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1. OBJETIVOS
2. INTRODUCCIÓN
3. REACTIVOS
Patrón de aminoácidos 1g/L: tirosina (Y), triptófano (W), arginina ( R), cisteína (C),
histidina (H), ácido aspártico (D), isoleucina (I), fenilalanina (F), serina (S) y prolina
(P).
Solución de Ninhidrina (fresca).
NaOH, 40% y al 10%
Ácido nítrico concentrado
Reactivo de Millon
Nitrito de sodio (NaNO2), 1%
Reactivo de Hopkins Cole (ácido acético glacial expuesto a la luz) o una pizca de
glioxilico en 30 mL de ácido sulfúrico concentrado
α-naftol, 0,15%
Hipobromito o hipoclorito de sodio o de potasio (NaClO).
Solución de urea, 1g/L
Hidróxido de amonio concentrado
Hidróxido de amonio, 10%
Nitroprusiato de sodio, 20 g/L
Acetato de plomo, 10%
Ácido sulfanílico, 0,5%, preparado en HCl, 2%
Nitrito de sodio, 5%
Reactivo de Erlich (p-dimetilaminobenzaldehído) 100g/L en ácido clorhídrico
concentrado)
Reactivo de Biuret
Na2CO3, 10 g/L
4. MATERIALES
Material de prueba
5. PROCEDIMIENTO
Reacción de Ninhidrina
Reacción de Millon
Esta prueba la dan los compuestos que poseen grupos fenólicos como la tirosina,
la prueba positiva en una proteína indica la presencia de este aminoácido en la
estructura de la misma. Al calentar el reactivo de Millon (mezcla nitrato y nitrito
mercúricos disueltos en ácido nítrico concentrado), con el aminoácido forma un
precipitado rojo.
Cuando una solución contiene una proteína con triptófano o cuando este
aminoácido se encuentra libre, el grupo indólico presente en el radical reacciona
con el ácido glioxílico (ácido acético más ácido sulfúrico), dando lugar a la
aparición de un anillo color violeta (púrpura) en la interfase de los líquidos como
prueba positiva para el ensayo.
Reacción de Sakaguchi
Prueba de nitroprusiato
Prueba de Ehrlich
Prueba de Pauly
El ácido sulfanílico diazotizado se une con las aminas, fenoles e imidazoles para
dar compuesto azo (diazonio) fuertemente coloreados, esto se forman únicamente
en frío, así que las soluciones se deben colocar en hielo antes de la diazotización.
Las proteínas y los péptidos, en medio alcalino forman con el ión Cu 2+ quelatos
solubles de coloración característica, desde el azul intenso al violeta.
6. BIBLIOGRAFÍA
I. INTRODUCCIÓN
Realice una breve introducción acerca de las reacciones que se utilizan para
identificar aminoácidos.
Reaccion de ácido glioxílico para triptófano: El grupo del triptófano reacciona con
el ácido glioxílico en presencia del ácido sulfúrico concentrado dando un color
púrpura. El ácido acético glacial que ha sido expuesto a la luz contiene ácido
glioxílico.
Desaminación:
Por oxidación: Desaminación oxidativa:
Frases de Riesgo (R): Incombustible. En contacto con metales puede formarse hidrógeno
gaseoso (existe riesgo de explosión). Precipitar los vapores formados con agua. No
permitir el paso del agua de extinción a acuíferos superficiales o subterráneos.
Frases de Seguridad (S):
PROTECCIÓN PERSONAL: Usar guantes apropiados, usar gafas, usar bata.
MANEJO DE RESIDUOS: Disponga del material de desecho en una instalación aprobada
para el tratamiento y disposición de desechos, de acuerdo con los reglamentos
aplicables. No disponga del desecho en la basura normal ni en los sistemas de drenaje.
Frases de Riesgo (R): Reacciona con muchos metales y sus sales dando lugar a la
formación de compuestos explosivos. Ataca a muchos metales formando gas inflamable
de hidrógeno. La disolución en agua es una base fuerte y reacciona violentamente con
ácidos.
Frases de Seguridad (S): NO permitir que este producto químico se incorpore al ambiente.
(Protección personal adicional: traje de protección completo incluyendo equipo
autónomo de respiración).
PROTECCIÓN PERSONAL: HIGIENE ESTRICTA! Ventilación, extracción localizada o
protección respiratoria. Mantener los recipientes bien cerrados, guantes protectores y
traje de protección, pantalla facial o protección ocular combinada con la protección
respiratoria.
MANEJO DE RESIDUOS: Puede ser necesario contener y eliminar el hidróxido de amonio
como desecho peligroso.
Frases de Riesgo (R): La sustancia penetra al cuerpo por vía inhalatoria, contacto con los
ojos e ingestión
Frases de Seguridad (S):
PROTECCIÓN PERSONAL: Equipo respiratorio con suministro de aire, utilizar guantes del
tipo alcohol polivinílico o goma de nitrilo, ropas antiestáticas de fibra natural o de fibras
sintéticas resistentes a altas temperaturas.
MANEJO DE RESIDUOS:
Frases de Riesgo (R): Nocivo por ingestioó n. Irrita los ojos, la piel y las víóas respiratorias, el
contacto prolongado o repetido puede producir sensibilizacioó n de la piel.
Frases de Seguridad (S):
PROTECCIÓN PERSONAL: ¡EVITAR LA DISPERSION DEL POLVO! Extracción
localizada o protección respiratoria, guantes protectores, traje de protección, gafas de
protección de seguridad.
MANEJO DE RESIDUOS: Barrer la sustancia derramada e introducirla en un recipiente,
recoger cuidadosamente el residuo, trasladarlo a continuación a un lugar seguro
III. METODOLOGÍA
Elabore los diagramas de flujo para cada una de las pruebas a realizar en el
laboratorio.
Completar
CUADRO 1
Color que se obtuvo Color que se obtuvo
Reacción Aminoácido patrón con el aminoácido con la solución
patrón problema
1.Ninhidrina
2.Xantoproteíca
3.Millon
4.Hopkins Cole
5.Sakaguchi
6.Nitroprusiato de
sodio
7.Acetato de plomo
8.Ehrlich
9.Pauly
10.Biuret Albúmina