INFORME DE MICROBIOLOGÍA

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO, MEDIOS SELECTIVOS Y

DIFERENCIALES

PRESENTADO POR:

DIEGO MAURICIO SALINAS

HENRY DIAZ

FUNDACION UNIVERSITARIA NAVARRA – UNINAVARRA

INGENIERIA AMBIENTAL

NEIVA, HUILA

2018
 INFORME DE MICROBIOLOGIA

PREPARACIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO, MEDIOS SELECTIVOS Y

DIFERENCIALES

PRESENTADO POR:

DIEGO MAURICIO SALINAS

HENRY DIAZ

PRESENTADO A:

VIOLEDY ANDREA JIMENEZ

FUNDACION UNIVERSITARIA NAVARRA – UNINAVARRA

INGENIERIA AMBIENTAL

NEIVA, HUILA

2018
 MARCO TEÓRICO

El presente informe es orientado a mostrar la forma de preparación, para hacer medios de

cultivos, estos medios de cultivo son artificiales y hechos en el laboratorio, con el fin de
poder tener un espacio apto lleno de nutrientes para que los microorganismos que allí
coloquemos, puedan alimentarse y aprovechar los nutrientes que allí encuentren, los medios
de cultivo son muy importantes para brindarles todas las condiciones, para que los
microorganismos puedan reproducirse, expandirse, multiplicarse y subsistir gracias a los
componentes que en el medio encuentren, el medio debe tener un pH neutro, básico o acido,
de acuerdo al microrganismo que allí vayamos a emplear, así mismo como su nivel de
oxígeno, temperatura, luminosidad y humedad; entre los componentes esenciales que
debemos encontrar en nuestros medios de cultivo son, una fuente de carbono, una fuente de
nitrógeno, elementos no metálicos como el Azufre y el Fósforo, elementos metálicos como
él (Ca, Zn, Na, K, Cu, Mn, Mg, Fe+2 y Fe+3), Vitaminas y Energía.

OBJETIVOS:
 Reconocer los diferentes medios de cultivo existentes para el crecimiento de
microorganismos, aplicando los conceptos básicos de nutrición y preparación de los
mismos.
 Desarrollar en los estudiantes competencias en los puntos clave que deben tenerse en
cuenta antes, durante y después de la preparación de un medio de cultivo.
 Preparar algunos medios de cultivo, líquidos o sólidos, siguiendo las instrucciones
proporcionadas.
 PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICA

En primero lugar, de acuerdo a la orientación del maestro, optamos por sacar los materiales
de instrumentación, debidamente limpios, secos y libres de contaminantes.

En segundo lugar, alistamos el Vaso de precipitado con 500 ml de agua destilada, la cual
colocamos en la eléctrica, hasta llegar al punto de ebullición.
En tercer lugar: en el punto de ebullición agregamos a un Biker 10 ml de esa agua destilada,
y colocamos también en el fogón, agregamos aproximadamente 6 gramos del polvo de
gelatina de caja.

En cuarto lugar, con el uso del mesclador, agitamos y mesclamos bien el producto, hasta
obtener una mezcla semi viscosa.

En quinto lugar: como la mezcla es semilíquida, agregamos 2 ml de esta mezcla en un tubo

de ensayo y tapamos inmediatamente.

En sexto lugar: como quedaron 8 ml de la mezcla en el Biker colocamos al fogón de nuevo,

y teniendo la mezcla semilíquida, vertimos en una caja de Petri y tapamos.

En séptimo lugar: hacemos todo el procedimiento anterior, pero esta vez con 6 gramos de
Agar, teniendo como resultado de toda la práctica, 2 cajas de Petri (1 mezcla con gelatina y
1 con mezcla de Agar), y dos tubos de ensayo (1 con mezcla de Gelatina y 1 con mezcla de
Agar)
En Octavo lugar: tapamos absolutamente todo, con papel y plástico envolvente, para asegurar
así que no ingrese luz, este libre de humedad y colocado a una temperatura acorde.

Resultados:

El uso de los diferentes instrumentos y materiales para desarrollar la

práctica en el laboratorio, debe ser siempre de manera limpia y
responsable, para que ningún material se contamine o contagie de
algún agente externo que pueda perturbar los resultados, es por ello
que en este caso obtuvimos resultados esperados, gracias a la asepsia.

Los cálculos previos para hacer medios de cultivo deben ser exactos,
para así poder tener estos resultados que son los medios de cultivo
esperados, aptos para la posterior siembra de microorganismos.

El vertimiento de la mezcla lista para el medio de cultivo, debe ser

rápida, de la manera como es instruida por el tutor, y con las medidas
de seguridad e higiene necesarias, es así como aprendimos que el uso
correcto siempre es primordial, para tener este resultado esperado,
con una consistencia deseada procedimos a hacer el medio de
cultivo.
 Obtuvimos los resultados esperados, teniendo
como lo muestra las imágenes a la izquierda y
abajo, los medios de cultivo en las Caja de Petri
y tubos de ensayo, una caja Petri con Agar, 1
Caja Petri con Gelatina, 1 Tubo de ensayo con
Agar y 1 tubo de ensayo con Gelatina; esto es
el resultado de un procedimiento correcto y
adecuado, siendo así con precisión para el
almacenaje y desarrollo de la siembra de en el
medio del Cultivo.

Durante el procedimiento hemos visto como, a

través de una correcta manipulación de la
instrumentación, de forma higiénica y
responsable, con todas las normas de asepsia,
podemos elaborar un medio de cultivo apto
para poder incluir microorganismos y que
estos se reproduzcan en un espacio acto, lleno
de todas las especificaciones que debe tener un
medio de cultivo, como la gelatina y el agar me
brindan los elementos esenciales, vitaminas y
demás, queda un resultado acorde a lo que
buscamos para preparar el medio de cultivo.

Conclusiones:
Se ha examinado que existen diferentes medios de cultivo para poder hacer una siembra de
microorganismos que puedan subsistir en él, y mostrarnos como es su propagación, y que
otros agentes pueden encontrarse en él.
Se verificó la importancia de tener un buen uso de los materiales e instrumentación empleada,
la cual debe estar limpia, seca y libre de cualquier contaminante que pueda alterar nuestros
resultados esperados.
También se evidencio la importancia en la cual debe permanecer el medio de cultivo, para
que no se dañe y pueda conservarse, se tienen en cuenta factores como la humedad, la luz, el
oxígeno y la temperatura, la cual debe ser apta para el tipo de siembre y de microorganismos
que queremos encontrar.
Se desarrollo a cabalidad la práctica de laboratorio, teniendo una satisfactoria comprensión
y conocimiento de cómo hacer un medio de cultivo.
Se verificó que las medidas de higiene, desinfección y esterilización en instalaciones y uso
de instrumentos en los que pasa el producto son de carácter oportuno, cuenta con todas las
zonas de higiene, manteniendo así un uso responsable de empleabilidad y proceso de creación
de medios de cultivo.
Bibliografía:
1. Literatura de Rojas-Triviño Alberto (2011) Conceptos y prácticas de microbiología
general.
2. Jimenez, V. Material y Guía de Laboratorio, (Preparación de medios de cultivos).
 INFORME DE MICROBIOLOGÍA

TÉCNICAS DE SIEMBRA PARA HONGOS Y BACTERIAS E IDENTIFICACIÓN DE

LOS MISMOS EN EL MICROSCOPIO

PRESENTADO POR:

DIEGO MAURICIO SALINAS

HENRY DIAZ

FUNDACION UNIVERSITARIA NAVARRA – UNINAVARRA

INGENIERIA AMBIENTAL

NEIVA, HUILA

2018
 INFORME DE MICROBIOLOGIA

TÉCNICAS DE SIEMBRA PARA HONGOS Y BACTERIAS E IDENTIFICACIÓN DE

LOS MISMOS EN EL MICROSCOPIO

PRESENTADO POR:

DIEGO MAURICIO SALINAS

HENRY DIAZ

PRESENTADO A:

VIOLEDY ANDREA JIMENEZ

FUNDACION UNIVERSITARIA NAVARRA – UNINAVARRA

INGENIERIA AMBIENTAL

NEIVA, HUILA

2018
 MARCO TEÓRICO

El presente informe es orientado a mostrar la forma de preparación, para hacer siembra de

microrganismos en el medio de cultivo anteriormente hecho, de manera que los
microorganismos de acuerdo a su tipo, características y morfología, así mismo se pueden
sembrar muestras de muestras biológicas tales como (orina, pus, secreciones, semen), esto
para determinar cómo se multiplican los microorganismos en el medio de cultivo. Es
necesario determinar cómo es el proceso de multiplicación de microorganismos en diferentes
compuestos nutritivos, los medios de cultivo que hemos empleado son los mismos anteriores,
donde tenemos 4 medios de cultivo (1 caja Petri con Gelatina, 1 con Agar, 1 Tubo de ensayo
con Gelatina y 1 tubo de ensayo con Agar). Aquí queda plasmado el procedimiento que se
desarrolló para la siembra con ayuda de Cera de oído, Semen y Telaraña.

OBJETIVOS:
 Practicar las diferentes técnicas de siembra para el desarrollo de cultivos y subcultivos de
hongos y bacterias, en medios de cultivo dispensados en tubos y cajas Petri, así como, en
medios de diferente composición y estado.
 Desarrollar en los estudiantes la capacidad de selección de una metodología específica, de
acuerdo a los criterios proporcionados, para la aplicación correcta de las técnicas de siembra
de acuerdo al microorganismo y al objetivo de la prueba.
 PROCEDIMIENTO DE PRÁCTICA

En primero lugar, tomamos los medios de cultivo que hemos hecho en el laboratorio anterior,
destapamos y preparamos.

En segundo lugar, alistamos todos los materiales que se emplearon de manera higiénica,
limpia y desinfectada.

En tercer lugar: En frascos de muestras, tres en total en donde en cada una teníamos semen,
cera de oído, y tela de araña, que son las empleamos para la siembra en los medios de cultivo.

En cuarto lugar, con el uso del asa microbiana, posteriormente puesta a fuego en el mechero
bunsen, para esterilizar optamos por sacar una parte de la muestra, y con el Asa micológica
previamente caliente tomamos una parte con la punta del Asa microbiana.

En quinto lugar: con el Asa micológica que tiene cera de oído, procedemos a introducirla en
un tubo de ensayo con Agar. Para hacer la siembra directa y guardamos.

En sexto lugar: Repitiendo el paso anterior pero esta vez con Semen hacemos una especie de
barrido en espiral en el medio de cultivo de Caja Petri con Gelatina y tapamos.

En séptimo lugar: De la misma manera que en los casos anteriores procedemos, pero esta vez
con Tela de Arana, hacemos la siembra en barrido en la caja de Petri que contiene Agar.
En Octavo lugar: De la misma manera utilizamos esta vez la saliva, pero es cultivada en el
tubo de ensayo restante con Gelatina.

En noveno lugar procedemos a tapar absolutamente todo, con papel y plástico envolvente,
donde no ingrese ningún rayo de luz, procedemos a guardar en Incubadoras mencionadas en
los materiales y terminamos.

Resultados:

El uso correcto de las asas es indispensable, es por ello que la

esterilización de las mismas nos ayudó a tener las medidas
higiénicas necesarias.
Al hacer la esterilización y también calentar un poco el asa para
tomar la muestra, nos facilitó hacer la siembra, ya que con la punta
un poco caliente se pudo hacer una adecuada siembra en el medio
de cultivo.

Durante el desarrollo del laboratorio hemos obtenido los resultados

esperados, adquiriendo destrezas y conocimientos para ejecutar una
correcta siembra, los resultados que obtuvimos en el momento, trata
de la disponibilidad que necesitan los diferentes microorganismos
para poder crearse y en que medios son más aptos para dicha
propagación.
Los resultados obtenidos
son los más acertados,
puesto que se llevó a cabo
todo al pie de la letra,
según las
recomendaciones del
tutor y de la guía.
 Después de 1 semana, obtuvimos los resultados que fueron
visualizados en el microscopio, en cada medio de cultivo:
Sacamos los medios de cultivo y nos dimos cuenta que hay
presencia a simple vista de microorganismos, por la
proliferación de hongos y demás sobre la superficie.

Esterilizando el asa
logramos sacar una
correcta muestra de los
microrganismos
presentes para ponerlos
posteriormente en
portaobjetos, para ser
vistos en el
microscopio.

En la muestra de siembra de oído encontramos

microorganismos como lo son:
-Staphylococcus aureus
-Staphylococcus epidermis

En la muestra de semen, encontramos solamente los

espermatozoides que estaban en estado inmóvil, no se vio
presencia de bacterias, hongos ni virus.
 En la muestra de Tela de araña, encontramos bacterias, y
hongos en su mayoría, ya que esta tiene mucha presencia de
polvo, la cual contiene abundantes bacterias y hongos, se vio
una proliferación de microorganismos.

En la muestra de Saliva, encontramos presencia de almidones,

bacterias como lo son:
Gram +: -Streptococcus: sanguis, gordonii, oralis, mitis, -
Actinomyces: naeslundii, israelii, viscosus.
Gram –: -Veillonellaparvula, -Fusobacteriumnucleatum.

Conclusiones:
Se ha procedido como estaba establecido, siempre teniendo en cuentas las normas de higiene,
esterilización y sobre todo las normas de asepsia para no dañar los medios de cultivo y de
siembra.
Se ha hecho la práctica de siembra adquiriendo conocimientos y determinando todas las
formas de hacer sembrado en Cajas de Petri y Tubos de Ensayo con Gelatina y Agar, los
cuales son los medios aptos para este tipo de siembras en cultivo.
Se uso la mejor técnica, siendo esta la más apropiada para hacer la siembra de los
microorganismos y así poder determinar cuál es la más indicada de acuerdo al tipo de
microorganismos que vamos a emplear.

Trabajo Complementario:
1. ¿Cuál es el objetivo o finalidad de una siembra por agotamiento?

Solución: Se realizan distintas técnicas de siembra, para conseguir el aislamiento de

bacterias en cultivos primarias, de manera que descarga totalmente el inóculo cargado
en un asa de siembra a lo largo de toda la superficie del medio, de manera que la
concentración de muestra en distintas zonas de la placa va disminuyendo a medida
 que se va agotando el material del asa, así tras la incubación, en la misma placa habrá
zonas con distinta densidad de crecimiento.

2. Mencione brevemente el proceso de purificación de un aislamiento bacteriano

obtenido en agares.

Solución: Viene de la mano con adaptación y purificación, el cual consiste en sembrar

en el medio de cultivo el sólido, luego siembra cada uno de los microorganismos en
el medio sólido, y siembra en medio de cultivo sólido cada uno de los
microorganismos aumentando la concentración como ejemplo de cianuro cada 48
horas.

3. Explique brevemente la metodología para realizar siembras en placa profunda y

placa en superficie.

Solución: Recuento en placa por siembra en profundidad: Consiste en añadir medio

de cultivo fundido y enfriado a 50ºC sobre placa de Petri que contiene una cantidad
determinada de la muestra diluida. Se tapa la placa y se rota para mezclar la muestra
en el agar. Cuando el agar solidifica se incuban las placas. Las colonias se desarrollan
tanto dentro del agar como en la superficie. Es un método generalmente utilizado para
el recuento de microorganismos anaerobios facultativos o microaerófilos.

Recuento en placa por siembra en superficie: Consiste en la siembra de un volumen

conocido de la dilución de la muestra sobre la superficie de un medio de cultivo en
placa Petri. En este método todas las colonias crecen sobre la superficie del medio.
Generalmente se utiliza esta técnica para el recuento de bacterias aerobias.

Bibliografía:
4. Literatura de Rojas-Triviño Alberto (2011) Conceptos y prácticas de microbiología
general.
5. Jiménez, V. Material y Guía de Laboratorio, (Técnicas de siembra para hongos y
bacterias).