BIOLOGÍA CELULAR E HISTOLOGÍA

GENERAL

1º MEDICINA, Universidad Miguel

Hernández

curso 2003- 2004

BIOLOGÍA CELULAR Y
MOLECULAR DEL CENTROSOMA

Nº exp.
- Carreres Ortega, Ainoa 1523

- Cigüenza Sancho, Mónica 1428

- Cigüenza Sancho, Sonia 1429

 ÍNDICE

1.- INTRODUCCIÓN

2.- DESARROLLO

2.1.- BIOLOGÍA MOLECULAR

2.1.1.- ESTRUCTURA: Microtúbulos y tripletes

2.1.2.- ESTRUCTURAS ASOCIADAS: Diplosoma y satélites

pericentriolares

2.1.3.- PROTEÍNAS: Estabilizadoras o inestabilizadoras

2.1.4.-PROTEÍNAS DE LA MATRIZ CENTROSOMAL

2.1.5.- PROTEÍNAS MOTORAS: Quinesinas y dineínas

2.1.6.- FÁRMACOS QUE AFECTAN A LOS MICROTÚBULOS

2.2.- BIOLOGÍA CELULAR

2.2.1.- EL CENTROSOMA

2.2.2.- CICLO DEL CENTRIOLO

2.2.3.- FUNCIONES

2.2.4.- MICROTÚBULOS COMO DERIVADOS CENTRIOLARES

2.2.5.- ANORMALIDADES

3.- BIBLIOGRAFÍA
 1.- INTRODUCCIÓN
Todas las células tienen una polaridad. Esto es particularmente evidente en las
células eucariotas, donde un citoesqueleto organizado diferencia las partes de la célula.
Por ejemplo las células epiteliales la posición del centrosoma en relación con el núcleo
define un eje estructural que indica la polaridad funcional de la célula. Los microtúbulos
(MTs), a causa de su polaridad intrínseca, están bien cualificados para tomar parte en la
polaridad celular. Y el centrosoma, la organela que organiza los MTs en haces útiles, es
por lo tanto fundamental para el establecimiento de la polaridad en la célula. En efecto,
esta polaridad funcional es mantenida en parte por la organización de los MTs que se
originan en los centrosomas y por tráfico de vesículas que ocurre a lo largo de estos
microtúbulos.

El término de centrosoma data del siglo XIX, cuando los biólogos celulares
Boveri y van Beneden descubrieron que las células que estudiaban tenían una estructura
en el centro de la que emanaban fibras. No estaba presente en las angiospermas. Esta
estructura se duplicaba antes de la mitosis y formaba los polos del huso mitótico. Como
el centrosoma fue definido por primera vez por su morfología más que por su función,
las organelas que cumplen la misma función en otros organismos, pero que tienen un
aspecto diferente, reciben nombres distintos (en la levadura se habla de corpúsculo polar
del huso). El término centro organizador de microtúbulos se emplea para referirse a
estas organelas.

El centrosoma es el mayor centro organizador de microtúbulos presente en

todas las células animales. A partir de él, los nuevos microtúbulos crecen hacia la
periferia formando una pequeña estructura con forma de estrella conocida como áster.
Se localiza al lado del núcleo, y está formado por dos estructuras cilíndricas, los
centriolos, dispuestos perpendicularmente entre sí y rodeados, tanto en interfase como
en metafase, por un material amorfo, el material pericentriolar o matriz centrosomal,
región del citoplasma que se tiñe oscuro cuando se observa con un microscopio
electrónico.
Aparece como una red de pequeñas fibras cuando se observa en las mejores
micrografías. Es la parte del centrosoma encargada de la nucleación y polimerización de
microtúbulos. La extensión del material pericentriolar, y por lo tanto la del centrosoma,
es difícil de determinar. La cantidad de material pericentriolar cambia durante el ciclo
celular alcanzando un pico en la transición de la metafase a la anafase y el punto más
bajo en la telofase. Muchas de las proteínas del material pericentriolar tienen un lado
tanto citoplasmático como centrosomal y los cambios en las cantidades de material
pericentriolar ocurren seguramente por reclutamiento de material citoplasmático durante
la mitosis. Esta matriz contiene anillos de γ-tubulina, a partir de los cuales se produce el
crecimiento de los MTs.

Se trata de una nucleación polarizada, ya que nos encontramos dos extremos

diferentes, opuestos: el (-) está fijado en el centrosoma, creciendo a partir del anillo de
la γ- tubulina, mientras que el extremo (+) está libre en el citoplasma.
El centrosoma interviene en la formación y regulación del aparato mitótico, y es
responsable del reparto cromosómico equitativo. La división celular tiene lugar gracias
al huso mitótico, de origen centriolar.
Pero no todos los centros organizadores constan de centriolos:
Por ejemplo, los ovocitos de ratón carecen de ellos durante las primeras 5 divisiones
mitóticas del desarrollo embrionario. Las células mitóticas de plantas superiores
tampoco los tienen. En hongos y diatomeas, el centro organizador es una placa llamada
corpúsculo polar del huso, situada en la envoltura nuclear. Los centriolos son
estructuralmente similares a los corpúsculos basales, que se encuentran en la base de los
cilios y flagelos eucarióticos. En algunos organismos (Chlamydomonas, por ejemplo) la
misma estructura actúa como corpúsculo basal en la interfase y centrosoma en la mitosis
Los corpúsculos basales también actúan como centros organizadores, ya que intervienen
en la formación del axonema de los cilios y flagelos. Así, en la regeneración o
formación de cilios, los microtúbulos del axonema crecen a partir de los del corpúsculo
basal. Durante la fertilización, en la mayoría de animales, los corpúsculos basales del
espermatozoide se convierten en el primer centrosoma del huevo.
Sin embargo, todos los centros organizadores poseen una matriz que nuclea la
polimerización de los microtúbulos, formada por γ- tubulina y otras proteínas.

2.- DESARROLLO

2.1.- BIOLOGÍA MOLECULAR:

2.1.1.- ESTRUCTURA: Microtúbulos y tripletes

El centriolo está formado por nueve tripletes de microtúbulos, los cuales se

orientan adoptando una forma en espiral. Tiene forma cilíndrica, de 0'15 a 0'25 µ de
ancho y de 0'3 a 7 µ de longitud. La pared tiene 0'04 o 0'05 µ de espesor, y es densa a
los electrones. La parte proximal es la más cercana al núcleo y la distal va hacia la
periferia.
Las técnicas de tinción negativa afirman la existencia en los túbulos de
microfilamentos paralelos al eje del túbulo. El nº de protofibrillas es fijo para
microtúbulos con el mismo origen, pero cambia de una especie a otra (de 9 a 14).

2.1.1.1.- Microtúbulos:

Su descubrimiento se debe al microscopio electrónico. Son formaciones

alargadas, de 250 Å de diámetro, y constituyen una parte del citoesqueleto. El
microtúbulo es un cilindro hueco, rígido, formado por 13 protofilamentos alineados en
paralelo. Los MTs centriolares son ensamblados a partir de α- y β-tubulina y también
requieren γ-tubulina. La γ-tubulina es cuantitativamente menor que las tubulinas α y β.
Además tiene una localización diferente ya que sólo está presente en los COMTs, sin
embargo, tiene una gran importancia funcional ya que juega un papel central en la
nucleación de los MTs al interaccionar con se extremos (-).
Los MTs centriolares son muy estables, a diferencia de los MTs citoplasmáticos, cuya
principal característica es la inestabilidad dinámica. La estabilidad de los centriolos
deriva de las modificaciones post traduccionales que sufren los microtúbulos
centriolares como la acetilación y la glutamilación de la tubulina.
La centrosfera que representa la extensión de la matriz centrosomal corresponde
a la existencia de varias redes de proteínas diferentes.
 - Las subunidades de tubulina están creando filamentos que son polares:

Los microtúbulos están formados de subunidades de una proteína llamada

tubulina. La subunidad de tubulina es un heterodímero formado de dos proteínas
globulares, α- tubulina y β- tubulina cada una con una masa molecular de unos 50kDa..
Las dos tienen una estructura muy similar: un centro de dos hojas beta rodeado de
hélices alfa. Cada subunidad está formada por 450 aminoácidos y organizada en tres
dominios estructurales separados por un sitio sensible a las proteasas. Las dos
subunidades están unidas por un por un enlace no covalente muy fuerte. La tubulina es
una proteína muy conservada. Cada monómero α ó β tiene un sitio de unión para una
molécula GTP. La GTP unida al monómero de α- tubulina está físicamente atrapada en
el dímero y nunca podrá ser hidrolizada o cambiada, por lo que puede considerarse parte
integral de la estructura del heterodímero (tiene un papel estructural). El nucleótido de
β- tubulina, sin embargo, puede tener tanto GTP como GDP, y es intercambiable. La
hidrólisis de este GTP, situado en la región N-terminal, está asociada a la
polimerización del siguiente heterodímero. El GTP se hidroliza cuando la tubulina se
oligomeriza. Los últimos heterodímeros en polimerizarse, los del extremo (+), contienen
todavía GTP, mientras que este GTP permanezca unido, el MT es estable y no se
despolimeriza. Cuando el GTP es hidrolizado la estructura se desestabiliza y el MT se
despolimeriza. La unión y la hidrólisis de GTP tiene como efecto la heterogeneidad
entre los MTs, puesto que la alteración reversible de la molécula de tubulina conduce a
un ensamblaje y a una estabilidad diferenciales de los MTs.

Modelo molecular de un dímero de α-β-tubulina

A lo largo del eje longitudinal de un microtúbulo, una β- tubulina forma una

interfase con la unidad α del dímero adyacente. Perpendicular a estas interacciones, los
contactos laterales, están formados entre protofilamentos vecinos. En esta dimensión,
los contactos principales son entre monómeros del mismo tipo (α-α y β-β).

Cada protofilamento en un microtúbulo está ensamblado con las subunidades en

la misma dirección, y ellos mismos están alineados en paralelo. Por lo tanto el
microtúbulo tiene una polaridad estructural, con α-tubulinas en un extremo y β-
tubulinas expuestas en el otro extremo.
Los nucleótidos se marcan en rojo la figura siguiente:

- Los dos extremos de un microtúbulo crecen en diferentes proporciones:

La polaridad estructural viene dada por la orientación regular y paralela de todas

sus subunidades. En un filamento polar, la proporción cinética de las constantes de
asociación y disociación son mucho más grandes para un extremo que para el otro. El
más dinámico de los dos extremos de un filamento, donde crecimiento y desensamblaje
son rápidos, se llama extremo (+), y el otro se llama extremo (-). En los microtúbulos,
las subunidades α están expuestas en el extremo (-), y las β en el extremo (+).

La elongación de los filamentos sucede espontáneamente cuando el cambio de

energía libre para la adición de subunidades solubles es menor de 0. Este es el caso
cuando la concentración de subunidades en solución excede la concentración crítica.
Del mismo modo la despolimerización sucede espontáneamente cuando la energía libre
es mayor de 0. Una célula puede acoplar procesos energéticamente desfavorables con
estos procesos espontáneos, así, la energía libre producida en procesos espontáneos
puede ser utilizada para hacer trabajo mecánico. Por ejemplo, la elongación de
microtúbulos puede empujar la membrana, y la rotura de microtúbulos ayuda a la
separación de los cromosomas mitóticos de sus hermanos durante la anafase.
 - Inestabilidad:

Además de su capacidad para formar polímeros no covalentes las subunidades

de tubulina también son enzimas que catalizan la hidrólisis de GTP. Para las
subunidades libres esta hidrólisis ocurre muy despacio, sin embargo, se aceleran cuando
las subunidades se incorporan a los filamentos. Justo después de la incorporación de la
subunidad, el grupo fosfato libre se libera de cada subunidad, pero el nucleósido
difosfato permanece en la estructura del filamento entre dos subunidades vecinas. Así,
pueden existir dos tipos diferentes de estructuras, una con la “forma T” con GTP unido,
y otra con “forma D” con GDP unido.

En células vivas, la mayoría de subunidades libres están en la forma T. Si la

proporción de la adición de subunidades es baja, la hidrólisis del nucleótido puede
ocurrir antes de que la siguiente subunidad sea añadida, y el tipo de filamento será
entonces de la forma D. La rápida interconversión entre un estado de crecimiento y otro
de rotura, con una concentración uniforme de subunidades libres, se denomina
inestabilidad dinámica.

El cambio a una rotura rápida se llama catástrofe, mientras que el cambio hacia
el crecimiento se llama rescate. Para los microtúbulos, la diferencia estructural entre el
extremo con forma T y el extremo en forma D es dramática. Las subunidades con GTP
unidas al monómero β producen protofilamentos derechos que fortalecen los contactos
laterales. Pero la hidrólisis de GTP a GDP se asocia con un cambio conformacional
sutil en la proteína, que curva a los filamentos. En un rápido crecimiento del MT, el
casquete de GTP fuerza la curvatura de los protofilamentos, y los extremos se muestran
derechos. Pero cuando las subunidades terminales hidrolizan sus nucleótidos, esta
constricción desaparece y los protofilamentos se curvan.
- La inestabilidad dinámica requiere energía pero es útil:

A primera vista, este comportamiento dinámico de los filamentos parece un

gasto de energía. Para mantener una concentración constante de MT, la célula debe
hidrolizar grandes cantidades de nucleósidos trifosfato. Las subunidades individuales
son pequeñas y pueden difundir muy rápidamente atravesando el diámetro de una célula
eucariota típica en un segundo o dos. El paso limitante en la formación de un nuevo
filamento es la nucleación, así que estas subunidades difundidas tienden a ensamblarse
en uno de los extremos de filamentos preexistentes o en sitios especiales donde la
nucleación es catalizada por proteínas especiales. En ese caso los nuevos filamentos son
altamente dinámicos, y menos estables.

2.1.1.2.- Tripletes

Cada túbulo se designa con A, el más interno, B, el intermedio y C el más

externo. A y B tienen una pared común y B y C también. Cada uno de estos túbulos
tiene un diámetro de 200 a 260 Å.
A y B comparten 3 o 4 microfilamentos, lo mismo que B y C. A es de sección circular y
B y C son semilunares. Las uniones entre tripletes adyacentes se producen gracias a los
puentes densos de una proteína entre los túbulos A y C.

El centro de la parte distal de un centriolo lo ocupa un cilindro de material opaco

hacia el que se dirigen líneas densas que se insertan en los túbulos A. Esta estructura se
denomina "rueda de carreta".
 2.1.2.- ESTRUCTURAS ASOCIADAS: Diplosomas y satélites pericentriolares:

- DIPLOSOMA: el centriolo se asocia a otro centriolo situado muy cerca de él, en

la vecindad del núcleo o cerca de la superficie de algunas células. Suelen tener una
disposición perpendicular.
- SÁTELITES PERIOCENTRIOLARES: son opacos a los electrones, y pueden
ser de dos tipos:
A) Mazas, 9 esferas de 400 a 700 Å de diámetro, vecinas al centriolo y unidas a los
microtúbulos.
B) Apéndices estriados, 4 brazos densos se extienden radialmente a partir de la
pared de cada centriolo, cuando éstos se separan 0'8 µ. Es donde penetran los
microtúbulos.

2.1.3.- PROTEÍNAS: Estabilizadoras o inestabilizadoras:

 - Las proteínas que se unen a los filamentos pueden estabilizarlos o
desestabilizarlos:
Una vez que el filamento está formado por nucleación y elongado a partir de las
subunidades, su estabilidad y propiedades mecánicas se ven a veces alteradas por un
grupo de proteínas que se unen a los lados del polímero.
Las proteínas que se unen a ambos lados de los MTs se llaman colectivamente
MAPs (proteínas asociadas a microtúbulos). Como la droga Taxol, las MAPs pueden
estabilizar la estructura. También pueden mediar en la interacción con otros
componentes celulares. Este grupo de proteínas se encuentra sobre todo en neuronas.
Estas MAPs tienen al menos un dominio que se une a la superficie del MT y otra que se
proyecta al exterior. La longitud del dominio que se proyecta determina cómo de
compactados están los MTs con las MAPs. Las células en las que predominan las
MAP2, con un dominio que se proyecta largo, forman un ramillete de MTs estables
ampliamente espaciados, mientras que las células con proteínas TAU, con un dominio
mas corto, forman ramilletes de MTs muy compactados.

Cuando cualquier MAP es añadida a una solución de tubulina pura no

polimerizada, acelera enormemente la nucleación, presumiblemente porque estabiliza
los pequeños oligómeros de tubulina que se forman en la polimerización temprana. Las
MAPs son dianas de varias proteínas quinasas, y la fosforilación resultante de una
MAP puede tener un papel primario en el control de la actividad y la localización dentro
de la célula.
Mientras que MAP2 y TAU están confinadas a unos tipos de células en
vertebrados, hay otras MAPs que parecen tener un papel principal en la dinámica de
MTs en casi todas las células eucarióticas.
En particular una proteína llamada XMAP215 se une a los MTs, pero tiene una
capacidad especial para estabilizar los extremos e inhibir su cambio de un estado de
crecimiento a otro de desensamblaje. La fosforilación de esta proteína durante la mitosis
inhibe esta actividad, contribuyendo sustancialmente a incrementar diez veces la
inestabilidad de los MTs durante esta fase.
Una familia de las proteínas quinesinas, conocida como catastrofinas, induce las
catástrofes. Se unen específicamente a los extremos separando los protofilamentos,
bajando la energía normal de activación que previene al MT de curvarse, propio del
estado de desensamblaje.
Opuestamente a esta acción hay MAPs que se unen preferentemente a los
extremos para favorecer el crecimiento del MT.
- Proteínas que regulan la longitud y el comportamiento cinético de los MTs:

Para separar un MT, han de romperse 13 uniones longitudinales, una por cada
protofilamento. La proteína katanina cumple esta función. La katanina se localiza en la
región que rodea la zona que contiene la γ-tubulina pericentriolar. Está formada por
dos subunidades, es un heterodímero compuesto por una subunidad de 60 KDa y otra
subunidad de 80 KD, La subunidad de 60 kDa pertenece a la familia AAA de ATPasas.
Además está subunidad contiene la actividad de desensamblaje de MT dependiente de
ATP y la actividad ATPasa estimulada por MTs a en ausencia de la subunidad de 80
kDa y lleva a cabo la rotura general. La otra más grande, de 80kDa dirige la katanina al
centrosoma. La katanina libera MTs de su adhesión al centrosoma, y tiene un papel
crucial en la rápida despolarización observada en los polos del huso mitótico durante la
mitosis. También se encuentra en células en interfase y postmitóticas, como las
neuronas.

Modelo que muestra cómo puede actuar la katanina durante el flujo de tubulina
hacia el polo en el huso mitótico. La katanina y una proteína similar a una kinesina se
muestran en relación con una hipotética matriz dentro del centrosoma. El
desensamblaje del microtúbulo en el cinetocoro libera un pequeño fragmento de MT y
permite a la kinesina arrastrar el MT hacia la matriz centrosomal. La polimerización
simultánea de tubulina en el extremo del MT en relación con el cinetocoro tiene como
resultado el movimiento de las subunidades marcadas de tubulina hacia el centrosoma.
El MT generado de este modo puede ser desensamblado a dímeros de tubulina por la
acción de la katanina o puede nuclear el crecimiento de un nuevo MT.
Se han aislado otras dos proteínas que también desensamblan microtúbulos, la EF1 alfa
y la p56; pero a diferencia de la katanina no dependen de ATP. Sin embargo como todas
las actividades de desensamblaje de los MT ocurren en presencia de ATP, se cree que la
katanina es de estas tres la proteína predominante. Por otra parte es la única proteína que
se sabe que desensambla los MT estables en subunidades de tubulina que conservan la
capacidad de polimerizarse más tarde.

Un estudio de GONCZY:
“Un estudio reciente ha mostrado que la proteína de enganche ZYG-12 de
"Caenorhabiditis elegans" es esencial para la fijación del centrosoma al núcleo. Los
resultados sugieren un nuevo mecanismo para la estrecha conexión entre estas dos
organelas, y arroja luz nueva a su significación biológica.”

2.1.4.- PROTEÍNAS DE LA MATRIZ CENTROSOMAL

El centrosoma es una organela compleja que contiene alrededor de unas cien proteínas
además del complejo γ-tubulina. Generalmente las proteínas se definen como
centrosomales sobre la base de su localización gracias a técnicas de
inmunofluorescencia. La resolución de estos experimentos es sólo suficiente para
revelar que una proteína está en la región general del centrosoma. Algunas proteínas se
localizan en el centrosoma independientemente de los microtúbulos mientras que otras
requieren MTs. Se considera que sólo las que su localización es microtúbulo
dependiente son verdaderamente componentes del centrosoma. Algunas proteínas están
presentes durante todo el ciclo celular, mientras que otras sólo aparecen en un
determinado momento y luego abandonan el centrosoma o son degradadas. Por otra
parte hay evidencias crecientes de que el centrosoma contiene proteínas que no tienen
nada que ver con la función centrosomal y puede que usen la asociación con el
centrosoma como medio para asegurar la segregación durante la mitosis o como un
medio para incrementar la concentración local de proteína. Además la función e
interacciones de muchas de las proteínas identificadas no se conocen.
 El material pericentriolar permanece pues en gran parte todavía desconocido.
El problema a la hora de identificar proteínas centrosomales es que esta pequeña
organela es difícil de purificar y sólo comprende una pequeña fracción del total de
proteínas celulares. La espectrometría por masa tiene la sensibilidad suficiente para
superar este problema, pero todavía queda el problema de la pureza. Los métodos de
análisis han permitido establecer que muchas proteínas tienen una estructura coil-coiled.
Algunas de las proteínas del material pericentriolar son:

Pericentrina:
Esta proteína de 220 kDa fue identificada en 1983 por técnicas de inmunofluorescencia
que la localizaron en el centrosoma. Más tarde también se encontró en centros
organizadores de microtúbulos no centriolares. A partir de la secuencia de aminoácidos
se predice la estructura tripartita de la pericentrina: un dominio central alfa helicoidal,
flanqueado por un dominio C-terminal y un dominio N- terminal no helicoidales. Esta
estructura es similar a la de los filamentos intermedios, lo que sugiere que la proteína
adopta una estructura coiled-coil que deja los extremos C y N- terminales
interaccionando con proteínas asociadas. Estos dominios contienen secuencias de
reconocimiento de proteínas quinasas. Utilizando diferentes modelos se puede prever
que la proteína se envuelve varias veces alrededor de los centriolos. Una estructura
como esta permite el acoplamiento al centrosoma de múltiples proteínas. La estructura
tridimensional de la pericentrina aparece como un entramado reticular cuya complejidad
y tamaño aumentan a medida que el ciclo celular avanza de la fase G1 a la mitosis. Así,
estructuralmente, la proteína une múltiples proteínas y forma un complejo que sirve
como andamio para la nucleación de los MTs.

Pericentrina y Γ-tubulina:
La γ-tubulina es un componente esencial del centrosoma que une el centrosoma con los
MTs. La γ-tubulina fue localizada formando una estructura en anillo en el material
pericentriolar. Forma un complejo llamado γ-TuRC que puede nuclear MTs in vitro al
unirse al extremo (-) y estabilizarlo. Además, esta proteína forma un complejo con la
pericentrina en el centrosoma e influye en la nucleación de los MTs. La pericentrina es
necesaria para que complejos de γ-tubulina se asocien al centrosoma: la unión correcta
de la pericentrina y γ-TuRC regulan el ordenamiento de la formación de MTs; o bien
otras proteínas que también se unen a la pericentrina ayudan a regular la actividad de
nucleación del complejo γ-TuRC.

AKAP (protein kinase A-anchoring protein: proteína que une la proteína

quinasa A):
La familia de proteínas centrosomales AKAP tienen un papel en el ensamblaje de los
MTs: reclutan la PKA (prot. kinasa A), una holoenzima formada por dos subunidades
reguladoras y dos subunidades catalíticas (R2C2), y cuya actividad está regulada por
AMP cíclico. Se ha demostrado que la PKA afecta la organización de los MTs. En
efecto, mutaciones en la PKA causan localizaciones incorrectas de RNAs, ya que se
perturba el desarrollo de los MTs. La PKA también está relacionada con la dinámica de
los MTs por su interacción con Op18 (oncoproteína 18). Esta última proteína
interacciona preferentemente con subunidades no polimerizadas de MTs, aumentando la
tasa de catástrofe (despolimerización) y regulando de este modo la dinámica de los MTs
como respuesta a señales externas. La PKA fosforila dos sitios de la oncoproteína 18 (la
serina 16 y la serina 63); esta fosforilación inhibe la actividad desestabilizadora de la Op
18.
Las AKAPs permiten el anclaje mutuo de los centriolos, de los MTs y de ciertos
compartimentos de membrana del aparato de Golgi. Por otra parte estas proteínas tienen
como diana un gran número de quinasas y fosfatasas cerca del centrosoma o de los
compartimentos del aparato de Golgi. Se han identificado diferentes dominios de estas
proteínas. Al igual que la pericentrina, las proteínas AKAP tienen dominios coil-coiled,
característicos de las proteínas estructurales. Estas proteínas se localizan en el
centrosoma y se unen a la subunidad reguladora RII de la PKA. Se han identificado
diferentes proteínas pertenecientes a esta familia.

AKAP450. Esta proteína de gran tamaño, codificada por un gen de estructura

compleja, tiene 50 exones. Tiene un dominio de 96 aminoácidos muy conservado
durante la evolución y es compartido por la pericentrina, cuya estructura es por otra
parte muy diferente. Este dominio es el dominio de unión a los centriolos (dominio
PACT). El extremo C-terminal se asocia a los centriolos; esta asociación parece ser la
responsable de la unión de los centriolos en pares. Además es resistente a los fármacos
antimitóticos y al aislamiento del centrosoma. La sobreexpresión de esta zona tiene
como consecuencia la disociación de la matriz centrosomal de los centriolos, aunque los
MTs estén presentes, demostrando la importancia de la asociación de esta proteína a los
centriolos. La parte N-terminal está implicada en la oligomerización de esta proteína,
oligomerización que se cree necesaria para el mantenimiento del material pericentriolar
del aparato de Golgi.

AKAP350: está relacionada con la regulación centrosomal y no centrosomal de

sistemas citoesqueléticos al unir PKA. Durante el ciclo celular se encuentra en el
centrosoma. La localización de las AKAPs y su habilidad para reclutar PKA de
compartimentos subcelulares implica una regulación de la PKA de muchas fases del
ciclo celular.
El centrosoma y proteínas de ensamblaje (la pericentrina y las AKAPs) sirven como andamios
para secuestrar PKA en el centrosoma. A su vez, la PKA afecta a la organización de los MTs al
regular proteínas como la Op18 (Oncoproteína 18), un desestabilizador de MTs.

Las AKAPs están presentes en regiones con gran actividad nucleadora de MTs. La PKA
es reclutada por las AKAPs para influir en la dinámica de los microtúbulos mediante la
regulación de factores desestabilizadores de microtúbulos.
La centrofilina es un componente importante del material pericentriolar durante
la metafase. Interviene en la nucleación del huso de MTs durante la mitosis.
La centrina se localiza dentro de lo propios centriolos y al igual que la γ-
tubulina, en el material pericentriolar. Esta proteína interviene en la duplicación y en la
separación del centrosoma. En las células donde se bloquea la síntesis de centrina los
centriolos son incapaces de duplicarse durante el ciclo celular y los husos tienen un solo
centriolo en cada polo. Las células se pueden dividir pero sin centriolo no se separan por
citocinesis, y en los siguientes ciclos de división son células multinucleadas y mueren.
La proteína CAP350 ha sido identificada recientemente. Se localiza al nivel de
los centriolos y también existe como una red en el material pericentriolar. Está
compuesta por 3117 residuos y contiene un dominio conservado CAP-Gly situado en la
parte C-terminal, que ha sido caracterizado como un domino de unión de los MTs, por
lo que se piensa que CAP350 es una proteína que une los MTs.
Además de las tubulinas α, β y γ también se han identificado otras dos tubulinas
presentes en los centrosomas: son la δ-tubulina y la ε-tubulina, en una localización
distinta a la de γ-tubulina. La δ-tubulina es más visible entre los centriolos mientras que
la ε-tubulin se localiza cerca de la γ-tubulina .El centrosoma único de las células en G1
posee ε-tubulina. El nuevo centrosoma la adquiere más tarde un proceso de maduración.

2.1.5.- PROTEÍNAS MOTORAS: Quinesinas y dineínas:

- Motores Moleculares:
Las proteínas motoras se unen a los filamentos del citoesqueleto polarizados y
usan la energía derivada de hidrólisis repetidas de ATP para moverse por ellos. Docenas
de proteínas motoras diferentes coexisten en todas las células eucariotas, y difieren en el
tipo de filamentos al que se unen, la dirección que llevan a lo largo de ellos, y la carga
que llevan. Muchas proteínas motoras llevan orgánulos membranosos, como
mitocondrias, sacos de Golgi o vesículas secretoras, a sus localizaciones específicas en
la célula. Otras proteínas motoras provocan el acoplamiento de filamentos contra otros,
generando una fuerza como la contracción muscular, el batido ciliar y la división
celular.
Las proteínas motoras que se mueven unidireccionalmente a lo largo de un
polímero orientado son reminiscencias de algunas otras proteínas y complejos proteicos
como DNA y RNA polimerasas, helicasas y rigosomas. Todas ellas tienen la capacidad
de utilizar energía química para propulsarse, y generar movimiento acoplando la
hidrólisis de nucleósidos trifosfato a un cambio conformacional a gran escala de la
proteína.
- Hay dos tipos de proteínas motoras para los MTs: quinesinas y dineínas:

La quinesina es una proteína motora que se mueve a lo largo de los MTs. Su

descubrimiento fue en axón gigante de calamar, donde llevaba los orgánulos
membranosos desde el soma neuronal hasta el terminal axónico yendo hacia el extremo
(+) de los MTs. La quinesina es estructuralmente similar a la miosina II en cuanto que
tiene dos cadenas pesadas y dos cadenas ligeras, dos dominios globulares en los
extremos y una espiral elongada responsable de la dimerización de las cadenas pesadas.
Como la miosina, la quinesina es un miembro de una gran superfamilia de proteínas en
las que el dominio motor es el único elemento común. Los humanos tienen alrededor de
40 quinesinas distintas.
Hay al menos diez familias de proteínas emparentadas con la quinesina, o KRPs, dentro
de la superfamilia. La mayoría de ellas tienen el dominio motor en el término N de la
cadena pesada y van hacia el extremo (+) del MT. Algunas cadenas pesadas de KRP no
tienen una secuencia enrollada y parecen funcionar como monómeros. Algunas otras
son homodímeros y otras son heterodímeros. Muchas proteínas quinesinas tienen
papeles específicos en la formación de los husos mitóticos y meióticos y la separación
cromosómica durante la división celular.

Las dineínas son una familia de proteínas motoras que se dirigen hacia el
extremo (-), pero no están relacionadas con las quinesinas. Están compuestas de dos o
tres cadenas pesadas (que incluye el dominio motor) y un gran número variable de
cadenas ligeras asociadas. La familia de la dineína tiene dos ramas principales. La rama
más antigua contiene las dineínas citoplasmáticas, que son homodímeros de cadena
pesada, con dos grandes dominios motores como cabecera. Probablemente se
encuentren en todas las células eucariotas, y son importantes para el tráfico de vesículas,
la localización del Aparato de Golgi cerca del centro celular...
Las dineínas axonémicas, la otra gran rama, incluye heterodímeros y
heterotrímeros, con dos o tres dominios motores como cabecera, respectivamente. Están
altamente especializadas para el desplazamiento rápido y eficiente de MTs que
conducen el batido de cilios y flagelos.
Una tercera rama, secundaria, comparte gran similitud en su secuencia con las dos
ramas anteriores pero parece estar involucrada en el batido del cilio.

Las dineínas son las más grandes de los motores moleculares conocidos, y
también están entre las más rápidas: las dineínas axonémicas pueden mover MTs en un
tubo de ensayo en la estimable proporción de 14 µm/s. En comparación, las quinesinas
más rápidas pueden mover sus MTs alrededor de 2-3 µm/s.
- Las proteínas motoras generan fuerzas acoplando hidrólisis de ATP a cambios
conformacionales:

Para una movilidad unidireccional, una proteína motora debe usar la energía
derivada de la unión e hidrólisis de ATP para forzar un gran movimiento en parte de la
proteína. Cuando la cabecera de la quinesina se une al MT, antes de chocar, su región de
unión está relativamente desestructurada. Desde la unión de ATP hasta la de la cabeza,
esta región se acorta a los lados de la cabecera, que lanza a la segunda cabeza hacia la
posición donde será capaz de unirse a un nuevo lugar de ligamiento en el
protofilamento, 8 nm del extremo (+) de MT más cerca que el sitio de unión de la
primera cabeza. Los ciclos de hidrólisis del nucleótido están estrechamente coordinados.

Hay que decir que, mientras que la mayoría de miembros de la superfamilia de

las quinesinas se mueven hacia el extremo (+) del MT y tienen sus dominios motores en
el término N, un par de miembros de esta familia tienen sus dominios en el término C y
se mueven hacia el extremo (-). Si los dominios motores de estos dos tipos de
quinesinas son esencialmente iguales, hay que explicar cómo pueden moverse en
direcciones opuestas. La respuesta parece estar en el modo en que las cabeceras están
conectadas. Las imágenes de alta resolución muestran que las cabezas que están ligadas
al MT son prácticamente indistinguibles, pero las cabezas no ligadas están orientadas de
modo muy diferente. Esta diferencia en la inclinación influye en el siguiente sitio de
unión para la segunda cabeza y por lo tanto determina la direccionalidad del
movimiento motor.

- La cinética de la proteína motora está adaptada a las funciones celulares:

Un pequeño número de moléculas de quinesina debe ser capaz de transportar

una mitocondria en todo el camino del axón nervioso, lo que requiere un gran nivel de
procesamiento. Hay dos razones para el alto grado de procesamiento del movimiento de
quinesina.

La primera es que los ciclos mecanoquímicos de las dos cabezas motoras del
dímero están coordinados con los demás, por lo que una cabeza de quinesina no
continúa hasta que la otra está en equilibrio para unirse. Esta coordinación permite a la
proteína motora operar en un ajuste mano a mano, nunca permitiendo al orgánulo
difundirse del sendero del MT.
 La segunda razón es que la quinesina gasta una gran fracción de su ciclo de
ATPasa en una fuerte unión al MT. El cambio conformacional que produce el trabajo
debe ocurrir mientras la proteína motora está muy unida a su polímero.
Dentro de las clases de proteínas motoras, la velocidad del movimiento es muy variable.
Para las quinesinas es alrededor de 0,02 a 2 µm/s.

- Las proteínas motoras median el transporte intracelular de orgánulos membranosos:

La función principal en células en interfase es el transporte y posicionamiento de

orgánulos membranosos. Aunque en la mayoría de las células los orgánulos no
necesitan cubrir largas distancias, su transporte polarizado es muy necesario. Así,
movimientos centrípetos de los orgánulos hacia el centro celular requiere la acción de
proteínas motoras dirigidas hacia el extremo (-), como la dineína citoplasmática,
mientras que los movimientos centrífugos hacia la periferia requieren proteínas motoras
dirigidas hacia el extremo (+), como las quinesinas.

La red de sacos del Retículo Endoplasmático se asocia con MT y se extiende por

la célula, mientras que el Aparato de Golgi está localizada cerca del centrosoma.
Cuando las células se tratan con un fármaco que despolimeriza MT, como colquicina o
nocodazol, el RE se colapsa al centro celular, mientras que el AG se fragmenta y
dispersa por todo el citoplasma.
Del mismo modo, el movimiento hacia fuera de los sacos del RE hacia la
periferia está asociado con un crecimiento de MT en las células vivas. A la inversa, las
dineínas se requieren para situar al AG cerca del centro celular, moviendo las vesículas
a lo largo de los MT hacia los extremos (-) en el centrosoma.
Por ejemplo, la dineína requiere la presencia de un gran número de proteínas
accesorias para asociarse con los orgánulos. La dinactina es un complejo grande que
incluye componentes que se unen a los MT, otros que se unen a la propia dineína y
otros que forman un pequeño filamento similar a la actina, formado por la proteína
ArpI. El filamento del ArpI puede mediar la ligación de este gran complejo a los
orgánulos membranosos a través de una red de espectrina y ankirina.
 2.1.6.- FÁRMACOS QUE AFECTAN A LOS MICROTÚBULOS

A causa de la dependencia de las células eucarióticas de un ensamblaje y

desensamblaje equilibrado de los filamentos citoesqueléticos, éstos son frecuentemente
la diana de toxinas naturales. Estas toxinas son producidas por plantas, hongos o
esponjas para su autodefensa. La toxina se une fuertemente al filamento o a la
subunidad libre que forma el polímero, conduciendo la reacción de ensamblaje en la
dirección en que la toxina puede unirse. La tubulina tiene muchas aplicaciones como
diana de fármacos (como fármacos anticáncer). Los diferentes modos de acción y los
sitios de unión a la tubulina de diferentes fármacos siguen investigándose.

Fármacos antimicrotubulares (que despolimerizan los MTs):

La colquicina y la vinblastina son ejemplos de fármacos que desestabilizan los

MTs interrumpiendo de este modo la mitosis. Sin embargo su efecto es apreciable
incluso cuando las concentraciones de son demasiado pequeñas para causar un
desensamblaje neto de los MTs. Esto puede deberse al importante efecto que tienen
estos fármacos sobre los parámetros de inestabilidad dinámica de los MTs, parámetros
que están íntimamente relacionados con la unión a GTP y su hidrólisis.

La colquicina extraída de semillas de cólquico ( Colchicum autumnale) ,es un

alcaloide que ha tenido un importante papel en la identificación de la tubulina y por lo
tanto en la comprensión de las propiedades y funciones de los MTs: se utilizó como
marcador bioquímico para purificar la tubulina (Weisenberg et al., 1968). La unión de la
cochicina a la tubulina es un proceso lento que se hace en dos etapas : primero se forma
un complejo tubulina-colchicina reversible y con baja afinidad seguido por la formación
de un complejo irrevesible de tubulina-colchicina.cuando la tubulina libre se polimeriza
en presencia de complejos tubulina-colchicina, la adición de nuevas subunidades al
extremo del MT es inhibida, lo que provoca la despolimerización del MT. Se une a la
tubulina libre, cerca del extremo amino terminal de la beta-tubulina, causando la
despolimerización del MT; también actúa sobre el huso mitótico, inhibiendo el
desarrollo normal de la mitosis bloqueándola en la metafase.

Estructura molecular de la colquicina

La vinblastina y la vincristina son dos alcaloides que se obtienen de Catharanthus

roseus (antes clasificada como Vinca rosea, por lo que estos compuestos fueron
llamados vinca-alcaloides). Estos y la vindesina y la vinorelbina, derivados semi
sintéticos de la vinblastina, actúan inhibiendo la mitosis durante la metafase. Estos
alcaloides se unen a la tubulina de un modo rápido y reversible e induce de este modo la
formación de polímeros cuya estructura es diferente a la de los MTs. Así la
polimerización de los MTs es impedida.. Además estos alcaloides también interfieren
con la habilidad de las células para sintetizar DNA y RNA. Aunque estos compuestos
tienen una estructura muy similar y la misma acción de base tienen diferentes efectos en
el organismo.

La vinblastina se une al extremo (+) del microtúbulo. La región implicada en la unión

de estos alcaloides a la tubulina podría corresponder a un dominio de regulación que
controla la polimerización de los MTs, y por consiguiente sería adyacente o taparía el
sitio de unión del GTP en la subunidad beta-tubulina.

Estructura molecular de la vinblastina

La vinblastina se utiliza principalmente para tratar la enfermedad de Hodgkin, linfomas

linfocíticos e histiocíticos, cánceres avanzados de pecho y testiculares. Parece que
también actúa contra el cáncer interfiriendo con el metabolismo del ácido glutámico
(específicamente con las vías que conducen desde el ácido glutámico hasta el ciclo de
Krebs y hasta la formación de urea).

Estructura molecular de la vincristina

Vincristina es usada principalmente para tratar leucemia aguda, neuroblastomas, la

enfermedad de Hodgkin y otros linfomas.
Vindesina se emplea para tratar melanomas y carcinomas y junto con otros fármacos
para tratar cánceres uterinos.
Vinorelbina está todavía en la fase II de ensayos clínicos como tratamiento para el
cáncer de ovario. Por ahora, la vinorelbina parece tener un mayor rango de actividad
anti tumoral que los otros vinca -alcaloides.
 El nocodazol (o metil [5-(2-tienil-carbonil)-1H-benzimidazol-2-yl]-carbamato)
es un fármaco anti-mitótico ya que inhibe la polimerización de unidades libres de
tubulina al unirse al residuo de arginina de la subunidad beta-tubulina. Se utiliza como
fármaco anti-tumor.

Estructura molecular del nocodazol

Fármacos antimicrotubulares que estabilizan los MTs:

Al contrario, el taxol®, extraído del tronco del Taxus brevifolia, estabiliza los
MTs, interrumpiendo también la mitosis. Se demostró utilizando derivados foto-
activables del taxol, que éste se une predominantemente a la región amino terminal de la
beta tubulina. La estequiometría de la unión del taxol es una molécula por dímero de
tubulina. Los dímeros estabilizados por taxol son capaces de ensamblarse con GDP, sin
necesitar el GTP para la hidrólisis como ocurre normalmente. Inhibe el crecimiento de
células cancerígenas, siendo un fármaco de notable éxito en el tratamiento del cáncer
ovárico.

Fármacos como éstos tienen un profundo y rápido efecto en la organización del

citoesqueleto de células vivas. Han sido y son muy útiles para los biólogos celulares en
su intento de demostrar el papel de los microtúbulos en varios procesos celulares.
Algunas de ellas matan eficientemente algunos tipos de tumores celulares.

La acrilamida, elemento muy utilizado en el laboratorio como precursor de

geles de poliacrilamida para la separación de proteínas y ácidos nucleicos, es también
una toxina para el citoesqueleto.

Un estudio: SLUDER Y NORDBERG:

“La amplificación del centrosoma (la presencia de más de dos centrosomas en la
mitosis) es característica de algunos cánceres humanos. Los centrosomas extra pueden
causar la formación de husos multipolares, los cuales distribuyen cromosomas
irregularmente a las células hijas; los desequilibrios genéticos resultantes pueden
contribuir a la transformación celular. Sin embargo, esto formula la pregunta de cómo
una población de células con amplificación del centrosoma puede sobrevivir con
caóticas mitosis sin convertirse pronto en no viables como resultado de la pérdida de
cromosomas. Observaciones recientes indican que una variedad de mecanismos mutan
parcialmente las consecuencias prácticas de la amplificación del cromosoma. Como
consecuencia, las poblaciones de células se propagan con buena eficiencia, a pesar de la
amplificación del cromosoma, todavía tienen un elevado error mitótico, considerado que
puede alimentar la evolución del estado transformado.”

2.2.- BIOLOGÍA CELULAR

2.2.1.- EL CENTROSOMA

Los MT se nuclean por un complejo proteínico que contiene γ-tubulina:

Presente en bastante menos cantidad que α y β tubulinas, esta proteína está involucrada
en la nucleación del crecimiento de MT. Los microtúbulos en las células vivas se
nuclean de un orgánulo intracelular específico, el centro organizador de microtúbulos, o
COMT. Anticuerpos contra la γ-tubulina tiñen el COMT. Los centrosomas sirven de
plantilla a partir de los cuales los MT crecen en número y en una dirección definidos;
determinan pues la correcta geometría, la polaridad y la estructura de los MTs. La
capacidad de polimerización de los centrosomas se debe a la matriz pericentriolar.
Los MT son nucleados en sus extremos (-), con el extremo (+) creciendo hacia el
exterior del centrosoma. El complejo de γ tubulina γ-TuRC es un eficiente nucleador de
MT. Dos proteínas se unen directamente a la γ tubulina junto con otras proteínas que
ayudan a formar el anillo que se ve en los extremos (-) de los MT nucleados a partir del
complejo. Los complejos γ-TuRCs son los centros de polimerización que determinan la
polaridad de los MTs y el número de protofilamentos.
 La γ-Tubulina está presente en un complejo de alto peso molecular. Este
complejo ha sido aislado y se ha demostrado que acelera la polimerización. También se
sabe el complejo adopta una estructura abierta de anillo helicoidal que corresponde al
ancho de los MTs. El complejo γ-TuRC (γ –Tubline Ring Complex) tiene como mínimo
siete polipéptidos dos de los cuales son α y β tubulina. Se estima que hay entre 10 y13
moléculas de γ-tubulina por complejo y de uno a dos α y β tubulinas. En este modelo las
proteínas que no son tubulinas están representados por un andamio helicoidal sobre el
que se disponen 13 γ-tubulinas. Estas 13 moléculas determinan el número y la polaridad
de los protofilamentos. Se cree que las moléculas α y β del γTuRC forman interacciones
estabilizantes con el primer dímero exógeno de α-, β-tubulina, cerrando pues el
complejo.

Modelo de la nucleación por el complejo de γ-Tubulina (γTuRC) (a) estructura del

γ-TuRC. En azul: “andamio” helicoidal; en gris: γ-tubulina; en verde y rojo:
dímeros α -β. (b) Nucleación debida a la disposición helicoidal de las moléculas de γ-
tubulina en la superficie del anillo.

- Los MT emanan del centrosoma en células animales:

En la mayoría de células animales el COMT se llama centrosoma. Se localiza
cerca del núcleo. Desde este punto focal, los MTs citoplasmáticos emanan con una
conformación astral, denominada “áster”. Los MTs se nuclean a partir de los extremos
(-), creciendo los extremos (+) hacia la periferia celular.
El centrosoma está compuesto de una matriz centrosomal que contiene más de
50 copias de γ-TuRC. La mayoría de las proteínas que forman esta matriz todavía
permanecen sin identificar, y no se conoce cómo reclutan y activan este complejo.
Incluidas en el centrosoma hay un par de estructuras cilíndricas dispuestas
perpendicularmente, con una configuración en forma de L. Son los “centriolos”, que se
convertirán en los cuerpos basales de cilios y flagelos en células móviles.
Los centriolos organizan la matriz centrosomal, también llamada material
pericentriolar, asegurando su duplicación durante cada ciclo celular. El centrosoma se
duplica y divide en dos partes iguales durante la interfase, cada uno conteniendo un par
de centriolos. Estos dos centrosomas hijos se mueven a lados opuestos del núcleo
cuando comienza la mitosis, y forman los dos polos del huso mitótico.

En células animales, la configuración astral es muy robusta. El sistema de MTs

radiados del centrosoma actúa como dispositivo para el reconocimiento de regiones
extracelulares y la posición del centrosoma en el centro.
Incluso en un fragmento celular carente de centrosoma, los MTs dinámicos interactúan
con orgánulos membranosos y proteínas motoras para situarse en una formación
estrellada con los extremos (-) incrustados en el centro. Esta capacidad para encontrar el
centro de la célula establece un sistema de coordinación general, utilizado para
posicionar muchos orgánulos dentro de la célula.

2.2.2.- CICLO DEL CENTRIOLO

El centriolo interviene en la formación y regulación del aparato mitótico, y es

responsable del reparto cromosómico equitativo. La división celular tiene lugar gracias
al huso mitótico, de origen centriolar.
Durante la interfase (fases G1 y G2), la matriz del centrosoma nuclea una serie de
microtúbulos citoplasmáticos que se proyectan al exterior en dirección al perímetro
celular, con sus extremos (-) unidos al centrosoma. Antes de que la célula eucariota se
divida, ha de duplicar sus centrosomas para que cada célula hija tenga el suyo. Esto dos
duplicados son necesarios para la división ya que forman los extremos del huso
mitótico.
 Los centrosomas de la mayoría de las especies animales tienen un par de centriolos,
aunque no son necesarios para la nucleación de los microtúbulos. Por eso se cree que el
material pericentriolar es la parte fundamental del centrosoma.
En la interfase de cada ciclo, los centriolos y otros componentes del centrosoma se
duplican, aunque siguen juntos como un único complejo en un lado del núcleo.
En un punto de la fase G1, los 2 centriolos se separan unos cuantos µm. Durante la fase
S, cerca de la base de cada centriolo, empieza a crecer un centriolo hijo en ángulo recto
respecto a él. En la fase G2 se completa el estiramiento del centriolo hijo.

Un estudio: DELATTRE Y GONCZY:

“¿Cómo regulan las células el número de centrosomas? El ciclo de duplicación
canónico genera dos centrosomas a partir de uno en la mayoría de las células
proliferativas. Los centriolos son clave en este proceso, y moléculas como centrinas,
SAS-4 y ZYG-1 dirigen la formación de centriolos hijos. La actividad Cdk2
probablememte empareja la duplicación del centrosoma con la fase S, y un mecanismo
permisivo aparece para limitar la duplicación del centrosoma en una por ciclo celular.
Aún así, tales mecanismos deben ser alterados en algunas células - por ejemplo,
espermatocitos - en las que la duplicación del centrosoma y la replicación del DNA no
están emparejadas. Hay además otras vías alternativas de biogénesis de centrosoma.
Por ejemplo, un centrosoma es reconstituído a partir de dos gametos en la fertilización.
En este caso, la estrategia más común concierne a las contribuciones diferenciales de los
centriolos y el material pericentriolar de cada gameto. Además, los centriolos a veces
pueden formarse de nuevo sin plantilla aparente. Esto ocurre, por ejemplo, en el
embrión temprano de ratón y en las especies partogenéticas y que pueden depender de
una semilla preexistente que resida sin material pericentriolar pero no es visible por
análisis ultraestructurales.”

Fase M: el complejo se divide en dos y cada pareja de centriolos forma parte de un

centro organizador de microtúbulos diferente, que nuclean los ásteres. Los dos ásteres se
desplazarán a polos opuestos de la célula formando los dos extremos del huso mitótico.
Al final de la profase, los microtúbulos polares se alargan mientras los dos centros se
separan hacia lados opuestos alejándose del núcleo. Se forma así rápidamente el huso
mitótico.
La fosforilación que origina la mitosis produce también estructuras microtubulares muy
dinámicas que salen de los centrosomas duplicados de los polos del huso. Unos
microtúbulos de un centrosoma establecen contacto con los del otro, originando los MT
polares. Los cinetocoros cromosómicos pueden capturar otros microtúbulos, que,
cuando los polos del huso mitótico tiran en direcciones opuestas, crean una tension
sobre los centros del cromosoma, produciendo después la separación de las cromátidas
hermanas.
Al finalizar la mitosis, cada célula hija recibe un centrosoma con sus cromosomas
asociados.
En la citoquinesis, la envoltura nuclear engloba los conjuntos de cromosomas de
cada célula, excluyendo a los centrosomas.

2.2.3.- FUNCIONES

Además de ser uno de los centros organizadores de microtúbulos, el centrosoma

interviene en el crecimiento de cilios y flagelos, el mantenimiento de la estructura de la
membrana celular, en la organización de todos los filamentos del citoesqueleto, en la
distribución de los cromosomas durante la mitosis,...
En este último punto señalado cabe destacar que el huso mitótico determina dónde y
cuándo sucede la segmentación de la célula madre para formar las células hijas.

Sin embargo se ha demostrado que los centrosomas no son esenciales para la

formación del huso mitótico en las células de mamíferos (en experimentos donde se han
eliminado por ablación con láser), aunque cuando están presentes tienen una función
dominante en la formación de los MTs. En los mamíferos los centrosomas se necesitan
par la formación de los MTs astrales y para posicionar el huso mitótico, pero parece que
existen mecanismos alternativos. Se ha demostrado que los centrosomas tiene un papel
en los puntos de control de ciclo celular. En ausencia de los centrosomas las células
somáticas se detienen en la fase G1.

No todos los centros organizadores de microtúbulos poseen centriolos. Los

corpúsculos basales también actúan como centros organizadores, ya que intervienen en
la formación del axonema de los cilios y flagelos. Así, en la regeneración o formación
de cilios, los microtúbulos del axonema crecen a partir de los del corpúsculo basal.
A parte de asociar las subunidades proteicas microtubulares para formar el huso
mitótico y axonema, inducen la formación de las raíces ciliares, permitiendo la
agregación de proteínas fibrosas en fibras de estriación transversal.

2.2.4.- LOS MICROTÚBULOS COMO DERIVADOS CENTRIOLARES

Hay tres tipos de microtúbulos en un huso mitótico totalmente formado:

Los polares: se solapan en la línea media del huso, y causan la separación del mismo
debido al empuje que realizan.
Los cinetocóricos: se adhieren al cinetocoro de los cromosomas, que forma el
centrómero de cada cromosoma duplicado, conduciendo a los cromosomas a lo largo
del huso.
Los astrales: salen en dos direcciones desde los centrosomas. Ayudan a generar las
fuerzas que separan los polos y los relacionan con el resto de la célula.

Se representan: ambos cinetocoros del mismo cromosoma y en cada cinetocoro un

único microtúbulo de muchos.
Profase: los microtúbulos que salen del áster conectan con el cinetocoro más próximo
hasta que cada cromosoma queda unido a ambos polos por sus dos cinetocoros.
Prometafase: se acortan los microtúbulos que sobrepasan el ecuador celular y se alargan
los que no lo alcanzan, colocando al cromosoma en la placa ecuatorial en la metafase.
Se produce por una rápida pérdida o adición de tubulinas en el extremo cinetocórico.
Anafase: se rompen los centrómeros y los microtúbulos de cada cinetocoro se acortan
arrastrando el cromosoma hacia su polo.

En todo momento hay una ganancia lenta de tubulinas en los cinetocoros y una pérdida
lenta de tubulinas en los polos del huso, independientemente de la fase mitótica. Los
microtúbulos se unen a los cinetocoros mediante dineína citoplasmática no fija, que
forma un anillo corredizo alrededor de los microtúbulos.
 Los microtúbulos intervienen en:
- Los movimientos de los cromosomas durante la división celular (constituyen el huso
mitótico).
- El transporte de sustancias u orgánulos intracelulares.
- La morfogénesis de la célula.
- El mantenimiento de la forma de la célula.
- Los movimientos celulares, mediante cilios y flagelos.
- La emigración de las vacuolas de endocitosis.
- La liberación de los granos de secreción.
- La polaridad celular.
- El mantenimiento de la estructura de la membrana celular (intervienen en la
organización de todos los filamentos del citoesqueleto).

2.2.5.- ANORMALIDADES/ MUTACIONES

A principios del siglo XX Theodor Boveri propuso que la pérdida de la

polaridad y las aberraciones en la segregación de los cromosomas, características de los
tumores malignos, podían deberse a defectos en la función del centrosoma. Estas
hipótesis han sido confirmadas por estudios recientes que relacionan las mutaciones en
el gen supresor de tumores p53 con la acumulación de defectos genéticos y la mala
regulación de la duplicación del centrosoma durante el ciclo celular.
Estudios llevados a cabo sobre centrosomas en 35 carcinomas de pecho han demostrado
que los centrosomas de adenocarcinomas de pecho muestran alteraciones características
en su estructura, entre las cuales están:
- aumento del volumen del centrosoma
- acumulación de un exceso de material pericentriolar
- centriolos supernumerarios
- fosforilación inapropiada de las proteínas centrosomales

Por otra parte, estas modificaciones estructurales también se acompañan de

modificaciones funcionales: las células tumorales presentan un mayor número de
COMTs que nuclean microtúbulos anormalmente largos. Así pues estas observaciones
son importantes para entender los mecanismos detrás de la inestabilidad genética y de la
pérdida de la polaridad de las células tumorales.

Un estudio: Nakajima T, Moriguchi M, Mitsumoto Y, Sekoguchi S, Nishikawa T,

Takashima H, Watanabe T, Katagishi T, Kimura H, Okanoue T, Kagawa K.

“La aberración del centrosoma acompañada de una mutación de p53 puede inducir
inestabilidad genética en el carcinoma hepatocelular. La duplicación del centrosoma es
controlada de una manera específica en el ciclo de una célula y ocurre una vez en todos
y cada uno de ellos, por ello asegura la segregación equilibrada de los cromosomas
durante la fase mitótica. Las anormalidades numéricas o estructurales pueden originarse
en los centrosomas de células malignas bajo defectuosos ciclos celulares y sistemas de
control; las células cancerígenas con centrosomas anormales pueden sobrevivir y
reentrar en el ciclo celular, promoviendo desequilibrios en la segregación de
cromosomas e inestabilidad genética.
Nosotros investigamos las aberraciones del cromosoma en 33 pacientes diagnosticados
con carcinoma hepatocelular (HCC), usando un marcador fluorescente de pericentrina.
También estudiamos la mutación p53, con actividad proliferativa, y la ploidia de DNA
en estos casos. En los hepatocitos normales, un centrosoma por célula fue identificado
como dotación de una ronda, normalmente en la vecindad de la membrana nuclear. Sin
embargo, en células cancerígenas del tejido HCC, ocurrieron varios modelos de
anormalidades del centrosoma, incluyendo centrosomas supernumerarios y centrosomas
con una forma y un tamaño anormal. Aunque la frecuencia de los centrosomas
anormales fue en cada tejido relativamente baja comparada con previos estudios de
otros cánceres, no obstante, la aberración del centrosoma se encontró en 30 tumores
externos de 33 tejidos HCC. El porcentaje de células tumorales con centrosomas
anormales fue significativamente más alto en los tumores no diploides (15,8 - 15,9 por
mil) que en los tumores diploides (5,1 - 5,4 por mil) (P<0,05), y tendía a ser mayor en
los tumores con la mutación p53 (11,6 - 13,1 por mil) que en aquellos con el p53
silvestre (5,6 - 6,8 por mil). Además, el 82% de los tumores no diploides exhibían la
mutación p53, mientras que sólo el 41% de los tumores diploides mostraban la
mutación p53. El porcentaje de células tumorales con anormalidades en el centrosoma
no estaba relacionado con la representación, tamaño o actividad proliferativa.
Por lo tanto, nuestros resultados indican que las células cancerígenas hepáticas, bajo una
aberración centrosómica y un sistema de control defectuoso probablemente causado por
la mutación p53, tenía el potencial para la inestabilidad genética y un comportamiento
agresivo. Este efecto potencial ocurre sin respecto al tamaño o apariencia del tumor.”

3.- BIBLIOGRAFÍA

Internet:
bio-cl.iespana.es/bio-cl/centro.htm
www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?CMD=search&DB=PubMed
intl.jcb.org/cgi/content/abstract/112/3/427
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http://www.pnas.org/cgi/reprint/95/16/9295.pdf : disassembly…
http://cimbad.mnhn.fr/ :tubuline et agents antimicrotubulaires
http://www.biochem.ucl.ac.uk estructuras molec imag
http://www.rscb.org/ caract tec de proteínas (imag, peso, subunidades…)

Libro de biología de 2º de Bachillerato Ed. Ecir

Manual de Citología de Marc Maillet, Editorial Toray- Masson. 1ª edición 1978
Biología Molecular de la Célula, Ediciones Omega, Alberts- Bray, 3ª edición
1996
Biología Celular. Ricardo Paniagua. 2ª Edición 2003. McGraw- Hill
Interamericana
Molecular Biology of THE CELL, Alberts- Johnson- Lewis. Garland Science

Biología celular y molecular del

centrosoma
Ainhoa Carreres Ortega
Mónica Cigüenza Sancho
Sonia Cigüenza Sancho
UMH, San Juan de Alicante
Mayo 2004