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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

S
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

A
RI
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE

A
INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

CU
PE
RO
TESIS
AG

Tecnologías de aprovechamiento de huesos para la


DE

obtención de sales a partir del beneficio de animales de


abasto
CA

(Technologies of utilization of bones to obtain salts from the


benefit of animals for slaughter)
TE

AUTOR: Br. Víctor Raúl Chávez Morales


IO

ASESOR: Ing. Gregorio Mayer Ascón Dionicio


BL

TRUJILLO – PERÚ
BI

2016

-i-
Esta obra ha sido publicada bajo la licencia Creative Commons Reconocimiento-No Comercial-Compartir bajola misma licencia 2.5 Perú.
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UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

S
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS

A
RI
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL

A
CU
TECNOLOGÍAS DE APROVECHAMIENTO DE HUESOS
PARA LA OBTENCIÓN DE SALES A PARTIR DEL
BENEFICIO DE ANIMALES DE ABASTO

PE
(TECHNOLOGIES OF UTILIZATION OF BONES TO OBTAIN
SALTS FROM THE BENEFIT OF ANIMALS FOR
SLAUGHTER) RO
AG

TESIS

PARA OBTENER EL TÍTULO DE:


DE

INGENIERO AGROINDUSTRIAL
CA

PRESENTADO POR EL BACHILLER:

VÍCTOR RAÚL CHÁVEZ MORALES


TE

SUSTENTADO Y APROBADO ANTE EL HONORABLE JURADO:


IO

PRESIDENTE : M.Sc. Carmen Rojas Padilla ………………


BL

SECRETARIO : M.Sc. Julio C. Rojas Naccha ………………


BI

MIEMBRO (ASESOR) : Ing. Gregorio M. Ascón Dionicio ……………...

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DEDICATORIA

A S
RI
No considerando el estudio como una obligación, sino como una oportunidad para

penetrar en el bello y maravilloso mundo del saber. Dedico este proyecto de tesis

A
a:

CU
Dios, por ser luz en mi camino y porque da sabiduría, y de su boca viene el

PE
conocimiento y la inteligencia. (Prov. 2:6)

RO
Esperanza Rasco Salazar, mi madre, por brindarme su amor, consejos y por ser
AG
un ejemplo de lucha, perseverancia, superación, humildad.

A Jorge y Segundo Chávez Rasco, papá y tío respectivamente, por su constante


DE

apoyo y porque siempre han luchado por darme lo mejor que han podido.
CA

Los seres más apreciables que son mis tías Lucila, Rosa, Isabel y Deysi por sus

constantes oraciones, por brindar y demostrar cada día su afecto, cariño y amor
TE

de madre a hijo.
IO

Mi tío Jorge Álvarez, por sus sabias palabras de aliento. Las cosas buenas llegan
BL

a los que saben esperar. Las mejores, a los que no se rinden, y luchan. Y las
BI

grandes bendiciones, a los que creen.

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S
AGRADECIMIENTOS

A
RI
Primeramente agradezco a Dios por darme salud, vida, una familia maravillosa y

por ser parte de este camino brindándome sabiduría, conocimiento, e inteligencia

A
para poder lograr uno de mis objetivos.

CU
Esta etapa de mi vida no lo hubiera logrado sin el apoyo de mi familia, fuente de

PE
apoyo constante en mis años de carrera profesional. Infinitamente agradecido con

RO
cada uno de ellos, no puedo dejar de mencionar a mi mamá Esperanza, pieza

fundamental en el desarrollo de este camino porque me brindó un amor


AG
desinteresado que un hijo busca encontrar, sin ello hubiera sido imposible

culminar mi profesión.
DE

Como no mencionar al Ing. Mayer, mi asesor de tesis, por brindarme la

oportunidad de recurrir a su capacidad y conocimiento científico. Es cierto no ha


CA

sido fácil, sin embargo, ha tenido toda la paciencia para guiarme en este proceso.
TE

Finalmente agradezco a mis amigos, aquellos que siempre estuvieron pendientes


IO

de mi progreso universitario, que día a día me dieron su apoyo cuando necesité

sin pedirme nada a cambio. Motivándome con sus palabras de aliento: En la lucha
BL

entre el arroyo y la roca siempre triunfa el arroyo no porque sea más fuerte sino
BI

porque persevera.

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INDICE

A S
RESUMEN .......................................................................... ¡Error! Marcador no definido.

RI
ABSTRACT ........................................................................ ¡Error! Marcador no definido.

A
1. INTRODUCCIÓN ......................................................... ¡Error! Marcador no definido.

CU
2. TECNOLOGIAS DE APROVECHAMIENTO DE HUESOS PARA OBTENCION DE
SALES ......................................................................... ¡Error! Marcador no definido.

3. USO Y APLICACIONES DE SALES MINERALES OBTENIDOS POR EL

PE
APROVECHAMIENTO DE TECNOLOGIA DE LOS HUESOS .................................... 6

3.1. Industria de fertilizantes .......................................................................................... 6

RO
3.2. Industria Biomédica ................................................................................................ 7

3.3. Industria Alimentaria ............................................................................................... 7


AG
3.4. Industria de Alimento Animal .................................................................................. 8

4. ANALISIS DE LAS TEC. DE APROVECHAMIENTO DE LOS HUESOS........................ 8

5. CONCLUSION ........................................................................................................................ 10
DE

6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS .................................................................................... 11

7. ANEXOS .................................................................................................................................. 14
CA
TE
IO
BL
BI

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RESUMEN

A S
El objetivo del presente trabajo es brindar información suficiente para conocer

RI
tecnologías de aprovechamiento de huesos para obtención de sales a partir del

A
beneficio de animales de abasto, con la finalidad de convertir una materia prima,

CU
no apta para el consumo humano, en un producto capaz de contribuir de manera

importante al crecimiento económico de las industrias relacionadas. Las

PE
metodologías aplicadas para obtención de sales resultaron ser eficientes, tal es el

caso en la cuantificación en harina de huesos de pollo con 19.80% de fosforo en

RO
forma de Pentóxido y 24.49% de calcio. También, se logró conocer diferentes

metodologías para la extracción de hidroxiapatita, resultando el proceso


AG

hidrotermal alcalino como el más ventajoso. Además de eso, las industrias donde

se utiliza estas tipos de sales son industrias de fertilizantes, biomédicas,


DE

alimentaria y alimento animal.


CA

Palabras clave: huesos, abasto, sales, tecnologías, industrias.


TE
IO
BL
BI

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S
ABSTRACT

A
RI
The aim of this study is to provide enough information to know harvesting bone

A
technologies to obtain salts from the benefit of animals for slaughter, in order to

CU
convert a raw material, unfit for human consumption, in a product capable of

contributing significantly to the economic growth of related industries. The

PE
methodologies used to obtain salts proved to be efficient, as is the case in the

RO
quantification chicken bone flour with 19.80% of phosphorus pentoxide shaped

and 24.49% calcium. Also, it managed to learn different methodologies for


AG
extraction of hydroxyapatite, resulting alkaline hydrothermal process as the most

advantageous. Besides that, the industries where use these types of salts are

fertilizer industries, biomedical, food and animal feed.


DE
CA
TE
IO

Keywords: bones, supply, salts, technologies, industries.


BL
BI

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1. INTRODUCCIÓN

S
En el Perú, la producción de carne durante los tres primeros meses del año 2015

A
RI
alcanzó 90 mil toneladas de peso en pie de vacuno, el sector porcino creció en 5%

con una producción de 45 mil toneladas, y finalmente, la producción de aves

A
alcanzó 412 mil toneladas. Las regiones que tuvieron mayor producción fueron

CU
Arequipa, Lima, Huánuco y La Libertad con 9, 7, 7 y 4 %, respectivamente. Esto

ha permitido considerar a la industria de la carne como una de las más atractivas

PE
en investigación de transformación de materia prima no comestible en un producto

RO
con perspectivas de un futuro muy prometedor de desarrollo (Benites, 2015).

El impacto ambiental que ocasiona los desperdicios de la industria de la carne es


AG
altamente significativo. Por consiguiente, se requiere la aplicación de estrategias

de manejo de aprovechamientos en huesos, que contribuyan con la disminución

de desechos sólidos (Quiroga, 1989)


DE

En el hombre y mamíferos superiores el hueso se compone de colágeno,

sustancia fundamental y minerales. El colágeno y la sustancia fundamental


CA

(mucopolisacáridos) comprenden la parte orgánica del hueso, mientras que la fase

inorgánica comprende las sales minerales (Dukes y Swenson, 1981). Desde el


TE

punto de vista de la ingeniería de tejidos, el hueso corresponde a un material


IO

multilaminar formado de varios tipos de componentes orgánicos como osteoblastos,

osteoclastos y colágeno, y varias sustancias inorgánicas como fósforo, calcio, sodio,


BL

potasio, magnesio, manganeso y flúor (Jensen , 2007).


BI

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La parte mineral generalmente ocupa entre el 65% y 70% mientras que la parte

orgánica entre el 30 al 35% sobre la base del peso seco. En su mayoría, el

S
componente inorgánico corresponde a hidroxiapatita, que representa cerca del

A
RI
50% del peso total del hueso. En adición a la hidroxiapatita, el hueso contiene

grandes cantidades de carbonato, citrato de sodio y magnesio. Como elementos

A
traza se encuentra hierro, zinc y cobre (Jensen, 2007).

CU
La Hidroxiapatita también puede obtenerse de otra especie animal, por

PE
transformación de materiales naturales como los esqueletos minerales de los

corales, conchas de mar, equinodermos y bovino, o puede ser sintetizada

artificialmente (Seckler, 1998).


RO
Con este trabajo se pretende conocer tecnologías de aprovechamiento de huesos
AG

para obtención de sales a partir del beneficio de animales de abasto como nueva

alternativa al desarrollo industrial, con un crecimiento económico, pues no implica


DE

la obtención de productos secundarios; sino, se aprovechan recursos

considerados muchas veces como material de descarte contribuyendo a disminuir


CA

la producción de desechos sólidos, y proporcionando a la vez una alternativa

rentable, aspectos que son objetivos de esta revisión.


TE
IO

2. TECNOLOGIAS DE APROVECHAMIENTO DE HUESOS PARA

OBTENCION DE SALES
BL
BI

Los procesos de uso y tratamiento de huesos, pueden ir desde simple técnicas

artesanales, hasta sofisticados sistemas de producción industrial. El proceso

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puede llevarse a cabo dentro de las instalaciones de la planta de trabajo, en áreas

previamente definidas o puede establecerse una industria independiente para su

S
transformación.

A
RI
 El desarrollo de la investigación cuantitativa del contenido de fosforo y

calcio en harina de huesos de pollo, se logró con metodología especificada,

A
CU
descrito en anexos 1, por la Asociación Oficial de Química Analítica. A

través de los métodos Titulométrico para la determinación de Calcio, y

PE
Espectrofotométrico para la determinación de Fósforo en forma de

Pentóxido de Fósforo (P2 O5), se obtuvo una cantidad promedio de 19.80%

RO
de Fósforo en forma de Pentóxido de fósforo (P 2O5), y 24.49% de Calcio.

En cuanto a la harina de huesos de res, se obtuvo un promedio de 26.58%


AG
de Pentóxido de fósforo (P2O5), y 29.86% de calcio, ambos datos muy

semejantes a lo teóricamente señalado, comercialmente se consideran


DE

abono fosfatado los que poseen de 16 a 46% de fosforo, y cantidades de

hasta 31.5% de calcio; esta semejanza nos da la pauta para considerar


CA

eficientes los método analíticos de cuantificación utilizados. (Horwitz, 1984).

 Mediante la metodología desarrollada por Orozco (2013), descrita en anexo


TE

2, se empleó un proceso de desproteinización por medio de cocción y

limpieza con ácido oxálico, Los resultados mostraron una eficiencia de la


IO

masa del material que está por debajo del 5%, ya que el proceso se inició
BL

con 6000 g de hueso femoral de cerdo y culminó con menos de 310 g de

hidroxiapatita natural de cerdo; los cuales son dependientes del proceso de


BI

calcinación y molienda. Además, las muestras tratadas a 800°C y 1000°C

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se observaron picos característicos de las fases cristalinas de

hidroxiapatita; sin embargo, para el caso de la muestra producida a 1200°C,

S
se desestabiliza por completo perdiendo la estructura cristalina

A
RI
característica de la hidroxiapatita.

A
 En la investigación desarrollada por Barakat (2009), y descrita en anexo 3,

CU
se usó tres procesos diferentes por descomposición térmica, agua

subcrítica y procesos hidrotermales alcalinos con la finalidad de obtener

PE
hidroxiapatita natural a partir de huesos de bovinos. Los resultados

obtenidos mostraron que los rendimientos fueron 61, 66, y 69 % con una

RO
relación de Calcio / fosforo de 1.56, 1.65 y 1.86 para la extracción de agua

subcrítica, descomposición térmica y alcalinas, respectivamente. Todos los


AG

valores obtenidos se encuentran dentro del rango aceptable para la

hidroxiapatita. Todos los métodos utilizados tienen la capacidad de eliminar


DE

los compuestos orgánicos presentes en los huesos de la especie bovina y

producir hidroxiapatita pura con un rendimiento promedio de 65%.


CA

 Sobczack (2009), aplicó hidrolisis ácida para obtener hidroxiapatita a partir

de huesos de diferentes tipos de animales, tomando como muestras huesos


TE

de cerdo. El tratamiento químico se realizó utilizando un agente moderado,

una solución de ácido láctico. Donde la concentración de calcio se


IO

determinó por titulación, y el fósforo, espectrofotométricamente; cuyo


BL

desarrollo experimental se explica en anexos 4. Y resultados obtenidos

muestran que el contenido de calcio y fósforo fueron 38% y 18%,


BI

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respectivamente, y cuya relación resultó ser superior al valor

estequiométrico ascendiendo de 1.67 a 1.70.

A S
 Con la finalidad de obtener sales de citrato de calcio y magnesio como

RI
ingrediente alimentario a partir de conchas de choro, Quispesivana (2007)

siguiendo metodología explicada en anexo 5, procedió a disolver los

A
CU
minerales mediante lixiviación ácida en ebullición, con un rendimiento del

95.94%. Los minerales disueltos, posteriormente precipitados en forma de

PE
sales de citrato, mostraron un contenido de calcio elemental de 20,5% y el

de magnesio de 0,0927%, lo que hizo posible que se elaborara un néctar de

RO
durazno enriquecido, el que aportó un 64,66% de la RDA de Ca para el

caso de la mujer posmenopáusica; y, sólo el 1,7% de los niveles de Mg.


AG

 Arboleda (2003), describe en anexo 6 que mediante la maceración de los

huesos de res con ácido clorhídrico diluido ya desengrasado a temperatura


DE

menor a 100 °C, logró obtener un precipitado que contiene fosfato dicálcico.

Los resultados mostraron que la temperatura mínima y el tiempo óptimo


CA

para desengrasar los huesos son 75°C y 15 minutos respectivamente.

Además, la cantidad de fosfato dicálcico obtenida por maceración de


TE

huesos con ácido es muy pequeña, alrededor de 4%, lo cual resulta poco

rentable para una empresa que no maneja volúmenes grandes de huesos.


IO

 Sittikulwitit (2004), logró su objetivo de determinar la biodisponibilidad de


BL

calcio de huesos de pollo en polvo en productos fortificados. Mediante un


BI

método de tratamiento alcalino, descrito en anexos 7, utilizando 3% de

NaOH y con una temperatura de 100°C para asegurar de que los huesos de

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pollo se encuentren en tratamiento para deshacer de todos los materiales

orgánicos, así como cualquier microbio antes de usar como un fortificante

S
de calcio. Los resultados mostraron que el hueso de pollo en polvo exhibió

A
RI
una excelente biodisponibilidad de calcio, bajo costos alternativo, y contiene

una relación entre calcio y fosforo de 2:1. Además, se mostró más alta

A
concentración de calcio biodisponible que la leche y varios productos

CU
enriquecidos en calcio, y fueron bien aceptados en productos de panadería.

PE
3. USOS Y APLICACIONES DE SALES MINERALES OBTENIDOS POR EL

RO
APROVECHAMIENTO DE TECNOLOGIA DE LOS HUESOS

El objetivo principal de la tecnología en los huesos es conseguir en abrir puertas


AG

para nuevas alternativas de producto útiles haciendo uso adecuado de tecnologías

válidas en la industria competitiva que aumente la posibilidad de hacer aplicable,


DE

generando un impacto directo a un futuro prometedor.

3.1. Industria de Fertilizantes


CA

En la cuantificación del contenido de calcio y fósforo en harina de hueso de pollo


TE

se obtuvo como resultado una nueva opción para ser utilizada como abono

orgánico, además del aporte nutricional que proveen al suelo, ayuda a mejorar su
IO

estructura, textura, aireación, retención de humedad, mayor desarrollo radicular en

los cultivos y favorecer el desarrollo de microorganismos beneficiosos (USAID,


BL

2000).
BI

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3.2. Industria Biomédica

S
La hidroxiapatita está siendo ampliamente utilizada en aplicaciones médicas por

A
su buena biocompatibilidad, osteoconductividad, agente no tóxico, no inflamatorio,

RI
y también es bioactivo es decir, tiene la capacidad de formar un enlace químico

directo con tejidos vivos (Elliott, 1994).

A
CU
Es altamente utilizado en las áreas de la medicina debido a la propiedad de actuar

como un biomaterial para implantes quirúrgicos y odontológicos; aplicables en

PE
ortopedia, odontología, cirugía ortognatica, oftalmología, laringología, y

traumatología (Lazic, 2001 y Piekarczyk, 1999).

3.3. Industria Alimentaria RO


AG
El fosfato dicálcico se utiliza principalmente en la industria alimentaria, como

suplemento mineral de Fósforo y Calcio, principalmente en cereales y bebidas

nutritivas en polvo como en chocolates, derivados lácteos, suplementos dietéticos


DE

en polvo. Así mismo es utilizado por su propiedad de ligar iones metálicos e

incrementar la actividad de los antioxidantes y estabilizar la textura de los


CA

vegetales enlatados. También se utiliza en algunas cremas dentales como un

agente de control de sarro (CFAIA, 2016).


TE

El fosforo y calcio son alternativas para brindar una aplicación de enriquecimiento a


IO

los alimentos como al néctar de durazno y a productos de panadería como pan,

galletas de mantequilla, pan integral y galletas de avena. Además, es bien


BL

aceptado cuando fue enriquecida en chips de camarón y pasta de chile, un


BI

aderezo (Kettawan, 2002).

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3.4. Industria de Alimento Animal

S
En la alimentación para ganado, el fosfato dicálcico, es utilizado como suplemento

A
de Fósforo y Calcio en las formulaciones. El fósforo mejora el peso de los

RI
animales, además de mejorar su aspecto, aumentar el rendimiento de leche

producida y ayudar a reducir las muertes por enfermedad (CFAIA, 2016).

A
CU
4. ANALISIS DE LAS TECNOLOGIAS DE APROVECHAMIENTO DE LOS

PE
HUESOS

En los últimos años la producción de carne se está incrementando, y la región La


RO
Libertad, no es ajena al acontecimiento que se viene desarrollando (Benites,

2015). Motivo por el cual existe cantidad de desechos de huesos por el beneficio
AG

de animales de abasto, por ello las investigaciones presentadas en este trabajo

nos da una referencia de cómo las tecnologías son aprovechadas en los huesos
DE

convirtiendo una materia prima no apta para el consumo humano, en un producto

capaz de generar un crecimiento económico en industrias de fertilizantes,


CA

biomédicas, alimentarias y de alimento animal.

En la actualidad, la industria avícola mantiene un interesante dinamismo,


TE

sostenida por la gran demanda de carne de pollo. Es por eso, que se da a conocer

una investigación en harina de huesos de pollo, resultando ser recomendable, por


IO

sus cantidades de calcio y, fosforo en forma de Pentóxido; teniendo en cuenta que


BL

tiene menor cantidad de elementos en comparación con harina de huesos de res,

esto es debido a que los huesos de este último son más rígidos y con estructura
BI

más compacta, de color clara que evidencia una elevada concentración de calcio.

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Por lo tanto, los métodos analíticos de cuantificación son considerados como

eficientes.

S
El conocer tecnologías para obtención de hidroxiapatita a partir de los huesos de

A
RI
animales de abasto, son considerados pertinentes porque permiten seleccionar

qué metodología es apropiada para tener un mayor rendimiento. La metodología

A
empleada por Orozco (2013) usando huesos de cerdo con edad de seis meses, no

CU
fue la ideal, ya que su eficiencia de la masa resultó ser muy baja. Sin embargo, el

uso de tres procesos diferentes desarrollados por Barakat (2009), en huesos de

PE
bovinos, logró eliminar compuestos orgánicos, produciendo hidroxiapatita pura;

RO
pero, de los tres métodos empleados, proceso hidrotermal alcalino, se presta con

buen rendimiento y relación entre calcio y fosforo. Así mismo, otra metodología
AG
aplicando hidrólisis ácida en huesos de diferentes tipos de animales, mostró que el

contenido de calcio y fosforo, resultaron con porcentajes bajos. Razones como

éstas, permiten tener como referencia que la metodología de proceso hidrotermal


DE

alcalino, resulta ser ventajoso y eficiente.

De acuerdo a la metodología anterior del proceso alcalino, Sittikulwitit (2004),


CA

logró determinar una excelente biodisponibilidad de calcio. Una vez más, permite

considerar que la metodología empleada es recomendable y, buena herramienta


TE

tecnológica para uso, con bajos costos y útil para aplicación en enriquecimientos
IO

de alimentos.
BL

En la actualidad, no se le ha dado la importancia necesaria al hecho de utilizar los

huesos, se han realizado pocas investigaciones, prueba de ello se encuentra en la


BI

investigación de obtención de sales de citrato de calcio y magnesio como

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ingrediente alimentario a partir de conchas de choro. Sin embrago, esta

metodología resultaría ser útil en desarrollarse, determinando su composición y los

S
beneficios de su uso en enriquecimientos de alimentos.

A
RI
En el país es necesario que se impulse proyectos de investigación sobre el uso de

materia orgánica considerada como desecho, que actualmente se está

A
CU
desaprovechando en el área industrial.

PE
5. CONCLUSIÓN

RO
Se logró conocer las tecnologías de aprovechamiento de huesos para la obtención

de sales del beneficio de animales de abasto, con el propósito de transformar una


AG

materia prima no comestible en un producto, capaz de generar una alternativa con

un valor económico en las industrias relacionadas. Además, las metodologías


DE

aplicadas, como en el caso de cuantificación de fosforo y calcio en harina de

huesos de pollo, obtención de hidroxiapatita y de otros minerales resultaron ser


CA

recomendable para la extracción de dichas sales.


TE
IO
BL
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6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

A S
Arboleda, L. 2003. Obtención de oseína, fosfato dicálcico y grasa a partir de

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hueso de res en la empresa Productos Alimenticios don Rafa Ltda. Tesis para

obtener el título de Ingeniera Química, Repositorio Institucional de UN.

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Colombia.

Barakat N.; Khil M.; Omran M.; Sheikh F.; Kim H. 2009. Extraction of pure natural

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hydroxyapatite from the bovine bones bio waste by three different methods,

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Benites, J. 2015. Producción de carne en el Perú. Minagri. Disponible en:

http://rpp.pe/economia/economia/minagri-produccion-pecuaria-crecio-casi-4-
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CFAIA. 2016. Asociación en China de alimentos aditivos e ingredientes.


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Dukes, H.; Swenson, M. 1981. Fisiología de los Animales Domésticos, Ediciones

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Elliott, C. 1994. Structure and Chemistry of the Apatites and Other Calcium
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Orthophosphates. Elsevier, Amsterdam.

Horwitz, W. 1984. Official methods of analysis of the Association of Official


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Analytical Chemists. Associate editors.14 ed. Washington, DC.1141 pp.


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BI

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Jensen, D.; Zhongrui L.; Pavel, I.; Dervishi, E.; Biris, A.S.; Jensen, P.; Biris, A.;

Lupu, D. 2007. Bone Tissue: A relationship between micro and nano structural

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composition and its corresponding electrostatic properties with applications in

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tissue engineering. Industry Applications Conference. 42nd IAS Annual

Meeting. IEEE. 55-59.

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Kettawan, A.; Sungpuag, P.; Chavasit, V.; Sirichakwal, P. 2002. Chicken bone

calcium extraction and its application as a food fortificant. Journal of National

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IO
BL
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ANEXOS

S
PROCESO EXPERIMENTAL PARA CUANTIFICAR LA CANTIDAD DE

A
FOSFORO Y CALCIO PRESENTES EN LA HARINA DE HUESOS DE POLLO

RI
A. Obtención de la harina de huesos

A
1. Colocar los huesos limpios en un recipiente de aluminio con agua destilada

CU
suficiente para cubrirlos.

2. Calentar en forma gradual hasta llegar a una temperatura máxima de 88°C,

PE
por un período de 6 a 8 horas, restituyendo la cantidad de agua si es

necesario.
RO
3. Dejar enfriar, y decantar el agua con grasa y restos de carne.
AG

4. Lavar los huesos con agua caliente, separando los últimos residuos de

grasa y sustancias adheridas si las hubiera.


DE

5. Extender los huesos sobre una superficie de cemento completamente

limpia, y dejarlos expuestos al sol, hasta que éstos estén bien secos.
CA

6. Una vez secos, someter a proceso de molienda, para obtener de esta

manera la harina de huesos.


TE

B. Cuantificación de Calcio
IO

1. Pesar 2.5 g de muestra y colocarla en un beaker de 250 mL.


BL

2. Añadir 30 mL de HNO3, y 10 mL de HCl, llevar a ebullición por 30 minutos.

Y luego, enfriar.
BI

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3. Transferir cuantitativamente a un frasco volumétrico de 250 mL llevar a

volumen, mezclar y filtrar si es necesario.

A S
4. Transferir una alícuota de 25 mL a un beaker y diluir a 100 mL. Añadir 2

RI
gotas de indicador de Azul de Bromofenol, y luego NH4OH (1+4) hasta que

el indicador cambie de amarillo a verde (no azul). Si se sobrepasa, regresar

A
CU
al color con HCl (1+4).

5. Diluir a 150 mL llevar a punto de ebullición, y agregar lentamente 30 mL de

PE
solución saturada caliente de (NH4)2C2O4 agitando constantemente.

6. Si el color cambia de verde a azul otra vez, ajustar a verde con HCl (1+4).
RO
Si cambia a amarillo, ajustar con NH4OH a verde.
AG
7. Enfriar a temperatura ambiente y dejar reposar toda la noche.

8. Filtrar sobrenadante a través de papel, y lavar el precipitado con NH4OH


DE

(1+50).

9. Colocar el papel con el precipitado en el beaker original, y añadir una


CA

mezcla de 125 mL de agua y 5 mL de H2SO4.

10. Calentar a una temperatura ≥ 70ºC, y titular con KMnO4 0.1N hasta la
TE

aparición de color rosado.

11. Corregir con blanco y calcular Calcio.


IO

1 mL KMnO4 0.1N = 2 mg de Ca
BL
BI

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C. Cuantificación de Fósforo

S
Preparación de la Curva Estándar

A
1. Pipetear alícuotas de 5 mL de las 7 soluciones estándar de Fósforo (anexo

RI
preparación de reactivos) en frascos volumétrico de 100 mL y añada 45 mL

A
de agua. Luego, en 5 minutos añadir a todas las soluciones estándares 20

CU
mL de reactivo Molibdatovanadato con bureta o pipeta, diluir a volumen y

dejar reposar por 10 minutos.

PE
2. Seleccionar 2 celdas de absorción y llenar ambas con estándar de 2 mg de

Pentóxido de fósforo (en alícuota de 5.0 mL). Colocar el espectrofotómetro


RO
a una λ=400 nm y ajustar a cero Absorbancia (A).
AG
3. Usando la celda muestra, determinar Absorbancia para los otros estándares

con ajuste a cero Absorbancia del instrumento con el estándar de 2 mg de

Pentóxido de fósforo (en alícuota de 5.0 mL). Después de cada


DE

determinación, vaciar y rellenar la celda conteniendo el estándar de 2 mg, y

reajustar, para evitar el error que puede darse por los cambios de
CA

temperatura. Plotear Absorbancia contra concentración de Pentóxido de

fósforo (P2O5) en mg/mL de la solución estándar.


TE

Preparación de la Solución de la Muestra


IO

1. Tratar 1 g de muestra como sigue: hervir suavemente 30-45 minutos con


BL

20-30 mL de HNO3 en un frasco adecuado (preferiblemente Kjeldahl en las

muestras que contienen grandes cantidades de materia orgánica) para


BI

oxidar toda la materia fácilmente oxidable.

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2. Enfriar y añadir 10-20 mL de HClO4 70-72%.

S
3. Hervir muy suavemente hasta que la solución sea incolora o cercano a ello,

A
y un vapor denso blanco aparezca en el frasco. No hervir a sequedad, las

RI
muestras contienen grandes cantidades de materia orgánica, aumentar la

temperatura a punto de evaporación, a 170ºC, por un período ≥1hr).

A
CU
4. Enfriar ligeramente, añadir 50 mL de agua, y hervir por pocos minutos.

5. Para contenido de hasta 5% de Pentóxido de fósforo (P 2O5), diluya a 250

PE
mL; para contenido mayor del 5% de P2O5, diluya a tal volumen que una

alícuota de 5 ó 10 mL contenga de 2-5 mg P2O5 (las soluciones deben estar

libre de óxido de nitrógeno y NOCl).


RO
AG
Determinación

1. Pipetear 5 ó 10 mL de solución muestra en un frasco de 100 mL, y agregar

45 mL de agua.
DE

2. Añadir 20 mL de reactivo Molibdatovanadato con bureta o pipeta.


CA

3. Diluir a volumen y dejar reposar por 10 minutos.

4. Determinar Absorbancia ajustando a cero Absorbancia con el estándar de 2


TE

mg de Pentóxido de fósforo (en alícuota de 5.0 mL).


IO

%P2O5 en muestra = mg P2O5 en la curva estándar x 100


mg de muestra en alícuota
BL
BI

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D. Preparación de Reactivos

S
Determinación de calcio:

A
RI
1. Ácido Clorhídrico (1+4): mezclar 1 parte de HCl con 4 partes de agua.

2. Azul de Bromofenol: disolver 0.1 g con 1.5 mL de NaOH 0.1N, y diluir a 25 mL.

A
CU
3. Hidróxido de Amonio (1+4): mezclar 1 parte de Hidróxido de Amonio con 4

partes de agua.

PE
4. Hidróxido de Amonio (1 +50): mezclar 1 parte de Hidróxido de Amonio con 50

partes de agua.
RO
5. Oxalato de Amonio, solución saturada: agregar al agua Oxalato de amonio
AG
hasta que éste ya no se disuelva con agitación.

6. Permanganato de potasio 0.1N: disolver 3.3 g de Permanganato de Potasio en


DE

1000 mL de agua, hervir 15 minutos, tapar y dejar reposar por lo menos 2 días

y filtrar. Estandarizar la solución como sigue: Pesar cuidadosamente 200 mg

de Oxalato de sodio previamente secado a 110ºC a peso constante, y


CA

disuélvalos en 250 mL de agua. Añada 7 mL de ácido sulfúrico, caliente a


TE

70ºC y luego lentamente añada la solución de permanganato de una bureta

con agitación constante hasta un color rosa pálido que persista 15 segundos.
IO

La temperatura al final de la titulación no debe ser menor de 60ºC. Calcule la

normalidad. Cada 6.700 mg de Oxalato de sodio es equivalente a 1 mL de


BL

Permanganato de potasio 0.1 N. Almacenar en frascos color ámbar y re


BI

estandarizar frecuentemente.

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Determinación de Fósforo:

S
1. Reactivo Molibdatovanadato: Disolver 40 g de Molibdato de amonio.4H20 en

A
400 mL de agua calentar y enfriar. Disolver 2 g de Vanadato de amonio en 250

RI
mL de agua calentar, enfriar y añadir 450 mL de ácido perclórico 70%.

A
Gradualmente añadir la solución de Molibdato a la solución de Vanadato con

CU
agitación, y diluir a 2 L.

2. Solución estándar de Fosfato: Secar Fosfato monobásico de potasio (KH2PO4,

PE
52.15% P2O5) por 2 horas a 105 °C. Preparar soluciones conteniendo 0.4-1.0

mg P2O5 / mL en incrementos de 0.1, pesando 0.0767, 0.0959, 0.1151, 0.1342,


RO
0.1534, 0.1726, y 0.1918 g de KH2PO4, y diluir cada una con agua hasta 100

mL. Preparar soluciones recientes, conteniendo 0.4 y 0.7 mg P2O5 / mL


AG

semanalmente.
DE

PROCESO EXPERIMENTAL DE HIDROXIAPATITA NATURAL OBTENIDA DEL


HUESO DE CERDO
CA

La síntesis de HA se inició a partir de hueso de cerdo con edad de sacrificio de


TE

aproximadamente seis meses. Debido a que el hueso se encuentra conformado

de una fase orgánica compuesta por proteínas, lípidos, agua y entre otros, se
IO

realizó un proceso de desproteinización con el fin de retirar todo esta materia


BL

orgánica.

Inicialmente, se emplearon 6 kg de hueso femoral de cerdo. La etapa de


BI

desproteinización consistió en lavar y cocinar el hueso por una hora en olla exprés

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en la cual se introdujeron 4 huesos de la parte femoral del cerdo; posteriormente

se desecharon las rótulas, membranas lipídicas y tejidos, reservando la parte del

S
hueso correspondiente a la diáfisis o hueso compacto y conservando 1,9 kg de

A
RI
diáfisis. El material resultante se trituró extrayéndole la médula y realizando un

lavado de manera convencional. El producto lavado es llevado a horno

A
microondas con una potencia de 700 W para permitir la cocción en agua durante

CU
30 min y separar los lípidos restantes del hueso. Se realizaron 5 repeticiones,

teniendo cuidado de reemplazar el agua de la cocción en cada proceso. El paso

PE
final del proceso de cocción se realiza sin agua con fin de secar el producto.

RO
El proceso anterior de lavado en el microondas no eliminó toda la componente

orgánica y lipídica, por lo que fue necesario realizar cinco procesos de lavado más
AG
en el horno con agua y detergente convencional cada uno de ellos durante 30 min

y cambiando el agua con detergente cada vez que se realizó el proceso de lavado.

El sucesivo proceso de cocción se realiza durante 22 minutos sin agua con fin de
DE

secar el producto.

Una vez terminados los dos procesos de lavado anteriores se realizó un lavado
CA

con ácido oxálico (H2C2O), durante 2 h con agitación magnética, con fin de

blanquear la superficie del hueso triturado. Una vez transcurridas las 2 h se lavó
TE

con 300 ml de agua destilada. Nuevamente se lavó con ácido oxálico durante 30
IO

minutos en agitación magnética, dejando actuar el ácido durante hora y media

más; reiteradamente se enjuaga con 300 ml de agua destilada. Terminadas las


BL

etapas de lavado con el ácido oxálico se realizaron dos repeticiones de secado


BI

durante 15 minutos sin agua en microondas. Finalizado todo el proceso de

secado, la masa de hueso que se conservó fue de 634.83 g.

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Con el fin de obtener un polvo fino y maleable se tomaron los trozos de hueso ya

secos y limpios y se realizaron procesos de molienda mediante un molino de bolas

S
de acero inoxidable 304, con dimensiones de 16 cm de alto y con un diámetro de

A
RI
15,5 cm, con cilindros de diferentes dimensiones desde 28,5 mm hasta 32 mm y

un diámetro de 31,6 mm dependiendo del tamaño del grano de las astillas de

A
hueso. La molienda se realizó con la relación de peso de 1 g de astillas de hueso

CU
por cada 10 g de acero en bolas, hasta obtener un polvo fino con un grano

promedio de 38 µm

PE
El proceso final de síntesis se realizó mediante un tratamiento térmico que inicia a

RO
temperatura ambiente hasta 800°C, 1000°C y 1200°C, con una rampa de

temperatura de 10 °C por minuto, manteniendo la temperatura limite durante 24 h,


AG
con el fin de determinar la influencia de la temperatura en la formación de los

cristales y enlaces característicos de la HA.

Las caracterizaciones estructurales se realizaron mediante difracción de rayos X


DE

(XRD) en un equipo RIGAKU, MINIFLEX II, con ánodo de cobre (kα = 1.5406 Å)

utilizando un voltaje de 30kV y un tamaño de paso 0.020° en 2θ.


CA

Las caracterizaciones composicionales se realizaron mediante transformada de

Fourier en el infrarrojo (FT-IR) en un equipo Spectrum BX-II.


TE
IO
BL
BI

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PROCESO EXPERIMENTAL DE HIDROXIAPATITA NATURAL DE HUESOS DE


BOVINOS POR TRES METODOS DIFERENTES

A S
Preparación de Huesos de Bovino

RI
Los huesos de la especie bovina se lavaron cuidadosamente con agua y acetona

A
para eliminar las grasas y otras impurezas. Después, los huesos se han secado a

CU
160°C durante 48 h. Los huesos secos limpios se muelen al tamaño de partícula

inferior a 450 micras.

PE
1. Proceso de Agua Subcrítica

RO
Autoclave cilíndrico de acero inoxidable hidrotermal con diámetro interno de 6 cm,

externo de 7,4 cm y altura de 15 cm fue utilizado en este proceso. Los huesos


AG

triturados se añadieron a agua desionizada a relación de sólido a líquido de peso

de 1:40. La mezcla se colocó en un crisol de teflón dentro de la autoclave de acero


DE

inoxidable. El gas nitrógeno se ha utilizado para eliminar el oxígeno disuelto del

agua y la atmósfera que rodea el crisol de teflón. La autoclave se cerró


CA

herméticamente y se calentó en baño de aceite de silicio a 275°C durante 1 h. La

autoclave se enfría por enfriamiento en gran cantidad de agua fría. La mezcla


TE

obtenida se filtró; el producto sólido se lavó con agua destilada y se seca a 80°C

durante 30 min. Por lo tanto, el agua subcrítica se ha invocado para extraer


IO

muchos compuestos orgánicos complejos.


BL
BI

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2. Hidrólisis Alcalina Hidrotermal

S
El hidróxido de sodio (96,5% de pureza,) se utilizó en la hidrólisis alcalina

A
hidrotérmica de colágeno. Los huesos triturados se mezclaron con la solución de

RI
25% en peso de hidróxido de sodio con una relación en peso de líquido / sólido de

A
1:40 y se calienta a 250°C durante 5 h. La misma autoclave de acero inoxidable

CU
hidrotermal antes mencionado fue tomada en este proceso. En consecuencia, en

este estudio, el proceso de hidrólisis alcalina hidrotérmica en una autoclave se ha

PE
empleado para hidrolizar el colágeno y los otros compuestos orgánicos presentes

en los huesos de la especie bovina.

3. Descomposición Térmica
RO
AG
En el proceso de descomposición térmica, 1 g de polvo de hueso bovino se colocó

en un crisol de alúmina abierto después se calentó en el horno a velocidad de

calentamiento de 10°C/min. La muestra se calentó a 750°C durante 6 h. El


DE

calentamiento directo del hueso bovino se hizo para descomponer el colágeno y

otros compuestos orgánicos que se pueden eliminar por calcinación.


CA

4. Caracterizaciones
TE

Morfología de la superficie se estudió mediante microscopía electrónica de barrido

(SEM, JEOL JSM-5900, Japón) equipado con energía dispersiva de rayos X


IO

(EDX). Información acerca de la fase y la cristalinidad se obtuvo mediante el uso


BL

del difractómetro Rigaku de rayos X (XRD, Rigaku, Japón) con Cu Kα (λ = 1,540

Å) radiación sobre ángulo de Bragg que van de 20 a 55°. Los patrones de


BI

difracción de electrones del área seleccionada se obtuvieron con microscopio

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electrónico de transmisión (TEM, JEOL JEM-2010, Japón) operado a 200 kV. La

caracterización espectroscópica ha sido investigado por transformación de Fourier

S
de infrarrojos (FT-IR), los espectros se registraron como pastillas de KBr utilizando

A
RI
Varian FTS 1000 FT-IR, intervalo espectral infrarrojo medio, con detector DTGS

refrigerado, serie de Scimitar, Varian Inc., Australia. Las propiedades térmicas han

A
sido estudiadas por el analizador térmico gravimétrico (TGA, Pyris1, PerkinElmer

CU
Inc., EE.UU.).

PE
PROCESO EXPERIMENTAL DE HIDROXIAPATITA A PARTIR DE HUESOS DE
DIFERENTES TIPOS DE ANIMALES
RO
En la investigación, se aplicó hidrólisis ácida en los huesos de cerdos. El
AG

tratamiento químico se realizó utilizando un agente moderado, es decir, una

solución de ácido láctico, y condiciones templadas, es decir, una temperatura de


DE

125-135 °C y presión de 0,26-0,30 MPa. Contrariamente a la hidrólisis alcalina,

este método elimina el problema de los peligrosos residuos alcalinos. La pulpa de


CA

hueso desengrasado y desproteinizado, llamado lodo de hueso, se aplicó como

materia prima.
TE

En el proceso de calcinación se obtuvo hidroxiapatita en dos etapas a


IO

temperaturas de 650°C y 950°C, respectivamente, para cada etapa. El material fue

calcinado a la máxima temperatura durante 3 horas. El proceso de calcinación se


BL

realizó en un horno de cámara con calefacción eléctrica en el medio ambiente. En


BI

todas las pruebas, se utilizó una fracción de tamiz de dimensión por debajo de

0.063 mm.

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Después de la exmineralización de la muestra anterior en la mezcla de ácidos

nítrico y clorhídrico concentrado. Se determinó el contenido de fósforo

S
espectrofotométricamente con un espectrofotómetro Marcel Media UV-VIS. Este

A
RI
método consiste en la formación de un complejo de fósforo-vanadio-molibdeno de

color amarillo y una medición fotométrica de absorbancia a una longitud de onda

A
de 430 nm. El contenido de calcio fue determinado con un método de titulación

CU
complejométrica utilizando versenato disódico. El método consiste en disolver una

muestra en ácido nítrico, la precipitación de fosfatos como bismuto (III) de fosfato

PE
(v) BiPO4, y luego determinar el contenido de calcio por titulación complejométrica

RO
con versenato disódico (EDTA) en presencia de una mezcla de indicadores

(calceína y timolftaleína).
AG

PROCESO EXPERIMENTAL PARA OBTENER SALES DE CITRATO Y


MAGNESIO A PARTIR DE CONCHAS DE CHORO
DE

Preparación
CA

Las conchas fueron limpiadas manualmente con un cuchillo y lavadas con agua

potable; posteriormente fueron secadas en estufa a 90ºC por 30 min. Antes de ser
TE

molidas en un molino de martillos con número de malla 40, para disminuir el


IO

tamaño de partícula y aumentar la superficie de contacto en el momento de

realizar la lixiviación ácida de los minerales.


BL

1. Lixiviación ácida: Se realizó en un vaso de precipitado por una hora a


BI

ebullición en campana extractora, añadiendo primero las conchas de choro

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molido y agua destilada en una cantidad aproximada de 300 ml, lo suficiente

para cubrir con agua las conchas de choro molido, en esta parte de la

S
operación se agregó el HCl concentrado lenta y fraccionadamente, luego se

A
RI
adicionó agua destilada hasta completar 1,8 litros; al término de esta

operación se dejó enfriar, para asegurar la precipitación de compuestos y

A
elementos indeseables tales como la Sílice; As, Hg y Pb. El precipitado se

CU
eliminó por medio de una filtración; este precipitado fue analizado para

determinar la cantidad de metales pesados eliminados, así como la cantidad

PE
de Ca que permaneció sin disolverse. Se quedó con el filtrado para la

siguiente operación.
RO
2. Precipitación de sales de Ca y Mg: Al filtrado de la operación anterior se le
AG
adicionó una solución de ácido cítrico 60% (p/v) en proporción 1,3:1 (ácido

cítrico: concha de choro molido), inmediatamente seguido de una solución de

KOH al 60% (p/v) en proporción 1,5:1 (ácido cítrico: concha de choro molido).
DE

Luego se llevó a ebullición por 20 min. En el proceso de ebullición se formó

continuamente un precipitado blanco, en su mayor parte constituido de sales


CA

de citrato de Ca y citrato de Mg. Este precipitado fue separado del

sobrenadante por filtración.


TE

3. Lavado: Para eliminar los restos de ácido y base del precipitado, se realizaron
IO

tres ciclos de lavado con agua destilada. Aquí se eliminó gran parte de Al, Cu,

Cd y Cr.
BL

4. Secado: Se realizó en estufa a 80 ºC por 6 horas.


BI

5. Molienda: Se utilizó un molino de martillos, con malla Nº 120.

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6. Tamizado: Realizado con un tamizador Ro-Tap. Esta operación se hizo con el

fin de adicionar al néctar el producto lo más fino posible (< 75 μm). También

S
se hizo el estudio de solubilidad en agua para la fracción de finos de las sales

A
RI
de citrato obtenidas. Éstas fueron envasadas en frascos de vidrio, hasta el

momento de su uso.

A
CU
ESQUEMA DE OBTENCION DE SALES DE CALCIO Y MAGNESIO

PE
RO
AG
DE
CA
TE
IO
BL
BI

Figura 1. Esquema de obtención de Calcio y Magnesio a partir de conchas de


choro.

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PROCESO EXPERIMENTAL PARA OBTENER FOSFATO DICALCICO A


PARTIR DE HUESO DE RES

A S
Es conveniente una trituración previa, aunque no sea absolutamente precisa; pero

RI
disminuye la duración de la maceración con los ácidos.

A
Se ha conducido a desengrasar los huesos a bajas temperaturas. Se trabajó en

CU
una marmita que posee un sistema de calefacción por resistencias, las cuales

proporcionan al agua el calor necesario para alcanzar la temperatura deseada. Se

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optó por mantener la temperatura a 75°C y aumentar el tiempo de desengrasado a

15 minutos. Generalmente se emplean 4-6 depósitos de maceración, formando un

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sistema continuo y entrelazados entre sí, para que los huesos frescos se pongan

en contacto con un ácido clorhídrico durante 24 horas, al cabo de este tiempo, la


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solución pasa por varios depósitos con huesos y enriquecido en fosfato, de

manera que la lejía al abandonar el depósito no contenga ácido libre. El ácido


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clorhídrico fresco llega, por el contrario, al depósito donde se encuentran los

huesos que han sido sometidos por mayor tiempo a tratamiento con ácido y por lo
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tanto deben estar agotados (oseína casi pura). La entrada del ácido a los

depósitos se realiza por la parte superior; las lejías son evacuadas por la parte
TE

inferior e introducida al depósito siguiente por encima, utilizando de esta manera la

gravedad.
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Cuando los huesos están triturados, al ponerse en contacto con la lejía que ya ha
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disuelto mucho fosfato y contiene poco ácido libre, se verifica una doble

descomposición entre el fosfato monocálcico disuelto en la lejía y el fosfato


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tricálcico de los huesos, o con el carbonato de cal de los mismos, dando origen al

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fosfato dicálcico. Este se separa en forma sólida y se reúne con los huesos,

formando bloques que resisten tenazmente a la acción del ácido.

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Las lejías saturadas que salen del depósito, se recogen en fosas y luego se

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precipita en mecanismos agitadores con lechada de cal. El precipitado de fosfato

dicálcico se lava y se recoge en filtros prensa, filtros de aspiración o centrífugas.

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ESQUEMA DE OBTENCION DE FOSFATO DICALCICO

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Figura 2. Esquema de obtención de fosfato dicálcico a partir de huesos de res.

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PROCESO EXPERIMENTAL PARA OBTENER CALCIO DE HUESOS DE


POLLO

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Preparación de Hueso he Pollo en Polvo

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Se preparó mediante un método de tratamiento alcalino utilizando 3% de NaOH y

el hueso neutralizado se secó a 100°C. Esto era para asegurarse de que los

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huesos de pollo en polvo se encuentren en tratamiento para deshacerse de todos

CU
los materiales orgánicos, así como cualquier microbio antes de usar como un

fortificante de calcio.

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