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S
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
A
RI
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE
A
INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
CU
PE
RO
TESIS
AG
TRUJILLO – PERÚ
BI
2016
-i-
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S
FACULTAD DE CIENCIAS AGROPECUARIAS
A
RI
ESCUELA ACADÉMICO PROFESIONAL DE INGENIERÍA AGROINDUSTRIAL
A
CU
TECNOLOGÍAS DE APROVECHAMIENTO DE HUESOS
PARA LA OBTENCIÓN DE SALES A PARTIR DEL
BENEFICIO DE ANIMALES DE ABASTO
PE
(TECHNOLOGIES OF UTILIZATION OF BONES TO OBTAIN
SALTS FROM THE BENEFIT OF ANIMALS FOR
SLAUGHTER) RO
AG
TESIS
INGENIERO AGROINDUSTRIAL
CA
-ii-
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DEDICATORIA
A S
RI
No considerando el estudio como una obligación, sino como una oportunidad para
penetrar en el bello y maravilloso mundo del saber. Dedico este proyecto de tesis
A
a:
CU
Dios, por ser luz en mi camino y porque da sabiduría, y de su boca viene el
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conocimiento y la inteligencia. (Prov. 2:6)
RO
Esperanza Rasco Salazar, mi madre, por brindarme su amor, consejos y por ser
AG
un ejemplo de lucha, perseverancia, superación, humildad.
apoyo y porque siempre han luchado por darme lo mejor que han podido.
CA
Los seres más apreciables que son mis tías Lucila, Rosa, Isabel y Deysi por sus
constantes oraciones, por brindar y demostrar cada día su afecto, cariño y amor
TE
de madre a hijo.
IO
Mi tío Jorge Álvarez, por sus sabias palabras de aliento. Las cosas buenas llegan
BL
a los que saben esperar. Las mejores, a los que no se rinden, y luchan. Y las
BI
-iii-
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S
AGRADECIMIENTOS
A
RI
Primeramente agradezco a Dios por darme salud, vida, una familia maravillosa y
A
para poder lograr uno de mis objetivos.
CU
Esta etapa de mi vida no lo hubiera logrado sin el apoyo de mi familia, fuente de
PE
apoyo constante en mis años de carrera profesional. Infinitamente agradecido con
RO
cada uno de ellos, no puedo dejar de mencionar a mi mamá Esperanza, pieza
culminar mi profesión.
DE
sido fácil, sin embargo, ha tenido toda la paciencia para guiarme en este proceso.
TE
sin pedirme nada a cambio. Motivándome con sus palabras de aliento: En la lucha
BL
entre el arroyo y la roca siempre triunfa el arroyo no porque sea más fuerte sino
BI
porque persevera.
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INDICE
A S
RESUMEN .......................................................................... ¡Error! Marcador no definido.
RI
ABSTRACT ........................................................................ ¡Error! Marcador no definido.
A
1. INTRODUCCIÓN ......................................................... ¡Error! Marcador no definido.
CU
2. TECNOLOGIAS DE APROVECHAMIENTO DE HUESOS PARA OBTENCION DE
SALES ......................................................................... ¡Error! Marcador no definido.
PE
APROVECHAMIENTO DE TECNOLOGIA DE LOS HUESOS .................................... 6
RO
3.2. Industria Biomédica ................................................................................................ 7
5. CONCLUSION ........................................................................................................................ 10
DE
7. ANEXOS .................................................................................................................................. 14
CA
TE
IO
BL
BI
-v-
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RESUMEN
A S
El objetivo del presente trabajo es brindar información suficiente para conocer
RI
tecnologías de aprovechamiento de huesos para obtención de sales a partir del
A
beneficio de animales de abasto, con la finalidad de convertir una materia prima,
CU
no apta para el consumo humano, en un producto capaz de contribuir de manera
PE
metodologías aplicadas para obtención de sales resultaron ser eficientes, tal es el
RO
forma de Pentóxido y 24.49% de calcio. También, se logró conocer diferentes
hidrotermal alcalino como el más ventajoso. Además de eso, las industrias donde
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S
ABSTRACT
A
RI
The aim of this study is to provide enough information to know harvesting bone
A
technologies to obtain salts from the benefit of animals for slaughter, in order to
CU
convert a raw material, unfit for human consumption, in a product capable of
PE
methodologies used to obtain salts proved to be efficient, as is the case in the
RO
quantification chicken bone flour with 19.80% of phosphorus pentoxide shaped
advantageous. Besides that, the industries where use these types of salts are
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1. INTRODUCCIÓN
S
En el Perú, la producción de carne durante los tres primeros meses del año 2015
A
RI
alcanzó 90 mil toneladas de peso en pie de vacuno, el sector porcino creció en 5%
A
alcanzó 412 mil toneladas. Las regiones que tuvieron mayor producción fueron
CU
Arequipa, Lima, Huánuco y La Libertad con 9, 7, 7 y 4 %, respectivamente. Esto
PE
en investigación de transformación de materia prima no comestible en un producto
RO
con perspectivas de un futuro muy prometedor de desarrollo (Benites, 2015).
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La parte mineral generalmente ocupa entre el 65% y 70% mientras que la parte
S
componente inorgánico corresponde a hidroxiapatita, que representa cerca del
A
RI
50% del peso total del hueso. En adición a la hidroxiapatita, el hueso contiene
A
traza se encuentra hierro, zinc y cobre (Jensen, 2007).
CU
La Hidroxiapatita también puede obtenerse de otra especie animal, por
PE
transformación de materiales naturales como los esqueletos minerales de los
para obtención de sales a partir del beneficio de animales de abasto como nueva
OBTENCION DE SALES
BL
BI
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S
transformación.
A
RI
El desarrollo de la investigación cuantitativa del contenido de fosforo y
A
CU
descrito en anexos 1, por la Asociación Oficial de Química Analítica. A
PE
Espectrofotométrico para la determinación de Fósforo en forma de
RO
de Fósforo en forma de Pentóxido de fósforo (P 2O5), y 24.49% de Calcio.
masa del material que está por debajo del 5%, ya que el proceso se inició
BL
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S
se desestabiliza por completo perdiendo la estructura cristalina
A
RI
característica de la hidroxiapatita.
A
En la investigación desarrollada por Barakat (2009), y descrita en anexo 3,
CU
se usó tres procesos diferentes por descomposición térmica, agua
PE
hidroxiapatita natural a partir de huesos de bovinos. Los resultados
obtenidos mostraron que los rendimientos fueron 61, 66, y 69 % con una
RO
relación de Calcio / fosforo de 1.56, 1.65 y 1.86 para la extracción de agua
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A S
Con la finalidad de obtener sales de citrato de calcio y magnesio como
RI
ingrediente alimentario a partir de conchas de choro, Quispesivana (2007)
A
CU
minerales mediante lixiviación ácida en ebullición, con un rendimiento del
PE
sales de citrato, mostraron un contenido de calcio elemental de 20,5% y el
RO
durazno enriquecido, el que aportó un 64,66% de la RDA de Ca para el
menor a 100 °C, logró obtener un precipitado que contiene fosfato dicálcico.
huesos con ácido es muy pequeña, alrededor de 4%, lo cual resulta poco
NaOH y con una temperatura de 100°C para asegurar de que los huesos de
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S
de calcio. Los resultados mostraron que el hueso de pollo en polvo exhibió
A
RI
una excelente biodisponibilidad de calcio, bajo costos alternativo, y contiene
una relación entre calcio y fosforo de 2:1. Además, se mostró más alta
A
concentración de calcio biodisponible que la leche y varios productos
CU
enriquecidos en calcio, y fueron bien aceptados en productos de panadería.
PE
3. USOS Y APLICACIONES DE SALES MINERALES OBTENIDOS POR EL
RO
APROVECHAMIENTO DE TECNOLOGIA DE LOS HUESOS
se obtuvo como resultado una nueva opción para ser utilizada como abono
orgánico, además del aporte nutricional que proveen al suelo, ayuda a mejorar su
IO
2000).
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S
La hidroxiapatita está siendo ampliamente utilizada en aplicaciones médicas por
A
su buena biocompatibilidad, osteoconductividad, agente no tóxico, no inflamatorio,
RI
y también es bioactivo es decir, tiene la capacidad de formar un enlace químico
A
CU
Es altamente utilizado en las áreas de la medicina debido a la propiedad de actuar
PE
ortopedia, odontología, cirugía ortognatica, oftalmología, laringología, y
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S
En la alimentación para ganado, el fosfato dicálcico, es utilizado como suplemento
A
de Fósforo y Calcio en las formulaciones. El fósforo mejora el peso de los
RI
animales, además de mejorar su aspecto, aumentar el rendimiento de leche
A
CU
4. ANALISIS DE LAS TECNOLOGIAS DE APROVECHAMIENTO DE LOS
PE
HUESOS
2015). Motivo por el cual existe cantidad de desechos de huesos por el beneficio
AG
nos da una referencia de cómo las tecnologías son aprovechadas en los huesos
DE
sostenida por la gran demanda de carne de pollo. Es por eso, que se da a conocer
esto es debido a que los huesos de este último son más rígidos y con estructura
BI
más compacta, de color clara que evidencia una elevada concentración de calcio.
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eficientes.
S
El conocer tecnologías para obtención de hidroxiapatita a partir de los huesos de
A
RI
animales de abasto, son considerados pertinentes porque permiten seleccionar
A
empleada por Orozco (2013) usando huesos de cerdo con edad de seis meses, no
CU
fue la ideal, ya que su eficiencia de la masa resultó ser muy baja. Sin embargo, el
PE
bovinos, logró eliminar compuestos orgánicos, produciendo hidroxiapatita pura;
RO
pero, de los tres métodos empleados, proceso hidrotermal alcalino, se presta con
buen rendimiento y relación entre calcio y fosforo. Así mismo, otra metodología
AG
aplicando hidrólisis ácida en huesos de diferentes tipos de animales, mostró que el
logró determinar una excelente biodisponibilidad de calcio. Una vez más, permite
tecnológica para uso, con bajos costos y útil para aplicación en enriquecimientos
IO
de alimentos.
BL
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S
beneficios de su uso en enriquecimientos de alimentos.
A
RI
En el país es necesario que se impulse proyectos de investigación sobre el uso de
A
CU
desaprovechando en el área industrial.
PE
5. CONCLUSIÓN
RO
Se logró conocer las tecnologías de aprovechamiento de huesos para la obtención
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6. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS
A S
Arboleda, L. 2003. Obtención de oseína, fosfato dicálcico y grasa a partir de
RI
hueso de res en la empresa Productos Alimenticios don Rafa Ltda. Tesis para
A
CU
Colombia.
Barakat N.; Khil M.; Omran M.; Sheikh F.; Kim H. 2009. Extraction of pure natural
PE
hydroxyapatite from the bovine bones bio waste by three different methods,
RO
Benites, J. 2015. Producción de carne en el Perú. Minagri. Disponible en:
http://rpp.pe/economia/economia/minagri-produccion-pecuaria-crecio-casi-4-
AG
en-enero-de-2015-noticia-776966.
Elliott, C. 1994. Structure and Chemistry of the Apatites and Other Calcium
TE
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Jensen, D.; Zhongrui L.; Pavel, I.; Dervishi, E.; Biris, A.S.; Jensen, P.; Biris, A.;
Lupu, D. 2007. Bone Tissue: A relationship between micro and nano structural
S
composition and its corresponding electrostatic properties with applications in
A
RI
tissue engineering. Industry Applications Conference. 42nd IAS Annual
A
CU
Kettawan, A.; Sungpuag, P.; Chavasit, V.; Sirichakwal, P. 2002. Chicken bone
PE
Research Council Thailand 34 (2): 163–180.
Lazic, S.; Zec, S.; Miljevic, N; Milonjic, S. 2001. The Effect of Temperature on the
RO
Properties of the ha Precipitated From Calcium Hydroxide and Phosphoric
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S
durazno (Prunus persica L.) variedad blanquillo. Rev. Soc. Quím Perú, 73(4):
A
RI
235-248.
Seckler, M.; Carrodeguas, R.; Derenzo, S.; Giulietti, M.; Rodríguez, R. 1998.
A
CU
Técnicas de obtención de hidroxiapatita y otros fosfatos de calcio. II Curso
PE
Cartagena de Indas.
RO
calcium from chicken bone extract powder and its fortified products. Journal of
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ANEXOS
S
PROCESO EXPERIMENTAL PARA CUANTIFICAR LA CANTIDAD DE
A
FOSFORO Y CALCIO PRESENTES EN LA HARINA DE HUESOS DE POLLO
RI
A. Obtención de la harina de huesos
A
1. Colocar los huesos limpios en un recipiente de aluminio con agua destilada
CU
suficiente para cubrirlos.
PE
por un período de 6 a 8 horas, restituyendo la cantidad de agua si es
necesario.
RO
3. Dejar enfriar, y decantar el agua con grasa y restos de carne.
AG
4. Lavar los huesos con agua caliente, separando los últimos residuos de
limpia, y dejarlos expuestos al sol, hasta que éstos estén bien secos.
CA
B. Cuantificación de Calcio
IO
Y luego, enfriar.
BI
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A S
4. Transferir una alícuota de 25 mL a un beaker y diluir a 100 mL. Añadir 2
RI
gotas de indicador de Azul de Bromofenol, y luego NH4OH (1+4) hasta que
A
CU
al color con HCl (1+4).
PE
solución saturada caliente de (NH4)2C2O4 agitando constantemente.
6. Si el color cambia de verde a azul otra vez, ajustar a verde con HCl (1+4).
RO
Si cambia a amarillo, ajustar con NH4OH a verde.
AG
7. Enfriar a temperatura ambiente y dejar reposar toda la noche.
(1+50).
10. Calentar a una temperatura ≥ 70ºC, y titular con KMnO4 0.1N hasta la
TE
1 mL KMnO4 0.1N = 2 mg de Ca
BL
BI
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C. Cuantificación de Fósforo
S
Preparación de la Curva Estándar
A
1. Pipetear alícuotas de 5 mL de las 7 soluciones estándar de Fósforo (anexo
RI
preparación de reactivos) en frascos volumétrico de 100 mL y añada 45 mL
A
de agua. Luego, en 5 minutos añadir a todas las soluciones estándares 20
CU
mL de reactivo Molibdatovanadato con bureta o pipeta, diluir a volumen y
PE
2. Seleccionar 2 celdas de absorción y llenar ambas con estándar de 2 mg de
reajustar, para evitar el error que puede darse por los cambios de
CA
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S
3. Hervir muy suavemente hasta que la solución sea incolora o cercano a ello,
A
y un vapor denso blanco aparezca en el frasco. No hervir a sequedad, las
RI
muestras contienen grandes cantidades de materia orgánica, aumentar la
A
CU
4. Enfriar ligeramente, añadir 50 mL de agua, y hervir por pocos minutos.
PE
mL; para contenido mayor del 5% de P2O5, diluya a tal volumen que una
45 mL de agua.
DE
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D. Preparación de Reactivos
S
Determinación de calcio:
A
RI
1. Ácido Clorhídrico (1+4): mezclar 1 parte de HCl con 4 partes de agua.
2. Azul de Bromofenol: disolver 0.1 g con 1.5 mL de NaOH 0.1N, y diluir a 25 mL.
A
CU
3. Hidróxido de Amonio (1+4): mezclar 1 parte de Hidróxido de Amonio con 4
partes de agua.
PE
4. Hidróxido de Amonio (1 +50): mezclar 1 parte de Hidróxido de Amonio con 50
partes de agua.
RO
5. Oxalato de Amonio, solución saturada: agregar al agua Oxalato de amonio
AG
hasta que éste ya no se disuelva con agitación.
1000 mL de agua, hervir 15 minutos, tapar y dejar reposar por lo menos 2 días
con agitación constante hasta un color rosa pálido que persista 15 segundos.
IO
estandarizar frecuentemente.
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Determinación de Fósforo:
S
1. Reactivo Molibdatovanadato: Disolver 40 g de Molibdato de amonio.4H20 en
A
400 mL de agua calentar y enfriar. Disolver 2 g de Vanadato de amonio en 250
RI
mL de agua calentar, enfriar y añadir 450 mL de ácido perclórico 70%.
A
Gradualmente añadir la solución de Molibdato a la solución de Vanadato con
CU
agitación, y diluir a 2 L.
PE
52.15% P2O5) por 2 horas a 105 °C. Preparar soluciones conteniendo 0.4-1.0
semanalmente.
DE
de una fase orgánica compuesta por proteínas, lípidos, agua y entre otros, se
IO
orgánica.
desproteinización consistió en lavar y cocinar el hueso por una hora en olla exprés
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S
hueso correspondiente a la diáfisis o hueso compacto y conservando 1,9 kg de
A
RI
diáfisis. El material resultante se trituró extrayéndole la médula y realizando un
A
microondas con una potencia de 700 W para permitir la cocción en agua durante
CU
30 min y separar los lípidos restantes del hueso. Se realizaron 5 repeticiones,
PE
final del proceso de cocción se realiza sin agua con fin de secar el producto.
RO
El proceso anterior de lavado en el microondas no eliminó toda la componente
orgánica y lipídica, por lo que fue necesario realizar cinco procesos de lavado más
AG
en el horno con agua y detergente convencional cada uno de ellos durante 30 min
y cambiando el agua con detergente cada vez que se realizó el proceso de lavado.
El sucesivo proceso de cocción se realiza durante 22 minutos sin agua con fin de
DE
secar el producto.
Una vez terminados los dos procesos de lavado anteriores se realizó un lavado
CA
con ácido oxálico (H2C2O), durante 2 h con agitación magnética, con fin de
blanquear la superficie del hueso triturado. Una vez transcurridas las 2 h se lavó
TE
con 300 ml de agua destilada. Nuevamente se lavó con ácido oxálico durante 30
IO
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Con el fin de obtener un polvo fino y maleable se tomaron los trozos de hueso ya
S
de acero inoxidable 304, con dimensiones de 16 cm de alto y con un diámetro de
A
RI
15,5 cm, con cilindros de diferentes dimensiones desde 28,5 mm hasta 32 mm y
A
hueso. La molienda se realizó con la relación de peso de 1 g de astillas de hueso
CU
por cada 10 g de acero en bolas, hasta obtener un polvo fino con un grano
promedio de 38 µm
PE
El proceso final de síntesis se realizó mediante un tratamiento térmico que inicia a
RO
temperatura ambiente hasta 800°C, 1000°C y 1200°C, con una rampa de
(XRD) en un equipo RIGAKU, MINIFLEX II, con ánodo de cobre (kα = 1.5406 Å)
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A S
Preparación de Huesos de Bovino
RI
Los huesos de la especie bovina se lavaron cuidadosamente con agua y acetona
A
para eliminar las grasas y otras impurezas. Después, los huesos se han secado a
CU
160°C durante 48 h. Los huesos secos limpios se muelen al tamaño de partícula
PE
1. Proceso de Agua Subcrítica
RO
Autoclave cilíndrico de acero inoxidable hidrotermal con diámetro interno de 6 cm,
obtenida se filtró; el producto sólido se lavó con agua destilada y se seca a 80°C
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S
El hidróxido de sodio (96,5% de pureza,) se utilizó en la hidrólisis alcalina
A
hidrotérmica de colágeno. Los huesos triturados se mezclaron con la solución de
RI
25% en peso de hidróxido de sodio con una relación en peso de líquido / sólido de
A
1:40 y se calienta a 250°C durante 5 h. La misma autoclave de acero inoxidable
CU
hidrotermal antes mencionado fue tomada en este proceso. En consecuencia, en
PE
empleado para hidrolizar el colágeno y los otros compuestos orgánicos presentes
3. Descomposición Térmica
RO
AG
En el proceso de descomposición térmica, 1 g de polvo de hueso bovino se colocó
4. Caracterizaciones
TE
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S
de infrarrojos (FT-IR), los espectros se registraron como pastillas de KBr utilizando
A
RI
Varian FTS 1000 FT-IR, intervalo espectral infrarrojo medio, con detector DTGS
refrigerado, serie de Scimitar, Varian Inc., Australia. Las propiedades térmicas han
A
sido estudiadas por el analizador térmico gravimétrico (TGA, Pyris1, PerkinElmer
CU
Inc., EE.UU.).
PE
PROCESO EXPERIMENTAL DE HIDROXIAPATITA A PARTIR DE HUESOS DE
DIFERENTES TIPOS DE ANIMALES
RO
En la investigación, se aplicó hidrólisis ácida en los huesos de cerdos. El
AG
materia prima.
TE
todas las pruebas, se utilizó una fracción de tamiz de dimensión por debajo de
0.063 mm.
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S
espectrofotométricamente con un espectrofotómetro Marcel Media UV-VIS. Este
A
RI
método consiste en la formación de un complejo de fósforo-vanadio-molibdeno de
A
de 430 nm. El contenido de calcio fue determinado con un método de titulación
CU
complejométrica utilizando versenato disódico. El método consiste en disolver una
PE
(v) BiPO4, y luego determinar el contenido de calcio por titulación complejométrica
RO
con versenato disódico (EDTA) en presencia de una mezcla de indicadores
(calceína y timolftaleína).
AG
Preparación
CA
Las conchas fueron limpiadas manualmente con un cuchillo y lavadas con agua
potable; posteriormente fueron secadas en estufa a 90ºC por 30 min. Antes de ser
TE
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para cubrir con agua las conchas de choro molido, en esta parte de la
S
operación se agregó el HCl concentrado lenta y fraccionadamente, luego se
A
RI
adicionó agua destilada hasta completar 1,8 litros; al término de esta
A
elementos indeseables tales como la Sílice; As, Hg y Pb. El precipitado se
CU
eliminó por medio de una filtración; este precipitado fue analizado para
PE
de Ca que permaneció sin disolverse. Se quedó con el filtrado para la
siguiente operación.
RO
2. Precipitación de sales de Ca y Mg: Al filtrado de la operación anterior se le
AG
adicionó una solución de ácido cítrico 60% (p/v) en proporción 1,3:1 (ácido
KOH al 60% (p/v) en proporción 1,5:1 (ácido cítrico: concha de choro molido).
DE
3. Lavado: Para eliminar los restos de ácido y base del precipitado, se realizaron
IO
tres ciclos de lavado con agua destilada. Aquí se eliminó gran parte de Al, Cu,
Cd y Cr.
BL
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fin de adicionar al néctar el producto lo más fino posible (< 75 μm). También
S
se hizo el estudio de solubilidad en agua para la fracción de finos de las sales
A
RI
de citrato obtenidas. Éstas fueron envasadas en frascos de vidrio, hasta el
momento de su uso.
A
CU
ESQUEMA DE OBTENCION DE SALES DE CALCIO Y MAGNESIO
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DE
CA
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BI
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A S
Es conveniente una trituración previa, aunque no sea absolutamente precisa; pero
RI
disminuye la duración de la maceración con los ácidos.
A
Se ha conducido a desengrasar los huesos a bajas temperaturas. Se trabajó en
CU
una marmita que posee un sistema de calefacción por resistencias, las cuales
PE
optó por mantener la temperatura a 75°C y aumentar el tiempo de desengrasado a
RO
sistema continuo y entrelazados entre sí, para que los huesos frescos se pongan
huesos que han sido sometidos por mayor tiempo a tratamiento con ácido y por lo
CA
tanto deben estar agotados (oseína casi pura). La entrada del ácido a los
depósitos se realiza por la parte superior; las lejías son evacuadas por la parte
TE
gravedad.
IO
Cuando los huesos están triturados, al ponerse en contacto con la lejía que ya ha
BL
disuelto mucho fosfato y contiene poco ácido libre, se verifica una doble
tricálcico de los huesos, o con el carbonato de cal de los mismos, dando origen al
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fosfato dicálcico. Este se separa en forma sólida y se reúne con los huesos,
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Las lejías saturadas que salen del depósito, se recogen en fosas y luego se
A
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precipita en mecanismos agitadores con lechada de cal. El precipitado de fosfato
A
CU
ESQUEMA DE OBTENCION DE FOSFATO DICALCICO
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A S
Preparación de Hueso he Pollo en Polvo
RI
Se preparó mediante un método de tratamiento alcalino utilizando 3% de NaOH y
el hueso neutralizado se secó a 100°C. Esto era para asegurarse de que los
A
huesos de pollo en polvo se encuentren en tratamiento para deshacerse de todos
CU
los materiales orgánicos, así como cualquier microbio antes de usar como un
fortificante de calcio.
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