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Fluorometria
Técnica espectrofotométrica que se basa en la absorción de radiación por parte del analito
a medir en una muestra y su posterior emisión. Su fundamento es la fluorescencia
molecular que se basa en que la emisión de radiación por electrones excitados que vuelven
al estado fundamental se realiza en varias etapas, de manera que se emite una radiación
de una longitud de onda distinta a la absorbida. En el fenómeno de fluorescencia, una
molécula absorbe radiación electromagnética y debido a ello los electrones pasan de un
estado basal a otra fase de excitación. Al ser la longitud de onda de la radiación emitida
diferente de la longitud de onda de absorción, puede utilizarse ésta tanto para identificar
como para cuantificar sustancias. (Douglas A. Skoog, 2008)
2. Fluorescencia
La fluorescencia se emite en todas direcciones, lo que puede aprovecharse al diseñar los
aparatos de medida que, en principio, son similares a los usados en espectroscopía de
absorción, con la diferencia de que, para evitar las interferencias que pueda causar la
transmisión de la radiación incidente sobre la muestra, se sitúa el sistema de detección en
ángulo recto respecto a la luz incidente. De esta manera, sólo se detecta radiación
fluorescente. Si no se hiciera así, no se podría discriminar la radiación fluorescente, al ser
ésta de menor magnitud que la radiación no absorbida procedente de la fuente de
radiación (al situar el detector en un ángulo de 90º con respecto a ella, la radiación no
absorbida procedente de la fuente de radiación no será detectada).
Figura 3 Fosforescencia
Bibliografía
Douglas A. Skoog, s. R. (2008). Principios de analisis instrumental. Cengace learning.