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DIAGNÓSTICO BACTERIOLÓGICO DE
INFECCIÓN DE VÍAS URINARIAS:
UROCULTIVO CON ANTIBIOGRAMA
Octubre de 2017.
Agentes más frecuentes Infecciones intrahospitalarias
Bacilos gramnegativos Agentes nosocomiales, el 70-75% son
por uso de sondas vesical
Escherichia coli 80%-90%
Escherichia coli
Proteus
Pseudomonas aeruginosas
Klebsiella
Enterococcus spp
Principales causantes de IVU s por la
mala higiene Staphylococcus spp (epidermidis)
Manifestaciones Clínicas
Cistitis Pielonefritis
Disuria Fiebre
Tenesmo vesical Escalofríos
Poliaquiuria Dolor lumbar
Dolor suprapúbico Náuseas
Vómito
Hematuria
Urocultivo
El estándar de oro en el diagnóstico de la infección de las vías urinarias es el
UROCULTIVO en presencia de sintomas.
Se requiere una cuenta bacteriana de bacterias mayor a de acuerdo a los
criterios de KASS. (Tabla siguiente)
El urocultivo es el cultivo de orina para diagnosticar infección sintomática del
tracto urinario o infección asintomática (bacteriuria asintomática) en pacientes con
riesgo de infección.
CATEGORIA CLINICOS LABORATORIO
IU aguda, no complicada, en mujeres Disuria, urgencia >10 leucocitos/
miccional,poliaquiuria. > /mL de patógenos urinarios en la
Ningún síntoma urinario en las muestra de orina obtenida por chorro medio.
últimas 4 semanas antes del
episodio actual .
Ausencia de fiebre o dolor lumbar.
FUNDAMENTO
Los métodos de dilución son
utilizados para medir la actividad in Método de dilución
vitro de un agente antimicrobiano
sobre un microorganismo
específico, utilizando diferentes
concentraciones del agente y un
inóculo conocido de la cepa
bacteriana. Las pruebas pueden ser
realizadas por dilución en caldo o en
agar, de esta forma es posible
determinar la concentración
inhibitoria mínima (CIM) del
antibiótico, después de la
incubación por 24 horas a 35 C.
FUNDAMENTO
Método de difusión
Antes de la recolección
• Se recomienda no ingerir antibióticos (salvo indicación de su médico), ni aspirinas,
ni vitamina C durante las 48 horas previas a la recolección.
• Tomar la primera orina de la mañana.
• En caso de urgencias, retener la orina de 3 horas como mínimo para tomar la
muestra.
• En caso de micciones imperiosas, retener la orina el mayor tiempo que pueda.
Toma de muestra en MUJERES:
1. Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la
mano lo siguiente:
a)Jabón desinfectante
b)Agua hervida o agua estéril a temperatura ambiente
c)Gasa estéril o un paño acabado de lavar
d)El recipiente para la toma de muestra.
2. Proceda primero a lavarse las manos y luego siéntese en el inodoro, lo más hacia
atrás que se pueda. Separe los labios genitales con una mano y mantenga
desinfectante. Enjuague con abundante agua estéril y luego seque bien con gasa estéril
o con un paño limpio.
3. Proceda a recoger la orina, destapando previamente el frasco SÓLO EN EL
MOMENTO DE LA MICCIÓN y sin tocar con los dedos su interior, coloque la tapa con
el lado plano hacia abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. Empiece a
orinar en el excusado y recoja en el frasco sólo la muestra del chorro medio, llenando
hasta la mitad del recipiente sin dejar de orinar. Una vez recolectada la muestra,
termine de orinar en el excusado.
4. Tape muy bien el frasco y rotúlelo con su nombre. Llévelo al laboratorio lo más pronto
posible en un recipiente con hielo cuidando que que este no se chorree
Toma de muestra en HOMBRES:
1. Debe hacerse una antisepsia previa de la zona genital, por lo tanto debe tener a la
mano lo siguiente:
a)Jabón desinfectante
b)Agua hervida o agua estéril a temperatura ambiente
c)Gasa estéril o un paño acabado de lavar
d)El recipiente para la toma de muestra.
2. Lavarse con jabón desinfectante primero las manos y luego la cabeza del pene
empezando por la abertura uretral y continúe en dirección a usted, con previa retracción
del prepucio. Luego enjuagar bien con agua estéril o previamente hervida y secar con
gasa estéril o con un paño recién lavado.
3. Proceda a recoger la orina, destapando previamente el frasco SÓLO EN EL
MOMENTO DE LA MICCIÓN y sin tocar con los dedos su interior, coloque la tapa con
el lado plano hacia abajo. No toque el interior del recipiente o de la tapa. Empiece a
orinar en el excusado y recoja en el frasco sólo la muestra del chorro medio, llenando
hasta la mitad del recipiente sin dejar de orinar. Una vez recolectada la muestra,
termine de orinar en el excusado.
4. Tape muy bien el frasco y rotúlelo con su nombre. Llévelo al laboratorio lo más pronto
posible en un recipiente con hielo cuidando que que este no se chorree
Otras técnicas de obtención de la muestra de orina
Células escamosas: por la descamación del epitelio desde los túbulos hasta las vías urinarias.
Cilindros: moldes de los túbulos renales constituidos por material proteináceo, células o ambos.
Hialinos: no indican daño renal y pueden aparecer en orina normal concentrada, insuficiencia cardíaca,
insuficiencia renal crónica o nefropatía diabética.
Céreos: son anormales y aparecen en insuficiencia renal crónica avanzada o pielonefritis crónica.
MORFOLOGÍA MICROSCÓPICA
Escherichia coli
Bacilos Gram Móviles (flagelos
negativos perítricos)
Oxidasa negativos
No forma esporas
Catalasa positivos
Miden 0.5 µ de
ancho por 3 µ de
largo Indol positivo
No formadores de esporas
Muestra aglutinación
Urea positiva
Indol negativo
Flagelos peritricos
PRUEBAS BIOQUIMICAS
Tinción de GRAM.
Prueba de catalasa.
Prueba de oxidasa.
Prueba de oxidación/fermentación conocida como OF.
Motilidad.
Cristal violeta.
Lugol.
Alcohol-acetona
Safranina.
Agua para enjuagar.
Resultados Resultados
PRUEBA DE LA OXIDASA
Reactivo usado
Si se observa el burbujeo Peróxido de hidrogeno al
generalmente intenso 30%
significa que hay
producción de oxígeno por
lo tanto se entiende que
hay presencia de la enzima
catalasa.
PRUEBA DE OXIDACIÓN Y FERMENTACIÓN
TAMBIÉN CONOCIDA COMO OF.
Criterios de Kass
antibióticos.
SENSIBLE RESISTENTE
Las pruebas de dilución determinan la CIM en forma directa mediante el uso de diluciones en serie del
antimicrobiano en caldo con el espectro de concentraciones significativas para la aplicación clinica.
-La dilucion se prepara en tubos o pozos de microdilución y ,por convension se duplica con la base de
1Mg/ml.El inoculo bacteriano se ajusta a una concentración de 10 5 a 10 6 bacterias por mililitro y se
agregan al caldo .
-Incubar 24 hora se examinan los tubos para detectar turbulencia causada por el crecimiento de
bacterias
El primer tubo que no haya crecieminto visible ( liquido claro) equivale a la CIM para este
microorganismo.
Método de difusión de Kirby Bauer
• Es un estudio de susceptibilidad o resistencia de un
microorganismo a la acción de distintos antibióticos, por difusión
en disco
• El disco tiene una cantidad
especifica de antimicrobiano,
que es aplicado a una
superficie de agar inoculado
con un microorganismo
• El antimicrobiano difunde
desde el disco al medio de
cultivo produciendo una
zona de inhibición.
• La zona de inhibición es medida
y es relacionada directamente
con la CMI (concentración
mínima inhibitoria)
• CMI: concentración mínima de
antibiótico necesaria para inhibir
el crecimiento de la bacteria
• Uso para Staphylococcus spp., Pseudomonas aeruginosa, Enterococcus
spp., Enterobacteriaceae
•Usa agar Müller Hilnton
• Es el recomendado por CLSI
(Clinical and Laboratory Standars
Institute), que ha dado
estándares y tablas para
mediciones
• Uso para anaerobios
facultativos y aerobios
Técnica de difusión (desarrollo)
• Inocular en las placas
Müller-Hinton las colonias
usadas, con ayuda de un hisopo
• Humedece el hisopo
en la suspensión bacteriana,
se retira el exceso
• Se siembra en la placa en
tres direcciones diferentes
• Se colocan los discos con ayuda de las pinzas, se distribuyen
uniformemente
• Se presionan ligeramente
para asegurar el contacto
• Se miden los halos
de inhibición con regla
por el fondo de la caja
• Interpretación de los
diámetros
• El antibiograma además de evaluar la susceptibilidad frente a antibióticos,
también puede hacer sospechar de algunos agentes bacterianos, como es el caso
de la Pseudomona aeruginosa la cual produce un pigmento verde sobre el Agar
Muëller-Hinton .
Método semiautomatizado MicroScan
• Es una prueba de mecanización microbiológica
semiautomática que
permite la identificación de microorganismos en
muestras clínicas
• En base a la fotometría
determinaciones ópticas en el crecimiento de los
microorganismos o pruebas bioquímicas
Se inoculan posos de micro-titulación que contienen diluciones dobles
seriadas de antibióticos con un inoculo de la bacteria a estudiar
• Desventajas: lectura inadecuada por presencia de polvo o aceites, cambios de
T si falla la corriente y cambia el pH del medio
• Ventajas: proporciona la CIM, rapidez y simplicidad, estandarización,
reproductibilidad y mecanización, margen de error menor a 1.5%, no depende de
agar, cantidad de inoculo, o tiempo.
• MicroScan es el líder mundial para la
identificación y suceptibilidad antimicrobiana
de organismos de interés clínico
• Identifica bacilos gramnegativos
• Cocos grampositivos anaerobios
• Organismos difíciles y levaduras
• Paneles, donde se contienen pruebas
bioquímicas, detección de enzimas,
hidrolisis de sustratos, cambios de pH,
producción de metabolitos
• Desde 27 a 42 pruebas, los resultados de
las pruebas se procesan y la base de datos
provee una identificación del
microorganismo.
ETAPA POST-ANALÍTICA
Ej. Dx. Etiológico: Escherichia coli
Ej. Dx. Nosológico: Cistitis
ANTIBIOGRAMA
Gentamicina ----------------------S
Trimetropim-Sulfametoxazol---R
Tetraciclina-----------------------R
Neomicina-------------------------S
Estreptomicina--------------------R
Nitrofurantoína--------------------I
Cloranfenicol----------------------R
Ana María Castro, . BACTERIOLOGÍA MÉDICA basada en problemas. México: Manual
Moderno. 2ª edición, 2014. pág. 169-173.
Laboratorio Hidalgo. Análisis Clínicos. Urocultivo Chorro medio. [Fecha de consulta:
19/Marzo/2017]. Disponible en:
https://www.laboratoriohidalgo.com/archivos/Indicaciones/IN.0043%20Rev.2%20Uro
cultivo%20Chorro%20Medio.pdf
Pinheiro, Pedro. Examen de urocultivo y antibiograma. [Fecha de publicación:
25/Mayo/2016; Fecha de consulta: 19/Marzo/2017]. Disponible en:
http://www.mdsaude.com/es/2016/04/examen-de-urocultivo.html
http://microbitosblog.com/category/pruebas-bioquimicas-primarias-para-
bacterias/