UNIVERSIDAD VERACRUZANA

FACULTAD DE CIENCIAS QUIMICAS

LABORATORIO DE BIOQUIMICA CLINICA

PROCEDIMIENTO NORMALIZADO DE PNO-BC-14.03 Tiempo 1.5 horas

OPERACIÓN PARA DETERMINACION DE Fecha Elaboración Pág. 1 - 4
CREATININA EN SUERO 25/05/16

1.0 OBJETIVO
Estandariza la determinación de albúmina en el Laboratorio de Bioquímica Clínica
(LBQC) de la Facultad de Ciencias Químicas (FCQ) de Orizaba.

2.0 CAMPO DE APLICACIÓN

Este Procedimiento Normalizado de Operación (PNO) es aplicable a los alumnos
de la EE LBQC así como al auxiliar y responsable del mismo

3.0 DEFINICIONES
Albúmina: Es la más abundante de las proteínas séricas transportan sustancias
tales como medicamentos, antibióticos, bilirrubina y ácidos.

4.0 RESPONSABILIDADES
Es responsabilidad de todos los alumnos que cursan la EE LBQC de la FCQ
cumplir con este PNO.

4.0 FUNDAMENTO
La albúmina es la más abundante de las proteínas séricas. Su importancia en el
funcionamiento del cuerpo es la habilidad para transportar substancias tales como
medicamentos, antibióticos, bilirrubina, ácidos y sirve como almacén de proteínas
de estructura necesarias para el crecimiento de los tejidos. Los niveles bajos de
albúmina ocurren comúnmente en una variación de enfermedades tales como el
síndrome nefrítico, enfermedades hepáticas, infecciones agudas y mala nutrición
haciendo así a las determinaciones de albúmina de primordial importancia.

Este procedimiento está basado en las propiedades de albúmina sérica de

copularse con colorantes, en este caso con el verde de Bromocresol (BCG). La
absorbancia del BCG a 620 nm incrementa al unirse con la albúmina y es
proporcional a la concentración de albúmina presente en el suero.

Albúmina + BCG complejo Albúmina-BCG

5.0 DESCRIPCION DETALLADA :

ELABORO REVISO: APROBO:
MAGE Ma. Elena Abud Barbosa M.C. José Felipe Velázquez Hernández
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OPERACIÓN PARA DETERMINACION DE Fecha Elaboración Pág. 2 - 4
CREATININA EN SUERO 25/05/16

Material
 5 tubos de ensaye de 13 X100 mm
 Suero o plasma con anticoagulante (EDTA, heparina oxalato o citrato)
 1 Micropipeta de 1.0 mL
 1 Micropipeta de 10 L
 Puntas para micropipeta.
 Gradilla.

Reactivos
 Reactivo Solución de Verde Bromocresol a pH 4.2
 Estándar Albúmina 5.0 g/dL

Equipo
 1 Espectrofotómetro UV-VISIBLE
 1 Baño María

6.0 PROCEDIMIENTO
PARÁMETROS
Longitud de onda 600 nm
Tipo de reacción Punto final
Temperatura de reacción 37°C
Estándar 5 g/dL
Linealidad 6 g/dL

1. Medir las siguientes cantidades de reactivos en 3 tubos

BLANCO ESTANDAR MUESTRA
Reactivo 3 mL 3 mL 3 mL
Agua destilada 20 µL - -
Estándar - 20 µL -
Muestra - - 20 µL

2. Mezclar y esperar 10 minutos a temperatura ambiente.

3. Ajustar el aparato a cero con el blanco y efectuar las lecturas de las
densidades ópticas del estándar y muestra a 600 nm

ELABORO REVISO: APROBO:

MAGE Ma. Elena Abud Barbosa M.C. José Felipe Velázquez Hernández
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6.1 Precauciones
El estándar contiene azida sódica puede reaccionar con las tuberías de cobre y
plomo y formar azidas metálicas explosivas. Eliminar desechos por un desagüe
sanitario, si este método de eliminación cumple los requisitos locales y nacionales
vigentes; eliminar los reactivos con gran volumen de agua para evitar la
acumulación de azidas.

7.0 CONSIDERACIONES ESPECIALES

7.1 Cálculos
𝑑𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑜𝑝𝑡𝑖𝑐𝑎 𝑑𝑒 𝑙𝑎 𝑚𝑢𝑒𝑠𝑡𝑟𝑎
( ) × 𝑛(𝑐𝑜𝑛𝑡𝑟𝑜𝑙 𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟) = 𝑔/𝑙
𝑑𝑒𝑛𝑠𝑖𝑑𝑎𝑑 𝑜𝑝𝑡𝑖𝑐𝑎 𝑑𝑒𝑙 𝑒𝑠𝑡𝑎𝑛𝑑𝑎𝑟
Donde: n= 5 g/dL

Concentración g/dL= Realizar las operaciones

Concentración g/dL = Resultado

7.2 Rango Biológico

3.8 -5.5 g/dL

8.0 DOCUMENTACION O BIBLIOGRAFÍA

Instructivo kit Siemens para albúmina sérica

9.0 TABLAS DE RESULTADOS

EQUIPO:

ESTANDAR PROBLEMA CONCENTRACION

0. 0. g/dL

ALBUMINA Relación A/G

g/dL

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MAGE Ma. Elena Abud Barbosa M.C. José Felipe Velázquez Hernández
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Tabla Resultados obtenidos por grupo:

EQUIPO PROTEINAS TOTALES ALBUMINA GLOBULINAS A/G
1 g/dL g/dL g/dL
2 g/dL g/dL g/dL
3 g/dL g/dL g/dL
4 g/dL g/dL g/dL
5 g/dL g/dL g/dL
6 g/dL g/dL g/dL
7 g/dL g/dL g/dL

9.1 OBSERVACIONES

Realizar las respectivas observaciones de esta práctica

9.2 CONCLUSIÓN

Captura la conclusión en función dela competencia desarrollada.

ELABORO REVISO: APROBO:

MAGE Ma. Elena Abud Barbosa M.C. José Felipe Velázquez Hernández