Universidad Autónoma de Nuevo

León
Facultad de Ciencias Químicas
Farmacología I

Dr. Marcos Jair Guerrero Muñoz

GRUPO 02
Integrantes:
Gricelda Denisse Nuñez Tirado #1672020
Diana Laura Jerónimo López #1885697
Jaime Arturo Mondragón Flores #1836051
Merari Elioenai Salazar García #1836059
Andrea Monserrat Nava Alanís #1658952
 Práctica #1. Determinación de parámetros farmacocinéticos del ácido acetil
salicílico

Introducción
Los salicilatos son medicamentos denominados AINES (antiinflamatorio no
esteroideo) que se utilizan para tratar el dolor e inflamación y en algunos casos para
el alivio de la fiebre. Este tipo de medicamentos, por lo general, son de venta libre
por lo cual su uso desmedido puede ser tóxico para las personas. Los salicilatos
son derivados del ácido salicílico tales como la aspirina, el salicilato de colina,
salicilato de magnesio, salicilato de sodio, entre otros. Este tipo de medicamentos
pueden causar efectos secundarios como lo son diarreas, náuseas, vómito,
estreñimiento, distención abdominal, etc.

La concentración terapéutica de salicilatos en sangre es de 10-30 mg/dl y en

condiciones normales, esta concentración plasmática se alcanza en 30 minutos y
es máxima pasada 1 hora, pero en sobredosis puede tardar en alcanzarse hasta 4-
6 horas. Por tanto, la valoración de la salicilemia debe hacerse en base a una
muestra obtenida al menos 6 horas post-ingesta. La dosis tóxica por ingesta de AAS
se estima en 150 mg/kg de peso (intoxicación leve). Entre 150 y 300 mg/kg, las
manifestaciones serán moderadas y son muy graves las intoxicaciones con dosis
superiores a 300 mg/kg (potencialmente mortales al superar los 500 mg/kg).
Cuando se presenta una intoxicación ya sea aguda o crónica por salicilatos o por
algún AINE en general se pueden presentar los siguientes efectos colaterales:
ulceras gástricas, disminución de la función renal, aumentar la presión sanguínea,
etc. Las manifestaciones más importantes en el envenenamiento por salicilatos son
la hiperpnea, y los trastornos en el equilibrio ácido-básico.

Los salicilatos se pueden determinar ya sea cualitativa o cuantitativamente en

muestras de orina o sangre mediante reacciones colorimétricas creando complejos.
Objetivo: Determinar los parámetros farmacocinéticos del ácido acetil salicílico en
una muestra de sangre.

Fundamento
La determinación de ASA se basa en la formación de un complejo de color púrpura
por reacción de los salicilatos con nitrato férrico y la precipitación simultánea de las
proteínas séricas en presencia de cloruro mercúrico en medio ácido. Posteriormente
la solución coloreada es sometida a un análisis espectrofotométrico a 540 nm.

Reactivos:
Ácido acetil salicílico
Nitrato férrico
Cloruro mercúrico
Tableta de aspirina de 500 mg (una para cada voluntario)
Agua destilada
Ácido clorhídrico 0.1N

Equipo:
Matraces erlem meyer
Matraz de aforación 250 mL
Tubos para sacar sangre que contengan oxalato de sodio
Equipo para sacar sangre (vacutainer o jeringa y torniquete, torunda)
Bolsa para RPBI
Espectrofotómetro UV-Vis.
Preparación de soluciones:
Solución de fierro y mercurio:
10 g de cloruro mercúrico en una pequeña cantidad de agua destilada en matraz A
En matraz B: 10 g de nitrato férrico disueltos en 30 mL de ácido clorhídrico 1N
Mezclar ambas soluciones y aforar en matraz volumétrico de 250 mL con agua
destilada

Solución de estándar de aspirina:

Solución stock de aspirina, 0.1 mg/mL de ácido acetil salicílico en agua destilada.
De esta solución se preparan estándares de 10, 20, 40, 60, 80 y 100 µ/mL.

Procedimiento:
Preparación de la curva de calibración:
Tomar un mL de cada estándar y colocarlo en un tubo de ensayo.
Aplicar calor: 3-5 min a 45+/-2°C.
Enfriar con agua corriente
Añadir 5 mL de reactivo cloruro férrico-mercúrico a cada tubo de estándar.
Llevar un blanco con 1ml de agua destilada más 5 ml del reactivo
Calentar todos los tubos de nuevo, por 1-2 minutos
Enfriar y medir la absorbancia a 540 nm contra el blanco preparado.

Análisis de aspirina en suero:

Cada voluntario tomara una tableta de ácido acetil salicílico de 500 mg.
Después de 0.5, 1 y 2 hr extraer 5 - 10 mL de sangre en tubos de ensayo con 0.5g
de oxalato de sodio.
Centrifugar las muestras a 4500 rpm por 5 minutos.
Tomar 1 mL del suero sobrenadante y colocarlo en un tubo de ensayo (realizarlo
por triplicado).
Se añaden 5 mL del reactivo férrico-mercúrico y se agita por 2-3 minutos. Si es
posible utilizar un vortex
Centrifugar a 4500 rpm para la precipitación completa de las proteínas plasmáticas.
El sobrenadante es recolectado y la absorbancia se mide a 540 nm.
Resultados:

Identificación de muestra:
Lote: 232N
Caducidad: JUN 20
Tabletas 500 mg

X Y muestra tiempo Absorbancia

[µg/ml] Absorbancia 1 1:30 h 0.14
10 0.125 2 2:00 h 0.078
20 0.134
40 0.152
60 0.17
80 0.188
100 0.197

Corrección con blanco Corrección con blanco

BLANCO: 0.056 BLANCO: 0.056
X Y muestra tiempo Absorbancia
[µg/ml] 1 1:30 h 0.084
Absorbancia
2 2:00 h 0.022
10 0.069
20 0.078
40 0.096
60 0.114
80 0.132
100 0.141

Curva de calibracion del ácido acetil salicílico

0.16
0.14
0.12
Absorbancia

0.1
0.08 y = 0.0008x + 0.0622
0.06 R² = 0.9914
r= 0.9956
0.04
0.02
0
0 20 40 60 80 100 120
[µg/ml]
 0.084−0.0622
[ ]muestra 1 = = 27.25 µg/ml
0.0008

0.022−0.0622
[ ] muestra 2= = 48.55 µg/ml
0.0008

Discusión:
Los resultados obtenidos experimentalmente son muy parecidos a los reportados
en la literatura, en donde los sujetos de prueba fueron 12 mujeres de edades entre
los 20 y 22 años con un peso y altura promedio de 57.7 Kg y 159.9 cm
respectivamente. En dicho estudio se reporta que la concentración plasmática luego
de 2 horas de haberse administrado una dosis oral de 600 mg de aspirina fue de
49.66 μg/mL. Mientras que la concentración plasmática que obtuvimos
experimentalmente después de 2 horas de la administración oral de aspirina de 500
mg de nuestro sujeto de prueba cuyos datos de sexo, edad, peso y altura coinciden
con los rangos del experimento llevado a cabo en la literatura (mujer de 20 años con
un peso de 50 Kg y una altura de 1.58 cm) fue de 48.55 μg/mL. Tal similitud entre
nuestro sujeto de prueba y las 12 mujeres del estudio nos permite hacer una
comparación rápida de los valores. A pesar de que hay una diferencia de 100 mg
entre las dosis administradas, la concentración plasmática es prácticamente la
misma en ambos experimentos. Cabe señalar que a los sujetos de prueba del
estudio reportado en la literatura no se les restringió un consumo de alimentos ni se
reporta que hayan realizado ejercicio u otro tipo de actividad física previo al
muestreo de sangre, mientras que en nuestro experimento el sujeto de prueba no
había desayunado previamente y realizó ejercicio físico 7 horas antes de la toma de
muestras. Estos factores pueden influenciar los resultados y justificar por qué la
diferencia entre las concentraciones plasmáticas es tan similar y no mayor a pesar
de los 100 g de diferencia entre las dosis administradas de aspirina.
Solo fue posible obtener 2 muestras de sangre de la persona que ingirió el del ácido
acetil salicílico, ya que se realizó venopuncion en ambos brazos, pero no le salía
sangre al paciente, entre las posibles causas de esta situación está la
deshidratación o el estado anímico de la persona no obstante, se obtuvieron 2
muestras a la 1:30 h y 2:00 h, finalmente se tomó otra muestra a las 2:15:00 hr pero
la cantidad de muestra que se le logra sacar no fue suficiente para poder realizar la
determinación por lo que solo se cuantificaron los salicilatos en 2 muestras.

Conclusión:
Con base en la práctica realizada se pudo cuantificar los salicilatos en sangre
obteniendo 27.25 µg/ml para la muestra 1 y 48.55 µg/ml por lo tanto se prefiere el
consumo de la marca miloden porque alcanza concentraciones plasmáticas más
altas en menor tiempo.

Bibliografía:

H. N. B., . B. S., . A. I., . S. R., & . R. N. (2009). Pharmacokinetic Study of Aspirin in

Healthy Female Volunteers. Pakistan Journal of Biological Sciences.
https://doi.org/10.3923/pjbs.2003.1404.1407