UNIVERSIDADA NACIONAL INTERCULTURAL DE LA AMAZONIA

FACULTAD DE INGENERIA AGROFORETAL ACUICOLA

CARRERA PROFESIONAL DE INGENIERIA AGROFORESTAL ACUICOLA

GENETICA

Practica N° 2
EXTRACCIÓN DE ADN
DOCENTE: Dra. TUISIMA CORAL, Lady Laura
CICLO: V

ESTUDIANTES:
PACAYA SAAVEDRA, Maricela
ZACARIAS HUATAY, Ruth Esther
CALAMPA TARICUARIMA, Joys Karen

Yarinacocha, Perú
2018
I. INTRODUCCIÓN

En el siguiente trabajo experimental, que fue realizado en el laboratorio de

microbiología de la universidad nacional intercultural de la amazonia (UNIA) de
Manera casera, nosotras extrajimos el ADN de la frutilla y también del plátano
ceda. Este proceso consta de varias etapas; en primer lugar, se tiene que
romper la pared celular y la membrana plasmática, cortando con el alfiler y
luego licuar con la licuadora la para acceder al núcleo de la Célula. Luego debe
romperse la carioteca para liberar al ADN. Después debe Precipitarse el ADN
en el alcohol para que no disminuya y se separe del resto de los elementos.

El ADN o ácido desoxirribonucleico, es un polímero de unidades menores

denominados nucleótidos, junto con el ácido ribonucleico, constituye la porción
prostética de los nucleoproteidos, cuyo nombre tiene un contexto histórico, ya
que se descubrieron en el núcleo de la célula. Se trata de una molécula de gran
peso molecular (macromolécula) que está constituida por tres sustancias
distintas: ácido fosfórico, un monosacárido aldehídico del tipo pentosa (la
desoxirribosa), y una base nitrogenada cíclica que puede ser púrica (adenina
o citosina) o pirimidínica (timina o guanina). La unión de la base nitrogenada
(citosina, adenina, guanina o timina) con la pentosa (desoxirribosa) forma un
nucleósido; éste, uniéndose al ácido fosfórico, nos da un nucleótido; la unión
de los nucleótidos entre sí en enlace diester nos da el polinucleótido, en este
caso el ácido desoxirribonucleico. Las bases nitrogenadas se hallan en relación
molecular 1:1, la relación adenina + timina / guanina + citosina es
de valor constante para cada especie animal. Estructuralmente la molécula
de ADN se presente en forma de dos cadenas helicoidales arrolladas alrededor
de un mismo eje (imaginario); las cadenas están unidas entre sí por las bases
que la hacen en pares. Los apareamientos son siempre adenina-timina y
citosina-guanina. El ADN es la base de la herencia.

II. OBJETIVOS

 Extraer ADN de material vegetal frutilla y plátano ceda (Fragaria y

Musa x paradisiaca L.) atravez de un método casero.
III. FUNDAMENTO TEORICO

3.1 HISTORIA

El primero en observar el ADN fue el bioquímico suizo Frederich Miescher, a finales

del siglo XIX. Sin embargo, pasó casi un siglo desde ese descubrimiento hasta que
los investigadores entendieron la estructura de la molécula de ADN y se dieron cuenta
de su importancia fundamental para la biología.
Por muchos años, los científicos debatieron qué molécula portaba las instrucciones
biológicas de la vida. La mayoría pensaba que el ADN era una molécula demasiado
sencilla para desempeñar un papel tan importante. En vez de ello, argumentaban que
era más probable que las proteínas desempeñaran esta función vital debido a su
mayor complejidad y más amplia variedad de formas.
La importancia del ADN se aclaró en 1953 gracias a la labor de James Watson,
Francis Crick, Maurice Wilkins y Rosalind Franklin. Al estudiar patrones de difracción
de rayos X y construir modelos, los científicos descifraron la estructura de doble hélice
del ADN, una estructura que le permite pasar información biológica de una generación
a otra.

3.2 ADN

Es el Ácido Desoxirribosa Nucleico. Es una molécula presente en casi todas nuestras

células que contiene la información genética. Esta molécula posee el código que
determina todas las características y el funcionamiento de un individuo. Es, además,
la encargada de transmitir la información de lo que somos a nuestros hijos, la molécula
de la herencia. Como vemos, la palabra clave es “información”.

Cada molécula de ADN es una especie de palabra larguísima, con forma de hélice
doble formada por una combinación específica de cuatro letras, A (adenina), T
(timina), C (citosina) y G (guanina).
3.3 ¿Dónde se encuentra el ADN?

En los organismos llamados eucariotas, el ADN se encuentra dentro de un área

compartimentalizada dentro de la célula llamada núcleo. Debido a que la célula es
muy pequeña, y porque los organismos tienen muchas moléculas de ADN por célula,
cada molécula de ADN debe estar empaquetada de forma muy compacta y precisa.
Esta forma superempaquetada del ADN se denomina cromosoma.
Durante la replicación del ADN, el ADN se desenrolla para que pueda ser copiado. En
otros puntos del ciclo celular, secciones puntuales del ADN también se desenrollan
cuando es necesario para que distintos juegos de instrucciones se usen en la
fabricación de proteínas y para otros procesos biológicos. Pero, durante la división
celular, el ADN se encuentra en su forma compacta de cromosoma para hacer posible
la transferencia a nuevas células.
Los investigadores llaman ADN nuclear al ADN encontrado en el núcleo de la célula.
El conjunto completo de ADN nuclear de un organismo se conoce como su genoma.
Además del ADN ubicado en el núcleo, los seres humanos y otros organismos
complejos también tienen una pequeña cantidad de ADN en otras estructuras
celulares adicionales conocidas como mitocondria. Las mitocondrias son las factorías
de las células, generando la energía que la célula necesita para funcionar
correctamente.
En la reproducción sexual, los organismos heredan la mitad de su ADN nuclear del
padre y la mitad de la madre. No obstante, los organismos heredan todo su ADN
mitocondrial de la madre. Esto ocurre porque sólo los óvulos, y no los
espermatozoides, conservan su mitocondria durante la fecundación.

3.4 ¿Qué hace el ADN?

El ADN contiene las instrucciones que un organismo necesita para desarrollarse,
sobrevivir y reproducirse. Para realizar estas funciones, las secuencias de ADN deben
ser transcritas a mensajes que puedan traducirse para la fabricación proteínas, que
son las moléculas complejas que hacen la mayor parte del trabajo en nuestro cuerpo.
Una secuencia discreta de ADN que contiene las instrucciones para elaborar una
proteína se conoce como gen. El tamaño de un gen puede variar enormemente, desde
aproximadamente 1,000 bases hasta 1 millón de bases en los seres humanos. Los
genes sólo forman aproximadamente el 1 por ciento de la secuencia de ADN. Otras
secuencias reguladoras de ADN dictan cuándo, cómo y en qué cantidad se elabora
cada proteína. La mayoría de las secuencias del genoma humano no tienen una
función conocida.

3.5 ¿Qué es la doble hélice del ADN?

Los científicos usan el término "doble hélice" para describir la estructura química de
doble hebra (bicatenaria) enrollada del ADN. Esta forma, efectivamente tiene una
apariencia muy parecida a una escalera retorcida en forma de hélice.
Para entender la doble hélice del ADN desde un punto de vista químico, hay que
imaginar los lados de la escalera como hebras formadas por grupos alternantes de
fosfato y azúcar. Cada "peldaño" de la escalera está formado por dos bases
nitrogenadas, las cuales forman una pareja unida por enlaces (puentes) de hidrógeno.
Debido a la naturaleza altamente específica de este tipo de emparejamiento químico,
la base A siempre forma pareja con la base T y, asimismo, la C con la G. Además, de
ser complementarias, las dos hebras están orientadas en direcciones opuestas. Así
pues, si la secuencia de las bases en una de las hebras de una doble hélice es
conocida, descifrar la secuencia de las bases en la otra hebra es algo muy sencillo
basado en el principio de complementariedad.
La estructura única de ADN hace posible que la molécula se copie a sí misma durante
la división celular. Cuando una célula se prepara para dividirse, la hélice de ADN se
separa temporalmente en dos hebras individuales. Estas hebras individuales sirven
como plantillas para construir dos nuevas moléculas de ADN de doble hebra, siendo
cada una, una copia exacta de la molécula original de ADN. En este proceso, se
agrega una base A dondequiera que haya una T, una C dondequiera que haya una
G, y así sucesivamente hasta que todas las bases tengan nuevamente una pareja
complementaria.
Del mismo modo, cuando se necesita fabricar una proteína concreta, la doble hélice
se desenrolla parcialmente al nivel de las instrucciones de dicha proteína para hacer
posible que un fragmento específico del ADN sirva como plantilla. Luego, esta hebra
plantilla se transcribe a ARNm, que es una molécula que comunica instrucciones
vitales a la máquina productora de proteínas de la célula.

3.6 Sal

La función de la sal en este experimento es que mantiene la forma del ADN esto quiere
decir que impide que las moléculas de ADN se destruyan, también la sal ayuda a
extraer el exceso de agua en la célula.

3.7 Frutilla

Son octoploides, es decir, que tienen 2 juegos idénticos de cromosomas, esto significa
que contienen dentro de ellas bastante material genético (por eso nos convenía usar
esta fruta más que otras).

3.8 Plátano

Los estudios citológicos han mostrado que el plátano está constituido por 11
cromosomas con un total de 500 a 600 millones de pares de bases, tratándose de uno
de los genomas más pequeños de todas las plantas, y que la mayoría de las
variedades cultivadas son triploides. Por tanto, sólo un pequeño porcentaje de los
óvulos producidos por las flores de las variedades triploides son capaces de ser
fertilizados. Si las flores se polinizan con polen procedente de una especie o variedad
diploide, la descendencia resultante será principalmente tetraploide.

3.8 Alcohol

Su función es que separa el ADN de otros componentes celulares los cuales son
dejados en la solución acuosa, también permite que podamos apreciar el ADN.

3.9 Detergente liquido

El detergente hace que la célula vacié su contenido molecular en una disolución
tampón en la que se disuelve el ADN en ese momento, el tampón contiene ADN y
todo un surtido de restos moleculares.

IV. MATERIALES

Según actividad

4.1 Preparación de la muestra

 Licuadora
 Agua mineral 250 ml
 Muestra vegetal fruta o verdura
 Cuchillo
 Vaso de precipitados
 Colador

4.2 Preparación den Lisis(lysis)

 Matraz Erlenmeyer
 Agua mineral 250 ml
 2 cucharaditas de sal
 6 cucharaditas de bicarbonato de sodio
 2 chorritos de detergente liquido

4.3 Solubilización de la membrana

 1 pipeta de 10 ml
 10 ml de muestra
 Vaso de precipitados

4.4 Extracción del ADN

 2 tubos de ensayo5 ml de la solución anterior
 10 ml de alcohol 96°c.
V. PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL

Paso a seguir:

1. Lavar la muestra vegetal (fresa).

2. Cortar la muestra vegetal (fresa) con cuchillo en trocitos pequeños.
3. Licuar los trocitos de fresa con agua mineral (200ml) por un tiempo de 15 seg para
que se pueda homogenizar la muestra.
4. Filtrar la muestra obtenida en un vaso precipitado (200ml) utilizando un colador.
5. Preparacion de lisis: en el matraz Erlenmeyer se agregó 200 ml de agua mineral,
2 cucharaditas de sal, 6 cucharaditas de bicarbonato de sodio y chorizos de
detergente líquido.
6. con una pipeta de (10ml) se ha obtenido 10ml de la muestra vegetal y se agregó
20ml de lisis en un vaso precipitado (20ml) y lo dejamos reposar por un tiempo de
5 mit.
7. Retirar 5ml de la solución anterior en un tubo de ensaño con la ayuda de un pipeta
(10ml) y añadir con una pipeta(10ml) 10 ml de alcohol 96°.se tiene que dejar
escurrir lentamente el alcohol por la cara interna del recipiente, teniendo éste
inclinado. El alcohol va a quedar flotando sobre el tampón.
8. Se introduce la punta de una varilla estrecha hasta justo debajo de la separación
entre el alcohol y el tampón. Remover la varilla hacia delante y hacia atrás y poco
a poco se irán enrollando los fragmentos de mayor tamaño de ADN. Pasado un
minuto retirar la varilla atravesando la capa de alcohol con lo cual el ADN quedará
adherido a su extremo con el aspecto de un copo de algodón mojado.
9. De la misma manera se repitió el procedimiento en el plátano. Solamente se ignoró
el paso 3. Ya que en el plátano se trituro con el cuchillo.
VI. RESULTADOS

Observación del ADN: Vertemos muy lentamente el alcohol en el tubo de

ensayo con la solución. Al cabo de pocos segundos seremos capaces de
observar tres capas bien

Diferenciadas. Encima de todo estará el alcohol, debajo de todo estarán los

restos celulares (membranas, orgánulos) del plátano y los otros componentes
de la solución y, en la interfase observaremos una especie de hilos blancos
rodeados de burbujas. ¡Eso es el DNA! (1)}

Figura 1. ADN DEL PLATANO

Figura 2. Como podemos observar en el alcohol hay una sustancia viscosa

Que Son fibrillas de ADN de la fresa que se precipitan sobre el alcohol.

}

VII. CONCLUSIÓN

 Se logró obtener el ADN de la fresa como una forma de puntos blancos que es el ADN.

 Se logro obtener el ADN vegetal del plátano con una forma de algodón blanco fina.

 A través de este experimento pudimos analizar que cada uno de los

ingredientes tiene su propia función. La solución de sal y jabón sirve para
romper la membrana plasmática y nuclear e incluso la pared celular. El
detergente elimina las proteínas que degradan el ADN. El alcohol etílico
sirve para precipitar el ADN.

VIII. REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

 Aguilar, A; Aguilar, P; Hurtado, E; Gutiérrez, S; Gómez, V. 2014. Extracción de

ADN (en línea). Universidad popular del Cesar. Consultado 24 de oct.
Disponible en https://es.slideshare.net/naya110/extraccion-de-adn-39981381.

 Peralta, P; Maúlen, C; Serrano, J; Fabregat, D. 2016.trabajo experimental de

biología: extracción del ADN de una muestra vegetal, la frutilla (en
línea).Instituto Abdón Cifuentes Biología San Felipe. Consultado 24 de oct.
Disponible en ttps://edoc.site/extraccion-de-adn-de-fresa-o-frutilla-pdf-
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 Salas, A. Informe de un experimento (extracción de ADN) (en línea).

Monografias.com. Consultado 24 de oct. Disponible en
https://www.monografias.com/trabajos91/informe-experimento-extraccion-
adn/informe-experimento-extraccion-adn.shtml.

 Martínez, L.EXTRACCIÓN DE DNA Experimento con reactivos de la vida

cotidiana (en línea) .1º Grado Genética – UAB. Consultado 24 de oct.
Disponible en
http://genetica.uab.cat/base/documents/genetica_gen/Laura%20Mart%C3%A
Dnez%20Mart%C3%ADn2015_4_19P21_19.pdf
IX. ANEXOS

Anexo 1.cortando la fresa Anexo 2.el plátano y la fresa

Anexo 3.agregando 200ml de agua Anexo 4.licuando la fresa.

Mineral.

Anexo 5. Batiendo la mescla para

Para tener una solución homogénea.