“Año del diálogo y la reconciliación nacional”

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMÁTICA

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA

PRÁCTICA Nª 4: IDENTIFICACIÓN DE Neisseria

CURSO: BACTERIOLOGÍA

PROFESORA: Nora Bravo cruz

ALUMNOS:

Calsina Quispecondori, Rocio

Flores Carrasco Kevin
Gonzales Cruz, Conny
Miranda Melo, Noemí
Palacios Guzmán, Claudia
Utia Yataco, Renzo

2018
 IDENTIFICACION DE Neisseria

El género Neisseria contiene los dos cocos gran negativos que son microorganismos
patógenos establecidos para humanos. El género también contiene muchas especies
comensales, la mayoría de las cuales son habitantes inocuos de los tractos respiratorio
y alimentario superiores. Las especies patogénicas son Neisseria
meningitidis (meningococo), una causa importante de meningitis y bacteriemia,
y Neisseria gonorrhoeae (gonococo), la causa de la gonorrea (vulgarmente, la gota
militar).

CARACTERÍSTICAS GENERALES
Neisseria son cocos gran negativos que en forma típica aparecen en pares (diplococos)
con los lados opuestos achatados, lo que les da una apariencia de “granos de café”. No
tienen movilidad, no forman esporas y no son acidorresistentes. Sus paredes celulares
son clásicas de las bacterias gramnegativas, con una capa de peptidoglucano y una
membrana externa que contiene polisacáridos complejos con lípido y proteínas. Los
elementos estructurales de N.meningitidis y N. gonorrhoeae son los mismos, excepto
que el meningococo contiene una cápsula polisacárida externa a la pared celular.

Neisseria gonorrhoeae Neisseria sicca

La Neisseria gonorrhoeae o gonococo Neisseria sicca, es considerada un

es una bacteria Gram-negativa, oxidasa
positiva, aeróbica, nutricionalmente
fastidiosa, que microscópicamente
aparece como diplococos. Los humanos
son los únicos hospedadores naturales
del gonococo, el cual se transmite por
vía sexual. La gonorrea es causada por
la bacteriaNeisseria gonorrhoeae y la
puede contraer cualquier persona que
tenga relaciones sexuales anales,
vaginales u orales con una persona que
tenga esta enfermedad. Puede causar
infecciones en los genitales, el recto y la
garganta. Una mujer embarazada con
gonorrea puede transmitírsela a su bebé
durante el parto.
agente comensal de la orofaringe
humana, es un diplococo gramnegativo
fastidioso aeróbico, inmóvil y oxidasa
positiva. Al igual que todas las especies
de este género, requieren de C0 2 y
cierto grado de humedad para crecer a
35 °C. Se cultiva en agar chocolate, agar
sangre de cordero y no se desarrolla en
Thayer Martin, dado que este medio
inhibe el desarrollo de neiserias
comensales excepto N. lactámica. La
colonia es blanca, opaca, de 1 a 3 mm,
adherente; con los días de incubación
adquiere una textura rugosa y produce
pigmento amarillo verdoso. Entre sus
características bioquímicas relevantes
se encuentra la producción de ácidos
desde sucrosa y fructosa, propiedad
que comparte con N. subflava y N.
mucosa y que permite diferenciarlas de
neiserias patógenas; por último, la
reducción de N03 es positiva para esta
especie.
 RESULTADOS

Se ve el crecimiento de E.coli (A) y N.lgonorrhoeae (B) en el medio Agar Chocolate.

A B

Tinción gram de N.gonorrhoeae, son gran negativos.

Prueba de catalasa:

E.coli, catalasa positiva N.gonorrhoeae catalasa positivo

Prueba Oxidasa:

E.coli pxidasa negativa N.gonorrhoeae oxidasa positivo

 “Año del diálogo y la reconciliación nacional”

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMÁTICA

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA

PRÁCTICA Nª 5: IDENTIFICACIÓN DE ENTEROBACTERIAS

CURSO: BACTERIOLOGÍA

PROFESORA: Nora Bravo cruz

ALUMNOS:

Calsina Quispecondori, Rocio

Flores Carrasco Kevin
Gonzales Cruz, Conny
Miranda Melo, Noemí
Palacios Guzmán, Claudia
Utia Yataco, Renzo

2018
MATERIALES

 CEPAS

□ Escherichia coli
□ Citrobacter freundii
□ Klebsiella pneumoniae
□ Proteus vulgaris
□ Enterobacter aerogenes
□ Proteus mirabilis
□ Serratia marcescens
□ Salmonella enterica ser. Typhi
□ Shigella flexnri
□ Salmonella enterica ser. Enteritidis
□ Salmonella enterica ser. Paratyphi A

 MEDIOS DE CULTIVO REACTIVOS QUÍMICOS

□ Placas de Mac Conkey

□ Tiras para indol
□ Placas de Xylosa Lisina Desoxicolato (XLD)
□ Reactivo de Kovac's
□ Tubos con agar Triple Sugar Iron (TSI)
□ Alfa naftol al 5%
□ Tubos con agar Lisina hierro (LIA)
□ Hidróxido de potasio al 40%
□ Tubos con medio (MIO) ó (SIM)
□ Tubos con agar Citrato de Simmons
□ Tubos con caldo MR-VP
□ Tubos con caldo soya tripticase (TSB)

METODOLOGÍA

Día 1

 Reciba las cepas (3 por cada grupo)

 Siembre cada una de ellas en TSB, incube a 37°C por 4 a 6 horas (Fase log).
 Transcurrido el tiempo indicado y en un tubo estéril y con pipetas individuales,
coloque 0,5 mL de cada cultivo y mezcle.
 Con un asa de siembra previamente esterilizada y enfriada, a partir de la mezcla,
siembre por agotamiento en agar MacConkey, XLD y EMB tratando de obtener
colonias aisladas.
 Coloque las placas en la incubadora a 37°C por 24 horas.
 A partir de las cepas recibidas
 Con la aguja de puntura y siguiendo las instrucciones que el profesor de
prácticas le brinde siembre las cepas en los medios diferenciales: TSI, LIA MIO,
o SIM, MR-VP, Citrato y el caldo urea.
  Coloque los tubos en la incubadora a 37°C por 24 horas.
Día 2

 Observe el desarrollo obtenido en el agar MacConkey, XLD y EMB

 En el agar MacConkey identifique las colonias grandes, rojas y de apariencia
seca como lactosa positiva y la presencia colonias traslúcidas e incoloras como
lactosa negativas.
 En XLD, las colonias amarillas como lactosa positivas y las rojas o translúcidas
rojas con punto negro o negras como lactosa negativas.
 En EMB, las colonias verdes con brillo metálico como lactosa positivas y
translúcidas color ámbar como lactosa negativas.

MEDIOS

 Utilización de citrato: Observe la presencia de crecimiento en el plano inclinado y

cambio en el color del medio frente a un tubo no inoculado.

□ Positivo: Presencia de color azul intenso y crecimiento en el medio de cultivo.

□ Negativo: No se observa crecimiento ni cambio de color.

 TSI: Observe las reacciones ocurridas, interprete y grafique los resultados.

□ Las bacterias que fermentan la glucosa dan una reacción alcalina en el plano
inclinado y ácido en el fondo (K/A).
□ Si además fermenta glucosa y/o sacarosa se produce acidez suficiente para
acidificar tanto el fondo como el plano inclinado (A/A).
□ La producción de gas se manifiesta por el resquebrajamiento del medio, se
simboliza de acuerdo a la cantidad observada de 1+ a 4+
□ La producción de hidrogeno sulfurado (H2S) se manifiesta por el color negro en
el medio, se simboliza de acuerdo a su intensidad de 1+ a 4+

 LIA: Observe las reacciones ocurridas en el medio, interprete y grafique sus

resultados.

□ La descarboxilación de la lisina origina una reacción alcalina en todo el medio lo

que origina la intensificación del color púrpura (K/K).
□ En los casos en que no produzca la descarboxilación de la lisina el medio se
observa alcalino en el plano inclinado y amarillo en el fondo, esta acidez se
produce por la utilización de la glucosa que el medio tiene (K/A).
□ En los casos en que se produzca la desaminación de la lisina el medio se
observa color rojo ladrillo en el plano inclinado y amarillo en el fondo, esta acidez
se produce por la utilización de la glucosa que el medio tiene (R/A).

 Medio MIO Prueba De Ornitina:

□ Observe el color en el medio semisólido

 □ Positivo: Púrpura
□ Negativo: Amarillo
□ RESULTADOS Y DISCUSIONES

Figura 1. Pruebas Bioquímicas para identificación de Salmonella enterica.

A) Citrato Simmons Agar, B) TSI, C) LIA y D) MIO

CITRATO: el fosfato monoamónico es la única fuente de nitrógeno y el citrato de sodio

es la única fuente de carbono. El medio de cultivo es diferencial en base a que los
microorganismos capaces de utilizar citrato como única fuente de carbono usan sales
de amonio como única fuente de nitrógeno, con la consiguiente producción de
alcalinidad. En nuestro caso, en la fig1, se observa un resultado positivo ya que el
medio se torna azul.

TSI: Este medio se utiliza para determinar la capacidad de los bacilos gramnegativos
para fermentar lactosa, sacarosa y glucosa, así como para determinar su capacidad de
producir H2S (ácido sulfúrico) y gas. El tubo contiene dos cámaras de reacción, en la
parte inclinada se fermenta la lactosa y la sacarosa y en la parte profunda se fermenta
la glucosa. Se observa en la fig1, es que fermenta glucosa y/o sacarosa y produce
de Gas (+1).

L.I.A.: es un medio de cultivo ampliamente utilizado para la diferenciación de bacilos

Gram negativos entéricos, especialmente miembros del género Salmonella con
capacidad de fermentación de lactosa, sobre la base de la producción de H2S y la
actividad de la enzima Lisina decarboxilasa. En la Fig1. Se observa la alcalinización
total (K/K).
MIO: Medio utilizado en la identificación de miembros de la familia Enterobacteriaceae
en base a la movilidad, producción de indol y actividad enzimática ornitina
decarboxilasa. El resultado es Positivo ya que el medio se torna morado.

Figura 2. Pruebas Bioquímicas para identificación de E. coli. A) Citrato Simmons Agar,

B) MIO, C) LIA y D) TSI

CITRATO: En nuestro caso, en la fig2, se observa un resultado negativo ya que el medio

se mantiene verde.

TSI: Se observa en la fig2, es que fermenta glucosa y/o sacarosa.

L.I.A.: En la Fig1. Se observa la alcalinización total (K/K).

MIO: El resultado es Negativo ya que el medio se mantiene amarillo pero produce Gas
(+2)
 Figura 3. Pruebas Bioquímicas para identificación de Klebsiella pneumoniae. A)
Citrato Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D). TSI

CITRATO: En nuestro caso, en la fig3, se observa un resultado positivo ya que el medio

se torna azul.

TSI: Se observa en la fig2, es que fermenta glucosa y/o sacarosa.

L.I.A.: En la Fig1. Se observa la alcalinización total (K/K).

MIO: El resultado es Negativo ya que el medio se mantiene amarillo, pero produce Gas
(+4)
 Figura 4. Pruebas Bioquímicas para identificación de Proteus mirabilis. A) Citrato
Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI.

CITRATO: En nuestro caso, en la Fig4 se observa un resultado positivo ya que el medio

se torna azul.

L.I.A.: En la Fig4 Se observa la alcalinización total (K/K).

TSI: Se observa en la Fig4 es que fermenta glucosa (K/A).

MIO: El resultado es positivo ya que el medio se torna púrpura pero no produce Gas.
 Figura 5. Pruebas Bioquímicas para identificación de Shigella sonnei.
A) Citrato Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI

CITRATO: debido a que las bacterias del genero Shigella no utilizan el citrato como
única fuente de carbono; no se observó crecimiento en la prueba en práctica.

TSI: Shigella fermentan la glucosa sin producción de gas, pero no la lactosa por ello se
observa en K/A. siendo Alcalina (rojo) en la superficie inclinada, Ácida (amarillo) en el
fondo y Sin producción de H2S (sin ennegrecimiento del fondo del tubo).

L.I.A.: no descarboxila la lisina ni la desamina. Se observa alcalino en el plano inclinado

y amarillo en el fondo, esta acidez se produce por la utilización de la glucosa que el
medio tiene (K/A).

MIO: Shigella son inmóviles, pero animados de movimiento pendular (oscilación) in

situ. Son indol negativo puesto que no se observó el viraje a rojo grosella. La prueba de
ornitina positivo, pero esta debió vio observarse con un color morado más intenso. esto
podría deberse a que tal vez cargarse más la hace con la bacteria en la siembra.
 Figura 6. Pruebas Bioquímicas para identificación de Citrobacter freundii. A) Citrato
Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI

CITRATO: en el caso de Citrobacter freundii este si utiliza el citrato como única fuente
de carbono. Por lo que se observó en práctica su crecimiento y el viraje del medio a
azul.

TSI: Citrobacter puede fermentar tanto la glucosa como la lactosa, además producir gas,
pero no H2S. en practica se observó la producción de gas de ++.(K/A)

L.I.A.: se observó la no descarboxilación de la lisina. Observándose amarillo bajo del

tuvo y morado en el pico. (K/A)

MIO: Resulto positivo la prueba de movilidad debido a que estas son bacterias móviles.
En cuanto a la ornitina también resulto positivo y en cuanto al indol negativo.
Figura 7. Pruebas Bioquímicas para identificación de Salmonella sp. A) Citrato Simmons
Agar, B) TSI, C) LIA y D) MIO

CITRATO: se observó el crecimiento y viraje a azul del medio.

TSI: es típico de las Salmonella la producción de H2S en esta especie se ve una

producción de ++. La producción de H2S generalmente en las Salmonellas es más alta.
Se observa que solo fermenta la glucosa mas no la lactosa (K/A) y no hay una
producción de gas.

L.I.A.: hubo descarboxilación de la lisina porque se intensificó el color violeta.

MIO: resulto positivo respecto a movilidad y descarboxilación de la ornitina, pero

negativo para la prueba de indol. Salmonella generalmente son móviles por flagelos
perítricos.
Figura 8. Pruebas Bioquímicas para identificación de Shigella boydii. A) Citrato
Simmons Agar, B) TSI, C) LIA y D) MIO

CITRATO: no se observó crecimiento alguno en el medio debido a que no usa al citrato

como única fuente de energía.

TSI: la bacteria no fermenta la lactosa, pero puede usar a la glucosa. No produce gas
ni H2S

L.I.A.: se nota claramente la que se torna amarillo y por ende esto indica que no
descarboxila la lisina

MIO: la prueba de movilidad resulto negativa al igual que la de indol y ornitina debido a
que el color morado es muy tenue. a diferencia de S. sonnei que si se observó el color
morado más intenso.
 A B C D

Figura 9. Pruebas Bioquímicas para identificación de Salmonella typhi A)

Citrato Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI.

CITRATO: Se observa un resultado negativo, al seguir del mismo color del medio.

MIO: Movilidad positiva, debido a sus flagelos, ya que producen un enturbiamiento

homogéneo del medio debido a su distribución aleatoria del microorganismo. Indol
negativo. Ornitina negativa ya que no tiene la enzima Ornitina-descarboxilasa.

L.I.A.: Se observa intensificación del color púrpura en todo el tubo por la

descarboxilación de la lisina, ya que posee la enzima lisina-descarboxilasa (K/K).

TSI: En el fondo del tubo se observa viraje del indicador debido a la fermentación de la
glucosa; en la superficie del medio se observa un color rojo más intenso que el medio
original debido a la no fermentación de la lactosa ni de la sacarosa (K/A). También se
observa coloración negra a lo largo de la punción debido a la producción de ácido
sulfhídrico.

Salmonella typhi es una excepción importante que no produce gas y es citrato de

Simmons negativo a comparación de las otras especies de Salmonella (Weng et al.,
2003)
 A B C D

Figura 10. Pruebas Bioquímicas para identificación de Yersinia

enterocolitica A) Citrato Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI.

CITRATO: Se observa un resultado negativo, al seguir del mismo color del medio.

MIO: Movilidad negativa. Indol negativo. Ornitina positiva pues tiene la enzima para
descarboxilar a la Ornitina y formar una amina, evidenciándose así un color purpura del
medio.

L.I.A.: Los microorganismos lisina decarboxilasa (LD) negativos, pero fermentadores de

la glucosa, producen un viraje al amarillo de la totalidad del medio de cultivo (A/A).

TSI: Fermentación de glucosa, lactosa y sacarosa (A/A) como la lactosa y sacarosa

están en una proporción 10 veces mayor que la glucosa, en un período de 24hs., la
lactosa y sacarosa, aún no se consumen quedando ácido el medio o sea totalmente
amarillo

La Yersinia enterocolitica es un cocobacilo Gram negativo pequeño, que no forma

esporas, es aerobio o anaerobio facultativo, móvil por flagelos perítricos a 22-25ºC, pero
no a 37°C (Elizalde et al., 2001).Es por ello que en esta práctica resulto movilidad
negativa ya que se incubo a 37 °C.
 A B C D

Figura 11. Pruebas Bioquímicas para identificación de Pseudomonas

aeruginosa A) Citrato Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI.

CITRATO: Se observa un resultado positivo. Ya que el citrato del medio es utilizado, el

nitrógeno también es extraído del fosfato de amonio contenido en el medio, liberando
amonio,lo cual alcaliniza el medio que vira de verde a azul.

MIO: Movilidad positiva, El movimiento de Pseudomonas se da por dos vías, la

primera es dado en medios líquidos, donde utiliza su único flagelo polar, en
ambientes semisólidos o superficies, se mueve a partir de los pilis (fimbrias) del
tipo IV a este yipo de movilidad se le llama “twi tching” . Indol negativo. Ornitina
positiva pues tiene la enzima para descarboxilar a la Ornitina y formar una amina,
evidenciándose así un color purpura del medio.

L.I.A.: Se observa intensificación del color púrpura en todo el tubo por la

descarboxilación de la lisina, ya que posee la enzima lisina-descarboxilasa (K/K).

TSI: Reacción típica de los bacilos gram-negativos no fermentadores de glucosa ni

lactosa (K/K).
 A B C D

Figura 12. Pruebas Bioquímicas para identificación de Edwarsiella

tarda A) Citrato Simmons Agar, B) MIO, C) LIA y D) TSI.

CITRATO: Se observa un resultado positivo. Ya que el citrato del medio es utilizado, el

nitrógeno también es extraído del fosfato de amonio contenido en el medio, liberando
amonio, lo cual alcaliniza el medio que vira de verde a azul.

MIO: Movilidad negativa. Indol negativo. Ornitina positiva ya tiene la enzima para
descarboxilar a la Ornitina y formar una amina, evidenciándose así un color purpura del
medio.

L.I.A.: Se observa intensificación del color púrpura en todo el tubo por la descarboxilación de
la lisina, ya que posee la enzima lisina-descarboxilasa (K/K).

TSI: Se observa en el medio K/A, no fermentan la lactosa y sí fermentan la glucosa, con

producción de H2S.
CUESTIONARIO

1. ¿Qué enzima desdobla la lactosa y cómo actúa?

La lactasa es una enzima producida en el intestino delgado, que juega un papel vital
en el desdoblamiento de la lactosa en sus dos componentes básicos: glucosa y
galactosa. Si los niveles de lactasa son bajos o ésta no realiza bien su labor,
aparecen dificultades para digerir la lactosa.

El mecanismo de acción de la lactasa de naturaleza transgalactosídica se produce

de la siguiente forma: en primer lugar, se produce la hidrólisis en la molécula de
lactosa en glucosa libre y complejo B-galactosidasa-galactosa. La enzima transfiere
galactosil para un receptor, el cual contiene un grupo hidroxilo. Siendo el agua este
receptor, la hidrólisis de una molécula de lactosa producirá una de glucosa libre y
una de galactosa libre. Siendo otra molécula de lactosa la receptora, se formará un
trisacárido, el cual actuará como otro receptor, formando tetrasacáridos. La
formación de oligosacáridos es más acentuada en mayores concentraciones de
lactosa, y la capacidad de actuación de la lactasa dependerá de la conexión
formada.

La hidrólisis de la lactosa provoca modificaciones en las características físicas y

químicas:

a) Poder edulcorante: la mezcla de glucosa y galactosa es de 2 a 3 veces más

dulce que la lactosa.
b) Digestibilidad: la mayoría de los individuos no consigue digerir la lactosa. En
cambio, la glucosa y la galactosa se digieren más fácilmente, inclusive en
personas intolerantes a este azúcar.
c) Solubilidad: la lactosa presenta una solubilidad del 18% en agua, a 25 °C. En
las mismas condiciones, la glucosa presenta una solubilidad del 50% y la
galactosa, del 25%.
d) Viscosidad: la glucosa y la galactosa presentan una viscosidad baja, lo cual
permite una alta concentración de sólidos sin que se produzca cristalización.
e) Cuerpo, textura y sabor: se modifican debido a la liberación de galactosa, el
sabor suele quedar más acentuado.
f) Reacción de Maillard: la glucosa y la galactosa son más reactivas que la
lactosa a temperaturas elevadas y pH superiores a 5,0, en relación a las
proteínas, de 2,5 a 5,0 más.
2. ¿En qué se diferencia una Escherichia coli enteropatógena de una E. coli
enterohemorrágica?

Escherichia coli enterohemorrágica (EHEC) productoras de verotoxina, son

determinadas cepas de la bacteria intestinal Escherichia coli (E. coli) causantes de
enfermedades. EHEC puede dar lugar a enfermedades diarréicas con sangre
(colitis enterohemorrágica).

Escherichia coli enteropatógena (EPEC) utiliza una variedad de factores de

virulencia para causar el daño mediante un mecanismo complejo. A nivel intestinal
induce una alteración histopatológica conocida como la lesión A/E (adherencia y
esfacelamiento) que se caracteriza por la degeneración de las microvellosidades
del enterocito. La diarrea secretoria causada por EPEC está relacionada con la
salida masiva de iones, lo cual parece ser una consecuencia del desarreglo del
citoesqueleto, la destrucción de las microvellosidades y la secreción de alguna
enterotoxina

REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS


 Bonifaz A., Micología Médica Básica, 3a edición, México, D.F., McGraw-Hill
Interamericana, 2010.
 Broocks G.F., Butel J.S. and Morse S.A., Microbiología Médica de Jawets,
Melnick y Adelberg, 19a edición, México, Editorial El Manual Moderno, 2008.
 Elizalde Castañeda, P., Díaz Aparicio, E., Hernández Andrade, L., & Jaramillo
Arango, C. J. (2001). Identificación y tipificación de biotipos y serotipos de
Yersinia enterocolitica. Revista de Saúde Pública, 35, 380-384.
 Mc Faddin J.F., Pruebas bioquímicas para la identificación de bacterias de
importancia clínica, 3a edición, México, Editorial Médica Panamericana, 2003.
 Sleigh M., Biología de los protozoos, Madrid, H. Blume Ediciones, 1979.
 Prescott G.W., How to know the freshwater algae, Dubuque, Iowa, Wm. C.
Brown, 1978.
 Weng Alemán, Z., Álvarez Molina, I., Rosa, D., Esther, O., y Rodríguez Salazar,
MC (2003). Recobrado de Salmonella sp. conservada por método simple a
temperatura ambiente. Vaccimonitor , 12 (3), 1-10.
 “Año del diálogo y la reconciliación nacional”

UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE CIENCIAS NATURALES Y MATEMÁTICA

ESCUELA PROFESIONAL DE BIOLOGIA

PRÁCTICA Nª 4: IDENTIFICACIÓN DE Vibrio

CURSO: BACTERIOLOGÍA

PROFESORA: Nora Bravo cruz

ALUMNOS:

Calsina Quispecondori, Rocio

Flores Carrasco Kevin
Gonzales Cruz, Conny
Miranda Melo, Noemí
Palacios Guzmán, Claudia
Utia Yataco, Renzo

2018
 INTRODUCCION

Vibrio es un género de bacterias Gram negativas, perteneciente al orden de los

Vibrionales, con forma de bacilos curvados. Bioquímicamente se caracterizan por dar
positivo en las pruebas de la catalasa y de la oxidasa, también dan negativo en la
adenina dihidrolasa, y positivo en la ornitina descarboxilasa. Vibrio cholerae
concretamente es sacarosa, manitol positivo y nitrato reductasa positivo. Bacteria
anaerobia facultativa, y su metabolismo es fermentativo. Poseen flagelación polar, que
les otorga una movilidad máxima. Pese a que nutricionalmente son poco exigentes, se
emplean medios específicos para aislarlos de muestras clínicas. El sodio estimula su
crecimiento y además tolera pH alcalinos, por eso se utiliza para su cultivo agua de
peptona alcalina.

La mayoría de las personas infectadas por V. cholerae no presentan síntomas, aunque

la bacteria esté presente en sus heces durante los 1 a 10 días siguientes a la infección,
con el consiguiente riesgo de infección de otras personas. En el 80% de las personas
que presentan síntomas estos son de leves a moderados; un 20% padece diarrea
acuosa aguda con deshidratación grave. Si no se da tratamiento, esta puede ocasionar
la muerte

El aislamiento se logra partir de vómitos o heces diarreicas, se extrae un alícuota que

es introducido en un medio de transporte. De éste, se puede efectuar la observación en
fresco, al microscopio de contraste de fase, o mediante una tinción de Gram. Existen
kits de anticuerpos para efectuar su determinación e identificación por
inmunofluorescencia.
El cólera representa aún una amenaza mundial y es un indicador fundamental del grado
de desarrollo social. Si bien no supone una amenaza para los países que garantizan
una mínima higiene, la enfermedad sigue siendo un reto para los países que no pueden
asegurar el acceso a agua potable y un saneamiento adecuado. Casi todos los países
en desarrollo tienen que hacer frente a brotes de cólera o a la amenaza de una epidemia
de la enfermedad.

MATERIALES Y MÉTODOS

Cepas

 Vibrio cholerae ogawa

 Vibrio cholerae
 Vibrio furnissii

MATERIALES

Medio OGAWA

El medio básicamente está constituido por un conjunto de sales tales como Citrato de
Magnesio, Sulfato de Magnesio, Glutamato de Sodio, Fosfato disódico, Fosfato
monopotásíco anhidro, además incorpora glicerol, verde de malaquita y homogenizado
de huevo; está mezcla debe tener un pH de 6.4, el medio se dispensa en tubos de 16 x
150 mm y se coagula inclinado a 78°+/-2°C. Ppor 45-60 minutos.

Vibrio furnissii

Es una bacteria halófila móvil , Gram negativa, oxidasa positiva, definida por primera
vez en 1977 y posteriormente aislada de fuentes diarreicas y ambientales Vibrio furnissii
y Vibrio fluvialis son muy parecidos en sus características fenotípicas, sin embargo V.
furnissii se diferencia de V. fluvialis por su producción de gas de la fermentación de
carbohidratos y también por las diferencias de secuencia en los genes toxR y rpoB Es
una de las 11 especies de Vibrio no cólera patógena en humanos Estas especies
emergentes de Vibrio incluyen V. furnissii , una especie marina diseminada y de vida
libre que se asocia con gastroenteritis aguda Vibrio furnissii de la gastroenteritis humana
rara vez se informa y las características clínicas de las infecciones con este organismo
no han sido bien informadas. La enfermedad generalmente ocurre después de la
ingestión de mariscos crudos o poco cocidos contaminados o después del contacto con
ambientes marinos cálidos. Aquí describimos a un paciente que desarrolló
gastroenteritis de V. furnissii y fue tratado exitosamente con antibióticos orales
doxiciclina y ciprofloxacina.

Vibrio furnissii está presente de manera ubicua en entornos acuáticos marino y en los
intestinos de camarones marrones sanos. Las infecciones causadas por estos vibriones
a menudo se asocian con la ingestión de mariscos contaminados / exposición a las
aguas costeras. También se ha asociado con brotes y casos esporádicos de
gastroenteritis humana. También se informó un caso de bacteriemia por V. furnissii con
lesiones asociadas de la extremidad inferior bilateral. En este estudio, encontramos a V
furnissii causando gastroenteritis, que es el primer caso reportado en India, con solo
unos pocos casos reportados en otros países.
  Vibrio cholerae Ogawa

Crecimiento de colonias
amarillas de forma redonda
en el medio TCBS se debe a
que utilizó el citrato, el ph por
del medio. Fermenta
sacarosa.

Pruebas bioquímicas

TSI: A/A Sin gas, no H2S

LIA: K/K

Citrato: Negativo

MIO: Indol (-)

TSA: Colonias blancas

  Vibrio cholerae

Crecimiento de colonias
redondas color verde y
amarillas porque no
fermenta la sacarosa.

Pruebas bioquímicas

TSI: A/A Sin gas, no H2S

LIA: K/K

Citrato: Negativo

MIO: Movilidad

TSA: Colonias blancas

  Vibrio furmissi

Crecimiento de colonias
redondas amarillas y viró
medio a amarillo se debe a la
utilización del citrato y el ph
por el azul de timol y
bromotimol del medio.
Fermenta sacarosa.

Pruebas bioquímicas

TSA: Colonias blancas

LIA: K/A

TSI: A/A, Sin gas, no H2S

Prueba de la oxidasa

Prueba de oxidasa (+) porque en las tres

cepas de Vibrio hay presencia de enzimas
oxidasas. Hay producción de la enzima
oxidasa intracelular, gracias al sistema de
citocromo oxidasa que activa la oxidación
del citocromo reducido por el oxígeno
molecular.

BIBLIOGRAFÍA

1. Hickman-Brenner FW, et al. 1984. Vibrio fluvialis y Vibrio furnissii aislados de

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