UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE

CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA:

GUÍA PARA LAS PRÁCTICAS DE LABORATORIO, TALLER O CAMPO

PERIODO
ASIGNATURA: Cultivo de Tejidos Vegetales NIVEL: 6to
LECTIVO:
DOCENTE: Ing. Cristian Peña M.Sc. NRC: 2592 - 2605 PRÁCTICA N°: 2
LABORATORIO DONDE SE DESARROLLARÁ LA
Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales
PRÁCTICA:
TEMA DE LA
Preparación de medios de cultivo
PRÁCTICA:
INTRODUCCIÓN:
La preparación del medio de cultivo debe ser llevada a cabo mediante una secuencia de pasos
inalterables que garantizan las condiciones adecuadas de concentraciones y pH, necesarias para
que el explante responda como se espera durante el cultivo
OBJETIVOS:

 Identificar los componentes del medio de cultivo.

 Comprender los materiales y pasos que se requieren para la elaboración de un medio de cultivo.
 Elaborar un medio de cultivo.
MATERIALES:

REACTIVOS: Agua, fuente de carbono (azúcar), agar, INSUMOS: vasos de precipitación, balones de aforación,
soluciones stock/madre de sales minerales, vitaminas, pipetas, pisetas, agitadores
fitohormonas

EQUIPOS: Hotplate con agitación, medidor de pH.

MUESTRA: Ninguna

INSTRUCCIONES:

- Utilice ropa de protección: mandil, guantes, gafas, cabello recogido, zapato cerrado, etc.
- Verifique la disponibilidad de los equipos a usar en la práctica

ACTIVIDADES POR DESARROLLAR:

1. Preparación de medio de cultivo.

 En un balón poner una cama de agua.
 Para preparar 1 litro de medio colocar en el balón 100 mL de solución stock Macronutrientes, 100 ml de solución
stock Micronutrientes y 10 mL de solución stock de vitaminas
 Agregar los fitoreguladores según la concentración requerida (0.5 mg/L BAP y 3 mg/L 2,4-D para la práctica 4; 20
uM BAP y 0.54 uM ANA para la práctica 5; y 2 mg/L BAP y 0.5 mg/L AIA para la práctica 6)
 Agregar 30 g/L de sacarosa (diluido por separado)
 Agitar y ajustar pH (5.7 – 5.8)
 Agregar 7 g/L de agar (depende de la marca de agar a utilizar)
 Calentar con agitación hasta que el medio hierva.
 Dispensar en frascos de vidrio y taparlos (aproximadamente 30 mL por frasco)
 Autoclavar.
 UNIVERSIDAD DE LAS FUERZAS ARMADAS – ESPE
CÓDIGO: SGC.DI.505
VERSIÓN: 1.0
DEPARTAMENTO DE CIENCIAS DE LA VIDA Y LA AGRICULTURA FECHA ULTIMA
REVISIÓN: 26/10/16

CARRERA:

RESULTADOS OBTENIDOS:

- Obtener un medio de cultivo adecuado que contenga macro y micronutrientes, vitaminas, fitoreguladores, una fuente de
carbono y el agente gelificante.
-
CONCLUSIONES:

- Para la preparación de un medio de cultivo se debe utilizar macro y micronutrientes, vitaminas, fitoreguladores, una fuente
de carbono y el agente gelificante.

RECOMENDACIONES:

 No agregar el agente gelificante antes de ajustar el pH, ya que este cambia el pH del medio.

FIRMAS

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Nombre: Nombre: Nombre:

COORDINADOR DE ÁREA DE COORDINADOR DE LABORATORIOS
DOCENTE CONOCIMIENTO