Ciencia Tecnología y Ambiente

TRABAJO: informe (Extracion de acidos nucleicos de

vegetales)

ALUMNO: EDISON DAVID SUPO CRUZ

PROFESOR: Isaac torrez quisocala

COLEGIO: “JUAN BUSTAMANTE”

GRADO: 4°

SECCION: “A”

LAMPA - PUNO - PERU

2015
 Fundamentación teorica
La extracion de ADN

Resumen El ADN es la molécula más importante que todo ser vivo posee y protege. Su importancia
radica en su función, presenta toda la información genética que determina cómo va a ser ese ser
(aunque no nos podemos olvidar que también hay un factor ambiental en el resultado de los
organismo). Es por ello, que la evolución se ha encargado de esconderlo de manera asombrosa en
los seres eucariotas: dentro del núcleo. Es decir, por si fuera poco, además de la membrana
lipídica, el ADN en las células eucariotas se ha escondido dentro de un núcleo protegido por una
doble membrana. A pesar de presentar esta fuerte protección, nuestra labor consistirá en
encontrar un método que sea económico, fácil de llevar a cabo y de poder reproducirse, para que
todos lo podáis realizar desde casa o en el colegio. Palabras clave ADN, extracción, cebolla
Contenido Introducción Los ácidos nucleicos son macromoléculas orgánicas formadas por
carbono, hidrógeno, oxígeno, nitrógeno y fósforo. Dichas macromoléculas se tratan de polímeros
cuyos monómeros son los nucleótidos que están formados por una base nitrogenada, un grupo
fosfato y una pentosa (ver anexo 2). Dentro de los ácidos nucleicos, podemos hablar de dos tipos,
el ADN (el cual es el centro de nuestro estudio) y el ARN molécula localizada tanto en el citoplasma
como en el núcleo de la célula el cual, en esta ocasión, no formará parte de nuestro objetivo:
extraer el ADN nuclear de una célula eucariota a partir de una metodología sencilla con materiales
disponibles al alcance de cualquier científico curioso. Material necesario - Muestra vegetal: cebolla
- Agua destilada - Sal de mesa - Bicarbonato sódico

- Detergente líquido o champú

- Alcohol a 0°C

- Batidora

- Hielos

- Colador

- Vaso

- Tubo de ensayo

- Varilla fina

En caso de que no reconozcas alguno de estos materiales, te puede ayudar ver el anexo
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de este informe.

Procedimiento
1.- Preparar la disolución que nos va a ayudar a separar nuestro ADN, a la cual hemos

llamado: cebollADN, gracias a los siguientes ingredientes, los cuales los mantuvimos en

un baño de hielo triturado:

120 ml de agua, si es posible destilada y si no mineral. No usar agua del grifo.

1.5 g de sal de mesa, preferiblemente pura.

5 g de bicarbonato sódico.

5 ml de detergente líquido o champú.

2-. Elegir la muestra a partir de la cual vamos a obtener nuestro ADN entre los vegetales

que pueda haber en una cocina, nuestro equipo, después de pasar un rato en la cocina de

nuestro colegio, decidió utilizar la cebolla. Con mucho cuidado, cortar en cuadraditos un

trozo (en nuestro caso fue un cuarto de una cebolla mediana) de la misma.

3.- Machacar la muestra con un poco de agua en la batidora. Procurar poner en marcha

las cuchillas cada 10 segundos, más o menos.

4.- Mezclar en un recipiente limpio, como en un vaso de precipitados, 5 ml del triturado

celular con 10 m la solución: cebollADN y agitar vigorosamente durante al menos 2

minutos. A continuación separar los restos vegetales más grandes del “caldo molecular”

colándolo gracias a un colador lo más fino posible.

5.- Retirar 5 ml del “caldo molecular” a un tubo de ensayo y añadir con pipeta 10 ml de

alcohol enfriado a 0ºC. Se tiene que dejar escurrir lentamente el alcohol por la cara interna

del recipiente, teniendo éste inclinado. El alcohol quedará flotando.

6- Se introduce la punta de una varilla estrecha justo debajo de la separación. Remover la

varilla hacia delante y hacia atrás y poco a poco se irán enrollando los fragmentos de

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mayor tamaño de ADN. Transcurrido un minuto retirar la varilla atravesando la capa de

alcohol con lo cual el ADN quedará adherido a su extremo con el aspecto de un copo de

algodón mojado.
Resultados

El resultado final que obtuvimos fue un filamento gelatinoso de color blanco. Es justo

este filamento la macromolécula que queríamos extraer: el ADN de nuestra cebolla.

Realmente, en ese filamento no estaba solamente el ADN, sino también el ARN, así que

podemos decir que realmente lo que habíamos separado eran ácidos nucleicos de
nuestra

muestra.

El motivo de comenzar triturando la muestra con una batidora es poder trocearla para que

se rompa el mayor número de células posibles y que queden más expuestas a la hora de

seguir echando nuestros reactivos mágicos.

La solución que decidimos llamas cebollADN, contiene una serie de sustancias, cada una

con una finalidad diferente:

La sal común (NaCl). La sal nos ayuda a disminuir la solubilidad de las proteínas lo que

facilita la precipitación de las mismas y de esta manera poder separarlas de nuestro

objetivo: el ADN.

El detergente líquido o champú. Se encarga de romper, destruir las membranas

plasmáticas de las células (ver anexo 4) ya que tiene la capacidad de disolver las grasas

que son el componente principal tanto de la membrana plasmática como de la membrana

nuclear. De esta manera, el detergente nos ayuda a que el ADN salga al exterior.

El bicarbonato sódico (NaHCO3). Ayuda al detergente a romper las membranas.

Por último, gracias al contacto de nuestra muestra con el alcohol, lo que conseguimos es

que nuestra enorme y alargada molécula de ADN, que tiende a enrollarse, precipite en el

fondo del tubo y poder así recogerlo.

Discusión

Observamos cómo de manera fácil podemos conseguir aislar la molécula más protegida

por los seres vivos: el ADN.

Por otro lado, también pudimos analizar cómo el resto delas moléculas: proteínas y
grasas

quedan en suspensión separadas del ADN.

Sin embargo, el filamento blanquecino que aislamos, no fue lo suficientemente claro, no

era una hebra clara. Creemos que uno de los posibles errores que cometimos fue el no

haber utilizado un sustituto de una enzima que nos ayudara a eliminar los restos de

posibles proteínas como el zumo de piña. Debido a no disponer de tiempo para poder

repetir la práctica empleando el zumo de piña, no podemos hacer una comparación de

ambos protocolos. Pero sí nos lo anotamos como mejora futura de nuestro trabajo.

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Agradecimientos

Queremos agradecer la paciencia y la ayuda que nuestra profesora de Biología y

Geología

nos ha prestado a lo largo de todo el procedimiento.

Desde la indagación de nuestro propio protocolo, el seguimiento de la práctica y la

proporción de todos los materiales que necesitamos para llevar a cabo nuestro propio

experimento.

Todo un reto para nosotros.

Anexos

Anexo 1: Nombre de todos los integrantes del grupo: Bases Nitrogenadas

Acuña López, Pedro

Alén Barrán, Sagrario

Álvarez Andonegui, Candela

Álvarez Santeiro, Lara

Anguita Suaz, Álvaro

Aren Clement, Andrew Louis

Ares Carril, Antía

Cano Antón, Cristina

Castrelo Martínez, Estrella del Mar

Charlín Nine, Samuel

Cos Gómez, Enrique

Costa Rey, Marta

Crespo Ramirez, Diego

Currás Mallo, Patricia

Díaz Cobian, Marta

Diz Casal, Mateo de Jesús

Fernández Fernández, Uxia

García Hermelo, Manuel

Anexo 2: Estructura de un nucleótido

Un nucleótido está formado por:CD

Una base nitrogenada, la cual presenta una estructura cíclica en donde podemos localizar

nitrógeno y carbono. Pero en función de qué estructura presente, podemos hablar de dos

tipos de bases nitrogenadas: bases pirimidínicas y las purínicas.

La sbases pirimidínicas derivan de la pirimidina, por lo que presentan solamente un anillo

en su estructura. A este grupo pertenece la citosina ( C ), la timina ( T ) y el uracilo ( U ).

Mientras que las bases purínicas derivan de la purina, por eso se aprecian dos anillos en

su estructura, perteneciendo a este grupo: la adenina ( A ) y la guanina ( G ).

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El segundo elemento del que consta un nucleótido es el grupo fosfato.

Y por último un azúcar, una pentosa, la cual puede ser de dos tipos: la ribosa (si
hablamos

del ARN) o la desoxirribosa (si hablamos del ADN).

 Extrayendo ácidos nucleicos de vegetales
Objetivo:

Realizar la extracción de ácidos nucleicos de un tejido vegetal y reflexionar sobre la simpleza

de si composición.

Hipótesis:

Poder observar el ADN de la cebolla.

Materiales:

 Cebolla fresca
 Sal
 Jugo concentrado de papaya
 Vaso
 Cuchillo
 Licuadora
 Detergente para lavar vajilla
 Agua destilada
 Alcohol de 96° frio
 Varilla de cristal o bureta
 Filtro para pasar café

Procedimiento:

1. Corta la zona central de la cebolla en cuadrados.

2. En un vaso con agua, echa tres cucharadas de detergente y una de sal, y añade agua destilada
hasta llenarlo.
3. Licua la mezcla a velocidad máxima durante 30 segundos. Luego, filtra lo licuado con ayuda de
un filtro para pasar café.
4. Llena hasta la mitad el vaso de cristal alto con la solución filtrada, añade tres cucharadas de
jugo de papaya. Luego, añade cuidadosamente un volumen del alcohol frio, equivalente al del
filtrado. El alcohol debe caer por las paredes del vaso.
5. Deja reposar por 2 o 3 minutos hasta que se forme una zona turbia entre las dos fases. A
continuación, introduce la varilla y extrae las fibras blancas.

Resultados:

 Cuando se licuó la cebolla con el detergente se pudo observar que se volvió espeso y se formó
mucha espuma.
 Cuando se filtró la espuma se quedó en el filtro.
 Cuando se le añadió alcohol de 96° frío al filtrado la pequeña espuma que había quedado
desapareció.

Discusión:

 ¿Qué es lo que se forma en la interfase luego de añadir alcohol al vaso de cristal? ¿Qué son
las fibras blancas que se extrajeron?
Desaparece la pequeña espuma que quedaba después de fíltralo. Después de dos minutos
aparecieron fibras blancas las cuales eran el ácido nucleico de la cebolla.
 ¿Para qué se ha utilizado el detergente en esta experiencia? ¿En dónde actúa?
Para ayudar romper la pared celular, la membrana nuclear, y la membrana plasmática.
 ¿Qué sentido tiene usar jugo de papaya durante el experimento si vamos a extraer ácidos
nucleicos de cebolla?
El jugo de papaya ayuda a eliminar las proteínas que pueden contaminar el ADN de la cebolla.
 ¿Para qué hemos utilizado el alcohol en este experimento? ¿Cómo actúa en el proceso de
extracción?
Para que se formen 2 fases en donde los ácidos nucleicos se elevaran ya que son menos densos
que el alcohol.

Conclusiones:

Efectivamente se obtuvo el ADN de la cebolla separado de los demás componentes que

utilizamos, ya que estos ácidos nucleicos precipitaban, pero no se pudieron observar en el
microscopio.
http://www.monografias.com/trabajos95/sobre-el-adn/image002.jpg