Problema 1:

Se investigó el efecto de un inhibidor I sobre la velocidad de una reacción catalizada

enzimáticamente sobre un solo sustrato, obteniéndose los siguientes resultados

Concentración de sustrato Concentración del inhibidor

(mmol L -1) (mmol L -1)
0 0.5 1.0
Velocidad de reacción  (mol L -1 min-1)

0.05 0.33 0.20 0.14

0.10 0.50 0.33 0.25
0.20 0.67 0.50 0.40
0.40 0.80 0.67 0.57
0.50 0.83 0.71 0.63

A) ¿De que manera actúa el inhibidor? B) Obténgase los valores para Vmáx, y Km.

SOLUCIÓN
A) La manera más sencilla de deducir cómo actúa un inhibidor es graficar 1/ en función de
1/[S]0 para cada concentración del inhibidor.

0.5

Vmáx 0

-1/Km

Gráfica de Lineweaver-Burk del efecto de un inhibidor

A partir de la gráfica se puede observar que la pendiente de las curvas se modifica con los
cambios en la concentración del inhibidor pero no la intersección en el eje 1/Vmax). Por
ello los datos anteriores indican que el inhibidor I está actuando como un inhibidor
competitivo.

1
B) De la intersección en el eje 1/ se puede estimar Vmax= 1(mol L -1 min-1) y de la
intersección con el eje 1/[S]0 los valores de Km=0,1 (mmol L -1) sin ihnhibidor, Km=0,2(mmol
L -1) con 0.5(mmol L -1) de inhibidor y Km=0,3 (mmol L -1) con 1(mmol L-1)

Problema 2:
A partir de los siguientes datos de una reacción enzimática, determinar de que manera está
actuando el inhibidor. Determinar la Km y la velocidad máxima.
[S] mM µg producto/h µg producto/h
(sin inhibidor) (6 mM inhibidor)
2 139 88
3 179 121
4 213 149
10 313 257
15 370 313

SOLUCIÓN
Se calculan los inversos de [S] y de v, producto sin inhibidor y producto con inhibidor y se
representa. Sin inhibidor: Vmax = 0,5x103 µg/h y Km = 5 mM. Con inhibidor: Vmax es la
misma y Km=9 mM.

PROBLEMAS PARA RESOLVER

Problema 1:
Calcular qué velocidad se obtendrá en una reacción enzimática si la velocidad máxima es igual a 100 y
la concentración de sustrato es a) 10 Km b) Km/3.
Sol.: a) 91 %; b) 25%

Problema 2:
Una enzima cuya Km es 2,4 · 10 -4 M se ensaya con una concentración de sustrato de 2·10 -7 M. Si la
velocidad media para esta reacción con una concentración de sustrato de 5·10 -2 M fue 0.128
mmoles/min, calcular la velocidad inicial en el caso anterior.
Sol.: 0.107 µmol/min

Problema 3:
Se detectó actividad de una determinada enzima en extractos de hígado y cerebro. Para dilucidar si la
actividad detectada era atribuible a la misma enzima presente en ambos órganos, o a especies distintas
de la enzima propias de cada órgano, se llevaron a cabo estudios cinéticos con distintos sustratos. Uno
de los sustratos, ensayado siempre bajo idénticas condiciones en 1 ml de volumen total incluyendo 0,1
ml de extractos de cada órgano, resultó ser transformado a las siguientes velocidades iniciales:
Concentración de sustrato Velocidad (moles/min)
(moles/ml) Hígado Cerebro
1 0,14 0,085
2 0,23 0,14
5 0,39 0,23
10 0,50 0,30
Den las características de la enzima que puedan ser determinadas a partir de estos datos, y muéstrese
cuáles de ellas son de interés en relación con la cuestión de la identidad de las dos enzimas.
Sol.: los valores de Km son los mismos

Problema 4

2
La cinética de una enzima viene determinada como función de la concentración de sustrato en
presencia y ausencia del inhibidor I.

[S], Mx10-5 0.3 0.5 1.0 3.0 9.0

V(µmol/min) sin inhibidor 10.4 14.5 22.5 33.8 40.5
V(µmol/min) con inhibidor 10-4 M 2.1 2.9 4.5 6.8 8.1
a) Calcular la Km y la Vmax en presencia y ausencia de inhibidor
b) Que tipo de inhibidor es?

Solución: Se calcula siguiendo el mismo procedimiento que el problema 4

a) Vmax = 50 µmol/min
b) Vmax’ = 9.5 µmol/min
c) KM = 1.1x10-5 M
d) Inh. No Competitiva