AKTIVITAS ANTIBAKTERI EKSTRAK DAUN BELUNTAS (Pluchea indica L.

)
DENGAN PELARUT AQUADES TERHADAP BAKTERI Streptococcus
agalactiae DAN Salmonella PENYEBAB MASTITIS PADA SAPI PERAH

Ahmad Azmi Khoirul Umam1, Puguh Surjowardojo2, dan Tri Eko Susilorini2
1
Student of Animal Husbandry Faculty, Brawijaya University, Malang
2
Lecturer of Animal Husbandry Faculty, Brawijaya University, Malang
ahmadazmee11@gmail.com

ABSTRAK

Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui kemampuan antibakteri ekstrak daun
beluntas (Pluchea indica L.) terhadap pertumbuhan Bakteri Streptococcus agalactiae
dan Salmonella penyebab mastitis pada sapi perah. Materi yang di gunakan meliputi
bakteri Streptococcus agalactiae dan Salmonella dari hasil isolasi pada susu mastitis
subklinis skor CMT +3 yang berasal dari perternakan sapi perah di daerah Jabung,
ekstrak daun beluntas dan iodips 10% (kontrol). Metode yang digunakan dalam
penelitian ini adalah percobaan menggunakan Rancangan Acak Lengkap Pola Tersarang
(Nested Design) dengan 5 perlakuan dan 4 ulangan. Konsentrasi ekstrak daun beluntas
divariasikan mulai dari 20%, 40%, 60%, 80% dan iodip 10% sebagai kontrol. Hasil
penelitian menunjukan bahwa ekstrak daun beluntas (Pluchea indica L.) berpengaruh
sangat nyata (P<0,01) terhadap Streptococcus agalactiae dan Salmonella. Ekstrak daun
beluntas konsentrasi 80% lebih efektif menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus
agalactiae dan Salmonella dibandingkan dengan kemampuan daya hambat iodips 10%.
Ekstrak daun beluntas menghambat pertumbuhan bakteri Streptococcus agalactiae
lebih baik daripada bakteri gram negatif Salmonella.

Kata Kunci : Ekstrak daun beluntas, Antibakteri, Streptococcus agalactiae, Salmonella

dan mastitis.
ABSTRACT

This research aims to determine the antibacterial activity of beluntas leaf extract and
determine effective concentration of beluntas leaf extract against Streptococcus
agalactiae and Salmonella bacteria. Materials was Streptococcus agalactiae and
Salmonella bacteria which isolated from mastitis milk, beluntas leaves were extracted
using water and Iodips was used as control The method was design by experiment
research using Nested Design with 5 treatments and 4 replications. Concentration of
treatments were P1 (20%), P2 (40%), P3 (60%) and P4 (80%) and positive control (iodips
10%). Collected data were analyzed using the analysis of variance indicated significant
effects, least significant difference test (LSD) was then employed. Result of this
research showed that concentration of beluntas leaf extract height significantly effect
(P<0.01) on growth of Streptococcus agalactiae and Salmonella. Based on research, it
can be concluded that beluntas leaf extract 80% showed the effective concentration. The
concentration of beluntas leaf extract against Streptococcus agalactiae was better than
Salmonella.

Keywords: Antibacterial, Pluchea indica L., Streptococcus agalactiae, Salmonella, Mastitis

1
 PENDAHULUAN
Mastitis adalah suatu peradangan
jaringan interna kelenjar ambing yang
disebabkan oleh infeksi dua golongan
bakteri yaitu bakteri gram positif dan
gram negatif. Peradangan ini
menimbulkan perubahan fisik, kimia,
mikrobiologis dan bertambahnya sel
somatik dalam susu dan dapat disertai
dengan perubahan patologi jaringan
ambing sapi perah. Mastitis merupakan
masalah utama dalam peternakan sapi
perah karena menyebabkan kerugian
yang cukup besar yang berhubungan
dengan penurunan produksi susu
hingga 15%, penurunan kualitas susu,
biaya perawatan dan pengobatan yang
cukup tinggi. Prevalensi mastitis di
daerah pengembangan ternak perah
seperti Jawa Barat, Jawa Tengah dan
Jawa Timur yaitu antara 37 sampai
67% disebabkan oleh mastitis sub klinis
dan antara 5 sampai 30% disebabkan
oleh mastitis klinis.
Kejadian mastitis disebabkan
oleh Bakteri Streptococcus agalactiae
yaitu 14.1%, bakteri Salmonella
(2,17%), Staphylococcus epidermidis
(10,9%), Staphylococcus aureus
(22,8%) E.coli (9,78%),
Corynebacterium (15,2%) (Junaidu,
Salihu, Tambuwal, Magaji dan Jaafaru
2011). Secara klinis terdapat dua
macam mastitis yaitu mastitis klinis dan
mastitis subklinis. Mastitis klinis
merupakan kondisi abnormal ambing
yang dapat dideteksi secara langsung
dan mastitis subklinis merupakan
perubahan yang nyata dan terjadi secara
tidak nampak pada ambing.
Pencegahan mastitis sapi perah
salah satunya dengan antiseptik dalam
teat dipping. Pemberian antiseptik
kimia yang dilakukan pada pencegahan
mastitis ini dapat menyebabkan
resistensi pada mikroba dan juga
menyababkan kontaminasi atau residu
pada susu. Seiring dengan tumbuhnya
kesadaran akan dampak buruk produk-
produk kimiawi, maka tumbuh pula
kesadaran akan pentingnya produk-
produk alami termasuk dalam
kesehatan, karena produk alam ini
diharapkan lebih alami dan tidak
menimbulkan resistensi. Salah satu
tumbuhan yang mengandung antibakteri
alami yaitu tumbuhan beluntas (Pluchea
indica L.).
Daun beluntas memiliki
kandungan kimia antara lain alkaloid,
flavonoid, polifenol, tanin, monoterpen,
sterol dan kuinon. Kandungan
flavonoid di dalam daun beluntas
membuat daun ini memiliki aktivitas
antibakteri terhadap bakteri gram
positif. Kandungan senyawa fenolnya
berguna untuk mengganggu
pertumbuhan bakteri bakteri gram
negatif (Widyawati, Budianta, Kusuma
dan Wijaya. 2014). Sehingga
kandungan antibakteri daun beluntas
sangat efektif digunakan sebagai
antiseeptik alami untuk mencegah
mastitis. Berdasarkan hal tersebut perlu
dilakukan penelitian pengaruh ekstrak
daun beluntas dengan pelarut aquades
terhadap daya hambat pertumbuhan
bakteri Streptococcus agalactiae dan
Salmonella penyebab mastitis pada sapi
perah.
MATERI DAN METODE
Alat dan Bahan
Peralatan yang digunakan adalah
timbangan analitik, pipet mikro 1 ml,
magnetic stirrer, erlenmeyer 1000 mL,
gelas ukur 1 L, rotary evaporator,
corong buchner, vacum pump, shaker
incubator, grinder, oven, cawan petri,
gelas ukur 500 mL, tabung reaksi ,
lampu spirtus/bunsen, erlenmeyer 500
mL, autoklaf, jangka sorong, inkubator,
stik L glass, cawan paddle, labu
erlenmeyer 250 mL dan alat lubang
2
sumuran Cork borer. Bahan yang
digunakan adalah Serbuk daun beluntas,
media nutrient agar (NA), aquades pH
7, alkohol 70%, Bakteri Streptococcus
agalactiae, Iodips 10%, Bakteri
Salmonella, ekstrak daun beluntas,
Mannitol Rhogasa Sharpe Agar
(MRSA), Salmonella Shigella Agar
(SSA) dan Reagen CMT.
Materi yang digunakan yaitu :
1. Bakteri Streptococcus agalactiae
dan Salmonella yang diisolasi dari
susu sapi perah yang terjangkit
mastitis subklinis skor CMT +3.
2. Ekstrak daun beluntas (Pluchea
indica L.) dengan pelarut aquades.
Daun beluntas yang digunakan
yaitu pada ruas daun 1-3.
3. Larutan iodips 10% yang
digunakan sebagai kontrol positif.
Metode penelitian yang
digunakan adalah percobaan
menggunakan Rancangan Acak
Lengkap pola Tersarang (Nested
Design) dengan 5 perlakuan dan 4 kali
ulangan. Perlakuan yang diberikan
adalah:
P0 = 1 mL iodips + aquades sebanyak
10 mL
P1 = 2 g ekstrak daun beluntas +
aquades sebanyak 10 mL
P2 = 4 g ekstrak daun beluntas +
aquades sebanyak 10 mL
P3 = 6 g ekstrak daun beluntas +
aquades sebanyak 10 mL
P4 = 8 g ekstrak daun beluntas +
aquades sebanyak 10 mL
Data hasil penelitian dianalisis
dengan menggunakan Analysis of
Variance (ANOVA) dengan
menggunakan Rancangan Acak
Lengkap Pola Tersarang (Nested
Design). Jika diperoleh perbedaan
diantara perlakuan, maka dilanjutkan
dengan Uji Beda Nyata Terkecil (BNT).
Proses Ekstraksi Daun Beluntas
Ekstraksi daun beluntas
dilakukan dengan metode maserasi
dengan menggunakan pelarut aquades.
Proses ekstraksi menurut Manu (2013)
sebagai berikut :
1. Ditimbang serbuk daun beluntas
sebanyak 150 gram
2. Dimasukan serbuk daun beluntas
dalam erlenmeyer ukuran 1 liter
3. Dilakukan meserasi dengan
menambahkan aquades sebanyak
350 mL atau sampai terendam
seluruhnya, kemudian
dihomogenkan dengan alat shaker
inkubator selama 24 jam.
4. Disaring larutan daun beluntas
menggunakan vaccum pump,
sampai residu tidak menetes dan
diperoleh filtrat.
5. Diuapkan filtrat menggunakan
Rotary evaporator dengan suhu
45o-50o C sampai pelarut menguap
seluruhnya, sehingga diperoleh
ekstrak daun beluntas.
6. Diencerkan ekstrak pekat menjadi
beberapa konsentrasi sesuai
perlakuan.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Ekstraksi Daun Beluntas
Penelitian ini menggunakan
sampel daun beluntas (Pluchea indica
L.) yang mempunyai ruas 1-3 atau daun
muda. Menurut Widyawati (2010)
menjelaskan daun beluntas yang lebih
muda mempunyai kandungan senyawa
antibakteri paling tinggi. Pemilihan
teknik ekstraksi dengan metode
maserasi dilakukan karena maserasi
merupakan metode yang paling
sederhana dan merupakan langkah awal
yang umumnya dilakukan pada
penelitian bahan alam. Penggunaan
pelarut aquades karena pelarut aquades
merupakan senyawa yang paling polar
dibandingkan pelarut lainya.
3
Uji Antibakteri Ekstrak Daun Keterangan: Notasi yang berbeda pada
Beluntas Terhadap Bakteri kolom di atas menunjukkan hasil yang
Streptococcus agalactiae dan berbeda nyata (α 1%, 4).
Salmonella Berikut merupakan
perbandingan daya hambat bakteri
Pengukuran daya hambat Streptococcus agalactiae dan
antibakteri ekstrak daun beluntas Salmonella disajikan pada grafik

Diameter Zona Hambat (mm)

terhadap bakteri Streptococcus dibawah ini
agalactiae dan Salmonella dilakukan 7
dengan cara mengukur diameter zona 6
5
bening (clear zone) yang terbentuk 4
disekitar daerah sumuran. Hasil zona 3
2
bening yang ada di sekitar lubang 1
sumuran merupakan adanya aktivitas 0
penghambat bakteri oleh senyawa aktif P0+ P1 P2 P3 P4
yang terdapat dalam daun beluntas. (iodip (20%) (40%) (60%) (80%)
Darsono dan Artemisia (2003) 10%)

mengungkapkan bahwa zona hambat Perlakuan

yang terbentuk di sekitar lubang
sumuran menunjukkan terdapat Ekstrak daun beluntas (EDB)
aktivitas senyawa antibakteri. pada konsentrasi 20% telah
Hasil dari analisis ragam pada memberikan efek penghambatan
penelitian ini menunjukan bahwa terhadap Streptococcus agalactiae dan
penggunaan ekstrak daun beluntas Salmonella dan cenderung meningkat
dengan pelarut aquades berpengaruh sebanding peningkatan konsentrasi
sangat nyata (P<0,01) terhadap daya hingga taraf EDB 80%. Diameter zona
hambat bakteri Streptococcus hambat tertinggi terhadap Streptococcus
agalactiae dan Salmonella. Berikut agalactiae didapatkan pada taraf EDB
merupakan hasil pengukuran rata-rata 80%, diikuti taraf EDB 60%, 40% dan
diameter zona hambat ekstrak daun 20% yaitu 6,85; 6,37; 4,13 dan 2,50
beluntas dengan pelarut aquades mm. Sedangakan Diameter zona hambat
terhadap daya hambat Streptococcus tertinggi terhadap Salmonella
agalactiae dan Salmonella dapat dilihat didapatkan pada taraf EDB 80%, diikuti
pada Tabel 1. sebagai berikut: taraf EDB 60%, 40% dan 20% yaitu
1,70; 1,26; 0,98 dan 0,74 mm. Pada
Tabel 1. Rata-Rata Diameter Zona hasil penelitian ini menunjukan bahwa
Hambat Bakteri Streptococcus ekstrak daun beluntas dengan pelarut
agalactiae dan Salmonella aquades konsentrasi 40% merupakan
Perla Rata-Rata Diameter Zona konsentrasi yang setara dengan
kuan Hambat (mm) kemampuan iodips 10% sebagai kontrol
Streptococcus Salmonella pembanding.
agalactiae Selain penentuan konsentrasi
P0 3,65 ± 0,42 b 1,60 ± 0,67b yang setara dengan kemampuan iodip
P1 2,50 ± 0,43 a 0,74 ± 0,04a 10%, dilakukan pula perbandingan zona
b
P2 4,13 ± 0,49 0,98 ± 0,08ab hambat Streptococcus agalactiae dan
c
P3 6,37 ± 0,35 1,26 ± 0,05ab Salmonella. Berikut merupakan nilai
c
P4 6,85 ± 0,54 1,70 ± 0,04b rata-rata daya hambat masing-masing
bakteri:

4
Tabel 2. Perbandingan rata-rata
Diameter Zona Hambat
Terhadap Bakteri
Streptococcus agalactiae dan
Salmonella
Bakteri Rata-Rata
Diameter Zona
Hambat (mm)
Salmonella
1,25a
Streptococus agalatiae 4,70b
Keterangan: Notasi yang berbeda pada
kolom di atas menunjukkan hasil yang
berbeda nyata (α 1%, 4).
Dari data yang telah diperoleh
dapat dikatakan bahwa ekstrak daun
beluntas mampu menghambat
pertumbuhan bakteri gram positif lebih
baik daripada bakteri gram negatif
dengan rata-rata daya hambat sebesar
4,70 mm sedangkan bakteri Salmonella
hanya memiliki rata-rata daya hambat
sebesar 1,25 mm. Hal ini terjadi karena
perbedaan sensitifitas pada bakteri dan
adanya perbedaan susunan pada dinding
selnya. Dinding sel bakteri gram positif
berlapis tunggal dengan kandungan
lipid 1-4%, sedangkan pada bakteri
gram negatif memiliki 3 lapis pada
dinding selnya (lipoprotein, membran
luar fosfolipid dan lipopolisakarida) dan
kandungan lipid berkisar 11-22%.
Membran luar fosfolipid tersebut
menyebabkan komponen kimia yang
bersifat antibakteri sulit menembus
dinding sel bakteri gram negatif,
sehingga dinding sel bakteri
Streptococcus agalactiae lebih mudah
ditembus daripada dinding sel bakteri
Salmonella (Sutrisna, Ekowati dan
Rahmawati, 2013).
Kemampuan Zat Antibakteri Daun
Beluntas
Adanya senyawa-senyawa aktif
yang terkandung dalam daun beluntas
berupa tanin, alkaloid dan flavonoid.
Senyawa aktif tersebut berperan utama
dalam menghambat pertumbuhan
bakteri Streptococcus agalactiae dan
Salmonella. Menurut Rafael, Miranda,
Bellei, Brito dan Teixeira (2004)
flavonoid mampu menghambat fungsi
membran sitoplasma, menghambat
sintesis asam nukleat dan menghambat
aktifitas antibakteri.
Senyawa tanin dapat
mengganggu permeabilitas sel karena
kemampuannya dapat mengkerutkan
dinding sel atau membran sel. Pada
dinding sel yang tidak selektif
permeabel, penetrasi senyawa-senyawa
tersebut mudah menembus dinding sel
yang akan menimbulkan terganggunya
integritas dinding sel bakteri
(Pambayun, 2007).
Alkaloid termasuk dalam
kelompok antibakteri yang dapat
mengganggu permeabilitas membran sel
mikroba, mengakibatkan kerusakan
membran sel dan menyebabkan
keluarnya berbagai komponen penting
dari dalam sel mikroba yaitu protein,
asam nukleat dan nukleotida (Ajizah,
2004).
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian ini,
maka dapat diambil kesimpulan sebagai
berikut:
1. Ekstrak daun beluntas (Pluchea
indica L.) dengan pelarut aquades
memiliki aktivitas antibakteri
terhadap bakteri Streptococcus
agalactiae dan Salmonella.
2. Ekstrak daun beluntas menghambat
pertumbuhan bakteri Streptococcus
agalactiae lebih baik daripada
bakteri gram negatif Salmonella.
3. Ekstrak daun beluntas konsentrasi
80% lebih efektif dibandingkan
dengan kemampuan daya hambat
iodips 10%.
5
 DAFTAR PUSTAKA Isolates Recovered from Milk of
Dairy Cows in Brazil. Journal of
Ajizah, A. 2004. Sensitivitas Clinical Microbiology. 42(9) :
Salmonella typhirium Terhadap 4214–4222.
Ekstrak Daun Psidium guava L.
Bioscientiae, Vol 1(1) : 31-38. Sutrisna, R., N. Ekowati dan D.
Rahmawati.2013. Uji Daya
Darsono, F.L dan S.D. Artemisia. 2003. Hambat Isolat Bakteri Asam
Aktivitas Antimikroba Ekstrak Laktat Usus Itik (Anas
Daun Jambu Biji Dari Beberapa Domestica) Pada Bakteri Gram
Kultivar Terhadap Positif Dan Pola Pertumbuhan
Staphylococcus aureus ATCC Isolat Bakteri Usus Itik. Jurnal
25923 Dengan "Hole-Plate Penelitian Pertanian Terapan.13
Diffusion Method". Jurnal (1): 52-59.
Penelitian Hayati 9(2): 49-51.
Widyawati,P.S, Wijaya, C.H,
Junaidu, A.U, Salihu, M.D. Tambuwal, Harjosworo dan Sajuthi. 2010.
F.M. Magaji and Jaafaru. 2011. Pengaruh Ekstraksi Dan
Prevalence of Mastitis in Fraksinasi Terhadap
Lactating Cows in some selected Kemampuan Menangkap
Commercial Dairy Farms in Radikal Bebas DPPH (1,1-
Sokoto Metropolis. Advances in Difenil-2- Pikrilhidrazil) Ekstrak
Applied Science Research, 2011, dan Fraksi Daun Beluntas
2(2): 290-294. (Pluchea indica Less). Seminar
Rekayasa Kimia dan Proses
Manu, R. 2013. Aktivitas Antibakteri Fakultas Teknik Universitas
Ekstrak Etanol Daun Beluntas Diponegoro Semarang.
(Pluchea indica.) Terhadap Widyawati, ,P.S, Budianta T.D,
Staphylococcus aureus, Bacillus Kusuma F.A dan Wijaya. 2014.
subtilis, Dan Pseudomonas Difference of Solvent Polarity
aeruginosa. Jurnal Ilmiah To Phytochemical Content and
Mahasiswa Universitas Antioxidant Activity of Pluchea
Surabaya. 2(1): 1-10. indicia Less Leaves Extracts.
International Journal of
Pambayun, R., M. Gardjito, Pharmacognosy and
S.Sudarmadji dan K. R. Phytochemical Research (IJJPR).
Kuswanto. 2007. Kandungan Vol 6(4): 850-855.
Fenol dan Sifat Antibakteri dari
Berbagai Jenis Ekstrak Produk
Gambir (Uncaria gambir Roxb).
Jurnal Farmasi Indonesia 18(3):
1-6.

Rafael, S.D., Miranda, B.C.Bellei,

M.A.Brito, and
L.M.Teixeira.2004. Phenotypic
and Molecular Characteristics of
Streptococcus agalactiae