U N I V E R S I D A D S A N T I A G O D E C A L I

DIRECCION GENERAL DE INVESTIGACIONES

COMISION CENTRAL DE INVESTIGACIONES – COCEIN
Acta No. 17 del 22 de noviembre de 2016

INFORMACION GENERAL DEL PROYECTO

PROFESORES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTO:

Nombre Identificación Formación Teléfono-Móvil: e-mail: Centro de Grupo de Rol en el

completo Académica Investigación: investigación proyecto:

Alberto Doctor en alberto.boc CICBA QUIBIO Tutor

Bocanegra Díaz Ciencias anegra00@
Químicas
usc.edu.co

ESTUDIANTES QUE PARTICIPAN EN EL PROYECTO:

Nombre: Identificación: e-mail: Teléfono-Móvil: Programa:

Lina Marcela Agudelo Charry 1113675373 marcemario.lmac@gmail.com 3172730134 Química

María Camila Giraldo Erazo 1113533764 cami-23@hotmail.com 3165669694 Química

Lugar de Ejecución del Proyecto: Universidad Santiago de cali

Ciudad: Santiago de Cali Departamento: Valle del cauca
Rol en el proyecto (en meses): 1 mes
Tipo de Investigación: Básica: X Aplicada

1.0 TÍTULO DEL PROYECTO:

CUANTIFICACIÓN Y DETERMINACIÓN DE LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA DE LA

BROMELINA, EXTRAIDA A PARTIR DE LA ANANAS COMOSUS (PIÑA).

2.0 RESUMEN DEL PROYECTO:

El resumen debe tener un máximo de 1000 palabras (espacio sencillo, fuente arial 12) y contener
la información necesaria para darle al lector una idea precisa de la pertinencia y calidad proyecto,
así como de sus objetivos y resultados esperados. Además, este debe contener una síntesis del
problema a investigar, el marco teórico y la metodología a utilizar.

3.0 DESCRIPCIÓN DEL PROYECTO:

3.1 Planteamiento de la pregunta o problema de investigación

La deficiencia de las enzimas proteolíticas son causantes de algunos problemas digestivos y

cognitivos en la población a nivel mundial. Por ende, hoy en día, a la bromelina se le otorgan
grandes beneficios enzimáticos, por lo que es de gran importancia conocer su activa catalítica e
incluirla en la dieta alimenticia diaria, siendo utilizada como un suplemento dietético. (Pastor B &
Ruiz M, 2013).

3.2. Justificación en términos de necesidades y pertinencia:

Las biomoléculas especializadas forman parte de las enzimas que actúan en diversas catálisis de
procesos biológicos indispensables para el buen funcionamiento de un organismo vivo. El hombre,
requiere de una buena actividad enzimática para poder llevar a cabo adecuadamente las
reacciones químicas que se dan dentro de las células. Sin embargo, las dietas alimentarias de
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algunos individuos no suplen de una manera apropiada, produciendo un aumento en la

susceptibilidad y severidad a problemas cognitivo y digestivos ().

La bromelina es una enzima imprescindible que puede proporcionar numerosos beneficios para la
salud. Son muchos los estudios que relacionan su consumo regular con un buen funcionamiento
digestivo y con la prevención de anomalías cognitivas. Por esta razón está siendo objeto de
algunas investigaciones por su gran aporte nutricional y preventivo ().

3.3 Marco teórico y estado del arte:

Deberá responder a las siguientes demandas: síntesis del contexto teórico general en el cual se
ubica el tema de la propuesta; estado actual del conocimiento del problema (nacional y mundial);
brechas que existen y vacíos que se quieren llenar con el proyecto; de qué forma la investigación
propuesta, con fundamento en investigaciones previas, contribuirá, con probabilidades de éxito, a
la solución o comprensión del problema planteado o al desarrollo del sector de aplicación
interesado.

3.4 Objetivos:

Objetivo General:

Cuantificación y determinación de la actividad enzimática de la bromelina, extraída a partir de la

Ananas Comosus (piña).

Objetivos Específicos:

 Extraer la enzima Bromelina a partir de la pulpa y el corazón de la Ananas Comosus (piña)

por medio de un solvente (acetona).

 Cuantificar la enzima extraída de la pulpa y corazón de la Ananas Comosus (piña) por

espectrofotometría de absorción molecular (UV- VIS).

 Determinar la actividad enzimática de la Bromelina extraída de la pulpa y el corazón de la

Ananas Comosus (piña) en la caseína.

 Evaluar en cuál de las dos fracciones (pulpa y corazón) de la Ananas Comosus (piña) se
encuentra mayor concentración de la enzima Bromelina.

3.5 Metodología Propuesta:

3.5.1. Selección y preparación de la muestra

Se realizará la compra de la materia prima (piña) específicamente oro miel en el supermercado

Mercamio en la ciudad Santiago de Cali. Posteriormente se retira la cascara, dejando a disposición
y por serado la pulpa y corazón de la Ananas Comosus; seguidamente, se picará en trozos
pequeños para su respectiva maceración.

3.5.2. Extracción de la enzima Bromelina

Se pesará 2,0000 g de cada una de las fracciones de la piña las cuales se dispondrán por
separado, en morteros de porcelana para su pronta maceración, seguidamente, se le debe
adicionar 5 mL de agua destilada, y una vez llevado a cabo el macerado se decantará a un tubo

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de ensayo y se colocará en un baño de hielo durante 5 minutos. Después se les debe agregar 5
mL de acetona fría ( 0 - 1 oC) dejándose reposar hasta observar un precipitado blanco.

3.5.3. Cuantificación
Cuantificación Se realizó una curva de calibración con disoluciones estándar de albúmina
sérica bovina a diferentes concentraciones mediante el método de Biuret agregando los
contenidos como se indica en el cuadro número 1:

Tubo Volumen de disolución estándar de albúmina sérica bovina (mL)

Concentración de la disolución estándar (mgmL-1)
Volumen de reactivo de Biuret (mL)
Volumen de agua destilada (mL)
B 0 0 3 2 1 0.3 0.3 3 1.7 2 0.4 0.4 3 1.6 3 0.6 0.6 3 1.4 4 0.8 0.8 3 1.2 5 1.2 1.2 3 0.8 6 2 2 3 0

Al mismo tiempo que se elaboraba la curva de calibración, a 10 tubos de ensayo con

extracto se les agregó 3mL del reactivo de Biuret, para después de 20 minutos hacer la
interpolación y obtener la concentración de proteína en el extracto. Determinación de la
actividad enzimática Para la determinación de la actividad enzimática se rotuló 3 tubos de
ensayo y a uno de estos se les adicionó disolución de caseina, a otro extracto y disolución
de caseina y al último se le agregó únicamente extracto, en las cantidades mostradas en el
cuadro número 2: Tubo Volumen de extracto (mL) Volumen de disolución de caseína al 0.5%
(mL) Volumen de disolución buffer de fosfatos de (pH=6.5-6.7)(mL) Volumen de ácido
acético de concentración 1molL-1 (mL) 1 0 4 2 0 2 5 4 2 2 3 5 4 2 2 El ácido acético se
adicionó sobre los tubos 2 y 3 después de 25 minutos, con la finalidad de evaluar la
actividad enzimática del extracto, repitiendo el experimento a 5, 15, 25, 37 y 40oC

3.6 Disposiciones Legales Vigentes

Para los proyectos que lo requieran, el investigador deberá describir las consideraciones éticas y
tener el aval de un comité de ética y bioética legalmente constituido.
Cuando la investigación requiera permisos o autorizaciones de otros entes, deben ser tramitadas
por el grupo de investigadores.

3.7. Referencias bibliográficas:

https://books.google.com.co/books?id=z-
cTAgAAQBAJ&pg=PA90&dq=deficit+de+enzimas+digestivas&hl=es&sa=X&ved=0ahUKEwiWlpqrq
enVAhUHYyYKHd3bDGcQ6AEIJDAA#v=onepage&q=deficit%20de%20enzimas
%20digestivas&f=false