PRÁCTICA No.

IDENTIFICACIÓN DE CARBOHIDRATOS POR MÉTODOS

CROMATOGRÁFICOS

Los carbohidratos o hidratos de carbono están formados por carbono (C),

hidrógeno (H) y oxígeno (O) con la fórmula general (CH2O)n. Los carbohidratos
incluyen azúcares, almidones, celulosa, y muchos otros compuestos que se
encuentran en los organismos vivientes.

Monosacáridos. Los monosacáridos o azúcares simples son los glúcidos

más sencillos, no se hidrolizan, es decir, no se descomponen en otros
compuestos más simples. Poseen de tres a siete átomos de carbono y su
fórmula empírica es (CH2O)n, donde n ≥ 3., simples pueden combinarse para
formar carbohidratos más complejos. Ejemplo de monosacáridos:

Disacárido, son un tipo de glúcidos formados por la condensación (unión) de

dos monosacáridos mediante un enlace O-glucosídico (con pérdida de una
molécula de agua) pues se establece en forma de éter siendo un átomo de
oxígeno el que une cada pareja de monosacáridos, mono o dicarbonílico, que
además puede ser α o β en función del -OH hemiacetal o hemicetal. Ejm.
Sacarosa: formada por la unión de una glucosa y una fructosa. A la
sacarosa se le llama también azúcar común. No tiene poder reductor.

 Lactosa: formada por la unión de una glucosa y una galactosa. Es el

azúcar de la leche. Tiene poder reductor .

 Maltosa, isomaltosa, trehalosa y celobiosa: formadas todas por la unión
de dos glucosas, son diferentes dependiendo de la unión entre las
glucosas. Todas ellas tienen poder reductor, salvo la trehalosa.
 El carácter reductor se da en un disacárido si uno de los monosacáridos que lo
forman tiene su carbono anomérico (o carbonílico) libre, es decir, si este
carbono no forma parte del enlace O-glucosídico. Dicho de otra forma, si el
enlace O-glucosídico es monocarbonílico el disacárido resultante será reductor
(maltosa, celobiosa, etc.), mientras que si el enlace O-glicosídico es
dicarbónílico el disacárido resultante será no reductor (sacarosa, trehalosa).

ENLACE GLICOSIDICO.- Es el enlace que se forma cuando el grupo alcohol

de un monosarido reacciona con el grupo alcohol de otro monosacárido,
desprendiéndose una molécula de agua

HIDROLISIS DE LA SACAROSA
La sacarosa no es un agente reductor, no forma osazonas Esto es porque el
enlace involucra el primer carbono de la glucosa y el segundo carbono de la
fructosa, y no queda grupos reductores disponibles. Cuando la sacarosa es
hidrolizada, los productos tienen una acción reductora.

La hidrólisis de la sacarosa (rotación óptica de +66.5°) produce una molécula

de glucosa (+52.5°) y una molécula de fructosa (-92°). Por lo tanto, los
productos cambian la dextro-rotación a levo-rotación. La mezcla molar de la
glucosa y fructosa así formada se llama azúcar invertido. La enzima que
produce la hidrólisis en la sacarosa se llama sacarasa o invertasa.

En presencia de (HCl) y en caliente, la sacarosa se hidroliza, es decir,

incorpora una molécula de agua y se descompone en los monosacáridos que
la forman, glucosa y fructosa, que así son reductores.

Si existe la presencia de un precipitado color rojo la prueba es positiva caso

contrario también existe la posibilidad aparecer una coloración verde lo que
indica una hidrólisis parcial de la sacarosa, considerando una prueba negativa.

Los polisacáridos son polímeros de monosacáridos unidos unos a otros por

enlaces glicosídicos. Los enlaces glicosídicos pueden ser hidrolizados por
ácidos relativamente fuertes o por enzimas específicas.

Los oligosacáridos, son carbohidratos que consisten de dos a diez azúcares

simples, son azucares reductores si uno de sus grupos carbonilos está libre
(no forma parte del enlace glicosídico).

HIDROLISIS DEL ALMIDON

El almidón es un polisacárido de reserva alimenticia predominante en las

plantas, constituido por amilosa y amilopectina. Tanto el almidón como los
productos de la hidrólisis del almidón constituyen la mayor parte de los
carbohidratos digestibles de la dieta habitual.

AMILOSA: Formado por moléculas de glucosa unidas por enlaces alfa 1-4.
AMILOPECTINA: formado por moléculas de glucosa con uniones alfa 1-4 y alfa
1-6, por lo que contiene ramificaciones.

Cromatografía. Cromatografía es el nombre dado a la técnica utilizada

para separar solutos en base a sus distribuciones diferenciales entre dos
fases, el sistema de solventes es la fase (fase móvil) que se mueve sobre la
otra fase (fase estacionaria). Los solutos se moverán con la fase móvil a una
tasa que dependerá de sus distribuciones diferenciales entre las dos fases.
Existen tres tipos de cromatografía: partición, intercambio iónico y
adsorción. La distancia que se mueve e soluto en relación a la distancia
que se mueve el solvente sirve como un medio conveniente para la
identificación de solutos. Esta tasa relativa de flujo es el valor de Rf para el
compuesto bajo las condiciones específicas del experimento.

distancia recorrida por el soluto (medida al centro de la mancha)

Rf = --------------------------------------------------------------------------------------

distancia recorrida por el solvente

Varios compuestos pueden tener el mismo valor de Rf en un sistema de

solventes particular; estos frecuentemente pueden ser separados corriendo
más de un cromatograma cada uno con un diferente sistema de solventes. Ya
que se deben usar idénticas condiciones para obtener el mismo valor de Rf de
un experimento a otro, es necesario siempre incluir un compuesto conocido
en un cromatograma para propósitos de comparación.