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Jesús Simal-Lozano
University of Santiago de Compostela
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All content following this page was uploaded by Jesús Simal-Lozano on 02 June 2014.
Palabras clave: Sep Pak C18, espectroscopía UV, barbitúricos, ácido salicílico, cafeína, teofilina.
A quick and simple method is proposed for the qualitative determination of sorne Barbiturates in plas- ·
ma (Aprobarbitone, Amylobarbitone, Barbitone, Dial, Pentobarbitone, Phenobarbitone, Qinalbarbito-
ne, Secbutotabarbitone and Talbutal), Salicylic acid, Cafeine and Theophylline. This method is based
on the purification process of the example by the use of the cartridge Sep Pak™ C18 and the exa-
mination of the purified at the spectroscopy UV.
• 1
espectrofotometría UV
Parte experimental
Material y aparatos
Reactivos
espectrofotometría UV
0,7 0,,1
0,6 _____ ,p H= 1 0,6- ------ pH= 1
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190 220 250 2 80 310 340 190 220 250 280 310 34 0
nm nm
Figura 2. Espectro de absorción al UV del grupo de Jos barbitúricos obtenido de muestras de plasma sobrecar-
gadas con 125 p.g comparado con su espectro patrón para cada componente.
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40 técnicas de LABORATORIO • n° 141
1
espectrofotometría UV
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190 220 250 2 8 0 310 340 190 220 250 280 310 340
; .
nm nm
Figura 3. Espectro de absorción al UV de una muestra de plasma sobrecargada con 37,5 p.g de cafeína comparado
con su espectro patrón.
0,7 0,7 1
1
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1
1
0,6 ----- pH= 1 0,6 1 ----- pH= 1
-pH=10 1
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1
l
190 220 250 280 310 340
nm
190 220 250 280 310 340
nm
1
Figura 4. Espectro de absorción al UV de una muestra de plasma sobrecargada con 50 pg de teofilina comparado
con su espectro patrón.
f
(Stead y Moffat, 1983). y ajustadas a pH 10.
1
i
barbitúricos .................................. 125 ¡.¡g/ml
cafeína . .... . .... .... ...... ...... . ..... ...... .. .. 37,5 ¡.¡g/mi
salicílico, ácido .... ...... ..... ............. 500 ¡.¡g/mi
-Metano!
-Etanol
-Hidróxido sódico 0,1N y 0,01N.
t
teofilina ... .. ..................... ...... ..... ... 50 ¡.¡g/mi - Plasma humano fresco congelado de donante
- Soluciones patrón de trabajo de cada fármaco.- único proporcionado por el Hospital General de:
Se preparan por dilución 1 a 10 de las anteriores Galicia. El plasma se descongela en baño de
-pH= 10
0,6 ____ pH=
- p H = 10
1
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0,3 '.J 1 0,3
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0,2 0,2
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190 220 250 280 310 340 190 220 250 280 310 340
nm nm
Figura 5. Espectro de absorción al UV de una muestra de plasma sobrecargada con 500 pg de ácido salicílico com-
parado con su espectro patrón.
de etanol y la solución alcohólica se evapora a se- mas que la utilización de las minicolumnas Sep Pak
quedad en un Baño María. El residuo obtenido se C18 dan lugar a una purificación satisfactoria de las
disuelve en 0,1 mi de hidróxido sódico 0,01N y se di- muestras de plasma, lo que permite detectar de una
luye a 10 mi ajustando el valor de pH a 10. manera rápida y sencilla los componentes estu-
-Obtención de los espectros. diados.
Con la solución anterior se consiguen los espec-
tros a pH 10 y a pH 1 (acidificando con ácido clorhí- Agradecimientos ·
drico 1N) entre 340 y 190 nm.
Con los patrones. Nuestro reconocimiento al Hospital General de
Se obtienen directamente los espectros a pH 10 Galicia por habernos facilitado de forma gratuita el
y pH 1 con las soluciones patrón de trabajo. plasma para realizar las muestras; así mismo, agra-
Por último se comparan los espectros obtenidos decemos a la firma comercial Sandoz por suminis-
para la muestra con los patrones respectivos. trarnos también de forma gratuita el fármaco butal-
bital.
Resultados