ANTICUERPOS

Efectores de la respuesta inmune

humoral

INMUNOLOGIA (3077)
Facultad de Ciencias Exactas, Físico-Químicas y Naturales
Dpto. de Microbiología e Inmunología
Inmunología

2018
Universidad Nacional de Río Cuarto

Dra. NOEMI RODRIGUEZ

 Objetivos de aprendizaje

 Describir la estructura de las inmunoglobulinas

 Analizar sus funciones biológicas
 Estudiar los genes involucrados en la síntesis y los mecanismos
de recombinación y conmutación en la diferenciación de los
isotipos
 RESPUESTA EFECTORA HUMORAL

Anticuerpos (Ac): moléculas de Inmunoglobulinas (Ig)

secretadas por células plasmáticas

 Dos cadenas polipeptídicas globulares pesadas (H)

Inmunoglobulina
 Dos cadenas polipeptídicas livianas (L)
glucoproteína unidas entre sí por puentes disulfuro
 Generalidades

 Proteínas de estructura globular sintetizadas por células del sistema

inmune (células plasmáticas derivadas de LB).
 Presentes en sangre (plasma) y otros fluidos biológicos (saliva, lágrimas,
secreción mucosa intestinal, líquido sinovial, líquido intersticial etc.)
 En el plasma se detectan dentro de la fracción de las γ globulinas.
 Capaces de reconocer Ag de manera muy específica y formar complejos
estables (inmunocomplejos).
 Son los efectores de la respuesta inmune humoral.
 Los Ac tienen una vida media relativamente larga (varias semanas).
 Constituyen una defensa muy eficaz contra agentes patógenos.

* Especificidad
Características principales * Afinidad
* Capacidad de dirigir los mecanismos
biológicos efectores de la RI humoral
 Estructura de una inmunoglobulina
Variabilidad de la región V: es la razón
de la gran diversidad de especificidades
de unión al Ag
Glucoproteínas formadas por
cuatro cadenas polipeptídicas
2 cadenas livianas L (Light: Liviana)
idénticas (PM: 23- 26 kDa)
2 cadenas pesadas H (Heavy: pesado)
idénticas (PM: 55-77 kDa)
Cada cadena presenta una zona
constante (C) y una variable (V).
Región bisagra: formada por un a.a.
prolina, localizada en la cadena H, entre
CH1-CH2; permite la movilidad a las Ig
(también susceptibilidad a proteasas)
Las cadenas H se unen entre si por puentes
disulfuro y a L por otro puente disulfuro.
La Ig completa es bivalente con dos
sitios idénticos de unión al antígeno
 Esquema de la estructura de una inmunoglobulina

Zona hipervariable: CDR1, CDR2 y CDR3

(ubicada en zona V. Región determinante
de Complementariedad-10 a 15 a.a.).
Conforman el PARATOPE (Rc idiotípico),
responsable de la unión con el epitope (Ag)

Dominios: estructuras proteicas conservadas

Región de unión al C´ 100-110 a.a., muy compacto y estable.
Cadenas L: 2 dominios: 1 variable (VL) y
Región de unión al Rc
Fc otro constante (CL).
Dominio de Ig Cadenas H: región variable (VH) y tres (IgG
e IgA) o cuatro (IgM e IgE) constantes (CH1,
CH2, CH3 y CH4).

H de C: región C de cadenas H (CH2 y

región bisagra). Su función no está clara
(parece ligado al catabolismo y alguna de
sus funciones, como la capacidad para unir
Rc celulares y activar C´)
 Esquema de la fragmentación de Ig por acción de enzimas
Digestión por proteasas (pepsina o papaína): escinde a la Ig en fragmentos:
 Fragmento Fab (antigen binding Fragment): 1 dominio C y 1 V de una cadena H y
de una cadena L. Reside la especificidad de la Ig (capacidad para reaccionar con
el Ag).
 Fragmento Fc (Crystalizable Fragment): dominios C de cadenas H, determina
funciones biológicas o efectoras en las Ig (fijación del C´, Rc celulares, etc.)
Papaína rompe a las Ig en 2 fragmentos F(ab) y uno F(c)
 Pepsina rompe a las Ig en 1 fragmento F(ab)´2 y 1 F(c).

Fab 2 Fab

1 Fc

Fc pepsina
1 F(ab)2´

1 Fc
 Estructura de las Inmunoglobulinas
Estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria.
Cuaternaria: permite sus dos funciones: unión al Ag y actividad biológica efectora.

V Cadenas L: región V (VL amino-terminal) y región C (CL

carboxi-terminal).
Dos tipos posibles de cadenas L:  (cappa) y  (lambda),
según variantes en la región C. En una misma Ig existen dos
cadenas  o dos cadenas  , pero nunca una de cada tipo.
C

Cadenas H: cada una posee una región variable (VH amino-

terminal 100-110 a.a.). El resto de la cadena muestra cinco
C
patrones de secuencia que configuran cinco tipos de cadenas H
según la porción C (CH). Cada tipo de cadena H recibe como
denominación una letra griega y determinan la clase o isotipo
C
de Igs.
Cada isotipo de cadena H puede combinarse por separado con
cada tipo ( o ) de cadenas L.
C
 Isotipos y determinantes isotípicos

Determinantes isotípicos: determinantes antigénicos que caracterizan las clases y

subclases de las cadenas H y tipos y subtipos de las cadenas L.
Isotipo (clase): conjunto de variantes de Igs comunes a todos los miembros de una
especie. Son variaciones en regiones C tanto de cadenas H como de cadenas L.
En determinados casos se pueden diferenciar subclases.
5 clases o isotipos según las porciones C de cadenas H: IgG, IgA, IgM, IgD e IgE
Cada isotipo (y subclase) es determinado por un gen de CH: Cμ, Cδ, Cα, Cε y Cγ.
Todos los individuos de una especie tienen el mismo juego de genes de regiones C.
Cada isotipo CH tiene dos versiones: κ o λ de CL

Cκ Cκ

Cγ Cμ
 Alotipos y determinantes alotípicos

Determinantes alotípicos: determinantes antigénicos específicos de las formas

alélicas de los genes de Ig.
Alotipos: pequeñas diferencias en la secuencia de a.a. en la región CL y CH
producidas por distintos individuos de una especie (se heredan): son variaciones
individuales dentro de una especie (individuos que presentan una variante alélica
distinta a la de otros individuos; presentes solo en algunos individuos sanos de la
especie)
 Idiotipos y determinantes idiotípicos

Determinantes idiotípicos: determinantes antigénicos presentes en moléculas

individuales de Ac o sobre moléculas de especificidad idéntica.
Idiotipo: conjunto de variantes antigénicas características de cada Ac de un mismo
individuo, debidas a las secuencias de aminoácidos de las porciones VH y VL.
El idiotipo puede coincidir o no con un paratope .
Ac producidos por un clon de LB y células plasmáticas derivadas de ellos llevan el
mismo idiotipo. Tienen un papel importante en la regulación de la respuesta
inmune.
 REACCIONAR CON LOS Ag: facilita su eliminación (inactivar al microorganismo
o hacerlo susceptible a la destrucción por otros componentes del sistema inmune).
 Cada Ac es específico: sólo puede unirse a un Ag o nº pequeño de Ag diferentes.

Las Ig reaccionan con el Ag de dos formas:

 Unidas al LB: BCR (receptor para Ag del LB). Les permite reaccionar con el Ag
en su forma nativa.
 Libres en fluidos. Posibilita que las Ig tengan distintas funciones biológicas:
 Activación del complemento
 Aglutinación
 Citotoxicidad celular dependiente de anticuerpos
 Neutralización
 Opsonización
 Protección de mucosas

Fab sitio de unión con el Ag

Fc induce activación del C´ y la unión al RcFc de células efectoras:
monocitos, macrófagos, neutrófilos y NK

Diferentes clases (isotipos) funcionan en distintos compartimentos corporales

(sangre, tejidos y superficies mucosas están protegidas por los Ac)
Funciones efectoras de los Ac.

Los Ac dirigidos contra

microorganismos (y sus
toxinas)
 neutralizan a estos
agentes,
 los opsonizan para la
fagocitosis,
 los sensibilizan para la
ADCC
 activan el Complemento.

Estas diversas funciones

efectoras pueden estar
mediadas por isotipos
diferentes
Neutralización de microorganismos y toxinas

IgG e IgA pueden neutralizar

toxinas e inhibir la infectividad
de los virus

A- los Ac impiden la unión de

los microorganismos a las
células: bloquean su capacidad
de infectar células del huésped.
B- los Ac inhiben la
propagación de
microorganismos: desde una
célula infectada a otra adyacente
sin infectar.
C- los Ac bloquean la unión de
toxinas a las células: inhiben
los efectos patológicos de las
toxinas.
 Opsonización mediada por Ac y fagocitosis del microorganismo

IgG se une a microorganismos y después es reconocida por RcFc de fagocitos:

Las señales de los Rc promueven la fagocitosis de los microorganismos
opsonizados y activan los fagocitos para que los destruyan.

Receptores para opsoninas: RFcγ-I y RFcγ-IIA (macrófagos, neutrófilos,

eosinófilos): fagocitosis.
 Citotoxicidad dependiente de Acs

IgG se une a células infectadas

y las regiones Fc de los Ac
unidos son reconocidas por un
RcFcγ (CD16) de NK. Estas
células se activan y matan a las
células cubiertas de Ac

Mecanismo de eliminación de
helmintos mediado por IgE y
eosinófilos.

RFcγ-IIIA (CD16) (NK: ADCC). RFcε (mastocitos, basófilos, eosinófilos: degranulación)

 CLASES DE INMUNOGLOBULINAS

 IgM, IgG, IgA, IgE e IgD

 Están determinadas por los isotipos de las cadenas CH: μ, α, γ, δ o ε.
 Las cadenas livianas (CL) pueden ser kappa (κ) o lambda (λ).
 Las distintas clases de inmunoglobulinas presentan diversas
funciones biológicas.
Subclases de Ig en los principales mamíferos domésticos
 Estructura molecular: monómero.
 Representa entre 80-85% de las Ig en suero y calostro (la más
abundante en suero).
 La producen células plasmáticas de bazo, ganglios linfáticos y medula ósea.
 Es la más pequeña, PM 180 kDa.
 Son las únicas que atraviesan placenta en primates y roedores (menor en perros
y gatos).
 Son las más características de la RESPUESTA INMUNE SECUNDARIA.
 Subclases: IgG1, IgG2, IgG3, IgG4 (hombre y diversas en otras especies).

 Funciones
 Neutralizan toxinas y micoorganismos.
 Activan vía clásica del C´
 Capacidad para activar procesos inflamatorios mediante unión a receptores
celulares (FcγR)
 Fagocitosis por macrófagos, neutrófilos
 Citotoxicidad celular dependiente de Ac por células NK
 Inmunoglobulina G (IgG)

Sitio de unión Sitio de unión

con el Ag con el Ag

Bivalente
 Inmunoglobulina M (IgM)

 Pentámero: 5 monómeros de Ig unidos por cadena J (péptido).

 Presente en plasma. Segunda en concentración. PM 900 kDa.
 Diez sitios de unión con Ag (multivalente).
 Secretada en RESPUESTA INMUNE PRIMARIA (y Ag T-independientes).
 Potente fijadora del C´ (5 fragmentos Fc que unen al componente C1q).
 Presente como monómero en la membrana de LB (Rc. antigénico de LB: BCR)
 Presente en la mayor parte de los mamíferos.
 No tiene región bisagra.
 El 2-Mercaptoetanol (2-ME) cliva la molécula en 5 monómeros (importancia
en el Inmunodiagnóstico).
Funciones
 Primera Ig de defensa en la respuesta humoral y aunque su grado de
afinidad para reaccionar con el Ag es inferior al de la IgG, su formación
pentamérica le permite unirse de forma múltiple con Ag.
 Activador de la vía clásica del Complemento
 Opsonización
 Efectiva frente a bacterias Gram negativas y puede neutralizar agentes
virales.
Inmunoglobulina M (IgM)
 .

 Dímero: 2 unidades básicas unidas por un componente

secretor (S) que la protege de la acción de enzimas
proteolíticas de las secreciones y una cadena J.
 Peso molecular: 360 kDa.
 De mayor relevancia en las secreciones externas: mucosas, piel, glándula
mamaria.
 Importante en la inmunidad del recién nacido.
 Se sintetiza en RESPUESTA INMUNE SECUNDARIA.

 Subclases
 IgA1 (IgA sérica): monómero sérico.
• Facilita fagocitosis: FcαR se expresa en macrófagos, neutrófilos.
 IgA2 (IgAs- IgA secretora): dímero unido por cadena J. Presente en
saliva, lágrimas, leche materna, secreciones respiratoria, digestiva y
vaginal
• Evita la adhesión de Ag a superficies corporales (impide el ingreso de
microorganismos y macromoléculas al organismo).
• Neutraliza toxinas en la mucosa.
• No fija C´ ni es opsonina.
Inmunoglobulina A (IgA)

Bisagra

Cadena J

Monómeros
 Mecanismo de síntesis de la IgAs

 Se secreta como dímero asociado con una cadena J.

 Secretada por células plasmáticas de la lámina propia (epitelio intestinal,
respiratorio, glándulas lagrimales y salivales y glándula mamaria lactante).
 IgA es transportada a través del epitelio hasta su superficie (lumen intestinal o
bronquial).
 El dímero-cadena J difunde a través de la membrana basal y se une al Rc poli-Ig en
la superficie basolateral de la célula epitelial.
 El complejo Rc poli-Ig-IgA dimérica, se interioriza y es llevado a través del
citoplasma de la célula epitelial dentro de una vesícula de transporte hacia la
superficie apical (transcitosis).
 En la superficie el Rc se rompe enzimáticamente, libera la porción extracelular del
Rc unido a Fc de IgA. Este fragmento Rc, componente secretor, protege la IgA
dimérica de digestiones proteolíticas.
 Algunas moléculas de IgA difunden desde lamina propia a espacios extracelulares
de tejidos que drenan al torrente sanguíneo.
 Función principal: proteger la superficie epitelial de los agentes infecciosos.
 Impide unión de bacterias o toxinas a células epiteliales o absorción de
sustancias externas; 1º línea de defensa contra amplia variedad de patógenos.
Esquema del mecanismo
de síntesis de IgAs

Exclusión
inmune de las
superficies
mucosas

Neutralización
de virus

Neutralización
de endotoxinas
(LPS). G-

Aclaramiento
de Ag que
hayan pasado
la barrera
intestinal

Esquema de los mecanismos de acción de la IgAs

 Monómero: con 4 dominios C en la cadena H (CH1-CH4).
 Su concentración en suero es baja (aumentada en procesos alérgicos).
 No activa el sistema C´.
 En condiciones fisiológicas tiene un papel importante en la inmunidad contra
parásitos: interviene en la respuesta inmune protectora, especialmente hacia
helmintos (protección frente a infecciones parasitarias por activación de
mastocitos o eosinófilos).
 Inmunoglobulina D (Ig D)

 Se presenta en forma de monómero.

 Constituye menos del 1% del total de Ig circulantes.
 No existe en todas las especies, únicamente en primates y
roedores.
 Es básicamente un BCR (constitutiva de la membrana de LB)).
 IgD no se secreta
 Se coexpresa con la IgM de superficie del LB
 No está claro su papel en respuesta inmune humoral.
 Inmunoglobulina Y

 Monomérica, de PM de 180 kDa (algo mayor que IgG mamífera; la cadena

H contiene un dominio C adicional y mayor cantidad de H de C).
 Carece de la región de bisagra que le otorga la flexibilidad a la IgG
mamífera.
 Las características funcionales de la IgY son homólogas a la IgG de los
mamíferos, incluyendo su papel en la respuesta inmune secundaria.
 En el suero de las aves galliniformes (pollos y pavos) IgY tiene la estructura
de una Ig convencional: 2 cadenas pesadas (H) y 2 cadenas livianas (L).
 En el suero de patos y gansos coexisten dos isoformas de IgY: una forma
completa y una forma truncada a la que le falta la región Fc, por lo que esta
isoforma no activa el C´ni promueve la opsonización.
 La IgY se transfiere activamente desde el suero a la yema de huevo mediante
un proceso que involucra un receptor para la porción Fc, por lo tanto luego
de la inmunización es posible encontrar de 100 a 200 mg de IgY por huevo.
 Principales características de la IgY

Esquema de una IgY

La transferencia de la IgY a la yema ocurre por un proceso activo donde

los ovocitos captan mediante receptores específicos la IgY sérica. Este
proceso tarda aproximadamente 5 días en realizarse.
 Síntesis de Inmunoglobulinas

 Las células plasmáticas, derivadas de los Linfocitos B activados luego del

reconocimiento de Ag, tienen capacidad para sintetizar y secretar Ig en
grandes cantidades.
 La síntesis de Ig se lleva a cabo en los ribosomas de estas células, donde
tiene lugar la traducción de mRNA correspondiente a las 4 cadenas
peptídicas.
 Posteriormente se produce el proceso de la glucosilación de dichas
cadenas y la secreción de las mismas.
 Síntesis de cadenas L y H: regulada por genes presentes en cromosomas
distintos.
 Los genes que codifican las cadenas L y H están en cromosomas diferentes

Cadena L:
segmentos Cadena H: un segmento
génicos génico de diversidad D
variables V y de entre V y J.
unión J. Se combinan V, D y J
Se combinan para codificar la región
para codificar V de la cadena H
la región V de
una cadena L

Región V: codificada por 2 (VL) Región C: en el locus de

o 3 (VH) segmentos génicos que cadena H hay genes para los
requieren un reordenamiento diferentes isotipos de Ig.
productivo para que pueda
transcribirse.
 REORDENAMIENTO DE LB maduro tiene genes de L y H ya
SEGMENTOS GÉNICOS DE LAS Ig reagrupados y sólo podrá producir
un determinado tipo de Ac.

Reordenamiento de genes de cadenas L

Participan los segmentos génicos V, J y C (no hay genes D).

Proceso de recombinación de genes: se acopla un segmento V con uno J. El conjunto
V/J se recombina con el segmento correspondiente a la región CL (Cκ o Cλ).
La transcripción genera un RNAm que contiene información secuenciada V, J y C.

Reordenamiento de genes de cadenas H

Participan los segmentos génicos V, D, J, y C.
1- Se produce la recombinación entre un segmento D y uno J.
2- D/J se recombina con un segmento V.
3- El complejo V/D/J se puede recombinar con cada uno de los segmentos que codifican
las regiones C, según el isotipo a formar (Cμ; Cδ; Cγ, etc). El proceso de recombinación
con los genes C tiene lugar a nivel de RNA

LB en reposo (naive) contiene la información de V/D/J más la de los genes

Cμ y Cδ, (originan IgM o IgD). Este mecanismo es el responsable de que en
los LB en reposo se expresen simultáneamente ambas Ig.
Los genes de la región
C de la cadena H se
encuentran juntos en
un cromosoma

Esquema del reordenamiento de

los segmentos génicos de cadenas
pesadas de las Ig
En las distintas fases de la RI humoral pueden
producirse diferentes clases de Ig
 Cambio de clase de las inmunoglobulinas
Cuando LB reconoce Ag, secreta IgM (Respuesta 1ria). Otros LB comienzan a
producir IgG, IgA o IgE, lo que significa que los LB pueden cambiar la clase o
isotipo de las Ig: se generan Ac que mantienen la región V (especificidad
antigénica), pero con segmentos constantes diferentes.
El cambio (conmuntación) de clase de Ig sólo ocurre en una respuesta secundaria.

Conmutación de clase

 Permite la producción de distintas clases de Ac (IgA, IgE, o IgG), definidas por la

región C de la cadena H (sólo cambia la región C de la cadena H) .
 El isotipo generado depende del tipo de citoquinas presentes en el entorno del LB.
 Ocurre en la cadena H por recombinación de conmutación de clase ("class switch
recombination" o CSR): se basa en secuencias de nucleótidos conservadas,
llamadas regiones de conmutación (regiones switch o S), presentes en un punto
anterior a los genes de la región C. El ADN se escinde por ciertas enzimas en dos
regiones S concretas.
 El exón del dominio V se vuelve a la región C elegida (γ, α o ε), lo forma un gen
de Ig que codifica un Ac de un isotipo diferente.
Mecanismos del cambio de isotipo de cadena pesada (switching)

LB producen IgM en Rta. Primaria (sin

estímulo de LTh).
Cuando LB reciben señales del LTh,
realizan un cambio a otro isotipo Ig (ej,
IgE).
Estos estímulos inician la transcripción
en línea germinal a través del locus Iε-
Sε-Cε. Los genes de CH proximales se
eliminan en un círculo de ADN, lo que
lleva a la recombinación de VDJ con el
gen Cε.
Las regiones de cambio se indican por
círculos etiquetados Sμ o Sγ.
Representan el lugar de inicio para la
transcripción de la línea germinal.
 Esquema del cambio de isotipo de cadena pesada de Ig

Los LB activados por las señales del LT cooperador presentan un cambio a un

isotipo diferente, que median distintas funciones efectoras. Se muestran
ejemplos seleccionados de isotipos cambiados.
 Fases finales de la síntesis de inmunoglobulinas

Una vez reagrupados los segmentos, se produce un solo mARN, que abandona
el núcleo dirigiéndose al RER, donde comienza su traducción. Luego se produce
el ensamblaje, cuyo proceso es el siguiente H+H → H2+L → H2L2.
IgM une primero una cadena H con una L. Su destino final, como receptor
(BcR) o bien para ser secretada, depende si posee o no un fragmento añadido de
19 a.a. en la región C-terminal. Su presencia determina una región hidrofóbica
capaz de anclarse a la membrana celular.
 BIBLIOGRAFÍA DE CONSULTA
• Tizard, I. Introducción a la Inmunología Veterinaria. Ed. Elsevier. 8º edición.
2009
• Gutiérrez Pabello, J. A. Inmunología veterinaria. Ed. El Manual Moderno,
México. 2010
• Abbas, A., Lichtman, A., Pillai, S. Inmunología celular y molecular. Editorial
Elsevier, España, 8º ed. 2016
• Margni, R.A. Inmunología e Inmunoquímica. Ed. Médica Panamericana. 5º ed.
Bs As, 1996.
• Delves, P.; Martin, S.; Burton, D.; Roitt, I. INMUNOLOGÍA. Fundamentos. Ed.
Médica Panamericana, 12º ed. México 2014.
• Parham, P. INMUNOLOGÍA. Ed. Médica Panamericana, 2º ed. 2006
• Fainboim, L. y Geffner, J. Introducción a la Inmunología humana. Ed. Médica
Panamericana, 6º ed. 2010
• Janeway, C.; Travers, P.; Walport, M.; Capra, J. D. Inmunobiología. Ed. Masson
et Cie. 2000
• Bases de datos y bibliotecas electrónicas