ESCUELA POLITÉCNICA NACIONAL

ESCUELA DE FORMACIÓN DE TECNÓLOGOS

TECNOLOGÍA EN AGUA Y SANEAMIENTO AMBIENTAL
MICROBIOLOGÍA

PRÁCTICA DE LABORATORIO NO 1

7.5/10
Nombre: Jorge Yupa

Fecha de realización de la práctica: 16/11/2018

Fecha de entrega de informe: 23/11/2018

1. TEMA: Preparación de muestras para la observación en el microscopio.

2. RESUMEN:

La microbiología es la ciencia que estudia los microorganismos, microbios, ya que estos

organismos no se pueden observar a simple vista y por ende necesitamos de un microscopio. Por

lo tanto se realizó la practica en el edificio de civil el día viernes 16 del mes presente, en este

laboratorio realizamos la practica dada con sus respectivos materiales. Al ingresar al laboratorio

nos dirigimos al reconocimiento de materiales para poder utilizarlos y no tener inconvenientes en

el trascurso de la práctica teniendo en cuenta el orden en general. Como primer punto se observó

la estructura celular y mitosis, seguidamente teníamos las muestras de ápice de cebolla, muestra

de sangre, y finalmente la muestra de líquido seminal. Fue importante la utilización de mandil y

aguantes, adicional fue recomendable el aseo en el puesto de trabajo para no tener inconvenientes

con los materiales, verificar que el microscopio se encuentre limpio, los materiales desinfectados

con alcohol; teniendo en cuenta todos estos parámetros se comenzó a observar las células en sus

diferentes fases, la estructura de la célula reproductora masculina y los glóbulos rojos (sangre).

Dada esta práctica se pudo conocer como son los procesos de la célula.

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3. INTRODUCCIÓN:

El ciclo celular es una serie de sucesos que se producen de manera ordenada desde un periodo de

biosíntesis, crecimiento de las células y una división celular que consta de dos fases: Interfase

(autoconservación) y Mitosis (reparto equitativo del material hereditario/reproducción).la

Interfase; es el periodo comprendido entre dos mitosis, siendo la fase más larga del ciclo celular.1

En el Periodo G1 Se produce síntesis de ARNm y proteína, crecimiento general y duplicación de

orgánulos durante el Periodo S se realiza síntesis y duplicación de ADN, formación de cromátidas

hermanas y duplicación del centrosoma por último el Periodo G2, Activo anabolismo (ARNs,

proteínas, ATP) cromosomas inician condensación, continuando con la Mitosis que es la

generación de dos células con igual número de cromosomas, consta de 4 fases: Profase

(Visualización de cromátidas hermanas, desintegración del citoesqueleto y formación del huso

mitótico), Metafase (Cromosomas muy condensados se ordenan en el plano ecuatorial), Anafase

(Cromátidas se separan por la partición de centrómeros, desplazamientos de cromátidas hacia los

polos) y Telofase (Cromátidas llegan a los polos, descondensación de cromosomas, dispersión del

huso, formación de envoltura nuclear) continuando con las CITOCINESIS que es la división del

citoplasma en anafase tardía o telofase temprana.2

4. OBJETIVOS:

Objetivo General:

Preparar muestras para la visualización en el microscopio de ápice de cebolla, células sanguíneas

y espermatozoides.

Objetivos Específicos:

- Teñir células sanguíneas e identificación morfológica de cada una de ellas.

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- Observar, identificar movimiento y morfología de espermatozoides.

- Teñir espermatozoides y observar su estructura interna.

5. MATERIALES Y METODOS:

Los materiales utilizados en la práctica fueron los siguientes:

Estos materiales fueron obligatorios por cada estudiante; mandil de laboratorio, guantes de nitrilo

y el manual de laboratorio, para anotar los resultados fue necesario contar con esferógrafo y una

hoja de datos, los materiales que estaban presentes en el laboratorio para la práctica fue el

microscopio, en el caso de nuestro grupo encontramos con los lentes sucios, adicional nos

entregaron pinzas, portaobjetos, cubreobjetos, la orceína fue utilizada en la raíz de la cebolla y la

dejamos actuar por 1 minuto, teníamos presente el Vidrio de reloj para colocar la raíz de la cebolla,

también contamos con el mechero de alcohol para calentar la muestra, posterior para la

observación de células sanguíneas se utilizó lanceta esterilizada, después se utilizó Hematoxilina

dejando actuar por 15 minutos, los materiales como portaobjetos, cubreobjetos fueron utilizados

en las tres muestras.

METODOLOGÍA:

Mitosis en ápices de cebolla:

1) Para esta observación se cultivó el bulbo de una cebolla fresca por cinco a seis días en

agua, la cebolla se colocó en un recipiente con agua hasta tocar es asiento de la cebolla. El

agua fue cambiada cada 24 horas y el recipiente estuvo a 25°C en la oscuridad.

2) En la práctica realizada se arrancó 2 raíces del bulbo, seguidamente con las tijeras se

cortó 2cm del ápice, el cual fue colocado en un vidrio de reloj.

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3) Se colocó la orcina en la muestra cubriéndole por completo la raíz de la cebolla por

aproximadamente 1 minuto.

4) Calentamos la placa con el mechero, teniendo en cuenta que al calentarle no se encuentre

muy cerca el vidrio y se dejó enfriar por 2 minutos.

5) Al enfriarse la muestra se retiró las raíces y se las cortó aproximadamente 2mm del ápice,

seguidamente fue colocada en el portaobjetos con la gota de orceína.

6) Se cubrió con el cubreobjetos y finalmente fue observada en el microscopio.

7) Tomamos notas de los resultados presentes.

Observación de células sanguíneas:

1) Como primer punto se procedió a hacer una punción en el dedo pulgar con la lanceta.

2) La gota de sangre se colocó en el portaobjetos.

3) Con otro portaobjetos ubicado a 30° del portaobjetos que contenía la muestra.

4) Posterior se realizó un frotis

5) Al frotis se le añadió gotas de alcohol, y dejamos que se evapore.

6) Cuando las células quedaron fijadas, se les agrego hematoxilina, y se dejó actuar por 15

minutos.

7) Luego de los 15 minutos, se secó la placa

8) Para culminar la práctica se observó en el microscopio

Montajes de espermatozoides en seco:

1) Primero, se tomó una gota de líquido seminal con el gotero.

2) Esta gota fue colocada a un portaobjeto, colocándolo en el centro.

3) Se colocó el cubreobjetos y se procedió a la observación estructural.

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6. RESULTADOS Y DISCUSIÓN:

Como primera muestra realizamos la mitosis en células de la raíz de la cebolla, se observó como

actuó la orceína en la raíz de la cebolla, esta reblandece las membranas celulares, posteriormente

se pudo diferencias en qué fase se encontraban las células o estados de división celular.2

Como segunda muestra observada fue la observación de células sanguíneas (glóbulos rojos), la

presencia de estos glóbulos fue notorio en diferentes fases por lo cual tomamos datos respectivos

de cada uno. La hematoxilina nos brindó la facilidad de detentar los glóbulos blancos, ya que

estaban presentes en grandes cantidades.2

Como última muestra se realizó espermatozoides, Uno de los principales factores relacionados con

la fertilidad es la producción espermática, que se valora mediante el espermograma, los

espermatozoides se encontraron vivos en la muestra presentada por lo cual fue de mayor tuvieron

una mejor vista sobre el movimiento de los mismos, algunos pueden tener mal formaciones que

afecta la movilidad y la rapidez, constan de 3 partes: cabeza, cuello y cola. Cada una de estas partes

tiene sus propias funciones. La cabeza contiene el ADN, el cuello lleva las mitocondrias, la cola

ayuda al movimiento.

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7. CONCLUSIONES:

 Dentro de la primera practica realizada con el ápice de cebolla se pudo visualizar

la epidermis y la composición de la célula gracias al azul de metileno, observando

a su vez su forma hexaédrica (en celdas) y alargadas, logrando diferenciar las

células en proceso de mitosis (4 fases), la membrana y el citoplasma.

 En relación a las células sanguíneas para la observación de las estructuras primero

fue necesario preparar la muestra correctamente y una buena utilización del

microscopio gracias a los pasos seguidos se pudo identificar los glóbulos rojos y

blancos siendo este uno de nuestros objetivos.

 Podemos concluir que a través del microscopio estamos en capacidad de observar

los espermatozoides, y así determinar sus características morfologías y vitalidad

siendo estos los principales parámetros para un espermograma.

8. BIBLIOGRAFÍA:

1. Lagunas M. & col. (2014). Ciclo celular: Mecanismos de regulación. Rev. Esp Cien Sal.
VERTIENTES. UNAM. Zaragoza. Recuperado de:
http://www.medigraphic.com/pdfs/vertientes/vre-2014/vre142e.pdf

2. Jiménez L. (2003). Biología celular y molecular. PEARSON. Pag 595-612. México.

Recuperado de: https://oncouasd.files.wordpress.com/2015/06/biologia-celular-y-
molecular.pdf

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9. ANEXOS:

Fig 1. Presencia del ADN de glóbulos blancos Fig 2. Acumulación de glóbulos rojos en
distintas fases.

Fig 3. Gota de sangre colocada en el Fig 4. Presencia de espermatozoides

observados en el microscopio.
portaobjetos para el respectivo análisis.