ESCUELA SUPERIOR POLITÉCNICA DE CHIMBORAZO

VICERRECTORADO ACADÉMICO
DIRECCIÓN DE DESARROLLO ACADÉMICO

FACULTAD: CIENCIAS
CARRERA: BIOQUÍMICA Y FARMACIA

GUÍA DE LABORATORIO DE QUÍMICA FARMACÉUTICA II

PRÁCTICA No. 2 – ANÁLISIS DE HIDROCORTISONA

1. DATOS GENERALES:

NOMBRE: estudiante(s) CÓDIGO(S): de estudiante(s)

 Cristina Calderón 2988

 Christian Dávila 2923
 Thalia Heredia 3051
 Joselyn Hidalgo 3045
 Gysell Lema 3008

GRUPO No.:

DOCENTE: Dra. Adriana Rincón

NIVEL: Séptimo PARALELO: A

LUGAR DE REALIZACIÓN: LABORATORIO DE TECNOLOGÍA

FARMACÉUTICA

FECHA DE REALIZACIÓN: FECHA DE ENTREGA:

2018-12-19 2018-12-21

2. OBJETIVO(S):
2.1. GENERAL
 Determinar las características cualitativas y cuantitativas de la hidrocortisona de
diferentes marcas comerciales

2.2. ESPECÍFICOS
 Determinar la solubilidad que presenta la hidrocortisona frente al cloroformo, agua y
etanol.
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 Identificar cualitativamente el principio activo hidrocortisona.

 Realizar cromatografía en papel de hidrocortisona, y determinar el Rf.
 Identificar los picos que se obtienen en el espectro de absorción de infrarrojo de la
hidrocortisona.

3. MARCO TEÓRICO
HIDROCORTISONA
La hidrocortisona es un medicamento que pertenece al grupo de los medicamentos
denominados corticoesteroides. Los corticoesteroides son unas hormonas producidas por
nuestro cuerpo que realizan diversas funciones de gran importancia. La hidrocortisona se
emplea para tratar los síntomas producidos por un brusco descenso de los niveles de
corticoides en el cuerpo, por el ejemplo en la enfermedad de Addison.
También presenta un gran poder antiinflamatorio. En ocasiones, por distintos estímulos,
algunas células de nuestro cuerpo liberan unas sustancias que provocan inflamación. Los
corticoides al reducir la liberación de estas sustancias ante, por ejemplo, respuesta
alérgica o inmune, reducen a su vez la inflamación. Por lo tanto la hidrocortisona será útil
en enfermedades que se caracterizan por una inflamación excesiva.
Es un polvo cristalino blanco o casi blanco, inodoro. Funde aproximadamente a 215ºC,
con descomposición. Moderadamente soluble en acetona y alcohol; poco soluble en
cloroformo; muy poco soluble en agua y éter. Presenta polimorfismo.
Estructura Química
 Peso molecular: 362.5g/mol
 Fórmula desarrollada: 1, 17,21-Trihidroxi-pregn-4-eno-3,20-diana.
 Fórmula molecular: C21H30O5
4. METODOLOGÍA:
Se necesita solución inyectable de 100 mg (2 unidades) de hidrocortisona.
4.1. Ensayo de Solubilidad
 Se coloca el volumen equivalente a 10 mg de hidrocortisona en 3 tubos de ensayo.
 Colocar 3 mL de colorformo, agua y etanol en cada tubo y agitar.
 Identificar si la hidrocotisona es soluble, insoluble o moderadamente soluble en
cada solvente.
4.2. IDENTIFICACIÓN
 Preparar una solución indicadora de ácido sulfúrico concentrado con
difenilananina (10 mL-0,1g)
 Colocar 0,10g de hidrocortisona en un tubo de ensayo y posteriormente poner de
3 a 4 gotas de la solución indicadora.
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 Esperar poco segundos y observar la coloración verde o violeta como presencia

de hidrocortisona.
4.3. Cromatografía en papel
 Para realizar cromatografía en papel se debe reconstituir la suspensión de
hidrocortisona.
 Recortar el papel cromatográfico hasta unas dimensiones adecuadas para la cuba
cromatográfica a utilizar.
 Para la fase móvil, debe mezclarse: tolueno, acetato de etilo, etanol (60:35:5).
 Colocar aproximadamente 10 mL de fase móvil en la cuba o frasco.
 Sembrar en el papel aproximadamente 1 o 2 gotas de la suspensión de
hidrocortisona con ayuda de una jeringa.
 Una vez colocada la muestra, introducir el papel en la cuba o frasco y tapar
herméticamente.
 Retirar el papel hasta que la fase móvil haya eluido hasta al menos las ¾ partes
del mismo.
 Dejar secar el papel al ambiente y revelar en cámara UV a 254nm.
 Calcular el Rf.
El Rf de un compuesto es una constante física, pero que puede variar con cualquier
cambio físico químico, por lo que siempre debe compararse con un patrón
cromatográfico en las mismas condiciones experimentales.
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑐𝑜𝑚𝑝𝑢𝑒𝑠𝑡𝑜 (𝑋)
𝑅𝑓 =
𝑑𝑖𝑠𝑡𝑎𝑛𝑐𝑖𝑎 𝑟𝑒𝑐𝑜𝑟𝑟𝑖𝑑𝑎 𝑝𝑜𝑟 𝑒𝑙 𝑒𝑙𝑢𝑦𝑒𝑛𝑡𝑒 (𝑌)

4.4. ESPECTRO DE ABSORCIÓN DE INFRARROJO:

 Calibrar el equipo.
 Colocar una gota de la suspensión de hidrocortisona en el detector del IR.
 Interpretar el espectro resultante.
5. EQUIPOS Y MATERIALES
5.1. MATERIALES
 4 tubos de ensayo.
 Gradilla.
 1 pipeta de 10 mL graduada.
 2 pipetas de 5 mL graduada.
 Papel cromatográfico
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 Cuba cromatográfica
 Pizeta
5.2.Reactivos
 Cloroformo
 Etanol
 Agua destilada
 Ácido sulfúrico concentrado.
 Difenilamina
 Tolueno
 Acetato de Etilo
5.3. Muestra:
 Hidrocortisona de 100 mg de diferentes casa comerciales.

6. RESULTADOS, REACCIONES Y DISCUSIONES:

Ensayo de Solubilidad

 Fundamento: Posee elevada solubilidad en agua que permite la administración por

vía IV inmediata de altas dosis de hidrocortisona, en pequeño volumen de diluente y
se emplea particularmente cuando se requieren niveles elevados sanguíneos de
hidrocortisona en forma rápida. Muy soluble en agua y alcohol; muy poco soluble en
acetona; insoluble en cloroformo

http://www.anmat.gov.ar/webanmat/fna/pfds/Libro_Segundo.pdf

Identificación

Difenilamina Difenilamina sulfonato

Usos de difenilamina sulfonato: indicador redox.

Indicador de color Principio: difenilamina sulfonato propiedades redox inherentes en la reacción de

valoración redox del punto estequiométrico cuando el indicador se oxida o la reducción, lo que indica
que el punto final de la titulación. Difenilamina indicador sulfonato cambios de color de la siguiente
manera:
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Purpura (oxidado)
Incoloro (reducido)

Discusión:

Al realizar el ensayo visualmente se determinó que el tubo de ensayo al agregar la solución indicadora en
la muestra, tomo un color verde, lo que indica la presencia de hidrocortisona, este ensayo de identificación
debe establecer la identidad del producto analizado y ser capaz de discriminar entre compuestos parecidos
o de estructura relacionada que pueden formar parte de la muestra. Este ensayo debe ser lo más específico
posible. La falta de especificidad de un método de identificación puede ser resuelta mediante combinación
de varios métodos.

Cromatografía en papel:

 Fundamento:
7. CONCLUSIONES Y RECOMENDACIONES
8. BIBLIOGRAFÍA
9. ANEXOS
10. CUESTIONARIO

10.1. ¿Cuál es el uso terapéutico de la hidrocortisona? Escriba su estructura

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Uso terapéutico: se emplea para enfermedades inflamatorias, nefritis lúpica estadio III y IV
(episodios agudos), shock anafiláctico (medicamento de segunda línea), lesiones de la médula
espinal, crisis asmática severa, anemia aplásica primaria refractaria, eritema multiforme
(síndrome de Stevens-Johnson), enfermedad de Crohn, colitis ulcerosa, edema cerebral asociado
a tumor maligno, polimiositis y dermatomiositis.
Insuficiencia adrenal primaria o secundaria, hiperplasia adrenal congénita, tiroiditis subaguda no
supurativa (la hidrocortisona y cortisona son los medicamentos de primera elección para esta
patología).

10.2. Mencione:
 Mecanismo de acción de la hidrocortisona.
La hidrocortisona posee ambas acciones mineralocorticoides y glucocorticoides. Las acciones
antiinflamatorias de los corticoides se deben a sus efectos sobre las proteínas inhibidoras de la
fosfolipasa A2, colectivamente llamadas lipocortinas. Las lipocortinas, a su vez, controlan la
biosíntesis de mediadores potentes de la inflamación, tales como prostaglandinas y leucotrienos
mediante la inhibición de la liberación de la molécula precursora del ácido araquidónico.

Las dosis farmacológicas de los glucocorticoides inhiben la liberación de la hormona

adrenocorticotrópica de la pituitaria, precipitando así la insuficiencia suprarrenal secundaria (cese
de la secreción de corticosteroides endógenos). Si se administran dosis suprafisiológicas de
glucocorticoides durante largos períodos de tiempo, la corteza suprarrenal se atrofia. La
insuficiencia suprarrenal puede ocurrir si estos pacientes son sometidos a estrés fisiológico (por
ejemplo, cirugía, infección sistémica, la pérdida de sangre).

 Reacciones adversas que causa la hidrocortisona

En tto. prolongado, parenteral: leucitosis; aumento presión intracraneal con papiledema en niños,
agravamiento de epilepsia; aumento de PIO, glaucoma, papiledema, cataratas subcapsulares
posteriores, adelgazamiento corneal o escleral, exacerbación de infección ocular viral o fúngica;
dispepsia, ulcus péptico con perforación y hemorragia, pancreatitis aguda, candidiasis;
alteraciones hidroelectrolíticas; alteración en cicatrización de heridas, atrofia cutánea,
hematomas, telangiectasias, estrías, acné, enrojecimiento y prurito; osteoporosis, fracturas
vertebrales y de huesos largos, osteonecrosis avascular, roturas tendinosas, miopatía terminal;
supresión eje hipotalámico-hipofiso-suprarrenal, retraso crecimiento en niños, facies
cushingoidea; ganancia de peso, tolerancia alterada a hidratos de C, aumento apetito; aumento de
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susceptibilidad y gravedad de infecciones, infecciones oportunistas, recurrencia de tuberculosis

activa; tromboembolismo. HTA; parestesias (IV), hipersensibilidad; irregularidades menstruales
y amenorrea; euforia, dependencia psicológica, depresión, insomnio, agravamiento de
esquizofrenia.

10.3. Identificar los picos en el espectro infrarrojo de la Hidrocortisona.

Principales bandas más representativas del espectro IR de la hidrocortisona

1. Tensión O-H ( grupo hidroxilo) 3434.9𝒄𝒎−𝟏
2. Tensión –C –H del 𝑪𝑯𝟑 3000-2800 𝒄𝒎−𝟏
3. Tensión C=O del carbonilo cetónico 1714.1 𝒄𝒎−𝟏
4. Tensión C=O del ácido carboxílico 1644 𝒄𝒎−𝟏
5. Tensión C=C del anillo 1610, 1580 y 1490 𝒄𝒎−𝟏

Región de la huella dactilar

6. Flexión asimétrica del metilo 1420 𝒄𝒎−𝟏
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7. Flexión simétrica del metilo 1347.8𝒄𝒎−𝟏

8. Tensión =C-O del ácido 1201.8 𝒄𝒎−𝟏
9. Flexión C-H en el plano 1046.8 𝒄𝒎−𝟏
10. Flexión O-H fuera del plano 942.1 𝒄𝒎−𝟏
11. Flexión C=C fuera del plano 864.2 𝒄𝒎−𝟏
12. Flexión C-H fuera del plano 745.7 𝒄𝒎−𝟏

BIBLIOGRAFIA:
 Callejas FR. Tablas de Espectroscopía Infrarroja [Internet]. 2010. Available from:
http://depa.fquim.unam.mx/amyd/archivero/TablasIR_24985.pdf
 Moreano S. Analisis quimico instrumental I. Copyright E, editor. Riobamba; 2016. 219 p.