‫البرنامج التدريبى لطأباء وكيميائى المختبر‬

‫‪Parasitology‬‬

‫) ‪(Semen - Urine - Stool‬‬

‫‪1‬‬
 Routine Stool Analysis
Before analysis:
- Stool sample is better provided in the lab and samples provided at home
should be immediately delivered to the lab (parasites as Giardia and
Entamoeba trophozoites rapidly disintegrate at room temperature).
- Stool samples must be examined within 1 hour after being provided by the
patient.

Steps of analysis:
I – Naked eye Examination to look for:
a- the presence of mucus ( especially when mucus is tinged with blood).
- If mucus is present, it should be put on a slide with a drop of iodine (iodine
concentration is 10% in distilled water) and examined microscopically for the
presence of Entamoeba trophozoites, pus cells and RBCs.
- Presence of pus cells and / or RBCs only together with mucus may be due to
bacillary or amoebic dysentery or both. We should put in mind that Entamoeba
trophozoites are not regularly excreted in every stool sample of the infected person.
- To differentiate between both types, either ask for another sample to look for
Entamoeba trophozoites or measure the pH of stool sample:
- acidic pH: is in favour of Entamoeba infection.
- alkaline pH: is in favour of bacillary infection.
- presence of Charcot Leyden crystals : is in favour of
Entamoeba infection.
- Presence of mucus only in a formed stool sample may be due to constipation
or irritable colon.
b- The presence of blood only may be due to piles or anal fissure.
c- The presence of worms (Enterobius, Ascaris, Taenia segments).
d- The presence of undigested food.
e- Formed, semi-formed and soft stool samples must be concentrated by
sedimentation method
f- Loose or water stool samples are examined by direct smear method.
g- Comment on colour, odour, consistency, presence of fat or pus.

II- Microscopic examination to comment on:

1- Digestion: vegetable cells, starch, muscle fibres, fat.
2- Presence of RBCs, Pus cells, Helminths eggs or larvae, Protozoa, Yeast
cells, Epithelial cells.
3- First we do screening of stool smear using the low power then use the high
power to confirm the details of parasites when detected.

2
 4- When loose stool sample shows no mucus, no eggs, no larvae or protozoan
parasites, we ask for the following tests:
- Recommend: test for Cryptosporidium oocysts in stool. OR
- Recommend: test for Rota virus antigen in stool (in patients aged between 2 – 5
years old).

N.B. Please don't write many bacteria in stool analysis report as there is always
normal bacterial flora passing down in normal stool samples.

Steps of sedimentation method:

- Use a wooden stick to collect approximately one gm of faecal sample
including external and internal portions. Put in a centrifuge tube.
- Emulsify faecal mass in the centrifuge tube by adding 3 – 4 ml of 10%
formal saline then add 3 ml of 10% formal saline, shake well.
- Sieve using a piece of gauze and plastic funnel then add 2 ml of ethyl acetate
and vortex for 1/2 – 1 minute.
- Centrifuge at 3000 RPM for 10 minutes.
- Loosen the debris layer very carefully, invert the tube to discard all
supernatant.
- A drop of the sediment is examined under the microscope after adding 2
drops of iodine.

After analysis:
- Recommend for stool culture if many pus cells are seen with no evidence of
presence of parasite.
- Recommend test for Cryptosporidium and / or Rota virus antigen
examination for watery stool samples showing no parasites.

3
 ‫إختبار ‪Stool analysis‬‬
‫قبل البدء فى عمل التحليل يراعى التى‪:‬‬
‫‪ -‬يفضل إعطاء عينة البراز داخل المعمل فى وعاء نظيف‬
‫‪ -‬العينات التى أتى بها المندوب الى المعمل تفحص فى الحال‬
‫‪ -‬ل يتأخر فحص عينات البراز عن ساعة تحسب من ميعاد إعطاء العينة والسبب‪:‬‬
‫إذا كانت عينة البراز تحتوى على طفيل ال ‪ Entamoeba histolytica trophozoite‬أو طفيل ال‬
‫‪ Giardia lamblia trophozoite‬فكلهاما يتحلل بسرعة فى درجة حرارة الغرفة‪.‬‬
‫شروط العينة‪:‬‬
‫‪ -1‬يفضل العينات تأخذ فى الصباح الباكر‪ :‬لن البراز مجمع طول الليييل وفرصيية ظهييور‬
‫البويضات والطفيليات أكبر‪.‬‬
‫‪ -2‬بالنسسبة للطفال يفضل التبول أول قبل أخذ العينة حتى ل يحدث أختلط‬
‫‪ -3‬عينات الطفال فى الحفاات ترفض اذا كان البراز جاف نتيجة تشرب البامبرز‪.‬‬
‫‪ -4‬ترفض عينة الشخص الذى أجرى أشعة بالصبغة خلل يومين بعد الشعة‪.‬‬
‫‪ -5‬يفضيييل المتنييياع عييين بعيييض الدويييية قبيييل التحلييييل مثيييل‬
‫‪Antibiotics/Antacids/Antidiarrheal/Antiparasite/Laxatives‬‬
‫‪ -6‬عينات خارج المعمل فى علب الكريم والزبادى ترفض ‪.‬‬
‫‪ -7‬يجب اجراء التحليل خلل ساعة حتى ل تموت الطوار الطفيلية ‪.‬‬
‫‪ -8‬يجب عدم ترك العينات فى الهواء حتى ل يحدث جفاف للعينة يؤدى لقتل الطوار النشييطة‬
‫‪ Trophozoite‬واليرقات ‪Larve‬‬
‫‪ -9‬يجب فحص ثللث عينات على ثلث أيام متتالية وذلك لزيادة فرصة رؤية الطفيليات‪.‬‬
‫‪ -10‬يجب رؤية وفحص العينة من أكثر من شخص فى المعمل‪.‬‬
‫‪ -11‬أذا كان بالعينة شىء غير طبيعى كالدم أو الصديد أو المخاط يجب فحصيية أول علييى‬
‫الميكرسكوب قبل البدء فى تحضير العينة‪.‬‬
‫‪ -12‬لتؤخذ عينة البراز من قاعدة الحمام )‪(Toilt Bowl‬‬
‫‪ -13‬لبد من ارتداء قفازات )‪ (gloves‬قبل المساك بعينه البراز حتى تتجنب نقل العدوى أو‬
‫استخدم أداه لنقل العينة فى الوعاء‬
‫‪ -14‬مراعاة عدم اختلط العينة بدم الدورة الشهرية للنساء‬
‫‪-15‬‬
‫‪Types of stool Type of stool Likely reason‬‬
‫‪Watery‬‬

‫‪4‬‬
‫‪Diarrhea‬‬
‫‪Clay colored‬‬
‫‪Obstructive jaundice or presence of barium sulfate‬‬
‫‪Reddish colored‬‬
‫‪Blood from lower gastrointestinal tract, beef consumption‬‬
‫‪Black‬‬
‫‪Bleeding from upper gastrointestinal tract, Iron, charcoal.‬‬
‫‪Green‬‬
‫‪.Ingestion of Spinach, antibiotics‬‬
‫طريقة تخزين عينة البراز‪:‬‬
‫‪ -1‬يتم تحضير العينة بطريقة الترسيب ثم وضعها فى الثلجة عند درجة حرار ‪ 4‬مئوية‪.‬‬
‫‪ -2‬يمكن استعمال فورمالين ‪ %40‬لحفظ عينة البراز أكثر من اسبوع فى الثلجة والفورمالين‬
‫يحافظ على الطوار المتحوصلة ‪.‬‬
‫‪ -3‬استخدام الكحول فى الحفظ يحافظ على الطوار المتحوصلة والنشطة معا‪.‬‬

‫خطوات التحليل وحضير عينة البراز‪:‬‬

‫‪Direct smear‬‬
‫‪Concentration technique‬‬
‫‪(A)-Sedimentation method‬‬
‫‪Saline sedimentation Tech.‬‬
‫‪Formal Ether Concentration Tech.‬‬
‫‪(B)-Floatation method‬‬
‫‪Kato technique‬‬

‫‪Direct Smear Technique.(Wet Mount)-1‬‬

‫ييرة‬‫ييص م‬ ‫ويتم عن طريق اخذ قطعة صغيرة من العينة على نقطة من محلول الملح ثم تفح‬ ‫‪-‬‬
‫بالعدسة ‪ 10‬ومرة بالعدسة ‪40‬‬
‫لو فية صديد او دم او مخاط يفحص أول‬ ‫‪-‬‬
‫يجب فحص عينة من سطح البراز وعينة من داخله‬ ‫‪-‬‬
‫الطريقة هالة وبسيطة لكنها غير دقيقة فى حالت الصابات الضعيفة‬ ‫‪-‬‬
‫يمكن استخدام اليود لصبغ العينة ورؤية الطوار التحوصلة لكن اليود يقتل الطوار النشطة‬ ‫‪-‬‬
‫لذا يجب فحص العينة أول قبل الصبغ باليود‬
‫عيوب الطريقة أنها غير دقيقه و تحتاج ان يكون الصابه بالطفيل شديده اما لو كانت اعداد‬ ‫‪-‬‬
‫الطفيليات فى العينه قليله ففرصه رؤيتها بهده الطريقه ضعيفه جد‬

‫‪5‬‬
 ‫‪Concentration Technique-2‬‬
‫)‪.Sedimentation Method-(a‬‬
‫‪.Saline Sedimentation Method-‬‬
‫الطريقه‬
‫‪ .1‬تؤخذ قطعة من البراز وتوضع في كوب نظيف ثم يضاف محلول الملح الى الكوب‪.‬‬
‫‪ .2‬يقلب البراز في المحلول جيدا‪.‬‬
‫‪ .3‬يصفي البراز فى انبوبه باستخدام قطعه شاش او غطاء الكوب‪.‬‬
‫‪6‬‬
 ‫‪ .4‬تترك النبوبه لمدة ‪ 30 – 20‬دقيقة‪.‬‬
‫‪ .5‬يفحص الراسب بالميكروسكوب‬
‫ملحوظه يمكن استخدام السنترفيوج لتدوير العينه و التسريع من الترسيب لكن التدوير القوى يمكن‬
‫ان يؤدى الى تكسير جدار البويضات و اليرقات‬
‫‪ -‬هده الطريقه مناسبة للطفيليات الثقل وزنا من محلول الملح و بالتالى تترسب فى قاع النبوبه‬
‫‪..Formal Ether Sedimentation Method-‬‬

‫تؤخذ قطعة من البراز وتوضع في كوب نظيف ثم يضاف محلول الملح الى الكوب‪.‬‬ ‫‪.1‬‬
‫يقلب البراز في المحلول جيدا‪.‬‬ ‫‪.2‬‬
‫يصفي البراز فى انبوبه باستخدام قطعه شاش او غطاء الكوب‪.‬‬ ‫‪.3‬‬
‫تدور النبوبه في السنترفيوج لمدة دقيقة واحدة‪.‬‬ ‫‪.4‬‬
‫إذا كان السائل العلوي ما زال متعكر يضاف محلول الملح أكثر من مرة و تدور النبوبه لمدة‬ ‫‪.5‬‬
‫دقيقة أخري حتى يصبح السائل العلوي رائقا‪.‬‬
‫يسكب السائل الرائق ويترك الراسب في النبوبة‪.‬‬‫‪.6‬‬
‫يضاف محلول الفورمالين إلي الراسب بالنبوبة ويمزج جيد ويترك لمدة ‪ 5‬دقائق‪.‬‬ ‫‪.7‬‬
‫يضاف الثير وتغلق النبوبة وترج بشدة لمدة دقيقة ثم تدار في السنترفيوج لمدة دقيقة‪.‬‬‫‪.8‬‬
‫‪-‬الطقة الولى ‪ :‬أيثر‬
‫‪-‬الطبقة الثانية‪:‬فضلت‬
‫الطبقة الثالثة ‪ :‬فورمالين‬
‫‪-‬الطبقة الرابعة ‪ :‬راسب يحتوى على الطفيليات‬
‫‪ .9‬يتم التخلص من الطبقات العلوية الثلثة من النبوبة ويترك الراسب فقط ويمزج هذا الراسب‬
‫جيدا‪.‬‬
‫تفحص نقطه من الراسب تحت الميكرسكوب‪.‬‬ ‫‪-10‬‬
‫تمزج نقطه من الراسب مع اليود و تفحص تحت الميكرسكوب‪.‬‬ ‫‪-11‬‬

‫)*‪(SAF: Sodium acetate-acetic acid-formalin solution‬‬

‫‪7‬‬
8
9
10
11
 ‫‪Adhesive tape method for the detection‬‬
‫‪of pinworm eggs‬‬

‫)‪Floatation Method-(B‬‬

‫الطريقه‬
‫‪ .1‬تؤخذ قطعة من البراز وتوضع في كوب نظيف ثم يضاف محلول الملح الى الكوب‪.‬‬
‫‪ .2‬يقلب البراز في المحلول جيدا‪.‬‬
‫‪ .3‬يصفي البراز فى انبوبه باستخدام قطعه شاش او غطاء الكوب‪.‬‬
‫‪ .4‬اترك اانبوبه لمده ‪ 10‬دقائق‪.‬‬
‫‪ .5‬اكمل النبوبه حتى فوهتها العليا بمحلول الملح‪.‬‬
‫‪ .6‬توضع شريحة فوق فوهة النبوبه‪.‬‬
‫‪ .7‬تترك النبوبه لمدة ‪ 30 – 20‬دقيقة‪.‬‬
‫‪ .8‬ترفع الشريحة باحتراس وتقلب وتوضع تحت الميكروسكوب و تفحص‪.‬‬

‫المميزات‬
‫هده الطريقه مناسبة للطفيليات الخف وزنا من محلول الملح و بالتالى تطفو على سطح السائل فى‬
‫النبوبه مثل‪:‬‬
‫‪Entrobius‬‬
‫‪Ankylestoma‬‬
‫‪Gross examination‬‬
‫‪Color‬‬

‫‪Normal:‬‬
‫‪12‬‬
Brown color is the normal color of stool
Abnormal:
Black color ‫ أسود‬: indicate iron medication (for treatment of anemia) or
upper GIT bleeding (due to peptic ulcer, stomach carcinoma or esophageal
varices).
-‫نزيف الجزء العلوى العلوى مان الماعاء أو نزيف الثانا عشر‬
Bright red color ‫ أحمر‬: indicate lower GIT bleeding (due to piles and anal
fissure).
- ‫نزيف الجزء السفلى مان الماعاء الدقيقة‬
Clay color(gray-white) ‫ مخاطى‬: indicate obstructive jaundice
-‫بسبب الدزنتاريا الميبية وانسداد القناة المرارية‬
Pale color: indicate combination of jaundice and blood (cancer of ampulla
of Vater).
Red brown color: indicate drugs as Tetracyclines, and Rifambicin
antibiotics
Green color: indicate medications as Diathiazine, Mercurous chloride also
vitamins cause green color of stool and in some cases of intestinal
putrefaction.

Note: red stool color may be seen if there are undigested beets or tomatoes.

Note: if stool color is black and there is no history of iron medication FOBT is
recommended.

Odour
Normal:
Normally offensive
Abnormal:
Odorless: usually seen if there is no fecal matter as in bacterial infection.
Very offensive: usually seen in cases of constipation and with certain
types of food that produce excessive gases.
pH ( reaction )
Normal:
Normally variable
Why stool pH is variable? Because stool pH mainly depends on the type
of diet.

Abnormal:
High alkaline stool
Physiological Pathological
High protein diet Poor fat absorption
13
High acidic stool
Pathological
Physiological
Poor absorption of sugars
High carbohydrate diet
as in lactose intolerance

Consistency
Normal:
Normally well formed

Abnormal:
Abnormal consistency may be graded as follow:
hard ‫صلبة‬: seen in cases of constipation
Semi formed: seen in the cases of parasitic infection
Soft ‫لينة‬: seen in the cases of parasitic infection
Watery/ Fluid ‫سائلة‬: mostly seen in cases of bacterial infection and
Diarrhes

1.Fecal consistency may be altered in various disease states

a.Diarrhea mixed with mucous and red blood cells is associated with
Typhoid .1
Cholera .2
Amebiasis .3
Large bowel malignancy .4
b. Diarrhea mixed with mucus and white blood cells is associated with
Ulcerative colitis.1
Regional enteritis.2
Shigellosis.3
Salmonellosis.4
Intestinal tuberculosis.5

Mucus
Normal:
Normally undetectable amount produce by GIT and found in the stool.

Translucent gelatinous mucous clinging to the surface of formed stool occurs in .1

a. Spastic constipation
b. Mucous colitis
c. Emotionally disturbed patients
d. Excessive straining
2. Bloody mucous clinging to the surface suggests
a. Neoplasm
b. Inflammatory process in the rectum
Mucous with pus and blood is associated with .3
a. Ulcerative colitis
b. Bacilliary dysentery
c. Ulcerating cancer of colon

14
d. Acute diverticulitis
e. Intestinal tuberculosis

Appearance pus
Normal:
Normally not found (pus can be found normally in the stool but you
cannot see it by naked eye).

Abnormal:
Usually detected with mucus and appear as white patches in the stool,
it indicate ulcerative colitis or bacterial infection as bacillary dysentery.
Also it can be graded using signs (+, ++, +++).
Presence of detectable pus by naked eye means that the microscopic
pus must be over 100.

‫ ادا كان الصديد او الماخاط غير واضح بالفحص الظاهري او ان تحضير العينه قد تم قبل ان‬: ‫مالحوظه‬
‫تسجل الفحص الظاهري فاعتماد على الفحص المايكروسكوبى لكتابه الصديد او الماخاط فى الفحص‬
‫ اكتب الصديد و الماخاط فى الفحص‬80 ‫الظاهري حيث ادا وجدت صديد تحت المايكرسكوب اعلى مان‬
++ ‫ او‬+ ‫الظاهري‬

Gross blood
Normal:
Normally no blood seen in the stool (you cannot see it by naked eye).

Abnormal:
Abnormal fresh blood seen in cases of lower GIT bleeding caused by:
Bilharzias (schistosoma mansoni infection)
anal fissure
piles

‫ فى الفحص‬RBCs ‫ اذا وجدت دم فى العينة بالفحص الظاهرى فلبد مان كتابه عدد ال‬: ‫مالحوظه‬
.(over 100) 100 ‫المايكروسكوبى اكثار مان‬
Cells

RBCs

Appearance:
‫تظهر كرات الدم الحماراء تحت المايكروسكوب كخليه صغيره الحجم ) اصغر مان خليه الصديد( و تبدو‬
‫بغشاء مازدوج )لكن فى الحقيقه غشائاها ليس مازدوج و انماا يظهر هكدا تنيجه اماتلئاها بالهيماوجلوبين الدى‬
.(‫يعطى هدا النطباع‬

15
 ‫مالحوظه‬
‫وجود دم فى البراز يحدث فى الغالب نتيجة نزيف و يظهر ايضا اثاناء الفحص الظاهرى ماماا يؤكد‬
‫الرؤيه تحت المايكروسكوب‬
‫لون كرات الدم الحماراء تحت المايكروسكوب ليس احمار بل ل لون لها و فى بعض الحيان تظهر‬
‫تحت المايكروسكوب شوائاب حماراء على شكل لطخه او خط طويل و هى ليس دم ابدا بل هى الياف‬
‫مان المالبس او مان الكل خاصة البطيخ و الطمااطم‪.‬‬
‫‪Normal:‬‬
‫‪Normally few amounts of RBCs (0-3) are seen under high power field of‬‬
‫‪microscope.‬‬

‫‪Counting:‬‬
‫‪RBCs are counted under HPF of microscope and the range of count is‬‬
‫‪written for example 10-12 or 30-40 and so on.‬‬

‫‪Interpretation:‬‬
‫‪Abnormal RBCs under microscope is seen in:‬‬
‫)‪Bilharzias (schistosoma mansoni infection‬‬
‫‪anal fissure‬‬
‫‪piles‬‬
‫‪Entameba histolytica infection‬‬

‫‪PUS‬‬

‫‪Appearance:‬‬
‫تظهر كرات الدم البيضاء او الصديد تحت المايكروسكوب كخليه كبيره الحجم و بها نواه ‪.‬‬

‫مالحوظه‬
‫الصديد دائاماا يوجد فى تجماعات‬
‫فى بعض الحيان تكون العينة كلها صديد و دلك فى حالت الصابات البكتيريه و هنا لحظ انه ل‬
‫توجد مااده برازيه فل يماكن الحكم على حاله الهضم‪.‬‬
‫ابحث دائاماا عن المااكن التى تظهر بيضاء بالعين الماجردة على الشريحة لنها غالبا ماا تكون ماخاط‬
‫و عليه تجماع مان الصديد ‪.‬‬
‫‪Normal:‬‬
‫‪Normally few amounts of pus (0-5) are seen under high power field of‬‬
‫‪microscope.‬‬

‫‪Counting:‬‬
‫‪Pus is counted under HPF of microscope and the range of count is written‬‬
‫‪as in the case of RBCs.‬‬

‫‪16‬‬
Note: if pus count is over 100 stool culture is recommended.

Interpretation:
Abnormal pus under microscope is seen in:
Bacterial infection as Shigellosis , Salmonellosis
Inflammation of the intestines, such as Ulcerative colitis

Note: usually pus is absent or few in cases of Viral diarrheas (Rotavirus infection) and
Parasitic infestations.

Epithelial cells

Appearance:
‫الخليا الطلئايه ل يوجد شكل مامايز لها فهى مان الماماكن ان تكون دائاريه او ماخروطيه و غير مانتظماه لكن‬
.‫حجماها الكبير و النواه بداخلها يجعل مان السهل تماييزها تحت المايكرسكوب‬
Normal:
Normally it is few or absent.

Interpretation:
Epithelial cells increased with gastrointestinal tract irritation

Note: absence of epithelial cells in meconium of newborn may aid in diagnosis of

intestinal obstruction in the newborn.

Digestive state
Starch

Appearance:
‫يظهر مان تناول اطعماة ماثال القماح و الرز و وله اشكال قياسية و لكن ل توجد بشكل كبير فى الحقيقة بل‬
.‫تكون على هيئاة شكل عشوائاى و تأخذ اللون البنى المامايز للبراز‬
Normal:
Normally found in the stool and graded as (+) when seen under HPF.

Interpretation:
Increased starch in stool (++ or +++) indicate a case of indigestion.

Fat

Appearance:
17
‫يظهر مان تناول الدهون فى الطعام سواء كانت مان ماصدر نباتى او ماصدر حيوانى و له احجام ماختلفة تشبه‬
. ‫الكرستلت تأخذ اللون الصفر البرتقالى‬
Note: Neutral fat globules can be stained with Sudan stain and counted.

Normal:
Normally found in the stool and graded as (+) when seen under HPF.

Interpretation:
Increased fat in stool may indicate:
Pancreatic insufficiency as in pancreatitis due to reduced pancreatic juice
secretion.
Disorders affect the absorption of fats as sprue (celiac disease) and
infection with Giardia.

Vegetable cells

Appearance:
.‫يظهر مان تناول الطعماة الغنية باللياف ماثال الخس‬
‫لحظ انها تشبه البويضات لدلك تحتاج خبرة للتفريق بينها وبين البويضات و عاماة ادا وجدت الخليا‬
.‫الخضرية توجد بكماية كبيرة اكثار بكثاير مان تواجد اى بويضات فى العينة‬
Normal:
Normally found in the stool and graded as (+) when seen under HPF.

Interpretation:
Increased vegetable cells in stool have no clinical significance and
considered as residual food.

Muscle fibers

Appearance:

‫تظهر مان تناول اللحوم و شكلها مامايز وواضح)ماثال شكل الحصيره( و ل تختلط ماع اى شىء اخر فى البراز‬
.‫ويماكن تقديرها بسهولة‬
‫مالحوظه‬
‫ لنه ل يأكل طعام طبيعى و لدلك‬muscle fibers ‫ اشهر ليحتوى على‬6 ‫براز الطفال الرضع فى اول‬
.‫ اشهر فيأكل الطفل بصورة طبيعية ويكون البراز ماثال الشخص العادى‬6 ‫ اماا بعد‬absent ‫تكتب‬

Normal:
Normally found in the stool and graded as (+) when seen under HPF.

18
‫‪Interpretation:‬‬
‫‪Increased muscle fibers in stool have no clinical significance and‬‬
‫‪considered as residual food.‬‬

‫‪Note: the presence of large amount of undigested meat fibers in the stool may be‬‬
‫‪caused by pancreatitis.‬‬
‫‪Note: Some studies have shown an excellent correlation between excessive fecal‬‬
‫‪muscle fibers and hypo- or achlorhydria.‬‬

‫‪ -١‬تفحص عينة البراز بالعين المجردة للبحث عن المخاط خصوصا إذا كان به خيوط دموية‬
‫‪ -٢‬إذا وجد المخاط فيوضع جزء منه على الشريحة مضافا إليه قطره من محلول ‪) Iodine‬محضر ‪% ١٠‬‬
‫فى ماء مقطر( ويفحص تحت الميكرسكوب للبحث عن طفيل‬
‫وعدة يكون مصحوبا ب‬ ‫‪Entamoeba histolytica trophozoites‬‬
‫‪Pus cells & RBCs‬‬
‫‪ - ٣‬وجود ‪ Pus cells & or RBCs‬فقط مع المخاط يمكن أن يكون بسبب بكتيريا أو بسبب طفيل‬
‫‪ Entamoeba histolytica‬لن الطفيل لينزل فى براز المريض بصورة منتظمة‪ .‬للتفرقة يمكن أن‬
‫نطلب عينة أخرى للبحث عن الطفيل أو نقيس ال ‪ ph‬لعينة البراز فهية حامضية فى حاليية الصييابةبييال‬
‫‪ Entamoeba‬بينما تكون قلوية فى حالة الصابة البكتيرية‪.‬‬
‫ييرخ‬ ‫‪ -٤‬المخاط فقط قد يكون سببه المساك أو القولون العصبى كذلك الدم قد يكون سببه وجود بواسير أو ش‬
‫شرجى‪.‬‬
‫‪ -٥‬إذا كانت العينة غير إسهال فيجب أن ترسب قبل الفحص بالطريقة التالية‪:‬‬
‫‪ -‬باستخدام مرود خشبى أو زجاجى نأخذ قطعة من براز المريض فى أنبوبة بها من ‪ ٥‬الى ‪ ٧‬مللى من‬
‫‪ formal saline %10‬ونقلب ثم نصفى المحلول باستخدام شاشة وقمع زجاجى أو بلستيك‬
‫ونستقبل الراشح فى أنبوبة عليها إسم المريض ونضيف اليها ‪٢‬مللى من محلول ‪ethyl acetate‬‬
‫ونعمل ‪ vortex‬لمدة دقيقة أو دقيقة ونصف‬
‫‪ -‬ندير العينة فى ال ‪ centrifuge‬لمدة ‪ 10‬دقائق على ‪ RPM 3000‬نفصل طبقة الشوائب العليل‬
‫برفق مستخدمتا مرود خشبى أو زجاجى ونرمى السائل الفوقى ونفحص الراسب تحت الميكرسكوب‬
‫بعد إضافة قطرة من ال ‪iodine‬‬
‫‪ – ٦‬العينات السهال تفحص بطريقة المسحة المباشرة ونضع قطرة من محلول ال ‪ iodine‬على الشريحة ثم‬
‫نبدأ بالفحص تحت الميكرسكوب‬
‫‪ -‬إذا لم نجد أى طفيل نكتب التوصية التالية وهاى‪:‬‬
‫‪19‬‬
 Test for Cryptosporidium parvum oocyst in stool is recommended
: ‫ سنوات نكتب التوصية التالية‬٥ ‫ إلى‬٢ ‫ إذا كان سن المريض بين‬-
Test for Rota virus antigen in stool is recommended

:‫ملحوظة‬
normal ‫ فى تحليل البراز لن هاناك دائما بكتيريا المسماه‬many bacteria ‫ غير مسموح بكتابة جملة‬-
‫ تنزل فى براز أى إنسان طبيعى‬flora
‫ تذكر أن الديدان الوحيدة التى يمكن رؤيتها بالعين المجردة فى براز المرضى هاى الدودة الدبوسييية ودودة‬-
.‫السكارس والدودة الشريطية‬
.‫ فى حالة وجود خليا صديد بأعداد كبيرة مع عدم وجود طفيل‬stool culture ‫ يمكن أن نوصى ب‬-

Routine Urine Analysis

Before analysis:
- Urine sample should be received in a clean covered container in the lab.
- Urine sample is preferably to be mid-stream morning sample.
- Urine sample is preferably provided after washing especially in females and
children.
- Urine sample should be examined within 1 – 2 hours after being provided by
the patient.

Steps of analysis:
(1) Shake urine sample well then fill the labeled test tube with urine.
(2) Dip the urine strip in urine and read the colours and comment on the following
items:
- Colour: usually write yellow.
If urine colour appears fluorescent : write amber yellow.
If specific gravity 1002 up to 1009 : write pale yellow.
If bilirubin is present : write deep yellow.
If many RBCs are present (about 50 or more / H.P.F.) : write reddish.

20
- Aspect: write clear or slightly turbid or turbid.
Restrict writing turbid to the following conditions:
- When many amorphous urate or phosphate are present.
- When many pus cells or many RBCs are present (about 50 cells or more /
H.P.F.).
- When many bacteria are seen under the microscope and the strip shows
nitrite positive.

- Volume: 10 ml urine sample is mandatory.

- pH: usually either less than 7 or more than 7
- If less than 7 (acidic): uric acid, amorphous urate or calcium oxalate crystals
may be present.
- If more than 7 (alkaline): triple phosphate, amorphous phosphate or calcium
oxalate crystals may be present.

- Specific gravity: write between 1002 up to 1030 as urine strip shows.

Be very cautious in writing specific gravity 1010 (this indicates that the patient is
suffering from renal failure).

- Albumin: If the strip shows the presence of albumin, confirm by boiling some
urine then add few drops of 3%acetic acid and read: Nil, trace, +, ++, --------------.

- Sugar: write as strip shows and confirm by Benedict's reagent. If age

of patient is 12 years old or less sugar should be routinely checked by

Benedict's reagent.

- Acetone: Usually appears with high sugar (++++)

Confirm:
Put a small amount of acetone powder on a filter paper and add few
drops of urine on it.
Result: violet colour means positive.
No violet colour means negative.
Presence of acetone alone may be due to
- long starvation (more than 12 hours).
- low carbohydrate diet.
- excessive vomiting (especially in pregnancy).
- prolonged diarrhoea.
- after anaesthesia.
Presence of acetone alone in pregnant lady means intrauterine foetal
danger and should be immediately reported.

21
‫فى حالة وجود أسيتون غير مصحوب بزيادة فى معدل السكر يجب السؤال فى الحال عن وضع‬
‫المريض فاذا كان سيدة حامل فيجب تبليغها أو تبليغ الطبيب المعالج على الفور لعمل اللزم‬
.‫حفاظا على صحة الجنين‬

- Bilirubin: If the strip shows the presence of bilirubin, confirm:

Method of testing bile salts in urine:

1- Put some of the tested urine in a test tube and add some sulfur powder
2- Sulfur powder quickly sinks to the bottom of test tube : positive.
3- Sulfur powder remains on the surface of urine : negative.

Method of testing bile pigments in urine:

- By Iodine:
1- Put few mls of urine sample in a clean test tube.
2- Add few drops of iodine (50% in absolute alcohol) on the side of test
tube.
Result: formation of GREEN RING between urine sample and iodine
means positive.
- By Fouchet:
1- Add 3 ml of 10% barium chloride to 3 ml of tested urine in a test tube.
Pour the contents on a filter paper on a glass funnel and receive the filtrate
in another test tube.
2- When the filter paper becomes dry add 3 drops of Fouchet
reagent on it and read:
purple or blue colour positive.
White or pale yellow colour negative.

Urobilinogen: normaly shows normal trace. If the strip shows more than normal
trace, bilirubin also appears on strip. If urobilinogen appears alone on strip,
confirm by Erlich's test.

(3) Reading colours on the strip must not be delayed more than 60 seconds and
bottle of strips must be closed immediately after taking the strip in order not to
spoil the strips.

(4) Centrifuge the urine sample for 5 minutes on 1500 to 2000 RPM.

(5) Discard the supernatant and screen the sediment microscopically as shown in
the following diagram using the low power:

22
(6) For counting RBCs or pus cells, we should count in two or three crowded areas
then in two or three spaced areas using the high power and take the average in
order to give a reasonable number of cells (note: writing from 10 pus cells or
more / H.P.F. necessitates recommending for urine culture so we must be careful).
Presence of pus clumps indicates recommending for urine culture.

(7) Epithelial cells found in urine of a female is usually a contamination from

vaginal discharge but this is not the case in the urine of a male.

(8) Not allowed to write the presence of casts in absence of albumin and the only
exception is hyaline casts (hyaline casts can be written in absence of albumin and
explained due to muscular effort).

(9) If yeast cells are seen under the microscope, it should be reported as yeast cells
and not as candida (candida is preferably diagnosed by culture and not by urine
examination).

(10) If sperms are present in a male urine sample, they should be counted
and the number is recorded per H.P.F. Sperms found in female urine sample is
considered contamination and is neglected.
After analysis:
1- Recommend for urine culture if:
- Pus cell count is 10 up to over 100 / H.P.F.
- Many bacteria are present and strip shows nitrite positive.
- Pus clumps are seen.
2- Presence of urobilinogen on strip with no bilirubin: recommend testing bilirubin
in blood.
3- Presence of protein in urine: recommend kidney function tests ( if it is not
requested in patient's sheet)
4- Presence of sugar in urine: recommend testing sugar in blood (if it is not
requested in patient's sheet)

Refused samples should be recorded in the special record denoting the reason for
sample refusal.
.‫العينات المرفوضة تسجل فى الدفتر المخصص لذلك مع كتابة سبب الرفض‬

23
 ‫إختبار ‪Urine analysis‬‬
‫قبل البدء فى عمل التحليل يراعى التى‪:‬‬
‫يفضل إعطاء عينة البول داخل المعمل فى وعاء نظيف من المعمل‬ ‫‪-‬‬
‫يفضل أن تكون العينة ‪mid-stream‬‬ ‫‪-‬‬
‫يفضل أن تعطى العينة بعد التشطيف فى حالة عينات الطفال والنسات أو السيدات‬ ‫‪-‬‬
‫ليتأخر فحص العينات أكثر من ساعة أو ساعتين مهما كان ضغط العمل ولبد أن يبدأ الفحص‬ ‫‪-‬‬
‫‪factors that should be standardized in the performance of the‬‬
‫‪:microscopic examination of urine‬‬

‫‪24‬‬
 ‫خطوات الفحص‪:‬‬
‫‪ -١‬يجب رج عينة البول جيدا قبل أن نمل بها أنبوبة الختبار المدون عليها إسم المريض‬
‫‪ - ٢‬يغمر الشريط فى البول ثم يرفع ونبدأ بقراءة اللوان مقارنة باللوان الموجودة على علبة الشرائط‬
‫‪ -٣‬ندون فى الدفترالتى‬

‫‪Colour‬‬
‫‪ ): - yellow‬اللون( ‪Colour‬‬
‫)اللون أصفر فسفورى ( ‪- Amber yellow‬‬
‫( عادة تكون الكثافة أقل من ‪- Pale yellow ( 1010‬‬
‫) عادة فى وجود صفراء فى البول ( ‪- Deep yellow‬‬
‫) عادة فى وجود كرات دم حمراء بصورة مرتفعة ( ‪- Reddish‬‬
‫للتفرقة بين اللون الحمر‬

‫‪25‬‬
 Aspect
Aspect (‫) المظهر‬: - clear
- slightly turbid
- turbid: ‫وذلك فى الحالت التالية‬
Many bacteria are seen under the microscope and the
strip shows nitrite positive.
Many amorphous phosphate or urate.
Pus cells or RBCs more than 50 / H.P.F.
Volume
Volume (‫) الكمية‬: 10 ml of patient's urine

pH
pH: ‫ حسب قراءة الشريط‬٧ ‫تكتب أقل أو أكثر من‬
:pH ‫ المحتمل ظهورهاا فى البول حسب ال‬crystals ‫ال‬
- Less than 7 (acidic) ‫ حامضى‬- uric acid crystals
- amorphous urate
26
 - calcium oxalate crystals
- More than 7 (alkaline) ‫ قلوى‬- triple phosphate crystals
- amorphous phosphate
- calcium oxalate crystals
Specific Gravity
Specific gravity (‫) الكثافة النوعية‬: ‫حسب قراءة الشريط‬
‫ فهذا يدل أن المريض يعانى من فشل كلوى‬1010 ‫يجب الحرص عند كتابة رقم‬

27
 ‫‪Albumin‬‬
‫إذا أظهر الشريط وجود زلل تأكد بغلى بعض البول فى أنبوبة زجاجية ‪ ):‬الزلل ( ‪Albumin‬‬
‫ثم يضاف بضع قطرات من ‪ of acetic acid %3‬وندون درجة ال ‪turbidity‬‬

‫‪Sugar‬‬
‫إذا أظهر الشريط وجود سكرتأكد بطريقة بينيدكت ‪ ):‬السكر( ‪Sugar‬‬
‫‪Add 8 drops of urine to 5ml of benedict, heating the tube until‬‬
‫‪boiling and examinant.‬‬

‫‪28‬‬
 ‫‪Acetone‬‬
‫عادة يظهر السيتون فى البول مع وجود السكر المرتفع ‪ ):‬أسيتون( ‪Acetone‬‬
‫وجود أسيتون بدون سكر قد يكون سببه أحد السباب التالية‪:‬‬
‫‪ -‬صيام أكثر من ‪ ١٢‬ساعة أو قيء كثيرويمكن اهاماله‬
‫‪ -‬إذا كانت المريضة سيدة حامل فيدون السيتون فى الحال لتنبيه الطبيب‬

‫‪Bilirubin‬‬

‫للتأكد من وجود ‪Bilirubin:‬‬ ‫إذا أظهر الشريط وجود صفراء تأكد كالتى‬
‫‪bile salts :‬‬
‫أضف قليل من بودرة ‪ sulfur‬على بعض البول فى أنبوبة زجاجية بدون إهاتزاز‪:‬‬
‫بودرة ال ‪ sulfur‬تظل طافية على السطح ‪ :‬سلبى‬
‫بودرة ال ‪ sulfur‬تنزل بسرعة الى القاع ‪ :‬إيجابى‬
‫للتأكد من وجود ‪: bile pigments‬‬
‫‪iodine‬‬ ‫ضع بعضامن البول فى أنبوبة زجاجية ثم أضف قليل من سائل‬
‫)‪( 50% in absolute alcohol‬‬
‫ولحظ تكون حلقة خضراء بين السائلين فى الحالت الموجبة‬

‫‪Urobilinogen‬‬
‫‪Urobilinogen:‬‬
‫اللون الطبيعى ‪ ، normal trace‬إذا أظهر الشريط أكثر من ذلك يسأل عن ال ‪ bilirubin‬فى الدم أو يكتب‬
‫توصية بالكشف عن نسبة ال ‪ bilirubin‬فى الدم‬

‫‪ -٤‬يجب قراءة الشريط خلل ‪ ٦٠‬ثانية فقط من وضعه فى البول كما يجب غلق علبة الشرائط مباشرة بعد‬
‫أخذ الشريط منها حتى ل تفسد الشرائط‬

‫‪ -٥‬تدار عينة البول فى السنتريفيوج لمدة خمس دقائق على سرعة ‪ ١٥٠٠‬الى ‪ ٢٠٠٠‬دورة فى الدقيقة‬

‫‪29‬‬
‫كما هاو موضييح‬ ١٠ X ‫ يرمى الجزء الرائق ويفحص قطرة من الراسب تحت الميكرسكوب بالعدسة‬-٦
:‫بالرسم‬

‫بذلك نأخذ فكرة مبدئية عن الموجود فى العينة‬

‫ فى عدد من الماكن المزدحمة بالخليا ثم فى عدد آخر من‬Pus cells ‫ ثم عد ال‬RBCs ‫ نبدأ فى عد‬-٧
X ٤٠ ‫الماكن الرائقة ونأخذ المتوسط باستخدام العدسة‬
‫ وجود هاذه الخليا يكون عادة مرجعه الى‬female ‫ فى حالة ال‬: epithelial cells ‫ عند التعليق على‬-٨
male ‫ فيجب الحرص عند كتابتها فى عينة ال‬male ‫إفرازات من المهبل وهاو ليس الحال فى عينات ال‬

hyaline cast ‫ فى عدم وجود زلل فى البول والستثناء الوحيد هاو النوع‬casts ‫ غير مسموح بكتابة‬-٩
‫فيمكن كتابته فى عدم وجود زلل ويفسر نزوله نتيجة المجهود العضلى‬

‫ ولي س‬yeast cells ‫ أثناء الفحص الميكرسكوبى لعينة البول فتكتييب‬yeast cells ‫ إذا وجدت‬-١0
candida

high power ‫ فيجب كتابة العدد باستخدام العدسة ال‬male ‫ أثناء الفحص فى عينة‬sperms ‫ إذا وجد‬-١1
‫ ولتكتب‬contamination ‫ فتعتبر‬female ‫أما إذا كانت العينة ل‬

‫كرات الدم الحمراء لها أكث من شكل‬-12

a. Smooth biconcave discs (~ 7 microns), no nucleus
b. Cells crenate in hypertonic (concentrated) urine
c. Cells swell and lyse in hypotonic (dilute), alkaline urine

RBCs can resemble

a. Yeast: tend to be spherical or ovoid, vary in size, often show
‘budding’; add 2% acetic acid to differentiate
(RBC hemolyze, yeast will not hemolyze)
b. Oil droplets or air bubbles: variations in size
(RBC uniform in appearance)
c. Oval form of calcium oxalate crystal: add 2% acetic acid, RBC
will hemolyze
d. WBC in hypertonic (concentrated) urine: WBC lose water,
become smaller; add 2% acetic acid to enhance nucleus (in
(hypertonic urine, crenated RBC
:‫بعد النتهاء من الفحص‬
:‫ وذلك فى الحالت التالية‬urine culture ‫تذكر أن تطلب توصية‬
.Pus cells 10 or more up to over 100 / H.P.F ‫ إذا كتبت‬-١
30
many bacteria with nitrite positive ‫ إذا كتبت‬-٢
of Pus cells Clumps ‫ إذا كتبت‬-٣

31
32
33
 Semen Analysis
Before analysis:
- Check that there was no sexual intercourse during the previous 3 days
preceding analysis.
- Sample must be provided in the lab in a sterile container.
- No soap to be used for providing the sample.
- Samples passed at home must reach the lab within half an hour and should
be immediately examined.
- Semen sample contaminated with urine is refused.
Steps of analysis:
1- Provided semen sample is put in the incubator adjusted at 37˚ C immediately
after receiving the sample.

2- The volume of semen sample is measured using a clean dry Pasteur pipette
and recorded in ml.

3- Record the time of semen liquefaction (the proper time is 1/4 to 1/2 an hour
after providing the sample) then determine the motility after 1/2 hour.

4- If semen sample did not liquefy after 1/2 an hour, stir the sample in a circular
way several times and using a clean dry Pasteur pipette withdraw and expel the
sample several times until mucus becomes slightly dissolved and we are able to
take a sample for determining motility.

5- Record the pH of semen (acidic or alkaline).

6- To determine the motility:

- Shake the sample in a circular way then take 10 µl on a slide, cover by a
squared cover.
- Using the high power we count in 5 microscopic fields to count 200 sperms
and determine the grades of motility as follows:
a- Rapid progressive.
b- Sluggish, non-progressive
c- Immotile.
- Determine the percentage of each grade.
- Repeat the calculations after 1 then 2 then 3 hours.

34
7- Determine sperm count as follows using buffered 3.5% formal saline as
a diluent:
Sperms / HPF Dilution Multiplication Count Total Count
factor
< 15 1:5 Count in 2 big ---- / Count / ml
sperms/HPF 100µl squares X ml X volume
(sample) + 25,000
400µl
(diluent)
(15-40) 1 : 10 Count in 2 big ---- / Count / ml
sperms / 100µl squares X ml X volume
HPF (sample) + 50,000
900µl
(diluent)
(40-200) 1 ; 20 Count in 2 big ---- / Count / ml
sperms / 50µl (sample) squares X ml X volume
HPF + 950µl 100,000
(diluent)
(≥ 200) 1 : 50 Count in 2 big ---- / Count / ml
sperms / 10µl (sample) squares X ml X volume
HPF + 490µl 250,000
(diluent)

3 sq. mm.

35
8- If no sperms are detected at all, centrifuge the whole semen sample for 1/4 of
an hour at 3000 RPM. If any sperms are found write the count 10,000.
If no sperms are detected even after centrifugation, write the following comments:
- No sperms could be detected in the whole sediment material after centrifugation
of this sample.
- Examination of 3 successive semen samples is recommended.

9- To determine sperm abnormality, count (using the haemocytometer) about

100 sperms and determine:
Abnormal head %
Abnormal neck %
Abnormal tail %

10- To determine sperm vitality (viability), we use eosin – nigrosin stain. We

count 200 sperms and determine the vitality percentage.
We mix a drop of fresh semen with a drop of stain on a glass slide, cover with a
glass cover and after 30 seconds, count using the high power:
- Number of viable sperms (did not take the stain).
- Number of non-viable sperms (took the stain).
After analysis:
1- In case no sperms are detected even after centrifugation, recommend
examination of 3 successive semen samples.
2- In case no sperms are detected even after centrifugation and pH of semen
sample is acidic, recommend fructose test in semen.
3- In case of persistent hyperviscosity, write the following comment: Sperm
count was not susceptible to accurate measurement due to incomplete
liquefaction of semen sample.
4- In case of presence of many pus cells, recommend semen culture.
5- In the presence of many sperm agglutination detected, write the following
comment:

Many sperm agglutination detected in this sample, semen anti-spermatozoa

antibodies test is recommended.
36
‫‪6-‬‬ ‫‪In case of oligozoospermia ( < 15 X 106 / ml ) and hypozoospermia:‬‬
‫‪- Test for post ejaculatory urine is recommended.‬‬
‫‪- Endocrine work up ( FSH, LH, Testosterone ) is‬‬
‫‪recommended.‬‬
‫‪7-‬‬ ‫‪In case of motility less than 40% : Test for swim up is recommended.‬‬
‫‪8-‬‬ ‫‪In case of Asthenozoospermia ( rapid progressive and sluggish progressive‬‬
‫‪less than 50%) : Test for sperm vitality is recommended.‬‬

‫ملحوظة ‪:‬‬
‫فى حالة استقبال عينة ‪ semen‬من المنزل أو من خارج المعمل لعمل تحليل ‪ semen‬يجب ابلغا‬
‫المريض أن ذلك يؤثر على النتيجة فى غير صالحه ويفضل احضار العينة فى المعمل أو يكتب ال‬
‫‪ comment‬التالى‪:‬‬

‫‪This sample is provided to the lab with uncertainty of sample identity and time‬‬
‫‪interval after voiding.‬‬

‫إختبار ‪Semen analysis‬‬

‫قبل عمل التحليل‪:‬‬

‫‪ -‬يجب المتناع عن الجماع أو القذف ‪ ٣‬أيام قبل إعطاء العينة‬
‫‪ -‬يفضل إعطاء العينة داخل المعمل فى وعاء نظيف معقم‬
‫‪ -‬ليستعمل صابون عند إعطاء العينة‬
‫‪ -‬العينات التى أحضرهاا المندوب من المنزل يجب أن تصل الى المعمل خلل نصف ساعة وتفحييص‬
‫مباشرة‬
‫‪ -‬عينات ‪ semen‬المختلطة بالبول ترفض‬

‫خطوات الفحص‪:‬‬
‫‪ -١‬توضع عينة ال ‪ semen‬فى الحضانة عند درجة ‪ º ٣٧‬مئوية لمدة نصف ساعة‬
‫‪ -٢‬يقاس حجم العينة باستخدام ‪ Pasteur pipette‬ويدون‬
‫‪ -٣‬نسجل ‪ time of semen liquefaction‬ثم نحدد ال ‪ motility‬كما هاو موضح فى خطوة ‪٦‬‬
‫‪ -٤‬إذا لم يحدث ‪ liquefaction‬للعينة بعد نصف ساعة نقوم بالتى حتى يتسنى لنا فحص العينة وتحديد ال‬
‫‪ motility‬بعد نصف ساعة مباشرة‪:‬‬
‫نقلب العينة بطريقة دائرية عدة مرات ثم باستخدام ‪ Pasteur pipette‬نظيفة وجافة نسحب جزء من العينة‬
‫ييذا‬‫ونطردهاا عدة مرات حتى يصبح هاذا الجزء سائل ونستطيع تحديد ال ‪ motility‬و ال ‪ count‬م ن ها‬
‫الجزء‬

‫‪ -٥‬نحدد ال ‪ pH‬باستخدام شريط عباد الشمس‬

‫‪ -٦‬لتحديد ال ‪ motility‬نقوم بالتى‪:‬‬

‫‪37‬‬
‫نرج العينة ونأخذ منها ‪ μl 10‬على شريحة ونغطى ب ‪ cover‬مربع ثم باستخدام العدسيية ال ‪High‬‬
‫‪ power‬نعد فى خمس ‪ microscopic fields‬حتى نكمل عد ‪ sperms 200‬وندون‬
‫‪a- % age of Rapidly progressive‬‬
‫‪b- % age of Sluggish & non-progressive‬‬
‫‪c- % age of Immotile‬‬
‫كرر العد بعد ساعة ثم بعد ساعتين ثم بعد ‪ ٣‬ساعات‬
‫‪ -٧‬حدد عد الحيوانات المنوية )‪ (sperm count‬كالتى‪:‬‬
‫إذا كان العد أقل من ‪ .sperms / H.P.F 15‬نخفف ‪٥ :١‬‬
‫إذا كان العد من ‪ .H.P.F / 40 – 15‬نخفف ‪١٠ :١‬‬
‫إذا كان العد من ‪ .H.P.F / 200 – 40‬نخفف ‪٢٠ :١‬‬
‫نخفف ‪٥٠ :١‬‬ ‫إذا كان العد من أكثر من ‪.H.P.F / 200‬‬
‫محلول التخفيف هاو ‪buffered 3.5% formal saline‬‬
‫نأخذ ‪ μl 10‬من محلول ال ‪ semen‬المخفف ونعد باستخدام ال ‪ haemocytometer‬فى مربعين كبار‬
‫ونضرب العدد كما هاو موضح‪:‬‬
‫نضرب فى ‪ ٢٥٫٠٠٠‬إذا كان التخفيف ‪٥ : ١‬‬
‫نضرب فى ‪ ٥٠٫٠٠٠‬إذا كان التخفيف ‪١٠ : ١‬‬
‫نضرب فى ‪ ١٠٠٫٠٠٠‬إذا كان التخفيف ‪٢٠ : ١‬‬
‫نضرب فى ‪ ٢٥٠٫٠٠٠‬إذا كان التخفيف ‪٥٠ : ١‬‬
‫هاذا يعطينا ‪ sperm count / ml‬ثم نضرب هاذا الرقم فى عدد ال ‪) mls‬حجم عينة ال ‪( semen‬‬
‫فنحصل على ‪total count / ejaculate‬‬

‫‪ -٨‬إذا لم نجد حيوانات منوية على الطلق ندير العينة فى ال ‪ centrifuge‬لمدة ربع ساعة عند ‪3000‬‬
‫‪ RPM‬وإذا وجد أى حيوان منوى يكتب العد ‪١٠٫٠٠٠‬‬
‫وإذا لم يوجد أى حيوان منوى على الطلق بعد ‪ centrifugation‬يكتب التعليق التالى‪:‬‬
‫‪No sperms are detected in the whole sediment material after centrifugation of this‬‬
‫‪sample.‬‬
‫‪Examination of 3 successive semen samples is recommended‬‬
‫وإذا لم يوجد أى حيوان منوى على الطلق بعد ال ‪ centrifugation‬وكذلك ال ‪ pH acidic‬نطلب توصية‬
‫‪Test for fructose in semen‬‬

‫‪ -٩‬لتحديد ‪ sperm abnormality‬نعد باستخدام ال ‪haemocytometer‬‬

‫عدد ‪ sperms 100‬ونحدد اللتى‪:‬‬
‫‪% age of abnormal head‬‬
‫‪% age of abnormal neck‬‬
‫‪% age of abnormal tail‬‬
‫‪ -١٠‬لتحديد نسبة الحيوانات الميتة الى الحية نستخدم صبغة ‪ eosin-nigrosin‬كلتى‪ :‬نخلط قطرة من عينة‬
‫ال ‪ semen‬مع قطرة من الصبغة على شريحة زجاجية ونغطيها ب ‪ cover‬مربع ونفحص بعد ‪ ٣٠‬ثانية‬
‫ب ‪high power‬‬

‫نعد عدد ال ‪) viable sperms‬الحية(التى لم تأخذ الصبغة‬

‫وعدد ال ‪) non-viable sperms‬الميتة( التى أخذت الصبغة‬

‫‪38‬‬
 :‫بعد إنتهاء التحليل‬
:‫فى حالة شدة اللزوجة يكتب التعليق التالى‬
Sperm count is not susceptible to accurate measurement due to incomplete
liquefaction of semen sample
‫ مطلوب‬semen culture :‫ يكتب التعليق التالى‬many pus cells ‫فى حالة وجود‬
:‫فى حالة إستقبال عينة من خارج المعمل وليست عن طريق المندوب يكتب التعليق التالى‬
The sample was provided to the lab with uncertainty of sample identity and
time interval after voiding.

‫بعض المصطلحات المستخدمة فى وصف تحليل السائل المنوى‬

‫المعنى‬ ‫المصطلح‬ ‫الرقم‬

‫قلة حجم عينة السائل المنوى عن الطبيعى‬ Hypospermia 1
(‫ ونصف‬1 ‫) الطبيعى‬
‫قلة عدد الحيوانات المنوية عن الطبيعى‬ Oligozoospermia 3
6
(X 10 / ml 15 > )
‫عدد الحيوانات المنوية‬ Cryptozoospermia 4
(X 10 /ml 1≥)
6

‫ل يوجد حيوانات منوية بعد فحص ثلث‬ Azoospermia 5

‫عينات متتالية للمريض‬
Count = Zero
‫زيادة عدد الحيوانات المنوية عن‬ Polyzoospermia 6
6
(>250 X 10 / ml)
40 ‫الحركة أقل من‬% Asthenozoospermia 7
Motility < 40%
Abnormal forms > 50% Teratozoospermia 8
‫قلة أو عدم وجود حيوانات منوية حية بعد‬ Necrozoospermia 9
sperm vitality ‫عمل‬
‫ممكن تجميع أكثر من مصطلح‬ Oligo-Astheno-Terato- 10
zoospermia

Semen analysis Notes

1- If no sperms detected in sample…..Centrifuge whole sample 15 min at 3000
RPM…..if any sperms detected …. Write comment that semen count < 10.000.

39
2-If no sperms detected after centrifugation ….comment that no sperms detected
in the whole sediment material after centrifugation of the sampleand 3 successive
samples is recommended.

3-If no sperms detected after centrifugation and Ph of sample acidic ….comment

that Frucctose test recommended.

4-In case of hyperviscosity …. Comment that sperm count was not susceptible to
accurate measurement due to incomplete liquefaction of semen sample.

5-In case of high pus …comment that pus C/S is recommended.

6-in case many sperm agglutination …comment that anti sperm Ab

recommended.

7-In case of oligozoospermia & hypozoospermia….comment that post ejaculatory

urine recommended with endocrine work up(FSH,LH and Testosterone)

8-In case of asthenozoospermia (rapid progressive &sluggish <50%)….spem vitality

recommended

Semen Viscosity
Asirate sample by wide bore plastic pipette

If drop form thread > 2cm …….It is abnormal

40
 Vitality Test

Drop of fresh semen + drop of eosin-nigrosin

Stain….Cover it for 30 second….Non viable sperms take
stain
-Sperm Aggregation:
Immotile sperms bind to each others and motile sperms bind to non-sperm cells or debris

-Sperm Agglutination:
Motile sperm bind to other motile sperm by their heads,tail or mid pieces(Anti Sperm Ab)

Sperm motility: grading

Is assessed as WHO 4 WHO 5

Immotile Grade D IM

Non Progressive Grade C NP

41
 ‫‪Progressive:‬‬ ‫‪PR‬‬

‫‪Slow‬‬ ‫‪Grade B‬‬

‫‪Fast‬‬ ‫‪Grade A‬‬

‫تحليل السائال المانوى‬

‫‪Semen examination‬‬
‫أول حاجه لزم تعمالها لزم يكون عندك نسخه مان الــ‬

‫‪WHO guideline for semen examination 5th edition‬‬

‫ودا انا نزلت لينكه قبل كدا وهو عباره عن كل ماايخص تحليل السائال المانوى بدون فتى أو تأليف يعنى مان اخر الخر‬
‫)‪:‬‬
‫أماا السؤال اللى تحت فبيتكلم عن صبغات للــ‬

‫‪42‬‬
Semen
‫ بإختصار شديد فيه تلت أنواع مان الصبغات بنستخدماهم فى تحليل السائال المانوى‬:
----------------------------------------------
1- ‫ صبغة الــ‬Myeloperoxidase stain
♣ ‫ وظيفتها‬:
‫تفرق بين الــ‬

WBCs ‫ والــ‬Spermatogenic cells

‫بماعنى انك لقيت العينه فيها‬

Round cells ‫ كتير وماحتاج تعرف اد ايه مانهم‬WBCs ‫ واد ايه مانهم‬Spermatogenic cell
♣ ‫ الخطوات‬:
‫ماذكوره ف الــ‬

Kit insert

... ‫وبعدها تعد على شريحة العد‬

♣ ‫ النتيجة‬:
‫كالتالى‬
Peroxidase granulations are stained bright red, nuclei of leucocytes are blue while
erythrocytes are stained light beige
‫ ماربع بتوع العد الحمار كلهم وتعوض ف القانون دا‬25 ‫ وتعد ف الــ‬:
(C = (N/n) × (1/10) cells per nl (cells x 106
Where C = concenrtation of peroxidase positive cells
N= number of peroxidase positive cells
n = number of grids, (1/10) is the dilution.
----------------------------------------------------
2- ‫ صبغة الــ‬Kwik-Diff stain
♣ ‫ وظيفتها‬:
‫ لعمال نسب الــ‬Sperm morphology
♣ ‫ الطريقة‬:
‫ ماذكوره ف الــ‬Kit insert ... ‫وبعدها تعد على شريحة عادية‬
♣ ‫ النتيجة‬:
‫كالتالى‬
Head , med-piece and tail should be stained violet

43
‫‪and acrosome should be stained light pink‬‬
‫‪ :‬وهتحدد النسب كالتالى‬
‫‪abnormal head%,‬‬
‫‪abnormal mid-piece%,‬‬
‫‪abnormal principal piece%‬‬
‫‪Excess residual cytoplasm%‬‬
‫‪----------------------------------------------------‬‬
‫‪ Eosin‬صبغة الــ ‪3-‬‬
‫‪ :‬وظيفتها ♣‬
‫‪ Vitality‬لتحديد نسبة الــ‬
‫‪ :‬الطريقة ♣‬
‫وبعدها تعد على شريحة عادية ‪ Kit insert ...‬ماذكوره ف الــ‬
‫الماصبوغ = المايت‬
‫الغير ماصبوغ = الحى‬
‫‪.‬‬
‫الحى * ‪ / 100‬الكلى = ‪Vitality‬‬

‫‪ WHO‬دى إرشادات فقط وبكرر تانى مارجعك هو الــ‬

‫وأى إستفسار بإذن ا ماعكم‬

‫‪44‬‬
45
46
 2

47
48