Práctica de Laboratorio de Nanobiotecnología

Ingeniería Bioquímica
Universidad de Antioquia

Nombre la práctica: Preparación de un hidrogel de magnetita/alginato para la remoción de un

colorante.
Elaboración: Sandra Navarro Gallón

Objetivo
El objetivo de ésta práctica es fabricar un hidrogel magnético de alginato para emplear en la remoción
del colorante azul de metileno.

Introducción
Los colorantes son una de las principales fuentes de contaminantes ambientales, los cuales se han
convertido en un serio problema industrial. Existen diversos tipos de procesos de tratamiento
químicos, físicos y biológicos que se han investigado para eliminar los colorantes de las aguas
residuales, sin embargo, la eliminación económica y efectiva de éstos sigue siendo aún un problema.
La exploración de diferentes adsorbentes poliméricos, particularmente hidrogeles con diferentes
grupos funcionales y la capacidad de complejación con los colorantes, es una alternativa reciente que
ha llamado la investigación de los investigadores. Los hidrogeles son redes tridimensionales de
cadenas de polímeros hidrófilos, química o físicamente reticulados, que no se disuelven, ni pierden
su forma. Se hace interesante entonces investigar el potencial industrial de hidrogeles magnéticos,
dado que aparte de sus características biocompatibles y biodegradables, son de fácil separación y
reutilización en su uso para la eliminación de colorantes de aguas contaminadas.

Reactivos, materiales y equipos:

Sulfato de hierro (II) heptahidratado (FeSO4.7 (2) Erlenmeyer de 250 mL
H2O) (1) Beaker 500 mL
Ácido sulfúrico al 98% (H2SO4) (2) Balón volumétrico de 50 mL
Peróxido de hidrogeno al 50%(H2O2) (1) Probeta de 20 mL
Azul de metileno (2) Pipeta volumétrica de 10 mL
Hidróxido de sodio (NaOH) pH-metro
Alginato de sodio Plancha de agitación y calentamiento
Cloruro de calcio (CaCl2) Espectrofotómetro UV-Vis
Ácido nítrico (HNO3) Celdas de plástico de 1cm para UV-Vis
Agua desionizada Barra o agitador magnético
(2) Erlenmeyer de 100 mL Pipetas pasteur

Procedimiento experimental:

1. Preparación de magnetita (Fe3O4)

Solución A.
-En un Erlenmeyer de 250 mL disolver 1 g de FeSO4.7 H2O en 30 mL de agua destilada.
-Adicionar a la solución anterior 10 mL de NaOH 1 M, mientras se agita magnéticamente.
-El pH final debe quedar alrededor de 12.
Solución B.
-En un beaker de 500 mL disolver 1,682 g de FeSO4.7 H2O en 30 mL de agua destilada.
-Adicionar a la solución anterior 7,5 mL de H2SO4 0,38 M (1 mL de H2SO4 al 98% en 50 mL de agua)
y mantener agitación magnética durante 10 minutos.
-Adicionar 7,5 mL de H2O2 1,7 M (1 mL de H2O2 al 50% en 50 mL de agua) y mantener la solución
con agitación magnética durante 10 min.
-Ajustar el pH alrededor de 12 con NaOH 1M

-Verter la solución A sobre la solución B y mantener agitación magnética durante 10 minutos.

-Al cabo del tiempo dejar en reposo para precipitar la magnetita.
-Realizar abundantes lavados al precipitado utilizando agua destilada.
! Comprobar la propiedad magnética de la magnetita por medio de un imán. Acercarlo y alejarlo del
envase para observar el efecto de atracción.

-Retirar el exceso de agua y guardar la magnetita hasta su uso.

2. Preparación de hidrogel de magnetita/alginato

-En un Erlenmeyer de 250 mL preparar 100 ml de una solución de CaCl2 al 6% p/v con agua destilada
(6 g en 100 mL de agua).
-En otro envase preparar 15 mL de alginato de sodio al 2.5% p/v (0.375 g de alginato en 15 mL de
agua). Tener en cuenta que se debe agregar poco a poco el alginato mientras se mantiene agitación
magnética para facilitar la completa disolución.
-Agregar la magnetita a la solución de alginato y mantener la mezcla con agitación magnética durante
30 minutos.
-Cumplido el tiempo y con ayuda de una pipeta pasteur, verter gota a gota la mezcla de
magnetita/alginato sobre la solución de CaCl2. Realizar este proceso mientras se agita
magnéticamente la solución de CaCl2.
-Dejar las perlas de hidrogel en la solución de CaCl2 durante 10 minutos. Luego retirar la solución y
lavar abundantemente las perlas con agua destilada.
-Tratar las perlas con una solución de HNO3 1 M durante 20 segundos para una generación más
efectiva de grupos carboxílicos que puedan interaccionar con los grupos catiónicos del colorante.
-Luego lavarlas nuevamente con abundante agua destilada.
-Finalmente dejar secar las perlas de hidrogel magnético al aire libre y almacenar en un lugar seco
hasta su uso.

3. Ensayo de adsorción del colorante

Para preparar la curva de calibración para el azul de metileno (AM):
-En un Erlenmeyer verter 500 mL de agua destilada y adicionar 2 gotas de azul de metileno. Agitar
hasta homogeneizar completamente la solución.
-Tomar 5 tubos de ensayo, marcarlos del 1 al 5 y de la solución anterior adicionar a cada uno el
volumen correspondiente indicado en la siguiente tabla:

Vol sln AM Vol H2O Concentración de

#
(mL) (mL) AM
1 2.0 0.0
2 1.8 0.2
3 1.6 0.4
4 1.3 0.7
5 1.0 1.0
-Leer la absorbancia de las diferentes concentraciones de solución de AM a una longitud de onda de
664 nm. Realizar las medidas por triplicado.

Una vez lista la curva de calibración, pesar aparte unos 4 g de perlas de hidrogel de magnetita y
adicionarlos en 400 mL de la solución de AM. Conservar con agitación magnética suave.
-Una vez adicionadas las perlas magnéticas de hidrogel, leer por triplicado la absorbancia de la
solución cada 15 minutos. Realizar al menos 5 lecturas.
-Calcular el porcentaje de adsorción de azul de metileno mediante la siguiente fórmula:

% AdsorciónAM = Co – C x 100
Co

Donde Co y C son las concentraciones de azul de metileno en la solución antes y después de la

adsorción, respectivamente.

Cuestionario para incluir en el informe de resultados:

1. ¿Cuál es el papel de la magnetita y del alginato en la formulación?
2. ¿Por qué ocurre la solidificación del alginato?
3. Si disminuyéramos el diámetro de las perlas hasta alcanzar tamaños en la escala nanométrica, ¿qué
podríamos esperar en cuanto al porcentaje de remoción del colorante y por qué?
4. ¿Qué técnicas de caracterización analíticas podría implementar para determinar la composición
química y elemental, el tamaño de poro de los hidrogeles, las propiedades magnéticas y los patrones
cristalinos de la magnetita?

Referencias
Jeon, Y. S., Lei, J., & Kim, J. (2008). Dye adsorption characteristics of alginate /
polyaspartate hydrogels. Journal of Industrial and Engineering Chemistry, 14, 726–
731. https://doi.org/10.1016/j.jiec.2008.07.007
Ak, D., Yakar, A., & Ufuk, G. (2015). Synthesis of Magnetic Fe 3 O 4 -Chitosan
Nanoparticles by Ionic Gelation and Their Dye Removal Ability. Water Environment
Research, (May), 425–436. https://doi.org/10.2175/106143014X14062131178673