INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA SUPERIOR DE MEDICINA

ASIGNATURA
INMUNOLOGÍA HUMANA

GRUPO
4CM10

PRACTICA DE LABORATORIO 4

INTEGRANTES DEL EQUIPO 3:

LÓPEZ LÓPEZ JESÚS DANIEL

MONZÓN SÁNCHEZ XIMENA LILIAN
SAMUEL VELÁZQUEZ LÓPEZ
DÌAZ GARCÌA NORMA JUDITH
ALDANA HERNÁNDEZ JORGE ALBERTO
 Análisis de resultados:

Cuando un antígeno en solución se agrega de manera progresiva a un

antisuero potente, se forman precipitados del complejo antígeno-anticuerpo.
El complejo Ag-Ac precipita espontáneamente o por centrifugación cuando la
proporción de Ags y Acs de la mezcla es equivalente, La precipitación es
máxima allí donde la proporción entre ambos es óptima (parte central de la
curva), pero va disminuyendo a medida que predomine el Ac o el Ag
(izquierda y derecha de la curva respectivamente) Este tipo de reacción no
es muy utilizado al requerirse grandes concentraciones de antígeno y de
anticuerpo para poder medir el precipitado formado.
 Bandas de
precipitación

Se basan en el hecho de las proteínas pueden difundir libremente

a través de los poros del gel. Estructura macroreticular con una malla muy
abierta, Ausencia de grupos iónicos, es una estructura neutra e inerte, no hay
interacción de las moléculas a difundir con la estructura del gel.

 Conclusión:

- La base del método se encuentra en la difusión de macromoléculas en gel

de agar.
- Su difusión depende de la concentración del gel, concentración de los
reactivos y tamaño de las moléculas Ag y Ac.
 1 ¿En condiciones de esta práctica, en caso de no observar precipitación en
una reacción Ag-Ac a que puede deberse?

Cuando un anticuerpo es puesto en contacto con el antígeno, se forman

complejos antígeno-anticuerpo que se insolubilizan en su mayor parte, dando
lugar a una reacción de precipitación.
Al no realizarse esta precipitación puede deberse a que el Ac no a migrado
para hacer reacción con el antígeno y generar el complejo Ag-Ac lo que quiere
decir que no hubo una correcta inmunodifusion.

2.- ¿Qué diferencia existe entre la técnica Oücherlony y la de Mancini?

TÉCNICA DE DIFUSIÓN RADIAL DOBLE DE OUCHTERLONY
Esta técnica se realiza en placas de agar en donde se practican pocillos, en
uno de estos pozos se coloca el suero o muestras a investigar y en el resto se coloca
el anticuerpo preparado frente a la sustancia que se quiere identificar.
Cuando difunden, ambos sistemas se encontrarán y se formará en la zona de
equivalencia el complejo Ag-Ac correspondiente que se hace visible en forma de una
línea de precipitación. En una preparación que contenga varios antígenos, se
obtendrán múltiples líneas de precipitado. La técnica de Ouchterlony permite
identificar sustancias según la forma de unirse las líneas de precipitación de dos o
varios sistemas.

Bandas de precipitación.

Método más simple para la demostración de las reacciones Ag-

TÉCNICA DE DIFUSIÓN Ac
RADIAL SIMPLE D
TÉCNICA DE DIFUSIÓN RADIAL SIMPLE DE MANCINI
Esta técnica se basa en la difusión cuando un antígeno difunde desde un
orificio al agar que lleva incorporado un anticuerpo específico, en un comienzo está
presente en una concentración relativamente alta y forma complejos solubles; al
difundir el antígeno se genera un gradiente de concentración, a medida que el
antígeno difunde más, la concentración disminuye de modo continuo hasta que se
alcanza el punto en el cual los reactantes están más cerca de las proporciones
óptimas (zona de equivalencia), el inmunocomplejo se insolubiliza y se forma un
anillo de precipitación.
Este anillo de precipitación es fácilmente visible y las concentraciones
antigénicas están en relación directa con el área del círculo de precipitación, cuanta
más alta es la concentración del antígeno, mayor es el diámetro del anillo.
A esta técnica también se le conoce como cuantificación por inmunodifusión
radial simple (SRID). Si se incorporan, digamos, tres estándares de concentración
de antígeno en la placa, puede obtenerse una curva de calibración que sirve para
determinar la cantidad de antígeno en las pruebas de muestras desconocidas. Este
método fue utilizado de manera sistemática en inmunología clínica, en particular
para las determinaciones de inmunoglobulina y también para sustancias como el
tercer componente del complemento, transferían, proteína C reactiva y la proteína
embrionaria, α-fetoproteína, que se asocia con ciertos tumores hepáticos. Cuando
se desea analizar una mayor cantidad de muestras se tiende a usar la nefelometría.

Halos de inhibición

Relación entre la cantidad de Ag y el grosor del anillo

formando precipitado.
Técnica Procedimiento Interpretación
TÉCNICA DE MANCINI (48-72h) Relación entre la cantidad
de Ag y el grosor del anillo
formado por el
precipitado.
TÉCNICA DE OUCHTERLONY (18-24h) NO IDENTIDAD: Ag’s.
IDENTIDAD PARCIAL:
Determinantes antigénicos
parcialmente compartidos
por los Ag’s.
IDENTIDAD TOTAL: = ‘s Ag.
Utilidad
SENSIBILIDAD: Medición de
las concentraciones de pp.:
IgG, IgA, IgM. (Para las IgE
e IgD se hace una dilución
menor del Ac en Agarosa
placas de bajo valor’)
Demostrar la identidad de
reacciones serológicas a
diversos agentes
infecciosos con anticuerpos
testigo positivos humanos.
Análisis semicuantitativo
en los sistemas serológicos
humanos (título
aproximado de
precipitación).

3.- Qué es la agammaglobulinemia y cómo puede evidenciarse por

electroforesis?

Es una inmunodeficiencia que afecta a niños varones, caracterizada por

niveles de IgG < 100 mg/dL y la disminución o ausencia de las otras Ig,
desaparición o niveles casi detectables de células B y por el comienzo de
infecciones recurrentes poco después de los 6 meses de vida, cuando
desaparecen los Acs maternos, localizadas principalmente en pulmones,
senos paranasales y huesos, por microorganismos tales como Streptococcus
pneumoniae, Staphylococcus aureus y Haemophilus influenza.
El diagnóstico clínico debe ser corroborado por la demostración de la ausencia
o la marcada disminución de las 5 clases de inmunoglobulinas (Igs) en sangre
periférica, mediante una electroforesis de proteína, cuantificación de Igs e
inmunoelectroforesis. El nivel serológico de la IgG total usualmente se
encuentra por debajo de 250 mg/dL, el resto de los isotipos M, A, D y E, se
encuentran extremadamente bajos o no son detectados. La respuesta de Acs
específicos tras estimulación con diferentes antígenos está marcadamente
deprimida.

4. Qué es la faboterapia y para qué se utiliza?

Tratamiento basado en la inmunidad pasiva a través de la administración de
fracciones F(ab)2 de inmunoglobulinas polivalentes equinas, concentradas y
purificadas, específicas que neutralizan a las toxinas de alacranes del género
Centruroides. Se utiliza para el tratamiento de picaduras de insectos
venenosos.

5. Qué es el mieloma múltiple y cómo puede evidenciarse en la electroforesis?

Tipo de cáncer de la médula ósea, en el que existe una proliferación anormal

de células plasmáticas. Hace que las células cancerosas se acumulen en la
médula ósea, donde desplazan a las células sanguíneas sanas. En lugar de
producir anticuerpos útiles, las células cancerosas producen proteínas
anormales que pueden provocar complicaciones.
El primer paso para hacer un diagnóstico de mieloma múltiple puede ser
encontrar un anticuerpo monoclonal en la sangre. Esta proteína anormal se
conoce por varios nombres diferentes, entre los que se incluyen
inmunoglobulina monoclonal, proteína monoclonal (proteína M), Pico M o
para proteína. A veces los fragmentos de la proteína anormal del mieloma
se filtran a través del riñón en la orina. Esta proteína en la orina, conocida
como proteína Bence-Jones, es la parte del anticuerpo llamada cadena ligera.