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ACTIVIDAD ANTIMICROBIANA Y ANTIMICOTICA DE

LOS EXTRACTOS ETANOLICOS DE LA SEMILLA DE LA


GUANABANA (Annona muricata) Y MATARRATON
(Gliricidia sepium)
Silvia Lorena Chaparro Caceres 1610430*, James Ricardo Cañas Reales 1610637*, Laura Tarazona
1610638* y Juan Alejandro Zapata Castrellon 1610697*.

RESUMEN Palabras claves: Extracción, aceites,


guanábana, Matarraton, antimicrobiano,
El creciente interés por compuestos antimicótico.
bioactivos de origen natural como auxiliares
en la prevención de enfermedades y como ABSTRACT
método de conservación han provocado
actualmente un sin número de The growing interest in naturally occurring
investigaciones. El estudio estuvo orientado a bioactive compounds as auxiliaries in disease
evaluar por medio de pruebas de sensibilidad prevention and as a preservation method
la capacidad de los extractos etanolicos have now caused a number of investigations.
obtenidos, en la participación antimicrobiana The study was aimed at evaluating by means
o antimicótica. En este trabajo se presentan of sensitivity tests the ability of ethanol
resultados obtenidos experimentalmente, la extracts obtained in antimicrobial or
metodología de trabajo, las discusiones antifungal participation. This paper presents
partiendo de las especies utilizadas. Se experimental results, the methodology, the
encontró que los extractos obtenidos a partir discussions based on the species used. We
de las hojas de Matarraton y de las semillas found that extracts obtained from matarratón
de guanábana tienen propiedades físicas en leaves and soursop seeds have physical
los cuales se pueden clasificar como un properties which can be classified as a plant
extracto vegetal de origen natural. En cuanto extract of natural origin. Regarding the
a la extracción se realiza por arrastre de extraction is performed by solvent drag,
solvente, utilizando hexano, se comprueba using hexane, its performance is checked as
su rendimiento en cuanto a su conservación to preserve avoiding any contamination;
evitando algún tipo de contaminación; la final separation of the solvent is conducted
separación final del solvente se realizó por by evaporation. Considering that the plant
evaporación. Teniendo en cuenta que el material must go through a process of
material vegetal debe pasar por un cutting up to obtain a higher yield in the case
procedimiento de troceado para obtener un of seeds of soursop. Biological sensitivity
mayor rendimiento en el caso de las semillas testing indicates that it is not active against
de guanábana. La prueba de sensibilidad Bacillus cereus, and moderately active
biológica indica que no es activo ante against Staphylococcus aureus.
Bacillus cereus, y medianamente activo Keywords: Extraction, oils, soursop,
contra el Staphylococcus aureus. matarratón, antimicrobial, antifungal
I. INTRODUCCION la medicina natural. Así también el matarratón
(Gliricidia sepium) De los extractos de G.
La implementación de nuevos procedimientos sepium se han aislado e identificado un gran
como lo son la obtención de aceites esenciales número de metabolitos secundarios (MS),
y extractos, que son productos con interés entre los cuales se destacan fenoles,
comercial hoy día son una de las alternativas alcaloides, flavonoides, aceites esenciales y
que más llaman la atención, pues se tienen los saponinas. Gracias a las propiedades
recursos naturales disponibles, convirtiéndose alelopáticas de estos compuestos, los extractos
así en un área amplia de investigación y obtenidos de esta planta tienen un gran
desarrollo, debido a la gran acogida que tienen potencial como biofungicidas y han sido
dentro de la industria farmacéutica, cosmética evaluados sobre hongos fitopatógenos,
y de alimentos, entre otras. Los aceites (Urdaneta et al., 2013) también tiene
esenciales por ser líquidos volátiles y propiedades curativas no solo por su efecto
encontrarse distribuidos en las plantas, pueden refrescante si no también su poder medicinal,
ser retirados por destilación con arrastre de para ayudar a secar la brasa que produce la
vapor de agua, operación que se llevó acabo varicela, sus propiedades antimicrobianas
en los laboratorios de operaciones unitarias en hacen que a partir del matarratón se formulen
la sede de la Universidad Francisco de Paula jabones para la protección ante
Santander. microorganismos.
Por su parte, el obtener los extractos de las ¿Qué son los extractos etanolicos?
plantas y estudiar sus partes activas permite
conocer aún más los recursos naturales con Extracto con olor característico, obtenido a
que se cuenta y así darles un mejor partir de materia prima desecada de origen
aprovechamiento; proporcionándoles un vegetal, por maceración o percolación en
mayor valor agregado al comercializarlas contacto con etanol, seguida de la eliminación
como productos puros o extractos. de dicho solvente por un procedimiento físico.
Estos procesos pueden ser sometidos a
La guanábana (Annona muricata) es una determinadas operaciones para eliminar
planta cuyo centro de origen es la parte algunos de sus componentes y así mejorar
tropical de Sudamérica pero ha sido notablemente la calidad del producto deseado.
introducida en muchos países. Crece (Gonzales, 2004).
óptimamente hasta los 1000 m.s.n.m y es
considerada la planta más tropical, pues no ¿Qué son los aceites esenciales?
resiste el frio. Sus usos medicinales son
variados las hojas y brotes internos son usados Los aceites esenciales (esencias o aceites
como anticancerígenos, la corteza como volátiles) son: “productos de composición
antibacteriano y antiulceroso, las hojas como generalmente muy compleja que contienen los
antiespasmódico, sedativo, antimalarico, principios volátiles que se encuentran en los
antidiabético y vasodilatador. Los vegetales más o menos modificados durante su
componentes químicos de la semilla: lactonas, preparación. Para extraer estos principios
annomontacina, annonacina, annomuricatina, volátiles, existen diversos procedimientos.
annonacinona, numerosos principios Únicamente se utilizan dos en la preparación
bioactivos y fitoquimicos encontrados en la de esencias oficiales: destilación con vapor de
guanábana confirman muchos de sus usos en agua de las plantas con esencia o de algunos
de sus órganos, y por expresión.
¿Qué son las acetogeninas?  Evaluar la capacidad de inhibición de los
aceites ante agentes microbianos.
Los compuestos de interés, por su comprobada
actividad biológica presentes en las III. MATERIALES Y METODOS
Annonaceae, son un grupo de metabolitos
 Selección y preparación de la materia
secundarios bioactivos conocidos como
prima
acetogeninas. Presentan diferentes
bioactividades como antitumoral Guanábana.
inmunosupresiva, pesticida, antiprotozoal y
antimicrobiana. Se recolectaron y pesaron 710 g de semillas
adquiridas del mercado de la avenida sexta del
Las acetogeninas de las Annonaceae pueden centro de Cúcuta Norte de Santander, su
inhibir selectivamente el crecimiento de las preparación empieza desde la limpieza,
células cancerígenas y también inhibir el eliminando cualquier tipo de suciedad con
crecimiento de células resistentes. Las solución jabonosa y lavados en agua de la
acetogeninas son potentes inhibidores de la llave, posteriormente se llevó a secado a
NADH ubiquinona oxidoreductasa, que es una temperatura ambiente por 36 horas.
enzima esencial en el Complejo I de la cadena
respiratoria mitocondrial, Obtención de los extractos etanolicos de
Annona muricata.

Después de pesadas las semillas se licuaron y


II. OBJETIVOS se llevaron al extractor solido-liquido del
laboratorio de operaciones unitarias. En el
Objetivo General
extractor se usaron dos disolventes Hexano y
 Extraer a escala piloto los aceites agua, el equipo se pone en funcionamiento y
esenciales de la semilla de Guanábana ( la extracción dura aproximadamente unos 40
Annona muricata) y de hojas de minutos.
Matarraton (Gliricidia sepium) mediante Matarraton.
el extractor solido- líquido para la
evaluación antimicrobiana con especies Se recolectaron las hojas aparentemente sanas
del genero E.coli, Staphylococcus aureus, y plenamente desarrolladas, se utilizaron 400
Pseudomonas sp. y antimicótica con g de hojas, estas se sometieron a lavado en
Fusarium sp y Trichoderma sp. solución jabonosa y agua de la llave, posterior
se llevó a secado a condiciones ambientales
Objetivos Específicos normales por 36 horas.
 Determinar los patrones necesarios para la Obtención de los extractos etanolicos de
extracción de aceites de guanábana y Matarraton.
Matarraton a escala piloto.
 Extraer en base húmeda los aceites Las hojas se secaron a la sombra y se
esenciales de las especies seleccionadas. sometieron al proceso de extracción con 750
 Usar la técnica de microgota con el uso de mL de etanol como solvente.
sensidiscos para determinar los halos de
inhibición en los medios de cultivo
 Flujograma del proceso EQUIPOS Y REACTIVOS

. MUESTRA VEGETAL Se utilizó un extractor sólidos líquido, balanza


analítica, licuadora, plancha con agitación.
Reactivos hexano y etanol.

SELECCIO SECADO TROCEADO


N

EXTRACCION DEL A.E

ANALISIS APLICACIONES

Fig1: diagrama del proceso de la extracción de


extractos etanolicos semilla guanábana y hojas
Matarraton. Fig 3: diagrama de flujo del equipo de
extracción solido liquido marca Ps-SL005\PE
generatoris escala laboratorio

Fig2. Flujograma de la extracción de aceites


de guanábana.
IV.RESULTADOS

PREPARACION DE MATERIA PRIMA

El análisis físico que se muestra en siguiente tabla.

MATERIA HUMEDAD CANTIDAD GRASA y OLOR TEXTURA


PRIMA PROTEICO
SEMILLAS 92% 710 g Olor a hexano Cobertura
dura con un
interior de
masa blanda
HOJAS 50 % 400 g 85 – 90 % Característico Hojas
a matarraton relativamente
secas
Tabla 1 ANALISIS FISISCO DE MATERIA PRIMA SEMILLAS DE GUANABANA Y HOJAS MATARRATON

EXTRACCION DE COMPUESTOS ETANOLICOS

Se trabajó con una relación de volumen de dos litros de agua y 700 ml de hexano para el caso de
la semilla y el etano al 96 % para el caso de hojas de Matarraton.

Tabla 2 VOLUMEN OBTENIDO DE EXTRACTO

MATERIA PRIMA EXTRACTO CON SOLVENTE EXTRACTO PURO


SEMILLAS 600 ml 50 ml
HOJAS DE MATARRATON 420ml 200 ml

PRUEBAS DE SENSIBILIDAD

Tabla 3 resultados de inhibición pruebas de sensibilidad

ESPECIE MICROORGANISMOS EXTRACTO DE MATARRATON EXTRACTO DE GUANABANA


FUSARIUM SP Medianamente activo Inactivo
TRICHODERMA SP Inactivo Inactivo
E.COLO Inactivo Inactivo
PSEUDOMONA Inactivo Inactivo
S.AUREUS Inactivo inactivo

Los datos observados en la siguiente tabla muestran que ninguno de los extractos etanolicos
cumple con la condición de ser un agente antifugico o antimicrobiano se puede atribuir a la
oxidación de estos extractos debido que se conservaron a temperaturas de 15-18°c por debajo de
la recomendad afectando considerablemente el halo de inhibición.

Por otro lado el medio para la pruebas de sensibilidad no fue el adecuado debido que se le dieron
aún más las condiciones al microorganismo para que creciera en un medio relajado
V. DISCUSIONES

Se determinaron las propiedades químicas de los extractos, estos fueron sometidos a pruebas de
laboratorio con el fin de caracterizar sus componentes como las oleorresinas, ya que el proceso de
extracción se obtuvo mediante un disolvente no polar, tal es el caso del hexano y el etanol. Entre
las características físicas se encontraron el aspecto semisólido y olores muy característicos de las
especies vegetales que se emplearon. La gran desventaja que se observó es que los aceites
esenciales tienden a oxidarse y transformar sus propiedades químicas a bajas temperaturas, lo
cual, se le atribuye los resultados obtenidos, pues su efecto inhibitorio sobre los microorganismos
empleados fue nulo.

Se conoce que las acetogeninas son compuestos presentes en el aceite de las semillas de la
guanábana que tiene efecto antimicrobiano, en las pruebas de sensibilidad, en donde se empleó
los sensidiscos con la técnica de microgota no se obtuvieron los resultados esperados, pues hay
factores que son determinantes en el proceso, como lo son los tiempos de oxidación, la
temperatura y la exposición a la luz solar.

En la literatura se discute la eficiencia del extracto etanolico del Matarraton su acción antifugico,
aunque solo se observó medianamente activo para fusarium sp. debido a que el medio ni los
sensidiscos fueron los adecuados para evaluar eficiencia del extracto. Por otro lado no se realizó
ningún tipo de filtración para eliminar impurezas que pudieron quedar en la extracción.

VI. CONCLUSIONES
VII. BIBLIOGRAFIA
VIII. ANEXOS
Microorganismos evaluados con extracto de Annona muricata Observaciones

Medio : Agar nutritivo

No se desarrolló halo
de inhibición.

No hubo presencia de
contaminación por
otro microorganismo.

Los sensidiscos no
fueron los adecuados
para la prueba de
sensibilidad ya que
este no absorbió el
extracto oleaginoso
de manera esperada.

Escherichia coli

Medio : Agar nutritivo

No se desarrolló halo
de inhibición.

No hubo presencia de
contaminación por
otro microorganismo.

Staphylococcus aureus
Medio : Agar nutritivo

No se desarrolló halo
de inhibición.

No hubo presencia de
contaminación por
otro microorganismo.

Los sensidiscos no
fueron los adecuados
para la prueba de
sensibilidad ya que
este no absorbió el
extracto oleaginoso
de manera esperada.

Pseudomonas SP

Microorganismos evaluados con extracto de Gliricidia sepium Observaciones

Medio : Agar nutritivo

No se desarrolló halo
de inhibición.

No hubo presencia de
contaminación por
otro microorganismo.

El extracto quedo que


algunas impurezas
que afectaron el
desarrollo de la
evaluación.

Pseudomonas SP
Medio : Agar nutritivo

No se desarrolló halo
de inhibición.

No hubo presencia de
contaminación por
otro microorganismo.

Escherichia coli

Medio : Agar nutritivo

No se desarrolló halo
de inhibición.

No hubo presencia de
contaminación por
otro microorganismo.

El extracto quedo que


algunas impurezas
que afectaron el
desarrollo de la
evaluación.

Staphylococcus aureus

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