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ESTADO DE CAMPECHE
ING.BIOQUIMICA
ALUMNOS: MATRICULA:
DIEGO GUADALUPE AC AC 5632
LUIS ALEJANDRO COLLI KU 5648
FRANCISCO GERMAN AC MOO 5923
ERICK ALEJANDRO CUEVAS MOGUEL 5631
El presente trabajo presenta los objetivos de dicha práctica de laboratorio, bajo los
cuales se ha llevado a cabo esta actividad. Seguidamente encontramos un marco
teórico con el propósito de dar al reporte un sistema coordinado y coherente de
conceptos y proposiciones que permitan abordar el problema.
Inmediatamente se integran los resultados obtenidos, así como las discusiones del
porqué se obtuvieron dichos resultados y en su caso del motivo por el cual no se
pudieron obtener. Continuando con el trabajo hallamos las conclusiones obtenidas
después de haber realizado la actividad, se indica si se cumplieron los objetivos
antes establecidos.
Como parte final se enlistan las referencias bibliográficas de los trabajos de los
cuales fueron útiles para obtener información en forma de texto, imágenes e
inclusive diagramas y tablas.
Contenido
Introducción ........................................................................................................................................ 2
Objetivos ............................................................................................................................................. 5
Objetivo general .............................................................................................................................. 5
Objetivos específicos. ...................................................................................................................... 5
Marco teórico ...................................................................................................................................... 6
1. EL ADN COMO LA SUSTANCIA HEREDITARIA .............................................................................. 6
2. ESTRUCTURA DEL ADN ................................................................................................................ 8
3. QUIMICA E HISTORIA DEL ADN ................................................................................................... 8
4. DESCUBRIMIENTO DE LA DOBLE CADENA DEL ADN ................................................................... 9
5. GENERALIDADES DEL ADN ........................................................................................................ 10
6. ADN Y BIOQUÍMICA. .................................................................................................................. 11
7. EXTRACCIÓN DE ADN ................................................................................................................ 15
Diagrama experimental ..................................................................................................................... 19
Extracción de ADN vegetal ............................................................................................................ 19
Diagrama experimental del epitelio bucal .................................................................................... 20
Materiales ......................................................................................................................................... 21
Procedimiento ................................................................................................................................... 22
Procedimiento de extracción de ADN de tejido vegetal. .............................................................. 22
Procedimiento de extracción de ADN de células de epitelio bucal. ............................................. 23
Resultados ......................................................................................................................................... 24
Discusión ........................................................................................................................................... 25
Conclusión ......................................................................................................................................... 26
Bibliografía ........................................................................................................................................ 27
Objetivos
Objetivo general
Se pretende extraer mediante un método casero el ADN de una muestra del
epitelio bucal y de un tejido vegetal (tomate) y se espera tener un resultado
favorable para su documentación y posterior análisis.
Objetivos específicos.
Establecer una metodología que nos permita extraer ADN con la utilización
de materiales caseros.
Extraer de manera exitosa el ADN de una muestra del epitelio bucal y tejido
vegetal y discutir sus resultados.
Identificar de manera visible la proporción de ADN
Marco teórico
1. EL ADN COMO LA SUSTANCIA HEREDITARIA
No sabíamos de la existencia de cromosomas hasta que fueron observados
durante la división celular a manera de bastones oscuros de ácidos nucleicos y
proteínas. 1
Ya antes había sido observado y descrito a principios del siglo XIX, pero su
significado como mensajeros de la información genética fue ignorado por más de
un siglo 1
Figura 1. Cromosoma
Los cromosomas contienen las partes codificables, la secuencia de nucleótidos con información
secuencial.
El DNA está formado por dos cadenas polinucleótidas enrrolladas, una alrededor
de la otra para formar una doble hélice dexogira 3
Hacia 1820, hidratos de carbono grasas y proteínas habían sido reconocidos como
principales ingredientes de los organismos vivos. 5
6. ADN Y BIOQUÍMICA.
El DNA, que contiene los genes (las unidades de la herencia), está empaquetado
en estructuras que se denominan cromosomas. Tal y como se definió
originalmente, el término cromosoma sólo señalaba las estructuras densas teñidas
de forma oscura que se veían en el interior de las células eucariotas durante la
meiosis o la mitosis.5
En una serie de experimentos, Matthew Meselson y Franklin W. Stahl
demostraron, en 1958, que en realidad el ADN se replica en forma
semiconservativa (Fig. 4), como habían indicado Watson y Crick. Más o menos al
mismo tiempo comenzaron a aparecer informes de la purificación y las
propiedades de algunas de las enzimas que intervienen en la replicación.7
7. EXTRACCIÓN DE ADN
La extracción de ADN requiere una serie de etapas básicas: En primer lugar, tiene
que romperse la pared celular y la membrana plasmática para poder acceder al
núcleo de la célula. A continuación, debe romperse también la membrana nuclear
para dejar libre el ADN.4
El estudio del ADN ha llevado a un enfoque molecular y bioquímico de gran
impacto en el crecimiento de los conocimientos genéticos. El análisis del ADN y la
información sobre la estructura genética de un organismo nos permite visualizar la
complejidad de los procesos involucrados en la expresión genética.4
La lisis celular se puede hacer por acción mecánica, pulverizando el tejido con
hielo seco nitrógeno líquido, también se puede utilizar la degradación enzimática
de la pared celular (si está presente) y lisis con detergentes de las membranas
celulares. Seguido al rompimiento celular la mayoría de métodos involucran una
desproteinización, lo cual se lleva a cabo con un solvente orgánico, seguido de
una precipitación con isopropanol o etanol y posterior solubilizarían con agua o
tampón (Véase Fig. 5).11
Figura 5. Etapas del proceso de extracción de ADN.
Extracción de ADN sencillo o casero.11
El ADN es una molécula muy larga y tiende agruparse. De ahí la facilidad para
retirarla. Para aislar el ADN hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es
soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol precipita en la interface
entre el alcohol y el agua. Además de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el
ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solución
acuosa.13
Las enzimas son unas sustancias que atacan a las proteínas de las células, lo que
permite romperlas y separarlas del ADN, que es el material que buscamos. Si no
disponemos de enzimas, podemos utilizar ablandador de carnes (el cual contiene
papaína, sustancia que degrada las proteínas).12
Trozos de tomate
Obtenemos una
muestra de tomate y
agua
Muestra filtrada
Agregar 30 ml de detergente
Obtenemos una
muestra con
detergente
Añadir la papaina
Muestra con
papaina
Mezcla de la
enzima, detergente
y alcohol etílico
Depositar el ADN en un
tubo Eppendort
CELULAS
Boca libre de
alimentos
Hacer buches de agua con
sal
Mezcla de
células bucales
y agua con sal
Muestra
Agregarle detergente
Dejar reposar
Esperar a que el ADN
se separe de la mezcla
Obtenemos ADN
Con respeto a la extracción del ADN del epitelio bucal, se puede decir que gracias
a una investigación pudimos descubrir que enjuagarse la boca con la mezcla de
agua con sal nos ayudó a arrancar las células del epitelio bucal.
3. González, N., Rodríguez, N., Torres, W., & De Jesús, R. (2011). Protocolo
sencillo para la extracción de ADN genómico. Revista Científica.
6. García, M.P.. (2003) Cincuenta años del ADN: la doble hélice. México. Espasa
Forum.
7. Lubert Stryer. (1995). Bioquímica Reverté. México. McKee, T., & McKee, J. R.
(2012). Biochemistry: the molecular basis of life. Oxford: Oxford University Press.
10. David, L.G. Dibner, M.D.& Battery, J.F. (1986). Bassin methods in molecular
biology. Elsiever Science Publishing Co.
13. Horton, H., RAWN, L. A., SCRIMGEOUR, J. D., & Horton, K. G. R. (2008).
Principios de bioquímica. Pearson Educación.