Cinética de muerte de poblaciones microbianas

Cuando una población microbiana se expone a un agente letal, la cinética de la muerte es casi
siempre exponencial ya que el número de supervivientes disminuye de forma geométrica con
el tiempo, lo que refleja el hecho de que todos los miembros de la población son igualmente
sensibles.

Al representar gráficamente el logaritmo del número de supervivientes frente al tiempo se

obtiene una línea recta cuya pendiente negativa define la tasa de mortalidad. Donde los
microorganismos morirán más rápido cuanto mayor sea el valor absoluto de la pendiente.

Fig1: curva de cinética de muerte de microorganismos al ser expuestos a un agente nocivo durante un tiempo
determinado.

La tasa de mortalidad nos indica solamente qué fracción de la población inicial sobrevive a un
determinado período de tratamiento. Para determinar el número real de sobrevivientes es
necesario conocer además el tamaño inicial de la población. Estos conocimientos son
ampliamente abordados en procedimientos de esterilización.

Criterio de muerte de un microorganismo

El único criterio válido de muerte en el caso de microorganismos es la pérdida de la capacidad

reproductiva. Esto se detecta mediante métodos cuantitativos de siembra en placas, los
supervivientes se detectan porque forman colonias.

Factores que afectan la cinética de muerte

Existe un conjunto de condiciones que afectan la cinética de destrucción. Se debe considerar

que el efecto letal de un agente cambia en relación a las distintas cepas, incluso dentro de una
misma especie bacteriana.

1. Concentración del agente: A mayores concentraciones del agente, menor es el tiempo

de exposición para conseguir el mismo efecto.
 2. Tiempo de exposición: Tiempo mínimo para obtener la curva de cinética de muerte y
la tasa de mortalidad.
3. pH: determina el grado de ionización del agente, siendo en general la forma no
disociada la que atraviesa mejor las paredes del microorganismo.
4. Presencia de materiales extraños: forman cubiertas que impiden el contacto
microorganismo-agente, o se combinan con el agente formando compuestos inertes o
menos activos.
5. Resistencia innata de los microorganismos: La eficacia de cada agente depende
también de las propiedades características de cada microorganismo: tipo de pared, la
presencia de esporas, la fase de desarrollo, etc., modifican la resistencia.
Dentro de las formas vegetativas el género Micobacterium el más resistente, en Gram
(+) se destacan Staphyilococcus y Enterococcus. Dentro de Gram(-) Pseudomona,
Klebsiella, Enterobacter, y Serratia son los más resistentes.
6. Número de población inicial: para determinar la concentración del agente y tiempo al
que se tiene que exponer.

Uso de luz UV para disminuir la población microbiana

La radiación UV es uno de los agentes usados para reducir el número de población inicial,
donde cada dosis de radiación UV al que se somete a una célula tiene una probabilidad de
supervivencia específica. Al incidir la luz UV sobre microorganismos su letalidad la determinan:
número de impactos necesarios para matar una célula y facilidad con la que la luz UV alcanza
el blanco.

Factores que influyen en la pendiente de cinética de muerte por radiación UV

- Intensidad de radiación: Depende del tipo de muestra que se trabaje. Se

determina por la cantidad de micro amperes emitidos por una fuente
monocromática a 2537Å.
- Densidad de suspensión: la curva se verá afectada por la concentración de células
que contenga la muestra, también puede ser identificado por el grado de turbidez.
Una mayor turbidez disminuirá el alcance de la luz UV.
- Naturaleza del líquido de suspensión: Al exponer la muestra a la luz UV pueden
formarse peróxidos que prolongan el efecto más allá del tiempo real de
exposición.
 - Estado fisiológico de las células: afecta la facilidad con la que el ADN puede ser
alcanzado por la luz UV y al número de impactos necesarios para matar una célula.
Tamaño, volumen, edad del cultivo.

Mecanismo de acción de la luz UV

El principal mecanismo del efecto letal de la luz UV sobre las bacterias, se atribuye a su
absorción por el ADN y el resultante daño de este. Así provocan la formación de uniones
covalentes entre los residuos de pirimidina adyacentes pertenecientes a la misma cadena, lo
que provoca la formación de dímeros de pirimidina de tipo ciclobutano.

Esto produce distorsiones en la forma del DNA e interfiere en el apareamiento normal de las
bases. El resultado final es la inhibición de la síntesis de ADN y secundario a esto, inhibición del
crecimiento y la respiración.

Fotorreactivación

El ADN cuenta con mecanismos de reparación ante daños a su estructura para evitar la lisis de
la célula, entre ellos se encuentra la fotorreactivación, proceso de reparación directa. En esta
los dos dímeros de pirimidina unidos covalentemente, producto del daño con luz UV, son
monomerizados y restaurados al ser expuestos a luz visible.

Las enzimas responsables de la reparación son las ADN fotoliasas que utiliza luz para catalizar
la reacción. La enzima fotoliasa después de ser irradiada por un fotón con una longitud de
onda de entre 300-500 nm, dona un electrón al dímero de bases pirimidínicas, que inicia una
reorganización atómica. Esta reorganización atómica corresponde a la escisión de los enlaces
covalentes del anillo de ciclobutano del dímero de bases pirimidínicas. Cuando dichos enlaces
de los dímeros se rompen, se restablecen las dos bases pirimidínicas.

Fig2: proceso de reparación de ADN por las enzimas fotoliasas luego de ser expuestos a daños por radiación UV.

Vignoli, R., Esterilizacion y desinfección. Recuperado 03 noviembre 2018, de

http://www.higiene.edu.uy/cefa/Libro2002/Cap%2027.pdf .

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