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LA MOLINA
INFORME DE LABORATORIO
Profesora :
Curso : Biología general
Alumna : Zevallos Alvites Martha Angela
Ciclo : 2015 – I
I. INTRODUCCIÓN
El conocimiento de las estructuras del ser vivo está basado casi totalmente en el
estudio con el microscopio. El microscopio óptico es un instrumento que permite la
observación de objetos y detalles de estructuras tan pequeñas que no podrían ser
observadas a simple vista. Con él, nuestro grado de visibilidad se amplía en cientos o
miles de veces, gracias a un conjunto de lentes, dispuestos convenientemente. Dado
que el microscopio permite superar estas dos dificultades, su uso y el conocimiento de
los principios y técnicas en microscopía, resultan fundamentales para el desarrollo de
la investigación en ciencias biológicas, especialmente en los campos de estudio que
conforman el área académica de la Universidad Nacional Agraria La Molina, pues al
ser una universidad dedicada a la formación de jóvenes profesionales con inclinación
hacia la investigación científica, es necesario que reciban una base sólida para realizar
estudios e investigaciones, empezando por lo más básico, que es saber utilizar
correcta y eficientemente las diferentes clases de microscopios, que le permitirán
descubrir un mundo que no tenían a su alcance anteriormente, pero que ahora
aprovecharán al máximo y del que nunca dejarán de aprender y sorprenderse.
II. OBJETIVOS
Identificar las partes del microscopio compuesto y comprender sus
características.
Manejar el microscopio óptico compuesto y estereoscopio correctamente
Identificar las similitudes y diferencias entre el microscopio compuesto y el
estereoscopio.
Realizar observaciones de muestras biológicas (vasos conductores – abeja) en
los microscopios y aprender a enfocarlas a diferentes aumentos.
Calcular la distancia límite de resolución, el grado de aumento y la distancia de
trabajo en el microscopio.
Los microscopios ópticos actuales tienen un poder resolutivo de 0,2 µm, unas mil
veces la del ojo humano
Parte mecánica
- Pie o soporte: sirve como base al microscopio y en él se encuentra la fuente de
iluminación.
- Platina: superficie sobre la que se colocan las preparaciones. En el centro se
encuentra un orificio que permite el paso de la luz. Sobre la platina hay un
sistema de pinza o similar, para sujetar el portaobjetos con la preparación, y
unas escalas que ayudan a conocer qué parte de la muestra se está
observando.
- Tubo: cilindro hueco que forma el cuerpo del microscopio. Constituye el soporte
de oculares y objetivos.
- Revólver: estructura giratoria que contiene los objetivos.
- Brazo o asa: une el tubo a la platina. Lugar por el que se debe tomar el
microscopio para trasladarlo de lugar.
- Tornillo macrométrico o de enfoque grosero: sirve para obtener un primer
enfoque de la muestra al utilizarse el objetivo de menor aumento. Desplaza la
platina verticalmente de forma perceptible.
- Tornillo micrométrico o de enfoque fino: sirve para un enfoque preciso de la
muestra, una vez que se ha realizado el enfoque con el macrométrico. También
desplaza verticalmente la platina, pero de forma prácticamente imperceptible.
Es el único tornillo de enfoque que se utiliza, una vez realizado el primer
enfoque, al ir cambiando a objetivos de mayor aumento.
Parte óptica
- Lentes oculares: son los sistemas de lentes más cercanos al ojo del
observador, situados en la parte superior del microscopio. Son cilindros huecos
provistos de lentes convergentes cuyo aumento se reseña en la parte superior
de los mismos (normalmente 10X).
- Lentes objetivos: son sistemas de lentes convergentes que se acoplan en la
parte inferior del tubo, mediante el revólver. En esta estructura se pueden
acoplar varios objetivos. Algunos objetivos no enfocan bien la preparación al
aire, y se deben de utilizar con un aceite de inmersión (100x).
Sistema de iluminación
Este tipo de sistema tiene la finalidad de dirigir la luz natural o artificial de modo que
ilumine la muestra para observarla al microscopio óptico. Está formada por cuatro
partes muy importantes, como la fuente de luz, espejos, condensador y diafragma.
- Fuente de luz: puede ser natural o artificial. La luz artificial puede ser
independiente del microscopio. Si lo es, este debe tener un espejo que dirija los
rayos hacia el eje óptico y en forma paralela a el.
- Espejo: puede moverse para orientarlo de la manera más conveniente. El
espejo tiene dos caras, una plana y una cóncava. Si utiliza la cara cóncava
cuando no se trabaja con el condensador, con una fuente luminosa natural. En
cambio la cara plana se utiliza cuando se trabaja con luz artificial o cuando se
usa el condensador.
- Condensador: sistema de lentes convergentes que capta los rayos de luz y los
concentra sobre la preparación, de manera que proporciona mayor o menos
contraste. Se regula en altura mediante un tornillo.
- Diafragma o iris: sobre el reflector de la fuente de iluminación. Abriéndolo o
cerrándolo permite graduar la intensidad de la luz.
Las partes de este microscopio son prácticamente las mismas que las discutidas para
el microscopio compuesto.
Este resultado permite saber cuántas veces más grande estamos viendo la imagen de
un objeto.
Poder de Resolución
Es la posibilidad de distinguir separados dos puntos muy cercanos entre sí. Cuanto
mayor sea el poder de resolución, menor será la distancia entre dos puntos a la cual
pueden distinguirse como tales. La distancia límite en la cual dos puntos pueden ser
todavía distinguibles se denomina Límite de Resolución. El poder de resolución de un
microscopio compuesto depende de la longitud de onda de la fuente luminosa y de la
apertura numérica (propiedad óptica de la lente).
Distancia de trabajo
Es la distancia que se mide entre la muestra observada y el lente objetivo. Es
inversamente proporcional a la apertura numérica y al aumento. Por lo tanto, cuanto
mayor la apertura del objetivo menor la profundidad de campo, e igualmente, cuanto
mayor el aumento menor la profundidad de campo.
Los pasos a seguir para la perfecta utilización del microscopio son las siguientes:
IV. MATERIALES
Materiales del alumno por mesa
- 2 estiletes
- Láminas portaobjetos
- Goteros
- Regla milimetrada de 20 cm
- Láminas cubreobjetos
- Muestras de agua estancada
V. PROCEDIMIENTO
1. Actividad partes del microscopio y poder de resolución
Se procedió a escribir en los espacios en blanco del cuadro con los sistemas que
conforman el microscopio óptico compuesto, sus partes y funciones; utilizando el
conocimiento adquirido previamente por la teoría y la explicación de la profesora,
ayudada de un gráfico contenido en la guía de laboratorio y la observación física de los
microscopios compuestos presentes en cada mesa de laboratorio.
2. Observación de muestras
Utilizamos los materiales solicitado para la práctica.
Tomamos unas gotas de la muestra de agua estancada y las colocamos en el porta
objeto, protegiéndolas con el cubre objeto. Pusimos el porta objeto en la platina
asegurándolo con la pinza; procedimos a observar la muestra con el objetivo de menor
aumento (10x). Para enfocar nuestros objetos de observación alternamos moviendo
los tornillos macrométrico y micrométrico hasta que logramos imágenes aceptables y
nítidas que nos permitieran hacer nuestras observaciones.
A continuación, procedimos a retirar la muestra de agua estancada, para observar la
muestra de vasos conductores de plantas proporcionado por la profesora, repetimos la
operación anterior y anotamos los resultados; aunque esta vez utilizando primero el
objetivo de menor aumento (10x) luego con el de mediano aumento (40x) y finalmente
con el de mayor aumento (100x) aunque no se utilizó el aceite de inmersión como se
solicita. Además al conseguir cada imagen requerida, medimos con una regla la
distancia de trabajo y calculamos la distancia límite de resolución.
Por último, utilizamos el estereoscopio para observar más detalladamente el cuerpo de
una abeja, también modulando la imagen a través de los tornillos del microscopio, para
luego proceder a documentar lo aprendido.
Se desarrolló el cuadro para hallar el poder de resolución de cada uno de los objetivos
del microscopio compuesto.
2. Observación de muestras
Imagen
Imagen
Observación en el estereoscopio:
Muestra abeja
Observación Se pudo ver que la composición de las alas era parecida a
celdas, además del cuerpo aumentado de la abeja, patas y
cabeza.
Grado de aumento 12x
Imagen
VII. CONCLUSIONES
Podemos afirmar que el estereoscopio y el microscopio compuesto son
artefactos indispensables en el proceso de observación de muestras
biológicas, son la base de todo estudio biológico pues permiten conocer la
composición de la muestra y analizarla según se necesite.
Se concluyó que en el agua estancada, suelen encontrarse protozoarios y
algas, producto de la exposición a los factores ambientales del lugar.
El microscopio nos permitió estudiar la composición y forma de los vasos
conductores de plantas, reafirmando lo aprendido anteriormente; además,
aprendimos acerca del cuerpo de un insecto (abeja) al poder observarlo de
manera detallada.
VIII. CUESTIONARIO
1. ¿Qué es la apertura numérica?
Es la capacidad de recoger luz de una lente, indica el poder de resolución del
objetivo. Para lentes secas su valor máximo es de 1, pero por las limitaciones
físicas de la calidad de las lentes, raras veces sobrepasan el valor de 0,95. Cuanto
mayor sea la apertura podremos conseguir mayor resolución y brillo en la imagen.
Si queremos usar lentes con una apertura mayor de 1 (máximo 1,4) estas deben
ser de inmersión en aceite con el mismo índice de refracción que la lente. El uso
del aceite implica que la distancia de trabajo entre el objeto y la lente debe ser muy
pequeña lo que imposibilita la observación de células vivas directamente en el
frasco de cultivo.
Microscopio electrónico
- Microscopio electrónico de transmisión (MET): Permite la observación de
muestras de cortes muy finos. Se ha de colocar una placa fotográfica detrás del
objeto para registrar la imagen aumentada. este tipo de microscopios pueden
aumentar un objeto hasta un millón de veces.
- Microscopio electrónico de barrido (MEB): En éste no es necesario que el
espécimen se encuentre en capas para observarlo. explora la superficie de la
imagen punto por punto, y recorre la muestra con un haz muy concentrado de
electrones. pueden llegar a ampliar una imagen unas 200.000 veces.
IX. BIBLIOGRAFÍA
BERNIS MATEU, F.J. 1997.- Atlas temático de Microscopía. Idea Books, S.A.,
Barcelona, España.
RAISMAN, J.S. Y A.M. GONZÁLEZ 2006.- Introducción: Principios de Microscopía en
http:// www.biología.edu.ar
HEALEY, P. 1971.-Microscopio y vida microscópica. Burguera.
Laboratorio n° 5: EL microscopio y las células - UPRM