UNIVERSIDAD DE SUCRE

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

DEPARTAMENTO DE FONOAUDIOLOGÍA
PRÁCTICA Nº6

FACTORES QUE AFECTAN LA ACTIVIDAD ENZIMÁTICA

INTRODUCCIÓN

Una de las manifestaciones de la vida es su notable eficiencia y complejidad de

funciones basada en reacciones químicas controladas. En las reacciones químicas
ordinarias que requieren o producen gran cantidad de energía, el proceso se lleva
a cabo regularmente a altas temperaturas, a veces con la participación de
catalizadores de carácter inorgánico que facilitan la reacción.

Dentro de la célula se llevan a cabo reacciones similares, por ejemplo la

respiración celular, que es análoga a una combustión, pero en este caso la
producción de calor y de otras formas de energía se realiza de manera controlada
por una variedad de enzimas que actúan de diferentes pasos o reacciones
intermedias, permitiendo así una máxima utilización energética.

Casi todas las enzimas o catalizadores bioquímicos son proteínas globulares, lo

que explica muchas de sus características y ejercen su acción dentro de un rango
de temperatura y pH estrecho fuera de los cuales pierden su actividad, quizás la
característica más relevante es su alto grado de especificidad, esto es, que cada
enzima cataliza una reacción o un grupo restringido de reacciones químicas y
actúa sobre su substrato específico. Por ejemplo, la amilasa actúa sobre la
amilosa, sacarasa (inversa) sobre sacarosa y la ribonucleasa actúa sobre el ARN.

Otra particularidad consiste en la capacidad de transformar una cantidad muy

grande de sustrato con relación al número de moléculas de la enzima. Sobre el
mecanismo de acción de las enzimas brevemente se puede considerar lo
siguiente: Las moléculas poseen un determinado nivel de energía y para realizar
las reacciones se requiere de la llamada energía de activación. El calor aument la
probabilidad de choque de las moléculas reaccionantes, permitiendo superar dicha
energía de activación.

OBJETIVOS

 Comprobar la reacción sobre el peróxido de hidrógeno por acción de la

enzima catalasa, presente en tejidos animales y vegetales, determinando
los productos de reacción.
 Estudiar algunos factores que afectan la actividad enzimática, tales como la
temperatura, pH, concentración de sustrato y de la enzima y presencia de
inhibidores.
MATERIALES Y REACTIVOS

8 Tubos de ensayo
Vasos de precipitado de 250mL
Agitadores
Estufa
Cinta indicadora de pH
Ácido clorhídrico 0.1N
Hidróxido de sodio 0.1N
Mortero y mango
Higado de res*
Papa cruda*
Cuchilla*
1 frasco de solución de peróxido de hidrógeno (agua oxigenada)*
Hielo*

*Lo traen los estudiantes

PROCEDIMIENTO

1. Efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa de papa

Corte un pedazo de papa pelada, macérelo adicionando 15mL de agua,

recoja el extracto en un vaso de precipitado.

Tome 5mL de éste y llévelo a un tubo de ensayo, tome la temperatura con

el termómetro y añada 3mL de peróxido de hidrógeno al 3% (Dioxogen),
observe lo que ocurra y anote las observaciones para su informe.

Tome otros 5mL de extracto y sumérjalos en un vaso con hielo por 10

minutos, al cabo de este tiempo registre la temperatura con el termómetro.
Tome el tubo y sin sacarlo del hielo adicione 3mL de peróxido de hidrógeno.
Observar y anotar resultados.

Caliente los 5mL restantes de extracto hasta ebullición en baño de María,

registre la temperatura e inmediatamente agregue 3mL de peróxido de
hidrógeno. Anotar las observaciones.

Repita el procedimiento anterior reemplazando la papa por hígado.

2. Influencia del pH sobre la actividad de la catalasa de papa.

Corte un pedazo de papa, macérelo agregado 15mL de agua, recoja el

extracto en un vaso de precipitado y divídalo en tres porciones.
 Tome 5mL de éste y llévelo a un tubo de ensayo, añada 2mL de solución
de ácido clorhídrico al 0.1N, verifique con un pedazo de cinta indicadora el
pH del medio y añada 3mL de peróxido de hidrógeno. Observe y anote.

Tome otros 5mL de extracto, añada 2mL de solución de hidróxido de sodio,

verificar el pH de la solución con una pedazo de cinta indicadora. Agregue
3mL de peróxido de hidrógeno. Observe y explique los resultados.

Tome 5mL de extracto, e inmediatamente agregue 3mL de peróxido de

hidrógeno. Anote las observaciones.

3. Influencia de la superficie de la muestra de hígado sobre su acción

enzimática

Tome un pedazo pequeño de hígado y divídalo en dos partes iguales.

Macere totalmente una de las porciones anteriores en un mortero y

transfiérala a un tubo de ensayo.

Divida en trozos la porción restante y transfiérala a un tubo de ensayo

diferente Adicione a cada tubo 3mL de peróxido de hidrógeno y compare la
reacción en cada tubo.