​ niversidad de Santiago de Chile

U
Facultad Tecnológica
Laboratorio de Bioquímica de los alimentos I
Ingeniería de Alimentos

Laboratorio N°1:
Titulación de aminoácidos

Integrantes:
➢ Rocío Araya Quintanilla
➢ Tamara Castillo
➢ Sara Martinez Andrade
Profesora: Myriam Pizarro Cruz
Fecha de entrega:17/05/2018

Resumen:
Los aminoácidos en esta ocasión se han utilizado para investigar a través de
una curva de titulación con una base fuerte, el hidróxido de sodio (NaOH) para
obtener su curva de calibración (pH vs ml NaOH), pka y pI respectivos. De esta
manera se pudo descubrir un aminoácido problema el cual nos dio que es la
Asparagina (N) con los Pka​1​: 1,9 y Pka​2​: 8,7 y su punto isoeléctrico pI: 5,3 que
a continuación se presentan en este informe los métodos utilizados.

Introducción:
Los aminoácidos son compuestos anfóteros, es decir, pueden comportarse
como ácidos o como bases, ya que contienen un ácido carboxílico(-COOH) y
un grupo amino(-NH2) en su estructura.
En esta experiencia se realizará la titulación de la glicina, un aminoácido
neutro, contiene un radical no ionizable además de ser soluble en agua.
También se titula otro aminoácido que a lo largo de este informe se identificará
a través de su curva de titulación, pka y pH.
Para obtener la curva de titulación se determinarán los valor de pk de cada
uno de los grupos ionizables, así como zonas de tamponamiento.

Dependiendo del pH en donde se encuentren los aminoácidos se pueden

obtener uno de estos tres gráficos:
Figura 1: Gráficos de los aminoácidos con los distintos pH. (Informe titulación de aminoácidos -
Verónica Gónzalez)

Objetivos:
● Caracterizar la titulación de glicina con NaOH, determinado el número de
grupos ionizables, y los valores de pKa1, pKa2 y pI según corresponda
● Caracterizar la titulación de nuestra muestra problema con NaOH,
determinado el número de grupos ionizables, y los valores de pKa1,
pKa2 y pI según corresponda.

Método experimental:

Materiales: Reactivos:

❏ pH-Metro ❏ Aminoácidos (Glicina y muestra

❏ Pipetas problema)
❏ Vasos precipitados ❏ Hidróxido de sodio (NaOH 0,5M)
❏ Bureta ❏ Ácido Clorhídrico (HCl)

Figura 2: Diagrama de flujo del procedimiento realizado en esta experiencia. Elaboración

propia, 2018
Resultados:

Terminada la experiencia se obtuvieron los siguientes resultados:

Glicina

Figura 3: Gráfico de la titulación del aminoácido Glicina. Elaboración propia, 2018

Este gráfico nos muestra la curva de titulación al agregar Hidróxido de sodio

(NaOH) a la glicina donde previamente a este aminoácido se le disminuyó el
pH a 1,66 con 4 gotas de Ácido Clorhídrico (HCl) ya que inicialmente su pH era
de 5,84.

Solución problema
Al realizar la titulación de nuestra muestra problema se obtuvo el siguiente
gráfico:

Figura 4: Gráfico de la titulación de la muestra problema. Elaboración propia, 2018

El gráfico nos muestra la curva de titulación al agregar Hidróxido de sodio

(NaOH) a la muestra problema en donde previamente a este aminoácido se le
disminuyó el pH a 1,1 con 6 gotas de Ácido Clorhídrico (HCl) ya que
inicialmente su pH era de 10,75.
Discusión

Glicina
Como se puede observar el pH del aminoácido fue elevándose, donde al
principio no se observaba un cambio muy notorio al agregarle la base, esto
quiere decir que nos encontrábamos en la zona tamponamiento 1. Luego
cuando el pH fue mayor que el pka del ácido carboxílico (pka=2,34) este pierde
un protón y por ende se produjo el gran salto. En ese salto se encuentra el
punto isoeléctrico del aminoácido (PI= 5,97). Después del gran salto, va
aumentando el pH hasta que este fue superior al otro pka pero ahora de la
amina (pka=9,6), donde este perdió un protón y finalmente el pH llegó a un
equilibrio que esta zona al igual que el salto se le conoce como zona
tamponamiento 2.

Solución problema
Trás realizar la curva de aminoácido problema y posteriormente graficarlo se
tomaron las dos zonas de tamponamiento en el cual el pH se mantiene
constante y se midió los ml que avanzó en cada zona.
Zona de tamponamiento 1: fue del 0 al 1,5 ml, la cual se dividió en dos partes
(0,75) para encontrar el punto medio, al reconocerlo se trazó una línea vertical
hasta punto en donde se junta con la curva, luego se trazó otra línea pero de
forma horizontal de est primer Pka del grupo carboxilo el cual nos dío 1,9,
después se procedió a realizar el mismo procedimiento en la Zona de
tamponamiento 2
Zona de tamponamiento 2: Fue de 1,5 a 3 ml dando el punto medio de 2,25 se
trazaron las línea vertical y luego horizontal, se obtuvo el Pka del grupo amino
el cual fue de 8,7.
Teniendo los datos del PKa del grupo carboxilo y grupo el amino se calculó el
PI que fue de 5,3.
conclusión:

Al realizar el gráfico de la muestra problema se identificó por el tipo de curva

que el aminoácido era de forma neutra como la glicina, además que al realizar
la experiencia se disolvió al instante por lo cual se concluye que es polar,
revisando las tablas de los Pka y los PI de todos los aminoácidos el valor más
cercano fue el del aminoácido Asparagina el cual es neutro y polar con un PKa
del carboxilo de 2,02 y PKa del amino de 8,8 y el pI de 5,41, los valores
obtenidos son los más cercano por lo que se concluyo que es el aminoácido
estudiado, se calculó el error porcentual del dato del PI donde fue de un 2% el
cual es relativamente insignificante y se produjo ya que los resultados se
realizaron con papel milimetrado y a mano.

Bibliografía:

Pizarro, M.Guía de laboratorio Curva de titulación de aminoácidos. En

http://academica2.usach.cl/pluginfile.php/100091/mod_resource/content/1/GUI
A%202%202015%20.pdf
Veronica Gonzalez Núñez, Curva de titulación de aminoácidos - Universidad de
Salamanca. Pág web:
http://diarium.usal.es/vgnunez/files/2012/11/4.-Curvas-de-titulaci%C3%B3n-de-
aminoácidos.pdf
Tabla de todos los datos de los aminoacidos: pág web
http://www.quimitube.com/wp-content/uploads/2014/10/punto-isoelectrico-y-pk-
aminoacidos-neutros-acidos-basicos.png