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Hans Zinnser,
Zinnser, 1953
1
•Las consecuencias de las infecciones causadas por los
microorganismos patógenos han afectado seriamente a
la humanidad por ej. la peste, el cólera, la influenza.
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• A pesar de la inherente complejidad de los sistemas biológico y
social involucrados en la emergencia, algunos estudios revelan
lo siguiente:
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Factores en la emergencia de enfermedades infecciosas.
4
Base ambiental de la transmisión de agentes
infecciosos según Feachem et al. (1983)
Propiedades relacionadas
a la supervivencia ambiental
LATENCIA:
El tiempo entre la excreción del patógeno y el
tiempo en que infecta a un nuevo hospedero.
DOSIS INFECTIVA:
Dosis mínima requerida de un organismo para
causar la enfermedad.
SUPERVIVENCIA:
Conservación de la viabilidad del organismo
bajo condiciones adversas.
5
PERSISTENCIA:
Capacidad de un patógeno de sobrevivir en el
medio por un período de tiempo.
VIABILIDAD:
Propiedad que posee una parte de una
población bacteriana capaz de multiplicarse
cuando existan óptimas condiciones para su
crecimiento.
MULTIPLICACIÓN:
Posibilidad de crecimiento microbiano bajo
determinadas condiciones.
Cryptosporidium parvum y
Giardia lamblia Rotavirus
Foto: HDA Lindquist, USEPA Foto: FP Williams, USEPA
6
Vías de transmisión de algunos microorganismos patógenos
en aguas.
7
Vías de transmisión de algunos microorganismos patógenos
en aguas.
Por contacto
Ruta de Piel, membranas de las mucosas, heridas, ojos
infección
Fuente: Cyanosite
8
Calidad del agua:
Para evaluar los cambios que las diferentes aplicaciones del agua
pueden originar en su calidad, se emplean parámetros físicos,
químicos y biológicos, también llamados indicadores de calidad de
agua.
Norma:
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Valores Guías en agua potable para verificar la calidad microbiológica
Organismos guíaa
Valor guí
•Toda
Toda agua de consumo
Escherichia coli o bacterias No debe detectarse en
coliformes termotolerantes ninguna muestra de 100ml
•Agua
Agua tratada que entra al sistema de distribución
Escherichia coli o bacterias No debe detectarse en
coliformes termotolerantes ninguna muestra de 100ml
•Agua
Agua tratada en el sistema de distribución
Escherichia coli o bacterias No debe ser detectado en
coliformes termotolerantes ninguna muestra de 100ml
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Límites permisibles para aguas de
hemodiálisis
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Término Indicador
Término Índice
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Características que debe tener un indicador:
Grupos de microorganismos
Métodos
Viruses Bacteria Protozoos
parásitos
Concentración Adsorción-elución Filtración por Filtración por
membrana por cartuchos/
Separación
inmunomagnética
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Métodos para la identificación y cuantificación de
indicadores y patógenos bacterianos en aguas.
MÉTODOS CONVENCIONALES
Diluciones
Peptona
10-1 10-2
salina
20 ml
100 10 ml 1 ml 1 ml 1 ml
ml
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Comparación de dos métodos de ensayo más utilizados en la
vigilancia de la calidad microbiológica del agua.
Los recursos están disponibles en la mayoría de los El costo de los recursos es alto en algunos países
países
Podría ser mejor el recobrado de microorganismos
dañados o estresados en algunas circunstancias
Conteo total
de bacterias heterótrofas.
Bacterias que requieren el carbono orgánico para su
crecimiento. Incluyen la flora autóctona y la alóctona
presente.
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Biofilm o biopelicula
Biofilm o biopelicula
16
Biofilm o biopelicula
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Conteo de bacterias heterótrofas
Verificar efectividad de los procedimientos de
limpieza y desinfección.
Grupo Coliforme
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Distribución del grupo coliforme en
heces de humanos y animales.
Tipo de muestra Porcentaje de coliformes totales
96.8 (B)
Coliformes totales
Coliformes fecales
(actualmente termotolerantes)
Escherichia coli
(≈95% de los coliformes en las heces)
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Coliformes totales (CT)
20
Escherichia coli
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Coliformes y enterococos-Filtración por membrana
m-Enterococos
m-FC
m-Endo LES
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Ejemplos de género y especies del Grupo Coliforme
dentro de la familia Enterobacteriaceae
Género Especie
Escherichia Escherichia coli
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Métodos para detección de microorganismos patógenos.
1. Métodos de filtración.
Adsorción/ elución de virus
Ultrafiltración
2. Métodos inmunológicos
Separación inmunomagnética (IMS)
3. Floculación.
Adsorción de virus con hidróxido de aluminio.
Floculación de quistes de Cryptosporidium con carbonato de calcio.
4. Centrifugación
Flujo continuo de centrifugado
Separación/aislamiento por densidad de gradiente
5. Citometría de flujo.
6. Técnicas de preenriquecimiento y enriquecimiento.
7. Otra técnicas (hidroextracción, extracción por solventes).
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Técnicas de cultivo de patógenos (más convencionales).
1. Cultivo de bacterias.
Técnica del Número Más Probable (NMP) en medio líquido.
Prueba de Presencia/Ausencia en medio líquido.
Placa vertida.
Filtración por membrana.
Enriquecimiento en medio líquido +confirmación o aislamiento
en medio sólido.
Género Salmonella
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Flujograma de la técnica de Salmonella sp.
Muestra de agua
18-24h/35-37 °C
24h/42 °C
18-24h/37 °C
Agar Kligler
18-24h/37 °C
Cultivos con imagen presuntiva
Pruebas bioquímicas y serológicas
Género Vibrio.
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Modelo hipotético de transmisión de Vibrio cholerae en la naturaleza.
Características
Características físicas
físicas
y químicas
químicas del
del agua
agua
•temperatura
•temperatura
•luz solar
solar Características
Característicasbiológicas
biológicas
•tensión
•tensión de
de OO22 disuelto
disuelto
•pH •afloramiento
•afloramientode
dealgas
algas
•lluvia •afloramiento
•afloramientode
defitoplancton
fitoplancton
•salinidad
•salinidad yy otros
otros
•nutrientes
•nutrientes químicos
químicos
Afloramiento
Afloramientodedezooplancton
zooplancton
(¿entra
(¿entraen
enlos
losno
nocultivables
cultivables?)?)
V. cholerae viable
V.cholerae viablepero
perono
nocultivable
cultivableen
enlala
columna
columnade deagua
aguaadherido
adheridoaapartículas.
partículas.
(¿relación
(¿relaciónde desimbiosis
simbiosisoocomensal?)
comensal?)
Retorno
Retorno de
de V. cholerae al
V. cholerae al
agua
agua por
por vía
vía fecal.
fecal.
Transmisión
Transmisiónde choleraealalhombre
deV.V.cholerae hombrepor
por
ingestión
ingestiónde
deagua
aguaconconcopépodos
copépodos
colonizados
colonizadosuuotros
otrosvectores.
vectores.
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Flujograma de la técnica de Vibrio cholerae.
Muestra de agua
Agar TCBS
Agar MacConkey
18-24h/37 °C
Agar Kligler
18-24h/37 °C
Cultivos con imagen presuntiva
Pruebas bioqu² as y serológicas
Plantas acuáticas
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Patógenos bacterianos más frecuentes determinados en aguas.
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Taxonomía.
•Género: Aeromonas (Stanier 1943)
•Familia: Aeromonadaceae (Colwell et al. 1986)
•Orden: Aeromonadales (Martin-Carnahan y Joseph, 2005)
•Especies:
•Aeromonas allosaccharophila (Martinez-Murcia et al. 1992, sp. nov.)
•Aeromonas caviae (ex Eddy 1962, Popoff 1984, sp. nov.) A. punctata subsp.
caviae (Scherago, 1936)
•Aeromonas culicicola (Pidiyar et al. 2002, sp. nov.) Aeromonas veronii
biovar sobria (Hickman-Brenner et al. 1988).
•Aeromonas encheleia (Esteve et al. 1995).
•Aeromonas enteropelogenes (Schubert et al. 1991 sp. nov.) Aeromonas trota
(Carnahan et al. 1992).
•Aeromonas eucrenophila (Schubert y Hegazi 1988, sp. nov.)
•Aeromonas hydrophila (Chester 1901, Stanier 1943)
•Aeromonas hydrophila subsp. anaerogenes (Schubert 1964)
•Aeromonas hydrophila subsp. dhakensis (Huys et al. 2002)A
•Aeromonas hydrophila subsp. hydrophila (Chester, 1901)
•Aeromonas hydrophila subsp. proteolytica (Merkel et al. 1964)
•Aeromonas hydrophila subsp. ranae (Huys et al. 2003 subsp. nov.)
•Aeromonas ichthiosmia (Schubert et al. 1991, subsp. nov.)
•Aeromonas jandaei (Carnahan et al. 1992, sp. nov.)
•Aeromonas media (Allen et al. 1983, sp. nov.)
•Aeromonas molluscorum (Minana-Galbis et al. 200, sp. nov.)
•Aeromonas popoffii (Huys et al. 1997, sp. nov.)
Muestra de agua
Hisopo de Moore Filtración por membrana
Pruebas bioquímicas
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Patógenos bacterianos más frecuentes determinados en aguas.
Género Plesiomonas
Taxonomía.
Pseudomonas shigelloides
Aeromonas shigelloides
Fergusonia shigelloides
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Algunas pruebas de diferenciación de los géneros Vibrio, Aeromonas y
Plesiomonas.
GRUPOS
PRUEBAS 1 2 3 4 5 6 7 8
Oxidasa + + - + + - + +
Nitrato + + - + - - + +
Arginina dihidrolasa - + + - - - + +
Lisina decarboxilasa + - d - - - d +
Ornitina decarboxilasa d - - - - - - +
µg
O/129 150µ disco S S S S S NT R& d
Crecimiento en:
d d d - - - + +
0% de NaCl
3% de NaCl + + + + + NT + +
6% de NaCl d d d d + NT - -
Simbolos: + todas las cepas son positivas,- todas las cepas son negativas, d diferentes características de cepa a cepa, S sensible, R resistente, NT no probada.
Grupo 1: V. cholerae, V. mimicus, V. parahaemolyticus, V. alginolyticus, V. harveyi, V. campbellii, V. fischeri y V. marinus.
Grupo 2: V. fluvialis, V. furnissii, V. anguillarum, V. diazotrophicus, V. splendidus biovar 1, V. tubiashii, V. costicola, V. nereis, V. damsela, V. proteolyticus, V.
orientalis y V. aestuarianus.
Grupo 3: V. metschnikovii.
Grupo 4: V. hollisae, V. natriegens, V. splendidus biovar II, V. nigripulchritudo y V. logei.
Grupo 5: V. ordalii.
Grupo 6: V. gazogenes.
Grupo 7: A. hydrophila, A. caviae, A. sobria y A. salmonicida.
Grupo 8: P. shigelloides.
& algunas cepas de A. salmonicida son sensibles.
Nota: Todas las cepas de Aeromonas fermentan la glucosa.
Fuente: Lee JV, DonovanTJ. Vibrio, Aeromonas and Plesiomonas. En: Isolation and Identification of Microorganisms of Medical
and Veterinary Importance. United Kingdom: Society for Applied Bacteriology, 1985:13-33.
Género Legionella
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Características de la enfermedad de los Legionarios y la fiebre de
Pontiac.
Medios de transmisión
Tipo de agua
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Ejemplos de pruebas bioquímicas y serológicas.
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Método de concentración por filtración por membrana
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Métodos moleculares para la detección e identificación.
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Métodos novedosos para la detección e identificación.
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Qué es una norma?
Es un documento establecido por consenso y aprobado
por un organismo reconocido que establece, para usos
comunes y repetidos, reglas, criterios o características
para las actividades o sus resultados, que procura la
obtención de un nivel óptimo de ordenamiento en un
contexto determinado.
Fuente:www.crid.or.cr
Características de la norma:
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Organismos internacionales que más frecuentemente
se emplean sus guías y normativas para la calidad del
agua y los métodos de ensayo
Siglas empleadas:
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Normas de métodos de ensayo asociados a la evaluación
de la calidad microbiológica del agua (cont..)
Microorganismos Norma
Microorganismos Norma
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Normas de métodos de ensayo asociados a la evaluación
de la calidad microbiológica del agua (cont..)
Microorganismos Norma
Microorganismos Norma
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Medios de cultivo normalizados más utilizados para la determinación de
coliformes, coliformes termotolerantes y Escherichia coli (NMP).
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Medios de cultivo normalizados más utilizados para la determinación de
estreptococos fecales (enterococos)(FM).
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Medios de cultivo normalizados más utilizados para la determinación de
Pseudomonas aeruginosa (NMP).
Medios de cultivo ISO APHA SCA EPA NC
8360-1
Caldo asparagina con X
etanol
Caldo asparagina X X X X
Caldo acetamida X X X
Caldo malaquita X
Agar King-P X X
Agar King-F X X
Agar leche con cetrimida X
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Medios de cultivo más utilizados en la determinación de algunos patógenos
bacterianos aislados en aguas. Salmonella sp y Salmonella typhi.
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Medios de cultivo más utilizados en la determinación de algunos patógenos
bacterianos aislados en aguas. Aeromonas sp.
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Gracias
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