UNIVERSIDAD NACIONAL

DEL CALLAO

FACULTAD: Facultad de Ingeniería Química

CURSO: Microbiología
AÑO Y SEMESTRE: 2018 – II

TITULO:
ANALISIS MICROBIOLOGICO DE AGUA POTABLE

Profesor:

HERRERA SANCHEZ, Sonia

Integrantes:

 ZACARIAS RODRIGUEZ, Leandro Justo

 CASTILLO QUIJADA , Ángela
 VEGA TOSCANO, Roger Fiel
 VARA AYERBE, David

05 de noviembre del 2018

 I. INTRODUCCION
La mayoría de las bacterias en el grupo de coliformes no causan la enfermedad,
pero cuanto mayor sea su número, mayor será la probabilidad de que las
bacterias causantes de enfermedades pueden estar presentes. Puesto que las
bacterias coliformes suelen persistir en el agua como la mayoría de organismos
que causan enfermedades, la ausencia de bacterias coliformes conduce a la
suposición de que el suministro de agua es microbiológicamente segura para
beber. Por lo tanto, la norma de agua potable requiere que no haya bacterias
coliformes presentes en el agua potable. Los coliformes fecales y E. coli también
deben estar totalmente ausentes en el agua potable.

La E.coli es una bacteria que se encuentra comúnmente en el sistema digestivo

de los seres humanos y animales de sangre caliente. Debido a su alta presencia
en el intestino, la E. coli se utiliza como el indicador principal para detectar y
medir la contaminación fecal en la evaluación de la inocuidad del agua y de los
alimentos.
Consideradas comensales inofensivos, las cepas de E. coli constituyen
alrededor
Del 1% de la población microbiana normal del intestino. Si bien la mayoría de las
cepas dentro del intestino son agentes patógenos gastrointestinales beneficiosos
para el ser humano, otros son perjudiciales.
El objetivo de este proyecto fue investigar la presencia de eschericha coli en una
muestra de agua con nutrientes para cultivo, por medio del cultivo microbiológico,
usando el agar Endo

Los resultados permitirán confirmar o no la presencia de una variedad de agentes

bacterianos implicados en contaminación microbiológica.
 II. OBJETIVO
 Analizar los microorganismos (escherichia coli y coliformes) de nuestra
muestra problema (agua potable de casa en ATE) e identificarlo mediante
el Agar Endo.

 Comparar nuestros resultados con a R.M N° 591-2008/MINSA,

interpretarlos y considerarlos si dicha muestra es apta o no para el
consumo humano.
 III. MARCO TEORICO

La E. coli es casi exclusivamente de origen fecal y se transmite a través de la

contaminación fecal de los alimentos y del agua, así como también a través de
la contaminación cruzada o por contacto humano directo durante la preparación
de los alimentos. Mientras tanto, la principal vía de exposición pareciera ser el
consumo de alimentos contaminados, como carne molida cruda o mal cocida,
leche cruda y productos frescos.
A pesar de la gravedad o ausencia de los síntomas de la enfermedad, las
personas y animales infectados pueden liberar entre 106 a 109 unidades
formadoras de colonias (UFC) por gramo de heces y la liberación de la E. coli
también se puede producir a través de portadores asintomáticos.

Fig. 1.- Vía de contaminación con E. coli a través de la interacción entre

animales, humanos, cultivos y medioambiente
3.1.- Qué alimentos podrían contaminarse

Una amplia gama de alimentos pueden ser un vehículo para la E. coli patógena
en conjunto con sus respectivas ecologías. Los alimentos pueden contaminarse
de manera directa o por contaminación cruzada durante el crecimiento y cultivo
(hortalizas), recolección (leche) o faenado (carne). Se puede producir una
contaminación adicional durante la manipulación pos cosecha, transporte,
elaboración y manipulación no higiénica de alimentos durante su preparación.
Los factores que contribuyen a la persistencia de la E. coli en los sistemas
alimentarios incluyen el control inadecuado de los parámetros de procesamiento
(p. ej., temperatura de cocción, valor del pH, actividad del agua y
almacenamiento a altas temperaturas que permiten el crecimiento de estas
bacterias).
Entre los ejemplos de alimentos contaminados se encuentran: carne cruda/mal
elaborada (carne fermentada, carne molida mal cocida, etc.), productos lácteos
no pasteurizados (queso, leche, etc.), jugos de frutas no pasteurizados y
hortalizas crudas (semillas germinadas, lechuga, espinaca, melones, hongos,
etc.).

3.2.- Productos frescos y semillas germinadas

La E. coli liberada por los animales y los seres humanos en sus heces puede
ingresar a los agro ecosistemas a través del estiércol, aguas de riego, semillas
contaminadas, plagas de insectos y animales silvestres, o vectores nematodos.
De esta manera, los productos frescos contaminados han cobrado mayor
importancia como causantes de epidemias de bacterias patógenas humanas,
que incluyen las diferentes variedades de E. coli. Se ha comprobado la
supervivencia y crecimiento de poblaciones de E. coli en plantas y suelos de los
campos de cultivo. Se ha demostrado además que la E. coli puede sobrevivir en
suelos contaminados hasta por 20 meses y, de esa manera, puede permanecer
como contaminante ambiental por un período de tiempo prolongado. Más aún, la
sobrevivencia en las hojas y raíces de los cultivos puede ser mayor que en el
suelo. Las hojas más tiernas tienden a proporcionar un mejor hábitat que las
hojas más maduras y las hojas con mayores niveles de nitrógeno, hojas y frutas
deterioradas, permiten una multiplicación más rápida y un aumento de la
supervivencia de la E. coli.
En los últimos años, ha aumentado significativamente la popularidad de las
semillas germinadas debido a su valor nutricional. Sin embargo, los informes de
brotes de enfermedades transmitidas por los alimentos, asociados con dichos
productos vegetales crudos, han aumentado la preocupación de los organismos
de salud pública y de los consumidores.

3.3.- Alimentos procesados

Los alimentos procesados pueden contaminarse a través de las materias primas,

un tratamiento y manipulación inadecuados del agua, así como también a través
de la contaminación cruzada. Las bacterias pueden continuar creciendo en los
alimentos, a menos que se controlen los parámetros de los procesos pertinentes,
como valor del pH, actividad del agua, temperatura y tiempo. Sólo unas pocas
células bacterianas que sobrevivan en los alimentos pueden ser suficientes para
provocar enfermedades.

3.4.- Control de la E. coli patógena en los alimentos y el agua

Es necesario identificar los puntos de control a lo largo de la cadena alimentaria

para reducir al mínimo los riesgos para la salud pública. Se deben seguir pasos
para la mitigación de los riesgos de acuerdo con los códigos reconocidos de
buenas prácticas y las recomendaciones pertinentes de los servicios veterinarios
y de salud pública. Para las variedades STEC/ EHEC, es necesario analizar la
senda desde la granja al consumidor. En la etapa precosecha, dichos pasos
incluyen reducir al mínimo la colonización en los rebaños de ganado y evitar la
contaminación con estiércol en los cultivos. En la etapa poscosecha, se incluye
la higiene y manipulación en los mataderos y establos de ordeño durante el
embalaje de los productos.
Las E. coli patógenas se comportan de manera similar que las E. coli genéricas
y son capaces de persistir y crecer en muchos alimentos. Crecen de manera
prolífica durante la producción de semillas germinadas, por lo cual reducir al
mínimo la contaminación inicial de dichas semillas y limitar su posterior
crecimiento son importantes medidas de control. Algunas cepas de E. coli
pueden desencadenar respuestas en condiciones difíciles que mejoran su
crecimiento y persistencia, p. ej., la STEC puede tolerar condiciones ácidas en
jugos de frutas y en carnes y lácteos fermentados.

Dado que los puntos principales de control tienden a ser diferentes según la
variedad, es esencial conocer la epidemiología de las enfermedades
transmitidas por los alimentos a nivel local para establecer un programa de
inocuidad alimentaria apropiado y efectivo. Esto exige un enfoque
interdisciplinario orientado a las interacciones que se producen entre los
humanos, animales y plantas dentro de sus ecosistemas.

Fig. 2.- Agentes patógenos entéricos humanos en las plantas de cultivos extensivos
IV. MATERIALES Y EQUIPOS DE LABORATORIO

AGUA POTABLE AGAR ENDO

AGAR EBM BOLSA SIMPLOX

PIPETAS TUBOS DE ENSAYO

INCUBADORA PROPITA
V. PARTE EXPERIMENTAL

 Se desinfecta el lugar de trabajo con lejía la mesa y el uso del mechero

de bunsen.
 Se prepara 1L se solución salina a 0.8%, de la cual se agrega 75 ml a una
probeta de 100ml.
 En un vaso de precipitado de 250 ml, se agrega 100ml agua y añadimos
el Agar Endo o el Agar EMB destapado, colocamos el vaso sobre la
cocina eléctrica el agar y pase al estado líquido hasta llegar a una
temperatura aproximada de 60-75°C.

 Se toma 90ml de la muestra problema (agua con nutrientes para cultivo)

en una probeta.
 En un vaso de precipitado se agrega la muestra (agua potable) y la
solución salina, con ayuda de una bagueta se diluye la solución.

 Se extrae 1 ml de la solución del vaso de precipitado con ayuda de una

pipeta y se agrega a la placa Petri ya teniendo el Agar Endo o el Agar
EMB listos para depositarlos en la placa Petri.
 Se agrega el Agar Endo o el Agar EMB y se cierra la placa Petri,
finalmente cuando este solido nuestro agar con la muestra pasamos a
ponerlo en la incubadora por aprox. 2 dias que es lo recomendable ya que
si se deja más tiempo las bacterias se mueren poco a poco.
LECTURA

 Tomar todas las precauciones necesarias al manipular las placas Petri,

para evitar contaminarlas y modificar el estado inicial de nuestra muestra.
 Llevar la placa al contador de colonias y determinar la cantidad de
Escherichia coli.

 Análisis : Agua de casa

 Lugar : Universidad Nacional del Callao, Laboratorio
de Microbiología, Mesa N° 2
 Fecha de Muestreo : 14/06/2016
 Fecha de Ejecución : 14/06/2016

RESULTADOS OBTENIDOS
Microorganismo Resultado(UFC/g) Lmp.(m) Apto
para
consumo
Escherichia coli 3 ufc 0 ufc/ml NO APTO

Coliformes 13 ufc 0 ufc/ml NO APTO

totales

VI. CONCLUSIONES

 El número de colonias de Escherichia Coli en la muestra fue 3 ufc / ml

y el número de colonias de Coliformes en la muestra fue 13 ufc.
 Comparando los resultados con la norma 591-2008/MINSA se puede
decir que nuestra muestra: agua potable de casa No es apto para el
consumo humano ya que sobrepasa los límites de ESCHERICHIA
COLI y COLIFORMES
VII. RECOMENDACIONES

 Desinfectar apropiadamente el área de trabajo, así como los

instrumentos a usar
 Usar todos los elementos de higiene como cofia, guantes y mascarillas
 La precisión y el cuidado de no contaminar la muestra al momento de
hacer la práctica de laboratorio

VIII. BIBLIOGRAFIA

 http://www.adiveter.com
 Publicación de investigación de la revista Applied and Environmental
Microbiology.
 Prats, G. (Editor). 2001. Guia per a la prevenció i el control de la
infección per Escherichia coli O157:H7 i altres Echerichia coli
verotoxigenes. Barcelona: Direcció General de Salut Pública.
 R.M N° 591-2008/MINSA.
CUESTIONARIO

1. ¿Cuáles son los microorganismos que se encuentran presentes en el

agua para consumo humano?
De los muchos microorganismos infecciosos que se encuentran en el medio
ambiente, en el agua se pueden hallar bacterias (como Shigella, Escherichia coli,
Vibrio y Salmonella), virus (como el virus Norwalk y rotavirus) y protozoos (como
Entamoeba, Giardia y Cryptosporidium). Estos microorganismos pueden
provocar síntomas como náuseas, vómitos, diarrea y calambres estomacales.
En las personas adultas con un buen estado de salud, estas enfermedades
suelen ser leves y duran poco tiempo. En bebés, niños, ancianos y personas con
el sistema inmunológico deprimido, pueden revestir mayor gravedad. Debido a
su resistencia a la desinfección, la Giardia y el Cryptosporidium son, en la
actualidad, las causas más frecuentes de enfermedades transmitidas por el
agua

2. ¿Cuáles son los análisis microbiológicos que se deben realizar de

forma obligatoria para cumplir con las exigencias legales?

Toda agua destinada para el consumo humano, como se indica en el Anexo I,

debe estar exenta de:
1. Bacterias coliformes totales, termotolerantes y Escherichia coli,
2. Virus;
3. Huevos y larvas de helmintos, quistes y ooquistes de protozoarios
patógenos;
4. Organismos de vida libre, como algas, protozoarios, copépedos,
rotíferos y nemátodos en todos sus estadios evolutivos; y
5. Para el caso de Bacterias Heterotróficas menos de 500 UFC/ml a 35°C.
Son parámetros de control obligatorio para todos los proveedores de agua, los
siguientes:
1. Coliformes totales
2. Coliformes termotolerantes
3. Color
4. Turbiedad
5. Residual de desinfectante
6. pH.
 En caso de resultar positiva la prueba de coliformes termotolerantes, el
proveedor debe realizar el análisis de bacterias Escherichia coli, como prueba
confirmativa de la contaminación fecal.
Control por contaminación microbiológica
Si en una muestra tomada en la red de distribución se detecta la presencia de
bacterias totales y/o coliformes termotolerantes, el proveedor investigará
inmediatamente las causas para adoptar las medidas correctivas, a fin de
eliminar todo riesgo sanitario, y garantizar que el agua en ese punto tenga no
menos de 0.5 mgL-1 de cloro residual libre. Complementariamente se debe
recolectar muestras diarias en el punto donde se detectó el problema, hasta que
por lo menos en dos muestras consecutivas no se presenten bacterias coliformes
totales ni termotolerantes.