La serotonina, o 5-hidroxitriptamina (5-HT), ha sido implicada en casi todas las funciones

fisiológicas o conductuales concebibles: afecto, agresión, apetito, cognición, emesis,

función endocrina, función gastrointestinal, función motora, neurotrofismo, percepción,
función sensorial. Sexo, sueño y función vascular. Además, la mayoría de los
medicamentos que actualmente se usan para el tratamiento de trastornos psiquiátricos (p.
Ej., Depresión, manía, esquizofrenia, autismo, trastorno obsesivo compulsivo, trastornos
de ansiedad) actúan, al menos parcialmente, a través de mecanismos serotoninérgicos (ver
en otro lugar, este volumen). ¿Cómo es posible que 5-HT se involucre en tantos procesos
diferentes? Una respuesta radica en la anatomía del sistema serotoninérgico, en el que los
cuerpos celulares 5-HT agrupados en los núcleos del cerebro del tronco encefálico se
posicionan a través de sus vastas proyecciones para influir en todas las regiones del
neuraxis. Otra respuesta radica en la diversidad molecular y distribución celular
diferencial de los muchos subtipos de receptores 5-HT que se expresan en el cerebro y
otros tejidos.
Durante la década pasada, las técnicas de clonación molecular han confirmado que
putativos subtipos de receptores de 5-HT, predecir a partir de unión de radioligando y
estudios funcionales (por ejemplo, 5-HT1, 5-HT2, 5-HT3, 5-HT4), representan gen
separado y distinto productos. Este conocimiento ha revolucionado la investigación
contemporánea sobre el sistema serotoninérgico.
Mediante el uso de hibridación in situ de ARN mensajero (ARNm) y mapas
inmunocitoquímicos, los estudios de receptores de 5-HT previamente reconocidos
podrían dirigirse más precisamente hacia las neuronas y las líneas celulares modelo que
expresan estos subtipos específicos del receptor 5-HT. Además, mediante el uso de las
técnicas de clonación, podrían iniciarse investigaciones para determinar el papel
funcional de los receptores 5-HT previamente no reconocidos (por ejemplo, 5-HT5, 5-
HT6, 5-HT7). Por lo tanto, se ha avanzado mucho en delinear las vías de transducción de
señales de los diversos subtipos de receptores 5-HT. El objetivo de esta revisión es sobre
los aspectos moleculares y celulares de los subtipos de receptores de 5-HT individuales y
su mecanismo de transducción, además de las interacciones entre diferentes subtipos de
receptores dentro de una sola neurona o región. De este trabajo en la comprensión de las
funciones globales del sistema 5-HT se discuten.

SUBTIPOS DEL RECEPTOR 5-HT: ASPECTOS MOLECULARES Y CELULARES

Biología Molecular
En la primera mitad de la última década, se logró la clonación de las principales familias
conocidas de receptores de 5-HT. Más recientemente, la atención se ha centrado en
cuestiones de regulación transcripcional y postranscripcional.

Procesamiento de ARN
La región flanqueante 5 'de varios genes del receptor 5-HT ha sido clonada, y se han
identificado secuencias de consenso para factores de transcripción en la región promotora
(2-4). La identificación de estos potenciales sitios reguladores prepara el escenario para
investigaciones en posible regulación funcionalmente significativa de la transcripción
génica in vivo (5). Una forma prominente de regulación postranscripcional es el corte y
empalme de ARN alternativo, en el que varía el corte y empalme de la secuencia
intrónica.El corte y empalme alternativo es común y ocurre para varios receptores de 5-
HT , incluyendo los receptores 5-HT2C, 5-HT4 y 5-HT7. Las dos variantes de corte y
empalme del receptor 5-HT2C descritas en la literatura codifican proteínas truncadas
severamente sin función obvia (6-8). En contraste, el empalme variantes del receptor 5-
HT4 (5-HT4 (a) -5-HT4 (f)) y receptor 5-HT7 (5-HT7 (a) -5-HT7 (d)) difieren en longitud
y composición en el carboxilo término (ver refs.9 y 10 para revisión). Diferencias entre
especies marinas y quizás regiona Las diferencias conducen a diferentes patrones de
empalme. Recientemente, Claeysen y otros (11) demostraron que las variantes más cortas
del receptor 5-HT4 tienen el mayor grado de actividad constitutiva, lo que sugiere que la
cola larga proporciona estabilidad estructural a la molécula. El receptor 5-HT7 no tiene
diferencias funcionales conocidas. En contraste, una segunda forma de regulación
postranscripcional, la edición de ARN, tiende a tener efectos marcados sobre las
propiedades funcionales de las proteínas.
Por ejemplo, la edición de ARN cambia un único aminoácido en la subunidad beta del
receptor AMPA (alfa-amino-3-hidroxi-5-metil-4-isoxazol propiónico), que determina las
propiedades de activación de este canal iónico controlado por ligando (ver ref.12 para
revisión).
La edición de ARN en sistemas de mamíferos se descubrió hace aproximadamente una
década y se define como cualquier modificación, que no sea un corte y empalme
alternativo, que se produce a nivel del ARNm. Existen varios mecanismos de edición de
ARN, pero la edición de mamíferos generalmente implica la conversión de residuos de
adenosina en inosinas por la acción de una familia de adenosina deaminasas (13). Tales
eventos de edición tienen el potencial de alterar el código genético a nivel de ARN; el
resultado es la formación de isoformas proteicas múltiples con función alterada. El
descubrimiento de la edición de ARN del receptor 5-HT2C proporcionó el primer
ejemplo, hasta ahora, de edición de un receptor acoplado a proteína G (14). La edición
del ARNm del receptor 5-HT2C humano implica cinco sitios, A a E, donde la adenosina
se convierte en inosina; La inosina sustituye a la guanosina en el código genético,
generando así diferentes isoformas de proteínas. Se han encontrado múltiples isoformas
de ARN para el receptor 5-HT2C en el cerebro humano, prediciendo la formación de
isoformas proteicas con hasta tres aminoácidos modificados en el segundo ciclo
intracelular del receptor (15,16) .Editar en los residuos de adenosina A, B, C y D del
ARNm del receptor 5-HT2C humano conduce a cambios predichos en los tres
aminoácidos para producir valina, serina, valina (VSV) en posiciones 156, 158 y 160 en
lugar de isoleucina, asparagina, isoleucina (INI) en estas posiciones en la isoforma del
receptor no editado (Fig.2.1) .Editar en los cinco sitios predice la formación de valina,
glicina, valina (VGV) isoforma Debido a que el segundo bucle intracelular ha sido
implicado en el acoplamiento de la proteína del receptor G, los estudios funcionales
iniciales se han centrado en las propiedades de señalización intracelular de las isoformas
del receptor 5-HT2C. Estos estudios han demostrado que las isoformas del receptor
editadas se acoplan de forma menos eficiente a las proteínas Gq. disminución de las
potencias agonistas para activar la fosfolipasa C (7,14,15) y reducción de la actividad
constitutiva del receptor (16,17). El descubrimiento de que el receptor 5-HT2C está
regulado por la edición de ARN presenta un desafío para los farmacólogos debido a
isoformas múltiples con farmacológicos potencialmente diferentes se predice que las
propiedades y funciones existen en el cerebro. No está claro, por ejemplo, qué isoforma
de receptor se debe usar para modelar in vitro el receptor y para caracterizar fármacos
recientemente desarrollados. Se predice que la isoforma INI no editada representa menos
del 10% de la población total de receptores en el cerebro humano; la isoforma principal
es VSV (15, 16). Hasta la fecha, todos los estudios de función han implicado células
recombinantes que expresan una sola isoforma del receptor.
La evaluación de las consecuencias funcionales in vivo de la edición de ARN del receptor
5-HT2C espera el desarrollo de métodos experimentales para aislar la función de una
isoforma única y específica en el cerebro. Estrategias tales como la generación de
anticuerpos bloqueadores que se dirigen a combinaciones de aminoácidos específicas en
el segundo bucle intracelular o el desarrollo de ratones transgénicos que expresan una
única isoforma pueden ser exitosos, aunque son experimentalmente desafiantes y
consumen tiempo. No se sabe si otros receptores de 5-HT, o para el caso, otros receptores
acoplados a proteína G , están sujetos a la edición de ARN. Parece probable que el
receptor 5-HT2C no sea único. Sin embargo, los métodos de detección para detectar de
manera confiable la edición de ARN no están disponibles; en cambio, el descubrimiento
de sustratos editados depende de la comparación de las secuencias genómicas y cíclicas
del ADN. Consecuentemente, los nuevos sustratos editados son lentos en aparecer.

Regulación postraduccional
La desensibilización del receptor y la regulación negativa son respuestas adaptativas
comunes a la exposición agonista sostenida. El modelo más ampliamente aceptado de
desensibilización de receptores acoplados a proteína G se basa en estudios extensos del
receptor beta-adrenérgico, un receptor Gs-linked. En una interpretación simplificada del
modelo, la unión de un agonista a un receptor de superficie celular conduce a la
fosforilación del receptor, la unión con arrestina, la internalización del receptor en
endosomas, la desfosforilación del receptor y el reciclado a la superficie celular. Se piensa
que la fosforilación del receptor media la desensibilización desacoplando el receptor de
G proteína. Para muchos receptores, este evento de fosforilación es promovido por una
familia de receptores acoplados a proteínas G quinasas (GRK). Sin embargo, las cinasas
dependientes del segundo mensajero y las proteínas quinasas C y A, además de los GRK,
se han implicado en la desensibilización del receptor 5-HT1A (18).
Estudios abundantes in vivo han documentado un debilitamiento del receptor 5-HT1A
mediado respuestas conductuales después del tratamiento a largo plazo con agonistas o
inhibidores de la recaptación de serotonina que promueven indirectamente la activación
del receptor. De hecho, la desensibilización de los autorreceptores del 5-HT1A de rafe se
ha propuesto que desempeñe un papel en la aparición terapéutica retardada de fármacos
antidepresivos. La proteína quinasa C también se ha implicado en la desensibilización del
receptor 5-HT2A (20). Se han demostrado los pasos subsiguientes en el ciclo de
insensibilización-resensibilización para el receptor 5-HT2A, incluida arrestina que se une
al tercer bucle intracelular del receptor (21) e internalización en vesículas endocitóticas
(22).
Sorprendentemente, los antagonistas del receptor 5-HT2A también causan internalización
del receptor, lo que puede estar relacionado con los hallazgos iniciales de la regulación
negativa de los receptores 5-HT2A (ver ref.23 para revisión). Importante, mediado por
antagonistas La internalización del receptor 5-HT2A se ha confirmado en células
piramidales corticales y se acompaña de una aparente redistribución de dendritas a
cuerpos celulares (24). El hecho de que los fármacos antipsicóticos atípicos como la
clozapina y la olanzapina, pero no el haloperidol, promuevan el 5-HT2A- la
internalización del receptor ha conducido a la especulación de que esta nueva propiedad
antagonista puede estar relacionada con la acción terapéutica en la esquizofrenia.

Actividad constitutiva del receptor y agonismo inverso

En Psicofarmacología: la Cuarta Generación de Progreso, el concepto de propiedades
agonistas inversas de los antagonistas del receptor de serotonina fue novedoso y exclusivo
del receptor 5-HT2C (25). El agonismo inverso es la capacidad de ciertos antagonistas
para bloquear la actividad espontánea (también referida como constitutiva) de un receptor
acoplado a proteína G, además de bloquear la unión de un agonista. Estos antagonistas se
denominan agonistas inversos porque sus efectos son frente a los de los agonistas. Por el
contrario, otros antagonistas, denominados antagonistas neutros, no tienen actividad
aparente cuando se añaden solos, aunque bloquean la acción de un agonista. Para explicar
la actividad constitutiva del receptor y el agonismo inverso de los antagonistas, el modelo
de el acoplamiento de la proteína del receptor-G se modificó para proponer la
isomerización espontánea del receptor a una forma activa (R *) en ausencia de un agonista
(26). Los antagonistas con actividad agonista inversa se unen y estabilizan la
conformación inactiva del receptor (R), mientras que los antagonistas neutros se
propusieron que se unen igualmente bien a las formas activas e inactivas del receptor.
Desde 1995, los receptores 5-HT1A (27, 28), los receptores 5-HT1B (29), 5-HT1D re los
receptores (30), los receptores 5-HT2A mutantes (31), los receptores 5-HT4 (11, 32) y
los receptores 5-HT7 (33) han mostrado actividad constitutiva; tanto los agonistas
inversos como los antagonistas neutros se han descrito para estos receptores.
Todos estos estudios que demuestran propiedades agonistas inversas de los antagonistas
de 5-HT se han realizado in vitro en células que expresan receptores recombinantes. No
se sabe si el agonismo inverso es relevante para las acciones in vivo de los antagonistas
de receptores, incluidas sus propiedades terapéuticas. Estudios recientes en vivo de un
reflejo motor simple han producido evidencia convincente de la actividad constitutiva del
receptor 5-HT2A / 2C y efectos diferenciales de los agonistas inversos frente a los
antagonistas neutros (34,35). Sin embargo, Millan et al. No pudieron mostrar los efectos
diferenciales de los agonistas inversos frente a los antagonistas neutros en el receptor 5-
HT1B y concluyeron que las demostraciones in vitro de actividad agonista inversa no se
pueden extrapolar a la situación in vivo. Estudios recientes de Berg et al (37) sugieren
que en ausencia de efectos mensurables sobre la actividad basal, el tratamiento
prolongado con agonistas inversos en el receptor 5-HT2C produce una activación de
fosfolipasa C potenciada, probablemente debido a una mayor expresión de proteínas Gq.

Electrofisiología
Aunque las acciones electrofisiológicas de 5-HT pueden parecer bastante variadas, se
encuentra una considerable uniformidad dentro de cada una de las principales familias de
receptores. Por ejemplo, todos los miembros de la familia 5-HT1 tienden a tener acciones
inhibitorias presinápticas o postsinápticas. De forma similar, todos los miembros de la
familia 5-HT2 tienden a tener acciones excitatorias. Por lo tanto, la discusión de la
electrofisiología de 5-HT se organiza de acuerdo con los subtipos de la familia del
receptor.

Receptores 5-HT1
Concentraciones densas de sitios de unión 5-HT1A y altos niveles de expresión de ARNm
5-HT1A se encuentran en varias regiones, incluyendo el núcleo del rafe dorsal, la capa
de células piramidales del hipocampo y la corteza cerebral (38-40). Los estudios en estas
regiones sido útil para delinear el papel fisiológico de este receptor.
Núcleos de Raphe
Las neuronas serotoninérgicas de los núcleos del rafe son inhibidas por la aplicación local
(microiontoforética) de 5-HT a su región corporal celular. Por lo tanto, el receptor que
media este efecto se ha denominado autorreceptor somatodendrítico (en oposición al
autorreceptor prejuncional). Estudios iniciales en el núcleo del rafe dorsal mostró que la
dietilamida del ácido lisérgico (LSD) y otros alucinógenos de la indolamina son agonistas
potentes en el autorreceptor 5-HT somatodendrítico (41, 42). Funcionalmente, se ha
demostrado que el autorreceptor somatodendrítico 5-HT media la inhibición colateral
(43). La base iónica para la inhibición mediada por autorreceptores, ya sea por 5-HT o
LSD, es una apertura de K? canales para producir una hiperpolarización (44); estos
canales se caracterizan por sus propiedades rectificadoras internas (45). Como en el
núcleo del rafe dorsal, las neuronas serotoninérgicas del tronco cerebral inferior también
están hiperpolarizadas por 5-HT a través de la apertura de K rectificante hacia dentro.
canales (46,47). Los hallazgos similares en las neuronas de rafe dorsal individualmente
aisladas (48) y microcultivadas individualmente (49) subrayan el hecho de que la
inhibición de los autorreceptores es independiente de cualquier entrada al núcleo del rafe.
Las grabaciones patch-clamp en la configuración adjunta a la celda y fuera de tales
neuronas dorsal del rafe dorsalmente aisladas muestran que el aumento en K? resultados
actuales de una mayor probabilidad de apertura de K unitario? actividad del canal (50).
Los autorreceptores somatodendríticos de las neuronas serotoninérgicas tanto en el núcleo
del rafe dorsal como en el núcleo del rafe magnus parecen ser predominantemente del
subtipo 5-HT1A; una variedad de fármacos con selectividad a 5-HT1A (p. ej., 8-OH-
DPAT y los fármacos ansiolíticos buspirona e ipsapirona) comparten la capacidad de
inhibir la activación de las células del rafe de forma dosis-dependiente (47,50a, 50b).
Recientemente, se ha encontrado un antagonista altamente selectivo de 5HT1A (WAY
100635) que bloquea potentemente la inhibición directa de las neuronas serotoninérgicas
del rafe dorsal tanto por 5-HT como por agonistas selectivos de 5-HT1A (51,52) .WAY
100635 también bloquea la inhibición indirecta del rafe dorsal neuronas inducidas por
inhibidores selectivos de la recaptación de 5-HT (53). Complementando este papel
autoinhibidor de los receptores 5-HT1A locales se encuentra un sistema de
retroalimentación negativa de ciclo largo activado por receptores postsinápticos 5-HT1A
en la corteza prefrontal medial.
Además de los sistemas de retroalimentación de ciclo largo, se encuentran circuitos
reguladores de circuito corto dentro del núcleo del rafe dorsal y el gris periacueductal
adyacente (PAG). Estos circuitos de cortocircuito involucran interacciones entre 5-HT y
ácido gamma-aminobutírico (GABAérgico) inhibitorio local. Neuronas excitatorias
glutamatérgicas (56). Curiosamente, tanto los estímulos excitatorios locales como los
inhibidores de las células 5-HT son modulados negativamente por los receptores beta
opiáceos. Las neuronas GABAérgicas locales son activadas por 5-HT a través de los
receptores 5-HT2A / 2C en un local negativo circuito de retroalimentación que
complementa la autoinhibición mediada por 5-HT1A (57). Las neuroquininas tales como
la sustancia P y la neuroquinina B, a través de los receptores NK1 y NK3,
respectivamente, activan principalmente las señales excitatorias glutamatérgicas locales
a las células 5-HT (58). Algunos de estos los circuitos se representan esquemáticamente
en la figura 2. 2.
Otras regiones subcorticales
Se han informado respuestas inhibidoras o hiperpolarizantes a 5-HT en una amplia
variedad de neuronas en la médula espinal, tronco encefálico y diencéfalo. En general,
tales respuestas se han atribuido a la mediación de los receptores 5-HT1. En las neuronas
sensoriales de los ganglios de la raíz dorsal , se ha informado que un receptor de tipo 5-
HT1 reduce el componente de calcio de los potenciales de acción y produce
hiperpolarizaciones que pueden simularse con agonistas de 5-HT1A tales como 8-OH-
DPAT (59). En células cerebelosas de Purkinje, 5- La inhibición inducida por HT, pero
no la excitación, está mediada a través de los receptores 5-HT1A (60). En las porciones
cerebrales del núcleo prepodamente hipogloso, la estimulación eléctrica focal evoca
potenciales postsinápticos inhibidores (IPSP) mediados por receptores 5-HT1A para
activar un rectificando interiormente K? conductancia (61) y una novela K rectificante
hacia el exterior conductancia (62). En el cerebro medio PAG, una región conocida por
estar involucrada en la modulación del dolor y las respuestas de miedo, aproximadamente
la mitad de las células son inhibidas / hiperpolarizadas por 8-OH-DPAT, lo que sugiere
la mediación de los receptores 5-HT1A (63). el hipotálamo ventromedial (64) y el tabique
lateral (65,66), los agonistas 5-HT y 5-HT1A producen efectos inhibidores, también al
activar un K? conductancia. Además de estos efectos postsinápticos, se ha demostrado
que 5-HT suprime la transmisión sináptica glutamatérgica a través de los receptores 5-
HT1B presinápticos en diversas regiones, incluido el núcleo hipogloso (67) y el núcleo
accumbens (68).
En la rata laterodorsal tegmental núcleo, ruptura de las neuronas colinérgicas son
hiperpolarizados por 5-HT a través de 5-HT1 receptores (69). En las ratas de
comportamiento libre, la inyección directa de 5-HT en el laterodorsal tegmental núcleo
se ha encontrado para suprimir el ojo rápido -movimiento (REM) de sueño (70). En gatos
no anestesiados, se ha demostrado que una población correspondiente de neuronas que
están activas de forma selectiva durante los estados REM (neuronas REMon) en el núcleo
tegmental laterodorsal se inhibe mediante la aplicación directa del agonista 5-HT1A 8-
OH-DPAT (71). Se ha propuesto que durante el sueño REM, la eliminación de una
influencia inhibidora 5-HT tónica de estas neuronas colinérgicas puede ser responsable
de la aparición de un EEG activado durante este estado de comportamiento.
Hipocampo
Las células piramidales de la región CA1 expresan niveles elevados de ARNm del
receptor 5-HT1A y del enlace del receptor 5-HT1A (72). Desde el principio, los registros
intracelulares en cortes de cerebro mostraron que la inhibición inducida por 5-HT fue
causada por la hiperpolarización resultante de una apertura de K? canales (73). El trabajo
posterior, en el que diversos enfoques farmacológicos se han utilizado en cortes
cerebrales, ha demostrado que la inhibición inducida por 5-HT en células piramidales
CA1 y CA3 está mediada por la activación de receptores del subtipo 5-HT1A ( 74-77).
Después de la administración a largo plazo pero no a corto plazo de varios tratamientos
antidepresivos (inhibidores selectivos de la recaptación de 5-HT, inhibidores de la
monoaminooxidasa, fármacos tricíclicos, terapia electroconvulsiva), se observan
respuestas desinhibitorias con el antagonista selectivo 5-HT1A. 100635, que sugiere un
aumento del tono inhibidor mediado por 5-HT1A en las células piramidales del
hipocampo CA3 (78). Curiosamente, este aumento en el tono 5-HT1A después del
tratamiento antidepresivo a largo plazo se potencia mediante tratamiento a corto plazo
con litio (79).
Además de los efectos directos mencionados anteriormente sobre las células piramidales,
se ha demostrado que 5-HT deprime tanto los potenciales sinápticos excitadores como
los inhibidores en el hipocampo. Concentraciones relativamente altas de 5-HT provocan
una reducción en los potenciales postsinápticos excitadores evocados eléctricamente
(EPSP) en las células piramidales CA1 (80), un efecto que imita el 8-OH-DPAT, que
sugiere la mediación de los receptores 5-HT1A. Medidas indirectas Indican que 5-HT
actúa presinápticamente para reducir el Ca2? entrada y, por lo tanto, transmisión sináptica
glutamatérgica. Además, se ha observado un efecto inhibidor mediado por 5-HT1A sobre
las supuestas interneuronas inhibitorias del hipocampo (81,82). ¿Concuerda con una
apertura de K? canales, los efectos inhibidores de 5-HT en las interneuronas son el
resultado de una hiperpolarización asociada con una reducción en la resistencia de
entrada. Funcionalmente, la inhibición mediada por 5-HT1A de interneuronas
GABAérgicas en el hipocampo conduce a una desinhibición de células piramidales en
CA1.Clarly, los efectos de 5-HT en el hipocampo son altamente complejos, involucrando
tanto acciones presinápticas como postsinápticas que pueden, en diversos grados, ser
inhibitorias o desinhibidoras, facilitadoras o desfavorables.
Corteza cerebral
En varios estudios se han descrito respuestas hiperpolarizantes / inhibitorias en células
piramidales de la corteza cerebral inducidas por 5-HT1A. En la corteza entorrinal, donde
la densidad de los receptores 5-HT1A es especialmente alta (y la densidad de receptores
5-HT2A baja ), sin embargo, las neuronas corticales en la mayoría de las otras regiones
muestran típicamente respuestas mixtas inhibitorias y excitadoras a 5-HT debido a la
expresión por las mismas células piramidales de múltiples subtipos de receptores 5-HT (
por ejemplo, 5-HT1A y 5-HT2 / 2C) (84-87). Las respuestas hiperpolarizantes mediadas
por los receptores 5-HT1A a menudo se desenmascaran o potencian en presencia de
antagonistas de 5-HT2, de acuerdo con la idea de que se produce una interacción entre
los receptores 5-HT1A y 5-HT2A a nivel neuronal individual (84,88,89 ). Una sugerencia
similar de un cambio en el equilibrio entre la excitación e inhibición mediada por 5-HT
proviene de otro estudio in vivo, en el que se demostró que la aplicación sistémica y local
de antagonistas de 5-HT2 evitaba una mejora de la actividad de la unidad ( y
desincronización cortical) que normalmente ocurre en respuesta a estímulos nocivos
(compresión de la cola) en ratas anestesiadas (90).
Además de los efectos postsinápticos antes mencionados, varios efectos presinápticos
están mediados por receptores 5-HT1 en la corteza cerebral. En la corteza cingulada, 5-
HT, que actúa sobre los receptores presinápticos 5-HT1B, reduce la amplitud de los EPSP
evocados eléctricamente, incluyendo componentes tanto de N-metil-Daspartato (NMDA)
como de componentes no NMDA (87). Modulaciones similares de EPSPs, mediadas por
receptores 5-HT1A o 5- HT1B, se han reportado para varias regiones corticales,
incluyendo prefrontal medial (91) y corteza entorrinal (92).

Receptores 5-HT2
Los estudios cuantitativos autorradiográficos muestran altas concentraciones de sitios de
unión de 5-HT2 y expresión de ARNm en ciertas regiones del cerebro anterior, como la
neocorteza (capas IV / V), corteza piriforme, claustrio y tubérculo olfatorio (93). Con
pocas excepciones notables (p. Ej., Núcleos motores y el núcleo del tracto solitario), se
encuentran concentraciones relativamente bajas de receptores 5-HT2 o expresión de
ARNm en el tronco encefálico y la médula espinal. Estudios encaminados a examinar el
papel fisiológico de los receptores 5-HT2 en varios de estas regiones se discuten en las
siguientes secciones.
Motoneuronas
En el núcleo facial y otros núcleos motores craneales, las motoneuronas tienen una alta
densidad de sitios de unión del receptor 5-HT2. Estudios iniciales in vivo demostraron
que la 5-HT aplicada microinformáticamente no induce por sí misma el disparo en las
motoneuronas faciales normalmente inactivas, pero facilita los efectos excitatorios
subumbrales y umbrales del glutamato (94). Los registros intracelulares de motoneuronas
faciales in vivo o en cortes cerebrales in vitro (95,96) muestran que la 5-HT induce una
despolarización subumbral lenta asociada con un aumento en la resistencia de entrada, lo
que indica una disminución en la K en reposo. conductancia.Ritanserina y otros
antagonistas de 5-HT2 pueden bloquear los efectos excitatorios de 5-HT en motoneuronas
faciales selectivamente (97). Los alucinógenos de indolina (p. Ej., LSD y psilocina) y
fenetilamina (p. Ej., Mescalina y DOI) actúan como agonistas de 5-HT2 en motoneuronas
faciales. La LSD administrada iontoforéticamente, la mescalina y la psilocina, aunque
tienen un efecto relativamente pequeño, producen una facilitación prolongada de la
excitabilidad de la motoneurona facial (98). Estudios intracelulares en cortes cerebrales
muestran que la mejora es causada en parte por un efecto despolarizante pequeño pero
persistente de los alucinógenos (97,99).
Otras regiones subcorticales
En cortes cerebrales de la formación reticular pontina medial, 5-HT induce una
hiperpolarización en algunas células y una despolarización en otras células (100). Las
respuestas hiperpolarizantes están asociadas con un aumento en la conductancia de la
membrana y tienen un perfil farmacológico 5-HT1. las respuestas despolarizantes tienen
una farmacología de 5-HT2 y se asocian con una disminución en la conductancia de la
membrana que resulta de una disminución en un K hacia afuera? actual. Estas dos
acciones de 5-HT no parecen coexistir en las mismas neuronas porque ninguna de las
células muestra respuestas duales a agonistas selectivos.
En cortes cerebrales de la substantia nigra pars reticulata, la mayoría de las neuronas son
excitadas por 5-HT vía receptores 5-HT2 (101), posiblemente del subtipo 5-HT2C en vez
de 5-HT2A (102). Neuronas en el olivar inferior los núcleos son excitados por 5-HT a
través de los receptores 5-HT2A, de modo que la frecuencia oscilatoria de entrada a las
células cerebelosas de Purkinje se altera (103). En el núcleo accumbens, la gran mayoría
de las neuronas se despolarizan por 5-HT y se las induce a disparar (104). Esta
despolarización está asociada con un aumento en la resistencia de entrada secundaria a
una reducción en un rectificador hacia adentro K? conductancia. El análisis
farmacológico muestra que la despolarización está mediada por un receptor de tipo 5-
HT2 en lugar de 5-HT1 o 5-HT3.
Las neuronas gabérgicas del núcleo reticularis talami muestran respuestas despolarizantes
marcadas a 5-HT, asociadas con una disminución en una K en reposo o "fuga".
conductancia; estas respuestas excitadoras son bloqueadas por los antagonistas de 5-HT2,
ketanserina y ritanserina (105). La despolarización lenta inducida por 5-HT inhibe
potentemente el disparo de ráfagas en estas células y promueve la actividad de pico único.
Se ha sugerido que el 5-HT- El cambio inducido en el modo disparo desde la oscilación
rítmica a la actividad de pico único, que ocurre durante los estados de alerta y atención,
contribuye a mejorar la transferencia de información a través del tálamo durante estos
estados. Las neuronas gabaérgicas dentro del núcleo del septo interno también están
excitadas por 5- HT a través de los receptores 5-HT2 (106). En la circunvolución dentada
del hipocampo, una subpoblación de neuronas GABAérgicas se activa a través de los
receptores 5-HT2A, evidenciado por un aumento en la frecuencia de IPSP en células
granulares en la circunvolución dentada (107). , se ha informado una activación similar
de las neuronas GABAérgicas a través de los receptores 5-HT2A en la región CA1 del
hipocampo (108). Estas observaciones se parecen mucho a los hallazgos en la corteza
piriforme, donde una subp La activación de las interneuronas GABAérgicas es excitada
por 5-HT a través de los receptores 5-HT2A (ver abajo). Además, la evidencia indirecta
sugiere que la inhibición inducida por 5-HT de las neuronas dentadas / interpositas de los
núcleos cerebelosos profundos está mediada indirectamente por la activación de
GABAérgico interneuronas a través de los receptores 5-HT2 (109) .Tomando en
conjunto, estos hallazgos sugieren que en múltiples ubicaciones dentro del sistema
nervioso central, la excitación de subpoblaciones de interneuronas por 5-HT a través de
los receptores 5-HT2 da lugar a efectos inhibitorios indirectos.
Corteza cerebral
Los efectos electrofisiológicos de 5-HT se han estudiado en varias regiones corticales.
Estudios in vitro en preparaciones de cortes cerebrales han demostrado que las células
piramidales en diversas regiones corticales responden a 5-HT ya sea por una pequeña
hiperpolarización, despolarización o ningún cambio en el potencial (84-86, 110).
Dependiendo de la región de la corteza cerebral en estudio, como se describe a
continuación, las despolarizaciones parecen estar mediadas por los receptores 5-HT2A o
5-HT2C. Además de estos efectos postsinápticos, la 5-HT induce un aumento de los
potenciales postsinápticos espontáneos (no evocados eléctricamente) o corrientes (PSP /
PSCs) en cortes cerebrales de diversas regiones corticales. Originalmente, las grabaciones
se realizaron a partir de células piramidales en una región paleocortical, la corteza
piriforme. En esa región, como en el hipocampo (véase más arriba), la 5-HT, que actúa a
través de los receptores 5-HT2A, induce un aumento de los IPSP espontáneos (86, 111-
115). Los estudios in vivo también han proporcionado evidencia de una activación
inmediata del receptor 5-HT2A de las neuronas GABAérgicas en la corteza piriforme
(116). Como en la corteza piriforme, 5-HT puede aumentar las IPSCs en células
piramidales en varias capas de la neocorteza (117, 118). Las IPSCs son el resultado de la
activación de interneuronas corticales a través de receptores 5-HT2A / 2C o 5-HT3 (117).
Se ha encontrado evidencia inmunocitoquímica en la corteza cerebral de primates para
una segregación de interneuronas que expresan 5-HT2A y 5-HT3; el anterior proyecto a
somatobasilar y el último a regiones dendríticas apicales distales de células piramidales
(119).
Cuantitativamente, en las células piramidales de la capa V, los eventos sinápticos
inducidos por 5-HT consisten principalmente en EPSP / EPSCs (118). Por lo tanto,
aproximadamente el 85% de todos los PSCs están bloqueados por AMPA / antagonistas
del receptor de glutamato de kainato (por ejemplo, LY293558) pero no por el antagonista
de GABAA bicuculina (118). El aumento inducido por 5-HT en EPSCs es más
pronunciado en regiones frontales, incluyendo la corteza prefrontal medial (118). En esa
región, los receptores 5-HT2A son más densos que en las regiones más posteriores
(40,120). Estudios recientes, en los que se utilizó marcaje intracelular con biocitina, han
confirmado que los aumentos inducidos por 5-HT Los EPSCs se producen
predominantemente en las células piramidales de la capa V, mientras que las respuestas
son mínimas en las células de la capa II / III y carecen de las células de la capa VI (121).
Los EPSC inducidos por 5-HT son antagonizados competitivamente por bajas
concentraciones del antagonista altamente selectivo de 5-HT2A MDL 100,907 (pA2,
8,8), que indica mediación por los receptores 5-HT2A (118,122). La norpinefrina, a través
de los adrenoceptores? 1, también induce un aumento en los EPSP en las células
piramidales de la capa V, pero (al menos en la rata) el aumento es solo una fracción del
producido por 5-HT (122). Los cambios en la frecuencia de las corrientes o potenciales
sinápticos generalmente se consideran indicativos de una modulación de la función
presináptica.En consecuencia, el agonista metabotrópico del receptor de glutamato II / III
no específico (1S, 3S) -ACPD (118) y el agonista metabotrópico selectivo mGlu II / III
LY354740 (123), que actúan en los autorreceptores inhibidores y se localizan en los
terminales nerviosos glutamatérgicos, suprimir el aumento inducido por 5-HT en la
frecuencia de EPSCs.Además, la activación de? receptores, localizados
presinápticamente en las entradas talamocorticales, también suprime las EPSC inducidas
por 5-HT, particularmente en la corteza prefrontal medial (124). Estos resultados son
consistentes con la idea de que la activación de los receptores 5-HT2A aumenta la
liberación de glutamato en la capa V piramidal células a través de un mecanismo
presináptico.5-HT también produce un aumento pequeño pero significativo en la
amplitud de los EPSCs espontáneos, un efecto que puede involucrar mecanismos de
amplificación postsináptica (118). Tales efectos postsinápticos son consistentes con el
hallazgo de un alto nivel de 5 - Inmunorreactividad del receptor -HT2A en las dendritas
apicales de las células piramidales corticales (125-127)
Los EPSCs inducidos por 5-HT se bloquean mediante la aplicación en baño de la
rebanada con la tetrodotoxina bloqueadora de canales de sodio rápida o perfusión con una
solución que no contiene calcio agregado ('' cero '' calcio) (118). ¿Por lo general,
sensibilidad a la tetrodotoxina y Ca2? la dependencia sugeriría que la activación de las
células glutamatérgicas dentro del corte por 5-HT había conducido a una liberación de
glutamato dependiente del flujo impulsivo. Sin embargo, varias líneas de evidencia
argumentan en contra de esta interpretación convencional. Primero, raramente fueron
neuronas dentro de los confines del cerebro rebanada inducida al fuego por la aplicación
de 5-HT en el baño. En segundo lugar, ninguna de las células piramidales (una fuente
potencial de entradas excitadoras intracorticales) se despolarizó suficientemente por 5-
HT como se registró en nuestras condiciones para alcanzar el umbral para disparar.
Tercero, EPSCs puede ser inducida por la microionoforesis de 5-HT en "puntos calientes"
a lo largo de la trayectoria de las dendritas apicales de las células piramidales de la capa
V (118). Juntos, estos experimentos sugieren que el aumento de EPSCs espontáneos
inducidos por 5-HT en neocortical las células piramidales se producen a través de una
acción focal que implica un mecanismo dependiente de Ca2 \ beta que no se basa en un
aumento en el flujo de impulsos en aferentes excitadores.
Como alternativa a un mecanismo convencional relacionado con el flujo impulsivo, se ha
formulado la hipótesis de que los EPSC inducidos por 5-HT resultan de una activación
de la vía de liberación "asíncrona" (128). Una de las diversas características distintivas
de este mecanismo alternativo de la liberación del transmisor es que Sr2? puede sustituir
al Ca2? en la versión asincrónica, pero no síncrona (129). Esta característica parece ser el
resultado de la participación diferencial de dos isoformas de la proteína sensora de calcio
synaptotagmin en los dos mecanismos de liberación alternativos (130). De acuerdo con
esta idea, Sr2 ? es altamente efectivo para permitir que 5-HT induzca un aumento en la
frecuencia de EPSCs en ausencia de Ca2? (128)
Recientemente, se ha encontrado que el LSD y otros fármacos alucinógenos, que actúan
como agonistas parciales en los receptores 5-HT2A, promueven un componente tardío de
los EPSP evocados eléctricamente (131). Es posible que este componente tardío, en lugar
de representar la transmisión polisináptica convencional, está mediado a través del
mecanismo de liberación del transmisor asíncrono, que posiblemente implique una
liberación de Ca2 intraterminal? almacena a través de la ruta fosfolipasa C, inositol
trifosfato (IP3). Una mejora de los EPSP evocados asincrónicos a través de los receptores
5-HT2A proporcionaría un posible mecanismo sináptico para los efectos alucinógenos de
estos fármacos. En contraste, la 5-HT en sí misma no promueve el retraso componente de
la liberación evocada eléctricamente excepto durante la fase de lavado, presumiblemente
debido a acciones opuestas en 5-HT1 u otros receptores no-5-HT2A (132). La figura 2.3
muestra la ubicación propuesta de varios subtipos de receptores 5-HT y sus interacciones
con otros receptores de neurotransmisores dentro del circuito cortical.

Receptores 5-HT3
Se han encontrado respuestas excitativas a 5-HT en varias neuronas centrales que tienen
muchas de las características de las respuestas periféricas de 5-HT3, incluyendo inicio
rápido y desensibilización rápida, características típicas de canales iónicos regulados por
ligando en lugar de respuestas de receptor acoplado a proteína G (133, 134). En las células
cultivadas NG108-15, las propiedades de permeación del canal 5-HT3 son indicativas de
un canal de cationes con una permeabilidad relativamente alta al Na? y K? y baja
permeabilidad al Ca2? (134). Se clonó un canal iónico 5-HT-cerrado que tiene
propiedades fisiológicas y farmacológicas apropiadas para un receptor 5-HT3 (135). En
el sistema de expresión de oocitos, este receptor muestra desensibilización rápida y está
bloqueado por 5-HT3. Antagonistas (por ejemplo, ICS 205-930 y MDL 72222). Su
homología de secuencia con el receptor nicotínico de acetilcolina (27%) y la subunidad \
alpha 1 del receptor GABAA (22%) indican que este clon del receptor 5 - HT3 es un
miembro de la superfamilia del canal iónico dependiente de ligandos. Típicamente, los
miembros de esta superfamilia están compuestos de múltiples subunidades; sin embargo,
solo una subunidad del receptor 5-HT3 y una variante alternativamente empalmada se
han clonado hasta la fecha (136).
En las rodajas de hipocampo, se ha informado que la 5-HT aumenta los IPSP
GABAérgicos espontáneos, muy probablemente a través de una excitación mediada por
el receptor 5-HT3 de interneuronas inhibidoras; estas respuestas también muestran
desvanecimiento con el tiempo (137, 138). Se ha informado de una inducción similar de
IPSCs mediada por el receptor 5-HT3 en la neocorteza (117). Los registros de patch
clamps completos han confirmado un efecto excitatorio directo del receptor 5-HT3 sobre
interneuronas del hipocampo independientes de la activación de la proteína G (139).
Aunque la excitación rápida y de inactivación rápida generalmente se ha aceptado como
característica de los receptores 5-HT3, también se han notificado respuestas no
desensibilizantes. En las células ganglionares de la raíz dorsal, una despolarización
relativamente rápida pero no inactivadora se ha descrito una respuesta que tiene un perfil
farmacológico de 5-HT3 (140). En las neuronas de las rebanadas de cerebro de núcleo
solitario del tracto solitario, se ha observado una respuesta despolarizante postsináptica a
los agonistas de 5-HT3 que no se desensibiliza rápidamente (141) .Además de estos
efectos postsinápticos, un aumento mediado por el receptor 5-HT3 en Ca2? la afluencia
se ha descrito en una subpoblación de terminales del nervio estriado (142).

Receptores 5-HT4, 5-HT6 y 5-HT7

El primer receptor de 5-HT unido a proteína Gs, el receptor 5-HT4, se identificó sobre la
base de criterios farmacológicos y bioquímicos (por ejemplo, acoplamiento positivo de
respuestas de 5-HT a adenilil ciclasa) (9). Posteriormente, un receptor con propiedades
farmacológicas y de otro tipo coincidentes, se clonó y se encontró que se expresaba en
diversas regiones del cerebro (143). Se han clonado otros dos receptores de 5-HT
acoplados positivamente a adenilil ciclasa. Debido a que su farmacología difería de la
descrita anteriormente. Sitio HT4, se designaron como receptores 5-HT6 y 5-HT7 (144-
146). En este momento, los estudios electrofisiológicos están disponibles solo para los
receptores 5-HT4 y 5-HT7 y se describen a continuación.
Receptores 5-HT4
Los estudios de unión que usan un ligando 5-HT4 selectivo indican que los receptores 5-
HT4 están presentes en varias regiones discretas del cerebro de mamífero, incluyendo el
cuerpo estriado, la sustancia negra, el tubérculo olfatorio y el hipocampo (147). Debido a
que estas regiones también expresan 5-HT4 -receptor mRNA, parece probable que los
receptores funcionan postsinápticamente para mediar ciertas acciones de 5-HT.La mejor
estudiada de estas regiones es el hipocampo, en el que los estudios bioquímicos y
electrofisiológicos han proporcionado una imagen detallada de las acciones de 5-HT en
los receptores 5-HT4. Los estudios electrofisiológicos muestran que los receptores 5-HT4
median la inhibición de una corriente de potasio activada por calcio que es responsable
de la generación de una hiperpolarización lenta en las células piramidales hipocampales
de la región CA1 (74,148,149). Una supresión de la hiperpolarización posterior mejoraría
la capacidad de estas células para responder a las entradas de excitación con una actividad
de pico robusta.
Receptores 5-HT7
El ritmo circadiano en los mamíferos se establece mediante un marcapasos ubicado
principalmente en el núcleo supraquiasmático del hipotálamo. Esta actividad de
marcapasos puede mantenerse en cortes hipotalámicos, en los que las neuronas
supraquiasmáticas muestran cambios diurnos en la velocidad de activación neuronal. La
administración de 5-HT parece producir un cambio de fase en esta actividad (150) al
actuar sobre un receptor que puede ser de los 5 - Subtipo HT7 (144). Este cambio está
mediado por la estimulación de la adenilato ciclasa porque se imita aumentando el
monofosfato de adenosina cíclico intracelular (cAMP) y bloqueado por la inhibición de
la proteína quinasa A (151). Sin embargo, el mecanismo preciso por el cual 5-HT7 los
receptores no se conocen actualmente porque no está claro si las neuronas
supraquiasmáticas expresan los receptores 5-HT7 (144). Además, el efecto de 5-HT sobre
las propiedades de la membrana de estas células no se ha examinado.5-Activación del
receptor HT 7 se ha informado que inhibe las corrientes de GABAA en neuronas
supraquiasmáticas en cultivo (152), pero la relación, si la hay, entre estas observaciones
y los cambios de 5-HT en la actividad circadiana aún no se ha determinado.
Otro efecto electrofisiológico que puede estar mediado a través de los receptores 5-HT
que están acoplados positivamente a la adenilato ciclasa es la mejora de la corriente
catiónica no selectiva hiperpolarizante activada Ih. Los canales Ih, que son homólogos a
los canales cíclicos nucleotídicos en neuronas sensoriales especializadas, son
positivamente modulados por cAMP (153, 154). Un aumento en Ih tiende a prevenir
hiperpolarización excesiva y a aumentar la excitabilidad neuronal. En varias regiones del
cerebro, incluido el tálamo (155), prepósito hipogloso (156), sustancia nigra zona
compacta (157) e hipocampo (158), se ha demostrado que 5-HT mejora Ih a través de un
mecanismo dependiente de cAMP. Los resultados de un análisis farmacológico con
múltiples fármacos no selectivos sugirieron que el aumento en Ih inducido por 5-HT en
las células ganglionares de la raíz dorsal está mediado por los receptores 5-HT7 (159).
Recientemente, el primer fármaco con selectividad hacia el receptor 5-HT7 era
demostrado bloquear la activación de la adenilil ciclasa por los agonistas de 5-HT en el
hipocampo del cobayo (33). La creciente disponibilidad de tales fármacos selectivos
debería mejorar en gran medida la evaluación electrofisiológica de los receptores de 5-
HT acoplados a Gs.

VÍAS DE TRANSDUCCIÓN DE SEÑALES INTRACELULARES

Vías de señalización múltiples: proteínas G y segundos mensajeros
Las vías de señalización intracelular múltiples constituyen un tema común para los
receptores acoplados a proteína G, y la familia del receptor 5-HT no es única. La
inhibición de la adenilato ciclasa fue la primera vía intracelular que se describió para los
receptores acoplados a proteína Gi / o, como el receptor 5-HT1A.
Sin embargo, ahora está claro que estos receptores regulan múltiples vías de señalización
y moléculas efectoras, incluida la activación de canales de K + (GIRK) rectificados
interiormente con proteína G, la inhibición de canales de Ca + sensibles al voltaje, la
activación de la fosfolipasa Cbeta y la activación del mitógeno activado proteína quinasa.
Aunque todas estas señales son sensibles a la toxina pertussis, por lo que las proteínas Gi
/ o están implicadas, pueden estar mediadas por complejos de proteína G distintos. Por
ejemplo, el acoplamiento a los canales GIRK está mediado por las subunidades beta
gamma liberadas de las proteínas Gi (y posiblemente Go), mientras que la inhibición de
los canales de Ca + está mediada por las subunidades beta gamma liberadas de las
proteínas Go.
El perfil de las moléculas de señalización varía de una célula a otra, ofreciendo diversas
posibilidades de señalización y aportando complejidad adicional. Por ejemplo, la
activación del receptor 5-HT1A de la fosfolipasa C depende del tipo de célula; esta señal
está mediada por las subunidades beta de la proteína G y esto requiere la presencia de una
isoforma C de fosfolipasa C regulada por beta gamma. Las subunidades gamma beta,
generadas por la disociación de la proteína Gi heterotrimérica, también activan la
isoforma tipo 2 de la adenilato ciclasa..
Esta activación es condicional, depende de la coactivación por G alfas (es decir, Gi
potencia la acción de Gs). La pregunta obvia es por qué las acciones opuestas de Gi y
G no se compensan entre sí. La respuesta puede estar en los detalles. Además de la gran
familia de proteínas G (subunidades 21  subunidades 5  y subunidades 11 ), la familia
de la adenilato ciclasa comprende al menos nueve miembros, cada uno regulado por
distintos insumos. La mayoría de estas moléculas se encuentran en el sistema nervioso
central.
La proteína G que contribuye a la activación de la adenilatociclasa tipo 2 es el
heterotrímero Gi1 o Gi2 (160), mientras que las tres subunidades Gi1 (i3> i2>
i1) tienen la capacidad de inhibir la adenilato ciclasa tipos 5 y 6 (161). Por lo tanto, en
células del cerebro en las que el heterotrímero Gi1 o Gi2 se coexpresa con
adenilatociclasa tipo 2, la activación del receptor 5-HT1A puede potenciar los aumentos
mediados por Gs en cAMP. Se ha demostrado que este tipo de interacción ocurre en el
cerebro, en el cual los receptores ligados a Gi mejoran las respuestas -adrenérgicas
(162); una interacción similar puede tener lugar en células que coexpresan un miembro
de la familia del receptor 5-HT1A con uno de los receptores 5-HT (5-HT4, 5-HT6 o 5-
HT7) ligado a la activación de adenilato ciclasa.
Aunque un aumento mediado por el receptor 5-HT en la formación de cAMP en un
colículo superior fue una de las primeras vías de mensajero definidas en el cerebro, el
receptor 5-HT4 fue uno de los últimos receptores de 5-HT que se clonaron (143).
Este receptor y los receptores 5-HT6 y 5-HT7 tienen en común la capacidad de activar
adenilato ciclasa a través de Gs.
En las células transfectadas, el receptor 5-HT6 se acopla a la adenilato ciclasa tipo 5, la
típica isoforma sensible a Gs (163). En contraste, el receptor 5-HT7 aumenta el calcio
intracelular, que activa la adenilato ciclasa tipo 1 u 8 estimulada por la calmodulina.
Una caracterización reciente de homogeneizados de hipocampo de rata sugiere que los
receptores 5-HT4 y 5-HT7 están implicados en la formación de cAMP (isoforma de
adenilato ciclasa desconocida) en el hipocampo.
Curiosamente, el receptor 5-HT1A produce un ligero aumento en la formación de cAMP,
quizás reflejando la potenciación de G de la activación de Gs de la adenilato ciclasa
tipo 2 mediada por el receptor 5-HT4 o 5-HT7.
Los receptores que se acoplan a los miembros de la familia Gq (Gq, G11, G14 y G15 /
16) activan la fosfolipasa C de una manera insensible a la toxina pertussis. La activación
de la fosfolipasa C fue el primer mecanismo de transducción de señal identificado para la
familia del receptor 5-HT2 y es esencialmente universal. Esto probablemente refleja la
amplia distribución de Gq / 11 y la redundancia funcional de estas dos proteínas G.
Se ha demostrado que el receptor 5-HT2C se acopla de manera sensible a Gi / o en
ovocitos de Xenopus (por ejemplo, ver ref.165) y en algunas líneas celulares transfectadas
(166).
En contraste, la evidencia reciente sugiere que la activación de la fosfolipasa C en un
entorno nativo (plexo coroideo) está mediada por completo por el acoplamiento Gq / 11
(167).
El acoplamiento del receptor 5-HT2C a G13 con posterior redisposición del citoesqueleto
se ha descrito recientemente en una línea celular transfectada (168).
Una amplia evidencia sugiere que los receptores 5-HT2A y 5-HT2C se acoplan a otras
vías efectoras, además de la fosfolipasa C (Fig.2.4).
La fosfolipasa A2 es una vía de transducción de señal independiente bien caracterizada
que conduce al ácido araquidónico, con la consiguiente formación de prostaglandinas y
leucotrienos (169).
La activación del receptor 5-HT 2A de la proteína quinasa mitotada se ha caracterizado
ampliamente en el músculo liso vascular y también se cree que es independiente de la
activación de la fosfolipasa C (170, 171).
El receptor 5-HT2A aumenta la actividad de la fosfolipasa D a través de una vía de
proteína GF (factor de ribosilación de adenosina difosfato) de proteína G pequeña, siendo
la activación principal de la proteína quinasa C (172).
Los receptores 5-HT2A regulan de forma diferencial el factor neurotrófico derivado del
cerebro en el hipocampo y la corteza y desempeñan un papel en la regulación por
disminución inducida por el estrés de la expresión del factor neurotrófico derivado del
cerebro en el hipocampo.
Además, se ha descrito un aumento mediado por el receptor 5-HT2A en el factor de
crecimiento transformante-1, secundario a la activación de la proteína quinasa C.
Los receptores 5-HT2A y 5-HT2C provocan aumentos específicos de la región en los
genes tempranos inmediatos c-fos y Arc en cerebro de rata, que probablemente se
encuentren aguas abajo de la activación de la fosfolipasa C.
Se ha demostrado una comunicación cruzada extensa y compleja entre el receptor 5-
HT2A y 5-HT2B y el receptor 5-HT1B / D en células serotoninérgicas inmortalizadas, en
las que el receptor 5-HT2B, a través de un producto de fosfolipasa A2, atenúa 5-HT1B /
Inhibición de la adenilato ciclasa mediada por el receptor D.
La coactivación del receptor 5-HT2A bloquea esta interacción por un mecanismo
desconocido. Estos ejemplos de vías de señalización intracelulares paralelas, interactivas
y convergentes ilustran la complejidad de la señalización del receptor, incluso dentro de
una única subclase del receptor.

Correlatos Fisiológicos
En general, los efectos electrofisiológicos de 5-HT se corresponden bien con la proteína
G y el acoplamiento de segundo mensajero de los diversos subtipos de receptores. Los
receptores 5-HT1 acoplados Gi / Go generalmente median los efectos inhibidores sobre
la activación neuronal a través de una apertura de rectificación interna K? canales o un
cierre de canales de Ca2? dependientes de voltaje. Se han observado inhibiciones
mediadas por receptores 5-HT1 en neuronas ubicadas en diversas regiones del sistema
nervioso central, desde células piramidales de la corteza cerebral e hipocampo hasta
neuronas serotoninérgicas del tronco encefálico. núcleos del rafe. La familia de receptores
5-HT2 acoplados a Gq / 11 generalmente media los efectos excitadores lentos a través de
una disminución en K? conductancia o un aumento en la conductancia del catión no
selectivo. Se han observado efectos excitadores lentos mediados por receptores 5-HT2 en
varias regiones, incluyendo la médula espinal y el tronco encefálico (p. Ej.,
Motoneuronas), regiones subcorticales (p. Ej., Núcleo accumbens) y corteza cerebral,
donde estos receptores están más concentrados. Los receptores 5-HT3, que son canales
regulados por ligando con homología estructural con receptores colinérgicos nicotínicos,
median los rápidos efectos excitatorios de 5-HT. A continuación, se proporcionan
ejemplos específicos para los receptores 5-HT1, 5-HT2 y 5-HT4, para qué vías de
transducción intracelular se han estudiado más intensamente.
Receptores 5-HT1
La apertura de K? los canales a través de los receptores 5-HT1A en las neuronas del rafe
dorsal están mediados por proteínas G sensibles a la toxina pertussis (178, 179). Los
mecanismos moleculares subyacentes a la apertura de K? Es muy probable que los canales
sean comunes a todos los receptores de neurotransmisores que se acoplan a través de la
familia Gi / Go de proteínas G. Como en el rafe dorsal, estos receptores activan una
proteína G sensible a la toxina pertussis que se acopla a la apertura de K rectificadora
interna. canales a través de una vía delimitada por membrana (74,180). ¿Está ampliamente
aceptado que el más bien que ? las subunidades regulan los canales (181-183). El
mecanismo efector que finalmente interviene en el efecto inhibitorio señalado por los
receptores 5-HT1A es el K rectificador interno canal.Interesante, al menos uno de los
potasio K? subunidades identificadas en el corazón, GIRK-1, se expresa a niveles
elevados en el hipocampo (184), lo que sugiere que podría estar involucrado en la
mediación de la hiperpolarización inducida por el receptor 5-HT1A en esta región. De
acuerdo con esta posibilidad, el K? la corriente activada por los receptores 5-HT1A en la
región CA1 muestra la firma característica de esta familia de canales de potasio,
concretamente, la rectificación hacia adentro (74).
Receptores 5-HT2
El papel de las proteínas G en la mediación de la corriente lenta hacia adentro inducida
por 5-HT2 que resulta de K? el cierre del canal ha sido evaluado en motoneuronas faciales
usando los análogos de nucleótidos de guanina resistentes a la hidrólisis GTP? S y GDP?
S (185). La corriente interna inducida por 5-HT se vuelve irreversible en gran parte en
presencia de GTP? S intracelular. La mediación por proteínas G también es sugerida por
el hecho de que la corriente interna se reduce por el P-S intracelular, lo que impide la
activación de la proteína G. Aunque la identidad de la (s) proteína (s) G que median las
respuestas electrofisiológicas aún no se ha determinado directamente, se sabe que la
familia de receptores 5-HT2 está acoplada a la fosfolipasa C. Por lo tanto, un miembro de
la familia Gq / 11 puede estar involucrado porque este último puede activar directamente
la fosfolipasa C (186).
Receptores 5-HT4
Inicialmente, se demostró que la 5-HT suprime una corriente de potasio activada por
calcio que es responsable de la generación de una hiperpolarización lenta en las células
piramidales del hipocampo de la región CA1 (ver arriba). Estudios posteriores han
implicado receptores 5-HT4, actuando a través de cAMP y proteína quinasa A, en la
mediación de esta acción (187). Una activación similar de una proteína quinasa
dependiente de cAMP ha sido implicada en la supresión de un K activada por voltaje.
corriente en neuronas cultivadas del colículo superior (188). Más recientemente, se ha
demostrado que los receptores 5-HT4 reducen la hiperpolarización posterior en células
piramidales del hipocampo al inhibir la liberación de calcio inducida por calcio de las
reservas intracelulares (189).

Importancia Farmacológica
La importancia farmacológica de un solo receptor que regula múltiples vías de
señalización apenas está comenzando a definirse. Los estudios más explícitos de
acoplamiento promiscuo de receptores a múltiples vías de señalización de proteína G han
involucrado la transfección de un receptor recombinante en varios modelos de células que
normalmente no expresa el receptor. Las potentes estrategias genéticas que implican
técnicas antisentido, la sobreexpresión de moléculas de señalización y la expresión de
mutantes negativos constitutivamente activos y dominantes han expuesto una multitud de
fascinantes posibilidades para que un único receptor esculpa múltiples señales
dependiendo de las propiedades de la célula. Además, los argumentos teóricos ( 190) y
pruebas experimentales (191-193) han aparecido en apoyo del nuevo concepto de tráfico
dirigido agonista de la señal intracelular. Este modelo propone que cuando un solo
receptor interactúa con múltiples vías de señalización, el patrón de señalización
intracelular puede diferir dependiendo de El agonista.
Aunque no se conoce el mecanismo de señalización especificada por agonistas, una
posibilidad es que diferentes agonistas promuevan distintas conformaciones de
receptores, exponiendo así los dominios interfaciales con propiedades de interacción
proteína-proteína alteradas. Todos estos estudios en condiciones artificiales nos dicen
solo qué puede ocurrir, no qué ocurre en vivo. Se necesitan técnicas para estudiar el papel
de las vías de señalización múltiples en las preparaciones nativas para determinar la
importancia de las diversas moléculas de señalización en la fisiología normal y en los
estados patológicos. Las estrategias transgénicas y de inactivación tienen cierta utilidad;
sin embargo, dirigir las moléculas de señalización tendrá una multitud de consecuencias
no deseadas debido a su papel universal en la fisiología celular. Recientemente se
describió otra estrategia que tiene un potencial significativo para detectar rutas de
señalización aguas abajo de la activación del receptor (167). Los péptidos de bloqueo
sintéticos dirigidos a interacciones proteína-proteína específicas en una vía de
señalización se vuelven permeables a la membrana mediante una nueva reacción de
conjugación, de modo que la función de un paso de señalización particular en sistemas
nativos se puede definir.

CORRELACIONES CONDUCTUALES
Actividad Neuronal 5-HT y Estado de Conducta
En una variedad de especies de mamíferos, se ha descubierto que las neuronas
serotoninérgicas de los núcleos de rafe tienen un patrón de disparo lento y tónico
(aproximadamente de una a dos espículas por segundo). El mantenimiento de disparos
rítmicos en una amplia variedad de condiciones ha sugerido que las neuronas
serotoninérgicas poseen mecanismos de marcapasos tónicos intrínsecos. Los registros
intracelulares de neuronas de rafe dorsal muestran que los picos surgen de rampas
despolarizantes graduales (potenciales de marcapasos) en lugar de potenciales
sinápticos.El ritmo del marcapaso de serotoninérgicos las neuronas resultan de una
interacción compleja de corrientes iónicas intrínsecas (por ejemplo, una corriente de
potasio hacia afuera transitoria dependiente del voltaje, una corriente de calcio hacia
adentro de bajo umbral y una corriente de potasio hacia fuera activada por calcio) (194).
También modula la actividad de neuronas serotoninérgicas son varios neurotransmisores,
que incluyen norepinefrina y 5-HT en sí. La norepinefrina, que actúa a través de los
adrenoceptores? 1, acelera la actividad del marcapasos de las neuronas serotoninérgicas
cerrando los canales de potasio. Por el contrario, la propia 5-HT, que actúa sobre los
autorreceptores 5-HT1A, se opone a la actividad excesiva de las neuronas
serotoninérgicas.
La actividad reguladora altamente regulada de las neuronas serotoninérgicas sugiere que
el sistema 5-HT cumple una importante función homeostática. A través de sus efectos
sobre la excitabilidad neuronal en diversas regiones del cerebro y la médula espinal, el
sistema serotoninérgico se encuentra en una posición estratégica para coordinar patrones
motores durante diferentes estados de comportamiento.
Las grabaciones de neuronas serotoninérgicas en animales no anestesiados han
demostrado que la actividad es más alta durante los períodos de despertar, reducida en la
vigilia tranquila, reducida más en el sueño de onda lenta y ausente durante el sueño REM
(sueño) (195). Se puede formular la hipótesis de que La función del sistema 5-HT, por
sus fluctuaciones coordinadas en la actividad, es promover un estado conductual dado.
Este concepto se ilustra en el siguiente escenario. Cuando las neuronas serotoninérgicas
estén en modo de activación tónica, prevalecerán las siguientes condiciones: ) Las
motoneuronas estarían en un estado relativamente despolarizado y excitable (a través de
los receptores 5-HT2) y, por lo tanto, receptivas al inicio del movimiento; (b) las neuronas
del núcleo reticularis thalami estarían en un modo despolarizado, de pico único (a través
de los receptores 5-HT2) y por lo tanto conducen a la transferencia de información
sensorial talamocortical (105,155); (c) las neuronas GABAérgicas de la vía
septohipocámpica se activarían (en parte a través de los receptores 5-HT2A), potenciando
potencialmente la potenciación a largo plazo inhibiendo las neuronas GABAérgicas del
hipocampo (106,196); (d) las neuronas del núcleo tegmental laterodorsal estarían
hiperpolarizadas (a través de los receptores 5-HT1) y, por lo tanto, no serían capaces de
generar la actividad de estallido del sueño REM (69-71).
Por el contrario, con una reducción de la actividad serotoninérgica durante diversas etapas
del sueño, las condiciones anteriores cambiarían de tal manera que las motoneuronas se
volverían menos excitables, la transferencia de información sensorial talamocortica
disminuiría, la función del hipocampo se vería reducida y los husos de sueño y
pontogénicosulo-occipitales (PGO ) las olas emergerían.

Genética molecular (incluidos los polimorfismos genéticos)

Knockouts 5-HT-Receptor / Transporter
Están comenzando a aparecer nuevos fármacos que muestran una selectividad
considerable para un subtipo particular de receptor de serotonina; sin embargo, muchos
aún no están disponibles para la comunidad científica en general. Los ratones
genéticamente modificados que no expresan un receptor específico proporcionan un
medio poderoso para complementar las herramientas farmacológicas para evaluar las
consecuencias conductuales de una proteína particular del receptor de la serotonina (ver
ref.197 para revisión).
El primer ratón knockout 5-HT-receptor se describió en 1994 (198), en el que el receptor
5-HT1B se eliminó mediante la técnica de recombinación homóloga. Estos estudios
originales mostraron una agresión notablemente mejorada en ratones knock-out 5-HT1B.
Desde entonces, las respuestas alteradas a las drogas de abuso, que incluyen el aumento
del consumo de alcohol (199) y la sensibilización a la cocaína (200), además de la
inhibición del pulso emparejado (201) y el sueño paradójico (202), han demostrado ser
fenotípicas prominentes rasgos.En 1995, se describió una línea de ratón "knockout" que
expresaba un receptor 5-HT2C no funcional mutante (203). Posteriormente, se mejoró la
convulsión
la susceptibilidad (204), la obesidad y la diabetes de inicio tardío (205) y un déficit
específico en la potenciación a largo plazo del giro dentado (206) se han informado.
Recientemente se generaron líneas de la mugre que son nulas para otros importantes
relacionados con 5-HT moléculas; estos incluyen el receptor 5-HT1A, que se asocia con
una mayor ansiedad (207-209), el transportador de serotonina, con una mayor
sensibilidad a la cocaína (210,211) y el receptor 5-HT5A, con sensibilidad reducida al
LSD (212). Aunque monoamina los ratones oxidasa A-null tienen alteraciones generales
en la dinámica de aminas biogénicas, la evidencia sugiere que los niveles mejorados de
5-HT encontrados en estos ratones están asociados con anormalidades del neurodesarrollo
(213, 214). Las tecnologías innovadoras como los knockouts condicionales inducibles,
que tienen potencial para la manipulación genética controlando temporal y espacialmente,
son muy prometedores para el futuro. Esto se ilustra en un estudio reciente en el que se
utilizó el rescate localizado de genes inactivados para estudiar la clasificación diferencial
del receptor 5-HT1A y 5-HT1B en neuronas estriatales (215). En estos ratones
transgénicos, pero no las neuronas transfectadas en cultivo, la reproducción de la
dirección normal del receptor 5-HT1B a los terminales axónicos prepara el escenario para
la mutagénesis estudios de determinantes moleculares de receptores dirigidos a terminales
de axones in vivo.
Polimorfismos genéticos
Las moléculas implicadas en las vías de 5-HT del cerebro han sido objetivos favoritos
para los estudios de genes candidatos, y el número de publicaciones que se ocupan de las
variaciones genéticas en los sistemas de 5-HT ha aumentado dramáticamente durante los
últimos años. Estudios recientes de población han investigado polimorfismos de un solo
nucleótido en enzimas sintéticas, moléculas de inactivación y receptores para 5-HT. La
lista de enfermedades humanas estudiadas es extensa e incluye trastorno obsesivo-
compulsivo, depresión mayor, depresión bipolar, esquizofrenia, enfermedad de
Alzheimer, comer trastornos, ansiedad, neuroticismo, fibromialgia, alcoholismo,
suicidio, homicidio, abuso de sustancias, juego patológico y respuestas a agentes
psicoterapéuticos. A pesar de la abundancia de publicaciones, no se han encontrado
enlaces definitivos ni reproducibles entre variantes alélicas de moléculas relacionadas con
5-HT en poblaciones humanas con trastornos de conducta o enfermedades cerebrales. En
la mayoría de los casos, los resultados no son reproducibles de un estudio a otro, en gran
parte debido a la naturaleza heterogénea de las enfermedades psiquiátricas, la ausencia de
una prueba diagnóstica de laboratorio específica y la modesta cantidad de pacientes en
muchos estudios. El polimorfismo genético más ampliamente estudiado en un m 5-HT la
molécula es el polimorfismo de inserción / deleción en la región promotora del gen
transportador de 5-HT (216). Estos polimorfismos de longitud variable son
biológicamente significativos porque los estudios in vitro han demostrado que la forma
corta reduce la expresión del ARNm del transportador, con la consiguiente capacidad de
captación reducida (217). Aunque muchos estudios sugieren que la forma corta se asocia
con trastornos afectivos, otros tienen no pudo replicar estos hallazgos (218).
Algunos polimorfismos comúnmente estudiados, como la variante C103T en el receptor
5-HT2A, son silenciosos (es decir, no cambian el código genético), mientras que otros
polimorfismos, como el alelo Cys23Ser del receptor 5-HT2C (219), producen proteínas
mutantes sin alteraciones aparentes en las propiedades funcionales. La importancia
clínica de una variante genética tan sutil puede requerir el análisis de otros genes
relacionados en conjunto. Los métodos para detectar polimorfismos genéticos avanzan
rápidamente y ahora permiten el genotipado simultáneo de varios polimorfismos de
nucleótidos; por ejemplo, recientemente se describió un método para detectar múltiples
polimorfismos singénucleótidos de genes relacionados con 5-HT (220).