Prueba de Satelitismo

El fenómeno del satelitismo de H. Influenzae se presenta cuando S. aureus suministra el factor V (NAD) que se
difunde en el medio de cultivo, a su vez la sangre del medio proporciona el factor X. El satelitismo no es una
prueba de identificación definitiva, debido a que este fenómeno puede ser exhibido por otros microorganismos
como Pasteurella, Corynebacterium, Actinobacillus. Los Haemophilus que no requieren el NAD no producen
satelitismo y no se corresponden con la especie influenzae. Este procedimiento no es útil para aislamiento a
partir de la muestra clínica.
Procedimiento:
1. Siembre en forma masiva una caja de agar sangre con el aislamiento en
estudio, realice una estría en el centro de la siembra masiva con una cepa
hemolíticas de Stapylococcus aureus.
2. Incube a 35ºC en atmósfera del 5% de CO2 durante 18-24 horas y
determine el crecimiento de colonias típicas de H. Influenzae en la cercanía
de la estría de S. aureus.
Interpretacion :
-Una prueba positiva de satelitismo consiste en el crecimiento de las
pequeñas colonias de Haemophilus solo muy cerca de la estría
de Staphylococcus aureus. Figura 1.Prueba de H. Influenzae
satelitismo .

Prueba de porfirina
Para detectar cepas de Haemophilus dependientes del factor X, basada en el principio de que la cepa
carece de la enzima porfobilinógeno sintetasa que transporta el ácido gamma aminolebulinico en
porfobilinógeno, por lo tanto la detención de porfobilinógeno o porfirinas en el sustrato de la prueba
indica que la bacteria es capaz de efectuar la síntesis endógena del hemo y no requiere una fuente
exógena de factor X.
Procedimiento:
1. Se suspende una asada del microorganismo en 0.5 ml de sustrato enzimático.
2. Se incuba 35 º C durante 4 horas (Suspensión concentrada)
3. Si la concentración es diluida incubar de 18 a 24 horas
 Se añade reactivo de Erlich.

INTERPRETACIÓN
 La aparición de color rojo en la fase acuosa indica la
presencia de porfobilinógeno, una prueba positiva indica
que el organismo no requiere de factor X, y viceversa sin + -
cambio de color indica que requiere de factor X.
Figura 2.Prueba de porfirina.

Referencias:
 Manual de procedimientos para el diagnóstico de meningitis bacteriana .Consultado : 09/03/19.Disponible en
:http://www.brizuela-lab.com.ar/resumenes/Manual%20Meningitis.pdf
 Seminario de Haemophilus. Consultado :09/03/19.Disponible
en:https://www.monografias.com/trabajos16/haemophilus/haemophilus.shtml