANA DE SALUD, 2008).

V. CONCLUSIONES
Logre terminar mis practicas pre profesionales cumpliendo así mis respectivos
objetivos trazados y expectativas que tenía antes de haber comenzado mis labores
como practicante en el servicio del Laboratorio del Centro de Salud Cono Sur.

Logre poner en práctica mis conocimientos adquiridos a través de los 5 años de


formación académica que estuve presente en la Universidad Nacional del Altiplano
Puno.

Aprendí el uso y manejo de los principales equipos de laboratorio diferenciando cada


uno de ellos y las funciones específicas que realizan.

Cumplí con mis labores encomendadas por parte del encargado del laboratorio
poniéndose de manifiesto en este informe.
VI. RECOMENDACIONES

Que antes de empezar a realizar el debido trabajo tener en cuenta las medidas de
bioseguridad adecuadas.
El cuidado y la delicada manipulación de los equipos de laboratorio deben ser muy
cuidadosa para evitar su deterioro o pongan en peligro su funcionamiento.

VII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS


 Birken S. Chemistry of human choriogonadotropin. Ann Endocrinol (Paris).
1984;45(4):297-305
 Casado C, Torrico G, Medina M. Laboratorio de Hematología. 2012.
 Dorner R, et al. Clinica Chimica Acta 1987; 167: 1 – 21.
 Maza J, Navarro J, Manual de procedimientos técnicos de laboratorio clínico del
primer nivel de atención. 1ra edición, 2007
 Ministerio de salud, Manual de procedimientos, 1999
 Organización panamericana de salud. Manual para el diagnóstico bacteriológico
de la tuberculosis. 2008.
 Velázquez R, Manual de Prácticas Bioquímica Clínica México de México. 2009
 Zambrano M, Morón C, Cecilia G. Manual de procedimientos de laboratorio en
técnicas básicas de hematología Lima, 2005.

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