UNIVERSIDAD NACIONAL DEL SANTA

FACULTAS DE INGENIERÍA
ESCUELA ACADÉMICA PROFESIONAL DE INGENIERÍA
AGRÓNOMA

PRÁCTICA N°: 5
TEMA: METAOLISMO MICROBIANO
ASIGNATURA: MICROBIOLOGÍA GENRERAL
DOCENTE: Ms. C. EDDY ESPEJO VARGAS
INTEGRANTES: LOYOLA CANO BRENDA ELIZABETH
VALVERDE MENDOZA CARLOS YANDIR
RAMOS LÓPEZ UBER

Nv. CHIMBOTE – PERÚ

2018
 METABOLISMO MICROBIANO
I. OBJETIVOS
 Determinar el metabolismo de Bacillus, Pseudomona, Enterobacter, y E. coli en
medios de cultivo de TSI, SIM, UREA Y CITRATO.
 Observar las reacciones de la catalasa en los cultivos de E. coli, Bacillus,
Pseudomona y Enterobacter.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

El término metabolismo se refiere al conjunto de reacciones químicas que tiene lugar
en la célula, y tiene tres funciones específicas:
1. obtener energía química del entorno, almacenarla, para utilizar luego en diferentes
funciones celulares.
2. convertir los nutrientes exógenos en unidades precursoras de los componentes
macromoleculares de la célula bacteriana.
3. formar y degradar moléculas necesarias para funciones celulares específicas, como,
por ejemplo, movilidad y captación de nutrientes.
Las células de los microorganismos, al igual que las de todos los seres vivos, por
medio de su metabolismo incorporan y transforman los diversos compuestos
obtenidos del medio ambiente, en compuestos requeridos para vivir, para su
crecimiento y para su reproducción. En estas transformaciones participan diferentes
enzimas que catalizan las reacciones de oxidación, reducción, hidrólisis, transferencia
de grupos, isomerización y síntesis, dando lugar a la degradación de los compuestos
incorporados (catabolismo) y a la síntesis de nuevos compuestos (anabolismo).
Las exoenzimas son secretadas por la célula y actúan fuera de ella sobre el sustrato,
disminuyendo el tamaño de las moléculas complejas en el medio ambiente, hasta
lograr un tamaño que pueda difundir al interior de la célula, donde servirán de sustrato
a las endoenzimas. Asimismo, cada grupo de microorganismos muestra una capacidad
enzimática diferente para transformar los compuestos, regida por su constitución
genética y por factores ambientales. Pueden poseer una batería reducida de enzimas
actuando sobre pocos sustratos o pueden presentar una amplia variedad de sistemas
enzimáticos (actuando sobre gran diversidad de sustratos
SUSTRATOS:
A) Citrato. algunas enterobacterias tienen la capacidad de usar citrato como única
fuente de carbono y energía.
Lectura e interpretación: La degradación del citrato como única fuente de carbono
origina la alcalinización del medio. Este aumento de ph se visualiza con el
indicador azul de bromotimol que vira a azul oscuro, dando una reacción positiva
si el crecimiento es visible; y como reacción negativa el color amarillo.
B) Urea. Evalúa en las bacterias la capacidad de utilizar la urea como fuente de
nitrógeno, mediante la enzima ureasa, que degrada la urea en dióxido de carbono
 y amoniaco. El amoniaco actúa como fuente de nitrógeno y capta protones,
transformándose en amonio y alcalinizando el medio. Contiene ro6o fenol como
indicador de ph, el cual vira el medio a fucsia cuando el ph se torna alcalino.
Lectura e interpretación: si es positivo el color será rojo y si es negativo será
amarillo.
C) SIM. El medio SIM es un medio semisólido destinado a verificar la movilidad,
producción de indol y de sulfuro de hidrógeno en un mismo tubo. Es útil para
diferenciar miembros de la familia Enterobacteriaceae.
D) H2S. el tiosulfato es reducido por algunos gérmenes a ácido sulfhídrico, el cual
reacciona con la sal férrica produciendo sulfuro de hierro que se manifiesta por
un precipitado negro en el medio (H2S positivo).
ACTIVIDAD CATALASA
Se trata de un ensayo muy simple que intenta determinar si la bacteria problema tiene
capacidad para degradar el peróxido de hidrógeno, uno de los agentes oxidantes
producidos como consecuencia de determinadas reacciones metabólicas oxidativas
propias del metabolismo aerobio. La enzima encargada de degradar este producto es
denominada catalasa y aparece en casi todos los microorganismos aerobios obligados
o facultativos. Existen sin embargo organismos anaerobios o microaerófilos que
carecen de dicha actividad, constituyendo esta prueba un importante elemento
taxonómico.
III. PROCEDIMIENTO

1. Primer experimento
 Rotular los tubos con el medio a usar.
 Coger un asa de siembra en punta y flamear al rojo vivo, se deja enfriar.
 Coger un cultivo bacteriano; sembrar por picadura central en la columna vertical
del medio.
 Incubar a 37°C por 24 horas.
 Realizar la lectura.

2. Actividad de la catalasa:
 Escoger cuatro laminas portaobjetos.
 Colocar en cada lámina cultivo de Bacillus, Pseudomona, Enterobacter y E. coli
respectivamente.
 Añadir una gota de agua oxigenada sobre una colonia del cultivo y observar si
de ésta se empiezan a desprender burbujas de oxígeno como consecuencia de la
actividad enzimática de la catalasa:
2H2O2 ==========> 2H2O + O2
IV. RESULTADOS

V. CONCLUSIONES
 Se demostró el metabolismo de Bacillus, Pseudomona, Eenterobacter y E. coli
en medios de cultivo de TSI, citrato, urea y SIM.
 Se observó la reacción de la catalasa donde salió positivo (se formó burbujas) para
la Pseudonoma y Bacillus; por otro lado, dio negativo en E. coli y Enterobacter.

VI. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICAS

Freeman, B. (1984). Tratado de Microbiología de Burrows. Edic: 21ª edición. Edit:
INTERAMERICANA. México. D.F.
Brock, T. (1993). Microbiología. Sexta edición. Prentice Hall Hispanoamericana S.A.
México.