BIOTECNOLOGÍA AGROINDUSTRIAL.

Práctica 2. Inóculo y consumo de sustrato durante

el crecimiento microbiano
Prof. Armstrong Fernández J.

Integrantes (Apellidos y Nombres)

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OBJETIVO GENERAL
Estudiar el consumo del sustrato de acuerdo al medio de cultivo, tipo de inóculo durante el
crecimiento microbiano.

INTRODUCCIÓN
Las levaduras son hongos que forman sobre los medios de cultivo colonias
pastosas, constituidas en su mayor parte por células aisladas que suelen ser
esféricas, ovoideas, elipsoideas o alargadas. Las levaduras pertenecen a dos
clases de hongos: ascomicetos o basidiomicetos, aunque muchas de ellas se
presentan comúnmente en la forma imperfecta. Las levaduras ascomicéticas
forman ascas libres, con 1 a 8 ascosporas, y en las especies hifales las ascas
están desnudas. Las levaduras son organismos aerobios y aunque muchas
especies son fermentadoras, otras no lo son, como los géneros Cryptococcus y
Rhodotorula. Las levaduras suelen fermentar unos pocos glúcidos,
principalmente hexosas y disacáridos. El género Saccharomyces y unos pocos
más, son fermentadores enérgicos de los azúcares bajo condiciones
anaeróbiocas. Su presencia depende de la temperatura, el pH, la humedad y
la disponibilidad de azúcares simples. La identificación sólo puede llevarse a
cabo sobre una cepa en cultivo puro, previamente aislada en una placa de
medio gelificado. Se comienza examinando el aspecto de los cultivos tras
incubación a 28-30°C durante 3 días o más.

El medio agar sabouraud es utilizado para cultivo de mohos y levaduras

patógenas y no patógenas. El bajo pH del medio resulta favorable para el
crecimiento de los hongos y ligeramente inhibitorio para las bacterias. En caso
de requerirse un incremento en la inhibición del crecimiento de bacterias, se
recomienda añadir agentes antimicrobianos como la gentamicina que inhibe
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el crecimiento de los microorganismos gram negativos o el cloramfenicol que

tiene un amplio espectro de acción.
La fermentación para producir está influenciada por factores como la
concentración y tipo de azúcares del sustrato y el microorganismo
fermentador que se emplee. Cuando S. cerevisiae se encuentra cultivada a
altas concentraciones de azúcar (menores a 30 – 40%) se incrementa la
producción de etanol. Adicionalmente, cuando S. cerevisiae se encuentra bajo
condiciones de alta concentración de oxígeno disuelto y la concentración de
azúcares supera 0,16g/L o 9g/L, la levadura convierte su metabolismo
oxidativo a oxido reductivo o fermentativo incrementándose
la producción de etanol. Dichas enzimas son claves en la producción de etanol
y presentan algunas diferencias de acuerdo con el microorganismo.
El microorganismo más utilizado para la obtención de etanol es la levadura
Saccharomyces cerevisiae, que convierte las hexosas en Etanol en condiciones
anaeróbicas, generando 2 moles del compuesto portador de energía en los
seres vivos, el adenosín trifosfato (ATP), por cada mol de hexosa consumida
además de 2 moles de etanol. Este microorganismo tiene también la capacidad
de convertir las hexosas en CO aeróbicamente, por lo que en dependencia de
las concentraciones de oxígeno en el medio de cultivo y de la fuente de
carbono, se puede favorecer uno de los dos procesos. Las levaduras tienen la
ventaja adicional de tolerar concentraciones relativamente altas de etanol
(hasta 150 g·L-1).

PARTE EXPERIMENTAL
2.1 Microorganismo de estudio
Se estudiará la actividad de levaduras nativas y comerciales que tenga
2.2 Medios de cultivo
Se utilizará como medio de cultivo Sabouraud y otro mismo con adición de
glucosa al 2%.
2.3. Preparación y siembra
De muestras de bebidas fermentables artesanales se tomará un volumen y se
sembrará en los medios de cultivo, luego se dejará en incubación por mínimo
tres días a 30°C.
2.4 Evaluación del crecimiento celular
Cada 12 horas se realizará una evaluación cualitativa y cuantitativa de la
presencia de levaduras.
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RESULTADOS
Presentar en una tabla biomasa vs tiempo para cada medio de cultivo..

DISCUSIÓN
-Analice y discuta los resultados emplee términos ingenieriles y/o biotecnológicos,
considerar los siguientes aspectos:
(No se acepta otro tipo de resultados, mínimo cinco publicaciones, de las cuales mínimo dos
sean dos publicaciones indexadas)
A) Respecto a tipos de medios selectivos.
B) Otros medios de cultivos para levaduras.
C) Crecimiento de levaduras nativos.
D) Respecto a sustrato principal y más de un sustrato.
E) Medio cultivo sólido y líquido.

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