PREPARACIÓN DE SOLUCIONES AMORTIGUADORAS Y CAPACIDAD

AMORTIGUADORA DE FLUIDOS BIOLÓGICOS

Buleje-Hinostroza R., Guerrero-Medina C., Montoya Obregón A., Ugarte-
Chinchero J.
I. INTRODUCCIÓN:
Casi todos los procesos biológicos son dependientes de pH; un pequeño cambio en el pH
produce un gran cambio en la velocidad del proceso. Esto no es solo es cierto para las
muchas reacciones en las que el H+ es un participante directo, sino también para aquellas
en las que aparentemente no juegan ningún papel. Las enzimas que catalizan las
reacciones celulares, y muchas de las moléculas sobre las que actúan, contienen grupo
ionizables con valores de pKa característicos. Los grupos amino carboxílicos protonados
de los aminoácidos y el grupo fosfato de los nucleótidos, por ejemplo, funcionan como
ácidos débiles; su estado iónico depende del pH de medio que los rodea.
(Cuando un grupo ionizable se captura en el medio de una proteína, lejos del solvente
acuoso, su pKa, o el pKa aparente, puede ser significativamente diferente de su pH en el
agua.) Como se observó anteriormente, las interacciones iónicas están entre las fuerzas
que estabilizan la molécula de la proteína y permiten que una enzima reconozca y se
conecte a su sustrato. (Lehninger, 2001)
Los tapones: Son sistemas acuosos que tienden a resistir los cambios de pH cuando se
agregan pequeñas cantidades de ácido (H+) o base (OH-). Un sistema tampón consiste en
un ácido débil (el donante de protones) y su base conjugada (el aceptor de protones). Como
un ejemplo, una mezcla de concentraciones iguales de ácido acético y iones acetato,
encontradas en el punto central de la titulación en la Figura N°1, es un sistema tampón.
Observe que la curva de titulación del ácido acético tiene una zona relativamente plana que
se extiende por cerca de una unidad de pH a ambos lados de su pH del punto central de
4,76. En esta zona, una cantidad dada de H1 o OH- agregada al sistema tiene mucho
menos efecto en el pH que la misma cantidad agregada fuera de la zona. (Lehninger, 2001)
FIGURA N°1. La curva de titulación del ácido acético. Después de la adición de cada
incremento de NaOH a la solución de ácido acético, el pH de la mezcla es medido. Este valor
se coloca en un gráfico en función de la cantidad de NaOH agregada, expresado como la
fracción de la concentración total requerida para convertir todo el ácido acético (CH3COOH)
en su forma desprotonada, acetato (CH3COO-). Los puntos entonces obtenidos generan la
curva de titulación. Nosotros los rectángulos se muestran las formas iónicas predominantes
en los puntos asignado. En el punto central de la titulación, las concentraciones de donantes
de protones y aceptores de protones son iguales, y el pH es numéricamente igual al pKa. La
zona sombreada es la región útil del poder tamponante, generalmente entre el 10 y el 90% de
la titulación de un ácido débil. (Lehninger, 2001)

TIPO DE BUFFER O TAMPONES:

 EL BUFFER BICARBONATO
 EL BUFFER FOSFATO
 EL BUFFER DE PROTEINAS
II. OBJETIVOS:

 Preparar soluciones buffer de diferentes pH.

 Demostrar la capacidad amortiguadora del buffer preparado.
 Determinar la capacidad buffer de una muestra de orina.

III. EQUIPOS, MATERIALES Y REACTIVOS:

 Potenciómetro
 Beakers
 Fiolas
 Pipetas de 1 a 5mL
 Picetas de agua destilada
 Solución de NaOH 0,05M
 Solución de HCl 0.005M
 Bicarbonato de sodio
 Solución de carbonato de sodio 0.5M
 Fosfato dibásico de sodio.

IV. RESULTADOS:
ENSAYO N°1: PREPARACIÓN DE LA SOLUCIÓN BUFFER BICARBONATO
Se prepararon 50mL de buffer bicarbonato 0.1M a un pH de 9. Se halló la
proporción entre el acido y la sal mediante la ecuación de Henderson-
Hasselbach y comparar el pH práctico con el teórico.

 𝑝𝐾𝑎 𝐵𝑖𝑐𝑎𝑟𝑏𝑜𝑛𝑎𝑡𝑜 = 10,3

 𝑝𝐻 = 9
(𝑆𝑎𝑙)
 𝑝𝐻 = 𝑝𝐾𝑎 + 𝐿𝑜𝑔 (Á𝑐𝑖𝑑𝑜)
(𝑆𝑎𝑙)
 9 = 10,3 + 𝐿𝑜𝑔
(Á𝑐𝑖𝑑𝑜)

𝑆𝑎𝑙
 (10)−1,3 = Á𝑐𝑖𝑑𝑜
 (𝑆𝑎𝑙)
 0,050 = (𝐴𝑐𝑖𝑑𝑜)

 𝑆𝑎𝑙 = 0,05. X
 Á𝑐𝑖𝑑𝑜 = 1. 𝑋
 Como la concentración de buffer bicarbonato es 0,1M
 0,05. X + 1. 𝑋 = 0.1
 𝑋 = 0.095
 𝑆𝑎𝑙 = 0,05x0,095 = 0.005M
 Á𝑐𝑖𝑑𝑜 = 0,095𝑀


H2CO3 HCO3- + H+

Ácido Base
conjugado conjugada


HCO3- CO3-2 + H+

NaHCO3 Na2CO3
𝑚𝑜𝑙 𝑔
𝑃𝑒𝑠𝑜 = 0,095 𝑥0,05𝐿𝑥84
𝐿 𝑚𝑜𝑙 C1Xv1=C2V2
𝑚𝑜𝑙 𝑔
𝑃𝑒𝑠𝑜 = 0,095 𝑥0,05𝐿𝑥84 0,5𝑀𝑥𝑉 = 0,005𝑥50𝑚𝐿
𝐿 𝑚𝑜𝑙
V1=0,5mL
𝑃𝑒𝑠𝑜 = 0,399𝑔
𝑃𝑒𝑠𝑜 = 0,4𝑔

 pH Teórico= 9
 pH Práctico= 8,8
ENSAYO N°2 COMPROBACIÓN DE LA CAPACIDAD BUFFER

Se dispuso de 2matraces y se agrego 10mL de la solución amortiguadora preparada al

primero, al segundo matraz se añadió 10mL de agua destilada, se midió el pH inicial y se
agrego a cada uno 1mL de NaOH 0,05M y se midió el pH. Se repitió el procedimiento 3
veces más hasta que se añadió un total de 3mL de la solución de NaOH 0,05M. Se
completo la siguiente tabla:

pH Inicial pH luego de añadir V gotas de NaOH 0,05M

1mL 2mL 3mL

Solución buffer 8,8 8,9 9,3 9,5

bicarbonato
Agua 6,8 7,2 7,5 7,8

ENSAYO N°3 CAPACIDAD AMORTIGUADORA DE FLUIDOS BIOLÓGICOS

Se colocó 20mL de agua destilada en un vaso descartable y se agregó 0,1mL de HCl

0,005M cada vez hasta un total de 5 repeticiones. Se midió el pH en cada repetición.

Se midió 2mL de orina y se colocó en un vaso descartable, luego se añadió 18mL de

agua destilada. Se agregó 0,1mL de HCl 0,005M cada vez hasta un total de 5
repeticiones. Se midió el pH en cada repetición.

Orina Agua
pH Inicial 6,8 6,7
Añadir 0,1mL de HCl 0,005M cada vez hasta 6,7 5,8
un total de 5 repeticiones 6,1 5,5
5,7 5
4,8 5

4,5 4,3
V. DISCUSION:
 DISCUSIÓN ENSAYO N°1
En los resultados obtenidos en relación con el pH teórico y práctico obtenemos
valores muy cercanos entre ellos, lo cual denota la eficiencia del sistema buffer
bicarbonato 0,1M debido a la relación entre HCO3- / H2CO3 es muy alta lo cual
supone una alta capacidad para amortiguar los ácidos.
Los fluidos parenterales mantienen los niveles químicos esenciales en el
organismo. El agua provee la hidratación. El sodio, potasio y calcio mantienen los
electrólitos catiónicos necesarios para un funcionamiento normal de nervios y
músculos. Cloruros y bicarbonato actúan como buffer para corregir el desbalance
ácido–base. Azucares en concentraciones del 10% o menos proveen de
carbohidratos y las calorías para los procesos energéticos. (Quintanilla, 2002)
 DISCUSIÓN ENSAYO N°2
Una solución amortiguadora puede soportar cambios de pH debido a que entre
los componentes del amortiguador se establece en equilibrio. Por lo tanto, los
amortiguadores obedecen el principio de LeChâtelier que establece si una
reacción en equilibrio se aplica una distención (en este caso la adición de NaOH)
el equilibrio se desplazará en la dirección que contrarreste la distorsión.
Como el pH no muestra diferencias significativas, existe una capacidad buffer
suficiente en el sistema como para el control de las distintas variaciones. Pero,
debido a que la concentración efectiva de bicarbonato en el sistema es baja, éste
mantendrá sus condiciones naturales siempre y cuando no se realicen
agresiones (agregado de ácidos, de efluentes) en concentraciones suficientes
como para destruir la capacidad buffer del sistema. (Garbagnati, 2005)
  DISCUSIÓN ENSAYO N°3
La medición de pH se efectúa mediante indicadores básicos débiles o ácidos de
los cuales cambian de color cuando cambia el pH de las soluciones en que se
encuentren. Un método practico para medir el pH es cuando tienen reactivos que
están impregnadas de sustancias indicadoras que al reaccionar con la sustancia
a la que se quiere medir cambia de color, en esta muestra biológica los datos
fueron disminuyendo por la acidificación producto de la distorsión agregada(HCl).

Este estudio reporta las variaciones inducidas por fármacos en niños y

adolescentes cardiópatas y sanos, en la tasa de flujo salival, pH y capacidad
amortiguadora, los cuales se han demostrado como factores de riesgo en la
caries dental y enfermedad periodontal. En relación con los resultados de TSF,
éstos coinciden con estudios previos los cuales señalan que en pacientes
sistémicos la disminución de los fluidos corporales, inducida por la administración
de fármacos, se manifiesta en la cavidad bucal con la disminución de la tasa de
flujo salival. (Morales, 2008)

VI. CONCLUCION:
 ENSAYO N°1
Se preparo una solución buffer con las mediciones con las correctas mediciones
obtenidas con pH aproximado al teórico.
 ENSAYO N°2
Se demostró la capacidad amortiguadora del buffer preparado, incluyendo la
adición de NaOH donde va aumentando en valores similares.
 ENSAYO N°3
Se determinó la capacidad de buffer de nuestra muestra biológica(orina) que al
añadir 0,1mL HCl va disminuyendo en valores similares.
VII. REFERENCIAS BIBLIOGRÁFICA:
 Nelson, D. L., Lehninger, A. L., Cox, M. M., & Cuchillo Foix, C. M. Lehninger
principios de bioquímica (3a ed.). Barcelona: Omega;2009.
 Delgado Quintanilla, P. E. S., & Romero Hernández, X. Y. Elaboración de un
Manual de métodos alternos para la preparación de soluciones parenterales de
gran volumen de uso hospitalario (Doctoral dissertation, Universidad de El
Salvador); 2002
 Garbagnati, M. A., González, P. S., Antón, R. I., & Mallea, M. A.Características
físico-químicas, capacidad buffer y establecimiento de la línea base ambiental del
Río Grande, San Luis, Argentina. Ecología austral;2005. 15(1), 59-71.
 Rojas Morales, T., Romero, M., Navas, R., Álvarez, C. J., & Morón Medina, A. Flujo
salival, pH y capacidad amortiguadora en niños y adolescentes cardiópatas: factor
de riesgo para caries dental y enfermedad periodontal. Estudio preliminar. Ciencia
Odontológica;2008. 5(1).