UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUÍMICA

Prueba de aglutininas
frías.
Departamento Académico de Bioquímica
Análisis Clínico II

2013
 Profesor Responsable:
Q.F. Dr. Juan Manuel Parreño Tipián.
 Alumna:
Fiorella Yahaira Pérez Guerrero
 Código:
08040106
 Año de Estudio:
Quinto
 Semestre Académico:
2013-II
 Laboratorio:
Viernes 10:00- 14:00

UNMSM
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I. INTRODUCCIÓN

Como sabemos las aglutininas son globulinas producidas por las

mismas células que producen los anticuerpos frente a antígenos extraños y que
hacen que los glóbulos rojos se agrupen; su importancia clínica implica realizar
una prueba de sangre con el objetivo de diagnosticar la presencia de
enfermedades infecciosas, ciertos tipos de cáncer, lupus eritematoso sistémico,
signos de anemia hemolítica y alteración que se caracteriza por la insuficiencia
de glóbulos rojos en la sangre debido a su destrucción prematura.
Si bien esta prueba no es muy específica en la determinación de ciertas
enfermedades, suele ser trascendental, ya que dichas células sanguíneas son
responsables de dotar de oxígeno a los tejidos corporales; por ello en el
presente informe estudiaremos la importancia de dicha prueba, así como los
métodos empleados para determinarla y su significancia clínica frente a un
resultado dado.

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II. OBJETIVOS

 Identificar la presencia o ausencia de Crioaglutininas en suero.

 Diagnosticar y determinar las causas de enfermedades idiopáticas por

crioaglutininas como Infecciones, Anemias hemolíticas, Linfoma, Lupus
eritematoso o Cáncer.

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III. MARCO TEÓRICO

A. Crioaglutininas

El análisis de crioaglutininas se realiza con el objetivo de evaluar las

condiciones que hacen que el cuerpo produzca ciertos tipos de anticuerpos
(aglutininas) a nivel del sistema inmunitario en respuesta a una infección.

Estas crioaglutininas fue descrito por primera vez hace más de un siglo, y no
son más que inmunoglobulinas o anticuerpos monoclonales de clase IgM,
que a temperaturas comprendidas entre 0 y 5 ºC, producen la aglutinación
de los hematíes o son capaces de producir hemólisis; el antígeno blanco en
el eritrocito es un oligosacárido del sistema I/i que es un precursor de los
antígenos de los grupos sanguíneos ABH y Lewis. Esto ocasiona también
una lesión celular por lisis directa que será mediada por la activación del
complemento. Dado que las IgM pueden fijar el complemento con facilidad,
los glóbulos rojos del paciente se recubren con el complemento.
Habitualmente, la progresión de la cascada del complemento se detiene en
la formación de C3b, por la presencia de proteínas protectoras en la
superficie de los glóbulos rojos.

Enfermedad crónica de
Aglutinación fría

B. Significancia clínica

Las crioaglutininas se encuentran por lo general a niveles bajos en muchas

personas normales o sanas; sin embargo cobran significado clínico cuando
interfieren en las tipificaciones dando reacciones cruzadas a temperaturas
por debajo de los 4ºC, causando así dolores en las extremidades, trombosis,
aglutinación y hemólisis.

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Su presencia puede seguir a una serie de infecciones o enfermedades

crónicas como un linfoma, anemia hemolítica, Lupus eritematoso sistémico
y cáncer.

Aglutininas frías o crioaglutininas

VALORES NORMALES: sin aglutinación en títulos o por debajo de 1/40

VALORES ELEVADOS: Aglutinación en título mayores de 1/40

C. Enfermedades idiopáticas por crioaglutininas elevadas

El síndrome de crioaglutininas se presenta con una frecuencia de 30-40% y

afecta generalmente a personas mayores de 40 años.

ENFERMEDAD CARACTERÍSTICAS
Anemia hemolítica De mayor frecuencia.
autoinmune
Infección por Afecta a recién nacidos, mujeres en período de
estafilococos lactancia y personas con enfermedades crónicas o
sistema inmunológico debilitado.
Mycoplasma Con frecuencia de 25-35%, está asociado a
pneumoniae síntomas de infecciones respiratorias. Ocasiona
dolor torácico, tos seca, sudoración excesiva,
fiebre, escalofrío y dolor de cabeza y garganta.
Formación de anticuerpos contra antígeno I.
Enfermedades Linfomas, leucemia linfocítica crónica. Frecuencia
linfoproliferativas del 15-20%. Origen generalmente monoclonal y
caracterizado por la destrucción preferencial de
células jóvenes.
Lupus eritematoso
sistémico.

Inducido por drogas Con frecuencia de 1-5% como la penicilina y alfa

metildopa.
Otros Frecuencia 5-1% en Hepatitis C, influenza,
citomegaloviru, sarampión, endocarditis
bacteriana, tularemia, cirrosis y tumores en el
timo.

El estudio de crioaglutininas también hace posible la detección de algunos

tipos de cáncer, como linfoma y mieloma múltiple.

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D. Signos y síntomas

En ciertos casos, los niveles altos de crioaglutininas pueden causar que la

sangre se aglutine en los vasos sanguíneos debajo de la piel cuando la piel
está expuesta al frío. Esto provoca una piel pálida y el entumecimiento de
las manos y los pies.

Es posible que se presenten con ictericia, signos cutáneos fenómeno de

Raynaud, cianosis en extremidades, nariz, orejas y fatiga crónica por la
anemia, generalmente con títulos aglutininas mayores a 1/128.

IV. PROCEDIMIENTO

Método: M. Tromberg
Fundamento: En la aglutinación antígeno - anticuerpo
(oligosacárido del sistema I/i - IgM)
Muestra: 3ml de sangre venosa.
Reactivos:  Citrato de sodio (anticoagulante) 3.8%
 Cloruro de sodio (medio) 0.9%
 Suero salino fisiológico
Materiales y  6 tubos de ensayo
Equipos:  Centrifuga
 Micropipetas

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A. Método Operatorio

Extraer 3 ml de sangre venosa y llevarlo a

0.75ml de citrato de sodio al 3.8%
(anticuagulante).

LLevar a Centrifugar a 2 000 RPM por 5

min, con el objetivo de separar el plasma,
plaquetas y globulos rojos.

Preparar una suspención de hematies al

0.5% ( 0.05ml de GR en 10 ml de SSF).

0.3

[C]

SSF(ml) 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3

PLASMA
0.3
(ml)

0.3 0.3 0.3 0.3 0.3

SUSP. GR
AL 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3 0.3
0.5%(ml)

Dejar en reposo por 24h a 0-5ºC

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V. RESULTADO

El resultado se realiza de acuerdo con la intensidad de la aglutinación que se

registra en base a la tabla de consideraciones.

Nº TUBO DE ENSAYO LECTURA

1 ++
2 ++
3 +++
4 +++
5 +++
6 +++

NOTA: Consideración de lectura:

Consideración Lectura
El disco se puede agitar sin romper. +++++
El disco al agitarlo se rompe en grandes
++++
fragmentos.
El disco al agitarlo se rompe en pequeño
+++
fragmentos.
El disco al agitarlo se rompe en pequeños
fragmentos fácilmente y puede observarse al ++
microscopio.
El disco al agitarlo se rompe en muy pequeños
+
fragmentos solo observables al microscopio.

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VI. DISCUCIÓN

Este examen se realiza con el objetivo de diagnosticar algunas infecciones y

determinar la causa de una anemia hemolítica; sin embargo por ser una prueba
in vitro existen algunos factores que no hacen que la prueba sea muy
específica. Un factor importante en el diagnostico de esta prueba son las bajas
temperaturas (0-5ºC) que se deben de manejar en todo el proceso y la
agitación del disco al observar la aglutinación.
Si bien los resultados obtenidos nos dan un índice de lectura entre (++) y (+++),
esto indicaría que en el paciente se encuentra un nivel de crioaglutinina a titulo
no mayor de 1/64.
Otro punto importante a mencionar es el hecho de diferenciar entre
crioaglutininas y aglutininas calientes que puede ayudar a entender por qué se
está presentando la anemia hemolítica y poder dirigir la terapia.

VII. CONCLUSIÓN

 Se encuentra un nivel de crioaglutinina en suero a titulo no mayor de 1/64.

 No existe índice de presentar enfermedad idiopática por crioaglutinina.

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VIII. CUESTIONARIO
1. ¿Qué son aglutininas en caliente?

Los estudios de aglutininas en caliente o también

conocida como la prueba de Widal se utilizan para
determinar enfermedades infecciosas como:
salmonelosis, richetsiosis, brucelosis. La reacción de
Widal, esta basado en el principio de aglutinación
antígeno-anticuerpo y fue desarrollada por Georges
Fernand Isadore Widal, prestigioso médico francés, en
Junio de 1896, para el diagnóstico serológico de la
fiebre tifoidea.

La reacción de Widal demuestra la presencia de anticuerpos aglutinantes

(aglutininas) contra los antígenos H (flagelar) u O (somático) de la Salmonella
typhi u otras bacterias en el suero de los pacientes con fiebre tifoidea a una
temperatura corporal de 37º C o mayor a ella.

En el laboratorio se realizan diluciones seriadas para identificar hasta que

dilución se presenta la aglutinación.

Aglutininas Febriles: Sin aglutinación de eritrocitos a titulo menor

o igual a 1/80 diluciones.

2. Fundamento de dicha prueba.

Se fundamenta en el principio de
aglutinación antígeno-anticuerpo a una
temperatura corporal de 37ºC o mayor
a esta, en donde predomina la IgG que
presentan una gran afinidad de unirse
al antígeno capsular de ciertos
organismos como la Salmonella.

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3. Interpretación clínica de las aglutininas en caliente.

Los niveles aumentados de aglutininas febriles pueden ser un índice de la

presencia de salmonelosis, fiebre tifoidea, tularemia, enfermedad por rikettsias
o brucelosis.
Un diagnóstico de estas infecciones puede considerarse positivo si los títulos
iníciales se cuadruplican entre una y cuatro semana; sin embargo, el clínico no
puede esperar este tiempo para establecer un tratamiento, por lo cual se debe
considerar la posibilidad de entrar a un tratamiento.

4. Fundamento e interpretación clínica de las crioaglutininas.

FUNDAMENTO
• En la aglutinación antígeno - anticuerpo presente entre los hematies
(antígeno blanco en el eritrocito es un oligosacárido del sistema I/i)
y los anticuerpos producidos por nuetro cuerpo (anticuerpos
monoclonales de clase IgM) a temperaturas comprendidas entre 0 y
5 ºC.

INTERPRETACIÓN CLÍNICA
• Las crioaglutininas se encuentran por lo general a niveles bajos en
muchas personas normales o sanas; sin embargo cobran significado
clínico cuando interfieren en las tipificaciones dando reacciones
cruzadas a temperaturas por debajo de los 4ºC.
• Su presencia puede seguir a una serie de infecciones o
enfermedades crónicas como un linfoma, anemia hemolítica, Lupus
eritematoso sistémico y cáncer.
• VALORES NORMALES: sin aglutinación en títulos o por debajo de
1/40
• VALORES ELEVADOS: Aglutinación en título mayores de 1/40

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IX. BIBLIOGRAFÍA
1. American Association of Blood Bank. Manual Técnico .13.ED. Buenos Aires:
Edigraf; 2001
2. Correa Jiménez, Luz María. Ayudas diagnósticas, análisis e interpretación.
Manizales, Universidad de Caldas, Centro Editorial 2002.
3. Schwartz RS. Autoimmune and intravascular hemolytic anemias. In: Goldman
L, Schafer AI, eds. Cecil Medicine. 24th ed. Philadelphia, Pa:Saunders
Elsevier; 2011:chap 163.
4. LotharT. Clinical Laboratory Diagnostics: Use and assessment of clinical
laboratory results, English edition, 1998.
5. Centro Médico de la Universidad de Maryland. Aglutininas frías y febriles,
Información general. University of Maryland Medical Center (UMMC)
6. Pagana KD, Pagana TJ. Guía de pruebas diagnósticas y de laboratorio. 8ª
Edición. España: Editorial Elsevier / Mosby; 2009.
7. Abraham E. Katime Zúñiga. Artículo de revisión: Reacción de Widal -
interpretación clínica. Rev. Panam Infectol 2006;8(2):40-44
8. Paul N. Lanken. Manual de cuidados intensivos. Editorial Médica
Panamericana. Madrid. 2003.

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