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LABORATORIO DE PARASITOLOGIA
CLINICA
PROGRAMA DE QUÍMICA
1
2012
AGRADECIMIENTOS:
2
CONTENIDO
PAGINA
REGLAMENTO………………………………………………………………….…...4
PRACTICA 1. PROTOZOARIOS……………………………………………....……8
PRACTICA 2. PLATYHELMINTHOS………………...……………………..…..…10
PRACTICA 3. ASCHELMINTOS………………………..……………………….…12
BIBLIOGRAFIA………………………………………………………….….……….29
3
REGLAMENTO
INTRODUCCION
Este reglamento regirá la actitud, el comportamiento y el desempeño del estudiante
dentro de los laboratorios de Microbiología y tiene como finalidad evitar riesgos al personal y
estudiantes que laboran en él, ya que el laboratorio es un área donde se manejan
microorganismos patógenos, parásitos y algunos compuestos químicos peligrosos. Asimismo, se
debe cuidar el equipo valioso como son los microscopios y el material delicado como la
cristalería.
REGLAS
1. Todos los alumnos deberán asistir con bata blanca larga y el cabello recogido.
2. La entrada al laboratorio quedará restringida exclusivamente a los alumnos inscritos
3. Se PROHIBE INTRODUCIR AL LABORATORIO CUALQUIER ALIMENTO O
BEBIDA, para evitar el riesgo de contaminación con microorganismos patógenos.
4. Está estrictamente PROHIBIDO FUMAR dentro del laboratorio.
5. Queda prohibido introducir mochilas, cajas de herramienta, etc., debiéndose colocar estas
en los lockers de la entrada de
6. Cualquier accidente en el laboratorio o derrame de microorganismos, se deberá
comunicar inmediatamente al profesor, para evitar el riesgo de contaminación con los
microorganismos patógenos o parásitos manejados en las prácticas.
7. Se nombrará un jefe de mesa quien será el responsable del cuidado del material y equipo
y de que la mesa quede aseada y desinfectada. También vigilará que todos los integrantes
de la mesa se laven las manos con antiséptico antes de retirarse. El jefe de mesa recibirá
del profesor los microscopios y otros materiales y aparatos necesarios para el desarrollo
de las prácticas, y posteriormente los devolverá en las mismas condiciones que los
recibió, a excepción de los materiales especiales indicados por el profesor. (ejemplo
cultivos). En caso de algún daño al material o aparatos, los alumnos integrantes del
equipo estarán obligados a reparar dicho daño en forma que indique el profesor.
8. Para tener derecho a la evaluación final en la teoría, el alumno deberá tener el 80 % de
asistencia.
9. Para poder tener derecho a la asistencia se dará 10 minutos como retardo
10. La calificación final de la materia de Microbiología quedará constituida por la puntación
obtenida en la práctica y en la teoría, cuya suma se efectuará en la forma siguiente:
a) La calificación final obtenida en el laboratorio tendrá un valor del 30 % de la calificación
final total.
b) La calificación total de la teoría corresponderá al 70 % de la calificación final.
c) La suma de ambas calificaciones (teoría y práctica) será igual al 100 %.
d) El alumno no podrá acreditar la materia si obtiene calificación reprobatoria en el
laboratorio o en la teoría. Debe aprobar ambas para promediarse.
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Introducción.- El Sistema Nacional de Salud debe garantizar la prestación de servicios para
promoción, prevención, diagnóstico, tratamiento y rehabilitación de la salud, regulando los
servicios médicos para que respondan a las demandas y necesidades de la población.
Los servicios médicos deben ser de alta calidad en todos los establecimientos,
independientemente del subsector de salud al que pertenezcan, ya sea público, social o privado.
Las soluciones tecnológicas que se instrumenten en los establecimientos objeto de esta norma,
deben ser el resultado de las demandas de actividades de promoción y prevención de la salud, así
como aquéllas dirigidas al diagnóstico y tratamiento de las diversas patologías. Se debe indicar
qué tecnologías diagnósticas, terapéuticas y de rehabilitación se utilizarán en los
establecimientos médicos para atender correctamente tales demandas, lo cual integra el programa
médico.
1. Objetivo
Esta Norma Oficial Mexicana tiene por objeto establecer los requisitos mínimos de
infraestructura y de equipamiento para los hospitales y consultorios que presten atención médica
especializada.
2. Campo de Aplicación Esta Norma Oficial Mexicana es obligatoria para todos los hospitales
de los sectores público, social y privado, cualquiera que sea su denominación, que realicen
internamiento de enfermos para la ejecución de los procesos de diagnóstico, tratamiento médico.
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INTRODUCCION A LA PARASITOLOGIA
Los parásitos son organismos que requieren de otro organismo (un huésped u hospedero) para
vivir o por lo menos para completar una parte de su ciclo vital. Son eucariotas y contienen
estructuras y organelos similares a los de las células humanas, presentan pared celular y se
consideran animales. Por ello es muy difícil crear antibióticos eficaces y seguros contra los
parásitos, ya que la mayor parte de los fármacos antiparasitarios ejercen algunos efectos adversos
en las células de los humanos.
Aunque los microorganismos patógenos, como los virus, algunas bacterias y hongos, también
son parásitos, éstos son estudiados por la microbiología. La parasitología es la ciencia que
estudia los protozoarios, los helmintos y los artrópodos parásitos.
Los protozoarios son animales inicelulares, dentro de los cuales se encuentran varios grupos
como parásitos:
- Apicomplexa (esporozoarios): se localizan en la sangre, los tejidos o en el intestino y
presentan reproducción sexual y asexual. Entre los más importantes se encuentran
Plasmodium (paludismo), Pneumocystis (neumonía), Toxoplasma (toxoplasmosis) y
Cryptosporidium (cryptosporidiasis).
- Ciliophora (ciliados): Balantidium coli (disentería)
- Sarcomastigophora (flagelados y amibas): incluye los flagelados que se encuentran en la
sangre (Trypanosoma), tejido linfático (Leishmania) o aparato digestivo (Giardia). Entre los
sarcodina se tiene a Entamoeba histolytica (disentería amibiana), y a las amibas de vida libre
Acanhthamoeba y Naegleria.
Cerca del 10 % de la población mundial está infectada con E. histolytica, el paludismo es la
causa principal de muerte relacionada con enfermedades infecciosas en todo el mundo. La
neumonía por Pneumocystis carinii es la principal causa de muerte en enfermos de SIDA.
Los Helmintos incluyen animales metazoarios denominados gusanos (redondos y planos) que
miden desde unos mm hasta varios metros, aunque sus huevos son microscópicos, así como
algunas de sus larvas (etapas juveniles).
Los Helmintos son miembros de dos grupos:
- Asquelmintos (gusanos redondos), por ejemplo Ancylostoma, Ascaris , Enterobius,
Necator, Onchocerca, Strongyloydes, Trichinella, Trichuris.
- Platelmintos (gusanos planos), como Taenia, Hymenolepis, Echinococcus, Dypylidium,
Fasciola.
Todos las etapas de un parásito pueden ser desarrolladas en un sólo huésped o en varios, o parte
en un huésped y parte en el medio ambiente.
En el caso de los parásitos que desarrollan ciclo sexual y asexual, se le denomina huésped
intermediario a aquél donde forma las etapas asexuales. Y huésped definitivo, donde desarrolla
la estapa sexual.
El parásito después de penetrar en un huésped se establece en un órgano blanco o en tejidos. La
mayoría de los parásitos que entran por ingestión de alimentos o agua contaminados con heces
(vía fecal-oral) pasan su ciclo de vida en el aparato digestivo. Los que penetran de manera
directa a través de la piel o se introducen a través de un vector , infectan la sangre o los vasos
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sanguíneos o establecen infecciones en los tejidos subcutáneos u órganos principales, incluso en
la médula ósea y en los tejidos linfáticos.
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PRACTICA #1
Protozoarios parásitos
OBJETIVO DE LA PRACTICA.
Diferenciar morfológicamente los protozoarios intestinales más comunes (trofozoítos u otras etapas)
y distinguirlos de los restos del material de la muestra.
INTRODUCCION.
Los Protozoarios son organismos unicelulares que se consideraron durante mucho tiempo como un
solo phylum, pero recientemente se han dividido en una serie de grupos con carácter de phylum.
Los phyla que incluyen especies parásitas humanas son Sarcomastigophora, Ciliophora,
Apicomplexa y raras veces Microspora.
Los protozoarios parásitos incluyen animales unicelulares que muestran modificaciones fisiológicas
parásitas fuertes en aquellos grupos que son completamente parásitos, en relación a aquéllos que
incluyen especies de vida libre y especies parásitas. Con frecuencia los órganos que no son
necesarios para una existencia parásita se han perdido. El único grupo de protozoos que sólo incluye
especies parásitas es el phylum Apicomplexa. Los miembros de este phylum carecen de órganos
locomotores, mientras que estas estructuras de uno u otro tipo existen en los phyla restantes de
protozoos.
PHYLUM SARCOMASTIGOPHORA.
Subphylum Mastigophora: se mueven mediante estructuras especializadas denominadas flagelos,
que son extensiones citoplásmicas largas como hilos. Los flagelos se originan en estructuras
citoplásmicas denominadas blefaroplastos. Su número varía en cada especie. Algunos son parásitos
hemáticos o tisulares y otros son intestinales. Se reproducen generalmente en forma asexual. Los
principales generos patogenos son Giardia lamblia, Trichomonas vaginalis, Dientamoeba fragilis,
Leishmania y Trypanosoma.
PHYLUM APICOMPLEXA.
Los miembros de este phylum (antes denominado Sporozoa), son parásitos estrictos, tisulares.
Presentan un ciclo de vida complejo con una alternancia de generaciones sexuales y asexuales. Los
generos patógenos mas importantes son Plasmodium, Toxoplasma, Isospora, Cryptosporium,
Pneumocystis y Sarcocystis.
PHYLUM CILIOPHORA.
En estos organismos la locomoción se lleva a cabo por medio de cilios, que son proyecciones
citoplásmicas relativamente cortas, que se originan en pequeños gránulos basales.
Son más cortos y más numerosos que los flagelos. El único género parásito es Balantidium, en el
intestino.
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MATERIALES Y METODOS.
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PRACTICA #2
PLATYHELMINTHES
OBJETIVO DE LA PRACTICA
Aprender a diferenciar morfológicamente a los Platyhelminthes, en ejemplares adultos, huevos y
larvas, con el fin de identificarlos.
INTRODUCCION.
El phylum de los Platyhelminthes o gusanos planos incluye animales pluricelulares que se
caracterizan por tener el cuerpo aplanado con simetría bilateral. La mayoría son hermafroditas. Los
adultos pueden tener menos de 1 mm de longitud o alcanzar una longitud de varios metros. La
mayoría de los miembros son simbiontes que viven sobre o dentro de sus hospedadores. Las
especies de vida libre pertenecen a la clase Turbellaria, que también incluye formas parásitas de
animales inferiores. Las clasaes Trematoda y Cestoda incluyen solo organismos parásitos.
Los Trematoda o "duelas" tienen forma de hoja alargada; son organismos delgados, con órganos de
fijación consistentes en ganchos o en depresiones musculares en forma de copa terminada en
ventosas. Su aparato digestivo es muy simple. De los tres órdenes de Trematoda, el Orden Digenea
incluye todas las especies parásitas humanas. Los miembros tienen ciclos de vida complejos, por lo
menos con un hospedador intermediario molusco. Hay especies intestinales, hepáticas, hemáticas y
pulmonares. Las especies más comunes son Fasciola hepatica, Fasciolopsis buski, Schistosoma
spp., Paragonimus westermani, Clonorchis sinensis.
Los miembros de la Clase Cestoda tienen cuerpo alargado en forma de cinta segmentada, que lleva
en el extremo anterior un órgano especial de fijación: el escólex. No poseen aparato digestivo. Los
céstodos adultos o tenias, viven en el intestino delgado. Con excepción de Hymenolepis nana, los
cestodos requieren un hospedador intermediario para el desarrollo larvario. El hombre puede ser
hospedador de los adultos, o de las fases larvarias, dependiendo de la especie. Ejemplos comunes
son T. solium,
T. saginata, Echinococcus granulosus, Hymenolepis nana,
H. diminuta.
MATERIALES Y METODOS
1. Observe a simple vista (macroscópicamente), parásitos adultos o fragmentos de ellos y note las
diferencias morfológicas. Escriba el nombre científico correspondiente y los nombres de sus
estructuras, aclarando si es ejemplar completo o es fragmento.
Haga dibujos.
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3. Haga dibujos detallados de los diferentes estadíos observados en cada parásito con el nombre de
la fase observada. Discuta las similitudes y diferencias, entre ellos, en sus diferentes etapas. Haga un
esquema con dibujos del ciclo vital completo para cada uno de los parásitos observados. Anote los
nombres de las etapas de desarrollo correspondientes en cada uno.
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PRACTICA #3
INTRODUCCION.
Los Aschelminthes (nemátodos) o gusanos redondos son animales cilíndricos, alargados,
generalmente con los extremos adelgazados. Poseen una cutícula gruesa que puede ser lisa, o
puede extenderse formando una serie de estructuras, sobre todo en los extremos anterior y
posterior. Los sexos están separados, siendo el macho generalmente más pequeño que la hembra.
Tienen un aparato digestivo bien desarrollado. Aunque la mayoría de los nemátodos son de vida
libre, numerosas especies parasitan al hombre, a los animales y plantas. Para el desarrollo larvario
de algunos, se necesitan hospedadores intermediarios. Los huevecillos de algunos requieren
maduración en el suelo y otros deben ser transmitidos por insectos. Las especies humanas son
intestinales y tisulares. Los géneros importantes en humanos son Trichinella, Trichuris,
Strongyloides, Ancylostoma, Necator, Ascaris, Toxocara, Enterobius, Gnathostoma, Wuchereria,
Onchocerca, Mansonella, Brugia, Loa Loa, Dipetalonema, Dracunculus.
MATERIALES Y METODOS
I. Estudie en un Ier grupo los nemátodos intestinales.
Observe al microscopio de luz, ejemplares de huevos y larvas microscópicos de nemátodos,
montados en laminillas fijas. Note las diferencias morfológicas para su identificación.
Observe bajo el microscopio de disección ejemplares de adultos macroscópicos. Haga dibujos
detallados de todos los parásitos observados, con el nombre de sus estructuras y el nombre
científico correspondiente de cada parásito. Compare las similitudes y diferencias entre los
dieferentes géneros observados.
Dibuje los ciclos vitales correspondientes para cada género, indicando las fases observadas en el
laboratorio.
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CUESTIONARIO.
1. Haga separadamente un esquema del ciclo vital completo de cada uno de los parásitos observados
en la práctica.
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PRACTICA #4
COPROPARASITOSCOPICO
DIRECTO
OBJETIVO DE LA PRACTICA.
Desarrollar la técnica del coproparasitoscópico directo y adquirir el criterio para saber cuándo
usarlo.
INTRODUCCION.
Un examen coproparasitoscópico es el estudio de material fecal, para la búsqueda e identificación
de formas parasitarias intestinales. Puede ser cualitativo o cuantitativo. Las muestras fecales son
seriadas con un mínimo de tres y deben colocarse en frascos de boca ancha, guardados en lugares
frescos, mientras se analizan, pues con el calor se aceleran los fenómenos de fermentación y con el
frío se pueden destruir los quistes y trofozoítos de protozoos. Si son heces formadas, para conservar
los parásitos se puede utilizar refrigeración a 10 C. Los métodos químicos permiten la conservación
durante un tiempo más prolongado, sin correr el riesgo de que los parásitos se deformen o se
destruyan, por ejemplo con soluciones que contienen formol, yodo-mertiolate, etc.
Este examen en fresco es sencillo, rápido y económico, pues requiere poco material.
-Es excelente para la búsqueda de trofozoítos y protozoos.
-Es eficaz en la búsqueda e identificación de quistes, huevos y larvas.
-Sin embargo, la muestra utilizada es muy pequeña y poco representativa.
Los montajes en solución salina tienen la ventaja de que retienen la movilidad de los trofozoitos, sin
embargo, es difícil la observación de las estructuras internas, pues con frecuencia son poco
definidas. El Yodo se emplea para destacar las estructuras internas de los parásitos presentes, pero
inmoviliza trofozoítos.
MATERIALES Y METODOS
Cada alumno debe trabajar por lo menos con dos especímenes diferentes, además de la muestra
testigo que proporcione el profesor. Una muestra debe ser propia del alumno y una segunda puede
ser de otra persona.
*Las heces son potencialmente infectantes. Se deben extremar las precauciones durante todo el
procedimiento.
COPROPARASITOSCOPICO DIRECTO.
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1. Obtenga una muestra de heces en un frasco estéril equivalente al tamaño de una nuez. La muestra
debe ser reciente. Si es de la noche anterior debe ser refrigerada mientras se lleva al laboratorio.
3. Con un aplicador se toma una muestra de heces (lo que se embarre solo en la punta), de
preferencia que contenga moco y sangre y se deposita en la gota de sol. salina, haciendo una
suspensión (no se hace frote). Se monta con un cubreobjetos.
7. Con ayuda de los libros, se aprecian los diferentes tipos de residuos fecales, así como los posibles
parásitos.
8. En un segundo portaobjetos coloque una gota de sol. de Nair y una gota de lugol, para hacer dos
nuevas preparaciones.
9. De ser necesario, se adiciona más reactivo por un lado del cubreobjetos para no dejar secar la
preparación.
10. Haga dibujos detallados de los protozoarios encontrados en las heces estudiadas. Hay
posibilidad de que encuentre Giardia, E. histolytica, Balantitdium y Cryptosporidium
principalmente.
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PRACTICA #5
COPROPARASITOSCOPICO.
CONCENTRACION POR FLOTACION.
OBJETIVO DE LA PRACTICA.
Desarrollar y comprender la técnica, con el fin de diferenciar e identificar los parásitos en una
muestra.
INTRODUCCION.
La concentración de parásitos por FLOTACION en muestras fecales permite comprobar la
existencia de quistes de protozoos, huevos o larvas de helmintos, aún cuando estén presentes en
pequeñas cantidades. Esta técnica se basa en la propiedad que tienen las soluciones de densidad
mayor, para hacer flotar objetos menos densos. Por su sencillez se puede utilizar en encuestas en el
campo. El método de Faust, con ZnSO4, es uno de los más utilizados, aunque es poco eficaz para
huevos pesados como los de Tremátodos o como los huevos no-fértiles de Ascaris. Tampoco es
muy efectivo para muestras de heces ricas en grasas. Este método puede realizarse en muestras
recientes , refrigeradas o fijadas con formol (5% ó 10%).
MATERIALES Y METODOS.
3. Centrifugue por 45 segundos a 2500 rpm. Rompa cualquier acúmulo que pudiera haberse
formado en la parte superior y decante el sobrenadante.
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7. Sin sacar el tubo de la centrífuga, recoja algunas gotas del material que flota en la superficie con
una asa de platino (se debe cuidar que el asa no penetre demasiado bajo la superficie).
8. Se deposita la gota en un portaobjetos y se monta con una gota de lugol entre porta y cubre.
11. Discuta las dificultades de la técnica y dibuje los parásitos encontrados. Compare con la
literatura para identificarlos. Concluya cuales parásitos identificó.
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PRACTICA #6
COPROPARASITOSCOPICO
POR SEDIMENTACION
OBJETIVO DE LA PRACTICA
Desarrollo y comprensión de la técnica para aprender a diferenciar e identificar los parásitos en
la muesta.
INTRODUCCION.
La sedimentación de parásitos intestinales en heces se logra por centrifugación ligera o por
gravedad del material fecal, conduciendo a la recuperación de todos los protozoarios, huevos y
larvas, especialmente huevos de tremátodos. Concentra bien estas formas y elimina bastantes
detritus orgánicos. Aunque se inactivan las formas móviles de los protozoarios, se mantiene la
integridad de los organismos. Es efectivo aún en heces con cantidades excesivas de grasas. Sin
embargo, durante la sedimentación, aparte de concentrarse los parásitos, se quedan reunidos
también algunos otros materiales, abundando los artefactos durante la observación. Debido a que
se usan varios reactivos resulta antieconómico, no obstante su eficacia.
MATERIALES Y METODOS.
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10. Haga dibujos detallados de los parásitos encontrados e identifíquelos mediante la comparación
de su morfología con los manuales y libros. Discuta las dificultades y las facilidades de la técnica,
con respecto a las anteriores. Para la identificación de los parásitos compare con los parásitos
observados en los libros. Haga dibujos detallados.
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PRACTICA #7
DIAGNOSTICO DE CISTICERCOSIS.
OBJETIVO DE LA PRACTICA.
Aprender a desarrollar las técnicas de diagnóstico de cisticercoisis y comprender su fundamento,
para establecer la confirmación de cisticercosis.
INTRODUCCION
Los huevos de Taenia solium al ser ingeridos por humanos (en alimentos contaminados con heces)
dan lugar a larvas que se dirigen a los órganos o tejidos del cuerpo, donde desarrollan los
cisticercos. La presencia de unos pocos cisticercos en áreas no vitales (tejido subcutáneo, entre
otros) puede ser asintomática, pero puede producirse una enfermedad grave cuando se fijan en
áreas de importancia vital, como el cerebro o los ojos.
Localización: a) mucosas, b) tejido celular subcutáneo, c) muscular, d) Ocular, e) sistema nervioso
central, f) otros.
MATERIALES Y METODOS.
Haga una visita al rastro de la ciudad o a la escuela de Medicina Veterinaria y trate de obtener
cisticercos en carne.
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3. Desarrolle la técnica serológica para diagnóstico de cisticercos, siguiendo las instrucciones
que acompañan a los reactivos.
CUESTIONARIO
1. Haga un esquema del ciclo vital de Taenia solium y uno del ciclo de Taenia saginata.
Compárelos y describa sus similitudes y diferencias.
2. Nuevamente diga, qué tipo de alimentos llevan los huevos de Taenia solium para que a un
humano se le desarrolle cisticercosis. Qué recomendaciones haría al paciente para evitar
contraercisticercosis.
3. Qué tipo de alimentos llevan los cisticercos, que al ingerirse causan la teniasis o sea el
desarrollo de los adultos. Qué recomendaciones haría al paciente para evitar contraer la tenia
adulta intestinal.
4. Investigue cuál es el tratamiento para la cisticercosis humana.
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PRACTICA #8
INTRODUCCION.
La tinción de Cryptosporidium aunque pueda realizarse con relativa facilidad, la observación es
difícil por su tamaño tan pequeño (mucho menor que Giardia). Al recurrir a la tinción con
anticuerpos fluorescentes no queda duda del hallazgo.
Por otro lado, la tinción de los parásitos en preparaciones fijas permiten una mejor observación del
núcleo y otras estructuras de los parásitos y proporciona el método mejor para el diagnóstico
morfológico de especies intestinales, como amibas y flagelados. Estas técnicas son útiles para la
conservación de los parásitos en colecciones. Desafortunadamente no son recomendables como
métodos rutinarios, porque requieren mucho tiempo, el proceso es complicado, y no siempre
resulta uniforme.
Sin embargo se han desarrollado algunos métodos de tinción menos laboriosos, e incluso algunos
de ellos se han adoptado como rutinarios en diagnóstico, tal como la tinción modificada de Ziehl-
Neelsen para diagnóstico de Cryptosporidium a partir de heces, permitiendo la observación de
ooquistes teñidos del parásito. Esta técnica es sencilla de realizar y poco costosa, por lo que ha
cobrado importancia, debido al reciente incremento de este protozoario en individuos
inmunocomprometidos.
MATERIALES Y METODOS
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5. Decolorar por goteo con Alcohol acido al 3% durante un min. hasta que no escurra más
colorante. Lave con agua de la llave.
6. Cubra los portaobjetos con verde de malaquita durante cinco minutos. Lave con agua de la llave
y deje secar al aire libre.
7. Observe al microscopio. Los ooquistes de Cryptosporidium se tiñen de color rojo intenso, sobre
un fondo verde. Identifique las fases del parásito observadas en el ciclo vital. Dibuje el ciclo
completo.
8. La laminilla puede guardarse, haciendo montaje con resina sintética.
9. Discuta las dificultades de la técnica y haga dibujos detallados.
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PRACTICA 9
CULTIVO DE PROTOZOARIOS
OBJETIVO:
Aplicación de algunas técnicas para cultivo y estudio microscópico de protozoarios. Descripción
de los protozoarios aislados.
INTRODUCCION.
Los protozoarios son organismos eucarióticos unicelulares, del reino animal, que varían en forma
y tamaño. Se encuentran en hábitats húmedos y son muy comunes en agua dulce, como
estanques, lagos, ríos, arroyos, suelos húmedos, aguas negras, estanques costeros, vegetación
flotante, estuarios, bahías, aguas termales, estanques glaciares, etc.
Los protozoos juegan un papel importante en la ecología. Algunos aportan materia orgánica en
ambientes acuáticos y otros actúan como depredadores de otros microorganismos y como
degradadores de materia orgánica. Son particularmente importantes en el suelo y en aguas
contaminadas. Ciertos grupos viven en asociaciones de comensalismo o de mutualismo, otros
son parásitos de animales o de humanos. Los protozoarios de vida libre son relativamente fáciles
de cultivar en medios de laboratorio que contengan infusiones de vegetales y bacterias. Los
parásitos en general no son cultivables, teniendo que recurrir a animales de laboratorio.
Para el aislamiento de protozoarios saprófitos son buenas las muestras de agua dulce que
incluyan fragmentos de algas filamentosas y lodo con abundante materia orgánica. También son
buenos los suelos con abundante materia orgánica en descomposición. Para la incubación es
buena una alta humedad. Se recomienda usar en los medios la misma agua de la muestra. Para
aislar parásitos intestinales se usan muestras de heces.
Los parásitos Giardia y Cryptosporidium pueden aislarse a partir de agua, incluso de agua
potable.
MATERIALES Y METODOS
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5. En una caja de Petri conteniendo agar nutritivo, inocule 0.1 ml de una suspensión bacteriana
(gramnegativas, como E. coli). Enseguida inocule la caja con una muestra de suelo
suspendido en agua, en cantidad suficiente para formar una película líquida sobre el agar.
Tape la caja.
6. Incube todos los medios de cultivo a temperatura ambiente, con luz tenue, durante
7- 10 días. Mantenga la humedad inicial, agregando agua si es necesario.
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1. Coloque una gota de la muestra de protozoos sobre un portaobjetos
2. Elimine los residuos de materia orgánica grandes y extienda la muestra homogéneamente
3. Fije con solución de Schaudinn durante 15 min, a 60-70 C.
4. Lave con agua destilada
5. Tiña con Hematoxilina de Harris o de Delafield (filtre la solución antes de usarla)
6. Lave con agua destilada.
7. Observe la preparación antes de que seque para ver si se tiñó bien
8. Para que vire el color, lave con agua de la llave
9. Deshidrate con alcohol de 70
10. Tiña con eosina alcohólica por 30 a 60 segundos
11. Para deshidratar la preparación, cubra con alcohol de 96 y después con alcohol
absoluto
12. Aclare con xilol
13. Cubra con bálsamo de Canadá y monte con un cubreobjetos. Deje secar y observe
a 10X y a 40 X
Apéndice:
Medios y reactivos utilizados:
Medio de Chalkley:
NaCl …………..0.1 g
KCl ……………0.004 g
CaCl 2 …………0.006 g
Agua dest. ……..1000 ml
Disolver y distribuir en frascos.
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PRACTICA #10
ARTHROPODA
OBJETIVO DE LA PRACTICA:
Observar las diferencias morfológicas de los artrópodos más comunes, para aprender a
identificarlos.
INTRODUCCION
Los animales de este phylum son segmentados, con simetría bilateral, el cuerpo incluído en una
cubierta quitinosa rígida o exoesqueleto y llevan apéndices pares, articulados. El aparato digestivo
está bien desarrollado. Los sexos están separados.
Los de interés médico pueden dividirse en dos grupos: aquellos que son auténticos parásitos, y los
que por diferentes medios afectan la salud o al bienestar.
CLASE CRUSTACEA:
Incluye formas acuáticas, como cangrejos, langostas, copépodos, gambas. Algunos son huéspedes
intermedaiarios de parásitos humanos.
CLASE QUILOPODA:
Incluye a los ciempies, caracterizados por tener un par de patas en cada segmento corporal. El
primer par de apéndices está transformado en uñas venenosas.
CLASE ARACHNIDA:
Tienen el cuerpo dividido en dos partes, llamadas cefalotorax y abdomen. Los adultos tienen cuatro
pares de patas. Ejemplo, los escorpiones (alacranes), arañas, garrapatas y ácaros. Algunos producen
veneno tóxico en diferente grado. Otros pueden transmitir patógenos.
CLASE PENTASTOMIDA:
Incluye solo endoparásitos llamados gusanos lengua. Carecen de apéndices externos y poseen dos
pares de ganchos cerca de la boca. Los adultos viven en el aparato respiratorio de vertebrados. En el
hombre pueden formarse fases larvarias enquistadas.
CLASE INSECTA:
Incluye los artrópodos más importantes de importancia médica. Tienen el cuerpo dividido en tres
partes: cabeza, tórax y abdomen. Poseen tres pares de patas.
Orden Anoplura:
Son piojos chupadores, aplastados dorsoventralmente, ápteros.
Orden Hemiptera:
Chinches verdaderas, ej: las de cama. Pueden ser ápteras o aladas. Los redúvidos (de nariz
cónica) son vectores de Tripanosomas.
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Orden Coleoptera:
Son los escarabajos. Algunos son huéspedes intermediarios de céstodos. Tienen alas
endurecidas.
Orden Hymenoptera:
Incluyen hormigas, abejas, avispas. Son importantes por el veneno de sus aguijones.
Algunas hormigas son huéspedes intermediarios de un céstodo.
Orden Diptera:
Con un par de alas auténticas, incluye moscas y mosquitos. Algunas larvas de moscas son parásitas
del hombre y de animales y los mosquitos transmiten diferentes patógenos.
MATERIALES Y METODOS
1. Haga observaciones macroscópicas (a simple vista) de artrópodos montados en preparaciones
permanentes. A continuación véalos con el microscopio estereoscópico. Los más pequeños puede
observarlos bajo el microscopio compuesto. Haga dibujos detallados anotando los nombres de las
partes del cuerpo y el nombre científico correspondiente de cada ejemplar, acompañado del nombre
popular.
Compare y discuta las similitudes y diferencias.
CUESTIONARIO.
1. Investigue en la biblioteca los datos sobre los artrópodos mas comunes importantes en México,
ya sea como parasitos o como animales venenosos, que incluya arácnidos e insectos y su
distribución geográfica.
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BIBLIOGRAFIA PARASITOLOGIA
Benson, H. . 1990
Microbiological Applications.
A laboratory Manual in General Microbiology
WCB Wm.C.Brown Publishers
Romero-Cabello, R. 1999.
Microbiología y Parasitología humana.
Ed. Médica Panamericana, Méexixo.
Stevens, R. 1986.
Diagnostic Devices Manual and Directory.
Immunology and Microbiology Tests.
Marcel Dekker, Inc.
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