LABORATORIO DE BIOQUÍMICA 502507

GUÍA 2. RECONOCIMIENTO DE BIOMOLÉCULAS

I. EL PROBLEMA

Los seres vivos y todo el material que de ellos se deriva, está formado por
diferentes tipos de compuestos que se pueden identificar (cualificar) y cuantificar.
Conocer cuáles son esas sustancias, permite generar ideas sobre la posible
función, propiedades y usos que estas puedan tener. La identificación cualitativa
se realiza por medio de reacciones específicas, cuyo producto es coloreado y de
fácil detección.
En esta práctica se pretende contestar las siguientes preguntas: ¿Cuál es la
composición mayoritaria en términos de las biomoléculas del material (muestras)
a estudiar en esta práctica de laboratorio? ¿Cómo actúan los reactivos (tabla1)
que permiten detectar la presencia de biomoléculas en las diferentes muestras?
Para esto último usted debe hacer una investigación exhaustiva que le permitirá
establecer sus hipótesis a partir de la naturaleza química del reactivo y del
contenido de las diferentes biomoléculas en cada una de las muestras. Así mismo
es importante que en este proceso identifique en cada caso cuales son sus
patrones de comparación positivos y negativos.

II. FUNDAMENTO TEÓRICO

Todos los organismos vivos están constituidos por compuestos químicos de

tamaño y masa muy variables denominadas biomoléculas. Estas sustancias se
clasifican en inorgánicas y orgánicas, siendo el agua la sustancia inorgánica más
importante para la vida, pues la inmensa mayoría de las reacciones bioquímicas
se desarrollan en medios acuosos. Una pequeña fracción en masa corresponde a
gases, sales, ácidos y a los iones. Las biomoléculas orgánicas como las
proteínas, lípidos, carbohidratos y ácidos nucleicos, están involucradas
prácticamente en todos los procesos y propiedades fisicoquímicas de los seres
vivos pertenecientes a los diferentes niveles de organización biológica.

Proteínas

Son macromoléculas de elevado peso molecular, caracterizadas por su gran

variabilidad estructural y enorme diversidad de funciones biológicas, sin embargo,
tienen en común el ser polímeros de α- L – aminoácidos codificados
genéticamente y ordenados en secuencias lineales unidas entre sí por enlaces
peptídicos. La variedad estructural se debe a las múltiples ordenaciones o
secuencias que pueden adoptar los veinte aminoácidos de los cuales están

1
constituidas y que naturalmente se repiten muchas veces dentro de sus
estructuras moleculares espaciales. Las proteínas de cada ser vivo,
independientemente del dominio biológico al que pertenecen, son específicas, a
punto de que una célula típica posee aproximadamente unas tres mil de ellas
diferentes. Se ha establecido que las proteínas que desempeñan la misma función
presentan ligeras variaciones estructurales (secuencia de aminoácidos) en las
distintas especies.
La organización espacial de una proteína se expresa en cuatro niveles, que se
denominan la estructura primaria, secundaria, terciaria y cuaternaria.

Carbohidratos

Son la fuente primaria de energía para los seres vivos, constituidas

fundamentalmente por los grupos funcionales hidroxilo y carbonilo. De acuerdo
con la naturaleza química, los azúcares más simples, de acuerdo al número de
monómeros que los conforman, son los monosacáridos como la glucosa, ribosa y
fructosa. De la misma forma, de las combinaciones de dos monosacáridos se
forman disacáridos como la sacarosa, maltosa, lactosa, entre otros. Los
polisacáridos pueden ser lineales o ramificados como la celulosa, almidón y el
glucógeno. La celulosa es un polímero lineal cuya función es estructural, es el más
abundante en las paredes de las células vegetales. El almidón es la molécula de
almacenamiento de glucosa (energía) en las plantas y en los animales es el
glucógeno. Estos compuestos son polímeros de glucosa que forman cadenas
lineales y ramificadas, en el almidón la cadena lineal o amilosa consta de
aproximadamente 200 unidades de glucosa unidas por enlaces glicosídicos α-1,4
y la ramificada o amilopectina resulta de la unión de glucosas por enlaces α-1,4 y
α-1,6. La estructura del glucógeno es similar a la del almidón, pero con mayor
cantidad de moléculas de glucosa y más ramificado. La celulosa es un polímero
lineal con enlaces β-1,4.

Lípidos

Son biomoléculas orgánicas de naturaleza química diferente, a las mencionadas

anteriormente se caracterizan por ser hidrofóbicos, es decir, insolubles en agua
pero solubles en solventes orgánicos como el cloroformo, benceno, alcohol,
acetona, y otros. Esto último debido a su estructura donde sobresalen los ácidos
grasos de cadena larga (saturados o insaturados) y el glicerol. Las grasas
insaturadas son líquidas (aceites) y se encuentran abundantemente en los
vegetales, mientras que las saturadas (mantecas) son sólidas y están presentes
en los tejidos animales. Son fuente de energía, hacen parte de la membrana
celular como responsables de la permeabilidad selectiva; algunos lípidos
complejos regulan funciones celulares y otros actúan como moléculas de señales
químicas. Los lípidos más importantes son las grasas o triglicéridos, los
fosfolípidos y los esteroides como el colesterol.

2
Ácidos nucleicos

Son polímeros de los nucleótidos (base nitrogenada, azúcar de cinco carbonos y

grupo fosfato), su función es la de portar la información genética necesaria para
que los organismos produzcan todos los factores necesarios para la vida como lo
son las proteínas y otros ácidos nucleicos como el ARN. Su nombre se debe a que
fueron aislados de los núcleos celulares. Dentro de las células los ácidos nucleicos
se encuentran combinados con proteínas básicas denominadas histonas, a estas
asociaciones supramoleculares se les denomina nucleoproteínas. Dependiendo
del tipo de azúcar (pentosa) que poseen en su estructura los ácidos nucleicos se
dividen en dos clases principales, el que tiene ribosa se llama ácido ribonucleico
(ARN) y el que tiene desoxirribosa es el ácido desoxirribonucleico (ADN). Estos
ácidos nucleicos no solo se encuentran formando el material hereditario en las
células procariotas y eucariotas sino también en organelos como los ribosomas,
mitocondrias y cloroplastos lo que evidencia la versatilidad evolutiva de estas
biomoléculas de acuerdo con su localización y función.

Reconocimiento de biomoléculas

La identificación de las proteínas se hace con el reactivo de Millon compuesto por

nitrato de mercurio en solución nitroso-nítrica que forma complejos color rojo
ladrillo con el anillo fenólico de la tirosina, péptidos o proteínas que contienen este
aminoácido.

Dentro de los carbohidratos se encuentran los azúcares reductores que se

reconocen con la prueba de Fehling, este reactivo contiene como agente oxidante
al ión cúprico (Cu+2) en una solución de CuSO 4 (Fehling A) y otra alcalina de
tartrato de sodio y potasio (Fehling B), durante el análisis un cambio de color de
azul a verde, amarillo, naranja, café o rojo brillante del oxido cuproso producido,
sugiere la oxidación a ácido de un monosacárido u oliogosacárido reductor. El
reconocimiento y diferenciación de polisacáridos puede realizarse con la reacción
de yodo-yoduro, éste reactivo se enlaza con la cadena ramificada de los
polisacáridos dando una coloración azul intensa con el almidón y un color rojo o a
café rojizo con el glucógeno.

En cuanto a los lípidos que contienen ácidos grasos en su estructura hay una
reacción particular para reconocerlos, la de saponificación, durante esta los
compuestos se hidrolizan en un medio básico y se obtienen las sales de los
ácidos grasos, es decir jabones, detectables por agitación.

Otros lípidos fundamentales son insaponificables y tienen como núcleo estructural

el ciclo pentanoperhidrofenantreno que se identifica con la prueba de Lieberman-
Burchard en esta a una solución en cloroformo se le adiciona anhídrido acético y
ácido sulfúrico, observando una reacción coloreada que inicia rojo y progresa a
verde-azul. Inicialmente los esteroides como el colesterol se convierte a derivados
sulfato y acetato que lentamente se someten a sulfonación en diferentes

3
posiciones, para luego eliminar los grupos SO 3H, produciendo insaturaciones en
forma repetitiva y finalmente polienos y esteroides aromáticos.

El reconocimiento de los ácidos nucleicos puede realizarse con el reactivo de

difenilamina, debido a que en condiciones ácidas reaccionan las desoxirribosas de
los nucleótidos de purina formando un compuesto de color azul con el ADN.

Los iones (sales solubles en agua se ionizan) se puede identificar fácilmente,

como es el caso de los iones carbonatos que en presencia de CaCl 2 se combinan
con el calcio formando un precipitado blanco.

Tabla 1 Reactivos utilizados para la identificación de diferentes moléculas de

importancia biológica

BIOMOLÉCULA REACTIVO
PROTEÍNAS Millon
POLISACÁRIDOS Lugol
AZÚCARES Fehling A y Fehling B
REDUCTORES
ÁCIDOS NUCLEICOS Difenilamina
COLESTEROL Cloroformo, anhídrido
acético y ácido sulfúrico
LÍPIDOS NaOH
SAPONIFICABLES

III. MATERIALES Y REACTIVOS.

Materiales por grupo:

2 gradillas
24 tubos de ensayo
1 pinza para tubo
3 pipetas graduadas (1, 5 y 10 mL)
1 pipeteador
2 vasos de precipitados (50 mL y 250 mL)
3 goteros

Materiales y reactivos generales (el volumen de los reactivos está calculado para
10 grupos) todos los reactivos con duplicado:

Fehling A y B (100 mL c/u)

Lugol (50 mL)
Reactivo de Millon (100 mL)
NaOH 15% (200 mL)
Cloroformo (100 mL)
Anhídrido acético (100 mL)
Ácido sulfúrico concentrado en gotero (100 mL)

4
Reactivo de difenilamina fresco: 1 g de difenilamina en 100 mL de ácido acético
glacial y se agregan 2 mL de ácido sulfúrico concentrado.

Tabla 2. Soluciones patrones negativos o positivos para esta práctica

PATRONES
Solución de fructosa 1%
Solución de rafinosa 1%
Solución de glucógeno 1%
Solución de almidón 1%
Agua destilada
Caseína al 1% en bicarbonato al 0,9%
Fosfatidilcolina al 1% en cloroformo
Acido palmítico 1% en cloroformo
Extracto de ácido nucleico( 1/4 de pastilla en 50 mL de agua
destilada)
Solución de colesterol al 1% en cloroformo
IV.
PROCEDIMIENTO

Preparación de extractos (a cargo del auxiliar de laboratorio)

Extracto de papa criolla: macerar cubitos de papa adicionando 8 mL de agua,

centrifugar durante 10 minutos y obtener el sobrenadante en un tubo debidamente
marcado.
Extracto de harina de trigo: adicionar a 2 g de harina de trigo, 100 mL de agua
caliente y filtrar con gasa doble. Obtener el filtrado en un vaso debidamente
marcado.
Extracto de cebolla cabezona: pelar y cortar en fragmentos pequeños 5 cebollas
cabezonas y para cada una: colocarla en el mortero y macerar con 50 mL de NaCl
al 5%, (mantener a 40oC), filtrar con gasa o muselina y recoger el filtrado en un
vaso de precipitados de 100 mL, adicionar 1mL de SDS al 1% (dodecil sulfato de
sodio), colocar en tubos tapa rosca y mezclar levemente por inversión 10 veces,
dejar en reposo por 10 minutos, transcurrido este tiempo, rotar lentamente cada
tubo y simultáneamente adicionar por las paredes, 3 mL de isopropanol, se debe
observar un precipitado blanco, colectarlo con una pipeta pasteur o gotero y
separar en un tubo marcado.

Extracto de cerebro de vaca: cortar en trozos pequeños 30 g de cerebro, macerar

en mortero y adicionar ATA en relación 1,5 mL/g de tejido. Agregar
aproximadamente 2,0 g de arena lavada, macerar y centrifugar a 4000 rpm por 10
minutos, desechar el sobrenadante y tomar el residuo, pasar a cápsula de
porcelana y adicionar la mezcla de etanol- {éter-cloroformo 2:2:1 en 1,5 mL/g de
tejido, luego centrifugue a 2500 rpm por 5 minutos, el sobrenadante es el extracto
a usar.

5
Identificación de biomoléculas

Para cada prueba de reconocimiento (tabla 1) y de acuerdo con su fundamento

teórico descrito previamente en está guía, usted debe seleccionar patrones o
parámetros de comparación negativos y positivos (tabla 2), los primeros también
se llaman blancos y son sustancias en las que se espera un resultado negativo
de acuerdo con su naturaleza química, por lo tanto no cambiará el color del
reactivo utilizado para la identificación. En los segundos se espera una prueba
positiva porque contienen las biomoléculas con los grupos necesarios para que
ocurra la reacción con los reactivos de reconocimiento y se observaran productos
coloreados.

Además para cada prueba de identificación también se deben seleccionar 1

muestra o material de prueba de la tabla 3, teniendo en cuenta su composición
molecular para una correcta interpretación de los resultados.

A. Reconocimiento de azúcares reductores

Numere cuatro tubos de ensayo, en un tubo de ensayo adicione 2 mL del patrón

negativo seleccionado de la tabla 2, en otro tubo de ensayo 2 mL del patrón
positivo seleccionado de la tabla 2, en el tercero 2 ml de una muestra elegida de
la tabla 3. Agréguele a cada tubo 1 mL de Fehling A y 1 mL de Fehling B, mezcle el
contenido de los tres tubos y caliéntelos durante cinco minutos en agua hirviendo.
Observe el aspecto de los tubos después de calentar, use los patrones positivos y
negativos como modelo de comparación y registre sus resultados en tablas.
B. Reconocimiento de polisacáridos

Numere cuatro tubos de ensayo, en los dos primeros tubos añada 1 mL de cada
patrón (positivo y negativo de tabla 2), en el tercero 1mL de una muestra (tabla
3).Después adicione 3 gotas de lugol a cada tubo y agite el contenido. Observe lo
que sucede, comparando con sus patrones y registre sus resultados para cada
tubo.
C. Reconocimiento de proteínas

Numere cuatro tubos, en un tubo de ensayo adicione 2 mL del patrón negativo

seleccionado (tabla 2), en otro tubo de ensayo 2 mL del patrón positivo
seleccionado (tabla 2), en el tercero 2 mL de una muestra elegida de la tabla 3.
Agregue a todos los tubos 5 gotas del reactivo de Millon, agite y caliente durante
un minuto en agua hirviendo. Observe lo que sucede y regístrelo en su tabla de
datos.

Tabla 3 Composición molecular de las muestras utilizadas en esta práctica

6
 MUESTRAS
Harina de trigo (100 g)
Extracto de papa criolla (100
g)
Leche entera (250 mL)
Leche descremada (250 mL)
Leche deslactosada (250 mL)
Clara de huevo (100 g)
Aceite de cocina de soya
(100 g)
Gelatina (100 g)
Pedazos de papel (100 g)
Cerebro de vaca (100 g)
Yema de huevo (100 g)
Cebolla cabezona (100 g)
Fuente: Tabla de composición de alimentos Colombianos. Bogotá: Bienestar Familiar, 2005.
COMPOSICIÓN
Proteína 10,5 g. Grasa total 1 g. Carbohidratos 76,1
g
Proteína 1,9 g. Lípidos 0,1 g. Carbohidratos 21,6 g
Proteína 8 g. Grasa total 8 g. Carbohidratos 12 g.
Colesterol 25 mg.
Proteína 6 g. Grasa total 0,2 g. Carbohidratos 11 g.
Colesterol 0 mg.
Proteína 8 g. Grasa total 4,5 g. Carbohidratos 11 g.
Colesterol 20 mg.
Proteína 10,9 g. Carbohidratos 0,73 g. Triglicéridos
0,17 g. Agua 88,2 g.
Grasa saturada 14,9 g, Grasa moninsaturada 43,0 g.
Grasa poliinsaturada 37,6 g.
Proteína 12,7 g.
Carbohidratos 95,0 g.
Grasa total 7,60 g. Esteroides 2000 mg.
Carbohidratos 0 g. Proteínas 10,1 g.
Grasa total 30,87 g. Esteroides 2,4 g. Proteína 16.7
g. Carbohidratos 1,78 g.
Agua 89,11 g. Proteína 1,1 g. Carbohidratos 9,34 g.
Ácidos nucleicos: 0,93%. Triglicéridos 0,1 g.

D. Reconocimiento de lípidos saponificables

Numere cuatro tubos de ensayo, en los dos primeros tubos añada 1 mL de cada
patrón (positivo y negativo de tabla 2), en el tercero 1 mL de una muestra (tabla
3). Agregue 3 mL de NaOH al 15% a cada tubo y una perla para ebullición,
coloque al baño maría durante 20 min (EN LA CABINA DE EXTRACCIÓN),
adicione 3 mL de agua destilada y agite fuertemente. Observe y compare con los
patrones elegidos.

E. Reconocimiento de esteroides

Numere cuatro tubos de ensayo, en un tubo de ensayo adicione 2 mL del patrón

negativo seleccionado (tabla 2), en otro tubo de ensayo 2 mL del patrón positivo
seleccionado (tabla 2), en el tercero 2 mL de una muestra elegida de la tabla 3.
Adicione a todos los tubos 3 mL de cloroformo y mezcle, luego agregue 1 mL de
anhídrido acético cuidadosamente por las paredes del tubo y agite, finalmente
coloque 3 gotas de ácido sulfúrico también por las paredes y observe la coloración
de la interfase al minuto y a los 15 minutos. Compare y registre sus resultados.

7
F. Reconocimiento de ADN

Numere tres tubos de ensayo, en los dos primeros tubos añada 1 mL de cada
patrón (positivo y negativo de tabla 2), en el tercero 1 mL de una muestra (tabla 3).
A cada tubo adicione 1 mL de agua destilada, suspenda la muestra, agregue 1 mL
de difenilamina, mezcle bien y caliente al baño maría por 10 minutos, sin dejar
que haya ebullición, luego enfríe a baño de hielo, observe durante 10 minutos y
registre los resultados en las tablas correspondientes.
V. BIBLIOGRAFÍA

Badui, Salvador. (2010). Química de los Alimentos. 4 ed. México: Pearson Addison
–Wesley.

Curtis, Helena y Barnes, Sue. (2008). Biología. 8 ed. Buenos Aires: Médica
Panamericana.

Plummer, David T. (1981). Bioquímica práctica. Barcelona: Mc Graw-Hill

Latinoamericana.

8
 PREINFORME E INFORME/ IDENTIFICACIÓN DE BIOMOLÉCULAS

PREINFORME Nombre: Cristian Fabián Limas Rodríguez Grupo: 2.1

1. Consulta

Realice todos los numerales del preinforme: título y consulta, fichas técnicas,
procedimiento en diagramas de flujo y bibliografía de acuerdo con las
indicaciones de su profesor.
1. Copie y llene la siguiente tabla para todas las muestras de la tabla 3 con las
que va a trabajar. Fíjese en los modelos. En la columna ¨Nombre de las
biomoléculas que contiene¨ escriba varios de las más abundantes que se
puedan identificar con los reactivos de reconocimiento a usar en esta práctica.
En la columna de ¨Tipo de biomolécula¨ sea lo más específico posible, indique
si es carbohidrato, lípido, proteína o ácido nucleico, y aclare por ejemplo para
los carbohidratos si se clasifican como monosacáridos, disacáridos o
polisacáridos, reductores o no, y en los lípidos simples (tipo) o
complejos (tipo), saponificables o no. Utilice la información de esta tabla,
junto con el fundamento teórico de la guía para plantear sus hipótesis.
2.
Nombre de las biomoléculas
Muestra Tipo de biomolécula
que contiene
X Almidón Carbohidrato, polisacárido
Sacarosa Carbohidrato, disacárido
no reductor
Extracto Almidón Carbohidrato, polisacárido
de papa
Leche Glucosa Carbohidrato,
entera monosacárido
Clara de Albúmina Proteína
huevo
Harina de Gluten, almidón Proteína, carbohidrato
trigo monosacárido
Pedazos Celulosa Carbohidrato, polisacárido
de papel
Aceite de Ácido graso Lípido, insaturado.
cocina

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 2. Fichas técnicas
Propiedades de los reactivos a usar en el laboratorio

Nombre Fórmula Aspecto Peligrosidad* Forma de desechar el reactivo

Reactivo de CuSO4x5 Líquido Depositar en residuos para sales y no

Fehling a y b H2O incoloro, el desagüe ya que puede ser peligroso
inodoro. para la consumo humano.
C4H4O6K
Nax4H2O

Lugol KI + I2 Líquido Desechar según indicaciones del

amarillent monitor.
o con olor
picante.

Reactivo de Hg2(NO3)2 Líquido Depositar en residuos para sales o

Millón transparen metales pesados, y no el desagüe ya
te inodoro que puede ser peligroso para la
consumo humano.

10
Hidróxido de NaOH Sólido Se puede botar en recipientes que
sodio blanco e contengan bases.
higroscópi
co.

Cloroformo CHCl3 Líquido Depositar en residuos para sales y no

incoloro el desagüe ya que puede ser peligroso
con un para la consumo humano.
olor dulce
característ
ico.

Anhídrido C4H6O3 Líquido Desechar en residuos que contengan

acético incoloro ácidos.
de color
acre.

Ácido H2SO4 Líquido El reactivo se debe depositar en

sulfúrico higroscópi soluciones que contengan ácidos y
co tener mucho cuidado al mezclarlo con
incoloro, otros químicos.
aceitoso e
inodoro.

11
Reactivo de C12H11N Cristal Almacenar en recipientes que no
difenilamina incoloro contengan ácidos fuertes y a productos
de olor que sean inflamables.
característ
ico.

Ácido C16H32O2 Cristales No es peligroso Depositar en residuos orgánicos.

palmítico incoloros
o blancos.
*
Indique la peligrosidad con el símbolo correspondiente: explosivo (E), comburente (O), inflamable
(F), extremadamente inflamable (F+), tóxico (T), muy tóxico (T+), corrosivo (C), nocivo (Xn),
irritante (Xi) y/o peligroso para el medio ambiente (N). SGA

3. Bibliografía

 Segal, C.A. & Ortega, G.J. (2005). Manual de prácticas de biología

molecular de la célula I. facultad de ciencias de la UNAM. México.
 Macarulla, J.M., Marino, A. & Macarulla, A. (2001). Bioquímica cuantitativa.
Volumen I: cuestiones sobre biomoléculas. Editorial Reverte. Barcelona,
España.
 Herrera, A.C. (2011). Estudio comparativo de métodos para la
determinación de sacarosa y azúcares reductores en miel virgen de caña
utilizados en el ingenio Pichichi S.A. Universidad Tecnológica de Pereira.
 López, I.M. (1992). Estudio genético y bioquímico de los polisacáridos
superficiales de Rhizobium. Facultad de ciencias, Universidad de Granada.
 Torres, G.M. (2013). Guía componente práctico. Escuela de ciencias
básicas, tecnología e ingeniería. Universidad Nacional Abierta y a Distancia.
Duitama, Colombia.
 Acosta, F.J. (2012). Interacción de ADN rico en adeninas y Timinas con
drogas. Doctorado en Polímeros y biopolímeros. Departamento de
Ingeniería Química, Universidad Politécnica de Cataluña. Barcelona,
España.

12
4. Procedimiento

4.1 Reconocimiento de azúcares reductores

Resultado esperado: se espera que cambie de color azul a rojo por la reducción
del ion Cu2+ a Cu+., significando que se oxida el grupo carbonilo, a un grupo
carboxilo.

Diagrama de flujo:

Adicionar 2ml del Adicionar 2 ml de

Enumerar cuatro
patrón negativo a un una muestra de la
tubos de ensayo.
tubo y 2ml del patrón tabla 3 en el 3° tubo.
positivo en otro.

Mezclar el contenido Agregar a cada

de los tubos y calentar
Observar el aspecto
durante 5’ en H2O
después de calentar.
hirviendo.
tubo 1ml de Fehling
A y 1ml de Fehling
B.

TABLA DE RESULTADOS
Muestra Resultado

1. Incluya los patrones y muestra debidamente descritos (evite limitarse a

escribir tubo 1, tubo 2, etc) y aclare en forma organizada las observaciones en
cada tubo y si la prueba puede considerarse positiva o negativa.

4.2 Reconocimiento de polisacáridos

Resultado esperado: se espera que cambie de color azul-violeta la muestra que

contenga almidón, debido a que el yodo se introduce entre las espiras de la
molécula de almidón.

13
Diagrama de flujo:

Enumerar cuatro Añadir en los 2 Adicionar en el 3°

tubos de ensayo. primeros 1ml de cada tubo 1ml de una
patrón de la tabla 2. muestra.

Observar lo que Agregar 3 gotas de

sucede y registrar Lugol a cada tubo y
los datos. agite.

TABLA DE RESULTADOS

Muestra Resultado

4.3. Reconocimiento de proteínas

Resultado esperado: se espera que se forme un coagulo blanco y luego de

calentar se torne de color rojo, esto ocurre por la interacción del medio ácido del
reactivo con el grupo –OH de la tirosina.

Diagrama de flujo:

Enumerar cuatro Adicionar en el 2°

Añadir 2ml del patrón
tubos de ensayo. tubo 2ml del patrón
negativo (tabla2).
positivo.

Agregar a todos los Adicionar en el 3°

Agitar y calentar durante tubos 5 gotas del tubo 2ml de una
1’ en agua hirviendo. reactivo de Millón. muestra tabla 3.

14
TABLA DE RESULTADOS

Muestra Resultado

4.4. Reconocimiento de lípidos saponificables

Resultado esperado: se deberá formar un precipitado como jabón, que será la sal
sódica de los ácidos grasos. Esto se produce por la separación de la glicerina y los
ácidos grasos presentes en la muestra.

Diagrama de flujo:

Enumerar cuatro Añadir en los dos Añadir en el 3°

tubos de ensayo. primeros tubos 1ml tubo 1ml de la
de cada patrón. muestra.

Adicionar 3ml de H2O Agregar 3ml de NaOH al

Colocar al baño
destilada y agitar para 15% a cada tubo y una
maría durante 20’.
observar que sucede. perla para ebullición

TABLA DE RESULTADOS

Muestra Resultado

4.5. Reconocimiento de esteroides

Resultado esperado: se espera que la muestra con los reactivos se torne de un

color verde-azul.

15
Diagrama de flujo:

Enumerar cuatro Adicionar en un tubo Adicionar en el 2°

tubos de ensayo. de ensayo 2ml del tubo 2ml del patrón
patrón negativo. positivo.

Agregar 1ml de Adicionar a todos los

Adicionar en el 3° tubo
anhídrido acético tubos 3ml de
2ml e una muestra.
con cuidado y agitar. cloroformo y mezclar.

Colocar 3 gotas de H2SO4

por las paredes y observar
la coloración en el 1°’ y el
15’.

TABLA DE RESULTADOS

Muestra Resultado

4.6. Reconocimiento de ADN

Resultado esperado: se formará un compuesto azul, por medio de las dos

desoxipentosas presentes en la muestra, por calentamiento.

Diagrama de flujo:

Añadir en los dos Agregar en el 3°

Enumerar 3 tubos
primeros tubos 1ml tubo 1ml de la
de ensayo.
de cada patrón. muestra.

16
 Agregar 1ml de Adicionar a cada
Enfriar a baño de hielo
difenilamina, mezclar y tubo 1ml de H2O
y observar durante 10’
calentar a baña maría por destilada y suspender
y registrar los datos.
10’. la muestra.

TABLA DE RESULTADOS

Muestra Resultado

INFORME Nombre__________________________________ Grupo ________

1. Discusión de resultados

Para la elaboración del análisis de resultados use toda la información de la guía

(fundamento teórico y procedimiento), la consulta e hipótesis en su preinforme, así
como los resultados obtenidos. No olvide que el análisis no se resuelve a manera

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de cuestionario, explique tanto las pruebas positivas como las negativas y redacte
con citas en normas APA.
Para cada ensayo explicar en forma concreta:

- El fundamento químico para la identificación de cada biomolécula, la relación con

los patrones positivos o negativos usados en la práctica y las observaciones.
- Si hay presencia de los diferentes tipos carbohidratos, lípidos, proteína y ácidos
nucleicos en cada muestra, de acuerdo con la consulta del preinforme y las tablas
de composición molecular de la guía.
2. Bibliografía: redáctela con normas APA, que corresponda con las citas usadas
en el análisis de resultados.

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