\--l \-/

APTIKASI PIMERII$AAN SEROLOGI :

DINGUE, MAUIRIA, TEPTOSPIROSIS

lllrEr$r llrrtl$ Dril0llr{rllDl
Prof. Dr. ARYATI, dr, MS, SpPK(K)
Departemen Patologi Klinik FK
UNAIR-RSUD dr Soetomo
2

PENDAHULUAN
'*ee@-
DBD -+ disebabkan oleh -t

Mengenai anak-anak dan dewasa

DEMAM ZIKA

Gambaran klinis penyakit

virus dengue tidak khas
demam tifoid,
DEMAM BERDARAH
DENGUE
\-- 'v \/ \/ ! 'v' \r' \--,/' \J/ \/ \.r'

Diagnosis IVD Kriteria Diagnosis DBD (WHO Lggi)

1. Demam, atau riwayat demam akut, antara 2-7 hari

2. Trombositopenia { < 100.000/pl )

Arymptrnutii: 3. Terdapat minimal satu dari manifestasi perdarahan berikut ini :

Wrth(r{l
literrnl rhage
'/ Uii Rumpel Leede/Tourniquet Test positif
"' Petekie, ekimosis, atau purpura
f{i!h ilnrrsual Perdarahan mukosa, saluran cerna
haenurrhlqe "
"' Hematemesis atau melena
Synqrtomrtir: li,:te;ue iev,:t
4. Terdapat minimal satu dari tanda plosma leakage oleh
llo rh+ck karena peningkatan permeabilitas kapiler berikut :
/ Hematokrit meningkat > 20% dibandingkan hematokrit rata-rata
Ilstgue ql0.k pada usia, jenis kelamin, dan populasi yang sama
riry.lrorx i055)
r' Hematokrit turun hingga > 2}o/o dari hematokrit awal, setelah
pemtlerian cairan
Gamhar 1. Manifestasi klinis IVD I Efusi pleura, asites, hipoproteinemia, hipoalbuminemia
5 6

Demamdengue:
. suhutubuhantarasg-40oc Klinis demam dengue:
-+ hifasik {saddte back fever} menyerupai berbagai penyakit seperti
. petekia atau uii Rumpel Leede positif -+ demam tifoid, leptospirosis, malaria, atau
gangguan vaskuler atau trombosit infeksi virus lain (influenza].
. laboratorium:
1. Leukosit normal; leukopenia -+ Demam berdarah dengue (DBD)
limfositosis relatif -+ limfosit atipik
(limfositplasma biru) -+hari III s/d VII . keadaan yang lebih berat ditandai
2. Trombositpada umumnya normal, namun dengan demam tinggi, berbagai tanda
dapat diiumpai trombosito penia, 45 o/o perdarahan, hepatomegali dan
penderita DD, enzim hati dapat meningkat kegagalan sirkulasi.
(scoT>scPT).
8
 \-/ '\/ \,

DIAGNOSIS TABORATORIUM PEMERIKSAAN TABORATORIUM

I Labtidakspesifik
/Rumpel Leede fRl/tes torniket] - manifestasi
perdarahan
1. Uji Rumpel Leede (RL) atau Tes Tourniquet
/fumlah trombosit -) gangguan vaskuler dan trombosit
r'Hematokrit/Hct -+ bila positif tidak selalu disebabkan oleh virus
/fumlah leukosit dengue saja, namun iuga dapat oleh penyakitvirus
lainnya.
(te rga ntun g ha ri d ema m I netro rilia'+
',Yii?#Si;$:i
r'Limfositplasma biru Prosedur keria :
r'Enzim hati ( fase akut : SGOT > ScpT)
. Perhatikan apakah sudah ada petekia di lengan
i Lab spesifik bawahyang akan diperiksa dan bila ada jangan
/Isolasi virus Dengue -+ kultur diikutkan pada perhitungan petekia yan! a[an timbul
/RNA virus Dengue -+ RT-pCR pada uii RL ini
/Pemeriksaan serologi ( EIISA, Rapid test/ICT) . Pasang manset tensimeter di atas tipatan siku dan
lDeteksi antibodi: IgM dan IgG antidengue pertahankan tekanan antara sistole dan diastole
)Deteksi antigen : NSI
ftidakboleh lebih dari 10O mmHg] selama S menit.
+Deteksi antibodi : IgA antidengue

Ilanset 213 lenqao atas I

a Setelah 5 menit lepaskan bendungan manset . Pertahankan antafa siitclik & diastslik,
maKimal 100 mmHg
tersebut a Tunggu 5 menrt
a Hitung iumlah petekia yang timbul dalam
daerah lingkaranyang dibuat 4 cm di bawah
lipatansiku dengan diameter S cm fsebaiknya
pembacaan dilakukan sampai dengan 15
menit setelah bendungan dilepaskary sebab
selama waktu itu ada kemungkinan tirnbul
petekia baru)
a Hasil dikatakan normal bila petekia yang
timbul beriumlah 5 atau kurang,

11
 2. Kadarhematokrit 3. |umlah trombosit
Peningkatan nilai hematokrit atau
Penurunan iumlah trombosit ftrombositopenia] pada
hemokonsentrasi selalu diiumpai pada DBD -+
umumnya teriadi sebelum ada peningkatan
indikator teriadinya perembesan plasma. hematokritdan terjadi sebelum suhu turun.
- Hemokonsentrasi dapat dilihat dari Trombositopenia < 10O.O00IUI -+ diiumpai antara
peningkatan hematokrit 2Ao/o atau lebih hari sakit ketiga sampai ketuiuh-
- Harganormal hematokritdewasa di Apabila diperlukan, pemeriksaan trombosit perlu
laboratorium PK RSIID Dr, Soetomo ! 35- diulangiltrombositserial setiap hari mmpai suhu
turun.
45o/a,6 4O-SOa/o, nilai ini berbeda pada
anak-anak

13 14

xoie : L,t' tL€r$r Unsrur-ed cr'Ljd) !4cld€d Ls.9. !rehdyeFr,

:reh*yi.s, Bl.rtt, Fi.* c+:!€/ A.r,;diq {.b,*.rr6;;
";";ia;i a^d
Rh.r krgs s:od .clls.
!dJ{s :
4. Isolasi virus
- Diagnosispasti: isolasivirusdengue
- Kultursel AP / 61,C6 /36,TRA-ZA|.SF
3i .::
F9 . - Bahan : serum, plasma, Duffy-cootdatahheparinized
- Faktor keberhasilan isolasi virus :
. Pengambilanspesimenyangawal fdalam 5 hari
demam)
. Penangananspesimen
. Pengirimanyang cepat, Ietrih baik dalam -70.C
- ldentifikasihasilkultursel:
. Metode imunofloresen IDFA atau IFA] dengan antibodi
monoklonal

I I t - Keterbatasan metode : teknik kompleks peralatan

hasil lama 2-3 minggu.
suli!

__.1 16
 \-/ 'v
\/\J\-/VV

5. UiiSerologi
a Uii serologi HI merupakangold str.ndardWH(}
5.1. Uii HI (Haemagglutination Inhibition) untuk diagnosis infeksi virus dengue.
Bahan: Antibodi HI bertahan di dalam tubuh sampai
bertahun-tahun, sehingga uii ini baik untuk studi
- 5 ml darah utuh, pimhkan serumnya,masukkan
sero-epidemiologi. Sayangnya uii ini membutuhkan
dalarn botol steril tertutup rapat kirim ke
sepasangserum (paireil sera,|, yang diambil pada fase
laboratorium. Bila tidak segera dikirim, serum
simpan dalam lemari es (4'C), pengiriman dalam akut [hari ketiga-kelima) dan fase konvalesen {hari
ke sepuluh-keduabelas)
termos berisi es.
Diagnosis ditegakkan bila terdapat kenaikan titer
- Darah kapiler dari uiung iari, teteskan pada
konvalesen 4x lipat titer serum akut.
kertas saring diameter L2,7 mm, bolak-balik
sampai ienuh, Keringkan pada suhu kamar 2-3 Primer <t/1284
iam, kirim ke lab dalam amPloP' Sekunder> L12560

18
17

,NTERPRETASI HAS'L Imun Infeksi Virus

SPESIMEN
SPESIMEN KEDUA INTERPRETASI
PERTAMA
Sebelum hari ke 4 Setelahl-4minggu Dengue primer
>4Xdan E 1ic
< 1:20 I
<1 :1280 c
Sebelum hari ke 5 Dengue F
s
< 1:20 > 1:255O Sekunder
>1:2O >=4X
o
Sebelum hari ke 7 !
E
> 1 :1280 Tak perlu kenaikan Dugaan -
Titer >= 4 X Dengue
Sekunder !si

2X
ig Time
5.2. Uii Dengue blot/Dot imunoasai/Dengue Stick Dengue Stick - AIM
flglt{ anti dengue dan IgG anti dengue}
Prinsip dasar :
- Uii ELISA indirek tlengur' Sli<* Slir'& 196
-
UjiCaptureELISA
Bahan I serum
Fase padat: kertas nitroselulose

Interpretasi: :Ut:::/:J.l **!r1J lJl

- Positif : terbentuk dot warna biru-ungu i.:ry.]: t',i+1,r:ajt-

- Negatif : tidakterhentuk warna

Bila hasil neg:atif, tunggu hasil pemeriksaan ff{othrr r,!iar':s*glt\otrtt
serum konvalesen untuk konfirmasi.
lll:]ilt r,,i"i* card Eru
!3 $J,!ia a-,t aa.pat d positi{
memberikan
ipercaya b i ta kontrot n e gati f ;;]-Jc r*!l!,$r
hasil atau sebaliknya. ihgff
I
21
I

5.3. Uii Captured ELTSA

Interpretasi ELISA Dengue (panbio)
- Palingbanyakdipakaisaatini
- Dapat deteksi IgM dan IgG-anti dengue
Rasro IIasil lnterpreta si
- Sensitivitaspada serum akutT$o/o,pada HI 530/0,
19M < 0-9 negatil 'Iidak ada inl-eksi
bila serum sepastng seflsitivitas 97olo.
dengue
- PalaCaparedgtrISA tertentu (Akira lgrashi, IgM 0.9-1.1 eq uir-ooa1 Perlu tes ulang
fepang), dapat deteksi antibodi IgM terhadap IgM >1,1 posilif )ugaan infeksi
ienis serotipenya, baru dengue
- Terdapat Dengue Duo ELISA (panbio, Australia), IgG < l.E negatil Tidak ada inl'ehsi
sekaliguslgM dan IgG dalam satu kali metode sekunder
pemeriksaan dengan serum tunggal. IgG 1.8-2,2 equivocal Perlu tes uiang
- Keterbatasan: butuh waktu semalam, kurang lgG > 2,2 pos itif Dugaan infeks
praktis untuk di lapangan. sekunder aktil
 5.4. Uii Imunokromatografi / Rapid Test
Bany_ak dipakai & tes paling berkembang
Prinsip Uii Rapid Test
saat ini.
l

Prinsip: uji gabungan Captured ELISA +

kromatografi.

Keuntungan: ::
- Cepat ( 5-15 menit) Anti'human
- S-erum tunggal: deteksi IgG & IgM anti- IgM& Isc
pdmembrane
Serum
IgMand
dengue sekaligus, ada yang dalarn 1 paket Icc
-
NS1, IgG dan_IgM antidengue (triple antibodies
dengue rapid test).

25
26

Dengue Cassette

2 Well design
c Biotine- boyine serum albumin r' Serum separation device
T1 Monoclonal antihuman IgM antibody (allowingwhole blood to be
T2 Monoclonal antihuman lgG antibody used also)
I
Antigen rekombinan Dt, Z, 3, 4 r' zsl'rlp process
Coniugatcolloidal gold labelled moncclonal mtbody
I
Neutravidine-gold r' Co[oidal gold visual detection
r' 15 minute assay
Keterangan Gambar:
r' DeEcts IgM & high levels of IgG
(same as strip test)
Control
T Test
27
 \r' \/ V

Kombinasi lgM & lgG antidengue

(rcrlELrsAl Negatr!e

:
HASIL INTERPBETASI
leG leM
1 POS POS DENGUE SEKUNDER l*!.rsYg-ls,q { !c81
Pqative

I NEG POS DENGUE PRIMER

3 POS NEG DUGAAN DENGUE SEKUNDER

NON-DENGUE / PRIMER \;gaL,r.. li val,d

4 NEG NEG AMATAWA[,
RETEST STI.H 4-7 HARI

\/Wtiemega lerycom 30

5. DeteksiBNAvirus
Metode : RT-?CR (ReverseTranscriptase Polryerqse Chain
Reac-tion)

PCR merupakan teknik mengamplifikasi DNA, dapat untuk

tentukan serotipe virus dengue, perlu prfmerspesifik sesuai
dengan serotipe virus dengue {nested PCR).

PrinsipPCR:
- DenaturasiuntaigandaDNAvirus
- Annealing fpenempelanl primer pada DNA target .' Shorr .'
- Primer Extension (pemaniangan primer)
Froduct

Pri6.' . rt..ii.n

Lo-q Produci "

Hasil merupakan akumulasi DNAtarget spesifik sekitar 2n.
I
Visualisasi hasil PGR dengan elektroforesis gel atau.OIV,4
probe, 31 32
 4MayZOLA
PCR Typing results
lA i 2 3 4[,1 5 67 S 910 11121314M

Etr M: {00 bp ladder

r60
trn
=- Lane l: DEN-'I pos ctrl
Lane 2: DEN-2 pos ct.l
Lane 3: DEI{.3 pos ctrl

- aa*
* *,
Lane4: DEN4 pos ct.l
Lane5: fl)23 = DEN-3
Lare6: i624 = DEN-3
LaneTi*025 NEc
LaneAi #026 = DEN-I
LanGg; *027: DENS
MALARIA
Lanc 10: #029 = DEN-1
DltrS1:42 bp Lane 11: 1030 = DEN-3

DlrTS2:11S bp
Lane 12: l03l =DEN-I
Lane 13: f032. DEN-{
01/TS3:290 bp
Lane 14: Neg ctrl
D1/OEN4:389 bp

{tuydti etit,2010) 34

D iagnosis malaria dapat ditegakka-

4. Quantitative Butfy coat
melalui
L Diagnosis klinis 5. Antigen detection menggunakan
2. Malaria blood smear: metode im unokromatografi (lCT)
. hapusan darah tipis {fhrn btood fitml -* Rapid Diagnostic Test (RDT)
. tetes tebal (ftrbft blood filml
6. Polymerase Chain Reaction (pCR)
3. Fluarescent micrascopy
Misal : menggunakan Acridine Orange {AO) -- 7. I ntral eucocyti c malaria pigm ent
B i*l mag i ng navigator atau mikroskop (hem ozoi nl -.-, fl autcytom etry
fluoresens
 ragnosrs ana versl
ct

DEPKES
.Anamnesis
.Pemeriksaan fisik
. Pemeriksaan laboratoriu m PATOFISIOLOGI
. Diagnosis pasti malaria --*
pemeriksaan sediaan darah
secara mikroskopik atau tes
diagnostik cepat

40

Masuknya plasmodium ke dalam darah

dan menginfeksi eritrosit

perlu dipahami alurnya

karena erat kaitannya dengan antigen
Ya ng disekresi ke dalam aliran darah
{}
dapat ditegakkan diagnosis melalui
pemeriksaan serol ogil ra pid te st
 \/' \-/

Pemeriksaan mi kroskopis

Pewarnaan
PEMERIKSAAN Giemsa
Pewarnaan AO

. SD tipis . Fluoresensi
LABORATORIUM . SD tebal . Mikroskop sistem
Kawamoto
. Quantitative
Buffy Coat (OBC)

Courtesy by Hermi lndita,2007

Pemeriksaan dengan mikroskop b. Kuantitatif

f parasit dihitung per mikro liter darah pada
leukosit atau eritrosit
1. Ada tidaknya parasit malaria (positifatau
negatif) contoh :

2. Spesies dan stadium plasmodium
3. Kepadatan parasit :
a. semi kuantitatif :
t-) : tidak ditemukan parasit dalam
1OO LPB
{+} : 1-10 parasit dalam 100 LPB
(++l : 11-100 parasit datam 100LPB
(+++) : 1-10 parasit datam 1 LpB
{++++}: > 10 parasit dalam 1 LpB
1. Bila dijumpai 1500 parasit per 200 tekogit
Jumlah lekosit 8.000/uL
Hitung parasit ; 8.0001200 x 1500 parasit -
60.000 parasiUul
2. Bila diiumpai 50 parasit per 1000 eritrosit
Jumlah eritrosit : 450.000
Hitung parasit : 450.00011000 x 50 parasit =
225.000 parusiUuL
 \-7 \J

45

CELL.DYN 32OO

Malaria detection capability

't-+--r,,
& Ieknologi Mslali;

)--l--,

aa|ir*

t
46
Hermi

CELL.DYN 32OOTM Pemeriksaan dengan tes diagnostik

Optical M.A.P.S.S T cepat (RaPid Diagnostic lesf)
filli b\ I

m __--____ alr '---_---_ -r-'

1. HRP-2 lHistidine rich pratein 2l
W
H
ril
L4 i/d
?it 1a-,
7\1 ]il
lL

4
i# 'L.g ffi .
trofozoit
.
r
skizon
gametosit muda P.falciParum
*fr I iI ai]lr "l
l
L
2. Enzim parasife lactate dehydrogenase (p-
,* l! ,l
;l
I LDH) dan aldolase
!:il :

i l-*#'
"I
i
I
I
' r parisit aseksual atau seksual
-ptasmodium
sl s.g --,,+*f- falciparum, F. vivax dan P'
vd -..1

II NITTTI malariae
 \/,' \-/

rig c o e

ii
-l:l\i[i

::,a.k!iPl
a!1il' Llii,liiA trPl1qoflc1
tTpl 1 oD2TClo
re h.umaco.u.m.
ffi-F# @131
lsffaiifd
j-::iiril,l,+ al;.! lt LB14]
:. r;:t
t- 11aFBc30
cE.!5
t: :]-lia" 1,'n 1
: !R:t.;!F c6it1
:rt"iii r.s i,l.lijil ir i::rr.r. rmi lsrnmrmensnm _
,i .,,.rrjji,:a lrl,-r KMFWT lssA DlaqdEa BddSFIems
: , .: j.r.r.r;1,: li .rn: il3FRa3{ lPmhrMqlcryMud.

ru51 !prioP,$
kd HPW23

i::r-:, a3:.! '. -?r, r,!r;i *oi E!gn@a___

hJlwud ll6l.na FaLiw
tr&a oass.L.taL FuEfl40hs kv6 whlbd
0s2-p5
r11A42
l**
Ecoil tsbaMid k
!8Cr ivuor Bosx tPty, Lrd.

u?3i2 1ry4r8_C91mg13141!S+q
: :ij, - L!:::.r; :r:l r2tB
sr lms,]illM**o1,,!l9 _
MFrAoBddled ru1ilC lcrK$old,lf,..
::.:i,e1:,3s( te:i ld F 30t0rt25
:: :--r \, irF.rlidi., r'.i:itrilil UIi D11:r, 30M25
:r:'' : 2'iicF FCirA-a i{l!$ iiAuqi 287
2S75
; :r- \: !5Ft($02{

Ptlxcrxt*€
CdnloEs k*et$u
AnHEens targeted bH currentry availahle B0Ts
I Histidine-rich protein 1l ( HRP-ID (n is a water-solubie protcin pro-
drceci b,v trophozoites and. young (but not rnature) gametocytes of
Y. falciparam. Commercral kits currentiy arailable detect HRP-II
from RJalriparurn only

I Parasire lacrate dehydrogenase (pLDH) (B) ls produced by asexual

;rnd serual stages (gametorrytes) of uralaria parasitcs. Test kits cr-rr-
rertly available cletect pl.DH from zrll four Plasmadiuttt species that
infect humans. Thei can distinguish P ftlcip*ru*'tfrom the nr:r-r1fal-
ciparum species, but cxnnot distinguish betu'een P vivrrlc, P. ovale
and P malariae .

I Other antigen(s) rhat are present in all for.rr species are also targeted
in kits that ccrnrbine de tection o[ tire HRP-II anrigen al P' talciparurn
logetber with that of an' as 1'et unspecified, "pan-malarial" anii8en
of the o*rer species.
 \-/ \-'l

SCH EMATIC REPRESENTATION OF IM MUHOTOGIC REACTION

0NA P0S|TIVE STRIP {EXAMPLE P v'yrx INFECTIoN)

Gold - lairelled
deteclion
a ntilr0dlt

P vivax
artigen

Captlrre antibody Captrlre aniibody Conlrol capture P6itif rir*d( . Peibf unhth P. Falcdto* , Positjt {stsk
speciiic {or dstecting ail antibociy specific p. F.tcilem &i p w.t, @,e, pLowo&@
P falciparLim malana sijecies for detection
fralariae
antigens a ntibody

TABLE 1. COMPARISON OFIHE REQUIREMENTS, PERFORi!1ANCE, DIRECT COSTS

AND lECHNICAL SPECIFICANONS OF I\4iCROSCOPY AND RDTS

MlcFosCoPY RDTs

Test Performance of RDTs Eqilpmnt $idw4e None

1. To date, no commercial RDT has been

reported to differentiate reliably between P.
vivax, P. ovale and P. malariae kh{r'int.n.iv6ness High Lo*

2. RDTs generally achieve a sensitivity of > tubidffiy High lor

90% in the detection of P. falciparum at

densities above 100 parasites per pl blood.
Below the level of 100 parasites per pl
blood, sensitivity decrease markedly Diffe..diatior bsM.en

3. HRP-lltests can remain positive forT-14 P viv.x P nwle ..d

days following chemotherapy Oi6oEnt6tu bees

&te.Uq of lB /rklpa.ufr) No
.eqr*t.rBd pars5ite
AnUB.n Fslibnc. liot applicnhl. Same ffDT3
\- \J
'\--l \/' \-/ \-l

Pendahuluan
. Leptospirosis : penyakit zoonosis oteh
bakteri spirochaeta I {famity
leptospiraceae, genus leptospira)
. Diklasifikasikan menjadi dua spesies,
LEPTO$PM$l$ yaitu :

a. Lepfosp ira interrogans (pathogen)

b. Leptospira biflexa (non pathogen)

57
58

Risk Groups
Leptospira :
. Bakteri Gram (-) Occupational t- xitosure
. Bersifat aerob
. Iiarmers - liice, Sugarcane, Vege_.tablers,
. Berbentuk pegas
Cattle, Piss
. Sewc:rage rvorkersi Abattoirs, I3utchers
tipis
. Diameter 0,1 pm . \ietenarians, I-alt staff, \{iners. Solclic-:rs
dan panjang 6-20 . Frishernren * Inland (not on the sea)
Hm Recrealional ac:tivities
. Sw'irnmiug, Sailins, \,larathon rultners,
Garrlening
5S
 Reservoirs of lnfection Modes of Transmission
. Rodet'rts I . Direct contact w-itl-r urine or lissue of
. ir-r{ercteii animal
I)ogs
. I'hrough skin abrasior-rs, intact mucus
Wild anirnals
Inen-Ibrane
. Domesticated animals
2. Indirect contact
. Cagcrl gaine animals
IJroI<en skin ivith infeclerl soil, water or
l-eptospira are excreted in ther urine vegetation
lngr-,stion of contanrinated footl & watE:r
il. DroplcL infection
Inhalat.ion of clroplets oI infectcd urine

Cara Penularan
How Leptospirssis is spread?
l.oF;e t$il t'{r t ttii 'irrrcr! by dirE(l
.odrrt r!rih .inl.:nrnnt"{! *ntfi

,,- 'nt.:::'1""tf
t
,'ttr-,.t4.,..15
4i:.l*L4
d.-
 \JV

*athogenesis
Apprcifis@ fim de a
pemtratlon ,:&
;r
r
'''--{4
lcpto.ptra [** ? lntsGrld Bgtri!6

*
- i: .:::

i*----!
:.:

l€pkpis pBffid iil

Bhd
Bhod streem sire

Localized in H;9h
rt
*?t '..!
i-.-_.*-l
jaundice i.:rb. arl-; ii!e31i.inlrn.t ? i.i
!-
- reterohclnofihage
l*tcrstfrai
CultrE

seBlrgy
i -{F-
osF

o* I o e
nephritis Rrn:rl t:riluri'

--*-
-r> Surber : Harrison's Infectious Ilisease
bb

Laboratory Tests
Jenis spesimen
. WBC / Diif Ccrunr / LLiD / tlb /Platt:lr:t

.
count
Serurn Bilirubin / SGOT/ SGPT
. Darah
. Illood [.lrea, Creatinir-re & Electrolytt:s
. Serum
. Ch,'sl X-lla5: FICC . Urine
. -lests for diagnosis
Laborator_v of . Cairan serebrospinal (CSS)
Leptospirosis

68
 Jenis Metode Sampel
Pemeriksaan
Pemeriksaan 1. Pemeriksaan bakteri Darah, urine, LCS, Direct Evidence
Bakteri secara langsung media kultur

2. lsolasi Bakteri Hidup Darah,urine, LCS

Demonstration of leptospires or their
3. Deteksi Antigen Serum products:
Bakteri
. Microscopy
Pemeriksaan 1. Microscopic Serum
Serologis Aglutination Test . Dark-field microscopy
(deteksi
antibodi)
(MAr) . Phase contrast microscopy
2. Enzyme-linked Serum . PCR (DNA)
lmmunosorbent
Assay (ELISA)

Pemeriksaan PCR Darah, urine, LC$g

POLYMERASE CHATN REACT/,ON (PCR)

Leptospira under the Microscope Sp<*iffia
(Arta6, R*d&* Eqrus,
#.4. 4r**- ,'
'r+.
r#
t
a Metode amplifikasi
l)ark Fieki !';,,. :q 1 A.r'.i
:a5 r,i-t-i-\l
ir-i..'1,!t ...r, segmen DNA
|::-ts
I
i-{r_)r,liir: }::.,r Leptospira pada
sampel penderita.
AceuralG
Ssnsative
-ld
R€*ull* Sangat berguna untuk
lr] {€w trcu(*
mendiagnosis
-.-:, o i:j, r: : r::r'i.: ir:, - t].a rt.-. i j :-), i leptospirosis terutama
1l Aqa.{}se Gel
: "''- pada fase awal
penyakit.
1,ong, Thin, Hishly Coik:d ==
?, R('a I- T rnrc PC R
raell Cu{-r'e

72
 lndirect Evidence
M ic roscaqic Agl uti n ati o n lesf
(MAr)
. "Gold standad'
Detection of antibodies to leptospira: . Prinsip : Ag leptospia + Ab anfi-fefiospira dalam
. Macroscopic agglutination test (MSAT) serum'pasiin ) aglutinasi ) px dengan mikroskop
. lndirect fluorescent antibody test (IFAT) lapangan gelaP
. lndirecthaemagglutinationtest (lHA) . Hasil akhir: pengenceran tertinggi dari serum
pasien
. Counter immuno electrophoresis (CIEP) Oengan 50Yo aglirtinasi, bandingkan dengan kontrol
. Complement fixation test (CFT) . Pemeriksaan dilakukan 2x $arak 5-7 hari), Dx
. ELISA leptospirosis: peningkatan titer antibodi 4x lipat
. Microcapsule agglutination test (MCAT) . Soesimen tunggal : hasil (+) ) titer > 1: 200
(daerah
. Lepto-DiPstick non endemis;, aan z 1:800 (daerah endemis)
. Serogrouplserovar specific tests
. MicrJscopic agglutination test (MAT) : reference test
. SerovarsPecific ELISA 74

Enzyme-linked lmmunosorbent Assay

(indirect ELISA)

i1
fi
tj
*& i";r4*t+ rrrllr+?rt
Sn*;Pl*

L?p1.1 f, tlt.i F-o d rJa'E4:l

I
iii1
,t
*
{-: f,:-: {^' : E'r:yttt- . r:!rrlstri..E!
', ': ':
il'
:. i
,l

.&
76
T&t6lettlltdt+4*S
 \_-/ \J \-/

PEMERIKSAAN LEPTOSPIRA
di RSUD dr. Soetomo
Tiga garis pemeriksaan pada strip :
Deteksi antibodi lgG/lgM . G: garis pemeriksaan lgG terhadaP
Leptospira leptospka intenogans
(sD BroLlNE) . M : garis pemeriksaan lgM terhadaP
Prinsip: leptospira intenogans
Deteksi antibodi lgGllgM
. C: garis kontrol
terhadap Leptospira
i nterrog ans secara kualitatif
pada serum manusia TT 78

lnterpretasi
1.lgG {+1 : terdapat antibodi
lgG terhadap leptospira
i nte rrog an s pada sampel

2. lgG dan lgM (+) :

terdapat antibodi lgG dan
lgM terhadap leptospira
i nterrog a ns pada sampel

.":

79
Terima kasih 80