septiembre 7

Detección
de
salmonella
sp
2016
Detectar la presencia de microorganismos del
Fundamentos de
genero Salmonella sp en muestras de alimentos,
los diferentes
con el fin de evaluar su calidad. Y Abarca
medio utilizados
todos los microorganismos capaces de crecer en
para la
el medio Salmonella-Shigella (SS) a una
identificación de
temperatura entre 30-37ºC. Con los diferentes
salmonella.
medios que se utilizan.
 Pre informe de microbiología

Aprendiz
Natalia Mariana Solano Ricaurte

Instructor:
María Mónica Gámez

Servicio nacional de aprendizaje (SENA)

Ficha: 1025445
Control de calidad de alimentos

CBC
Fundamento del medio XLD
(XILOSA-LISINA-DESOXICOLATO)
La degradación a acido a partir de la Xilosa, lactosa y sacarosa
producen un viraje a amarillo del indicador Rojo de fenol. El
tiosulfato y sal de hierro revelan la formación de H2S por la
precipitación del sulfuro de hierro negro en las colonias. Las
bacterias que descarboxilan la lisina, producen cadaverina, se
reconocen por la presencia de un color rojo-purpúreo debido al
aumento de pH alrededor de las colonias. El efecto inhibidor es muy
débil.

Identificación de salmonella en XLD

Las colonias típicas de la Salmonella son de color rojo con el centro
negro debido a la producción de H2S.
Fundamento del medio macconkey
Agar selectivo y diferencial para el aislamiento de Entero bacterias.
El medio contiene sales biliares y cristal violeta que son inhibidores
de la microbiota Gram positiva. La lactosa junto al indicador Rojo
neutro sirven para la comprobación de la degradación de dicho
azúcar, dividiendo el grupo en 2: Bacterias fermentadoras y no
fermentadoras de Lactosa. Por fermentación de la lactosa, disminuye
el pH alrededor de la colonia. Esto produce un viraje del color del
indicador de pH (rojo neutro), la absorción en las colonias, y la
precipitación de las sales biliares.
Identificación de salmonella en macconkey
Las colonias fermentadoras de lactosa dan un color rosado. Las
colonias no fermentadoras de lactosa son incoloras (salmonella)
Fundamento del medio HECKTOEN-ENTERICO (HE). El
Agar HE es un medio de cultivo selectivo para la identificación de
bacterias intestinales patógenas. La alta concentración de sales
biliares inhibe el desarrollo de las bacterias Gram positivas. La
Fucsina acida junto con el azul de Bromotimol reaccionan virando a
amarillo al bajar le pH del medio por la acción de los ácidos
producidos a partir de la fermentación de los 3 hidratos de carbono
(Lactosa, Sacarosa, Salicina) que contiene el medio. La combinación
de tiosulfato y una sal de hierro dan una coloración negra a las
colonias H2S positivas.
Salmonella en agar HE
Las colonias de Salmonella spp. Son de color azul verdoso con
típicos centros negros por el gas H2S.

Fundamento de las baterias bioquimicas

Agar hierro de kliger (KIA)
Es un medio sólido y diferencial. El fundamento se basa en la
capacidad de fermentación de dos azucares (glucosa y lactosa), en la
producción de ác. sulfhídrico y en la producción de gas.
Identificación de salmonella en agar (KIA)
La mayor parte de las salmonellas producen H2S. r esultado
es K/A

Fundamento de la prueba del indol

El indol es un compuesto que se genera mediante la desaminación
reductiva del triptófano y esta reacción es llevada a cabo por algunas
bacterias que poseen las enzimas denominadas en su conjunto
triptofanasas. Para detectar la producción de indol se utiliza el medio
Caldo triptófano y la lectura de la prueba se realiza con el reactivo
de Kovacs (alcohol isoamilo, p-dimetilaminobenzaldehído y ácido
clorhídrico concentrado) con el que el indol producido reacciona
generando una coloración rosa intensa.
Identificación de salmonella en indol
Fundamento de la prueba de oxidasa
Los discos contienen oxalato de dimetil-para-fenilendiamina, el cual
es el sustrato de la enzima oxidasa. Los microorganismos que
producen la enzima oxidasa se evidencian porque en presencia de
oxígeno atmosférico y citocromo c, se oxida el sustrato presente en
los discos a un compuesto de color rojo-fucsia.

Identificación de salmonella en prueba oxidasa

Es negativa

Fundamento del voges proskauer

Esta prueba se realiza para determinar la capacidad de un
microorganismo de fermentar la glucosa con producción de ácido
por la vía ácido mixta o con producción de un producto final neutro
(acetoína) por la vía butanodiólica.

Identificación de salmonella en V/P

Negativo
Fundamento de la prueba de citrato
Se usa para determinar si el organismo es capaz de utilizar el citrato
como única fuente de carbono y compuesto amoniacales como única
fuente de nitrógeno. El medio contiene citrato sódico, fosfato de
amonio y azul de bromotimol como indicador; este se tornará azul
cuando el medio se basifica. Las bacterias que metabolizan el citrato
liberan iones amonio al medio (degradación del fosfato amónico) lo
que provoca que este se alcalinice y el indicador vire azul.

Identificación de salmonella en citrato

Es positivo
Fundamento del agar (LIA)
Es un medio que sirve para demostrar la producción de dos enzimas:
la lisina descarboxilasa y la lisina desaminasa, además la presencia
de sales de hierro sirve para detectar la producción de H2S por
algunos microorganismos. La descarboxilacion de la lisina ocurre en
ambiente anaeróbico o sea en el fondo del tubo y se pone de
manifiesto por la alcalinización del medio produciendo un viraje del
indicador púrpura de bromocresol. La presencia de glucosa en los
componentes del LIA determina primero una reacción de
fermentación, produciendo acidificación y cambio de color del
medio a amarillo y el pH favorable para la reacción de
descarboxilacion que ocurre después, volviendo a su color violeta
original la parte del fondo del tubo.

Identificación de salmonella la en LIA

Fundamento rojo de metilo
Determinar la capacidad de un microorganismo para producir y
mantener estables los productos terminales ácidos de la
fermentación de la glucosa y vencer la capacidad amortiguadora del
sistema. La prueba Rojo de metilo es cuantitativa para la producción
de ácido y requiere que los microorganismos produzcan ácidos
fuertes a partir de la glucosa, de forma que el medio del pH
descienda a menos de 4.4. Esta distinción puede hacerse a través del
indicador Rojo de metilo que presenta color amarillo por encima de
un pH de 5.1 y solo presenta color rojo cuando el pH desciende a
4.4.

Identificación de salmonella en M/R

Positivo

Fundamento de la ureasa
Los microorganismos que poseen la enzima Ureasa tienen la
capacidad de hidrolizar la urea contenida en el medio con
producción de amoniaco, para esta prueba se utiliza el caldo urea de
Stuart o agar urea de christensen. El caldo Stuart está estabilizado
con sales de fosfato a un pH de 6.8. El microorganismo en estudio
debe producir cantidades relativamente grandes a fin de superar el
sistema estabilizador del medio y elevar el pH del medio los
suficiente como para virar el indicador (por encima de 8.0).

Identificación de la salmonella en agar urea

Negativo
Fundamento de movilidad (agar SIM)
Me permite determinar la capacidad de movimiento por parte de un
microorganismo

Identificación de salmonella en agar SIM_ movilidad

Positiva
Fundamento del medio rambach
Medio de cultivo cromogénico CHROMagar para detectar y aislar
Salmonella SPP en muestras de alimentos

identificacion del medio rambach para salmonella

Fundamento del agar SS
El agar SS es un medio altamente selectivo que inhibe el desarrollo
de la mayoría de coniformes y permite el desarrollo de las especies
de Salmonella y Shigella. La alta concentración de sales biliares y
citrato se sodio inhibe a todas la bacterias Gram positivas y a
algunas Gram negativas. La Lactosa es el único hidrato de carbono y
el Rojo neutro detecta la producción de ácido. El tiosulfato de sodio
es una fuente se azufre y las bacterias que producen H2S se detectan
por la presencia de un precipitado negro por el citrato férrico.

Identificación de salmonella en agar SS.